Rhiphicephalus microplus is one of the main ectoparasites of cattle in regions of tropical and subtropical climate. The economic losses caused by this parasite are related to treatment costs, decreased productivity and disease transmission. Currently the use of chemical products is still the most common form of control of the cattle tick, however, its use in an inadequate and suppressive way, has been causing the development of resistance to different classes of commercially available acaricides. Thus, the control of this parasite has been characterized by presenting a great challenge for technicians and producers. An alternative to tick control is the association of two different pharmacological bases, and currently this form of presentation is widely found commercially. The objective of this work is to describe the evaluation of the effectiveness of organophosphates and synthetic pyrethroids based on different combinations of R. microplus in the state of Rio Grande do Sul, Brazil. For this, 54 samples of cattle farms were collected, located in different municipalities of the state of Rio Grande do Sul. The evaluation of the in vitro efficacy of the acaricides tested was performed through the adult immersion test (AIT). In order to carry out the tests, four commercially available products were chosen: Ectoparasiticide A - 15% cypermethrin + 25% chlorpyrifos + 1% citronellal - (Colosso®, Ouro Fino Animal Health), Ectoparasiticide B - 15% cypermethrin + 30% chlorpyrifos + 15% fenthion - (Colosso FC30®, Ouro Fino Animal Health), Ectoparasiticide C - 50% chlorpyriphos + 6% cypermethrin high-cis - (Flytion®, Clarion Biosciences Ltda.) and Ectoparasiticide D - 16% ethion + 8.5% chlorpyriphos + 5% alpha-cypermethrin - (Potenty®, MSD Animal Health). The cypermethrin/ chlorpyrifos/ fenthion combination showed the best results, with an average efficiency greater than 95%, being effective in 94.44% (51/54) of the tested farms. The product containing the cypermethrin / chlorpyrifos / citronellal combination had a lower mean efficacy (62.11%), being effective in only 29.62% (16/54) of the properties tested. R. microplus presents different degrees of resistance to the association of organophosphates and synthetic pyrethroids, and multiple resistance was observed in most of the populations studied. Only the cypermethrin/ chlorpyrifos/ fenthion combination showed acceptable mean levels of efficacy in the tick populations studied. In this way, it is essential to establish a frequent monitoring of the effectiveness of the carrapaticides used, in order to prolong their useful life, contributing to their rational use for tick control in cattle. / Rhiphicephalus microplus é um dos principais ectoparasitas de bovinos em regiões de clima tropical e subtropical. As perdas econômicas que este parasita causa, estão relacionadas aos custos com tratamento, diminuição da produtividade e transmissão de doenças. Atualmente o uso de produtos químicos ainda é a forma mais comum de controle do carrapato bovino, no entanto, seu uso de maneira inadequada e supressiva, vem causando o desenvolvimento de resistência às diferentes classes de acaricidas disponíveis comercialmente. Assim, o controle deste parasita tem se caraterizado por apresentar um grande desafio para técnicos e produtores. Uma alternativa ao controle do carrapato é a associação de duas bases farmacológicas diferentes, sendo que atualmente esta forma de apresentação é amplamente encontrada a nível comercial. O objetivo deste trabalho é descrever a avaliação da eficácia de associações carrapaticidas, a base de organofosforados e piretroides sintéticos, em diferentes populações de R. microplus no estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Para isto, foram coletadas amostras de carrapatos de 54 propriedades, localizadas em diferentes municípios do estado do Rio Grande do Sul. A avaliação da eficácia in vitro dos acaricidas testados foi realizada através do teste de imersão de teleóginas (bicarrapaticidograma). Para a realização dos testes, foram escolhidos quatro produtos comercialmente disponíveis, sendo eles denominados: Produto A - 15% cipermetrina + 25% cloripirifós + 1% citronelol - (Colosso®, Ouro Fino Saúde Animal), Produto B - 15% cipermetrina + 30% cloripirifós + 15% fenthion - (Colosso FC30®, Ouro Fino Saúde Animal), Produto C - 50% cloripirifós + 6% cipermetrina high-cis - (Flytion®, Clarion Biosciences Ltda.), Produto D - 16% ethion + 8.5% cloripirifós + 5% alfa-cipermetrina - (Potenty®, MSD Saúde Animal). A associação de cipermetrina/clorpirifós/fenthion, apresentou os melhores resultados, com eficácia média superior a 95%, sendo eficaz em 94,44% (51/54) das propriedades testadas. O produto contendo a associação de cipermetrina/clorpirifós/citronelal, apresentou menor eficácia média (62,11%), sendo eficaz em apenas 29,62% (16/54) das propriedades testadas. R. microplus, apresenta diferentes graus de resistência à associação de organofosforados e piretroides sintéticos, sendo observado resistência múltipla em boa parte das populações estudadas. Apenas a combinação de cipermetrina/clorpirifos/fenthion apresentou níveis médios aceitáveis de eficácia nas populações de carrapato estudadas. Desta maneira, é fundamental estabelecer um monitoramento frequente da eficácia dos carrapaticidas utilizados, a fim de prolongar sua vida útil, contribuindo para o seu uso racional para o controle do carrapato em bovinos.

