Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-06-26T01:13:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 317531.pdf: 1600754 bytes, checksum: 3f1de19873921411c085d945c5c2628f (MD5) / Introdução: A Croton antisyphiliticus Mart., conhecida popularmente como canela-de-perdiz ou curraleira, é uma planta arbustiva do cerrado brasileiro, encontrada principalmente no estado de Minas Gerais. A medicina popular descreve o uso desta espécie no tratamento da sífilis, inflamação, lesões ulcerativas, eczemas e reumatismos. Objetivo: Avaliar o efeito anti-inflamatório do extrato bruto, frações e compostos isolados obtidos da espécie Croton antisyphiliticus Mart. (Euphorbiaceae), no modelo da pleurisia induzida pela carragenina (Cg), em camundongos. Metodologia: Partes aéreas da Croton antisyphiliticus foram secas, maceradas e submetidas o processo de extração com etanol 96%, para obtenção do extrato bruto hidroalcoólico (EBH). Através de uma extração líquido-líquido, o EBH foi fracionado com o uso de diferentes solventes de polaridade crescente em: hexano (Hex), acetato de etila (AcOEt) e aquosa (Aq). A fração Aq foi cromatografada em coluna de sílica gel, fornecendo 2 compostos: vitexina (VT) e ácido quínico (AcQ). Nesse estudo, foram utilizados camundongos albinos Swiss, fêmeas (18-22 g), os quais foram submetidos ao modelo experimental da pleurisia induzida pela Cg. No protocolo experimental, os animais receberam injeção endovenosa do corante Azul de Evans (25 mg/kg), para análise indireta da exsudação. Em seguida, diferentes grupos de animais foram tratados com o material vegetal (EBH, frações ou compostos isolados), 0,5 h antes da indução da pleurisia com uma injeção intrapleural de Cg (1%). Após 4 h de pleurisia, avaliou-se o efeito do EBH, das suas frações: Hex, AcOEt e Aq, bem como dos composto isolados: VT e AcQ, obtidos das partes aéreas da Croton antisyphiliticus, sobre a migração de leucócitos, exsudação, mieloperoxidase (MPO), adenosina-deaminase (ADA), metabólitos de óxido nítrico (NOx), fator de necrose tumoral-alfa (TNF-?) e interleucina-17 (IL-17). A análise estatística utilizada foi o teste de variância ANOVA, complementado pelo teste de Newman-Keuls. Valores de P < 0,05 foram considerados significativos. Resultados: EBH, Hex, AcOEt, Aq, VT e AcQ inibiram: migração de leucócitos (neutrófilos), exsudação, atividade da MPO e ADA, e diminuíram as concentrações de NOx, TNF-? e IL-17 (P < 0,05). Entretanto, o AcQ não inibiu a secreção de TNF-? e IL-17 (P > 0,05). Conclusão: Este estudo demonstrou que a Croton antisyphiliticus Mart. apresentou importante efeito anti-inflamatório, sendo a sua fração Aq, entre as frações avaliadas, a mais efetiva em diminuir a inflamação, o qual parece estar relacionado com a inibição da migração de leucócitos, principalmente os neutrófilos ativados, haja vista a capacidade da planta em reduzir a atividade das enzimas MPO e ADA. O material vegetal estudado também foi capaz de reduzir a concentração de mediadores pró-inflamatórios como: NOx, TNF-? e IL-17. Essa redução pode estar relacionada com a diminuição do recrutamento celular e extravazamento vascular para o sítio inflamatório, promovidos pelos compostos isolados, a VT e o AcQ.<br> / Abstract : Introduction: Croton antisyphiliticus Mart. is popularly named as canela-de-perdiz or curraleira. It is a shrub plant found in the Brazilian savanna, mainly in the state of Minas Gerais. The folk medicine describes the use of this species in the treatment of syphilis, inflammation, ulcer, eczemas and rheumatisms. Objective: To evaluate the anti-inflammatory effect of the crude extract, its fractions and isolated compounds obtained from the aerial parts of Croton antisiphyliticus Mart., in the carrageenan-induced pleurisy model. Methodology: Aerial parts of the plant were dried, macerated and extracted with ethanol 96% to obtain the crude hydroalcoholic extract (CHE), which was partitioned with solvents of increasing polarity to obtain 3 fractions: hexane (Hex), ethyl acetate (EA) and aqueous (Aq). The Aq fraction was chromatographed on silica gel column and resulted in 3 isolated compounds: vitexin (VT) and quinic acid (QA). Swiss mice, female (18-22 g), were used in the murine carrageenan-induced pleurisy model. In this experimental protocol, animals received a previous injection of Evans Blue Dye (25 mg/kg) intravenous, in order to evaluate the exudate concentration. Then, different groups of animals were pre-treated, by intraperitoneal route (i.p.), with the vegetable products obtained from Croton antisyphiliticus (CHE, its fractions and isolated compounds), 0.5 h before pleurisy induction with an intrapleural (i.pl.) injection of carrageenan (Cg: 1%). The anti-inflammatory effect of CHE, its fractions (Hex, EA and Aq) and isolated compounds (VT and QA) was investigated upon: leukocyte migration (neutrophyls), exudation, myeloperoxidase (MPO), adenosine-deaminase (ADA), nitric oxide metabolities (NOx), tumoral necrosis factor- alpha (TNF-á) and interlekin-17 (IL-17). It was used to statistical analysis the variance test of ANOVA, which was complemented by Newman-Keuls test. Values of P < 0.05 were considered significant. Results: CHE, Hex, EA, Aq, VT and QA inhibited leukocyte migration (neutrophils), exudation, and decreased MPO and ADA activities, as well as NOx, TNF-á and IL-17 levels (P < 0.05). Although QA had inhibited those inflammatory parameters, it did not decrease the concentration of TNF-á and IL-17 (P > 0.05). Conclusion: This study demonstrated the anti-inflammatory effect of Croton antisyphiliticus Mart. may be related to the inhibition of leukocyte migration, mainly activated neutrophils, since this plant is capable to reduce the activity of enzymes that is related to neutrophil activation (MPO and ADA). The extracted vegetable products obtained from this plant also decreased the levels of pro-inflammatory mediators, such as: NOx, TNF-á and IL-17. Among the analyzed fractions, Aq fraction performed the best anti-inflammatory effect, which may be associated with its isolated compounds, VT and AcQ, in the inhibition of leukocyte recruitment and vascular fluid leakage in the inflammatory site.