Previamente foi relatado a associação do oleato de etoposídeo à uma microemulsão rica em colesterol (LDE) que é captada por células malignas que superexpressam receptores da Lipoproteína de Baixa Densidade (LDL). A associação do fármaco é estável, sua atividade antiproliferativa é preservada e há uma redução da toxicidade em animais. Dando continuidade, esse trabalho tem como objetivo investigar a cinética plasmática da associação LDE: oleato de etoposídeo e ainda verificar se a associação do fármaco à LDE modifica a propriedade da microemulsão de se concentrar nas células neoplásicas com aumento dos receptores, determinando a captação de ambos os componentes nos tecidos acometidos pelo tumor comparado com o tecido equivalente normal. O [3H]oleato de etoposídeo associado à LDE marcada radioativamente com [14C] oleato de colesterol, foi injetado intravenosamente em 14 pacientes com câncer de ovário (50,6 ± 7,5 anos), 24 horas antes da cirurgia. Amostras de sangue foram coletadas no período de 24 horas para determinar a curva de decaimento plasmático da associação. A radioatividade presente nas alíquotas do plasma foi determinada usando solução cintiladora e a Taxa Fracional de Remoção (TFR) foi calculada através de uma análise compartimental. Amostras de tecido ovariano com tumor e sem tumor foram coletadas durante a cirurgia, onde foi dado início ao procedimento de extração lipídica para determinação da radioatividade. A TFR da LDE e do oleato de etoposídeo foram similares (0,0881 e 0,1722 respectivamente, P= 0,2422). A média da captação tecidual de ambos[14C]-LDE e [3H]-oleato de etoposídeo por tecido maligno de ovário foi quatro vezes maior quando comparado com o tecido contralateral sem a doença (captação da LDE= 448 ± 184 e 143 ± 51 e a captação do oleato de etoposídeo foi de 346 ± 75 e 103 ± 56, respectivamente). O resultado indica que maior quantidade do fármaco fica retido na partícula da microemulsão, sendo removida da circulação e internalizada pelas células. Em adição foi mostrado que a associação LDE: oleato de etoposídeo teve habilidade de se concentrar nos tecidos malignos de ovário. Contudo, a associação pode ser usada para direcionar e concentrar o oleato de etoposídeo nas células malignas de ovário. / Background: Previously we reported the association of etoposídeo oleate to a cholesterol-rich microemultion (LDE) that is taken up by malignant cells that overexpress low-density lipoprotein (LDL) receptors. The association of the drug is stable, preserves the anti-proliferative activity of the drug and reduces the toxicity to animals. In order to investigate the plasma kinetics of the association LDE:etoposídeo oleate and to verify whether the complex has the ability to concentrate in malignant ovarian cancer we performed the following analysis. Methods: [3H]etoposídeo oleate associated to LOE labeled with [14C]-Cholesteryl Oleate (CO) was intravenously injected into 10 patients with cancer of ovary (50,6 ± 7,5 yr.) 24 h before the surgery. Blood samples were collected over the 24 h period to determine the plasma decay curves of the complex labels. Radioactivity present in plasma aliquots was determined in a scintillation solution and the plasma fractional c1earance rate (FCR) was calculated by compartmental analysis. Specimens of tumors and normal ovaries excised during the surgery were collected for lipid extraction, separation by thin layer chromatography and radioactive counting. Results: Fractional clearance rate (FCR) of LDE and of the drug were similar (0,0881 e 0,1722, respectively, P =0.2422). The mean of the uptake of both [14C]-LDE and [3H]-etoposídeo oleate by malignat tissue of ovary was three fold greater when compared with that of the contralateral normal ovaries (LDE uptake = 448 ± 184 and 143 ± 51 and etoposídeo oleate uptake = 346 ± 75 and 103 ± 56, respectively). Conclusions: Our results indicate that most of the drug is retained in the microemulsion particles until its removal from the circulation and internalization by the cells. In addition, we showed that the association LDE:etoposídeo oleate has the hability to concentrate in malignant ovarian tissues. Therefore, the complex can be used to direct and concentrate etoposídeo against malignant ovarian cells.

Introdução: Os efeitos do treinamento físico sobre o metabolismo de lípides têm sido bastante estudados, mas a situação diametralmente oposta, qual seja, a de pacientes acamados sob cuidados prolongados, tem sido pouco investigada. A avaliação de possíveis impactos derivados da imobilização é importante, pois o período de restrição ao leito pode gerar fatores de risco aterogênicos. Outro ponto relevante é a concentração e o aspecto funcional da HDL, que é fator de proteção anti-aterogênico e estudos têm mostrado a concentração diminuída em indivíduos sedentários. Objetivo: Investigar os efeitos da imobilização prolongada sobre o perfil de lípides, apolipoproteínas e a transferência de lípides para a HDL em pacientes acamados. Métodos: Foram estudados 23 pacientes acamados por um período maior que 90 dias de internação no Hospital Auxiliar de Suzano do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP. Foram avaliados o perfil lipídico, a concentração das apolipoproteínas, CETP, LCAT e LDL oxidada. No ensaio de transferência de lípides, as amostras de plasma foram incubadas com a nanopartícula artificial marcada com 3H-éster de colesterol, 14C-fosfolípides, 3H-triglicérides e 14C-colesterol livre. A quantificação da transferência de lípides da nanopartícula foi feita após a precipitação da fração não HDL. Os dados dos pacientes acamados foram comparados com os obtidos de 26 voluntários sedentários saudáveis, pareados por idade e sexo. Resultados: A média de internação dos acamados foi de 817 dias. As concentrações de colesterol não-HDL (148 ± 36 vs 125±40 mg/dL, p<0,05), LDL-C (124±31 vs 96±36 mg/dL, p<0,01), HDL-C (45±10 vs 36±13 mg/dL, p<0,01) foram menores no grupo acamado, enquanto que os triglicérides foram iguais entre os grupos. A apo A-I (134±20 vs 111±24 mg/dL) foi menor nos acamados (p<0,01), e a apo B não apresentou diferença entre os grupos. A LDL oxidada (53±13 vs 43±12 mg/dL) foi menor no grupo acamado (p<0,05), enquanto que a CETP e LCAT não diferiu entre os grupos. As transferências para HDL de éster de colesterol (6,24±1,1% vs 4,80±1,2%), colesterol livre (4,04±1,1% vs 3,05±1,1%), fosfolípides (19,06±1,3% vs 17,32±2,0%) e triglicérides (3,65±0,7% vs 3,06±0,6%) estavam diminuídas nos acamados comparado ao grupo sedentário (p<0,01). Conclusões: O sedentarismo extremo dos pacientes acamados afetou a concentração do HDL-C, apo A-I e as transferências lipídicas da nanopartícula para HDL. Mesmo a menor atividade física exercida no dia-a-dia dos sedentários pode ser determinante na concentração e no metabolismo da HDL. Apesar da menor concentração do LDL-C e os triglicérides não serem diferentes dos sedentários, o status de HDL mostrou-se alterado nos acamados. Devido à importante função anti-aterogênica da HDL, essas alterações metabólicas devem ser um motivo de atenção adicional na assistência a esses