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:31:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 kizzyMFMC_DISSERT.pdf: 774522 bytes, checksum: da3661ec2a393e4af5e31278032e04d2 (MD5) Previous issue date: 2011-09-08 / Despite its known resistance, the sheep are subject to endoparasitoses, which are the main limiting factor for its production worldwide, especially in tropical regions. This study aims to evaluate the changes in parasitic load, serum biochemical and hematological panel, and Famacha scores of mixed-bred sheep naturally infected with nematodes and treated with ivermectin and closantel. The study was conducted at July 2010, in a farm in the municipality of Mossoró, Rio Grande do Norte state, Brazil. We selected 41 animals were divided into three groups: group I- control (without treatment), group II- treated with ivermectin (0.2 mg/kg), and Group III- treated with closantel (5 mg/kg). Stool samples were collected on days 0, 7, 14 and 21 after treatment for quantitative analysis (EPG) and qualitative analysis (stool culture), we used samples from days 0, 14 and 21. The first blood sample was given on day 0, the second and third 24 and 72 hours after the first, respectively the fourth and fifth 7 and 14 days after the first of which analyzed the blood count, serum total protein, albumin and globulins, and albumin/globulins ratio. Famacha scores were determined the degree of each animal at all times of sampling. Closantel administration was effective for the reduction of parasite counts, especially Haemonchus contortus, in evaluated sheep. On the other hand, there was parasite resistance to ivermectin. Famacha data showed negative correlation with packed cell volume, leukocytes, hemoglobin, albumin, total protein, globulin and albumin/globulin ratio. The packed cell volume showed a strong and positive correlation with hemoglobin, albumin and total protein. Treatment with ivermectin and closantel were not responsible for considerable changes in hematological and biochemical parameters evaluated. / Apesar de sua conhecida resistência, os ovinos estão sujeitos as endoparasitoses, sendo este o principal fator limitante para a sua produção em todo o mundo, especialmente em regiões tropicais. Este trabalho objetiva avaliar a carga parasitária, o perfil hematológico e bioquímico sérico, e o grau Famacha de ovinos sem padrão racial definido infectados e tratados com ivermectina e closantel. O trabalho foi realizado no mês de julho de 2010, numa propriedade rural no município de Mossoró-RN. Foram selecionados 41 animais, os quais foram divididos em três grupos: grupo I- controle (sem tratamento), grupo II- tratado com ivermectina (0,2 mg/kg) e Grupo III- tratado com closantel (5 mg/kg). As amostras de fezes foram coletadas nos dias 0, 7, 14 e 21, pós-tratamento para análise quantitativa (OPG) e para análise qualitativa (coprocultura), foram utilizadas amostras nos dias 0, 14 e 21. A primeira coleta de sangue se deu no dia 0, a segunda e a terceira 24 e 72 horas após a primeira, respectivamente, a quarta e a quinta 7 e 14 dias após a primeira, dos quais foram analisados o hemograma, os níveis séricos de proteínas totais, albumina e globulinas, e a relação albumina/globulinas. Foi determinado o grau de anemia pelo método Famacha de cada animal em todos os momentos de coleta de amostras. O tratamento com closantel foi eficaz na redução da carga parasitária, principalmente Haemonchus contortus, nos ovinos avaliados. Por outro lado, houve resistência dos parasitas à ivermectina. Os dados de Famacha apresentaram correlação negativa com volume globular, leucócitos, hemoglobina, albumina, proteínas totais, globulinas e relação albumina/globulinas. O volume globular apresentou uma correlação forte e positiva com hemoglobina, albumina e proteínas totais. Os tratamentos com closantel e ivermectina não foram responsáveis por alterações consideráveis nos parâmetros hematológicos e bioquímicos avaliados.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2016-06-21T17:33:38Z No. of bitstreams: 1 Naiara Carvalho Teixeira Bagues Contribuição para o ... 2016.pdf: 2270065 bytes, checksum: ee36fb7fb8ecab2b0af558caddf66435 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2016-06-21T17:33:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Naiara Carvalho Teixeira Bagues Contribuição para o ... 2016.pdf: 2270065 bytes, checksum: ee36fb7fb8ecab2b0af558caddf66435 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-21T17:33:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Naiara Carvalho Teixeira Bagues Contribuição para o ... 2016.pdf: 2270065 bytes, checksum: ee36fb7fb8ecab2b0af558caddf66435 (MD5) Previous issue date: 2016 / Made available in DSpace on 2016-07-22T13:19:17Z (GMT). No. of bitstreams: 3 Naiara Carvalho Teixeira Bagues Contribuicao para o 2016.pdf.txt: 243367 bytes, checksum: 9df9a4fb8bc7a3cd21d749f05648f537 (MD5) Naiara Carvalho Teixeira Bagues Contribuicao para o 2016.pdf: 2270065 bytes, checksum: ee36fb7fb8ecab2b0af558caddf66435 (MD5) license.txt: 2991 bytes, checksum: 5a560609d32a3863062d77ff32785d58 (MD5) Previous issue date: 2016 / Fundação Gonçalo Moniz, Instituto de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / INTRODUÇÃO: A Leishmaniose visceral (LV) é uma doença infecciosa e parasitária que se encontra em expansão no Brasil. A espécie que causa a doença no Brasil é a Leishmania infantum. O cão é o principal reservatório do parasita. Uma vacina contra leishmaniose visceral canina (LVC) pode favorecer o controle da doença. Este trabalho tem como objetivo contribuir para o desenvolvimento de uma vacina contra LVC. OBJETIVO: O estudo do primeiro capítulo visou o desenvolvimento de um modelo para a avaliação de antígenos candidatos à vacina contra LVC. METODOLOGIA: Um experimento foi realizado para obtenção de cães resistentes a LVC. Os linfócitos dos animais deveriam ser capazes de reconhecer antígenos potencialmente úteis para o desenvolvimento de uma vacina. Para