Introduction. There is a high prevalence of mortality in the Pediatric Intensive Care Units (PICU) in developing countries. Association has been found between disglyce mia and mortality in the PICU; however, there is a lack of standardization of the utility of such ranges. Objectives. To analyze the association between glycemia levels in PICU admission and mortality in patients hospitalized at Instituto Nacional de Salud del Niño (INSN). Methods. Retrospective cohort in PICU patients admitted to INSN between 2012 and 2013. A Poisson regression model with robust variance was used to quantify the association. Diagnostic Test performance evaluation was used to describe sensitivit y, specificity, positive predictive value, negative predictive value and likelihood ratios for each range of glycemia. Results. 552 patients were included (Age range 5 to 79,8 months). The mean glycemia on admission was 121.3 mg/dL. Ninety two (16.6%) patients died during hospitalization. In multivariable analyses, significant associatio ns between glycemia <65 mg/dL (RR: 2.01, 95%CI 1.14-3.53), glycemia >200 mg/dL (RR: 2.91, 95%CI 1.71-4.55), malnutrition (RR: 1.53, 95%CI 1.04-2.25), mechanica l ventilation (RR: 3.71, 95%CI 1.17-11.76) and mortality at discharge were found. There was low sensitivity (between 17.39% and 39.13%) and high specificity (between 49.13% and 91.74%) for different glucose cut-off levels. Conclusions. There is an increased risk of death at discharge in patients who developed hypoglycemia and hyperglycemia on admission to the PICU. Certain glucose ranges (>200mg/dL and <65mg/dL) have a high specificity as predictors of death at discharge.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: Existe evidencia de una alta prevalencia, severidad y progresión de enfermedad periodontal en sujetos diabéticos, y recientemente en prediabéticos, lo que soporta a la Diabetes Mellitus (DM) como factor de riesgo de enfermedad periodontal (EF). También se sugiere una influencia bidireccional, ya que al mismo tiempo que la DM predispone a la EP, la presencia de periodontitis en pacientes diabéticos puede influir negativamente en su control metabólico. Por lo tanto es evidente que el tratamiento oportuno de la EP mejoraría la calidad de vida de estos pacientes; pudiendo contribuir a mejorar su control metabólico. En el presente estudio se realizó tratamiento periodontal a pacientes diabéticos descompensados y prediabéticos con periodontitis severa, con el objetivo de contribuir al conocimiento que permita la inclusión de estos pacientes en tratamientos periodontales exitosos sin aumentar su riesgo médico. Materiales y métodos: Como parte del proyecto Domeyko de obesidad y diabetes “Evaluación de marcadores bioquímicos y genéticos de daño endotelial y periodontal en individuos obesos normoglicémicos, intolerantes a la glucosa y diabéticos tipo 2”, se seleccionaron 12 pacientes diabéticos descompensados y 7 obesos intolerantes a la glucosa o prediabéticos con periodontitis crónica generalizada severa, los cuales fueron sometidos a un protocolo de tratamiento periodontal no quirúrgico, sin modificar las indicaciones médicas de cada individuo. Se analizaron parámetros clínicos (Profundidad al sondaje, nivel de inserción clínica, índice de sangramiento al sondaje y placa bacteriana) y metabólicos (hemoglobina glicosilada) registrados antes y seis meses después de realizado el tratamiento periodontal. Resultados: Se obtuvo una disminución significativa de los parámetros clínicos registrados en los pacientes diabéticos y obesos prediabéticos seis meses después del tratamiento periodontal. Conclusión: Es posible realizar tratamientos periodontales exitosos en pacientes diabéticos descompensados y obesos intolerantes a la glucosa o prediabéticos con periodontitis crónica generalizada severa, sin alterar negativamente su condición sistémica. No obstante, es necesario aumentar el número de pacientes tratados con el fin de presentar resultados más concluyentes.