pacientes para a prevenção de eventos cardiovasculares. / Introduction: The effects of physical training on lipid metabolism have been deeply studied, but the diametrically opposite situation such as the long-term care bedridden patients, has been little investigated. The evaluation of immobilization impacts is important, because the bedridden period may take to atherogenic risk factors. Another relevant point is the concentration and functional aspects of HDL, that is an anti-atherogenic protection factor and studies have shown lower concentration in sedentary subjects. Objective: To investigate the effects of long-term immobilization on lipid profile, apolipoproteins and lipid transfer to HDL in bedridden patients. Methods: Twenty-tree bedridden patients under a period over than 90 days from the Auxiliary Hospital of the University of São Paulo Medical School in the city of Suzano, state of São Paulo were selected for the study. The lipid profile, apolipoproteins, CETP, LCAT and oxidized LDL concentration were evaluated. In the lipid transfer assay, the plasma samples were incubated with an artificial nanoparticle labeled with 3H-cholesteryl-esters, 14C-phospholipids, 3H-triglycerides and 14C-unesterified cholesterol. The lipids transferred from nanoparticle to HDL were quantified in the supernatant after chemical precipitation of non-HDL fractions. Data from bedridden patients were compared with those obtained from 26 healthy sedentary volunteers, paired for age and sex. Results: The average of hospitalization period of the bedridden was 817 days. The concentration of non-HDL cholesterol (148±36 vs 125±40 mg/dL, p<0.05), LDL-C (124±31 vs 96±36 mg/dL, p<0.01), HDL-C (45±10 vs 36±13 mg/dL, p<0.01), were lower in bedridden group, whereas the triglycerides were equal between the groups. The apo A-I (134±20 vs 111±24 mg/dL) was lower in bedridden (p<0.01), and the apo B was not different between the groups. The oxidized LDL (53±13 vs 43±12 mg/dL) was lower in bedridden group (p<0.05), whereas the CETP and LCAT was not different between the groups. The lipid transfer to HDL of cholesteryl-esters (6.24±1.1% vs 4.80±1.2%), unesterified cholesterol (4.04±1.1% vs 3.05±1.1%), phospholipids (19.06±1.3% vs 17.32±2.0%) and triglycerides (3.65±0.7% vs 3.06±0.6%) were decreased in bedridden patients compared to sedentary group (p<0.01). Conclusions: The extreme sedentary of bedridden patients affected the HDL-C and apo A-I concentration and the lipid transfer from nanoparticle to HDL. Even the low levels of physical activity exerted in the day-to-day life of sedentary subjects can be determinants of HDL concentration and metabolism. Despite their lower LDL-C and the triglycerides not different from sedentary subjects, the HDL status was clearly further altered in the bedridden. Due to the important anti-atherogenic functions of HDL, those metabolic alterations should be an additional matter of concern in the management of those patients to prevent cardiovascular events.

Orientador: Carlos Raimundo Ferreira Grosso / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:12:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Palmu_PatriciaSayuriTanada_D.pdf: 1612085 bytes, checksum: 538e68bde3ca35cc56464ce19f8fb800 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Recentemente surgiu um grande interesse no desenvolvimento de biofilmes comestíveis ou degradáveis biologicamente, principalmente devido à demanda por alimentos de alta qualidade e preocupações ambientais sobre o descarte de materiais não renováveis de embalagem para alimentos. Os biofilmes são geralmente produzidos com macromoléculas, como polissacarídeos, proteínas, lipídios e derivados. O objetivo desse trabalho foi o desenvolvimento e caracterização de biofilmes simples de glúten de trigo, composto e de duas camadas contendo cera de abelha e ácidos palmítico e esteárico, bem como testar a aplicação dos filmes e das coberturas em frutas frescas. A solução formadora de filme foi preparada usando glúten de trigo, etanol, glicerol e hidróxido de amônio (6N) para ajustar o pH da solução. As composições das formulações dos filmes foram calculadas segundo um planejamento fatorial 24. As propriedades funcionais utilizadas para verificar os efeitos dos fatores foram as propriedades mecânicas (resistência à tensão e elongação na ruptura), permeabilidades ao vapor d¿água e ao oxigênio e solubilidade em água. A partir da formulação que apresentou as melhores propriedades funcionais, foram desenvolvidos e caracterizados os filmes compostos e de duas camadas contendo glúten de trigo, cera de abelha e mistura 1:1 de ácidos palmítico e esteárico em várias concentrações. Outras análises como efeito da umidade relativa sobre as propriedades mecânicas dos filmes e análises microestruturais através da microscopia eletrônica de varredura foram realizadas. A seguir, realizou-se o estudo da aplicação das coberturas e filmes comestíveis à base de glúten em morangos frescos mantidos sob refrigeração, através das análises de: perda de peso, retenção da firmeza, cor, acidez titulável, sólidos solúveis e totais, açúcares redutores e totais e análise sensorial de aparência para determinar a vida de prateleira dos morangos e de degustação para verificar a aceitação das coberturas à base de glúten. Para complementar o estudo, foi realizada uma reação de lipofilização do glúten de trigo, verificada através da porcentagem de grupos amino livres pelo método de TNBS. A partir do glúten modificado, o biofilme foi preparado e caracterizado, comparando-se com o filme de glúten não modificado. Outro trabalho complementar foi a preparação e caracterização de biofilmes preparados a partir de farinhas de trigo brasileiras e também a comparação das propriedades com os filmes de glúten vital (comercial). Os resultados obtidos indicaram que as propriedades mecânicas dos filmes simples foram influenciadas pelas concentrações de glúten e glicerol, sendo o filme mais resistente o de maior concentração de glúten e menor de glicerol. A menor permeabilidade ao oxigênio foi obtida no filme com menor concentração de glúten, glicerol e etanol e a permeabilidade ao vapor d¿água mais baixa foi no filme com menor concentração de glicerol. Os filmes compostos e de duas camadas ficaram opacos e o filme de duas camadas com 10% de ácidos esteárico e palmítico e cera de abelha apresentou a menor permeabilidade ao vapor d¿água, porém a resistência à tensão e a elongação foram baixas. A morfologia observada através do microscópio eletrônico de varredura para o filme simples de glúten foi completamente modificada quando se adicionou a mistura de ácidos palmítico e esteárico e cera de abelha. O estudo da aplicação dos biofilmes e coberturas em morangos mostrou que a cobertura de duas camadas com glúten e lipídios teve efeito na retenção da firmeza e na diminuição da taxa de perda de peso nas frutas cobertas. As frutas embaladas com o filme de glúten retardaram a senescência por apresentarem os menores parâmetros (a/b) em relação à cor da fruta. A análise sensorial dos morangos indicou que as coberturas simples de glúten