isso, uma cepa de L.infantum foi isolada de cão naturalmente infectado e doente (Camaçari, Bahia). Seis cães adultos e sadios foram inoculados com 1x108 formas promastigotas em fase estacionária de cultura por via dérmica e acompanhados por dois anos. RESULTADOS: Os animais apresentaram: 1) área de induração e ulceração rasa no local da inoculação do parasita com cura espontânea em um período inferior a três meses, 2) ausência de manifestações clínicas e de alterações hematológicas e bioquímicas séricas, 3) produção baixa e flutuante de anticorpos da classe IgG reativos a antígenos de Leishmania, 4) resposta linfoproliferativa (em 4 de 6 cães) frente a estimulação com antígenos de Leishmania, 5) produção baixa de IFN-γ em um ensaio realizado com sangue total incubado por 24h com antígenos de Leishmania (4 de 5 cães), 6) carga parasitária baixa em aspirado de baço, detectada por PCR em tempo real. CONCLUSÃO: Os animais desenvolveram uma forma subclínica da infecção ao lado de resposta imune humoral e celular fracas. OBJETIVO: No segundo capítulo foi testado um ensaio de avaliação da produção de citocinas por células de sangue de cães naturalmente infectados por Leishmania infantum. O quantiFERON modificado permite a avaliação in vitro e de maneira rápida da produção de citocinas contra Leishmania em animais de área endêmica. METODOLOGIA: Antígeno solúvel e antígenos recombinantes de L. infantum (rLci2-NT-5R-CT e rLci2-NT-CT) foram produzidos e utilizados no ensaio para a estimulação do sangue total de27 cães de área endêmica e não endêmica para LVC por 24h. O plasma foi coletado e a produção das citocinas caninas IFN-γ, IL-2, IL-6, IL-10 e TNF-α foram quantificadas. RESULTADO: Devido a problemas técnicos não foi possível avaliar os dados obtidos e, consequentemente, não foi possível caracterizar grupos de animais susceptíveis e resistentes. OBJETIVO: No terceiro capítulo, a carga parasitária e aspectos histológicos em diferentes regiões do baço de cães com LVC foi analisada. METODOLOGIA: A carga parasitária e alterações histológicas no baço de 6 cães com LVC foram avaliados por amostragem de três secções inferior, média e superior do órgão. RESULTADO: Observou-se uma variação na distribuição na carga parasitária do baço do mesmo animal. Avaliações histológicas (desorganização polpa branca, granulomas, periesplenite, células plasmáticas, e infiltração polimorfonuclear) mostraram uma variação na freqüência (granulomas) ou intensidade (perisplenite) no baço de 2 dos 6 cães. CONCLUSÃO: Conclui-se que a distribuição da carga parasitária e as alterações histológicas no baço de cães com LV mostram um certo grau de heterogeneidade. / INTRODUCTION: Visceral Leishmaniasis (VL) is an infectious parasitic disease which is increasing in Brazil. The species that causes the disease in Brazil is Leishmaniainfantum. The dog is the main reservoir of the parasite. A canine visceral leishmaniasis vaccine (CVL) may favor the control of the disease. This paper aims to contribute to the development of a vaccine against CVL. OBJECTIVE: The first chapter study aimed the development of a model for the evaluation of candidate antigens for a vaccine against CVL. An experiment was conducted to obtain resistant dogs to CVL. Lymphocytes of these animals should be able to recognize potentially useful antigens for a vaccine development. METHODOLOGY: For this, a strain of L. infantum was isolated from naturally infected and sick dog (Camaçari, Bahia). Six dogs and healthy adults were intradermally inoculated with 1 x 108 promastigotes in the stationary phase culture and were followed for two years. RESULTS: The animals showed: 1) induration area and shallow ulceration in parasite inoculation site with spontaneous healing in a period of less than three months, 2) absence of clinical symptoms and hematological and biochemical changes, 3) low and floating production of antibodies IgG reactive to Leishmania antigens, 4) lymphoproliferative response (in 4 of 6 dogs) compared to stimulation with leishmanial antigens, 5) low IFN-γ in a test performed on whole blood incubated for 24 h with antigen Leishmania (4 of 5 dogs), 6) a low parasite load in spleen aspirates, detected by realtime PCR. CONCLUSION: These animals developed a subclinical form of the infection alongside with a weakspecific humoral and cellular immune response and weak cell. OBJECTIVE: The second section was tested in a trial evaluating cytokine production by blood cells of dogs naturally infected with Leishmaniainfantum. The modified QuantiFERON allows evaluation both in vitro and quickly production of cytokines against Leishmania in animals in an endemic area. METHODOLOGY: Soluble antigen and recombinant antigens of L. infantum (rLci2-5R-NT-CT and rLci2-NT-CT) were produced and used in the assay for the stimulation of whole blood of 27 animals from endemic and nonendemic area for LVC for 24h. Plasma was collected and cytokine production of canine IFN- γ, IL-2, IL-6, IL-10 and TNF-α cytokines were quantified. RESULTS: Due to technical some problems, it was not possible to characterize groups of animals susceptible and resistant in relation to modified QuantiFERON assay results. OBJECTIVE: In the third chapter, the parasite load and histological aspects in different regions of the spleen of dogs with CVL were analyzed. METHODOLOGY: The parasite load and histological changes in the spleen of 6 dogs with CVL were evaluated by sampling three sections of the spleen (lower, middle and upper section of the organ). RESULTS: There was a variation in parasitic load distribution in the spleen of the same animal. Histological evaluations (disorganized white pulp, granulomas, periesplenite, plasma cells, and polymorphonuclear infiltration) showed a variation in the frequency (granulomas) or intensity (perisplenite) in spleen in 2 of 6 dogs. CONCLUSION: Therefore, the distribution of the parasitic load and histological changes in dogs spleen with VL show a certain degree of heterogeneity.

Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-07-03T15:17:42Z No. of bitstreams: 1 KerciaMonalineDeSouzaJoventino_DISSERT.pdf: 1519788 bytes, checksum: 901d657abfb5f3e00400db99cd1e6791 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-07-11T11:42:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 KerciaMonalineDeSouzaJoventino_DISSERT.pdf: 1519788 bytes, checksum: 901d657abfb5f3e00400db99cd1e6791 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-11T11:42:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 KerciaMonalineDeSouzaJoventino_DISSERT.pdf: 1519788 bytes, checksum: 901d657abfb5f3e00400db99cd1e6791 (MD5) Previous issue date: 2017-03-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O citomegalovírus é uma importante complicação após o transplante renal. O uso de imunossupressores na prevenção de rejeição ao aloenxerto pode desencadear mudanças no comportamento do CMV, sendo importante o seguimento viral póstransplante, como medida preventiva para limitar o impacto clínico deste vírus. O objetivo do estudo foi monitorar a infecção por citomegalovírus em pacientes submetidos a transplante renal no Hospital Universitário Onofre Lopes, Natal, Rio Grande do Norte. No total foram incluídos 165 pacientes no período de fevereiro de 2013 a janeiro de 2016. Amostras de sangue periférico foram obtidas na 2ª, 4ª, 8ª, 12ª e 24ª semanas pós-transplante para detecção molecular do CMV pela nestedPCR e a quantificação da carga viral do CMV pela PCR em tempo real. Os transplantados renais apresentaram incidência de 59,4% de infecção ativa por CMV, correlacionada ao uso de everolimo (p=0,0008) e timoglobulina (p=0,0042). Quarenta e cinco pacientes apresentaram números de cópias superiores ao ponto de corte de 4600 cópias/mL, com sensibilidade de 67,2% e especificidade de 70,7%, associado a sinais e sintomas de infecção por CMV, tais como febre, distúrbio gastrointestinal, mialgia, leucopenia e trombocitopenia. Nossos resultados demonstraram uma alta incidência de infecção ativa por CMV, evidenciando a necessidade do diagnóstico precoce dessa infecção, além de que a PCR em tempo real pode ser utilizada para monitorar infecções sintomáticas por CMV em receptores de transplante renal. / Cytomegalovirus infection is an important complication after renal transplantation. The use of immunosuppressants in the prevention of rejection may trigger changes in the behavior of CMV, it is important to post-transplant viral follow-up, as preventive measure, to limit clinical impact of this vírus. The objective of this study was to monitor cytomegalovirus infection in patients who underwent renal transplant in the Onofre Lopes University Hospital (HUOL), Natal, Rio Grande do Norte. In total were included 165 patients in the period from 2013 to 2016. Samples of peripheral blood obtained on the 2nd, 4th, 8th, 12th and 24th weeks post-transplant to molecular detection of CMV by nested-PCR and quantification of CMV viral load by real-time PCR. Who renal transplants presented incidence of 59.4% of active CMV infection was, correlation with the use of everolimus (p = 0.0008) and thymoglobulin (p = 0.0042). Forty-five patients who presented copy numbers above the cut-off point (4600 copies/mL), with sensitivity of 67.2% and specificity of 70.7%, associated were clinical signs and symptoms of CMV infection, such as fever, gastrointestinal disturbance, myalgia, leukopenia and thrombocytopenia. Our results demonstrated a high incidence of active CMV infection, evidencing the necessity of the early diagnosis of this infection, in addition to real-time PCR can be using to monitor CMV symptomatic infections in renal transplant recipients.

Submitted by João Henrique Costa (henrique@biblioteca.ufpb.br) on 2016-12-22T15:45:32Z No. of bitstreams: 1 Arquivototal.pdf: 710350 bytes, checksum: 1690abae39b38922136d39e01300a1b3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-22T15:45:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arquivototal.pdf: 710350 bytes, checksum: 1690abae39b38922136d39e01300a1b3 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Reduce human impacts to water quality, potentially affecting biodiversity. Fish parasites can be good indicators of the quality of water bodies, and their presence or absence can be interpreted as a sign of changes in habitat and help in the diagnosis of environmental problems. The study was conducted in two Paraiba’s estuaries, Mamanguape (APA) and North Paraíba (surrounded by riverside community) in order to verify characteristics of the hosts and abiotic data as predictors of wealth gill parasites of fish. The species chosen hosts were Anchoa januaria (Steindachner, 1879), Atherinella brasiliensis (Quoy & Gaimard, 1825), Mugil curema Valenciennes, 1836 and Rhinosardinea bahiensis (Steindachner, 1879). In addition, the most prevalent and abundant copepod, Acusicola brasiliensis, was tested as a possible biomarker. Generalized Linear Models were built with the intention to test the influence of the following predictor variables: weight, length, relative condition factor (Kn) collection period (full or dry), the estuary area, estuary, pH, ammonia, total dissolved solids , turbidity, transparency, nitrate, nitrite, conductivity, total phosphorus and chlorophyll a in wealth response variables of parasites and plenty of Acusicola brasiliensis. Both the wealth and the abundance of A. brasiliensis had significant relationship with parameters that indicate the quality of water, and you can use them as indicators of environmental health. / Parasitos são importantes componentes das comunidades e constituem grande parte da diversidade biológica encontrada em diversos ecossistemas, podendo fornecer valiosas informações acerca de seus hospedeiros e o ambiente onde vivem. Entretanto, apesar de sua importância, a biodiversidade parasitária ainda é pouco conhecida em algumas regiões do Brasil, principalmente no que tange os parasitos de peixes na região Nordeste, sendo a maioria dos estudos concentrados na região Sudeste e Norte. O presente estudo teve como objetivo geral fazer o levantamento de fauna parasitária de peixes dos estuários do rio Paraíba do Norte e do rio Mamanguape, os dois principais estuários do Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil. Foram realizadas duas coletas de peixes em cada estuário, em novembro de 2013 e em julho de 2014, utilizando arrastos manuais. Após a identificação e necropsia dos peixes, seus parasitos foram coletados, armazenados e identificados com a maior resolução taxonômica possível. Para cada espécie de parasito, foram calculados os valores de prevalência, intensidade média e abundância média. Dentre os 794 peixes examinados, pertencentes a quatro espécies, 145 estavam parasitados por pelo menos uma espécie de parasito. No total, foram registradas 21 espécies de parasitos, dentre eles digenéticos, copépoda, isopodas, nematodas e monogenéticos, sendo o copépode Acusicola brasiliensis a espécie mais abundante. Considerando que a fauna parasitológica dos peixes destes estuários ainda não havia sido estudada, todos as ocorrências são novos registros de localidades para as espécies de parasitos. Além disso, novos registros de hospedeiros são feitos para espécies de parasitos já registradas em outras regiões.