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario. / Se evaluaron las concentraciones sanguíneas de glucosa, cortisol y la relación neutrófilo:linfocito (N:L) en equinos Fina Sangre de Carrera (FSC) sometidos a dos tipos de ejercicio en el curso del entrenamiento. Un total de 15 ejemplares fueron distribuidos según el tipo de trabajo realizado en 3 grupos de 5 animales cada uno, Grupo (Gr.) I: control, sin ejercicio desde hace 60 días por no encontrarse aún incorporados al plan de trabajo del corral, el Gr. II: galope de 1000 metros y Gr. III: trabajo competitivo, galope de 600 metros seguido en forma inmediata de 400 metros a velocidad supramaximal. De cada animal se extrajeron 2 muestras de sangre por punción yugular, una antes del ejercicio (T0) y otra a las 2 horas (T1). Se determinaron las concentraciones plasmáticas de cortisol (RIA) y glucosa (espectrofotometría por técnica enzimática), y se realizó un recuento leucocitario (contador hematológico automático). Los valores se expresaron mediante media y D.E.. Las variaciones por efecto del tiempo, grupo e interacción grupo por tiempo, se determinaron con ANDEVA con un intervalo de confianza de 95% y nivel de significancia de p≤0,05. La intensidad del ejercicio fue la suficiente para generar un aumento significativo de la glicemia en los Gr. II y III al T1; sólo el grupo III fue significativamente mayor al Gr. I al T1 . La concentración plasmática de cortisol dentro de grupo, presentó una disminución significativa para el T1 del Gr. II, respecto de su T0. En cuanto a la relación N:L, los valores entre grupos al T0 presentaron que el Gr. II fue significativamente mayor que los otros grupos; al comparar los valores dentro de grupo, mostraron una disminución significativa en el Gr. II. El grupo que presenta la mayor concentración basal de cortisol y la mayor relación N:L es el grupo II, que precisamente se encuentra en un tipo de trabajo intermedio del entrenamiento. Además, al tener un mayor descenso del cortisol plasmático y de la relación N:L en T1 respecto de T0, refleja que la intensidad del ejercicio al que fue sometido es inferior al del grupo III. Los resultados descritos permitirían concluir que la respuesta del organismo al ejercicio físico tiene directa relación con el tipo de trabajo al cual es sometido el animal y la adaptación de éste al entrenamiento. / Fifteen thoroughbred racing horses were evaluated for plasma concentrations of glucose and cortisol, and blood neutrophil:lymphocyte (N:L) ratio. According to their training work, they were separated into three groups of five animals each: control group (GI), 1000m gallop training group (GII) and competitive work group (GIII). Blood samples were obtained from jugular vein at resting (T0) and 2 hours after wards (T1). Plasma glucose and cortisol, and total leukocyte counts were expressed as mean and SD. Group and time effect variations and group-time interactions were determined by ANOVA with 95% confidence interval and p≤ 0.05 significance level. The intensity of this excercise was enough for generate a notable glycemia increase on GII and GIII on T1; only GIII was significantly greater than GI on T1. The plasma cortisol concentration inside the group presents a significant decrease for T1 of GII, in relation to their T0. About the N:L ratio, values between groups on T0 demonstrate that GII was significantly greater than other groups; if comparing values inside the group the results shown a significant decrease on GII. The group that presents greater cortisol basal concentration and N:L ratio is GII, which precisely has done an intermediate work training when comparing with GIII. In addition, having a greater decrease of plasma cortisol and N:L ratio on T1 respect T0 shows that intensity of excercise which was subjected was inferior than GIII excercise. The results described allow conclude that the answer of organism to physic excercise have an direct relation with the kind of job which is subjected the animal and their training.

