A neuroinflamação tem sido demonstrada como um fator presente em diversas doenças neurodegenerativas, como a doença de Alzheimer e doença de Parkinson. O lipopolissacarídeo (LPS) é uma molécula constituinte da membrana de bactérias gram-negativas e, após a ligação desta molécula ao receptor TLR4 ocorre a ativação de diversas vias de sinalização as quais aumentam a produção e secreção de moléculas pró-inflamatórias. Devido a sua alta imunoatividade o LPS tem sido utilizado em modelos de inflamação in vivo e in vitro. O LPS também parece ser capaz de modular, através de uma inflamação sistêmica, a resposta da leptina. A leptina é um hormônio peptídico secretado principalmente pelo tecido adiposo, esta adipocina tem sua ação mediada pela ligação ao receptor ObR, o qual quando ativado pode induzir a ativação de diversas vias de sinalização, levando, por exemplo a produção de SOCS3, que age como um fator de regulação negativo da sinalização pelo ObR. A função mais conhecida e estudada da leptina é na regulação do controle alimentar, onde após a ingestão de alimentos a leptina age no hipotálamo sinalizando a sensação saciedade. Entretanto, já há evidências da presença de seu receptor em outras áreas cerebrais, como no hipocampo, onde esta adipocina pode ter um papel na regulação da memória e aprendizagem. Além disso, também tem sido implicada como neuroprotetora em doenças neurodegenerativas, como as doenças de Alzheimer e Parkinson, sendo a leptina capaz de melhorar tanto aspectos moleculares quanto comportamentais destas patologias. A leptina tem se mostrado importante na regulação da resposta imune, podendo servir como uma molécula de sinalização de uma inflamação sistêmica para o cérebro. A neuroinflamação tem sido implicada como um dos fatores que podem levar a resistência à leptina no hipotálamo. Tendo este hormônio ações distintas entre os tecidos, nós investigamos como a neuroinflamação induzida por injeção ICV de LPS poderia modular a resposta à leptina no hipocampo. Além disso, foram avaliados parâmetros inflamatórios centrais e periféricos e também a resposta astrocítica à neuroinflamação pela dosagem de proteínas características desse tipo celular, todos os parâmetros foram analisados após 48 horas da indução do modelo. Nosso estudo não encontrou diferença no imunoconteúdo da leptina no hipocampo, porém houve um aumento no conteúdo proteico do receptor ObR neste tecido nos ratos tratados e não ocorreu alteração significativa nos níveis intracelulares de SOCS3. Nós encontramos uma diminuição nos níveis séricos de leptina e da proteína S100B nos ratos do grupo LPS. A expressão proteica das citocinas pró-inflamatórias IL-1β e TNF-α foram alterados no hipocampo após a injeção ICV de LPS, tendo um aumento nos níveis intracelulares de IL-1 β e uma diminuição de TNF-α. A proteína glial fibrilar ácida (GFAP) teve um aumento em seu imunoconteúdo no hipocampo dos ratos tratados, em contrapartida os níveis de S100B intracelulares não foram alterados significativamente. Os níveis séricos de TNF-α tiveram um aumento em resposta à neuroinflamação induzida, além disso, os ratos que receberam injeção ICV de LPS mostraram uma maior perda de peso em relação aos ratos que receberam apenas veículo. Nossos dados mostram que a neuroinflamação é capaz de modular a resposta hipocampal e periférica de leptina, colaborando assim para uma melhor compreensão do papel da sinalização por leptina na neuroinflamação e possivelmente nas doenças neurodegenerativas. / Neuroinflammation has been established as a factor present in various neurodegenerative diseases such as Alzheimer's and Parkinson's disease. LPS is a constituent molecule of the membrane of gram-negative bacteria and, after binding of this molecule in the TLR4 occurs activation of several signaling pathways which increase the production and secretion of pro-inflammatory molecules, due to their high immunoactivity LPS has been used in models of inflammation in vivo and in vitro. LPS also seems to be able to modulate, through a systemic inflammation, the response of leptin. Leptin is a peptide hormone secreted mainly by the adipose tissue, that adipokine has its action mediated by binding to the ObRb receptor which when activated can induce activation of several signaling pathways, leading to, for example, production of SOCS3 which acts as a negative feedback on ObRb. The most studied and known function of leptin is in the regulation of food control, where after the food intake leptin signaling in the hypothalamus acts feeling of hunger. However, there is evidence of the presence of its receptor in other brain regions such as hippocampus, where this may adipokine play a role in the regulation of memory and learning. Furthermore, as has also been implicated as neuroprotective in neurodegenerative diseases such as Alzheimer’s and Parkinson’s diseases, and leptin can improve both molecular and behavioral aspects of these diseases. Leptin has been shown to be important in regulating the immune response, may serve as a signaling molecule to a systemic inflammation of the brain. The neuroinflammation has been implicated as a factor that can lead to leptin resistance in the hypothalamus. As this hormone have distinct actions between tissues, we investigated as a neuroinflammation induced by ICV injection of LPS could modulate the response to leptin in the hippocampus. In addition, we assessed the central and peripheral inflammatory parameters, and also the astrocytic response to neuroinflammation by measuring protein characteristics of this cell type, all parameters were analyzed after 48 hours of induction model. Our study found no difference in leptin immunocontent in the hippocampus, but there was an increase in the protein content of the ObR receptor in this tissue in the treated rats and no significant change in intracellular levels of SOCS3. We found a decrease in serum leptin and S100B protein in rats of LPS group. Protein expression of pro-inflammatory cytokines IL-1β and TNF-α were changed in the hippocampus after ICV injection of LPS, with an increase in intracellular levels of IL-1 β and TNF-α decreased. GFAP had an increase in their immunocontent in hippocampus of rats treated, in contrast to the intracellular S100B levels were not significantly altered. The TNF-α serum levels were increased in response to induced neuroinflammation, in addition, rats receiving ICV injection of LPS showed greater weight loss compared to rats receiving vehicle only. Our data demonstrate that neuroinflammation is capable of modulating hippocampal and peripheral leptin response, thus contributing to a better understanding of the role of leptin signaling in the neuroinflammation and possibly in the neurodegenerative diseases.