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C?lulas da resposta imune em mulheres portadoras de candid?ase vulvovaginalQueiroz Filho, Jos? 26 April 2006 (has links)
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Previous issue date: 2006-04-26 / A candid?ase vulvovaginal (CVV) ? uma das infec??es mais comuns na pr?tica cl?nica de um ginecologista, e o controle dessa patologia ? realizado por v?rios mecanismos de defesa, onde a resposta imune celular parece ser fundamental. Com a finalidade de investigar a resposta imune celular em mulheres com e sem CVV, foram avaliadas c?lulas do sangue perif?rico da mucosa vaginal, concentra??es de IgE s?rica total e espec?fica para Candida albicans de 60 mulheres sendo 40 com CVV e 20 como grupo controle, na faixa et?ria de 10 aos 60 anos atendidas no servi?o de ginecologia do complexo de sa?de HAPVIDA em Natal (RN) no per?odo de janeiro a mar?o de 2006. As coletas de sangue perif?rico foram realizadas por pun??o venosa e a contagem celular de cada paciente foi realizada por automa??o e contagem manual em esfrega?os sanguineos corados por Giemsa. A quantifica??o de linf?citos TCD4+ e TCD8+ foi realizada por citometria de fluxo e os esfrega?os vaginais foram preparados com raspado da parede vaginal lateral, as l?minas foram fixadas imediatamente em ?lcool absoluto e coradas posteriormente com hematoxilina-eosina, foram analisados 10 campos microsc?picos por l?minas em objetivas 10X e 40X. As concentra??es de IgE total s?rica e espec?fica para Candida albicans foram obtidas por quimiluminesc?ncia e fluoroimunoensaio. No sangue perif?rico e no raspado vaginal estudou se as c?lulas tipo neutr?filos, linf?citos, eosin?filos e mon?citos . A an?lise estat?stica foi feita utilizando se o teste exato de Fisher e teste n?o param?trico de Kruskal-Wallis, Mann-Whitney e o teste de correla??o de Spermann. No grupo de mulheres com CVV a an?lise celular no sangue perif?rico houve predomin?ncia de eosin?filos (m?dia: 302,60) sendo esse achado significativo com p=0,037 em rela??o ao grupo controle. O estudo das c?lulas nos raspados vaginais demonstrou diferen?as significativas para neutr?filos (m?dia: 230.70) e linf?citos (m?dia: 11,50) com signific?ncia de P=0,0001. Com rela??o a quantifica??o de linf?citos TCD4+ e TCD8+ n?o houve significado estat?stico. As concentra??es de IgE total s?rica e espec?fica n?o apresentaram significado estat?stico e para ambos grupos os resultados encontrados foram semelhantes nas diferentes metodologias aplicadas. Ao correlacionar as concentra??es de IgE total s?rica (m?dia=308,83) com eosin?filos no sangue perif?rico de mulheres com CVV apresentou um ?ndice de correla??o de 0,25 considerado baixo. / Vulvovaginal candidiasis (VVC) is one of the most common infections in the clinical practice of a gynecologist. and control of this disease is carried out by various defense mechanisms, where the cellular immune response appears to be fundamental. In order to investigate the cellular immune response in women with and without CVV, Peripheral blood cells of vaginal mucosa were evaluated, the concentrations of total and specific IgE to Candida albicans, 60 women and 40 with VVC and 20 as a control group, aged 10 to 60 years years served in the gynecology service Hapvida health complex in Natal (RN) in the period January-March 2006. Peripheral blood samples were taken by venipuncture and cell count of each patient was performed by automation and manual counting in blood smears stained with Giemsa. Quantification of CD4 + and CD8 + lymphocytes was performed by flow cytometry Vaginal smears were prepared with shaved lateral vaginal wall, The slides were fixed immediately in absolute ethanol and then stained with hematoxylin-eosin, 10 were analyzed by microscopic fields blades eyepiece 10X and 40X objective. The serum IgE concentrations and total specific for Candida albicans, They were obtained by chemiluminescence and fluoroimmunoassay. In peripheral blood and vaginal shaved studied cell type cell neutrophils, lymphocytes, eosinophils and monocytes. Statistical analysis was performed using the Fisher exact test and nonparametric Kruskal-Wallis, Mann-Whitney and Spearman correlation test In the group of women with VVC cell analysis in peripheral blood eosinophil predominated, (average 302.60) and this significant finding with p = 0.037 in the control group. . The cell study the cells in vaginal scrapings showed significant differences in neutrophils neutrophils, (average 230.70) and lymphocytes (average 11.50) with significance of p = 0.0001. .With Respect to quantification of CD4 + T lymphocytes and CD8 + there was no statistical significance. IgE serum concentrations and specific overall did not show statistical significance and and both groups the results were similar in the different methodologies. By relating the total serum IgE concentrations (mean = 308.83), with eosinophils in the peripheral blood of women with VVC had a 0.25 considered low correlation index.