Se determinó la actividad antioxidante y citotóxica de los productos de reacción de Maillard (MRP’s) obtenidos por síntesis a partir de los sistemas modelo D-glucosa - Glicina y D-glucosa - L-lisina, y se les caracterizó por espectroscopia UV/VIS e IR. La actividad antioxidante fue determinada por autoxidación del pirogalol (inhibición del radical superóxido), resultando un mayor porcentaje de inhibición para el sistema D-glucosa - L-lisina (54.73%) con relación al sistema D-glucosa - Glicina (52.24%); y el método indirecto de Fenton modificado (inhibición del radical hidroxilo) obteniendo una menor formación de complejo Malondialdehido (MDA) para el sistema D-glucosa - Glicina (1.25 pico mol/mL) respecto al sistema D-glucosa - L-lisina (3.05 pico mol/mL). En cuanto al bioensayo de citotoxicidad se obtuvo un mayor porcentaje de embriones no viables en el sistema D-glucosa - L-lisina (100%) comparado con el sistema D-glucosa - Glicina (58 %) a las 24 horas de fecundación y a una concentración de 0.25 mL de MRP’s en 2.75 mL de agua de mar. / It was determined the antioxidant and cytotoxic activity of Maillard reaction products (MRP’s) obtained by synthesis from the D-glucose - Glycine and D-glucose - L-lysine model systems, as well as its characterization by UV/VIS and IR spectroscopy. The antioxidant activity was determined by autoxidation of pyrogallol (inhibition of superoxide radical), being a greater percentage of inhibition from D-glucose - L-lysine model system (54.73 %) respect to the D-glucose - Glycine model system (52.24 %); and Fenton’s indirect modified method (inhibition of the hidroxile radical) obtaining a smaller formation of Malondialdehide complex (MDA) for D-glucose - Glycine model system (1.25 pico mol/mL) respect to D-glucose - L-lysine model system (3.05 pico mol/mL). As to the citotoxicity activity, we obtained a greater percentage of nonviable embryos in the D-glucose - L-lysine model system (100%) respect to D-glucose - Glycine model system (58%) to the 24 hours of fertilization and a concentration of 0.25 mL of MRP’s in 2.75 mL of sea water.

Doctor en Bioquímica / Tanto los niveles intracelulares de Ca2+ ([Ca2+]i) como el transporte de la glucosa son fundamentales para la fisiología del cardiomiocito, sin embargo, aún no se ha investigado la interrelación entre ambos eventos. En esta tesis se investigó si insulina regula los niveles [Ca2+]i en el cardiomiocito, el mecanismo que participa y su papel en el transporte de glucosa vía GLUT4. Con este objetivo, cultivos primarios de cardiomiocitos de rata se preincubaron con la sonda fluorescente para Ca2+ FLUO3-AM y se visualizaron los cambios en los niveles de Ca2+ por microscopia confocal. Las vías transduccionales que regulan los movimientos intracelulares de Ca2+ se intervinieron selectivamente con inhibidores químicos y herramientas genéticas. La captación de glucosa se evaluó utilizando [3H]-2-desoxiglucosa y los niveles de GLUT4 en la superficie celular se cuantificaron en cardiomiocitos no-permeabilizados transfectados con el plasmidio GLUT4-myc-eGFP. Los resultados mostraron que insulina indujo un rápido y transitorio aumento del [Ca2+]i en dos componentes. Los bloqueadores del canal L de Ca2+ nifedipino y del canal/receptor intracelular ryanodina sólo previnieron el primer componente componente. el segundo componente se redujo con: a) inhibidores selectivos del receptor de inositol-1,4,5-trifosfato: xestospongina C y 2 amino-etoxidifenilborato (2APB), b) disminución de la masa del receptor de IP3 vía siRNA y c) por transducción de un péptido inhibidor de señalización de las subunidades β de la proteína G (βark). La captación de glucosa inducida por insulina fue prevenida por el quelante del Ca2+ intracelular BAPTA-AM, 2 APB y βark, pero no por nifedipino ni ryanodina. De manera similar, la exposición del GLUT4-myc-eGFP en la membrana celular inducida por insulina fue inhibida por BAPTA-AM y xestospongina C, pero no por nifedipino. Sin embargo, este proceso también requirió la activación de PI3K y Akt para la segunda fase de liberación del [Ca2+]i y para la translocación del GLUT4. La transfección de un dominante negativo de PI3K inhibió parcialmente la exposición de GLUT4-myc-eGFP. En