Submitted by Claudia Rocha (claudia.rocha@udesc.br) on 2018-03-13T14:24:56Z No. of bitstreams: 1 PGCA14MA204.pdf: 193153 bytes, checksum: 775a55b56bd27e5412d5e2e42810041c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-13T14:24:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA14MA204.pdf: 193153 bytes, checksum: 775a55b56bd27e5412d5e2e42810041c (MD5) Previous issue date: 2014-02-11 / PROMOP / CAPES / Anaplasma marginale (THEILER, 1910), Babesia bovis (BABES, 1888) and B. bigemina (SMITH & KILBORN, 1893) are obligatory intraerythrocytic microorganisms that are responsible for high mortality and morbidity rates in several regions of Brazil. The goal of this project was to investigate the infections dynamics and the pathogens prevalence in cattle located in the mountain region of Santa Catarina, Brazil. For this purpose, 257 blood samples from animals with age between four months and eleven years were collected from March 2012 to July 2013, in sixteen cities of the region. The samples were grouped in five classes according to age, Group A were compounds of the animals with six months or less; Group B animals from 7 to 12 months, Group C animals from 13 to 24 months, Group D animals from 25 to 36 months and Group E animals with more than 36 months. Blood samples were submitted to hematological analysis, conducted at Laboratório Clínico Veterinário – Centro de Ciências Agroveterinárias (CAV), and pathogen investigation was examined by Multiplex-PCR, in Laboratório de Bioquímica de Hemoparasitas e Vetores – LABHEV (CAV). Erythrogram and WBC were performed on electronic counter (CELM CC-530), and differential leukocyte counts by cytological analysis in optical microscope. The DNA extraction was performed by the phenol-chloroform method. Using the Multiplex-PCR technique, we were able to detect Anaplasma marginale prevalence in about 27.24%, B. bovis in 29.57% and B. bigemina in 16.73% of the animals. Statistical analysis showed correlation between the presence of the microorganisms and the animals groups age. The hematological modifications most significant were found on WBC, where leukocytosis was founded in the overall average of animals. However, infections were delivered in healthy animals, which shows sub-clinical infections in animals studies. The study area was characterized in enzootic instability, since the prevalence of microorganisms occurred in less than 75% of the population, situation that requires care in vector control and parasites to be conducive to outbreaks of disease / Anaplasma marginale (THEILER, 1910), Babesia bovis (BABES, 1888) e B. bigemina (SMITH & KILBORN, 1893) são microorganismos intra-eritrocitários obrigatórios responsáveis por causar prejuízos ligados a alta morbidade e mortalidade em várias regiões do Brasil. Com intuito de avaliar a dinâmica de infecção e prevalência desses parasitas em bovinos da região serrana de Santa Catarina, 257 amostras de sangue de animais com idade entre três meses e onze anos, foram coletadas entre março de 2012 e julho de 2013, em dezesseis municípios da região. As amostras foram divididas em cinco classes de acordo com a idade, onde o grupo (A) foi composto de animais de 4 a 6 meses, o grupo (B) animais entre 7 e 12 meses, o grupo (C) de 13 a 24 meses, o grupo (D) de 25 e 36 meses e no grupo (E) com mais de 36 meses. As amostras foram utilizadas para análises hematológicas, processadas no Laboratório Clínico Veterinário do Centro de Ciências Agroveterinárias (CAV) e para pesquisa dos agentes parasitários pela Multiplex-PCR, no Laboratório de Bioquímica de Hemoparasitas e Vetores - LABHEV. Eritrograma e leucograma foram realizados em contador eletrônico (CELM CC-530) e contagem diferencial de leucócitos por análise citológica em microscopia óptica. A extração de DNA foi realizada pelo método de fenol e clorofórmio. Com o uso da técnica Multiplex-PCR, foram detectadas prevalência de A. marginale em 27,24% dos bovinos, B. bovis em 29,57% e B. bigemina em 16,73% dos animais. Através da análise estatística verificou-se associação entre presença dos microorganismos e as classes etárias. A alteração hematológica mais relevante encontrada foi na porção leucocitária, onde a leucocitose foi observada na média geral dos animais amostrados. Contudo, as infecções foram apresentadas em animais saudáveis, o que demonstra infecções sub-clínicas nos bovinos estudados. A região estudada foi caracterizada em estado de instabilidade enzoótica, já que a prevalência dos microrganismos se deu em menos de 75% da população estudada, situação que requer cuidados no controle de vetor e parasitos por ser propícia à ocorrência de surtos da doença

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-03T12:56:44Z No. of bitstreams: 1 Romulo Menna Barreto Valenca.pdf: 688661 bytes, checksum: d80c675dd68a0dfbf5ff078ecc666613 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-03T12:56:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Romulo Menna Barreto Valenca.pdf: 688661 bytes, checksum: d80c675dd68a0dfbf5ff078ecc666613 (MD5) Previous issue date: 2009-10-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of this study was to determine the prevalence and identify the risk factors associated with infection by Leptospira spp. in commercial pig farms in the state of Alagoas, Brazil. To compose the study, were used 342 pigs (312 sows and 30 boars) from at seven swine herds distributed in five districts of the state of Alagoas. The serological diagnosis of infection was done by Microscopic Agglutination Test (SAM). The risk factors analysis was performed by the application of research questionnaires, consisting of objective questions relating to the designer, the general characteristics of the property, the production management, and reproductive health. Detected a prevalence of 16.10% (55/352) of pigs positive. The risk factors associated were: The not perform quarantine (p = 0.003, OR = 5.43, CI = 1.79 -16.41) and artificial insemination utilization (p = 0.023, OR = 3.38, CI = 1.18 - 9, 66). Was foundsignificant association of sows infection with the increased number of stillborn and mummified, and with the increase frequency of estrus recurrence and increased the numbers of days from weaning to service of seropositive sows. It is concluded that infection with Leptospira spp. is disseminated in commercial pig farms in the state of Alagoas, favoring the reproductive failures and decrease of zootechnical performance. The risk factors identified in this study are facilitators in the dissemination of infection and should be adjusted to control the disease in the herds studied. / Objetivou-se com este estudo calcular a prevalência e identificar os fatores de risco associados à infecção por Leptospira spp. em suínos criados em granjas tecnificadas no Estado de Alagoas, Brasil. Para compor a amostra do estudo de prevalência foram utilizados 342 suínos, sendo 312 matrizes e 30 varrões, oriundos