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008 / A tolerância ao lipopolissacarídeo (LPS) ocorre quando animais e células expostas ao LPS tornam-se hiporesponsivas a uma subseqüente dose de LPS. Acredita-se que esse mecanismo esteja envolvido na diminuição da resposta celular observada em pacientes com sepse grave e choque séptico. O objetivo do estudo foi avaliar a indução da tolerância em monócitos de voluntários sadios, em sangue total, após a exposição in vitro ao LPS, medido pela detecção de citocina intracelular e espécies reativas de oxigênio (EROs). Material e métodos: As células do sangue periférico foram condicionadas com pequenas dses de LPS por 18h e desafiadas com diferentes agonistas dos Toll-like receptors (lipopeptídeo ativador de macrófagos (MALP-2), flagelina e LPS) e bactérias gram-negativa (Pseudomonas aeruginosa) e gram-positiva (Staphylococcus aureus) mortas por calor ou condicionadas com pequenas doses de MALP-2 por 18h e desafiadas com MALP-2 ou LPS. Para detecção da interleucina-6 (IL-6) intracelular, amostras de sangue total foram estimuladas por 6h. Os monócitos foram identificados pelos parâmetros de dispersão frontal e dispersão lateral e positividade para CD14. As amostras foram marcadas para a verificação da produção de IL-6 intracelular nos monócitos por citometria de fluxo. Para indução de EROs, o sangue total foi estimulado por 30 minutos com LPS, P. aeruginosa, S. aureus. A produção de espécies reativas de oxigênio foi medida por citometria de fluxo pela detecção do 2’,7’ diclorofluoresceína-diacetato. Resultados: O condicionamento com doses crescentes de LPS resultou em menor detecção de IL-6 intracelular nos monócitos após desafio com LPS. Efeito similar foi observado com MALP-2, P. aerugionosa, S. aureus, mas não com a flagelina. O condicionamento com MALP-2 e desafio com MALP-2 ou LPS não resultou em menor detecção de IL- 6 intracelular nos monócitos. O condicionamento com 15ng/mL de LPS, por outro lado, resultou numa produção de EROs preservada ou aumentada nos monócitos após o desafio com LPS, P. aeruginosa, S. aureus. Conclusão: O fenômeno da tolerância envolve uma regulação complexa, na qual a produção de citocinas pró-inflamatórias, como a IL-6, está diminuída, enquanto a produção de EROS está preservada ou até aumentada. / Tolerance to lipopolyssacharide (LPS) occurs when animals or cells exposed to LPS become hyporesponsive to a subsequent challenge of LPS. This mechanism is believed to be involved in the down-regulation of cellular responses observed in patients with severe sepsis and septic shock. The aim of this investigation was to evaluate the induction of tolerance in monocytes of healthy volunteers, in whole blood, after LPS-exposition in vitro, assessed by intracellular cytokine detection and reactive oxygen species (ROS) generation. Material and Methods: Peripheral blood cells were conditioned with small doses of LPS for 18h and challenged with different agonists of Toll like receptors (Macrophage-activating lipopeptide-2 (MALP-2), Flagellin and LPS) and whole gram-negative (Pseudomonas aeruginosa) and gram-positive (Staphylococcus aureus) killed bacteria or conditioned with small doses of MALP-2 for 18h and challenged with MALP-2 or LPS. For detection of intracellular interleukin-6 (IL-6) samples of whole blood were stimulated for 6h. Monocytes were identified by forward scatter and side scatter parameters and CD14 positive staining. The samples were stained to verify the intracellular production of IL-6 on monocytes by flow cytometry. For induction of ROS, whole blood was stimulated for 30 minutes with LPS, P. aeruginosa and S. aureus. ROS production was measured by flow cytometry, using 2’,7’- dichlorfluorescein-diacetate detection. Results: The conditioning with increasing doses of LPS resulted in lower intracellular detection of IL-6 in monocytes after the challenge with LPS. Similar effect was observed with MALP-2, P. aeruginosa, and S. aureus, but not with Flagellin. The conditioning with MALP-2 and challenge with MALP-2 or LPS did not result in lower intracellular detection of IL-6 in monocytes. LPS conditioning with 15ng/mL of LPS, on the other hand, resulted in preserved or increased production of ROS in monocytes after challenge with LPS, P. aeruginosa and S. aureus. Conclusion: The phenomenon of tolerance involves a complex regulation, in which the production of pro-inflammatory cytokines such as IL-6 is diminished, whereas the production of ROS is preserved or even increased. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-06-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:26:19Z : No. of bitstreams: 1 Publico-141.pdf: 1535996 bytes, checksum: af74b773a6305b7327f17191a30e524c (MD5) / Pré-exposição a pequenas doses de LPS induz resistência a uma dose letal de LPS, um fenômeno conhecido como tolerância à endotoxina. A pré-exposição ao LPS modula o padrão de resposta celular, conforme ilustrado pela expressão gênica e síntese protéica alteradas de citocinas inflamatórias. No entanto, os mecanismos envolvidos neste processo ainda são parcialmente descritos. Interessante, as células tolerantes ao LPS assemelham-se àquelas obtidas de pacientes sépticos. Métodos: Tolerância ao LPS foi induzida em células mononucleares do sangue periférico humanas pela incubação destas com 1 ng/mL de LPS durante 48 horas. Após este período, as células foram desafiadas com 100 ng/mL de LPS por 2, 6 e 24 horas. Em cada um destes momentos, foi avaliada a expressão de 84 genes relacionados à via dos receptores do tipo Toll, por PCR array. Resultados: O pré-tratamento com LPS não modulou a expressão de CD14 e TLR4 na superfície de monócitos, demonstrando que a tolerância não ocorreu devido à modulações dos receptores do LPS. Um gene foi considerado tolerizável quando o pré-tratamento com LPS reverteu o efeito causado na expressão gênica pelo desafio com LPS; enquanto um gene foi considerado não tolerizável quando o pré-tratamento com LPS não reverteu o efeito do desafio com LPS. As cascatas no NF-κB, JNK, ERK e TRIF estavam bloqueadas ou atenuadas em células tolerantes, enquanto a expressão dos genes relacionados à cascata da p38 estava aumentada. Conclusão: Esses resultados demonstram uma regulação distinta entre as cascatas da via de sinalização dos TLRs durante a tolerância. Além disso, este achado pode explicar a regulação diferenciada entre alguns mediadores inflamatórios, como por exemplo a regulação positiva de IL-10 e COX2 e regulação negativa de TNF-α e IL-12, fato este também explicado pela influência de regulações epigenéticas. A tolerância pode resultar em repressão ou indução de expressão gênica, sendo tal efeito dependente de regulação positiva ou negativa induzida pelo desafio com LPS. / Pre-exposure to low doses of LPS induces resistance to a lethal challenge, a phenomenon known as endotoxin tolerance. In this study, tolerance was induced in human PBMC by culturing cells with 1 ng/mL LPS for 