conclusión, insulina aumentó los niveles de [Ca2+]i vía IP3R en cultivos primarios de cardiomiocitos, regulando la captación de glucosa vía GLUT4. Esta nueva vía de señalización de insulina podría influenciar al metabolismo cardiaco en el miocardio adulto y estar modificada en condiciones metabólicas como son la obesidad, resistencia a insulina y diabetes / Intracellular calcium levels ([Ca2+]i) and glucose uptake are central to cardiomyocyte physiology, yet connections between them have not been studied. We investigated here whether insulin regulates [Ca2+]i in cultured cardiomyocytes, the participating mechanisms, and their influence on glucose uptake via glucose transporter 4 (GLUT4). Cultured neonatal rat cardiomyocytes were preloaded with the Ca2+ fluorescent dye FLUO3-AM and visualized by confocal microscopy. Ca2+ transport pathways were selectively targeted by chemical and molecular inhibition. Glucose uptake was assessed using [3H]2-deoxyglucose and surface GLUT4 levels were quantified in non-permeabilized cardiomyocytes transfected with GLUT4-myc-eGFP. Insulin stimulated a fast, two-component, transient increase in [Ca2+]i. Nifedipine and ryanodine prevented only the first component. The second one was reduced by inositol-1,4,5-trisphosphate (IP3)-receptor selective inhibitors (xestospongin C, 2 amino-ethoxydiphenylborate), by type 2 IP3-receptor knockdown via siRNA, or by transfected G peptidic inhibitor ARKct. Insulin-stimulated glucose uptake was prevented by BAPTA-AM, 2-amino-ethoxydiphenylborate and ARK-ct, but not by nifedipine or ryanodine. Similarly, insulin-dependent exofacial exposure of GLUT4-myc-eGFP was inhibited by BAPTA-AM and xestospongin C but not by nifedipine. Phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) and Akt were also required for the second phase of Ca2+-release and GLUT4 translocation. Transfected dominant-negative PI3K inhibited the latter. In conclusion, in primary neonatal cardiomyocytes, insulin induces an important component of Ca2+ release via IP3-receptor. This component signals to glucose uptake via GLUT4, revealing a so far unrealized contribution of IP3-sensitive Ca2+ stores to insulin action. This pathway may influence cardiac metabolism in conditions yet to be explored in adult myocardium

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Lactato deshidrogenasa es una enzima que clásicamente se ha descrito como citoplasmática. Pese a ello, algunos autores han aportado evidencia que sugiere la presencia de esta enzima en mitocondrias, lo que ha generado controversia respecto a su localización subcelular. Con el ánimo de aportar información que permita comprender el funcionamiento de la vía indirecta de síntesis de glicógeno en oocitos de rana, se decidió estudiar la localización de la enzima así como algunas de sus características. Para determinar la localización subcelular se compararon los resultados obtenidos de actividad de LDH con los resultados de actividad de enzimas marcadoras de fracción citoplasmática y mitocondrial en fracciones subcelulares obtenidas por centrifugación diferencial de extractos de oocitos de rana. La caracterización parcial de la enzima se realizó determinando los valores de Km para los sustratos, el pH óptimo de actividad de la enzima y el peso molecular nativo mediante cromatografía de exclusión molecular y el peso molecular de la subunidad por electroforesis desnaturante en geles de poliacrilamida (PAGE). Además, se observó la existencia de isoformas mediante cromatografía de intercambio iónico y electroforesis nativa en geles de poliacrilamida. Se determinó que lactato deshidrogenasa está presente en la fracción citoplasmática de los oocitos de rana y que está ausente en la fracción mitocondrial. Se caracterizaron las dos fracciones obtenidas mediante cromatografía de intercambio iónico observando una gran similitud en las características cinéticas de la enzima presente en cada fracción. Se calculó el peso molecular nativo de 131 KDa mediante cromatografía de filtración en gel y el peso molecular de la subunidad de la enzima de 33 KDa mediante electroforesis desnaturante. Se determinó la presencia de dos isoformas de la enzima mediante cromatografía de intercambio iónico.