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2012-10-21T11:34:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 203044.pdf: 3077803 bytes, checksum: 2579a4e0bf9fa9627f5f2652cbbfb303 (MD5) / Estudos têm demonstrado o efeito antiinflamatório do PK11195 e do Ro5-4864 em modelos experimentais (TORRES et al., 1999; 2000). Estes dois fármacos são denominados ligantes do receptor benzodiazepínico periférico (RBP) estão localizados em diversos tecidos, em nível periférico. Neste estudo foi utilizado o modelo de pleurisia induzida pela carragenina (Cg, 1%/cav.), em camundongos. Este é um modelo pelo qual apresenta uma resposta inflamatória bifásica (4 e 48 h) importante para avaliação de novos fármacos com propriedades antiinflamatórias. Objetivos: 1) Avaliar o efeito do PK11195 e do Ro5-4864 sobre a resposta inflamatória induzida pela Cg na cavidade pleural de camundongos. Os parâmetros inflamatórios (leucócitos, exsudação, concentrações da mieloperoxidase (MPO), adenosina-deaminase (ADA), óxido nítrico (ONx) e permeabilidade vascular) foram estudados 4 e 48 h após a indução da pleurisia, 2) Avaliar se o possível efeito antiinflamatório dos fármacos estudados ocorre devido a síntese esteroidal. Materiais e métodos: Neste protocolo experimental, foram utilizados camundongos albinos suíços de ambos os sexos, pesando entre 18-22g. Todos os animais foram tratados previamente com solução de azul de Evans (25 mg/kg, i.v.) para análise indireta do exsudato, exceto para àqueles experimentos pelo qual, estudou-se as enzimas MPO e ADA, ONx e análise histológica. Inicialmente avaliou-se a curva dose, tempo e resposta sobre os parâmetros inflamatórios (leucócitos e exsudação). Após o estabelecimento da melhor dose e o melhor tempo de tratamento prévio dos animais com os fármacos em estudo, avaliou-se o efeito destes sobre as concentrações de MPO, ADA, ONx), tanto na primeira (4 h) como na segunda fase (48 h) da resposta inflamatória induzida pela carragenina na cavidade pleural de camundongos. Análise estatística: Os resultados obtidos com a contagem de leucócitos, exsudação, MPO, ADA, ONx e permeabilidade vascular foram expressos através da média ± e.p.m. A análise estatística para estes parâmetros foi realizada por meio do teste paramétrico ANOVA (Dunnett) complementado, quando necessário pelo teste t de student. A análise histológica foi expressa através de scores (0 = ausente; 1 = discreto; 2 = moderado e 3 = abundante). Para este último parâmetro a análise estatística utilizada foi o teste não paramétrico de Man-Whitney. Valores de P < 0,05 foram considerados significativos. Resultados: Na primeira fase (4 h) da resposta inflamatória induzida pela carragenina, o PK11195 e o Ro5-4864 inibiram significativamente o influxo de leucócitos (P < 0,01), às custas de neutrófilos (P < 0,01), a exsudação (P < 0,01), os níveis de ONx (P < 0,01) no lavado pleural e a permeabilidade vascular no pulmão (P < 0,01). Além disso, somente o Ro5-4864 foi capaz de inibir significativamente as concentrações da enzima MPO no lavado da cavidade pleural 4 h após (P < 0,05). Nesta fase, ambos os fármacos também inibiram os leucócitos no sangue dos animais inflamados (P < 0,01). A análise histológica revelou que o PK11195 e o Ro5-4864 inibiram de forma significativa a migração de neutrófilos, mononucleares e edema pulmonar (P < 0,01). No baço observou-se também a diminuição de leucócitos, neutrófilos na polpa vermelha, bem como diminuição da hiperplasia da polpa branca (P < 0,01). Neste último órgão, os fármacos estudados também aumentaram a apoptose (P < 0,01). Já no fígado, observou-se que o PK11195 e o Ro5-4864, diminuíram os neutrófilos e as células de Kuppfer (P < 0,01). Na segunda fase (48 h) da pleurisia induzida pela carragenina, o PK11195 e o Ro5-4864 inibiram de forma significativa os leucócitos (P < 0,01), às custas de mononucleares (P < 0,01), e os níveis de ADA no lavado pleural de xv camundongos inflamados (P < 0,01). A analise histológica revelou que ambos os fármacos inibiram os neutrófilos (P < 0,01) e os mononucleares, no pulmão (P < 0,01). No baço, tanto o PK11195 como o Ro5-4864 inibiram os neutrófilos e os mononucleares (P < 0,01), no entanto, somente o Ro5-4864 diminuiu de forma significativa o centro germinativo, neste órgão (P < 0,01). Já no fígado, observou-se que os dois fármacos diminuíram a hiperplasia de células de Küppfer (P < 0,01). Finalmente para avaliarmos o possível mecanismo de ação antiinflamatório do PK11195 e do Ro5-4864 utilizamos a DL-aminoglutatimida neste modelo experimental. Os resultados revelaram que este último fármaco reverteu o efeito antiinflamatório do PK11195 em relação a: exsudação, neutrófilos, mononucleares e níveis de ONx no lavado pleural (P < 0,01), na pleurisia induzida pela Cg 4 h. Nesta fase, este efeito ocorreu também em relação ao fármaco Ro5-4864 em relação a: neutrófilos, mononucleares, MPO e ONx (P < 0,01). Na pleurisia induzida pela Cg 48 h, a DL-aminoglutatimida reverteu os efeitos antiinflamatórios tanto do PK11195 como do Ro5-4864 em relação a: leucócitos, mononucleares, neutrófilos e exsudação na cavidade pleural de camundongos (P < 0,01). Além disso, a DL-aminoglutatimida reverteu também o efeito antiinflamatório do Ro5-4864 em relação aos níveis da ADA (P < 0,01). Conclusão: Estes resultados revelam que o efeito antiinflamatório tanto do PK11195 como do Ro5-4864 ocorre principalmente sobre o influxo de leucócitos ativados, bem como a inibição de enzimas pró-inflamatórios como MPO e ADA, além do mediador óxido nítrico. Além disso, parece que este efeito antiinflamatório é mediado pela síntese esteroidal. Estudos posteriores devem ser realizados para melhor elucidar o mecanismo de ação antiinflamatória dos ligantes do PBR.