48 h. Cells were subsequently challenged with 100 ng/mL LPS for 2, 6 and 24 h, and the expression of 84 genes encoding proteins involved in the TLR signaling pathway was evaluated at each time point by PCR array. LPS pretreatment did not modulate the expression of TLR4 and CD14 on the surface of monocytes. A gene was defined as tolerized when LPS pretreatment reversed the effect of LPS challenge on the expression of the gene or as non-tolerized when LPS pretreatment did not reverse the effects of LPS challenge. We observed impaired or attenuated signal transduction through the NF-κB, JNK, ERK and TRIF pathways, whereas expression of p38 pathway-related genes was preserved in LPStolerant cells. These results show a distinct regulation of the TLR pathway cascades during tolerance; this may account for the differential gene expression of some inflammatory mediators, such as up-regulation of IL-10 and COX2 as well as down-regulation of TNF-α and IL-12. Depending on the effect of LPSinduced gene up-regulation or down-regulation, tolerance, as a reversion of such LPS effects, may result in repression or induction of gene expression. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2016-03-18T12:14:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 suzana_cardozo_ioc_dout_2014.pdf: 2843989 bytes, checksum: 86fbef7b8c97536a2ad4ba706de60d31 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Inibidores de PDE4 atuam aumentando as concentrações intracelulares de AMPc, um segundo mensageiro com várias ações anti-inflamatórias em células efetoras envolvidas na patogênese da asma e DPOC. Nesta tese foram avaliados 8 compostos de uma nova série de inibidores de PDE4, pertencentes à classe das N-metil-N-acilidrazonas (NAHs), com base em modelos experimentais de inflamação e remodelamento pulmonar, visando-se identificar potenciais novos agentes terapêuticos para doenças inflamatórias pulmonares. Foram quantificados leucócitos infiltrados no tecido pulmonar, a geração de citocinas, resistência e elastância pulmonar, fibrose e a produção de muco nas vias aéreas de camundongos A/J estimulados, por via intranasal, com LPS ou alérgeno. Todas as analises foram realizadas 18 ou 24 h após a última provocação. Culturas primárias de linfócitos e fibroblastos foram também empregadas para estudo de impacto dos tratamentos ao nível celular. O potencial pro-emético dos compostos mais promissores foi indiretamente investigado com base no ensaio de tempo de anestesia induzido pela mistura de quetamina e xilazina. O tratamento com agentes NAHs (100 \03BCmol/kg, oral), exceto LASSBio-1393, inibiu acentuadamente a hiper-reatividade das vias aéreas (AHR), o infiltrado leucocitário e a produção de citocinas, de forma comparável ao observado para rolipram e cilomilast Observou-se que os NAHs foram também ativos no bloqueio terapêutico da resposta asmática alérgica desencadeada por ovoalbumina (OVA). Neste modelo, somente LASSBio-1406 e LASSBio-1407 foram capazes de reverter todas as alterações patológicas avaliadas, incluindo o infiltrado eosinofílico, a fibrose peribrônquica e a mucogênese, claramente refratários ao tratamento com o inibidor de referência de PDE4 rolipram. O perfil de ação diferenciada do composto LASSBio-1407 foi também confirmado na reversão das respostas de infiltração eosinofílica, secreção de citocinas, hiperreatividade e remodelamento das vias aéreas no modelo de asma induzida por HDM, em condições onde o composto de referência cilomilast mostrou eficácia comparativamente menor. Ambos LASSBio-1406 e LASSBio-1407 foram também mais potentes do que cilomilast e rolipram no bloqueio da ativação e resposta proliferativa de linfócitos e fibroblastos em sistemas in vitro. Por ultimo, constatou-se que a administração oral de LASSBio-1406 e LASSBio-1407, diferentemente do observado com rolipram e cilomilast, não modificaram o tempo de sono induzido por quetamina e xilazina, realçando o menor potencial pró-emético dos compostos NAHs destacados Tomados em conjunto, os resultados apontam os derivados LASSBio-1406 e o LASSBio-1407, como os mais promissores na série estudada de agentes N-metil-Nacilidrazônicos, inibidores de PDE4, pelo amplo perfil de ação sobre alterações patológicas cruciais associadas à asma, bem como pelo menor impacto sobre efeitos adversos próeméticos. Os compostos LASSBio-1406 e LASSBio-1407 são certamente, dentre os compostos testados, protótipos moleculares de forte potencial terapêutico no tratamento de doenças inflamatórias pulmonares crônicas / Inhibitors of phosphodiesterase type 4 (PDE4) act by increasing intracellular concentrations of cyclic AMP, which has a broad range of anti - inflammatory effects on various key effector cells involved in asthma and chronic obstructive pulmo nary disease (COPD). In this study we have evaluated eight compounds of a new series PDE4 inhibitors, which belong to the class of N - methyl - N - acylhydrazones (NAHs), using experimental models of lung inflammation and remodeling order to identify potential new therapeutic agents for pulmonary inflammatory diseases. Local change in l eukocyte levels , cytokines production , airway hyper - reactivity (A HR ) and remodeling were examined in A/j mice challenged intranasally with LPS or allergen. All analyzes were performed 18 or 24 h after the last challenge. Primary Cultured lymph node cells and fibroblasts were also used to assess the effects of NAHs at th e cellular level. Potential provoke emesis of the more promising compounds was investigated indirectly based on the test sleep time induced by mixture of ketamine and xylazine. NAHS derivative (100 μ mol/kg, v.o. ), except LASSBio - 1393, markedly inhibited th e AHR, leukocyte infiltration and cytokine production, in a comparable manner to that observed in rolipram and cilomilast. We found that NAHs derivates were also active in the therapeutic blockade of ovalbumin - evoked allergic asthmatic response. In this mo del, only LASSBio - 1406 and LASSBio - 1407 were able to reverse all pathological changes, incl uding eosinophilic infiltrate, p eribronchial fibrosis and mucus exacerbation clearly refractory to treatment with the PDE4 inhibitor rolipram. The distinguished the action profile of LASSBio - 1407 compound was also confirmed in the reversal of eosinophilic inflammation responses, cytokine secretion, hyperresponsiveness and airway remodeling in asthma model induced by HDM, in conditions where the reference compost cilom ilast showed efficacy compared lower. Both LASSBio - 1406 and LASSBio - 1407 were also more potent than rolipram, and cilomilast in blocking the activation and proliferative response of lymphocytes and fibroblasts in vitro systems. Finally, it was found that o ral administration of LASSBio - 1406 and LASSBio - 1407, different from that observed with rolipram and cilomilast, did not change the sleep time induced by ketamine and xylazine, highlighting the lowest pro - emetic potential of posted N AHs compounds . Taken to gether, the results indicate th at LASSBio - 1406 derivatives and the LASSBio - 1407, as the most promising in the studied series of N AHs agents, PDE4 inhibitors, the broad profile of action on crucial pathological changes associated with asthma, as well as the smallest adverse i mpact on pro - emetic effects. LASSBio - 1406 and LASSBio - 1407 are certainly among the tested compounds, molecular p rototype strong therapeutic potential in the treatment of chronic pulmonary inflammatory diseases.