Generalitat Valenciana (GV-3117-95); Ministerio de Sanidad (FIS 94/0014-01, FIS 96/1994-01); Unión Europea (ERBSC1-CT920833)

En la actualidad es difícil encontrar que se monitoree la glucosa antes, durante y al finalizar un proceso quirúrgico para comprobar el estado de estrés del animal y el nivel de dolor que experimenta; ambos episodios conllevan a cuadros de hiperglucemia; esta se presenta como respuesta en el paciente tras haber sufrido un trauma o lesión, que en este caso lo causa la cirugía, generando complicaciones como: Deshidratación, lenta recuperación post-quirúrgica, daños neurológicos y en diversos tejidos del organismo. El objetivo de este estudio fue determinar el porcentaje de pacientes con hiperglucemia del curso de Cirugía de Animales Menores de la Universidad Ricardo palma y la clínica veterinaria Hernández en la ciudad de Lima. Se evaluaron 25 pacientes caninos de sexo macho sometidos a castración, entre Agosto del 2014 y Julio del 2015; a los cuales se les evaluó la glucosa en diferentes etapas de la cirugía con un glucómetro de acuerdo a un tipo de cirujano. Los resultados fueron analizados mediante los programas SPSS y Microsoft Excel. Los resultados promedio indicaron que de las 100 mediciones de glucosas obtenidas un 18% se encontraba en hiperglucemia, siendo el máximo valor registrado el de 212 mg/dl; de los cuales el grupo de Cirujano 1 (profesores) no mostro pacientes en estado hiperglucémico; sin embargo en el grupo de Cirujano 3 (alumnos) el 87.5 % de los pacientes se encontraban en hiperglucemia durante la etapa 3 de la cirugía. Los resultados por American Society of Anesthesiologists (ASA) mostraron un mayor porcentaje de hiperglucemia en los ASA 2. Se comprobó la existencia de hiperglucemia en los procedimientos quirúrgicos de la Sala de Cirugía de Animales Menores y Clínica veterinaria recomendándose realizar un monitoreo más exhaustivo de constantes vitales en los diferentes procedimientos quirúrgicos y clasificaciones ASA, empleando las diferentes fichas de monitoreo incluyendo la medición de dolor.At present it is difficult to find that glucose is monitored before, during and after a surgical procedure to check the status of animal stress and the level of pain experienced; both episodes lead to hyperglycemia boxes; This response occurs in the patient after a trauma or injury, which in this case is caused by surgery, causing complications such as dehydration, slow post-surgical recovery, neurological damage and various body tissues. The aim of this study was to determine the percentage of patients with hyperglycemia course of Small Animal Surgery University of Ricardo Palma and Hernandez veterinary clinic in the city of Lima. 25 canine patients undergoing castration of male sex were evaluated between August 2014 and July 2015; to which glucose were evaluated at different stages of surgery with a meter according to a type of surgery. The results were analyzed using SPSS and Microsoft Excel programs. The average results showed that of the 100 glucose measurements obtained 18% was in hyperglycemia, the maximum recorded the 212 mg / dl value; of which one surgeon group (teachers) showed patients in hyperglycemic state; however in the group of Surgeon 3 (students) 87.5% of patients were in stage 3 hyperglycemia during surgery. The results for American Society of Anesthesiologists (ASA) showed a higher percentage of hyperglycemia in ASA 2. the existence of hyperglycemia was found in surgical procedures for the Board of Surgery and Small Animal Veterinary Clinic recommending a more comprehensive monitoring of constant vital in different surgical procedures and ASA classifications using different tabs monitoring including measurement of pain.