e composta com lipídios mantiveram a qualidade dos morangos durante o tempo de armazenamento em termos de aparência e que o sabor dos morangos com a cobertura simples de glúten foi aceito pelos consumidores. A reação de lipofilização modificou o glúten através da diminuição da porcentagem de grupos amino livres, porém o filme preparado com o glúten lipofilizado apresentou propriedades mecânicas e de barreira inferiores ao filme com glúten sem modificação. Os filmes preparados a partir das farinhas de trigo ¿semi-duras¿ brasileiras apresentaram propriedades mecânicas e de barreira semelhantes ao filme com glúten vital (comercial), podendo até serem usadas em substituição ao glúten comercial / Abstract: Recently interest in the development of edible films and coatings for foods has grown considerably due to consumer demand for high quality foods and environmental concerns over the disposal of non-renewable food packaging materials. Polysaccharides, proteins and lipids can be used as edible film-forming agents. The objective of this work was the development and characterization of simple, composite and bilayer wheat gluten films with lipids (beeswax and stearic and palmitic acids) and the application of the films and coatings on fresh fruits. The base film was prepared from a solution of gluten, absolute ethanol, glycerol and 6 N ammonium hydroxide to adjust the pH. The composition of the film formulations was calculated according to a 24 factorial planning. The functional properties used to verify the factor effects were mechanical properties (tensile strength and percent elongation at break), oxygen and water vapor permeabilities and solubility in water. The simple film with the best functional properties was used to prepare the composite and bilayer films of wheat gluten, beeswax and a 1:1 blend of stearic and palmitic acid. Other analysis as effect of the relative humidity on the mechanical properties and morphology of the surface by scanning electron microscopy were effected. After this, the application of the gluten-based coatings and films was effected on fresh strawberries maintained upon refrigeration, and the analysis of weight loss, retention of the texture, color, titratable acidity, soluble and total solids, reducing and total sugars and sensory evaluation of appearance to determine the shelf life of the strawberries and of taste to verify the acceptance of the gluten-based coatings, were effected. To complement the study, a reaction of lipofilization of wheat gluten was effected, and it was verified through the percentage of free amino groups by the TNBS method. Biofilms were prepared from the modified gluten and were characterized and compared with the film from unmodified gluten. Another complementary work was the preparation and characterization of biofilms prepared from Brazilian wheat flours and also comparison of the properties with the films from vital gluten (commercial). The results showed that the mechanical properties of the simple films had been influenced by the concentrations of gluten and glycerol, being the most resistant film with higher concentration of gluten and less glycerol. The lowest oxygen permeability was obtained in the film with lower concentration of gluten, glycerol and ethanol and the lowest water vapor permeability was in the film with lower concentration of glycerol. The composite and bilayer films were opaque and the bilayer film with 10% blend of stearic and palmitic acids and beeswax showed the lowest water vapor permeability, however the mechanical resistance and the elongation were low. The morphology observed through the scanning electron microscopy for the simple film of gluten was completely modified when the mixture of palmitic and stearic and beeswax was added. The application of biofilms and coatings in strawberries showed that the bilayer coating of gluten and lipids had a significant effect in the retention of the texture and the reduction of weight loss in the coated fruits. The senescence was decreased in fruits packed with the gluten film verified by the lower parameters in relation to the color of the fruit. The sensory evaluation of the strawberries indicated that the simple coating of gluten and the composite with lipids had kept the quality of the strawberries during the time of storage in terms of appearance and the consumers accepted the flavor of the strawberries with the simple coating. The lipofilization reaction really modified the gluten through the reduction of the percentage of free amino groups, however the film prepared with the lipophilized gluten presented lower mechanical and barrier properties comparing to the film with unmodified gluten. The films prepared from Brazilians ¿semi-hard¿ wheat flours had presented similar mechanical and barrier properties than the film from vital gluten (commercial), being able to be used in substitution / Doutorado / Doutor em Alimentos e Nutrição

Orientador: Helena Teixeira Godoy / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:59:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lage_MoacirEvandro_D.pdf: 7285871 bytes, checksum: a1e480213acdfeb0e7b31420c8906a65 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O presente estudo teve como objetivos comparar a oxidação da mioglobina, dos lipídeos e do colesterol e a perda de suco na carne maturada e processada de bovinos suplementados ou não com vitamina E, durante a exposição em balcão remgerado, além de avaliar as alterações de sabor decorrentes da oxidação após o cozimento e posterior aquecimento. Também, determinar os níveis de vitamina E, ácidos graxos, colesterol, lipídeos totais e pH das mesmas amostras. Foram confinados 24 bovinos machos castrados, da raça Nelore (Bos indicus), submetidos a um período de confinamento de 98 dias, com ração de concentrado de milho, farelo de soja, polpa cítrica, e mistura mineral, e bagaço de cana-de-açúcar in natura como fonte de volumoso. Um lote de 12 novilhos foi suplementado com 1.000 mg de acetato de alfa-tocoferoVcabeça/diae o outro foi mantido como controle. Após o abate as carcaças foram resmadas por 24 horas e desossadas. A carne correspondente aos músculos Supraspinatus (SS), Semitendinosus (ST) e Longissimus lumborum (LL) foi embalada a vácuo e maturada em câmara ma (2°C por 14 dias), congelada e mantida em câmara de estocagem (-20°C) até o momento das análises.Com a parte da ponta-de-agulha desossada (referente a 68, 78, 88 e 98costelas) produziu-se o charque. O efeito da suplementação conn ¿tocoferol sobre a oxidação da mioglobina se manifestou após o primeiro dia de exposição em "display". O valor L* teve relação com a oxidação, apresentando-se mais elevado, principalmente nos músculos LL e SS. Houve grande diferença entre os músculos SS, ST e LL quanto à estabilidade da cor, sendo que o músculo LL apresentou maior estabilidade. A suplementação foi eficiente para aumentar a concentração intramuscular do a-tocoferol, mesmo em animais com história prévia de alimentação em pastagens. A estabilidade lipídica foi melhorada significativamente na carne. O músculo SS apesar da maior concentração de a-tocoferol demonstrou menor estabilidade lipídica em relação aos músculos LL e ST. Não houve nenhuma influência da suplementação de a-tocoferol sobre o nível de 7-cetocolesterol, único óxido de colesterol detectado no charque, e sobre a composição de ácidos graxos dos músculos analisados. O conteúdo de colesterol foi menor nos músculos do lote suplementado, sendo a diferença maior nos músculos com maior nível de a-tocoferol, com diferença significativa (P<0,05) para o músculo SS. A suplementação com a.