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas. / Made available in DSpace on 2012-10-26T09:49:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 304962.pdf: 871003 bytes, checksum: 06ad885598551e07e84925ccf9de84a3 (MD5) / Estudos epidemiológicos com a população humana indicam que existe associação entre a ativação do sistema imune materno e o aumento do risco de dano no sistema nervoso central (SNC) da prole. A exposição a citocinas pró-inflamatórias específicas podem sensibilizar o cérebro e levar a má-formação do córtex cerebral possibilitando uma variedade de desordens neurológicas em crianças e adultos. OBJETIVO: Avaliar o impacto da inflamação perinatal em roedores submetidos à criolesão durante o desenvolvimento cortical. METODO: Fase 1: Uma única injeção intraperitoneal de LPS foi administrada no E18 nas concentrações de 50, 150, 300 µg/Kg. O grupo controle recebeu solução salina 0.9%. A temperatura corporal foi avaliada antes e 3 horas após o LPS. As gestantes foram submetidas ao teste do campo aberto 3 horas após administração da solução pirogênica e após testagem foram anestesiados para determinação leucocitária. Fase 2: Extração do liquido amniótico e soro materno para determinação dos marcadores de IL-1 e TNF- (ELISA). Fase 3: Taxa de aborto: Após administração do LPS e solução salina, os animais foram monitorados para avaliação da taxa de aborto. Fase 4: Após LPS (150µg/Kg) no E18 as gestantes foram monitoradas até o parto onde foram separadas em 4 grupos distintos: sham, LPS, Criolesão (CL) e LPS + CL. Os filhotes no dia pós natal 0 (P0) foram submetidos a anestesia por hipotermia e receberam um corte na área do córtex somatossensório primário. Os animais que foram submetidos à criolesão receberam além da anestesia e do corte a aposição de um bastão resfriado em nitrogênio liquido na área seccionada. O comportamento destes animais foi avaliado na fase adulta com a aplicação dos seguintes testes: Campo aberto, Nado forçado, Labirinto em Y, Labirinto em Cruz Elevado e Suspensão pela Cauda. RESULTADOS: A administração intraperitoneal de LPS nas doses de 50, 150 e 300µg/Kg causaram hipotermia materna. Os níveis de neutrófilos 3 horas após a administração do LPS reduziram significativamente no grupo tratado com 300µg/Kg of LPS devido a hipotermia materna. Os grupos tratados com LPS mostraram redução significativa da atividade locomotora indicando comportamento doentio. Os níveis de IL-1ß e TNF-a no soro materno e liquido amniótico comprovaram a presença de inflamação sistêmica. Os animais que sofreram hipotermia, submetidos ou não a inflamação, mostraram níveis de ansiedade significativamente maiores no teste do Labirinto em Cruz Elevado. Mais pesquisas são necessárias para avaliar o comportamento de ansiedade demonstrada pelos animais testados. O LPS leva ao comportamento doentio das gestantes, modifica a fisiologia do parto e pode levar a altas taxas de aborto de uma forma dose-dependente. O LPS também modifica os níveis séricos de marcadores pró-inflamatórios nos compartimentos maternos e fetais. O sorotipo E-coli 0111:B4 causa hipotermia nas gestantes. / Epidemiological studies with human populations indicate associations between prenatal immune activation and increased risk in offspring for central nervous system (CNS) disorders. The exposure to particular proinflammatory cytokines may sensitize the brain to hypoxic insults and that can lead to structural malformations of the cerebral cortex enabling a variety of neurological disorders in children and adults. OBJECTIVE: Evaluate the impact of perinatal inflammation in rodents subjected to freezing lesion during cortical development. METHOD: Phase 1: A single intraperitoneal injection of LPS was performed on gestational day E18. The aliquots of increasing concentration were 50, 150, 300 ìg/Kg. The control group received pyrogen-free 0.9% isotonic saline. Body temperature was performed before and 3 hours after LPS administration. Animals were subjected to the open field test 3 hours after the endotoxin injection then anesthetized for maternal cardiac blood testing and determination of leukocyte, monocyte, lymphocyte and granulocyte levels. Phase 2: Maternal serum and amniotic fluid extraction was performed 3 hours after LPS injection for detection of the markers IL-1 and TNF-á (ELISA). Phase 3: Labor analysis: Following LPS injection, four animals of two treatment groups were monitored daily in single cages until delivery to evaluate the occurrence of abortion in each treatment group. Phase 4: Following LPS injection (150ìg/Kg) on E18 maternal mice were monitored daily in single cages until delivery. Pups on postnatal day zero (P0) were separated into four distinct groups according to the treatment their mothers had received. Groups were divided as followed: Sham, LPS, Focal freezing lesion (FFL) and LPS+FFL. Pups whose treatment involved freezing lesion were subjected to the incision on the primary somatosensory cortex area. Male mice were allowed to become adults and then tested in behavioral tests such as the Open Field, Forced swim, Y maze, Elevated Plus Maze and Tail Suspension. RESULTS: Intraperitoneal administration of 50, 150 and 300ìg/Kg of E.coli LPS elicited hypothermia in pregnant mice. Neutrophil levels were significantly different in the group that was treated with 300ìg/Kg of LPS. Groups receiving LPS showed significantly less locomotion than the group receiving saline. IL-1â and TNF-á were measured in maternal serum and amniotic fluid and significant results were found proving the presence of maternal systemic inflammation model. Animals which were subjected to hypothermia, independently of the inflammation, showed significant levels of anxiety in the Elevated Plus Maze Test. More researches are necessary to evaluate the anxiety behavior displayed by the animals of this research LPS causes pronounced evidence of sickness behavior in pregnant mice, it modifies the physiology of gestation and might lead to abortion in a dosedependent way. Furthermore, LPS modifies serum levels of proinflammatory markers observed in the maternal and in the intrauterine compartment. E. coli serotype 0111:B4 was observed to decrease body temperature leading to hypothermia.