Se determinó la actividad antioxidante y citotóxica de los productos de reacción de Maillard (MRP’s) obtenidos por síntesis a partir de los sistemas modelo D-glucosa - Glicina y D-glucosa - L-lisina, y se les caracterizó por espectroscopia UV/VIS e IR. La actividad antioxidante fue determinada por autoxidación del pirogalol (inhibición del radical superóxido), resultando un mayor porcentaje de inhibición para el sistema D-glucosa - L-lisina (54.73%) con relación al sistema D-glucosa - Glicina (52.24%); y el método indirecto de Fenton modificado (inhibición del radical hidroxilo) obteniendo una menor formación de complejo Malondialdehido (MDA) para el sistema D-glucosa - Glicina (1.25 pico mol/mL) respecto al sistema D-glucosa - L-lisina (3.05 pico mol/mL). En cuanto al bioensayo de citotoxicidad se obtuvo un mayor porcentaje de embriones no viables en el sistema D-glucosa - L-lisina (100%) comparado con el sistema D-glucosa - Glicina (58 %) a las 24 horas de fecundación y a una concentración de 0.25 mL de MRP’s en 2.75 mL de agua de mar. / It was determined the antioxidant and cytotoxic activity of Maillard reaction products (MRP’s) obtained by synthesis from the D-glucose - Glycine and D-glucose - L-lysine model systems, as well as its characterization by UV/VIS and IR spectroscopy. The antioxidant activity was determined by autoxidation of pyrogallol (inhibition of superoxide radical), being a greater percentage of inhibition from D-glucose - L-lysine model system (54.73 %) respect to the D-glucose - Glycine model system (52.24 %); and Fenton’s indirect modified method (inhibition of the hidroxile radical) obtaining a smaller formation of Malondialdehide complex (MDA) for D-glucose - Glycine model system (1.25 pico mol/mL) respect to D-glucose - L-lysine model system (3.05 pico mol/mL). As to the citotoxicity activity, we obtained a greater percentage of nonviable embryos in the D-glucose - L-lysine model system (100%) respect to D-glucose - Glycine model system (58%) to the 24 hours of fertilization and a concentration of 0.25 mL of MRP’s in 2.75 mL of sea water.

Objetivo: Determinar el índice glicémico de Pouteria lúcuma (lúcuma), Annona cherimola (chirimoya) y Mauritia flexuosa (aguaje). Materiales y métodos: el estudio fue de tipo experimental. Se reunió a 9 sujetos que fueron seleccionados tras una serie de pruebas, se les extrajo muestras de sangre venosa mediante la colocación de un catéter venoso, ello para determinar la glucosa en los tiempos 0, 15, 30, 60, 90 y 120 minutos. Dichas muestras se tomaron tras la ingesta de los alimentos en estudio, lúcuma, chirimoya y aguaje, empleando como patrón referencial a la glucosa anhidra. Una vez obtenidos los resultados de la glucosa por cada tiempo, se determinó el índice glicémico mediante la sumatoria del área bajo la curva de cada alimento. Resultados: Se obtuvo un índice glicémico de 68 para la lúcuma, 58 para la chirimoya y 35 para el aguaje. Considerándose para la dos primeras un índice glicémico medio y para el último, un índice glicémico bajo. Conclusión: En el estudio presentado se determinó el índice glicémico de tres frutas nativas peruanas: la lúcuma, chirimoya y aguaje, que fueron 68%, 58% y 35%; respectivamente, empleando como alimento referencial la glucosa anhidra. / Objective: To determine the glycemic index of Pouteria lucuma (lúcuma), Annona cherimola (cherimoya) y Mauritia flexuosa (aguaje). Materials and methods: The study was experimental. It met 9 subjects that were selected after a serie of tests. They were extracted venous blood samples by placing a venous catheter, thereby to determine glucose at times 0, 15, 30, 60, 90 and 120 minutes. These samples were taken after food intake (lucuma, cherimoya and aguaje), using anhydrous glucose as reference. After obtaining the results of glucose per time, the glycemic index was determined by the sum of the area under the curve of each food. Results: The glycemic index obtained was 68 for lucuma, 58 for cherimoya and 35 for aguaje. Considered for the first two medium glycemic index and for the latter, a low glycemic index. Conclusion: In the presented study, the glycemic index of three peruvian native fruits was determined: lucuma, cherimoya and aguaje, which were 68%, 58% and 35%; respectively, using as a reference food anhydrous glucose. / Tesis