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Efeito do transplante de c?lulas tronco mesenquimais e de c?lulas lisadas da medula ?ssea em ratos submetidos ao modelo l?tio-pilocarpinaCamozzato, Tatiane 06 March 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-03-06 / A epilepsia atinge cerca de 1% da popula??o mundial, sendo que aproximadamente 30% desses pacientes n?o respondem ao tratamento medicamentoso. Por sua vez, as c?lulas tronco representam uma esperan?a de tratamento da epilepsia, porquanto t?m grande capacidade de prolifera??o, diferencia??o e regenera??o de tecidos, podendo restaurar circuitos neurais e restabelecer a excitabilidade neuronal fisiol?gica. O objetivo deste estudo foi verificar se as c?lulas tronco mesenquimais (CTM) ou se c?lulas lisadas (Lise Celular) obtidas da medula ?ssea apresentam potencial terap?utico no controle das crises epil?pticas e do dano neuronal progressivo induzido pela epilepsia experimental. Os animais foram injetados com l?tio-pilocarpina (127 mg/kg e 60 Mg/kg i.p., respectivamente) para indu??o de status epilepticus (SE). As crises comportamentais foram classificadas de acordo com a escala de Racine e a dura??o do SE foi controlada com diazepam (10 mg/kg, i.p., 90 minutos). Os animais controle receberam solu??o salina. Ap?s 22 dias, o total dos animais foi dividido em cinco grupos: PILO; PILO+CTM, PILO+Lise, Salina e Salina+CTM. Os grupos CTM receberam transplante de c?lulas tronco mesenquimais, obtidas da medula ?ssea de camundongos EGFP C57BL/6. O grupo PILO+Lise recebeu c?lulas tamb?m provenientes da medula ?ssea desses animais, mas que passaram previamente por um processo de lise celular. Os animais dos grupos Salina e PILO receberam solu??o salina. Todos os transplantes foram feitos via veia da cauda (104-6 c?lulas, 200μL). Os animais tratados com pilocarpina (PILO) foram monitorados por v?deo durante sete dias pr?-transplante, e outros catorze dias ap?s o procedimento, para observa??o e computa??o de crises espont?neas recorrentes (CERs). Ainda, 45 dias depois da inje??o das c?lulas os animais foram avaliados nas seguintes tarefas: labirinto aqu?tico de Morris (LAM), reconhecimento de objetos, campo aberto e labirinto em cruz elevado. Decorridos 24 horas, 07 dias, 14 dias, 21 dias, 60 dias e 135 dias do transplante os animais foram sacrificados, e foram coletados os hipocampos direito e esquerdo para an?lise da presen?a de EGFP por PCR. Para a avalia??o histol?gica, os animais foram sacrificados 04 meses ap?s o transplante, tendo sido analisados o volume hipocampal, o volume dos n?cleos CA1, CA2, CA3 e CA4, bem como a densidade e o n?mero total de c?lulas nestes n?cleos. Finalmente, as c?lulas provenientes da medula ?ssea de camundongos C57/BL6 antes e ap?s serem cultivadas foram avaliadas por citometria de fluxo. Nossos resultados demonstram que as c?lulas mesenquimais injetadas n?o reduzem as CERs. J? para os animais tratados com lisado celular, verificamos que h? redu??o na freq??ncia de crises. A administra??o de CTM aos animais tratados com PILO promoveu melhora cognitiva no paradigma do reconhecimento de objetos, sem, por?m, melhorar a performance destes animais no LAM. O tratamento com lisado celular, por sua vez, n?o levou a melhor desempenho em quaisquer dos paradigmas cognitivos citados acima. Por meio da an?lise histol?gica podemos observar que os animais tratados com l?tio-pilocarpina apresentavam contagem total de c?lulas, densidade e volume inferiores aos animais controle. Ainda, CTM ou Lise n?o produziram aumento significativo em nenhuma das vari?veis analisadas, com exce??o do volume hipocampal, que se apresentou maior nos grupos PILO+CTM no hemisf?rio direito e PILO+Lise em ambos os hemisf?rios. Por outro lado, a an?lise dos dados obtidos na citometria de fluxo revelou que as CTM s?o positivas para os seguintes marcadores de superf?cie CD45, CD19, CD34, CD117 e Sca-1. Finalmente, detectamos a presen?a de EGFP em amostras obtidas do hipocampo de animais transplantados com CTM, resultado que demonstra que as c?lulas administradas intravenosamente migram ao sistema nervoso central. Nos ?ltimos anos, estudos que buscam tratamentos baseados em c?lulas tronco para as mais diversas doen?as neurodegenerativas foram vistos com muito interesse. Este tipo de tratamento pode, no futuro, ser ?til tamb?m no tratamento da epilepsia cr?nica, embora ainda seja preciso estabelecer com mais clareza o tipo de c?lula tronco ideal.