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências / Made available in DSpace on 2013-06-26T00:01:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 311503.pdf: 929167 bytes, checksum: b46c55d2ed1692f3ce3016e50aabab43 (MD5) / A exposição ao lipopolissacarídeo (LPS), no período gestacional pode comprometer e/ou alterar o desenvolvimento fetal e predispor a prole a prejuízos em sua fisiologia na vida adulta. Esses prejuízos podem estar relacionados à manifestação de patologias neuropsiquiátricas, alterações no comportamento e aumento do estresse oxidativo. O objetivo deste estudo foi avaliar o impacto do estressor imunogênico, aplicado durante o período gestacional, sobre o comportamento tipo-ansiedade e a atividade da Glutationa Redutase (GR) no córtex e hipocampo da prole adulta. As fêmeas gestantes foram expostas ao LPS (10µg/kg/i. p.) no 8º dia de gestação. No 45º dia de idade, as proles geradas foram submetidas a diferentes tratamentos: 1. expostas ao LPS (5µg/kg/i. p.), 2. tratadas com PBS, 3. tratadas com midazolam (1mg/kg), 4. não manipuladas. Posterior ao período de 4 horas da exposição ao LPS ou 30 minutos após o tratamento com midazolam, as proles foram avaliadas no Labirinto em Cruz Elevado (LCE). Amostras de córtex e hipocampo foram coletadas 4 horas após a exposição ao LCE para análise da GR. Com o objetivo de avaliar o impacto da adoção cruzada (cuidados maternos) na prole adulta de camundongos submetidos ao modelo de exposição ao LPS na fase intra-uterina, proles de fêmeas expostas ao LPS durante o período gestacional foram adotadas por fêmeas não manipuladas e vice-versa. Os resultados mostraram que a exposição ao LPS durante a gestação provocou: 1. aumento do ganho de peso corporal nas proles após o desmame, de forma mais pronunciada nas proles fêmeas a partir do 33º dia de idade, 2. as proles apresentaram aumento dos parâmetros indicativos de ansiedade, 3. redução dos níveis de glutationa redutase nas proles machos no hipocampo, 4. O protocolo de adoção foi capaz de gerar aumento de ansiedade nos animais e 5. No protocolo de adoção cruzada um fenômeno de tolerância foi observado quando as proles foram expostas ao LPS na idade adulta. Desta maneira, verificamos que o LPS no período gestacional repercute em alterações metabólicas,comportamentais na prole adulta e na atividade antioxidante. / Exposure to the Lipopolysaccharide (LPS), during pregnancy can compromise and / or alter fetal development, and predispose the offspring to losses in their physiology in adulthood. These losses can be related to the manifestation of neuropsychiatric disorders, changes in behavior, and increased oxidative stress. The objective of this study aims at evaluating the impact of immunogenic stressor applied during pregnancy, on the anxiety-like behavior and activity of glutathione reductase (GR) in the cortex and hippocampus of adult offspring. The pregnant females were exposed to LPS (10ìg/kg/ip) on the eight day of gestation. At 45 days of age, the offspring were subjected to different treatments: 1. exposure to LPS (5ìg/kg/i. p.), 2. treated with phosphate buffered saline (PBS), 3. treated with midazolam (1mg/kg), 4. not manipulated. Four hours after the exposure to LPS or thirty minutes after treatment with midazolam, the offspring were evaluated in the elevated plus maze. Cortex and hippocampus samples were collected for analysis of GR. In order to assess the impact of cross-fostering (maternal) in the adult offspring of mice subjected to the type of exposure to LPS in utero, offspring of females exposed to LPS during pregnancy were adopted by unmanipulated females and vice versa. The results of this study demonstrate that exposure to LPS during pregnancy leads to: 1. an increase in body weight gain in the offsprings post weaning, more pronounced in the female offspring from 33 day-old, 2. an increase on indicative parameters of anxiety-like behavior in the offsprings, 3. decreased levels of glutathione reductase in the hippocampus of male offsprings, 4. the protocol adopted was able to generate increased anxiety-like behavior in animals and 5. a phenomenon of tolerance was observed when the offspring were exposed to LPS in adulthood in the cross-fostering protocol. Thus, we found that very low dose of LPS during pregnancy reflected in metabolic and behavioral changes in the adult offspring and decreased antioxidant activity.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-10-19T13:03:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 338971.pdf: 3352887 bytes, checksum: ce3157b765264ba2c34f1e75e377aa64 (MD5) Previous issue date: 2015 / A doença de Parkinson (DP) é uma doença neurodegenerativa de causa multifatorial, cujos sintomas manifestam-se normalmente na fase adulta tardia. Evidências recentes têm apontado para fatores ambientais do período perinatal (incluindo a exposição a pesticidas) e o processo inflamatório (causado por infecções virais ou bacterianas) como causadores de toxicidade direta aos neurônios dopaminérgicos. Ainda, estudos sugerem que exposições à toxicantes durante o período perinatal podem ser responsáveis por uma condição de toxicidade silenciosa com consequências tardias e duradouras no sistema dopaminérgico nigroestriatal, algumas das quais são evidenciadas apenas se este sistema sofrer um novo insulto na fase adulta. Embora tais evidências pareçam ser de grande importância para o entendimento da etiologia da doença de Parkinson idiopática, os mecanismos moleculares relacionados a tais fenômenos são desconhecidos. O objetivo do presente trabalho foi investigar os mecanismos relacionados à neurotoxicidade dopaminérgica tardia decorrente da exposição aos pesticidas paraquat (PQ) e maneb (MB) ou ao processo inflamatório induzido pela administração sistêmica de lipopolissacarídeo (LPS) no sistema nigroestriatal em desenvolvimento relacionando-os com o eventual aumento da susceptibilidade a insultos neurotóxicos decorrentes da exposição aos pesticidas na fase adulta. Além disso, objetivou-se investigar o efeito da exposição aos pesticidas PQ e MB em cultivos de células tronco neurais sobre parâmetros de proliferação e diferenciação celular. Camundongos Swiss machos e fêmeas foram expostos a uma combinação dos pesticidas PQ e MB (PQ + MB) diariamente entre o dia pós-natal (PN) 5 ao 19. A exposição PN ao PQ + MB não causou mortalidade, alterações no peso corporal e nem alterações comportamentais no sistema motor dos animais, indicando ausência de toxicidade evidente. Entretanto, houve redução na atividade dos complexos I e II da cadeia transportadora de elétrons mitocondrial, além de redução nos níveis dos marcadores dopaminérgicos tirosina hidroxilase (TH) e transportador de dopamina (DAT) no estriado. Ainda, houve uma diminuição significativa no número de neurônios TH e DAT positivos na substância negra pars compacta (SNpc), a qual pode estar relacionada ao mecanismo de toxicidade silenciosa. Essas alterações foram evidenciadas apenas nos camundongos machos. Quando esses animais foram reexpostos aos mesmos toxicantes na vida adulta foram observadas alterações motoras, bem como degeneração dos neurônios dopaminérgicos na SNpc, indicando um aumento na susceptibilidade dos animais machos à segunda exposição na vida adulta. Por outro lado, camundongos Swiss machos e fêmeas expostos ao LPS (dia PN 5 e 10) apresentaram comprometimento motor significativo e aumento nos níveis de interleucinas inflamatórias no estriado. Quando esses animais foram expostos aos pesticidas na vida adulta, apenas os camundongos machos apresentaram alterações comportamentais que podem indicar um possível aumento na susceptibilidade dos animais. Por fim, foi avaliado o efeito da exposição ao PQ e MB em cultivos primários de células tronco neurais de ratos. A exposição aos pesticidas, especialmente o PQ ou a associação PQ + MB induziu uma redução na proliferação celular e um aumento na geração de espécies reativas. A redução na proliferação celular foi relacionada a alterações na expressão gênica de proteínas importantes na regulação do ciclo celular. Os dados indicam que exposições a toxicantes ambientais e o processo inflamatório durante períodos críticos do desenvolvimento cerebral podem levar a uma progressiva neurotoxicidade na vida adulta.