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas / Made available in DSpace on 2012-10-19T04:54:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T23:26:20Z : No. of bitstreams: 1 179111.pdf: 2498811 bytes, checksum: 127acf3da6d6cde793afb292d2aca3d4 (MD5) / O tratamento in vivo em camundongos com ligantes do receptor periférico benzodiazepínico (PBR) exerceram efeito inibitório na resposta inflamatória em dois modelos de inflamação aguda. No primeiro modelo o efeito antiinflamatório em de pré-tratamento com os ligantes PBR, PK11195 1-(2-chlorophenyl)-N-methyl-N(1-methylpropyl)-3-isoquinoline carboxamide e Ro5-4864 7-chloro-5-(4-Chlorophenyl)-1,3-dihydro-1-methyl-2-H-1,4-benzodiazepin-2, mostraram que a formação do edema em resposta a carragenina (300 mg/pata) foi inibida por PK11195 e Ro5-4864, em diferentes intervalos de tempo. O estudo do tempo resposta mostrou que a melhor resposta com ambos ligantes foi ótima em animais injetados no tempo de 24h, por esta razão este tempo de pré-tratamento foi escolhido para estudo da dose resposta. A formação do edema de pata em resposta a carragenina (300 mg/pata) foi reduzida por PK11195 e Ro5-4864 em diferentes doses (0,00001-10mg/kg, i.p.) produzindo uma inibição dose dependente na formação do edema de pata em camundongos induzida pela carragenina. PK11195 e Ro5-4864 (0.1 mg/kg, i.p.) quando administrado 24 h antes da indução do edema, inibiram de forma significativa o edema de pata de camundongos induzido por vários mediadores inflamatórios. No segundo modelo o pré-tratamento com os ligantes (0.1 mg/kg, i.p.), 24 h antes da indução da pleurisia induzida pela carragenina, mostrou uma significante inibição no recrutamento das células totais e diferenciais, principalmente a custas de neutrófilos, inibindo também a liberação de Interleucina-13 (IL-13) e Interleucina-6 (IL-6) no líquido pleural

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000399357-Texto+Completo-0.pdf: 1396496 bytes, checksum: 2fad2df47997209231d151979b59a483 (MD5) Previous issue date: 2008 / The purpose of this study was to investigate the potential effect of low level laser therapy (LLLT) on modulating the pro-inflammatory and antiinflammatory mediators of acute inflammation in rat pleurisy model. In the classic model of pleurisy there is little evidence of anti-inflammatory effects from LLLT and dosage characteristic, such as wavelength, total energy, number and pattern of treatment, with the necessity for more studies. A sample of 48 female Wistar rats were divided into control and experiential groups. An inflammation was induced by carrageenan (0. 2mL) injected into the pleural cavity. At 1, 2, and 3 h after induction the continuous wave (20 mW) diode laser of the InGaAlP (660nm) type was used in laser groups different doses and treatment patterns and with a total energy delivered of 0. 9, 2. 1 and 4. 2 joules. At 4 h after the exudate volume, total and differential leukocytes, protein concentration, nitric oxide (NO), interleukin (IL)-6, interleukin (IL)-10, tumor necrosis factor (TNF)-J and monocyte chemoattractant protein (MCP)-1 were measured from the aspirated liquid. Any treatment pattern and quantity of energy can reduce a significantly volume of the exudate (P<0,05). The final energy lower than 2. 1 joules reduces significantly (P<0,05) only NO, IL-6, MCP-1 and IL-10, while 2. 1 joules reduce significantly all variables independently of the treatment pattern. The neutrophil migration has significant correlation with the TNF-J concentration (r=0,551). The LLLT (660nm) induced an anti-inflammatory effect characterized by inhibition of both total and differential leukocyte influx, exudation, total protein, NO, IL-6, MCP-1, IL-10 and TNF-J, but keeping a highly dose-dependent outline. Under these conditions, laser with 2. 1 joules was more effective than 0. 9 joule and 4. 2 joules. / A proposta deste estudo foi investigar o efeito potencial da terapia laser de baixa intensidade na modulação de mediadores pró-inflamatórios e antiinflamatórios na fase aguda da inflamação no modelo de pleurisia em ratos. No modelo clássico de pleurisia temos poucas evidencias do efeito antiinflamatório do laser e das características de dosagem, como o comprimento de onda, energia total, números e formas de tratamento, necessitando ainda de mais estudos. A amostra de 48 ratas Wistar foram divididas em grupos controle e experimentais. A inflamação foi induzida por carragenina (0. 2 mL) injetada na cavidade pleural. Na 1ª, 2ª e 3ª hora após a indução o laser diodo de InGaAlP (660 nm) no modo contínuo (20 mW) foi usado nos grupos laser diferentes doses e formas de tratamento, com uma energia total de 0. 9, 2. 1 e 4. 2 joules. Após 4 horas o volume de exsudato, leucócitos totais e diferencial, concentração de proteínas, oxido nítrico (NO), interleucina (IL)-6, interleucina (IL)-10, fator de necrose tumoral (TNF)-J e proteína quimioatrativa de monócitos (MCP)-1 foram mensuradas no liquido pleural aspirado. Todas as formas de tratamento e quantidade de energia reduzem significativamente o volume do exsudato (P<0,05). A energia final abaixo de 2. 