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An?lise da imuno express?o das prote?nas IL-17, IL-23 E ROR?t na patogenia da doen?a periodontalAguiar J?nior, Jos? Nazareno Moreira de 24 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-24 / A doen?a periodontal ? uma condi??o inflamat?ria cr?nica de car?ter infeccioso causada
primariamente por bact?rias presentes em um biofilme dent?rio que interagem com o
hospedeiro, determinando, assim, a natureza da doen?a resultante. Apesar de j? se conhecer
muito sobre a patog?nese destas patologias, ainda n?o se sabe a composi??o exata do perfil de
c?lulas T durante a fase ativa da doen?a (Th1, Th2 ou Th17). Este trabalho visou avaliar,
atrav?s da express?o imuno-histoqu?mica, a presen?a dos marcadores (IL-17, IL-23 e ROR?t),
envolvidos na resposta Th 17 em casos de gengiva clinicamente saud?veis (n=32), gengivite
induzida pelo biofilme dental (n=30), periodontite cr?nica (n=32) e periodontite agressiva
(n=25), objetivando analisar se a express?o e/ou distribui??o destas mol?culas em linf?citos e
macr?fagos, presentes no infiltrado inflamat?rio dos tecidos periodontais, influencia na
destrui??o tecidual observada nestas doen?as. Foi realizada a an?lise morfol?gica dos casos,
onde avaliou-se a intensidade do infiltrado inflamat?rio em leve, moderado e intenso. Para
cada caso, nas ?reas mais imunomarcadas, 5 campos foram escolhidos e analisados, tanto em
rela??o a intensidade do infiltrado inflamat?rio quanto a quantidade de c?lulas
imunomarcadas, baseando-se em escores predeterminados: escore 0 (aus?ncia de infiltrado
inflamat?rio/imunomarca??o), escore 1 (o infiltrado/imunomarca??o abrangia menos de 25%
da ?rea do campo), escore 2 (o infiltrado/imunomarca??o ocupava entre 25 e 50%) e escore 3
(infiltrado/imunomarca??o presente em mais de 50% da ?rea do campo). A partir disto, gerouse
uma mediana que representava cada caso. A intensidade do infiltrado inflamat?rio foi
correlacionada com a progress?o da doen?a, se mostrando crescente da gengiva clinicamente
saud?vel at? a periodontite agressiva (p<0,001). Detectou-se a presen?a da IL-17, IL-23 e do
ROR?t na maioria dos casos avaliados e a quantidade de c?lulas imunomarcadas foi
correlacionada tanto com a intensidade do infiltrado inflamat?rio (P<0,001) quanto com os
par?metros cl?nicos analisados (P<0,001), apresentando uma correla??o positiva,
predominantemente moderada. A periodontite agressiva apresentou um maior percentual de
imunomarca??o em rela??o ?s outras condi??es cl?nicas avaliadas, para todos os marcadores,
sugerindo uma poss?vel associa??o destes marcadores com a progress?o desta doen?a, onde
quanto maior a perda de suporte periodontal, maior a quantidade do infiltrado inflamat?rio e
maior n?mero de c?lulas imunomarcadas. / Periodontal disease is a chronic inflammatory condition primarily caused by bacteria
in dental biofilm, which interact with the host, thus determining the nature of the resulting
disease. Despite the wide knowledge about the pathogenesis of these diseases, the exact
composition of the T cell profile during the active phase of the disease (Th1, Th2 or Th17)
remains unknown. This study aimed to evaluate by immunohistochemical expression, the
presence of the markers (IL-17, IL-23 and ROR?t), involved in Th17 response in clinically
healthy gingiva cases (n = 32), biofilm-induced gingivitis (n = 30), chronic periodontitis (n =
32) and aggressive periodontitis (n = 25), in order to analyze if the expression and/or
distribution of these molecules in lymphocytes and macrophages, present in the inflammatory
infiltrate of periodontal tissue, influences the tissue destruction observed in these diseases.
The morphological analysis of cases was performed which assessed the intensity of the
inflammatory infiltrate in mild, moderate and intense. For each case, in the area with the most
representative immunostaining, 5 fields were chosen and analyzed, both for the intensity of
the inflammatory infiltrate as for the quantity of immunostained cells, based on predetermined
scores: score 0 (absence of inflammatory infiltrate/immunostaining), score 1 (the
infiltrate/immunostaining covered less than 25% of the field area), score 2 (the
infiltrate/immunostaining occupied between 25 and 50%) and score 3
(infiltrate/immunostaining present in over 50% of the field area). From this, a median was
generated representing each case. The intensity of the inflammatory infiltrate correlated with
the disease progression, in other words, it was crescent from clinically healthy gingiva to
aggressive periodontitis (P <0.001). It was detected the presence of IL-17, IL-23 and ROR?t
in most of the evaluated cases and the number of immunostained cells correlated with the
intensity of the inflammatory infiltrate (P <0.001) and with the clinical parameters analyzed
(P <0.001), showing a positive correlation, mainly moderate. Aggressive periodontitis
showed a higher percentage of immunostaining for all markers in relation to other clinical
conditions assessed, suggesting a possible association of these markers with the progression
of this disease, in which the higher the loss of periodontal support, the greater the amount of
inflammatory infiltrate and larger the number of immunostained cells.