<br> / Abstract : Parkinson's disease (PD) is a multifactorial neurodegenerative disorder with late-life onset. It has been hypothesized that PD could arise from events that occur early in development that have long-term but delayed adverse consequences for the nigrostriatal dopamine system, which may become evident only if the system undergoes further adult-related insult. Possible developmental events could include exposures to environmental neurotoxicants (including pesticides) and inflammatory process (induced by bacterial or viral infections). A "silent toxic" status has been hypothesized to be responsible for the enhanced adult susceptibility to environmental factors known to be involved in the induction of neurodegenerative disorders. However, the molecular mechanisms related with this phenomenon are unknown. Therefore, the objective of the present study was to investigate the mechanisms of late dopaminergic toxicity induced by exposures to the pesticides paraquat (PQ) and maneb (MB), as well as the inflammatory process induced by systemic lipopolysaccharide (LPS) administration on the nigrostriatal dopaminergic system during the early-postnatal development. In addition, we aimed to evaluate whether pesticides or LPS exposure during critical periods of development could enhance the vulnerability of the dopaminergic system to the toxicity elicited by subsequent re-exposure to the pesticide in adult life. Moreover, we aimed to investigate the effects of PQ and MB exposure in primary embryonic neural stem cells (NSC) on parameters related to cell proliferation and differentiation. Male and female Swiss mice were treated daily with a combination of PQ and MB (PQ + MB) from post-natal (PN) day 5 to 19. Pesticide exposure did not induce mortally; neither modify body weight nor mice motor function. However, PQ + MB exposure decreased the activity of mitochondrial complex I and II and reduced the levels of tyrosine hydroxylase (TH) and dopamine transporter (DAT) in striatum. In addition, postnatal PQ+MB exposure decreased the number of TH and DAT positive neurons in the substantia nigra pars compacta (SNpc), which was related to the silent toxicity mechanism. These alterations were observed just in male mice. The findings indicate that the exposure to PQ + MB during PN period was able to produce permanent and progressive lesions of the nigrostriatal dopaminergic system and enhanced adult susceptibility of male mice to this pesticide. On the other hand, male and female mice exposed to LPS (at PN days 5 and 10) showed a significant motor deficits and an increase in striatal inflammatory interleukin levels. Male mice exposed developmentally to LPS and re-challenged as adults to PQ + MB showed alterations in motor function, indicating a possible increase in the adult susceptibility of male mice to the pesticides. The effect of PQ and MB exposure was also investigated in NSC. Pesticides exposure, especially to PQ or PQ+MB reduced cell proliferation and induced an increase in reactive species generation. The decrease in cell proliferation was elated to alterations in gene expression of important proteins modulating the cell cycle regulation. Taken together, these findings indicate that exposure to environmental toxicants and the inflammatory process during brain development might lead to a progressive neurotoxicity late in life.

Orientador : Prof. Dr. Aleksander Roberto Zampronio / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa: Curitiba, 29/04/2016 / Inclui referências : f. 91-116 / Área de concentração / Resumo: A febre pode ser definida como um aumento controlado da temperatura corporal interna de um organismo para níveis acima dos normais, decorrente de uma alteração do ponto de termorregulagem hipotalâmico (set point). Existem diferentes maneiras de mimetizar a febre em animais de laboratório, porém o modelo de administração intraperitoneal de lipopolissacarídeo (LPS) é amplamente utilizado e estável. Uma vez injetada, essa substância se liga à receptores do tipo Toll-Like 4 em células do sistema imune como macrófagos, que passam a sintetizar e liberar diversos pirogênios endógenos, tais como interleucina(IL) -1?, IL-1?, IL-6, IL-8, proteína inflamatória de macrófago (MIP-1?) e o ligante do receptor ativador de fator nuclear ?B (RANKL) entre outros. Estes mediadores induzem a formação e liberação de diversos mediadores centrais como prostaglandinas (PG), endotelina-1 (ET-1), fator liberador de corticotrofina (CRF), substância P (SP), opióides endógenos e endocanabinóides que por sua vez irão atuar em respostas complexas culminando na resposta febril. Entretanto, esses estudos foram todos realizados em animais de experimentação machos. Considerando-se que há evidências de diferenças na resposta inflamatória e febril relacionadas ao gênero em animais experimentais e que mulheres possuem maior incidência de patologias inflamatórias e relacionadas à dor, o objetivo deste trabalho foi avaliar a resposta febril induzida por LPS e por diferentes mediadores que são liberados por este pirogênio em ratas, bem como a influência de hormônios sexuais femininos nestas respostas. Em complementação, investigamos a expressão de ciclooxigenase-2 (COX-2) e de diversos receptores destes mediadores centrais em ratas e a influência da ovariectomia sobre esta expressão. Verificamos que fêmeas ovariectomizadas (OVX) apresentaram temperaturas basais maiores que fêmeas falso-operadas. A injeção de LPS (50 ?g/kg,i.p.) em animais falso-operados induziu uma resposta febril significativamente menor quando comparado com ratas OVX. Estas apresentaram um perfil de resposta febril similar ao observado em machos. O tratamento subcrônico com 17?