1 joules somente reduz significativamente (P<0,05) o NO, IL-6, MCP-1 e IL-10, enquanto que 2. 1 joules reduz significativamente todas as variáveis independente da forma de tratamento. A migração de neutrófilos tem uma correlação significativa com a concentração de TNF-J (r=0,551). A terapia laser de baixa intensidade (660 nm) induz um efeito antiinflamatório caracterizado pela inibição de ambos leucócitos totais e diferencial, exsudato, proteínas totais, NO, IL-6, MCP-1, IL-10 e TNF-J, mas mantendo um alto perfil dose-dependente. Nestas condições acima, o laser com 2. 1 joules foi mais efetivo que 0. 9 joule e 4. 2 joules.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Biologicas / Made available in DSpace on 2012-10-17T04:22:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-09T01:06:29Z : No. of bitstreams: 1 149023.pdf: 46743870 bytes, checksum: 13fe812001e91e9486c17da4c16c4eca (MD5) / Caracterização do receptor B1, e dos mecanismos relacionados à resposta inflamatória induzida pela des-Arg9-bradicinina na cavidade pleural de camundongos. Os resultados mostram que a des-Arg9-bradicinina causa resposta inflamatória caracterizada por um pico de 1h para o extravasamento e um pico de 4 h para a migração de neutrófilos para a cavidade pleural dos animais. Nesta resposta inflamatória estão envolvidos vários mediadores inflamatórios, entre eles, as taquicininas, o CGRP, o óxido nítrico, e produtos das ciclooxigenases. O tratamento prévio dos animais com LPS não aumentou a expressão dos receptores B1 na cavidade pleural de camundongos, sugerindo que estes receptores estão presentes na sua forma constitutiva.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2012-10-24T20:41:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 261614.pdf: 631140 bytes, checksum: ff121f74c5bc6020d896f00ab345d6e4 (MD5) / A Lotus corniculatus (Fabaceae) é distribuída em muitas regiões do mundo e possui grande valor agronômico por seus constituintes: proantocianidinas, flavonoides e ácido oleanólico. Esta planta é utilizada como alimento para o gado proporcionando o aumento no ganho de peso e na produção de leite, além do controle de infecções intestinais parasitárias nos animais. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito anti-inflamatório e antibacteriano do extrato bruto (CE) da Lotus corniculatus v. São Gabriel, frações (hexano (HEX), acetato de etila (AcOEt), butanólica (BuOH) e resíduo aquoso (AF)), e compostos isolados (canferitrin, ácido oleanólico e ß-sitosterol). As partes aéreas da Lotus corniculatus foram secas a temperatura ambiente, e a partir desse material (620 g), foi extraído o extrato bruto (CE) por maceração com etanol 96% por um mês. O solvente foi evaporado resultando em 78 g de extrato bruto (CE). O extrato bruto foi fracionado por extração líquido-líquido utilizando solventes em ordem crescente de polaridade resultando nas frações hexano (HEX), acetato de etila (AcOEt), butanólica (BuOH) e resíduo aquoso (AF). A partir da fração HEX foram isolados o ácido oleanólico e o ß-sitosterol, e a partir da fração AcOEt o canferitrin. Para a avaliação da atividade anti-inflamatória foi utilizado o modelo de pleurisia induzida pela carragenina, em camundongos, e foram avaliados os seguintes parâmetros inflamatórios: concentrações de leucócitos, exsudação, atividade da mieloperoxidase (MPO) e da adenosina-deaminase (ADA), além das concentrações de nitrito/nitrato (NOx) e interleucina-1 beta (IL-1 ). Nesse protocolo experimental, foram utilizados camundongos albinos suíços, os quais foram distribuídos em diferentes grupos e tratados com CE (100 - 400 mg/kg), HEX (50 - 200 mg/kg), AcOEt (100 - 400 mg/kg), BuOH (50 - 200 mg/kg), AF (25 - 200 mg/kg), canferitrin (50 - 100 mg/kg), ácido oleanólico (10 - 100 mg/kg) ou ß-sitosterol (10 - 100 mg/kg) 0,5 h antes da administração da carragenina (1%, i.pl.). Os parâmetros inflamatórios foram avaliados 4 h após. Todos os animais, exceto nos experimentos que foram analisadas as atividades enzimáticas, foi administrado previamente (10 min.) Azul de Evans (25 mg/kg, i.v.) a fim de avaliar a exsudação. Dexametasona e indometacina foram utilizados como fármacos anti-inflamatórios de referência. Para a avaliação da atividade antibacteriana, foi utilizada a técnica de microdiluição em caldo para a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e da concentração bactericida mínima (CBM). Neste protocolo, o material vegetal, o extrato bruto (CE), frações e compostos isolados, foram dissolvidos em dimetilsulfóxido (DMSO) e transferidos para uma placa em diluição seriada e, a seguir, o inóculo bacteriano foi adicionado. Gentamicina foi utilizada como fármaco antibacteriano de referência. Diferenças estatísticas entre os grupos, para os parâmetros inflamatórios, foram determinadas pela análise dos testes t de Student ou de variância (ANOVA). Valores de P < 0,05 foram considerados significativos. O extrato bruto da Lotus corniculatus (200 - 400 mg/kg) e frações (50 - 200 mg/kg), assim como os compostos isolados (25 - 100 mg/kg) inibiram: leucócitos, neutrófilos, exsudação, a atividade da MPO e da ADA, além das concentrações de NO e IL-1 (P < 0,05). A indometacina e a dexametasona inibiram todos os parâmetros inflamatórios estudados (P < 0,05). Em relação à atividade antibacteriana, somente as frações HEX e AcOEt, e os compostos isolados ácido oleanólico e canferitrin, revelaram atividade bactericida e/ou bacteriostática. A fração HEX demonstrou moderada atividade antibacteriana (CIM = 