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Estudo da influ?ncia de linf?citos TCD-8 e das c?lulas NK em casos de carcinoma epiderm?ide de l?bio inferior sem met?stase e com met?stase e sua rela??o com a progress?o da les?oMaciel, Thais Aline Oliveira 26 February 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-02-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The presence of inflammatory cells within the tumor microenvironment plays a dual
role that may contribute both to the progression and for inhibition of tumor growth. Recent
studies suggest that the quality, not the quantity, of the inflammatory infiltrate is the most
important determinant for prognosis. Therefore, TCD8 cells and natural killer cells are the main
effector cells in combating cancer. The aim of this study was to assess, through the
immunohistochemical study, the expression of TCD8 lymphocytes and NK cells in epidermoid
carcinoma (EC) of the lower lip. The sample consisted of 32 specimens of EC of the lower lip,
of which 16 had regional lymph node metastasis, and the 16 remaining, free of metastases. The
total number of positive cells at the front of invasion were evaluated quantitatively and the
results were related to clinical TNM staging, histological grade of malignancy and prognostic
factors. It was observed for the group with metastasis, prevalence of stages III and IV
(p<0.0001). Most patients with metastasis, had a high grade of malignancy (p=0.006). Most
cases classified as high grade of malignancy had stages III and IV (p=0.032). Of the total
sample, there were three cases of recurrence and five with death, however these variables were
not statistically significant when associated with clinicopathological parameters. The
immunostaining of CD8 and CD57, respectively, showed no statistically significant association
with any of the clinicopathological parameters studied, metastasis (p=0.346, p=0.622), TNM
classification (p=0.146, p=0.576), histological grade of malignancy (p=0.936, p=936),
recurrence (p=0.075, p=0.075) and death (p=0.897, p=0.856). Believing in the function of the
immunological system against malignant cells, it is concluded that the TD8 lymphocytes and
NK cells, would be acting in the control of the progression of malignant neoplasms, but not in
isolated manner / A presen?a de c?lulas inflamat?rias dentro do microambiente tumoral exerce um papel
dual podendo contribuir tanto para a progress?o como para a inibi??o do crescimento do tumor.
Estudos recentes sugerem que a qualidade, e n?o a quantidade, do infiltrado inflamat?rio ? o
determinante mais importante para o progn?stico. Portanto, as c?lulas TCD8 e as c?lulas natural
killer (NK), s?o as principais c?lulas efetoras no combate do c?ncer. O objetivo desse trabalho
foi avaliar, atrav?s do estudo imunoistoqu?mico, a express?o dos linf?citos TCD8 e das c?lulas
NK em carcinoma epiderm?ide (CE) de l?bio inferior e sua rela??o com a progress?o da les?o.
A amostra foi composta por 32 esp?cimes de CE de l?bio inferior, dos quais 16 apresentavam
met?stase linfonodal regional, e os 16 restantes, livres de met?stase. O total de c?lulas positivas
no front de invas?o foram avaliados de forma quantitativa e os resultados obtidos foram
relacionados com estadiamento cl?nico TNM, grada??o histopatol?gica de malignidade e
fatores progn?sticos. Observou-se para o grupo com met?stases, preval?ncia dos est?gios III e
IV (p<0,0001). A maioria dos casos com met?stase, apresentava alto grau de malignidade
(p=0,006). A maioria dos casos classificados como de alto grau de malignidade apresentava
est?gios III e IV (p=0,032). Do total da amostra, houve tr?s casos com recidiva e cinco com
?bito, no entanto essas vari?veis n?o apresentaram diferen?a estatisticamente significativa
quando associadas a par?metros clinico-patol?gicos. A imunoexpress?o do CD8 e do CD57,
respectivamente, n?o apresentaram associa??o estatisticamente significativa com nenhum dos
par?metros cl?nico patol?gicos estudados, met?stases (p=0,346; p=0,622); estadiamento
cl?nico TNM (p=0,146; p=0,576) grada??o histopatol?gica de malignidade (p=0,936; p=936);
recidiva (p=0,075; p=0,075) e ?bito (p=0,897; p=0,856). Acreditando na fun??o que o sistema
imunol?gico possui frente a c?lulas malignas, conclui-se que os linf?citos TCD8 e as c?lulas
NK, estariam atuando no controle da progress?o de neoplasias malignas, mas n?o de forma
isolada