de sete granjas de ciclo completo e distribuídas em cinco municípios do Estado de Alagoas. O diagnóstico sorológico da infecção foi realizado pela técnica de Soroaglutinação Microscópica (SAM). A análise dos fatores de risco foi realizada por meio da aplicação de questionários constituídos por perguntas objetivas referentes ao criador, às características gerais da propriedade, ao manejo produtivo, reprodutivo e sanitário. Obteve-se uma prevalência de 16,10% (55/342) de suínos soropositivos. Os fatores associados foram: não realização de quarentena (p = 0,003; OR = 5,43; IC = 1,79 – 16,41) e a utilização da inseminação artificial (p = 0,023; OR = 3,38; IC = 1,18 – 9,66). Detectou-se associação entre a infecção dasmatrizes e o aumento do número de natimortos e mumificados, assim como com a maior freqüência de repetição de cio e aumento do intervalo desmama/estro nas matrizes soropositivas. Conclui-se que a infecção por Leptospira spp. encontra-se disseminada nas granjas suinícolas tecnificadas no Estado de Alagoas e contribui com a ocorrência de falhas reprodutivas e queda nos índices zootécnicos nessas propriedades. Os fatores de risco identificados nesse estudo são facilitadores na disseminação do agente e devem ser corrigidos para controlar a doença nos rebanhos estudados.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_eliane_machado_pereira.pdf: 4235511 bytes, checksum: 28dcd80ec8888a8603565a7809054107 (MD5) Previous issue date: 2012-03-15 / This study verified helminth parasites infection in gastrointestinal tract, lungs, heart, and kidneys of southern sea lions, Otaria flavescens, from south coast of Rio Grande do Sul State, Brazil. Twenty-nine sea-lions were found dead on the beaches, whose carcasses had mild state of decomposition, were necropsied. The organs were collected during field necropsies for laboratory analyses were 24 small and large intestines, 24 livers including parenchyma and gall bladder, 29 stomachs, 24 hearts, and 24 pairs of kidneys. The organs were maintained frozen at -20°C until their processing. A sieve with 150µm mesh was used for screening the parasites. All content retained was analyzed under stereomicroscope. The helminthes were collected, counted, fixed in AFA, stained with carmine, and clarified in beechwood creosote. The small intestines were divided into three segments that were separately analyzed to record the distribution of helminthes by preference sites. Kolmorogov-Smirnov test was used to verify the type of data distribution. Comparison of mean abundance of infection between age classes was performed through Wilcoxon test at significant level of 0.05. Correlations between infection intensity, sex, total length of the individual, and length of small and large intestines were determined using Pearson s Correlation. Action® software version 1.1 was applied for statistical analyses. Among 29 specimens of O. flavescens 23 were males, three females, and three individuals whose sex could not be determined. The average length of the animals was 2.14±0.31m (1.58 to 2.64m) including 13 sub-adults and 16 adults. A total of 996 specimens of Contracaecum ogmorhini were recorded, especially in the stomach (10.34% of prevalence), 42,145 specimens of Corynosoma australe (100% of prevalence) and 512 of Bolbosoma turbinella (50% of prevalence) were found. Two species of trematodes were found: Stephanophrora uruguayense (Prev. 4.17%) and Ascocotyle (Phagicola) longa (Prev. 33.33% ), a estimated total of 1,988.202 specimens. Cestodes were found in only one of the hosts (4.16% of prevalence) which presented four scoleces. Macroscopically, liver, gall bladder, heart, lungs, and kidneys did not contain parasites. No significant correlation was observed between infection intensity, mean abundance, sex, total length of the host, or length of intestines. Infections levels were similar between sub-adults and adults sea lions. This is the first record of Diphyllobothrium sp., Bolbosoma turbinella, Contracaecum ogmorhini, Ascocotyle (Phagicola) longa, and Stephanoprora uruguayense in O. flavescens in Brazilian waters. As regards parasite fauna of O. flavescens, our data are different from those previously reported for specimens from Pacific coast of South America. / Este estudo analisou os helmintos parasitos gastrointestinais, pulmonares, cardíacos e renais do O. flavescens no litoral sul do Rio Grande do Sul, Brasil. Foram necropsiados 29 leões-marinhos, cujas carcaças apresentavam baixo estado de decomposição. Os órgãos coletados mediante necropsia a campo para análise em laboratório foram 24 intestinos delgado e grosso, 24 fígados incluindo parênquima e vesícula biliar e 29 estômagos, 24 corações e 24 pares de rins. Os órgãos foram congelados a 20oC até o seu processamento. Para a triagem dos parasitos foi usada peneira com malha de 150 µm e todo o conteúdo retido foi analisado sob microscópio estereoscópico. Os helmintos foram fixados em AFA, corados com Carmin e clarificados com creosoto de Faia. Os intestinos delgados foram divididos em três segmentos que foram analisados separadamente para registrar a distribuição dos helmintos por sítios de preferência. Teste de Kolmorogov-Smirnov foi utilizado para verificar tipo de distribuição dos dados. A comparação da abundância média de infecção entre classes etárias foi realizada através do teste de Teste de Wilcoxon usando nível de significância de 0.05. As correlações entre intensidade de infecção, sexo, comprimento total do individuo e comprimento dos intestinos delgado e grosso foram verificadas usando a Correlação de Pearson. Para as análises estatísticas usou-se o software Action® versão 1.1. De 29 espécimes de O. flavescens 23 eram machos, três fêmeas e em três indivíduos o sexo não pode ser determinado. A média do comprimento total dos animais foi 2,14±0,31m (1,58 - 2,64m), sendo 13 subadultos e 16 adultos. Foram registrados 996 espécimes de Contracaecum ogmorhini presentes principalmente no estômago, (prevalência 10%). Registrou-se 42.145 espécimes de Corynosoma australe (Prev. 100%) e 512 de Bolbosoma turbinella (Prev. 50%). Duas espécies de trematódeos foram coletados: Stephanophrora uruguayense (Prev. 4.17% ) e Ascocotyle (Phagicola) longa (Prev. 33.33% ) totalizando 1.988.202 espécimes. Cestódeos foram encontrados em apenas um hospedeiro (Prev. 4,16%) que apresentou 4 escóleces. Macroscopicamente, fígado, vesícula biliar, coração, pulmões e rins examinados não estavam parasitados. Nenhuma correlação significativa foi observada entre a intensidade de infecção, sexo, comprimento total ou comprimento dos intestinos. Este é primeiro registro de Diphyllobothrium sp., Bolbosoma turbinella e Contracaecum ogmorhini em O. flavescens em águas brasileiras. No que se diz respeito à fauna parasitária de O. flavescens, as espécies encontradas no presente estudo não são as mesmas previamente citadas para leãomarinho-do-sul da costa pacífica da América do Sul.