-tocoferol reduziu a perda de suco dos músculos ST e SS, com menor perda de suco nos músculos dos animais suplementados (PO,O5),perceptível pelo grupo de provadores deste estudo, ao nível de suplementação dea -tocoferol utilizado, quanto ao sabor de requentado (WOF- Warmedover flavor)da carne assada. Do 10 para o 30 dia de estocagem refrigerada (+ ou - 5°C),houve um aumento (P <0,05) de intensidade de WOF. Os atributos sensoriais tipicos desejaveis da carne assada decresceram de intensidade no decorrer de 3 dias de conservação após o cozimento, enquanto os atributos oxidativos, desagradáveis, tiveram sua intensidade aumentada / Abstract: The objective of the present study was to compare the myoglobin, lipid and cholesterol oxidation, and drip loss in the matured and processed meat from cattle supplemented or not with vitamin E, during the "display" in rerngerated counter, besides evaluating the flavor alterations due oxidation after the cooking and posterior reheating. As well, to determine the vitamin E levels, fatty acids, cholesterol, total lipids and pH of the same samples. Twenty four Nelore steers (Bos indicus), males, castrated, were feeding for 98 days, with ration composed of concentrate contained com, soybean meal, citric pulp, and mineral premix, and sugar cane trash in natum. A group of 12 steers was supplemented with 1.000 mg of alpha-tocoferol acetate/head/day and the group remainder was kept as controI. After slaughter, the carcasses were cooled by 24 hours and boned. The meat corresponding to the muscles Supraspinatus (SS), Semitendinosus (ST) e Longissimus /umborum (LL) was vacuum packed and matured in cold chamber (2°C for 14 days), fTozenand kept in stock chamber (-20°C) until the moment of analyses. The part ofthe boned flank (regarding 6th, 7th, 8th and 9th ribs) was used to produce charqui. The effect of alpha-tocoferol supplementation on myoglobin oxidation appeared after the first exhibition day in "display". The value L* had relation with the oxidation, being more elevated, mostly in the muscles LL and SS. There was great difference among muscles SS, ST and LL regarding the color stability and the muscle LL was more stable. The alpha-tocoferol supplementation was efficient to increase the intermuscular alpha-tocoferol concentration, despite animals with previous history of pasture feeding. The lipid stability was improved (P<0,05) in the meat ITom supplemented steers. The muscle SS in spite of the highest alpha-tocoferol concentration demonstrated lower lipid stability regarding the muscles LL and ST. There was not influence of alpha-tocoferol supplementation on the 7-cetocolesterol levei, single cholesterol oxide detected in the charqui, and neither on the fatty acids composition of the analyzed muscles. The cholesterol content was lower in the muscles of the supplemented group, being the higher difference in the muscles with higher tocoferol levei, with significant difference (P<0,05) for the muscle SS. The alpha-tocoferol supplementation reduced drip loss of ST and SS muscles, with lower drip loss (P<0,05) in muscles of supplemented animais. The muscle LL did not suffer this influence. In the sensory aspect, there was no perceptible benefit (P>O,O5) by the fitting rooms group of this study, for alpha-tocoferol level used, regardingthe flavor of reheated roast-beef (WOF-Warmed over flavor). From 1st to 3rd day of rerngerated stock (+ ou - 5°C), there was an increase (P<0,05) of WOF's intensity. The typical desirable sensory attributes of the roastbeef decreased of intensity during the 3 days of preservation after the cooking, while the unpleasant oxidatives attributes had your intensity increased. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:38:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_Marcele_Sousa_Vilanova.pdf: 948050 bytes, checksum: 7a7d6aa129c7207e116bace94c372823 (MD5) Previous issue date: 2011-02-21 / We tested the effect of two levels of ether extract based on rice oil concentrate, 30 Saanen goats during early lactation. The feeding was based on the ratio of 60% forage (alfalfa hay), and 40% commercial concentrate with two levels of lipids (3% and 5%). The variables were: average milk production, behavior of the lactation curve, milk chemical composition and total time of lactation against the profile of saturated, monounsaturated and polyunsaturated. The increase in the percentage of ether extract oil-based rice did not affect milk production, which presented as mean ± 2658 379 mL milk / goat / day, between 11 weeks and the chemical composition of milk, which characterized by having 3.78 ± 0.59% fat, 3.10 ± 0.18% crude protein, 4.46 ± 0.20% lactose and 12.19 ± 0.72% of total solids. However significant (P <0.05) fatty acid profile of milk, reducing the concentrations of saturated fatty acids, palmitic acid C16: 0, myristic C14: 0, capric C10: 0 and lauric C12: 0, which were higher in 3% treatment (26.87, 8.60, 5.90 and 3.06% respectively) and increasing concentrations of unsaturated C16: 1, C17: 1 and C20: 1 (0.43, 0.12 and 0.10%, respectively). The inclusion of rice bran oil at levels of 3% and 5% of dry matter in the diet of goats does not affect milk production and the chemical composition until the 11th week of lactation, however, is able to alter the fatty acid profile of significantly. / Testou-se o efeito de dois níveis de extrato etéreo a base de óleo de arroz no concentrado de 30 cabras Saanen durante a fase inicial de lactação. A alimentação baseou-se na relação 60% de volumoso (feno de alfafa), e 40% de concentrado comercial com dois níveis de extrato etéreo (3% e 5%). As variáveis estudadas foram: Produção, composição química, perfil de ácidos graxos saturados, mono e polinsaturados no leite. O aumento no percentual de extrato etéreo na ração não influenciou a produção de leite, que apresentou como média 2658±379 mL de leite/cabra/dia, no período de 11 semanas e nem a composição química do leite, que se caracterizou por ter 3,78 de gordura; 3,10 de proteína bruta; 4,46 de lactose e 12,19 de sólidos totais. O perfil de ácidos graxos do leite foi influenciado pelo acréscimo de extrato etéreo na ração. No tratamento de maior proporção houve um aumento das concentrações de ácidos graxos insaturados C18:1n 9c (Oléico) e C18:3n3, (25,79 e 0,80%, respectivamente) e no Ácido Linoléico Conjugada (CLA) que aumentou de 0,37 para 0,72% com o acréscimo de óleo; e uma redução dos ácidos graxos saturados: palmítico C16:0, mirístico C14:0, cáprico C10:0 e láurico C12:0, que foram maiores no tratamento 3% (26,87; 8,60; 5,90 e 3,06%, respectivamente).

Orientador: Admar Costa de Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-04T15:40:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Botelho_AdrianaPrais_M.pdf: 512202 bytes, checksum: bcf5ef975b16eb94dafdbac80cdd5ce6 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: O ácido linoléico conjugado (CLA), um conjunto de isômeros de posição e geométricos do ácido linoléico com duplas ligações conjugadas, ocorre em pequenas quantidades em uma grande variedade de alimentos. O CLA pode ser originado no rúmen por meio da biohidrogenação incompleta de ácidos graxos poliinsaturados provenientes da dieta e também, pela dessaturação do ácido graxo C18:1 trans-11. Dessa maneira, concentrações significativas de CLA podem ser encontradas nas carnes, no leite e seus produtos derivados. O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito da suplementação com ácido linoléico conjugadosobre o perfil lipídico e a composição corporal de ratos Wistar saudáveis em crescimento. Foram realizados dois ensaios biológicos: um em que variou a quantidade de CLA suplementada, e outro em que variaram as misturas comerciais de CLA utilizadas. Para o primeiro ensaio biológico, foram utilizados 40 ratos albinos, machos, recém-desmamados, distribuídos aleatoriamente em 4 grupos com 10 animais cada, de acordo com a quantidade de suplemento administrada. Os animais foram suplementados diariamente durante 21 dias com AdvantEdge® CLA (EASTM) nas concentrações 1, 2 e 4 % sobre o consumo diário de dieta, constituindo respectivamente os grupos AE1, AE2 e AE4, e com ácido linoléico na concentração de 2 % sobre o consumo diário de dieta, constituindo o grupo controle ©. Com este ensaio procurava-se identificar qual a quantidade de suplemento mais adequada para reduzir a gordura corporal dos ratos. Para o segundo ensaio biológico, foram utilizados 30 ratos albinos, machos, recém-desmamados, da linhagem Wistar, divididos aleatoriamente em 3 grupos com 10 animais cada, de acordo com a marca de suplemento administrada. Utilizando-se a quantidade de suplemento identificada no primeiro ensaio, os animais receberam diariamente, durante 42 dias, as misturas comerciais AdvantEdge® CLA (EASTM) e CLA One® (Pharmanutrients), constituindo os grupos AE e CO, respectivamente, e ácido linoléico, constituindo o grupo controle ©, na concentração de 2 % sobre o consumo diário de dieta. Durante os dois períodos experimentais os animais tiveram o peso e consumo de dieta monitorados a cada dois dias. Ao final de cada experimento, os animais foram mortos por deslocamento cervical sob anestesia (pentobarbital sódico . 46 mg/kg), sendo o sangue utilizado para as determinações séricas de triacilgliceróis, colesterol total e leptina e a carcaça empregada para a determinação da composição corporal centesimal. Para esta avaliação, foi removido todo o conteúdo intestinal para obtenção da carcaça vazia. Em seguida a carcaça foi congelada em nitrogênio líquido, fatiada, liofilizada, moída e armazenada a - 80 °C até o momento das determinações de umidade, cinzas, proteína bruta e gordura. A eficiência alimentar dos ratos não foi alterada com a suplementação de CLA em ambos os ensaios biológicos. Com relação aos valores séricos de triacilgliceróis, estes não apresentaram diferença significativa (p > 0,05) após a suplementação com CLA. Quanto aos teores de colesterol total no primeiro ensaio, estes demonstraram uma redução dose dependente após 21 dias de tratamento, tomando-se em conta as suplementações. No entanto, no segundo ensaio biológico, aos 42 dias de tratamento, a administração de CLA aumentou os teores de colesterol total dos animais. No tocante à composição corporal, constatou-se uma redução média de 18,0 % dos teores de gordura corporal dos grupos AE2 (11,2 %) e AE4 (11,6 %), quando comparados ao teor do grupo controle (13,9 %). A mesma redução foi observada no segundo ensaio biológico nos grupos AE e CO, em relação ao controle (18,1 %, 16,7 % e 21,2 %, respectivamente). Após 42 dias de suplementação com CLA, os animais dos grupos AE e CO, no segundo ensaio biológico, obtiveram aumento de 7,5 % nos teores de cinzas e diminuição de 22,4 % da concentração sérica de leptina. Tendo em vista os resultados encontrados, pôde-se concluir que a suplementação com ácido linoléico conjugado na concentração de 2 % sobre o consumo médio diário de dieta reduziu a gordura corporal e aumentou os teores de cinzas em ratos / Abstract: Conjugated linoleic acid (CLA), a group of positional and geometric isomers of linoleic acid with conjugated double bonds, occurs in small quantities in a wide variety of foods. CLA can originate in the rumen by biohydrogenation of fatty acids from ingested food, and by the desaturation of the trans-11 C18:1 fatty acid. Thus, significant concentrations of CLA are found in beef, milk and dairy products. The purpose of this study was to assess the effect of conjugated linoleic acid supplementation on lipid profile and body composition of healthy growing Wistar rats. Two biological assays were performed: one varying CLA supplement concentration in the diet, and another varying the commercial brands of CLA used. For the first assay, 40 albino male, weaning rats were distributed at random in 4 groups of 10 animals each, according to the amount of supplement to be administered. Animals in groups AE1, AE2 and AE4 were supplemented daily for 21 days with the commercial product AdvantEdge® CLA (EASTM) at 1, 2 and 4 % of food intake respectively, and those in group C (control) with linoleic acid at 2% of food intake. The aim of this first assay was to find the optimum amount of supplement for the purpose of body fat reduction. In the second assay, 30 albino male, weaning Wistar rats were distributed at random in 3 groups of 10 animals each, according to the brand of supplement. Animals were supplemented daily for 42 days at a concentration of 2 %, chosen on the basis of results in the previous assay. Group AE received AdvantEdge® CLA (EASTM); group CO was fed CLA One® (Pharmanutrients); and group C (control) was given linoleic acid at 2 % of food intake. Throughout the experimental period animals had their weight and food intake controlled every 2 days. At the end of each experiment, the animals were killed by cervical displacement under anesthesia (sodium pentobarbital . 46 mg/kg). The blood was used for the determinations of serum triacylglycerols, total cholesterol and leptin; and the carcass was used for determining body composition. Gut contents were removed to obtain empty carcass weight. The carcass was then frozen in liquid nitrogen, chopped, dried, ground and stored at - 80 °C until determinations of water, ash, protein and fat were performed. Feeding efficiency of the rats was not altered by CLA supplementation in either of the assays. No significant difference (p > 0.05) was observed in the serum levels of triacylglycerols after supplementation with CLA. Total cholesterol values, as measured in the first essay after 21 days of treatment, presented a dose-dependent reduction. In the second assay, however, CLA supplementation was found to increase total cholesterol after 42 days. An average reduction of 18.0 % on body fat percentage was found in groups AE2 (11.2 %) and AE4 (11.6 %), compared to the control (13.9 %). Body fat percentage was also reduced by 18.0 % in the second assay in groups AE and CO, compared to the control (18.1 %, 16.7 % e 21.2 %, respectively). After 42 days of CLA supplementation, animals in groups AE and CO, in the second assay, displayed an increase of 7.5 % in ash content and a decrease of 22.4 % in the serum leptin concentration. Considering the results obtained it can be concluded that the conjugated linoleic acid supplementation at a concentration of 2 % of food intake reduced the body fat and increased the ash content of rats / Mestrado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Mestre em Alimentos e Nutrição

Orientador: Neura Bragagnolo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-26T13:23:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_DeboradosSantosVenancio_M.pdf: 659453 bytes, checksum: 771dfa7781b70db92d56d782ce00e5e2 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A utilização da energia de micro-ondas tem sido explorada para extração de compostos orgânicos, inorgânicos e para aceleração de reações químicas em diferentes matrizes. Os métodos convencionais utilizados para extração de lipídeos são métodos laboriosos e que utilizam grandes quantidades de solventes, com a possibilidade de degradar os compostos de interesse. A técnica de extração assistida por micro-ondas (microwave assisted extraction - MAE) combina a energia de micro-ondas gerada pela condução iônica e rotação de dipolos e a extração com solventes, sob freqüência de 2,45 GHz. O aquecimento das moléculas ocorre de forma mais rápida, o que aumenta a eficiência da extração em um tempo menor que as técnicas convencionais. Nesse trabalho foi desenvolvido um novo método de extração de lipídeos para peixes a partir de um delineamento composto central rotacional utilizando material de referência certificado de tecido de peixe homogeneizado (1946 NIST). Os parâmetros avaliados foram massa de amostra, massa de sulfato de sódio e volume de solvente extrator. De acordo com os resultados obtidos, as melhores condições para a MAE foram 0,60 g de amostra; 0,8 g de sulfato de sódio e 9 mL de solvente extrator (acetato de etila:metanol 2:1 (v/v)), a 54°C por 15 minutos (Medina, 2013). O método foi validado com material de referência de peixe homogeneizado e filé de tilápia (Oreochromis niloticus). O teor de lipídeos obtido pela MAE no material certificado foi 10,07 ± 0,25 g/100g e o valor declarado no material certificado de peixe é 10,17 ± 0,48 g/100g. No filé de tilápia o teor de lipídeos obtido pela MAE foi 2,28 ± 0,14 g/100g enquanto pelo método de extração sólido-líquido (Folch et al., 1957) foi 2,33 ± 0,09 g/100g. Esses valores não apresentaram diferença estatística ao nível de significância de 95% pelo Test t, além disso, não foi observada alteração na composição de ácidos graxos. Foram realizadas análises de produtos de oxidação lipídica (dienos conjugados, peróxidos, substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico e compostos voláteis) nos extratos lipídicos provenientes da MAE e do método de extração sólido-líquido. Os valores obtidos para estes parâmetros por MAE foram menores que os valores obtidos pelo método de extração sólido-líquido. Para avaliar o efeito das micro-ondas no tecido de filé de tilápia foi realizada microscopia eletrônica de varredura. O tecido do peixe foi totalmente destruído nas amostras irradiadas por micro-ondas enquanto que o tecido proveniente do método de extração sólido-líquido manteve-se íntegro. O método foi aplicado em amostras de peixes pacu (Piaractus mesopotamicus), pescada (Cynoscion jamaicensis) e atum (Thunnus thynnus), cujos valores de lipídeos totais variaram de 1 a 13 g/100g. Os valores de lipídeos totais e de ácidos graxos obtidos não apresentaram diferença estatística quando comparados aos valores obtidos pelo método de extração sólido-líquido. Dessa forma, a MAE pode ser aplicada para extração de lipídeos em peixes, uma vez que os resultados demonstraram boa exatidão e precisão, além de ser uma técnica rápida, robusta e de baixo consumo de solvente comparada à extração sólido-líquido / Abstract: The use of microwave energy has been explored for extracting organic and inorganic compounds and accelerating chemical reactions in different matrices. The conventional methods used for extracting lipids are laborious and use a large amount of solvent, possibly degrading the compounds of interest. Microwave assisted extraction (MAE) combines microwave energy generated by ionic conduction and dipole rotation and the solvent extraction, at a 2.45 GHz frequency. Molecule heating occurs more rapidly, which increases extraction efficiency in a shorter time than conventional techniques. In the present study, a new lipid extraction method assisted by microwave was developed for fish meat by way of a rotational composite design using lake superior fish tissue certified reference material (1946, NIST). According to the results, the best conditions for for MAE were 0.60 g of sample; 9 mL of extraction solvent (ethyl acetate:methanol 2:1 (v/v)), 0.8 g de of sodium sulfate, at 54°C for 15 min (Medina, 2013). The method was validated using the lake superior fish tissue certified reference material and tilapia fillet (Oreochromis niloticus). Lipid content of the certified reference material by MAE was 10.07 ± 0.25 g/100g while the value declared in the certificate is 10.17 ± 0.48 g/100g. Lipid content of tilapia fillet by MAE was 2.28 ± 0.14 g/100g while by solid-liquid extraction (Folch et al., 1957) it was 2.33 ± 0.09 g/100g. These values were not statistically different by the t test at a 95% significance level; in addition, no changes in fatty acid composition were noticed. Lipid oxidation products (conjugated dienes, peroxides, TBARS and volatile compounds) were determined in the lipids extracted by MAE and solid-liquid extraction, being the values obtained for MAE lower than those obtained by solid-liquid extraction. Scanning electron microscopy was carried out in the microwave irradiated samples to evaluate the effects of microwave on the tilapia fillet tissue. The fish tissue submitted to microwave irradiation was completely destroyed in comparison to the tissue from the fish tissue submitted to solid-liquid extraction, which remained intact. The method was applied to fish samples, i.e., pacu fish (Piaractus mesopotamicus), hake (Cynoscion jamaicensis) and tuna (Thunnus thynnus), whose lipid contents varied between 1 and 13 g/100g. No significant differences were found between MAE and solid-liquid extraction for total lipid content and fatty acid composition of these three fishes. Therefore, MAE can be applied for lipid extraction from fish since the results showed good accuracy and precision, moreover it is a fast and robust technique with low solvent consumption as compared to solid-liquid extraction / Mestrado / Ciência de Alimentos / Mestra em Ciência de Alimentos

Orientador: Francisco Maugeri Filho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-27T13:11:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 HartwigDuarte_Susan_D.pdf: 24431149 bytes, checksum: c5a52419e7e78c24bfe96084aaeaa744 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A constante busca por fontes alternativas de energia tem estimulado o mercado mundial de combustíveis limpos. Tendo em vista este cenário, o objetivo desta tese foi estudar a produção de lipídeos, pela levedura oleaginosa 'Candida sp'. LEB-M3 cultivada em glicerol bruto e o processo de recuperação lipídica para aplicação na síntese enzimática de biodiesel. Durante os cultivos em glicerol bruto e diferentes fontes de nitrogênio, a levedura apresentou conteúdo lipídico 30,8% (m/m) e concentração lipídica de 3,09 g/L, em relação carbono/nitrogênio de 90. As condições de menor agitação e aeração em biorreator (200 rpm e 0,5 vvm) favoreceram a formação de ácidos graxos que conferem melhores parâmetros de qualidade do biodiesel. Entre as técnicas de ruptura estudadas, a abrasão por cisalhamento com pérolas de vidro apresentou alta recuperação lipídica (125%), quando comparada à técnica padrão estudada. A extração com CO2 supercrítico indicou ser um método de extração de lipídeos microbianos promissor, porém é mais seletivo aos compostos apolares e por isso apresentou rendimento global máximo de 6,17%. A reação de síntese de biodiesel com lipídeo microbiano e metanol em meio reacional com n-hexano e lipase recombinante de 'Rhizopus oryzae' (rROL) imobilizada como catalisador da reação, apresentou rendimento de metil ésteres de ácidos graxos (FAMEs) de 40,6%. Além disso, foram realizadas 5 reutilizações da enzima, com perda máxima de 30% no rendimento de FAMEs. O estudo da produção e recuperação lipídica da levedura' Candida sp'. LEB-M3 possibilitou a síntese enzimática de biodiesel, contribuindo assim para o desenvolvimento sustentável da cadeia produtiva do biodiesel / Abstract: The constant search for alternative energy sources has stimulated the global market of clean fuels. In view of this scenario, the goal of this thesis was to study the production of lipids by oleaginous yeast 'Candida sp'. LEB-M3 grown in crude glycerol and the lipid recovery process for use in biodiesel enzymatic synthesis. During the cultivation in crude glycerol and different nitrogen sources, the lipid content of the yeast showed 30.8% (w/w) and lipid concentration of 3.09 g/L, for carbon/nitrogen ratiof of 90. The conditions of less agitation and aeration in the bioreactor (200 rpm and 0.5 vvm) favored the formation of fatty acids that give best biodiesel quality parameters. Among the cell disruption techniques studied, abrasion by shearing with glass beads showed higher lipid recovery (125%) compared to the standard technique studied. The extraction with supercritical CO2 showed to be a promising method of microbial lipid extraction, but is more selective to non-polar compounds and therefore presented the maximum overall yield of 6.17%. The biodiesel synthesis reaction with the microbial lipid and methanol in the reaction medium with n-hexane and recombinant 'Rhizopus oryzae' (rROL) immobilized catalyst of the reaction, showed a yield of 40.6% of fatty acid methyl esters (FAMEs). In addition, there were 5 reuses of enzyme, with a maximum loss of 30% FAMEs yield. The study of lipid production and lipid recovery of the yeast 'Candida sp'. LEB-M3 enabled the enzymatic synthesis of biodiesel, thus contributing to the sustainable development of the biodiesel production chain / Doutorado / Engenharia de Alimentos / Doutora em Engenharia de Alimentos

O cromo é o sétimo metal mais abundante na crosta terrestre e ocorre naturalmente nos diversos compartimentos ambientais, porém o intenso uso deste metal em atividades industriais tem aumentado a liberação deste contaminante, ocasionando alterações na estrutura e funcionamento dos ecossistemas terrestres e aquáticos. Considerando as diferentes formas de exposição ao metal pelos organismos, procurou-se avaliar os efeitos do cromo nas populações fitoplanctônica e zooplanctônica e nas interações tróficas entre ambas, com base em aspectos estruturais e fisiológicos. Para tanto, foram realizados ensaios ecotoxicológicos com duas espécies de algas (Pseudokirchneriella subcapitata e Chlorella vulgaris), avaliando efeitos na densidade celular, concentração de pigmentos e composição bioquímica, além de ensaios com organismos zooplanctônicos (Cladocera Ceriodaphnia dubia e Ceriodaphnia silvestrii) expostos a diferentes vias de contaminação, como água contaminada, alimento contaminado e a combinação de ambas as situações (água e alimento contaminados), avaliando efeitos na sobrevivência, fecundidade, taxa de alimentação e composição bioquímica. Os resultados obtidos demonstraram que o cromo, nas condições testadas, afetou o crescimento, a concentração de pigmentos e a composição bioquímica das algas P. subcapitata e C. vulgaris. Nos ensaios realizados com C. dubia e C. silvestrii, os diferentes tratamentos com cromo não alteraram a sobrevivência destas espécies, porém, nos tratamentos com meio aquoso contaminado com cromo e exposição combinada (meio aquoso e alimento contaminados com cromo) houve redução na fecundidade e diminuição da taxa alimentar destes organismos. Redução no crescimento populacional e aumento de proteínas, carboidratos e lipídeos totais de C. dubia e C. silvestrii também foram relacionados à presença de cromo. Conclui-se, portanto, que o cromo, nas condições testadas, foi tóxico para as espécies fito e zooplanctônicas, podendo causar alterações nas cadeias tróficas dos ecossistemas aquáticos. / Chromium is the seventh most abundant metal in the earth\'s crust and occurs naturally in various environmental compartments, but the heavy use of this metal in industrial activities has increased the release of this contaminant, causing changes in the structure and functioning of terrestrial and aquatic ecosystems. Considering the different forms of exposure to metal by organisms, sought to evaluate the effects of chromium on phytoplankton and zooplankton populations and trophic interactions between them, based on structural and physiological aspects. For this, ecotoxicological tests were conducted with two species of algae (Pseudokirchneriella subcapitata and Chlorella vulgaris), assessing effects on cellular density, pigment concentration and biochemical composition, and tests with zooplankton (Cladocera Ceriodaphnia dubia and Ceriodaphnia silvestrii exposed to different ways of contamination, such as contaminated water, contaminated food and a combination of both situations (contaminated water and food), evaluating effects on survival, fertility, feed rate and biochemical composition. The results showed that chromium under the conditions tested, affected the growth, pigment concentration and biochemical composition of the algae P. subcapitata and C. vulgaris. For tests with C. dubia and C. silvestrii, the different treatments with chromium did not affect survival of these species, however, in treated aqueous medium contaminated with chromium and combined exposure (aqueous and food contaminated with chromium) there was a reduction in fecundity and decreased feed rate of these organisms. Reduction in population growth and increased protein, carbohydrate and lipid of C. dubia and C. silvestrii were also related to the presence of chromium. Therefore, it is concluded that chromium, in the conditions tested, was toxic to phytoplankton and zooplankton species, may cause changes in trophic chains of aquatic ecosystems.

A Xylella fastidiosa é uma bactéria gram-negativa, colonizadora do xilema e é o agente responsável por doenças em plantas cultivadas. No Brasil, a principal doença causada por esta bactéria é a CVC (Clorose Variegada dos Citros), a qual traz grandes prejuízos à produção de laranja dos estados de São Paulo e Minas Gerais. Apesar do atual controle da doença, ainda não se desenvolveu um método específico para o controle da bactéria. Durante a interação planta-patógeno ocorre uma geração exacerbada de oxidantes por parte do hospedeiro, na tentativa de eliminar o patógeno de seu organismo. Dessa forma, os patógenos são expostos a hidroperóxidos derivados de ácidos graxos, formados a partir da ação de lipoxigenases ou ainda pela reação direta de lipídeos com espécies oxidantes. Durante o processo evolutivo, foram selecionados mecanismos de defesa contra estas espécies oxidantes por parte dos patógenos. Dentre estes mecanismos, encontra-se a enzima Ohr (Organic Hydroperoxide Resistance protein), uma peroxidase baseada em resíduos de cisteínas, dependente de grupos lipoil e que possui alta atividade frente à hidroperóxidos orgânicos. Esta proteína provavelmente atua na proteção da célula bacteriana e possui algumas particularidades que fazem dela um alvo em potencial para o desenvolvimento de drogas. Os objetivos deste projeto foram caracterizar possíveis substratos fisiológicos de Ohr de X. fastidiosa, e ainda, buscar moléculas capazes de inibir a atividade peroxidásica desta enzima. Inicialmente demonstramos que Ohr é capaz de reduzir hidroperóxidos de ácido graxo com alta eficiência (kcat/KM ~ 106 M-1.s-1)e, além disso, estes hidroperóxidos são capazes de inativar Ohr em um processo dose dependente, provavelmente devido à alta afinidade entre estes e a enzima. Porém, a enzima não apresentou atividade frente à hidroperóxido de fosfolipídeo (fosfatidilcolina) e hidroperóxido de colesterol. Ademais, elucidamos a estrutura de Ohr na conformação oxidada (ponte dissulfeto), auxiliando no entendimento da dinâmica do ciclo catalítico da enzima. Por fim, selecionamos um composto capaz de inibir a atividade peroxidásica de Ohr in vitro, e temos indícios de que este é capaz de afetar o crescimento bacteriano em situação de estresse oxidativo. / Xylella fastidiosa is a gram-negative bacterium that colonizes the xylem and is the causative agent for several plant diseases. In Brazil, the main disease caused by this bacterium is the CVC (Citrus Variegated Chlorosis), which provokes large losses to the orange production in São Paulo and Minas Gerais states. Despite the current disease control, it has not been yet developed a specific method to eliminate the bacterium. During the plant-pathogen interactions, hosts produce an exacerbated amount of oxidants, in an attempt to eliminate the pathogen. Among them, fatty acids hydroperoxides are formed by the lipoxygenase action or even by the direct reaction between lipids and oxidant species. During the evolutionary process, pathogen defense mechanisms against oxidative species have evolved. Among them, Ohr (Organic Hydroperoxide Resistance protein) that is a Cys-based, lipoyl dependent peroxidase, displaying high activity towards organic hydroperoxides. This protein probably plays a central role in oxidative stress response and presnts some particularities, which make it a potential target for drug design. The objectives of this project were to characterize possible physiological substrates of Ohr from X. fastidiosa and search for molecules capable of inhibiting its peroxidase activity. Initially, we demonstrated that Ohr reduced fatty acid hydroperoxides with high efficiency (kcat/KM ~ 106 M-1.s-1). Moreover, these hydroperoxides inactivated Ohr in a dose-dependent manner, probably due to the high affinity between them and the enzyme. However, the enzyme did not display any activity towards phospholipids (posphatidilcholine) hydroperoxides and cholesterol hydroperoxide. Besides, we elucidated the structure of Ohr in the oxidized form (disulfide bond), which gave us insights on the dynamics of structural elements in the catalytic site. Ultimately, we identified a compound that was able to inhibit the peroxidase activity of Ohr in vitro, and we gained evidences that this compound can affect the bacterial growth under oxidative stress.