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An?lise comparativa da imunoexpress?o de GLUT-1, GLUT-3 e M-CSF em les?o perif?rica e central de c?lulas gigantesVasconcelos, Rodrigo Gadelha 18 December 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-12-18 / A les?o perif?rica de c?lulas gigantes (LPCG) e a les?o central de c?lulas gigantes (LCCG) s?o les?es histologicamente semelhantes que acometem a regi?o de cabe?a e pesco?o. O estudo teve a finalidade de analisar a express?o imuno-histoqu?mica atrav?s dos marcadores GLUT-1, GLUT-3 e M-CSF em uma s?rie de casos de les?o perif?rica e central de c?lulas gigantes, na tentativa de estabelecer poss?veis associa??es e correla??es entre a express?o destas prote?nas nessas les?es, buscando uma melhor compreens?o do diferente comportamento biol?gico dessas entidades patol?gicas. A amostra foi constitu?da por 20 esp?cimes teciduais emblocados em parafina de LPCG, 20 de LCCG n?o agressivo e 20 de LCCG agressivo, oriundos do Servi?o de Anatomia Patol?gica da Disciplina de Patologia Oral do Departamento de Odontologia da UFRN. Em rela??o ao GLUT-1, verificou-se uma diferen?a estatisticamente significante (p< 0,05) na quantidade de c?lulas mononucleares imunomarcadas entre a les?o perif?rica (LP) e a les?o central n?o agressiva (LCNA) e entre a LP e a les?o central agressiva (LCA). Em rela??o ? intensidade da marca??o tamb?m foi verificado uma diferen?a estatisticamente significante tanto para as c?lulas mononucleares quanto para as c?lulas gigantes entre LP e LCNA e entre LP e LCA, nas c?lulas gigantes tamb?m ocorreu uma diferen?a estatisticamente significante entre a LCNA e a LCA. Em rela??o ao GLUT-3, foi encontrada uma diferen?a estatisticamente significante entre LP e LCA e entre LCNA e LCA na quantidade de c?lulas mononucleares imunomarcadas. No que concerne ? intensidade de marca??o para a referida prote?na foi verificado uma diferen?a estatisticamente significante nas c?lulas gigantes entre LP e LCA. Para o M-CSF foi observado apenas uma diferen?a estatisticamente significante na intensidade de marca??o nas c?lulas mononucleares entre LP e LCNA e entre LP e LCA. Com base nestes resultados, pode-se concluir a participa??o do GLUT-1, GLUT-3 e do M-CSF na patog?nese das les?es estudadas. Os transportadores de glicose estariam envolvidos no fornecimento de energia, para o metabolismo energ?tico das c?lulas e a prote?na osteoclastog?nica estaria envolvida no mecanismo de reabsor??o ?ssea encontrada nessas les?es. / The
peripheral
giant cell lesion
(
PG
CL
)
and
the
central
giant cell lesion
(
CGC
L)
are
lesions
histologically
similar
affecting the
head and neck
region
.
The study
aimed to
analyze the
immunohistochemical expression
of
markers GLUT
-
1
,
GLUT
-
3
and
M
-
CSF
in a series of
cases of
PGCL
and
CGCL
,
in trying to understand
the different
biological
behavior
of these
pathologies
.
The
sample consisted of
20
tissue
specimens
of
PGCL 20
central lesion
of
not
aggressive
giant cell
(
CLNAGC)
and 20
central lesi
on
of aggressive
giant cell
(
CLAGC),
coming from the
Pathology Unit
of
Oral Pathology
of
the Department of
Dentistry
of UFRN
.
W
as performed the s
emi
-
quantitative
and
qualitative analysis of
immunohistochemical expression
of the markers in
giant cells
and
m
ononuclear cells
.
In relation to the
GLUT
-
1, it was found
a statistically
significant
difference (p
<
0.05)
in the number of
mononuclear
cells
immunomarked
between the
PGCL
and
the
CLNAGC
and between
the
PGCL
and
CLAGC
.
Regarding the
intensity
of
staining w
as
also observed
a statistically
significant difference
both
at the
mononuclear cells
as in
giant cells
between
PL
and
CLNAGC
and between
PGCL
and
CLAGC
,
at the
giant cells
there was also a
statistically
significant difference
between
the
CLNAGC
and
CLAGC
.
In relation to
GLUT
-
3
,
was found
a statistically
significant
difference
between
PGCL
and
CLAGC
and
between
CLAGC
and
CLNAGC
in
amount
of
mononuclear cells
immunomarked
.
Regarding the intensity of labeling for such
protein was found a statistically
signifi
cant difference at
the giant cells between PL and
CLAGC
.
To
the
M
-
CSF was observed only a statistically
significant difference in
the
intensity
of labeling at
the
mononuclear cells between
PGCL
and
CLNAGC
and
between
PGCL
and
CLAGC
.
Based on these results,
we can conclude the participation
of GLUT
-
1, GLUT
-
3 and M
-
CSF in the pathogenesis of the lesions studied.