Completando 100 anos da descoberta da molestia, a Doenca de Chagas, causada pelo agente etiologico Trypanosoma cruzi, ainda e considerada nas Americas Central e do Sul um problema de saude publica, atingindo mais de 8 milhoes de individuos. Sua transmissao ocorre de distintas maneiras, como por vetores, transfusao sanguinea, transplante de orgaos, acidentes em laboratorios, via oral. O parasita e conhecido por sua heterogeneidade no genotipo e fenotipo, baseado em mutacoes cumulativas em diferentes sub-populacoes do parasita. A cepa CL Brener e uma cepa padrao para pesquisa com diversas peculiaridades interessantes como baixa infectividade em animais, resposta aos tratamentos existentes e seus marcadores geneticos serem estaveis. O clone CL B5 de T. cruzi e originado a partir da cepa CL Brener modificada geneticamente. A cepa possui um gene reporter, o LacZ de Escherichia coli que sintetiza uma enzima, a À-galactose que pode catalisar uma reacao colorimetrica com o substrato vermelho de clorofenol À-galactopiranosideo (CPRG). A atividade enzimatica e diretamente proporcional ao numero de parasita. No presente trabalho propomos a introducao de uma tecnica colorimetrica para caracterizacao de parametros para quantificacao do parasitismo tecidual e comparacao com a tecnica histologica e Real Time-PCR. Camundongos Balb/C machos foram divididos em grupos controle (nao infectado) e experimental variando a via de inoculacao, a saber, intraperitoneal (IP), subcutanea (SC) e oral (OR). As curvas parasitemicas foram realizadas por meio da coleta de sangue da cauda do animal. Apos morte dos mesmos, foram estudados os tecidos cardiaco, hepatico, esplenico, enterico e muscular (musculo esqueletico). Os orgaos foram retirados, divididos em tres porcoes equitativas para analise histologica, enzimatica e molecular. Na atividade enzimatica, comparando os tecidos em suas vias de inoculacao, o figado apresentou resultado significativo no grupo inoculado via IP. Tecido cardiaco apresentou diferenca estatistica (P<0,05) entre as vias de inoculacao OR e SC, apresentando maior atividade enzimatica na primeira, o que esta relacionado a uma maior quantidade de parasita tecidual. Nos cortes histologicos o grupo SC mostrou-se mais infectado com grande numero de ninhos de forma amastigota em praticamente todos os tecidos, enquanto nos demais grupos foram observados ninhos de amastigota em sua maioria no coracao e viii musculo esqueletico. A presenca do parasita nos demais tecidos foi confirmada pela eletroforese em gel de agarose 1,5% apos tecnica de PCR convencional. A Real Time-PCR nao se mostrou satisfatoria no trabalho devido a dificuldade na sua padronizacao. Concluindo, a metodologia enzimatica se mostrou favoravel e adequada na quantificacao parasitaria tecidual, podendo ser aperfeicoada para corroborar sua eficacia. / One hundred years after the discovery of Chagas Disease, an illness caused by blood born protozoan Trypanosoma cruzi, is still consider a public health problem. It is a major cause of morbidity and mortality in Central and South Americas where more than 8 million individuals are already infected. This illness can be contracted by different forms as vector transmission, blood transfusion, tissue transplant, laboratory accidents and oral route. The parasite has a heterogeneous genotype and phenotype due to accumulating mutation in their sub-populations. CL Brener is considered as a pattern strain due to some intrinsic characteristics as low infectivity, good response to therapy drugs and a stable genetic heritage. The CL B5 clone of T. cruzi was originated by a genetic modification of the CL Brener strain which has a reporter gene LacZ of Escherichia coli, which induces the syntesis of â-galactosidase which is able to catalyze a colorimetric reaction using the substrat Chlorophenol red-â-D-galactopyranoside (CPRG). The enzymatic activity is directly related with the number of the parasites. In this study we proposed a new colorimetric assay to quantify T. cruzi load in different animal tissues by comparing with other methodologies such histological and molecular assay (Real Time-PCR). Male Balb/C mice were separated into control and experimental groups according to the route of infection (IP-intraperitoneal, SC-subcutaneous, OR-oral). Parasitemic curves were made by collecting blood samples from the tail of experimental animals. Fifteen days after, animals were euthanized and their tissues removed (heart, liver, spleen, intestine and skeletal muscles) and divided in three portions for the colorimetric analyses, histopathology and molecular assay. The enzymatic activity was performed comparing the number of parasites in different tissues according to the route of infection. Comparing them, it was observed that heart and liver displayed the highest number of parasites as compared with the other studied tissues. In the liver, IP route triggered the highest number of parasites while in the heart OR and SC routes displayed enhanced parasites. The histopathology analysis revealed that SC group presented the highest number of amastigote nests. For IP and OR groups, nests were mostly observed in heart and skeletal muscles. T. cruzi DNA were detected using electrophoreses 1,5 % agarose gel after conventional PCR technique, displaying characteristic bands of DNA. The Real Time-PCR was not a satisfactory x assay for this study due to difficulties on its patronization. To conclude, the enzymatic methodology was advantageous and appropriated on quantifying tissue parasites. Some further experiments will be needed to improve methodology and its efficacy.