-estradiol (1 mg/kg, s.c.) em animais OVX reduziu a febre induzida pelo LPS. Fêmeas OVX apresentaram uma redução nos níveis de estradiol plasmático. A administração de LPS aumentou os níveis de testosterona em animais falso-operados e OVX. A administração intracerebroventricular (i.c.v.) de TNF-? (250 ng) e MIP-1? (500 ng) promoveram um aumento da temperatura corporal em animais falso-operados que foi abolida em ratas OVX. Já a administração de IL-1? (3.1 pg) em animais falso-operados e OVX induziu uma resposta febril similar em ambos os grupos. O tratamento com antagonista para RANK, osteoprotegerina, aboliu a resposta febril induzida pelo LPS em animais OVX, porém não modificou essa resposta em animais falso-operados. A administração de LPS aumentou a expressão de receptores RANK em neurônios hipotalâmicos de ratas falso-operadas e este aumento foi reduzido após a ovariectomia. A fim de avaliar o envolvimento de prostaglandinas nestas respostas, observamos que o tratamento com o inibidor não seletivo de ciclooxigenase indometacina reduziu a resposta febril induzida pelo LPS tanto em animais falso-operados e OVX. A injeção de LPS aumentou a concentração de PGE2 no fluido cerebroespinhal tanto em animais falso-operados como em OVX mas os níveis deste eicosanoide foi significativamente maior em animais OVX quando comparado com falso-operados. A administração de LPS também aumentou a expressão de COX-2 no hipotálamo em ambos os grupos mas a expressão desta enzima foi significativamente maior em OVX quando comparado com animais falso-operados. A administração i.c.v. de PGE2 (250 ng) também induziu uma resposta febril maior em animais OVX quando comparado com animais falso-operados. No mesmo sentido, a expressão de receptores de prostaglandinas EP3 aumentou em neurônios hipotalâmicos de ambos os grupos após a administração de LPS mas foi significativamente maior em animais OVX quando comparada à animais falso-operados. A injeção i.c.v. de CRF (2,5?g), ET-1 (1 pg), do agonista opiodérgico morfina (10 ?g) e de substância P (500 ng) induziu febre em animais falso-operados. A ovariectomia reverteu a resposta febril induzida por CRF, ET-1 e substância P mas não aquela induzida por morfina. Por outro lado, a administração de LPS aumentou a expressão de receptores CRFI/II, ?-opioidérgicos, e NK1 sem alterar significativamente a expressão de receptores ETB em animais falso-operados. A ovariectomia não modificou o aumento promovido pelo LPS de receptores de CRF e de opióides, mas um aumento significativo na expressão de receptores ETB e NK1 foi observado em fêmeas OVX que receberam LPS quando comparadas a falso-operadas. No presente estudo discutimos as relações entre estes diferentes mediadores e seus receptores na resposta febril e a modulação destas respostas por hormônios ovarianos. Os dados obtidos sugerem que a resposta febril em fêmeas, embora menor do que em machos envolve mediadores similares. No entanto, a ação de alguns destes mediadores é modificada pela na ausência dos hormônios gonadais apresentando-se mais dependente de prostaglandinas nesta condição que simula a menopausa do que de outros mediadores centrais. Palavras-chave: Febre, Lipopolissacarídeo, Endotoxina, Hormônios sexuais. / Abstract: Fever can be defined as a controlled increase in internal body temperature resulting from a change in the hypothalamic thermoregulatory set point. There are different ways to mimic this phenomenon in laboratory animals, but the model of intraperitoneal administration of lipopolysaccharide (LPS) is widely used and stable. Once injected, LPS binds to Toll-Like type 4 receptor in immune cells such as macrophages, and induces the synthesis and release various endogenous pyrogens such as interleukin (IL) -1?, IL-1?, IL-6, IL -8, macrophage inflammatory protein (MIP-1?) and the receptor-activator of nuclear factor ?B ligand (RANKL), among others. These mediators induce formation and release of several central mediators such as prostaglandins (PG), endothelin-1 (ET-1), corticotrophin-releasing factor (CRF), substance P (SP), endogenous opioids and endocannabinoids which in turn will act in complex ways culminating in the febrile response. However, these studies were all performed in male experimental animals. Considering that there is evidence of differences in inflammatory and febrile response related to gender in experimental animals and that women have a higher incidence of inflammatory disorders and related pain, the aim of this study was to evaluate the fever induced by LPS and different mediators that are released by this pyrogen in female rats as well as the influence of female sex hormones in these responses. Additionally, we investigated the expression of cyclooxygenase-2 (COX-2) and various receptors of these central mediators in female rats and the influence of ovariectomy on this expression. We found that ovariectomized (OVX) female rats had higher baseline temperatures than sham-operated female rats. The injection of LPS (50 ?g/kg, i.p.) in sham-operated animals induced a significantly lower febrile response when compared to OVX rats. OVX female rats had a febrile response similar to that observed in males. The subchronic treatment with 17?-estradiol (1 mg/kg, s.c.) in OVX animals reduced the LPS-induced fever. OVX females showed a reduction in plasma oestradiol levels. The LPS administration increased testosterone levels in sham-operated and OVX animals. The intracerebroventricular (i.c.v.) administration of TNF-? (250 ng) and MIP-1? (500 ng) promoted an increase in body temperature sham-operated animals was abolished in OVX rats. However, the administration of IL-1? (3.1 pg) in sham-operated and OVX animals induced a similar febrile response. The treatment with RANK receptor antagonist, osteoprotegerin, abolished the fever induced by LPS in OVX animals but did not modify this response in sham-operated animals. The LPS administration increased expression of RANK receptors on hypothalamic neurons of sham-operated rats, and this increase was reduced after ovariectomy. In order to assess the involvement of prostaglandins in these responses, we observed that the treatment with the nonselective cyclooxygenase inhibitor indomethacin reduced the fever induced by LPS in both sham-operated and OVX animals. The injection of LPS increased the PGE2 concentration in the cerebrospinal fluid in both sham-operated and OVX animals but the levels of this eicosanoid was significantly higher in OVX rats compared to sham-operated ones. The LPS administration also increased COX-2 expression in the hypothalamus in both groups but the expression of this enzyme was significantly higher in OVX female rats compared to sham-operated animals. The i.c.v. administration of PGE2 (250 ng) also induced a higher febrile response in OVX compared to sham-operated animals. Similarly, the expression of prostaglandin EP3 receptors was increased in hypothalamic neurons of both groups after administration of LPS but was significantly higher in OVX compared to sham-operated animals. The i.c.v. injection of CRF (2,5?g), ET-1 (1 pg), opiod receptor agonist morphine (10 g) and substance P (500 ng) induced fever in sham-operated animals. The ovariectomy reversed the febrile response induced by CRF, ET-1 and substance P but not that induced by morphine. Moreover, LPS administration increased the expression of CRFI/II, ?-opioid and NK1 receptors without significantly altering the expression of ETB receptors sham-operated animals. Ovariectomy did not affect the increase in the expression of CRF and ?-opioid receptors promoted by LPS but a significant increase in the expression of NK1 and ETB receptors was observed in OVX females which received LPS as compared to sham-operated rats. In the present study we discuss the relationship between these different mediators and their receptors in the febrile response and modulation of these responses by ovarian hormones. The data suggest that the febrile response in females, although lower than in males involves similar mediators. However, the action of some of these mediators is modified by the absence of gonadal hormones, being more dependent on prostaglandin synthesis in this condition that simulates menopause than other central mediators. Key-words: Fever, Lipopolysaccharide, Endotoxin, Sexual Hormones.