The bigger
immunostaining of these proteins in mononuclear cells show that these cells
perform
a
higher metabolic activity and osteoclastogenic, espe
cially in
CLAGC
. It was found that
the mononuclear cells were more related to the pathogenesis of the studied
lesions
than
properly
the giant
s
cell
s.
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Reprograma??o de c?lulas-tronco mesenquimais em neur?nios utilizando genes pr?-neuraisAra?jo, J?ssica Alves de Medeiros 08 April 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-04-08 / A possibilidade de repor c?lulas perdidas em doen?as neurodegenerativas
atrav?s de transplantes com c?lulas-troncos das mais diversas fontes vem sendo
amplamente estudada. As c?lulas-tronco adultas (CTA) podem ser facilmente
isoladas e sua utiliza??o na pesquisa n?o envolve quest?es ?ticas e religiosas.
Al?m disso, estas c?lulas s?o menos prop?cias ? transforma??o tumoral do que
c?lulas-tronco embrion?rias, outra importante fonte de c?lulas para terapias
celulares. No entanto, as CTA s?o, em estados fisiol?gicos, restritas a gera??o
de c?lulas dos seus tecidos de origem, o que poderia limitar a sua utiliza??o.
Por?m, nos ?ltimos anos, uma s?rie de t?cnicas vem sendo descritas com o
objetivo de reverter tais limita??es. Neste trabalho, n?s investigamos a
capacidade das c?lulas-tronco mesenquimais adultas, isoladas de camundongos
ou do cord?o umbilical humano, serem induzidas a adquirir um fen?tipo neuronal
de forma direta, sem passar por um est?gio de c?lula progenitora ou pluripotente,
atrav?s da reprograma??o gen?tica com genes pr?-neurais. Nossos resultados
indicam que tanto c?lulas-tronco mesenquimais adultas murinas quanto
humanas podem ser reprogramadas em neur?nios ap?s a express?o combinada
de Sox2 e Ascl1 ou Sox2 e Neurog2. As c?lulas reprogramadas exibem
morfologias compat?veis com o fen?tipo neuronal, expressam prote?nas t?picas
de neur?nios maduros, apresentam a capacidade de gerar potenciais de a??o
repetitivos e formam conex?es sin?pticas com outros neur?nios presentes no
cultivo. Portanto, nosso trabalho apresenta a primeira evid?ncia de
reprograma??o direta de c?lulas-tronco mesenquimais humanas em neur?nios
funcionais.
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A influ?ncia da criopreserva??o nas c?lulas mesenquimais indiferenciadas do ligamento periodontal de humanos an?lise comparativa in vitroVasconcelos, Rodrigo Gadelha 04 February 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-02-04 / Cryopreservation is a process where cells or biological tissues are preserved by freezing at very low temperatures and aims to cease reversibly, in a controlled manner, all the biological functions of living tissues, i.e., maintain cell preservation so that it can recover with high degree of viability and functional integrity. This study aimed to evaluate the influence of cryopreservation on the mesenchymal stem cells originating from the periodontal ligament of human third molars by in vitro experiments. Six healthy teeth were removed and the periodontal cells grown in culture medium containing α-MEM supplemented with antibiotics and 15% FBS in a humidified atmosphere with 5% CO2 at 37? C. Cells isolated from each sample were divided into two groups: Group I - immediate cell culture (not fresh cryopreserved cells) and Group II - cell cryopreservation, during a period of 30 days. Analyses of rates of cell adhesion and proliferation in different groups were performed by counting the cells adhered to the wells, in intervals of 24, 48 and 72 hours after the start of cultivation. The number of cells in each well was obtained by counting viable cells with the use of hemocytometer and the method of exclusion of cells stained by trypan blue. The difference between groups for each of the times was analyzed by Wilcoxon test. Regarding the temporal evolution for each group, analysis was done by Friedman's test to verify the existence of differences between times and, when it existed, the Wilcoxon penalty was applied. The results showed no statistically significant difference between the two groups analyzed in this study. Therefore, we conclude that the cryopreservation process, after a period of 30 days, did not influence the cell type studied, and there was no difference in growth capacity in vitro between the groups / A criopreserva??o ? um processo em que c?lulas ou tecidos biol?gicos s?o preservados atrav?s do congelamento a temperaturas muito baixas e objetiva cessar reversivelmente, de forma controlada, todas as fun??es biol?gicas dos tecidos vivos; ou seja, manter a preserva??o celular de maneira que esta possa recuperar-se com alto grau de viabilidade e integridade funcional. Este trabalho se prop?s avaliar in vitro a influ?ncia da criopreserva??o nas c?lulas mesenquimais indiferenciadas procedentes do ligamento periodontal de terceiros molares humanos. Para tanto, foram utilizados 6 dentes sadios os quais tiveram as referidas c?lulas removidas e cultivadas em meio de cultura α-MEM contendo antibi?ticos e suplementado com 15% de FBS, em atmosfera ?mida com 5% de CO2 a 37? C. As c?lulas isoladas de cada amostra foram divididas em dois grupos: Grupo I cultivo celular imediato (c?lulas frescas n?o criopreservadas) e Grupo II criopreserva??o celular, durante um per?odo de 30 dias. As an?lises dos ?ndices de ades?o e prolifera??o celular nos diferentes grupos foram realizadas atrav?s das contagens das c?lulas aderidas ?s superf?cies dos po?os de cultivo celular, nos intervalos de 24, 48 e 72 horas ap?s o in?cio do cultivo. O n?mero de c?lulas em cada po?o foi obtido pela contagem das c?lulas vi?veis atrav?s do uso do hemocit?metro e o m?todo de exclus?o das c?lulas coradas pelo azul de trypan. A diferen?a entre os grupos para cada um dos tempos foi analisada pelo teste de Wilcoxon. Em rela??o ? evolu??o temporal para cada um dos grupos, a an?lise foi feita pelo teste de Friedman para verificar a exist?ncia de diferen?a entre os tempos e, quando ela existiu, foi aplicado o teste de Wilcoxon com penaliza??o. Os resultados demonstraram que n?o houve diferen?a estatisticamente significativa entre os dois grupos analisados neste estudo. Portanto, conclui-se que o processo de criopreserva??o, ap?s um per?odo de 30 dias, n?o exerceu influ?ncia no tipo celular estudado; n?o havendo, portanto, nenhuma diferen?a na capacidade de crescimento in vitro entre os grupos
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Avaliacao de polimorfismos nos genes XPD e XRCC3 em carcinomas orais de celulas escamosasPereira, Joabe dos Santos 16 September 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-09-16 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is an important cause of morbidity and mortality worldwide despite recent advances in treatment. There are several studies aiming to find markers that may improve the assessment of this disease prognosis. Studies about genetic polymorphisms have gained prominence due to their influence on individual susceptibility to cancer development. The aim of this study was to evaluate the association between the frequency of polymorphisms XPD Lys751Gln and XRCC3 Thr241Met and clinicopathological features of OSCC cases, including age, sex, presence or absence of metastases, and histological grading of malignancy according to Bryne (1998). Sample consisted of 54 cases of OSCC and 40 cases of inflammatory fibrous hyperplasia (IFH). OSCC cases were classified as low or high grade. DNA samples were previously extracted from paraffin blocks. Genotypes for each case were determined through PCR-RFLP (polymerase chain reaction - restriction fragment length polymorphism). Results were analyzed by Fisher s exact test and Chi-square test and the odds ratio was calculated considering p < 0.05 to indicate statistical significance. For XPD, Lys/Gln genotype was more common in IFHs (n=28; 70%) than in OSCCs (n=24; 44.4%) (OR: 0.3; p<0.05). Frequency of Gln allele was higher in high-grade lesions when compared to low grade lesions (0.48 and 0.21, respectively) (OR: 3.4; p<0.05). For XRCC3, Met allele was more common in OSCC than in IFH (0.49 and 0.35, respectively) (OR: 2.6; p<0.05). Met/Met genotype was associated with presence of metastases (OR: 8.1; p<0.05). There was no statistically significant association between the genotypes and the age or sex of patients. In the present sample, the higher frequency of XPD Gln allele in IFH reveals a possible protective role of this variant against the development of OSCC. However, its association with high-grade lesions indicates that this allele could influence the tumor progression after the neoplasia development. The presence of XRCC3 Met allele, in turn, seems to contribute to the development of OSCC and metastases / O carcinoma oral de c?lulas escamosas (COCE) ? importante causa de morbidade e mortalidade em todo o mundo a despeito dos recentes avan?os nas formas de tratamento. Diante disto, v?rias s?o as pesquisas no intuito de se encontrar marcadores que possam melhorar o progn?stico desta doen?a. Neste sentido t?m se destacado os estudos dos polimorfismos gen?ticos, os quais podem influenciar a suscetibilidade individual para o desenvolvimento do c?ncer. O objetivo deste estudo foi avaliar a associa??o entre a frequ?ncia dos polimorfismos XPD Lys751Gln e XRCC3 Thr241Met e o perfil clinicopatol?gico em casos de COCE, incluindo idade, sexo, presen?a ou n?o de met?stase e grada??o histol?gica de malignidade de Bryne (1998). A amostra foi composta por 54 casos de COCE e 40 casos de hiperplasia fibrosa inflamat?ria (HFI). Os casos de COCE foram classificados como les?es de baixo ou de alto grau de malignidade. Foram utilizadas amostras de DNA previamente extra?do de blocos de parafina. Os gen?tipos para cada caso foram determinados atrav?s da t?cnica de PCR-RFLP (rea??o em cadeia da polimerase - polimorfismos de comprimento de fragmentos de restri??o). Os resultados foram submetidos aos testes estat?sticos Exato de Fisher e Qui-quadrado de Pearson e foi calculada a raz?o de chance (odds ratio) considerando o n?vel de signific?ncia quando p<0,05. Para o XPD, o gen?tipo Lys/Gln foi mais comum nas HFIs (n=28; 70%) que nos COCEs (n=24; 44,4%) (OR: 0,3; p<0,05). A frequ?ncia do alelo Gln foi maior nas les?es de alto grau, em compara??o ?s de baixo grau (0,48 e 0,21, respectivamente) (OR: 3,4; p<0,05). Para o XRCC3, o alelo Met foi mais frequente no COCE que na HFI (0,49 e 0,35, respectivamente) (OR: 2,6; p<0,05). O gen?tipo Met/Met foi associado ? presen?a de met?stases (OR: 8,1; p<0,05). N?o houve associa??o estat?stica significativa entre os gen?tipos e a idade ou sexo dos pacientes. Na amostra analisada, a maior frequ?ncia do alelo XPD Gln na HIF revela um poss?vel papel protetor dessa variante contra o desenvolvimento do COCE. Todavia, sua associa??o com les?es de alto grau, indica que esse alelo poderia influenciar no processo de progress?o ap?s o tumor instalado. A presen?a do alelo XRCC3 Met, por sua vez, parece contribuir com o desenvolvimento do COCE e de met?stases nessas les?es
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Soy loco por ti, América: a integração regional como prioridade da política extrema brasileira na era Lula (2003-2010) / Soy loco por ti, América: regional integration as a priority of Lulas foreign policy (2003-2010)Prado, Lidia Domingues Peixoto 17 May 2012 (has links)
A presente tese tem como objetivo analisar a política externa brasileira para a América do Sul durante os governos Lula (2003-2010), a fim de entender porque a integração regional foi a prioridade da política externa brasileira durante esse período. Nesse sentido, a hipótese a ser avaliada é que a atuação diplomática pragmática na América do Sul tem como objetivo a legitimação da posição de líder regional do Brasil, o que garantiria ao país a proeminência no cenário global, que corresponderia, por sua vez, ao percurso mais favorável para angariar uma posição de destaque no sistema internacional vigente. Para tanto, o trabalho contará com três momentos: a revisão histórica do tema (a integração regional como prioridade da política externa brasileira); a análise da atuação brasileira para a América do Sul durante os governos Lula; e a comprovação teórica da hipótese a partir de uma modelagem que categoriza o Brasil como um país intermediário. / This thesis aims to analyze the Brazilian foreign policy for South America during the Lula government (2003-2010) in order to understand why regional integration is the priority of Brazilian foreign policy during this period. The hypothesis being evaluated is that this pragmatic diplomatic performance in South America aims to legitimize the position of regional leader from Brazil, which would guarantee the countrys prominence in the global scenario, generating a shortcut to have a more favorable position in the international system. The document will have three stages: the historical review of the subject (regional integration as a priority to Brazilian foreign policy); the Brazilian performance analysis for South America during the Lula government; and the theoretical proof of the hypothesis suggested using a modeling that classifies Brazil as a middle power.
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Aplica??o da terapia celular em modelo experimental de enfisema pulmonarFreitas, Paula M?ssnich de 24 March 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-03-24 / A doen?a pulmonar obstrutiva cr?nica (DPOC) ? uma importante causa de mortalidade em todo mundo. No Brasil, a cada ano, s?o hospitalizados 280 mil pacientes com DPOC. Como o pulm?o adulto n?o pode ter um crescimento espont?neo ou regenerar-se, o enfisema pulmonar ? considerado uma doen?a progressiva e irrevers?vel. O objetivo principal deste trabalho foi avaliar o efeito do transplante de c?lulas mononucleares de medula ?ssea na regenera??o do tecido pulmonar enfisematoso de animais experimentais. O modelo experimental de enfisema pulmonar foi induzido em camundongos atrav?s de instila??o intranasal de 3,5 mL/kg de papa?na em solu??o de NaCl2 a 0,9%. Os animais foram divididos em dois grupos, sendo um controle (n=8) que recebeu somente soro, e o grupo experimental (n=8), cujos animais receberam 1x107 c?lulas de medula ?ssea EGFP+ atrav?s da veia caudal. Os animais foram sacrificados 45 dias ap?s o transplante e os pulm?es foram removidos e perfundidos com formol tamponado a 10%. Os fragmentos pulmonares foram inclu?dos em parafina para obten??o de cortes seriados de 3 Om. As l?minas foram coradas com Hematoxilina-eosina para avaliar a morfologia pulmonar e com Azul de Evans 0,1% e DAPI para a confirma??o da presen?a de c?lulas EGFP+ no epit?lio pulmonar. As an?lises demonstraram a presen?a de c?lulas alveolares EGFP+ sugerindo que as c?lulas de medula ?ssea dos animais doadores est?o envolvidas no processo de reparo do tecido pulmonar.
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