Submitted by BRENO CAYEIRO CRUZ null (breno.c.cruz@hotmail.com) on 2017-12-04T11:58:38Z No. of bitstreams: 1 - TESE -.pdf: 3422888 bytes, checksum: a396717b2b2074de76c0871a37c4eebb (MD5) / Submitted by BRENO CAYEIRO CRUZ null (breno.c.cruz@hotmail.com) on 2017-12-04T14:43:23Z No. of bitstreams: 1 - TESE -.pdf: 3422888 bytes, checksum: a396717b2b2074de76c0871a37c4eebb (MD5) / Submitted by BRENO CAYEIRO CRUZ null (breno.c.cruz@hotmail.com) on 2017-12-05T14:11:14Z No. of bitstreams: 1 - TESE -.pdf: 3422888 bytes, checksum: a396717b2b2074de76c0871a37c4eebb (MD5) / Submitted by BRENO CAYEIRO CRUZ null (breno.c.cruz@hotmail.com) on 2017-12-11T18:47:11Z No. of bitstreams: 1 - TESE -.pdf: 3422888 bytes, checksum: a396717b2b2074de76c0871a37c4eebb (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2017-12-13T11:26:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 cruz_bc_dr_jabo.pdf.pdf: 3422888 bytes, checksum: a396717b2b2074de76c0871a37c4eebb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-13T11:26:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 cruz_bc_dr_jabo.pdf.pdf: 3422888 bytes, checksum: a396717b2b2074de76c0871a37c4eebb (MD5) Previous issue date: 2017-10-27 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1888) é o mais importante ectoparasito da pecuária brasileira, cujo controle exige conhecimentos comportamentais de seu ciclo biológico para melhor sucesso na atuação sobre e fora do hospedeiro, combatendo-o em épocas do ano desfavoráveis ao mesmo. A maioria das informações sobre sua biologia e ecologia foi originada em outros países ou então há muito tempo. Baseado nas mudanças climáticas recentes e ausência de informações sobre ecologia e biologia deste ixodídeo na região, este estudo, conduzido em bioma de Cerrado e clima tropical com estação seca (Aw), obteve tais dados pela observação, ao longo de dois anos, dos fatores envolvidos nas suas fases de vida parasitária e não parasitária, além de avaliar o comportamento desta cepa quanto à evolução do perfil de resistência/susceptibilidade aos acaricidas. Observando a fase de vida parasitária deste carrapato, foi possível perceber sua adaptação às mudanças climáticas, com cinco gerações anuais registradas em dois anos consecutivos pela primeira vez na literatura. Constatou-se que não houve correlações significativas entre seu ciclo parasitando bovinos e os níveis de chuva, temperaturas ambiental e ao nível do solo e umidade relativa do ar. Já a fase de vida livre foi influenciada pelos fatores climáticos, com correlação positiva entre pluviosidade/pré-postura, correlações negativas entre temperatura/pré-postura, incubação e pré-eclosão, entre umidade relativa do ar/incubação e pré-eclosão. Os dados obtidos indicaram que o período de seca (outono e inverno) é mais favorável à manutenção do carrapato bovino no ambiente, além de albergar as maiores cargas parasitárias nos hospedeiros. A dinâmica populacional calculada reforça a adaptação deste ixodídeo às mudanças climáticas, culminando na existência de 5,212 gerações anuais mesmo em condições climáticas e ambientais distintas, oscilando entre 2,6 e 8,3 gerações/ano. Considerando estes dados, foi proposta uma metodologia de controle estratégico específica, tratando os animais entre a segunda metade da primavera e a primeira metade do verão (outubro a fevereiro). Estes tratamentos na estação chuvosa levariam a populações menores na estação seca, reduzindo também o “spring rise”. A análise da eficácia de diferentes compostos químicos por meio do Teste de Pacote de Larvas gerou resultados contraditórios, com alta eficácia registrada para piretróides e organofosforados, e oscilações na eficácia do amitraz. Estes valores levantaram questionamentos sobre a aplicabilidade desta técnica no monitoramento da resistência. Futuros estudos devem ser propostos, analisando a real eficácia dos Testes de Pacote de Larvas, confrontando diferentes metodologias in vivo e in vitro; comparando a dinâmica populacional deste ixodídeo em diferentes pastagens, formas de manejo, taxas de lotação, altitudes e biomas; atestando a eficácia da metodologia de controle estratégico proposta e, principalmente, confirmando a possibilidade de observarem-se mais de oito gerações de R. microplus por ano em condições climáticas ideais. / Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1888) is the main ectoparasite in Brazilian cattle industry, and its control demands behavioral knowledge of its biologic cycle, for increased success in actions over and out of the hosts, with treatments in periods of the year less favorable to this tick. Most of the information about its biology and ecology was originated in other countries or a long time ago. Based in recent climate changes and absence of ecologic and biologic data on this region, the present study, conducted in the Brazilian “Cerrado” biome and tropical savanna climate (Aw), obtained such data through the observation, during two consecutive years, of factors involved on parasitic and free living phases of its cycle, also evaluating the behavior of this strain regarding evolution of its resistance/susceptibility profile against acaricides. Observing the parasitic phase of the Southern Cattle Tick, it was possible to detect adaptations of this ixodid to climate changes, with five annual generations in two consecutive years being registered for the first time in literature, without significant correlations between its period parasitizing bovines and rain levels, environmental and soil level temperatures and relative air humidity. The free living period of its cycle was affected by climatic variables, with positive correlation between rainfall and the period before oviposition, and negative correlations between temperatures and the period before oviposition, egg incubation and period before hatching, and between relative air humidity and egg incubation and the period before larval hatching. Obtained data indicate that the dry season (autumn and winter) is more favorable for maintenance of the Southern Cattle Tick on the environment, as well as presenting highest parasitic burdens in hosts. Population dynamics calculated reinforces the adaptations of such ixodid to climate changes, leading to the existence of 5.212 yearly generations even in distinct climatic and environmental conditions, varying between 2.6 and 8.3 generations per year. Considering such data, a specific strategic control methodology was proposed, treating animals between the second half of spring and the first half of summer (October to February). Such treatments in rainy seasons would lead to smaller populations on the dry season, also reducing the “spring rise”. Analysis of efficacy of different chemical compounds using the Larval Packet Test generated contrasting results, with high efficacy indexes registered for pyrethroids and organophosphates, with variations in amitraz efficiency. Such values lead to a questioning of the applicability of such technique in monitoring resistance. Future studies must be proposed, analyzing the real efficacy of Larval Packet Tests, confronting different in vivo and in vitro methodologies; comparing population dynamics of such ixodid in different pastures, husbandry methods, stocking rates, altitudes and biomes; confirming the efficacy of the proposed strategic control method and, above all, confirming the possibility of observing more than eight R. microplus yearly generations in ideal climatic conditions. / 2014/14820-2