100 µg mL-1) para a bactéria Bacillus cereus, e fraca atividade antibacteriana (CIM = 600 a 1000 µg mL-1) para as bactérias Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Staphylococcus epidermidis, Providencia alcalifaciens e Acinetobacter calcoaceticus. A fração AcOEt demonstrou fraca atividade antibacteriana (CIM = 800 µg mL-1) para as bactérias Enterococcus faecalis, Bacillus cereus e Acinetobacter calcoaceticus. O ácido oleanólico revelou boa atividade antibacteriana para Staphylococcus aureus meticilina resistente (CIM = 100 µg mL-1),Listeria monocytogenes e Bacillus cereus (CIM = 25 µg mL1), e o canferitrin demonstrou boa atividade antibacteriana para as bactérias: Staphylococcus epidermidis, Shigella flexinerii, Salmonella typhimurium e Acinetobacter calcoaceticus (CIM = 100 µg mL-1). Este composto demonstrou excelente atividade antibacteriana para as bactérias Enterococcus faecalis (CIM = 3.9 µg mL-1) e Bacillus cereus (CIM = 8.5 µg mL-1). O extrato bruto, frações e compostos isolados da Lotus corniculatus v. São Gabriel demonstraram importante atividade anti-inflamatória e antibacteriana. Os compostos isolados: canferitrin, ácido oleanólico e ß-sitosterol podem ser responsáveis por estes efeitos anti-inflamatório e/ou antibacteriano. The Lotus corniculatus (Fabaceae) is distributed in many regions of the world and has a high agronomic value for its constituted: proanthocyanidins, flavonoids and oleanolic acid. This plant is used as food for cattle providing the enhancement of the weight and of milk production beyond the control of intestinal parasitic infections in the animals. The aim of this study was to evaluate the anti-inflammatory and anti-bacterial effects of crude extract (CE), fractions (hexane (HEX), ethyl acetate (AcOEt), n-butanol (BuOH) and aquous fraction (AF)), and isolated compounds (kaempferitrin, oleanolic acid and ß-sitosterol) from Lotus corniculatus v. São Gabriel. The aerial parts of Lotus corniculatus were dried at room temperature and this material (620 g) the crude extract (CE) was extracted by maceration with ethanol 96% for one month. The solvent was evaporated resulting in 78 g of crude extract (CE). The crude extract was fractionated by liquid-liquid extraction using solvents in growing order of polarity resulting in hexane (HEX), ethyl acetate (AcOEt), n-butanol (BuOH) and aqueous fraction (AF). From the HEX fraction it was isolated the oleanolic acid and the ß-sitosterol and from AcOEt fraction the kaempferitrin. To evaluate the anti-inflamatory activity, it was used the mouse model of pleurisy induced by carrageenan and the following inflammatory parameters were evaluated: leukocytes, exudation, myeloperoxidase (MPO) and adenosine-deaminase (ADA) activities, as well as, nitrite/nitrate (NOx) and interleukin-1 beta (IL-1ß) levels. In this experimental protocol, swiss mice were used in the in vivo experiments, which were distributed in different groups and they were treated with CE (100 - 400 mg/kg), HEX (50 - 200 mg/kg), AcOEt (100 - 400 mg/kg), BuOH (50 - 200 mg/kg), RA (25 - 200 mg/kg), kaempferitrin (50 - 100 mg/kg), oleanolic acid (10 - 100 mg/kg) or ß-sitosterol (10 - 100 mg/kg) 0,5 h before carrageenan (1%,i.pl.). The inflammatory parameters were evaluated 4 h after. All animals, except in the experiments that were analyzed enzymatic activities, the animals were previously pretreated (10 min.) with Evans blue dye (25 mg/kg, i.v.) in order to evaluate the exudation. Dexamethasone and indomethacin were used as anti-inflammatory reference drugs. To evaluate the anti-bacterial activity, it was used the microdilution in broth technical to determine the minimal inhibitory concentraton (MIC) and the minimal bactericidal concentration (MBC) methodology. In this protocol the crude extract (CE), fractions and isolated compounds were dissolved in dimethylsulfoxide (DMSO) and transferred to plate in serial dilution and, after, the bacterial inoculum were added. The gentamicin was used as the anti-bacterial reference drug. To the anti-inflammatory parameters, statistical differences between groups were determined by Student's t test and analysis of variance (ANOVA). Values of P < 0.05 were considered significant. The crude extract of Lotus corniculatus (200 - 400 mg/kg) and fractions (50 - 200 mg/kg), as well as its isolated compound (25 - 100 mg/kg) inhibited: lekocytes, neutrophils and exudation, the MPO and ADA activities, as well as NO and IL-1 levels (P < 0.05). Indomethacin and dexamethasone inhibited all the studied inflammatory parameters (P < 0.05). In regard to the anti-bacterial activity, only the HEX and AcOEt fractions and the isolated compounds, oleanolic acid and kaempferitrin, revealed anti-bacterial and/or bacteriostatic activities. The hexane fraction showed moderate anti-bacterial effect (MIC = 100 µg mL-1) on Bacillus cereus and weak anti-bacterial effect (MIC = 600 to 1000 µg mL-1) on Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Staphylococcus epidermidis, Providencia alcalifaciens and Acinetobacter calcoaceticus. The AcOEt fraction demonstrated a weak anti-bacterial activity (MIC = 800 µg mL-1) on Enterococcus faecalis, Bacillus cereus and Acinetobacter calcoaceticus.The Oleanolic acid, isolated from hexane fraction, exhibited a good anti-bacterial activity on methycillin-resistant Staphylococcus aureus (MIC = 100 µg mL-1), Listeria monocytogenes and Bacillus cereus (MIC = 25 µg mL-1) and the kaempferitrin, a compound isolated from this fraction, demonstrated a good anti-bacterial effect on: Staphylococcus epidermidis, Shigella flexinerii, Salmonella typhimurium and Acinetobacter calcoaceticus (MIC = 100 µg mL-1). This compound showed an excellent anti-bacterial activity on Enterococcus faecalis (MIC = 3.9 µg mL-1) and Bacillus cereus (MIC = 8.5 µg mL-1). The crude extract, fraction and isolated compound from Lotus corniculatus v. São Gabriel, demonstrated important anti-inflammatory and anti-bacterial activities. The isolated compounds: kampferitrin, oleanolic acid and ß-sitosterol can be responsible for these anti-inflammatory and/or anti-bacterial effects.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T00:57:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 289130.pdf: 934362 bytes, checksum: 45e1f5c2bc758369144b6b49b7c34dae (MD5) / O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito anti-inflamatório da Lotus corniculatus no modelo de pleurisia induzida por bradicinina, em camundongos. Materiais e métodos: As partes aéreas da L. corniculatus var. São Gabriel foram secas ao ar e cortadas. Ao material obtido foi adicionado etanol 96% para obter o extrato bruto hidroálcoólico (CE). Este foi fracionado por partição líquido-líquido utilizando hexano, acetato de etila, n-butanol e água, em ordem crescente de polaridade, resultando nas frações hexano (HEX), acetato de etila (AcOEt), butanol (BuOH), e aquosa (Aq). Os compostos 1 e 2 foram isolados das frações HEX e AcOEt por meio de coluna cromatográfica de sílica gel, e identificados como ácido oleanólico e canferitrina. Camundongos albinos suíços foram utilizados nos experimentos e a pleurisia foi induzida por bradicinina (BK), de acordo com metodologia descrita por Saleh et al. (1997). Inicialmente, diferentes grupos de animais foram tratados com diferentes doses de CE (25-200 mg/kg), HEX (5-25 mg/kg), AcOEt (5-25 mg/kg), BuOH (5-25 mg/kg), Aq (5-25 mg/kg), ácido oleanólico (1-5 mg/kg), ou canferitrina (1-10 mg/kg), 0,5 h antes da indução por BK. Os parâmetros inflamatórios (leucócitos, exsudação, atividade das enzimas mieloperoxidase (MPO) e adenosina-deaminase (ADA), e concentrações de nitrato/nitrito (NOx) e interleucina-17A (IL-17A)) foram avaliados 4 h após a indução da pleurisia. Diferenças estatísticas entre os grupos foram determinadas pela analise de variância (ANOVA), complementadas quando necessário, com Dunnett ou teste t de Student. Valores de p < 0,05 foram considerados significantes. Resultados: o CE, suas frações e compostos isolados inibiram significativamente os leucócitos, a exsudação, a atividade das enzimas MPO e ADA, assim como as concentrações de NOx e IL-17A (p < 0,05). Conclusão: A L. corniculatus apresentou importante efeito anti-inflamatório, principalmente pela inibição do influxo de leucócitos e exsudação causada pela BK. Este efeito parece ser em parte mediado pela inibição das enzimas MPO e ADA, e dos mediadores NO e IL-17A. Além disso, os compostos ácido oleanólico e canferitrina parecem ser responsáveis, em parte, pelo efeito anti-inflamatório observado.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2012-10-22T17:44:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 225204.pdf: 793572 bytes, checksum: c926504bdd61b55900b4d9275567811b (MD5)

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:19:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 317861.pdf: 1410239 bytes, checksum: a9a522b9a6436f3e67d49123748a3ad7 (MD5) Previous issue date: 2013 / Introdução: Rosmarinus officinalis L. (Laminaceae), conhecida como alecrim, é uma planta nativa da região mediterrânea e atualmente é cultivada em várias partes do mundo, incluindo o Brasil. Esta planta é empregada na medicina popular para o tratamento de doenças inflamatórias como a asma brônquica. Além disso, estudos têm demonstrado que esta planta possui atividades antimicrobiana, antioxidante, anti-inflamatória, hipoglicemiante, hepatoprotetora, antiplaquetária, antinoceptiva e antiviral. Objetivos: Avaliar o efeito anti-inflamatório do extrato bruto sem óleo (EBSO), frações e compostos isolados de R. officinalis L., administrada por via intraperitoneal (i.p.), no modelo da pleurisia induzida pela carragenina em camundongos. Metodologia: As partes aéreas frescas de R. officinalis L. foram submetidos às técnicas de extração por arraste de vapor para retirada dos óleos essenciais e de maceração em etanol 96%, para obtenção do extrato bruto sem óleo (EBSO). Este extrato foi particionado com hexano, acetato de etila e etanol para obter as frações hexano (HEX), acetato de etila (AcOEt) e etanólica (EtOH) ambas sem óleos essenciais. Os compostos isolados, Carnosol (CAR) e Ácido rosmarínico (RA), foram isolados da fração AcOEt e EBSO, respectivamente. No protocolo para identificar e elucidar a estrutura dos compostos isolados desta planta foram utilizadas análises de eletroforese capilar, características físicas, infravermelho, ressonância magnética nuclear (RMN de 1H e 13C). Neste protocolo experimental foram utilizados camundongos albinos Swiss. A pleurisia foi induzida segundo metodologia descrita por SALEH et al., 1996 e, foram avaliados os seguintes parâmetros inflamatórios no lavado da cavidade pleural: leucócitos, exsudação, atividades das enzimas mieloperoxidase (MPO) e adenosina-desaminase (ADA), e as concentrações de nitrito/nitrato (NOx), interleucina-17A (IL-17A) e interleucina-10 (IL-10), além do RNAm para IL-17A e IL-10. Neste estudo, diferentes grupos de animais foram tratados com EBSO (10 - 100 mg/kg), HEX (10 - 50 mg/kg), EtOH (10 - 50 mg/kg), AcOEt (10 - 50 mg/kg), CAR (1 - 10 mg/kg) ou RA (2,5 - 10 mg/kg) administrados (i.p.) 0,5 h antes da carragenina (1%) administrada por via intrapleural (i.pl.). Os parâmetros inflamatórios foram avaliados 4 h após. Para avaliar a exsudação, os animais foram tratados previamente com solução Azul de Evans (25 mg/kg, i.v.). Diferenças estatísticas entre os grupos foram determinadas pela análise dos testes de variância (ANOVA), e complementadas pelo teste Dunett e/ou teste t de Student. Valores de p < 0,05 foram considerados significativos. Resultados: EBSO (50 - 100 mg/kg), HEX (25 - 50 mg/kg), EtOH (50 mg/kg), AcOEt (25 - 50 mg/kg), CAR (2,5 - 10 mg/kg) e RA (5 - 10 mg/kg) inibiram: leucócitos, neutrófilos, mononucleares e exsudação (p < 0,05). Da mesma forma, EBSO (50 mg/kg), HEX (25 mg/kg), EtOH (50 mg/kg), AcOEt (25 mg/kg), CAR (2,5 mg/kg) e RA (5 mg/kg) inibiram as atividades das enzimas MPO e ADA, as concentrações de NOx, as concentrações/RNAm para IL-17A, além de aumentar as concentrações/RNAm para IL-10 (p < 0,05). Conclusões: Os resultados demonstraram que a Rosmarinus officinalis L. possui importante atividade anti-inflamatória isto devido principalmente à redução do influxo de leucócitos e da exsudação. Este efeito parece ser em parte mediado pela inibição da liberação e/ou produção de mediadores pró-inflamatórios (NOx, IL-17A) e aumento da liberação e/ou produção de mediadores anti-inflamatórios (IL-10), incluindo a modulação da expressão do RNAm. Ainda, o carnosol e o ácido rosmarínido, parecem ser, em parte, responsáveis pelo efeito anti-inflamatório apresentado pela Rosmarinus officinalis L.<br> / Abstract : Introduction: Rosmarinus officinalis L. (Laminaceae), known as rosemary, is a native plant from Mediterranean region, which is currently cultivated in many parts of the world, including Brazil. This plant is widely used in folk medicine to treat inflammatory diseases, such as bronchial asthma. Furthermore, studies have demonstrated that this plant has antimicrobial, antioxidant, anti-inflammatory, hypoglycemic, hepatoprotective, antiplatelet, antinociceptive and antiviral activities. Objectives: To evaluate the anti-inflammatory effect of the crude extract oil free (EBSO), fractions and isolated compounds from R. officinalis L., administered intraperitoneally (i.p.) in the carrageenan-induced murine model of pleurisy. Methodology: The fresh R. officinalis L. aerial parts were underwent extraction through the steam technique to remove the essential oils and maceration with ethanol 96%, to obtain the crude extract oil free (EBSO). This extract was partitioned with hexane, ethanol and ethyl acetate solutions to obtain the hexane (HEX), ethyl acetate (AcOEt) and ethanol (EtOH) fractions, both with essential oils free. The isolated compounds, carnosol (CAR) and rosmarinic acid (RA) were isolated from the AcOEt fraction and EBSO respectively. Analysis of capillary electrophoresis, physical characteristics, infrared, nuclear magnetic resonance (1H and 13C NMR) were used to identify and elucidate the structure of the isolated compounds present in the R. officinalis L. Swiss mice were used throughout the experiments. Pleurisy was induced according to the methodology described by SALEH et al., 1996 and, the following inflammatory parameters were evaluated in the fluid leakage of the pleural cavity: leukocytes, exudation, myeloperoxidase (MPO) and adenosine deaminase (ADA) activities, and the concentrations of nitrite/nitrate (NOx), interleukin-17A (IL-17A), and interleukin-10 (IL-10), and mRNA for IL-17A and for IL-10. In this study, different groups of animals were pretreated with EBSO (10 - 100 mg/kg), HEX (10 - 50 mg/kg), EtOH (10 - 50 mg/kg), AcOEt (10 - 50 mg/kg), CAR (1 - 10 mg/kg) or RA (2.5 - 10 mg/kg) administered (i.p.) 0.5 h before carrageenan (1%) which was administered by intrapleural route (i.pl.). The inflammatory parameters were evaluated after 4 h. To evaluate the exudation, the animals were pretreated with Evans blue dye (25 mg/kg, i.v.). Statistical differences between groups were determined by analysis of variance test (ANOVA), and supplemented by test Dunett and/or Student's t test. p < 0.05 was considered significant. Results: EBSO (50 - 100 mg/kg), HEX (25 - 50 mg/kg), EtOH (50 mg/kg), AcOEt (25 - 50 mg/kg), CAR (2.5 - 10 mg/kg) and RA (5 - 10 mg/kg) inhibited leukocytes, neutrophils, mononuclears and exudation (p < 0.05). Also, EBSO (50 mg/kg), HEX (25 mg/kg), EtOH (50 mg/kg), AcOEt (25 mg/kg), CAR (2.5 mg/kg) and RA (5 mg/kg) inhibited the MPO and ADA activities, concentrations of NOx, concentration/mRNA for IL-17A, and increased concentration/mRNA for IL-hj10 (p <0.05). Conclusions: The results demonstrated that the Rosmarinus officinalis L. has important anti-inflammatory activity mainly due to reduce the influx of leukocytes and exudation. This effect appears to be related to the reduction of release and/or production of pro-inflammatory mediators (NOx, IL17A) and increased release and/or production of anti-inflammatory mediators (IL-10), including modulation of mRNA expression. Also, the carnosol and rosmarínic acid appear to be partly responsible for the anti-inflammatory effect presented by Rosmarinus officinalis L.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-11-29T13:03:50Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcia de Jesus A. Silva.pdf: 2397176 bytes, checksum: 10d2601e2d4c7bb5bd425131e63a0ebc (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-11-29T13:04:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcia de Jesus A. Silva.pdf: 2397176 bytes, checksum: 10d2601e2d4c7bb5bd425131e63a0ebc (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-11-29T13:04:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcia de Jesus A. Silva.pdf: 2397176 bytes, checksum: 10d2601e2d4c7bb5bd425131e63a0ebc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-29T13:04:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcia de Jesus A. Silva.pdf: 2397176 bytes, checksum: 10d2601e2d4c7bb5bd425131e63a0ebc (MD5) Previous issue date: 2016-04-29 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Inflammation is a physiological process that begins in response to infection or tissue damage. It is a mechanism focusing on tissue repair after injury and consists of a cascade of cellular and microvascular events that aims to remove damaged tissue and generation of new ones. In this cascade is observed an increasing in microvascular permeability, followed by adhesion and cell infiltration at the site of injury, apoptosis, and growth of new tissue and blood vessels. The nitrostyrene is a group of compounds consisting of an aromatic ring linked to a chain of the nitro group (NO2). It has been studied by having various biological activities such as anti-apoptotic, anti-platelet or anti-microbial, although few studies have been made for the anti-inflammatory activity of these compounds. The aim of this study was to evaluate anti-inflammatory activity of four new compounds from the class of nitrostyrene (NPA, 7B, 7D and 7E) in in vitro/in vivo assays. Initially, the compounds were submitted to in vitro testing in a murine macrophages model activated by lipopolysaccharide (LPS) and MRC5 human lung fibroblast in order to assess the cytotoxic potential of such compounds. Shortly thereafter, they were evaluated for inhibition of nitric oxide (NO·), for dosage of the cytokine TNF-α and evaluation of the expression of proteins involved in the inflammatory process. To evaluate the acute inflammatory process in vivo was performed edema induction by carrageenan tests on zebrafish model of LPS-induced pleurisy in mice. The four new compounds tested showed cytotoxic activity on J774A.1 and MRC5 cell when tested in the concentrations (3.12-25 μg/ml). For THP-1 cytotoxic activity was starting concentration of 10 μg/ml. All compounds inhibited nitric oxide production by macrophages activated by LPS but only the NPA showed a possibly significant concentration-response at the concentrations of 10 and 20 μg/ml. This same compound also reduced TNF-α, NF-B and ERK 1/2 levels in THP-1 cells. The NPA possibly also inhibited the carrageenan-induced edema in Zebrafish fish and leukocyte migration into the pleural cavity of mice by inhibiting the intracellular signaling pathways NF-B and ERK 1/2 in in vivo assays. In conclusion, compounds tested in this study not only presented significant cytotoxic activity, as also showed an excellent in vitro/in vivo anti-inflammatory potential, most likely by acting in the inhibition of NF-B and ERK 1/2 pathways. Data were important to explore the biological activity of these novel compounds and their possible application in the treatment of inflammatory diseases. / A inflamação é um processo fisiológico que se inicia em resposta a uma infecção ou dano aos tecidos. É um mecanismo direcionado ao reparo tecidual após a lesão e consiste em uma cascata de eventos celulares e microvasculares que tem como objetivo a remoção de tecidos danificados e a geração de outros novos. Nessa cascata é observado o aumento da permeabilidade microvascular, seguido pela adesão e infiltração de células no local da lesão, apoptose celular e crescimento de novos tecidos e vasos sanguíneos. Os nitroestirenos são um grupo de compostos constituído por anel aromático ligado a uma cadeia do grupo nitro (NO2). Eles têm sido estudados por apresentar diversas atividades biológicas tais como anti-apoptótica, antiplaquetária e antimicrobiana, entretanto poucas pesquisas têm sido realizadas quanto à atividade anti-inflamatória desses compostos. O objetivo deste estudo foi avaliar atividade anti-inflamatória de quatro novos compostos da classe dos nitroestirenos (NPA, 7B, 7D e 7E) em ensaios in vitro/in vivo. Inicialmente, os compostos foram submetidos a ensaio in vitro em modelo de macrófagos murino ativados por lipopolissacarídeo (LPS) e fibroblastos de pulmão humano MRC5, a fim de avaliar a capacidade citotóxica desses compostos. Logo em seguida, foram avaliados quanto à inibição de óxido nítrico (NO·), dosagem da citocina TNF-α e avaliação da expressão de proteínas envolvidas com o processo inflamatório. Para avaliar o processo anti-inflamatório agudo in vivo foi realizado ensaios de indução do edema por carragenina em peixe Zebrafish e o modelo de pleurisia induzido por LPS em camundongos. Os quatro novos compostos testados apresentaram atividade citotóxica em célula J774A.1 e MRC5 quando testados nas concentrações (3.12-25 μg/mL). Para THP-1 a atividade citotóxica foi apartir da concentração 10 μg/mL. Todos os compostos inibiram a produção de óxido nítrico em macrófago ativado por LPS, entretanto somente NPA apresentou uma possível concentração-resposta significativa nas concentrações de 10 e 20 μg/mL. Este mesmo composto também reduziu os níveis de TNF-α, NF-B e ERK 1/2 em células THP-1. O NPA também possivelmente inibiu o edema induzido por carragenina em peixe Zebrafish e a migração de leucócitos na cavidade pleural de camundongos através da inibição das vias de sinalização intracelular NF-B e ERK 1/2 em ensaios in vivo. Em conclusão, compostos testados neste estudo nao somente apresentaram atividade citotóxica significativa, como também demonstraram um excelente potencial anti-inflamatório in vitro e in vivo, provavelmente por atuação de inibição das vias NF-B e ERK 1/2. Os dados obtidos foram importantes para exploração da atividade biológica destes novos compostos e sua possível aplicação na terapêutica de doenças inflamatórias.