O lipopolissacarídeo (LPS) é uma endotoxina de bactérias gram-negativas utilizada experimentalmente para estimular processos inflamatórios e ativar o sistema imune através da liberação de citocinas pró-inflamatórias no sistema nervoso central (SNC). A administração experimental de LPS a ratas prenhes resulta em alterações que podem ser verificadas tanto nos animais submetidos ao tratamento quanto na prole destas fêmeas. O objetivo deste estudo foi o de verificar a existência alterações relacionadas à aprendizagem e à memória na prole masculina de ratas submetidas ao LPS durante a gestação. Para tanto, foi administrado LPS (100mg/kg) no 9,5º dia da prenhes de ratas Wistar. O presente trabalho avaliou os efeitos desta administração no reconhecimento dos animais utilizando o olfato tanto na infância quanto na idade adulta, assim como os níveis de neurotransmissores no bulbo olfatório. A atividade geral dos animais foi analisada no campo aberto e também o comportamento no labirinto em cruz elevado. A aprendizagem dos animais foi observada na caixa de Skinner e também foi analisado reconhecimento de objetos dos animais. Os níveis de neurotransmissores do hipocampo na idade adulta também foram dosados. Os resultados mostraram que a administração de LPS no 9,5º de gestação causou: 1) diminuição do reconhecimento do odor materno nos filhotes na infância e que essa alteração não permanece na idade adulta; 2) diminuição nos níveis de dopamina no bulbo olfatório dos animais tratados pré-natalmente; 3) ausência de interferência na atividade geral e de locomoção dos animais quando comparados com o grupo controle; 4) ausência de alterações na aquisição do aprendizado resultando porém em diminuição no tempo de reversão do aprendizado; 5) nenhuma diferença no reconhecimento de novos objetos assim como ausência de alterações nos níveis de neurotransmissores no hipocampo comparado ao grupo controle. Esses dados sugerem que infecções maternas podem interferir no ambiente intra-uterino e desta forma interferir no desenvolvimento e na atividade do SNC da ninhada em longo prazo / The lipopolysaccharide (LPS) is an endotoxin of gram-negative bacteria used experimentally to stimulate inflammatory processes and activate the immune system through the release of pro-inflammatory cytokines in the central nervous system (CNS). The experimental administration of the LPS in pregnant rats results in changes that can be viewed both in animals subjected to the treatment and the offspring of these females. The aim of this study was to verify the changes related to learning and memory in male offspring of rats submitted to LPS during gestation. It was administered LPS (100mg/kg) in 9,5th day of pregnant of Wistar rats. This work has investigates the effects of this administration in recognition of animals using the olfaction in childhood and adulthood as well as levels of neurotransmitters in the olfactory bulb. The general activity of the animals was analyzed in the open field task and also the behavior in the elevated pluz maze. The learning process of the animals was observed in the Skinner box and also studied animal objects recognition. The levels of neurotransmitters of hippocampus were also analyzed. The results showed that the administration of LPS on 9,5 gestation day caused: (1) decrease of the smell recognition in childhood and do not remains in adulthood; (2) decrease in levels of dopamine in the olfactory bulb of the animals treated; (3) not interfered in general activity of animals when compared with the control group; (4) there was no difference in the acquisition of learning but presented decrease in time reversal of learning; (5) did not make differences in recognition of the new objects as well as not submitted changes in levels of neurotransmitters in hippocampus compared to the group control. These data suggest that maternal infection can interfere in the intrauterine environment and thus interfere with development and activity of the SNC

A esquistossomose, causada pelo helminto do gênero Schistosoma, é uma doença negligenciada no mundo e apresenta alta prevalência por estar associada principalmente com saneamento básico e educação sanitária insuficientes. A doença desenvolve formas clínicas no seu hospedeiro vertebrado, inicia-se com uma fase aguda e posterior desenvolvimento da fase crônica. A fase crônica da doença acarreta maiores prejuízos, um deles é o desenvolvimento de lesões no fígado, baço, intestino e pulmões. A hipertensão portal causada pela doença permite a migração de ovos aos pulmões, onde inicia-se uma resposta inflamatória granulomatosa. A migração de ovos pelos órgãos pode favorecer o deslocamento conjunto de bactérias em uma infecção natural. Para o estudo da ação das bactérias no organismo é comum a utilização de endotoxina da parede de bactérias Gram-negativas, denominada lipopolissacarídio (LPS). Neste trabalho, avaliamos o processo inflamatório pulmonar estimulado com LPS em animais infectados com Schistosoma mansoni em fase crônica. Os grupos de estudo foram divididos em Controle/Salina (dividido nos períodos de 6h (n=6) e 24h (n=6)), Schisto (com 120 dias de infecção (n=6)), LPS (dividido nos períodos de 6h (n=6) e 24h (n=6)) e LPS/Schisto (dividido nos períodos de 6h (n=6) e 24h (n=6)). Observamos o aumento de células polimorfonucleares (PMNs) nas primeiras 6 horas após a inoculação de LPS, no grupo LPS (p<0,001) em relação aos demais grupos; e o aumento (p<0,001) de PMNs no grupo LPS/Schisto em relação aos grupos Controle/Salina e Schisto. Após 24 horas da inoculação de LPS, o processo inflamatório modificou-se com o aumento de células mononuclerares (MNs), exceto no grupo Controle/Salina (p<0,001). O número de PMNs permaneceu aumentado no grupo LPS/Schisto em relação ao grupo Controle/Salina (p<0,001) e ao grupo Schisto (p<0,05). A dosagem da concentração de óxido nítrico aumentou no grupo LPS (p<0,001) em relação aos demais grupos, e no grupo LPS/Schisto (p<0,001) em relação aos grupos Controle/Salina e Schisto em 6 horas após a inoculação do LPS. Os granulomas pulmonares não sofreram alteração significativa no tamanho entre os grupos Schisto e LPS/Schisto. Sugerimos com este trabalho que a esquistossomose em fase crônica pode causar a imunossupressão de uma infecção bacteriana Gram-negativa concomitante. / Schistosomiasis, caused by helminth of the genus Schistosoma, is neglected disease in the world and has a high prevalence to be associated with areas where sanitation and hygiene education are insufficient. The disease develop clinical forms in their host vertebrate begins in an acute phase and subsequent development of chronic phase. The chronic phase of the disease causes major damage one of them is the development of lesions in the liver, spleen, intestines and lungs. The portal hypertension caused by disease allows the migration of eggs to the lungs here start a granulomatous inflammatory response. The migration of eggs may favor the displacement set of bacterial infection in a nature. To study the action of bacteria in the organs is common to use the endotoxin wall of Gram-negative bacteria the lipopolysaccharide (LPS). In this study, we evaluated the process pulmonary inflammatory stimulated with LPS in animals infected with Schistosoma mansoni chronic phase. The study groups were divided into Controle/Salina (divided into group Controle/Salalina 6 h (n = 6) and 24 h (n = 6)), Schisto (120 days of infection ( n = 6)), LPS (divided into group 6 h (n = 6) and 24 (n = 6)) and LPS / Schisto(divided in groups 6 h (n = 6) and 24 h (n = 6)). Observed an increase in polymorphonuclear cells (PMNs) in the first 6 hours after inoculation of LPS in group LPS (p<0,001) in relation to the other groups, and the increase (p<0,001) of PMNs in group LPS/Schisto than in groups Controle/Salina and Schisto. After 24 hours inoculation of LPS the process change inflammatory modified with increased cells mononuclerares (MNs) in groups, except in group Controle/Salina(p<0,001). The number of PMNs remained increased in group LPS/Schisto when compared to group Controle/Salina (p< 0,001) and group Schisto (p<0,05). The dosage of nitric oxide concentration increased in group LPS (p<0,001) in relation to the other groups, and group LPS/Schisto (p<0,001) in relation to groups Controle/Salina and Schisto in 6 hours after the LPS inoculation. The pulmonary granulomas did not change significantly in size between groups Schisto and LPS/Schisto This work suggest that schistosomiasis in chronic phase may cause immunosuppression of a Gram- negative bacterial infection concomitant. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES