Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2017-07-07T13:53:50Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2546672 bytes, checksum: c5c0e26a4ec7b88d290cf26347b25d8f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-07T13:53:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2546672 bytes, checksum: c5c0e26a4ec7b88d290cf26347b25d8f (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Various epidemiological studies have suggested an association between diets rich in polyphenols and a lower risk of cardiovascular disease. Syzygium jambulanum is rich in polyphenols, and thus, the objective of this work was to evaluate the cardiovascular effects induced by lyophilized Syzygium jambulanum fruit juice (LSFSJ) using in vivo and in vitro techniques. LSFSJ presented a high polyphenols content (988.55 ± 5.41 mg of Gal Acid / 100g), and the presence of flavonoids and steroids. In normotensive rats, LSFSJ (5, 10, 30, 50 and 100 mg / kg, i.v.) induced hypotension and bradycardia at the maximal dose was observed. In superior mesenteric rat artery rings pre-contracted with phenylephrine (FEN) (1 μM), LSFSJ (1 - 5000 μg / mL) induced concentration-dependent relaxation in the presence (MR = 105.3 ± 3.54% (EC50 = 1172.7 ± 116.1 μg / mL) and absence of endothelium (MR = 106.4 ± 4.5%, EC50 = 1506.5 ± 148.1 μg / mL). These data suggest that the LSFSJ-induced response appears independent from endothelium released factors. All subsequent experiments were performed in the absence of endothelium. The LSFSJ contraction response induced by depolarizing tyrode solution with 60 mM KCl (MR = 28.7 ± 2.8%) was significantly lower than the LSFSJ response in FEN induced contraction. To investigate the involvement of potassium channels, depolarizing tyrode solution with 20 mM KCl or TEA at different concentrations was used. The LSFSJ response in contraction induced by depolarizing tyrode solution with 20 mM KCl was significantly attenuated (MR = 75.9 ± 6.0). The LSFSJ-induced response was also significantly attenuated in the presence of TEA at concentrations of 1 mM (MR = 62.5 ± 9.8%); 3mM (MR = 40.9 ± 3.8%) and 5mM (MR = 10.3 ± 3.7%). To investigate potassium channel subtypes involved in the response, 4- aminopyridine, a selective blocker of KV channels, glibenclamide (10 μM), a selective blocker of KATP channels, BaCl2 (30 μM), a selective blocker of KIR and iberiotoxin channels 100 nM) or TEA (1mM), a selective blocker of BKCa channels were used. In the simultaneous presence of differing potassium channel blockers, we observed significant attenuation of the LSFSJ effect (MR = 23.9 ± 3.4%), this was also observed in the presence of 4-aminopyridine (MR = 33.6 ± 5.9%), and in the presence of BaCl2 or glibenclamide, we also observed an attenuation of the maximum effect respectively (MR = 73.5 ± 6.9%, MR = 72.3 ± 4.3%). However, incubation with iberiotoxin (MR = 94.2 ± 8.1%) did not promote alteration in the response produced by LSFSJ. Through calcium influx we also investigated the involvement of CaV channels in the JSJ-induced response; in which there were no changes in maximal effect. However, its potency was altered. Also, an activator of L-type CaV channels, the S (-) - Bay K 8644, was used; and demonstrated possible participation of these channels in the vasorelaxant effect of JSJ. In conclusion, JSJ causes hypotension and vasorelaxation in rats, and this vaso-relaxing effect mainly involves three subtypes of potassium channels: KV, KATP and KIR without ruling out possible participation of the channels for Ca2+. / Vários estudos epidemiológicos têm sugerido uma associação entre dietas ricas em polifenóis e um menor risco de doenças cardiovasculares. Dentre as frutas ricas em polifenóis encontra-se a Syzygium jambulanum. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi avaliar os efeitos cardiovasculares induzidos pelo liofilizado do suco da fruta Syzygium jambulanum (LSFSJ), utilizando técnicas in vivo e in vitro. O LSFSJ apresentou um alto teor de polifenóis (988,55 ± 5,41 mg de Ác. Gal/100g) e presença de flavonoides e esteroides. Em ratos normotensos, o LSFSJ (5; 10; 30, 50 e 100 mg/kg, i.v.) induziu hipotensão e observou-se uma bradicardia na dose máxima. Em anéis de artéria mesentérica superior de rato, pré-contraídos com fenilefrina (FEN) (1 μM), o LSFSJ (1 - 5000 μg/mL) induziu relaxamento dependente de concentração na presença (Emáx = 105,3 ± 3,54 %; CE50= 1172,7± 116,1 μg/mL) e ausência do endotélio (Emáx = 106,4 ± 4,5 %; CE50 = 1506,5 ± 148,1 μg/mL). Esses dados sugerem que a resposta induzida pelo LSFSJ parece ser independente dos fatores liberados pelo endotélio. Todos os experimentos seguintes foram realizados na ausência do endotélio. A resposta do LSFSJ na contração induzida por solução despolarizante de tyrode com 60 mM de KCl (Emáx = 28,7 ± 2,8 %) foi significativamente menor do que a resposta do LSFSJ na contração induzida por FEN. Para investigar o envolvimento dos canais para potássio foram utilizados solução despolarizante de tyrode com 20 mM de KCl ou TEA em diferentes concentrações. A resposta do LSFSJ na contração induzida por solução despolarizante de tyrode com 20 mM de KCl foi significativamente atenuada (Emáx = 75,9 ± 6,0). A resposta induzida pelo LSFSJ também foi significativamente atenuada na presença de TEA nas concentrações de 1 mM (Emáx= 62,5 ± 9,8 %); 3 mM (Emáx= 40,9 ± 3,8 %) e 5 mM (Emáx= 10,3 ± 3,7 %). Para investigar os subtipos de canais para potássio envolvidos na resposta foram utilizados: 4-aminopiridina, bloqueador seletivo dos canais KV, glibenclamida (10 μM), bloqueador seletivo dos canais KATP, BaCl2 (30 μM), bloqueador seletivo dos canais KIR e iberiotoxina (100 nM) ou TEA (1mM), bloqueador seletivo dos canais BKCa. Na presença dos diferentes bloqueadores dos canais para potássio, simultaneamente, observamos uma atenuação significativa do efeito do LSFSJ (Emáx = 23,9 ± 3,4 %), esse efeito também foi observado na presença de 4- aminopiridina (Emáx = 33,6 ± 5,9 %), na presença de BaCl2 ou glibenclamida também observamos uma atenuação do efeito máximo (Emáx = 73,5 ±6,9 %; Emáx = 72,3 ± 4,3 %) respectivamente. Contudo a incubação de iberiotoxina (Emáx = 94,2 ± 8,1 %) não promoveu alteração da resposta produzida pelo LSFSJ. Também investigamos o envolvimento dos canais CaV na resposta induzida pelo JSJ através do influxo de cálcio no qual não observamos alterações no efeito máximo contudo houve sua potencia foi alterada, além disso um ativador dos canais CaV do tipo-L, o S(-)-Bay K 8644, também foi utilizado o que demonstrou uma possível participação destes canais no efeito vasorrelaxante do JSJ. Em conclusão o JSJ causa hipotensão e vasorrelaxamento em ratos, e esse efeito vasorrelaxante envolve majoritariamente três subtipos de canais para potássio o KV, o KATP e o KIR sem descartar uma possível participação dos canais para Ca2+

A juçara, Euterpe oleracea Mart., fruta indígena da Amazônia Legal, é rica em fitoquímicos com atividades anti-oxidante, antiinflamatória e anti-câncer. Este estudo tem por objetivo analisar os efeitos do extrato hidroalcoólico da casca, caroço e fruto total da juçara em diferentes linhagens de células malignas humana. Os frutos foram coletados no Parque da Juçara, localizado no Maracanã, município de São Luís, seguida da confecção da excicata que se mantém registrada no Herbário Rosa Mochel do Núcleo de Estudos Biológicos da Universidade Estadual do Maranhão. Os extratos hidroalcoólicos da casca, caroço e fruto total foram extraidos no Laboratório de Farmacologia e Psicobiologia da UERJ. As linhagens celulares utilizadas nos ensaios foram MCF-7 (adenocarcinoma de mama), CACO-2 e HT-20 (adenocarcinoma colo retal) e adenocarcinoma na mama (MDA-MB-468). As linhagens foram tratadas com 10, 20 e 40g/mL dos extratos por 24 e 48 horas e feitas às análises. Células MCF-7 controle apresentaram núcleo proeminente com nucléolos evidentes. Após tratamento com o extrato hidroalcoólico da casca da juçara, as células mostraram morfologia arredondada com retração do citoplasma. O ensaio de viabilidade com MTT ((3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)) demonstrou uma redução na viabilidade das células. Após 48 horas, o tratamento das células com 20g/mL do extrato da casca reduziu a viabilidade sendo que o efeito citotóxico do tratamento com 40g/mL do extrato da casca foi potencializado. Células tratadas com 10g/mL do extrato do caroço de juçara apresentavam-se arredondadas com consequente redução no volume celular. A concentração 20g/mL de extrato hidroalcoólico do caroço, causou severa redução no volume das células e ocasionou o surgimento de vacúolos intracelulares. O mesmo foi observado após tratamento com 40g/mL. O tratamento com 40g/mL do extrato hidroalcoólico do fruto total, modificou drasticamente a morfologia das células MCF-7 causando vacuolização e aparente lise com perda do conteúdo citoplasmático e o ensaio da viabilidade com MTT demonstrou redução na viabilidade das células MCF-7 tratadas com 20 e 40g/mL após 24 horas de tratamento. Análises por MET (Microscopia Eletrônica de Transmissão) demonstraram o surgimento de vesículas autofágicas, cuja comprovação deu-se com a identificação da expressão da proteína LC3BII na membrana do autofagossoma pela técnica de Western Blotting. Mediante o demonstrado pelos experimentos, com as linhagens MCF-7 e MDA-MB-468, confirma-se que as frações isoladas do extrato do caroço da juçara, promove modificações celulares indicativas de autofagia a partir de 10g/mL, em 24 horas. O núcleo permaneceu íntegro, não apresentando características de núcleo apoptótico. Os dados são conclusivos para ocorrência de morte celular por autofagia em linhagem celulares de carcinoma de mama MCF-7 quando tratadas com extrato hidroalcoólico da casca, caroço e fruto total da juçara do Maranhão, agente quimiopreventivo no câncer de mama estrogênio-dependente. / Juçara, Euterpe oleracea Mart., an indigenous fruit from Amazon, is rich in phytochemicals with antioxidant, anti-inflammatory and anti-cancer activity. This study aims to analyze the effects of the hydroalcoholic extract of the bark, seed and total fruit of juçara in different human malignant cell lines. Fruits were collected at the Maracana Ecological Park, in São Luís, followed by excicata manufacturing that remains registered in the Herbarium Rosa Mochel from the Nucleus of Biological Studies at the State University of Maranhão. The hydroalcoholic extracts of bark, seed and fruit were all obtained in the Laboratory of Pharmacology and Psychobiology UERJ. The cell lines used in the tests were MCF-7 and MDA-MB-468 (breast adenocarcinoma) and CACO-2 and HT-20 (colorectal adenocarcinoma). Strains were treated with 10, 20 and 40μg/mL of extracts for 24 and 48 hours. Control MCF-7 cells showed prominent nucleus with evident nucleoli. After treatment with the hydroalcoholic extract from the bark of juçara, the cells showed rounded morphology with retraction of the cytoplasm. The MTT viability assay showed a reduction in cell viability. After 48 hours, treatment of cells with 20μg/mL of bark extract reduced cell viability and the cytotoxic effect of treatment with 40μg/mL extract of the bark was potentiated. Cells treated with 10μg/mL of the bark extract were rounded with consequent reduction in cell volume. The concentration of 20μg/mL of bark extract caused severe reduction in volume of the cells and caused the appearance of intracellular vacuoles. The same was observed after treatment with 40μg/mL. Treatment with 40μg/mL of the hydroalcoholic extract of total fruit dramatically changed the morphology of the MCF-7 cells causing vacuolization and lysis with apparent loss of cytoplasmic contents. MTT assay showed a reduction in viability of MCF-7 cells treated with 20 and 40μg/mL after 24 hours of treatment. Analysis by electron microscopy showed the appearance of autophagic vacuoles. Autophagosome protein LC3BII was identified by Western Blotting technique. It is confirmed that the isolated fractions of the bark extract from juçara promotes cellular changes indicative of autophagy from 10μg/mL in 24 hours. The nuclei remained intact, showing no apoptotic features. The data are conclusive for the occurrence of autophagy in carcinoma cell line MCF-7 breast treated with hydroalcoholic bark, seed and fruit from juçara.

O café uma é das bebidas mais consumidas no mundo e seus efeitos benéficos são objetivo do estudo durante anos. O café, por ser uma bebida antioxidante, pode inibir as enzimas hepáticas diminuindo a lesão de hepatócitos e com isso temos um efeito hepatoprotetor. Esta melhora no fígado é relacionado diretamente à ingestão de café. Portanto, este estudo tem como objetivo avaliar o efeito do consumo de café em grupos de portadores de hepatite B crônica e de hepatite C crônica supondo que o café pode retardar a progressão da lesão hepática. Métodos: Um total de 1169 pacientes com doenças hepáticas crônicas foram selecionados do banco de dados do ambulatório de hepatologia do Hospital das Clínicas de São Paulo, sendo 514 (44%) com o vírus da hepatite B (HBV) e 655 (56%) com hepatite C (HCV). Foram consideradas as variáveis como tabagismo, etilismo, consumo de café, exames laboratoriais (ALT, AST, GGT, INR, plaquetas, bilirrubina total, bilirrubina direta e bilirrubina indireta, albumina e creatinina), APRI e FIB4 para avaliar fibrose e o grau de lesão hepática. Resultados: Através da análise descritiva dos dados observamos que 758/1169 (65%) pacientes consumiam café. Pacientes que consumem café apresentam menores índices de AST (p=0,004), APRI (p=0,002) e FIB4 (p=0,003). Ao se analisar por etiologia observou-se que pacientes portadores de hepatite crônica C que consumem café apresentam menores índices de ALT (p=0,021), AST (p=0,005), APRI (p=0,013) e FIB4 (p=0,013) e maiores níveis de albumina (p=0,006). O mesmo não foi observado para os portadores de hepatite crônica B. Conclusões: A ingestão de café está associada com a redução das enzimas do fígado e parece estar diretamente ligada a diminuição dos valores de APRI e FIB4 em pacientes portadores de hepatite crônica C. O mesmo não é observado para hepatite crônica B / Coffee is one of the most consumed beverages in the world and its beneficial effects are objective of study for years. Coffee is considered an antioxidant drink and can inhibit injury of hepatocytes decreasing liver enzymes, thus having a hepatoprotective effect. This improvement in the liver is directly related to coffee intake. Therefore, this study aims to evaluate the consumption of coffee in groups of chronic hepatitis B and C patients assuming that coffee can slow the progression of liver damage. Methods: 1169 patients with chronic liver disease were consecutively selected in our clinic hepatology database of the Hospital das Clinicas in Sao Paulo. There were 514 (44%) patients with hepatitis B virus (HBV) and 655 (56%) with hepatitis C virus (HCV). Variables such as smoking, alcohol consumption, coffee consumption, laboratory tests (ALT, AST, GGT, INR, platelet, total bilirubin, direct bilirubin and indirect bilirubin, albumin and creatinine), APRI and FIB4 were analyzed to assess fibrosis and degree of liver injury. Results: Through descriptive analysis, we found that 758/1169 (65%) patients consumed coffee. Patients who consume coffee have lower levels of AST (p = 0.004), APRI (p = 0.002) and FIB4 (p = 0.003). When analyzed by etiology it was observed that patients with chronic hepatitis C who consume coffee have lower levels of ALT (p = 0.021), AST (p = 0.005), APRI (p = 0.013) and FIB4 (p = 0.013) and higher albumin level (p = 0.006). The same was not observed for patients with chronic hepatitis B. Conclusions: Coffee intake is associated with reduced liver enzymes and appears to be directly linked to the reduction of APRI and FIB4 values in patients with chronic hepatitis C. The same is not observed for chronic hepatitis B

O câncer de mama é o segundo tipo de neoplasia mais prevalente no mundo e o mais comum entre as mulheres. É descrito que o padrão de consumo alimentar materno e paterno está relacionado à suscetibilidade da prole ao desenvolvimento de doenças crônicas não transmissíveis, inclusive o câncer. A amora-preta é uma das frutas com maior conteúdo antioxidante e seus compostos bioativos possuem atividade antioxidante, anticarcinogênica e anti-inflamatória. Sendo assim, o presente trabalho propõe avaliar os efeitos do consumo materno e/ou paterno de extrato de amora-preta (Rubus spp.) na suscetibilidade da prole feminina ao desenvolvimento de neoplasias mamárias quimicamente induzidas. Para tanto, camundongos da linhagem C57BL/6 foram divididos aleatoriamente em 4 grupos: pai amora (PA), mãe amora (MA), pai e mãe amora (PMA) e controle (CTRL). Os pais receberam extrato de amora-preta logo após o desmame durante 8 semanas e as mães receberam o extrato durante a gestação e lactação. O extrato de amora-preta foi administrado na água de beber (0.84g de antocianinas/L) ad libitum. Os pais tratados com extrato de amora apresentaram redução na atividade enzimática da superóxido dismutase (SOD) e da catalase (CAT) no testículo (p<0.05 e p<0.001, respectivamente), aumento na capacidade antioxidante plasmática, na porcentagem de espermatozoides normais e na produção diária de espermatozóides em relação ao grupo controle (p<0.001 para todos). Além disso, os grupos PA, MA e PMA apresentaram aumento na taxa de prenhez (p<0.05) e redução da mortalidade perinatal (p<0.01, p<0.05 e p<0.001, respectivamente). Em relação à prole feminina não submetida à carcinogênese foi observada redução na capacidade antioxidante plasmática nos grupos PA (p<0.001) e MA (p<0.01), enquanto o grupo PMA apresentou aumento nesse parâmetro (p<0.001). No desenvolvimento da glândula mamária, houve aumento do desenvolvimento epitelial nos grupos PA, MA e PMA (p<0.001 para todos), de diferenciação nos grupos MA e PMA (p<0.01 para ambos) e da taxa de apoptose nos grupos MA e PMA (p<0.05), além de redução no número de TEBs nos grupos PA, MA e PMA (p<0.01, p<0.001 e p<0.001, respectivamente). Não foram observadas alterações significativas nas filhas submetidas à indução química da carcinogênese mamária por DMBA. Assim, é possível concluir que apesar de ter alterado o desenvolvimento da glândula mamária, o consumo materno e/ou paterno de extrato de amora-preta não foi capaz de impactar sobre a suscetibilidade da prole feminina à carcinogênese mamária quimicamente induzida. / Breast cancer is the second most prevalent type of cancer in the world and the most common among women. It is known that maternal and paternal food intake pattern are related to offspring susceptibility to non-communicable diseases, including cancer. Blackberry is one of the fruits with high antioxidant content and its compounds have antioxidant, anticarcinogenic and anti-inflammatory properties. So, the aim of the present study was evaluate the effects of maternal and/or paternal blackberry extract consumption on female offspring susceptibility to chemically-induced breast carcinogenesis. Thus, C57BL/6 mice were divided into 4 groups: father blackberry (FB), mother blackberry (MB), father and mother blackberry (FMB) and control (CTRL). Fathers received blackberry extract from weaning during 8 weeks and the mothers were treated during gestation and lactation. Blackberry extract was given in the drink water (0.84g anthocyanins/L) ad libitum. Fathers treated with blackberry had a reduction on superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities in the testis (p<0.05 and p<0.001, respectivelly), an increase on plasmatic antioxidant capacity, percentage of normal sperm and daily sperm production in relation to control group (p<0.001 for all comparisons). Moreover, FB, MB and FMB groups had an increase of pregnancy rate (p<0.05) and a decrease of perinatal mortality (p<0.01, p<0.05 and p<0.001, respectively). Female offspring had a reduction of plasmatic antioxidant capacitity in FB (p<0.001) and MB (p<0.01) groups, while FMB group showed an increase in this parameter (p<0.001). On mammary gland development, it was observed higher epithelial development in FB, MB and FMB groups (p<0.001 for all comparisons), increased differentiation in MB and FMB groups (p<0.01 for both) and higher apoptosis rate in MB and FMB groups (p<0.05 for both), besides decreased TEBs number in FB, MB and FMB groups (p<0.01, p<0.001 and p<0.001, respectively). It was not found significant differences in the female offspring submitted to chemically-induced breast carcinogenesis. So, it is possible to conclude that in spite of maternal and/or paternal blackberry extract consumption changed the mammary gland development, it was not able to change the female offspring susceptibility to chemically-induced breast carcinogenesis.

A deterioração oxidativa de alimentos é o fator determinante na qualidade sensorial e nutricional do produto, podendo ocorrer em alimentos complexos tanto na fase contínua como na fase dispersa. Em geral, a formação de radicais e espécies reativas de oxigênio e nitrogênio é o evento primário que ocorre priori ao progresso da oxidação de componentes e estruturas sensíveis e está comumente associado a eventos na fase aquosa. A oxidação de lipídeos é frequentemente investigada em alimentos e em meio biológico separadamente dos eventos no meio aquoso e a proteção antioxidante somente avaliada na fase dispersa. Entretanto, a oxidação de proteínas e eventos na fase contínua vêm despertando considerável interesse e aparentemente antioxidantes eficientes na fase dispersa não protegem de forma eficaz as proteínas e os componentes na fase contínua. Um futuro progresso na proteção antioxidante de alimentos e sistemas biológicos origina de uma abordagem holística dos processos redox envolvidos em ambas as fases dispersa e contínua, bem como o uso combinado de espécies antioxidantes e antiredutoras para um superior efeito antiradical global. Neste sentido, foram preparados três novos compostos antiradicais de dupla função (antioxidante e antiredutor) com adequado balanço hidrofílico-lipofílico e aprimorada propriedade antiradical global. Os antiradicais diferulato de astaxantina, retinoato de quercetina e retinoato de epicatequina se mostraram melhores antioxidantes e antiredutores do que seus precursores isoladamente ou em misturas, apresentando superior eficiência na desativação do oxigênio singlete excitado, captação do radical 1-hidroxietila, menor efeito pró-oxidante em sistemas de oxidação catalisados por íons de ferro, e eficiência na redução do reativo estado triplete da safranina (E1/2 = 1,48 V vs. NHE). / The oxidative deterioration of foods is the determining factor in the sensory and nutritional quality of the product, which may occur in complex food both at the continuous and the dispersed phases. In general, the formation of radicals and reactive oxygen and nitrogen species is the primary event that occurs prior to the progress of oxidation of components and sensitive structures and is commonly associated with events in the aqueous phase. The oxidation of lipids is often investigated in food and biological media separately from the events in the aqueous phase and the measurement of the antioxidant protection is only evaluated in the dispersed phase. However, the oxidation of proteins and the events in the continuous phase have attracted considerable interest and apparently, efficient antioxidants in dispersed phase do not effectively protect proteins and components in the continuous phase. A further progress in the antioxidant protection of food and biological systems arise from a holistic approach of the redox processes involved in both the dispersed and continuous phases as well as the combined use of antioxidant and antireductant species for a superior overall antiradical effect. In this sense three new antiradical compounds with dual function (antioxidant and antireductant) were prepared with proper hydrophilic-lipophilic balance and global antiradical properties. The antiradicals astaxanthin diferulate, epicatechin retinoate, and quercetin retinoate are shown to be better antioxidant and antireductant than their precursors, isolated or in mixture, exhibiting enhanced singlet excited oxygen deactivation, 1-hydroxyethyl radical scavenging, lower pro-oxidative effect in the oxidative system catalysed by iron ions and an efficient reduction of the reactive triplet state of safranine (E1 / 2 = 1.48 V vs. NHE).

Special attention has been focused on protection against diseases associated with oxidative stress such as cancers, diabetes, cardiovascular diseases, aging and neurodegenerative disease in the last years. Previous reports indicate that highcholesterol diets induced oxidative stress and hypercholesterolemia in rats. Some dietary compounds such as polyphenols found in red wine and grape juice have demonstrated to be potent antioxidants, behaving as ROS scavengers, metal chelators and enzyme modulators. Therefore, this study was conducted to evaluate the effects of red wine, grape juice and ethanol in adult Wistar rats fed with an egg yolk enriched diet. Animals were treated daily with two hypercaloric diets containing 0% and 0,627% cholesterol, respectively and submitted to red wine, grape juice and ethanol moderated doses for 35 days. Experimentally, red wine, grape juice and ethanol partially prevented lipid peroxidation and restored non-proteic thiols content of high cholesterol treated animals. Liver histology assessment indicated that only grape juice, among all beverages, reduced hepatic cell damage and improved histomorphology of the liver similar to cholesterol untreated rats. Conclusively, we can suggest that grape juice is excellent alternative to red wine in this experimental model of adult rats fed with high cholesterol diet. / A proteção contra as doenças associadas com estresse oxidativo, como câncer, diabetes, envelhecimento, doenças neurodegenerativas e doenças cardiovasculares têm recebido atenção especial nos últimos anos. Trabalhos anteriores indicam que dietas ricas em colesterol induzem ao estresse oxidativo e à hipercolesterolemia em ratos. Algumas substâncias da dieta como os polifenóis encontrados em vinho e suco de uva têm demonstrado serem antioxidantes potentes, agindo como seqüestradores de radicais livres, quelantes de metais e moduladores enzimáticos. Assim, este trabalho foi conduzido para avaliar os efeitos de vinho tinto, suco de uva e etanol em ratos Wistar adultos alimentados com uma dieta enriquecida com gema de ovo. Os animais foram tratados diariamente com duas dietas hipercalóricas contendo 0% e 0,627% de colesterol, respectivamente e submetidos a doses moderadas de vinho tinto, suco de uva e etanol por 35 dias. Experimentalmente, o vinho tinto, o suco de uva e o etanol preveniram parcialmente a peroxidação lipídica e restauraram o conteúdo de tióis não-protéicos dos animais tratados com dieta rica em colesterol. A avaliação histológica do fígado dos ratos indicou que somente o suco de uva, dentre todas as bebidas utilizadas, reduziu o dano nas células hepáticas e melhorou significativamente a histomorfologia do fígado. Concluindo, podemos dizer que o suco de uva é uma excelente alternativa ao vinho tinto neste modelo experimental de dieta enriquecida com colesterol em ratos adultos.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Phenolic compounds are secondary metabolites, widely distributed in the plant kingdom, which present antiinflamatory, antibacterial, antiviral, antialergical and antitumoral activities, in addition to antioxidant activities. Even in low concentrations compared to the oxidant substrate, the antioxidant compounds can delay or inhibit free radical oxidation rates. Thus, this study aimed to quantitatively determine and classify the compounds as natural antioxidants isolated and its contribution to the antiradical activity from the chromatographic analysis (HPLC-DAD) and a systematic study of the antiradical activity of antioxidant compounds isolated (patterns reference) and natural (herbal extracts) using in vitro and ex vivo.bem. Furthermore, the antioxidant species bioactivity was assessed from cells of the cortex and permeation cell biomembranes, artificial lipid. Among the antioxidant compounds studied, quercetrin presented protection action against free radicals on cell-based studies (cortex cells), high in vitro and cell-based antiradical actions, and also biomembrane permeations. These responses, when added, can confer to quercitrin higher relevance as a antioxidant at physiological levels when compared to others poliphenols. This work presents a systematic study on antiradical activities of isolated antioxidant compounds (from reference standards) and natural antioxidant compounds (medicinal plant extracts), by using in vitro and ex vivo methods. / Os compostos fenólicos constituem-se por um grupo de metabólitos secundários, amplamente distribuídos no reino vegetal, que apresentam propriedades antinflamatórias, antibacterianas, antivirais, antialérgicas e antitumorais, além de possuírem propriedades antioxidantes. Mesmo presentes em baixas concentrações em relação ao substrato oxidante, os antioxidantes podem atrasar ou inibir as taxas de oxidação dos radicais livres. Desta forma, este estudo teve como objetivo classificar e determinar quantitativamente os compostos antioxidantes isolados e naturais quanto a sua contribuição na atividade antirradicalar a partir da análise cromatográfica (HPLC-DAD) e de um estudo sistemático da atividade antirradicalar de compostos antioxidantes isolados (padrões de referência) e naturais (extratos de plantas medicinais) usando métodos in vitro e ex vivo.bem. Além disso, a bioatividade das espécies antioxidantes foi avaliada a partir de células de córtex e da permeação por biomembranas celulares artificiais lipídicas. Dentre os antioxidantes estudados, a quercitrina apresentou ação protetora contra radicais livres em nível celular (células de córtex), alta ação antirradicalar in vitro e em nível celular (ex vivo), além de permear biomembranas. Essas respostas, quando somadas, podem credenciar a quercitrina com um dos antioxidantes da classe dos polifenóis de maior relevância em nível fisiológico.

This study has aimed to evaluate the effects of treatments with essential oil (OAT) and infusion of Aloysia triphylla (IAT) on microbiological, chemical and sensory stability of silver catfish (Rhamdia quelen). α-citral (29.4%) and β-citral (20.8%) were the main components of OAT, followed by limonene (11.9%). Major compounds identified in the IAT were isoquercetrin > rosmarinic acid > luteolin. Experiments were divided in four parts in which the first has was aimed at evaluating the antimicrobial activity of OAT against foodborne bacteria strains, the microbiological stability of silver catfish fillets refrigerated after dipping in OAT solution and the microbiological changes during the ice storage of whole silver catfish previously sedated with OAT during the transport in vivo. In vitro assays revealed that the OAT has strong inhibitory activity against Staphylococcus aureus and Enterococcus faecalis, and moderate inhibitory activity against Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, Salmonella Typhimurium, Salmonella Choleraesuis and Salmonella Enteritidis, but does not inhibit Pseudomonas aeruginosa. Fillets imersed in 30 or 40 μL/L of OAT had lower mesophilic and psychrotrophic counts than control (p<0.05) during storage. Entire refrigerat fish that were previously sedated with 40 μL/L of OAT slowed lower counts for psychrotrophic at the 7th and 28th days of storage than control (p<0.05), whereas the mesophilic counts were similar to the control during storage. The 2nd experiment has aimed at determine whether the use of OAT in the water (0, 30 or 40 μL/L) to sedate silver catfish during transport action would delay the chemical and the sensory post mortem changes of refrigerated whole fish. Fresheness of entire silver catfish was extented by sedation with 40 μL/L of OAT as indicated by the delay in the onset of rigor mortis and in the degradation of inosine 5'-monophosphate into inosine compared to the control (p<0.05). Fish exposed to 30 or 40 μL/L OAT received lower demerit scores than the control (p <0.05) in sensory evaluation after 10 days of storage, whereas fish treated with 40 μL/L of OAT had higher shelf life (35 days in ice) than the control (p<0.05). In the 3rd experiment, we assessed whether the use of OAT in the water to sedate silver catfish during transport would influence the lipid stability of fish fillets during frozen storage (17 months). The fillets from fish exposed to 30 and 40 μL/L of OAT had higher initial content of primary products of lipid oxidation (conjugated dienes, CD) than control fillets, whereas the fillets from fish exposed to 40 μL/L of OAT had lower content of secondary products of lipid oxidation (thiobarbituric acid reactive substances, TBARS) after 6, 9 and 17 months of frozen storage than control fillets (p<0.05). The 4th experiment was aimed at evaluating the in vitro antioxidant activity of IAT and the lipid stability and instrumental color of frozen fillets after immersion in distilled water (control) or IAT (1, 2.5 or 5%). The antioxidant effect of IAT (1-5%) was demonstrated as the treated fillets had lower CD values after 7 months of storage, as well as lower TBARS value than control after 4, 7 and 10 months of storage. Regardeless of the storage time, the treatment with 5% IAT reduced brightness, increased the yellowness and chroma compared to control fillets, whereas the treatment with 2.5% IAT only increased the yellowness. However, the total color change during the storage of fillets treated with 2.5 and 5% IAT was lower than in control fillets (p <0.05). These results indicate that OAT has antimicrobial activity against foodborne bacteria. Furthermore, the use of OAT as a sedative in the transport of silver catfish extended the freshness and increased shelf life of the refrigerated whole fish, and also delayed lipid oxidation of the fillets during frozen storage. Dipping silver catfish fillets in IAT delayed lipid oxidation and color changes during frozen storage, which can extend the shelf life of fillets. These results indicate the great potential of A. triphylla in the fish processing sector as a pre-slaughter treatment (sedative) or in the post-slaughter period (natural food additive). / O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do óleo essencial de Aloysia triphylla (OAT) e da infusão de A. triphylla (IAT) na estabilidade da carne de jundiá (Rhamdia quelen) com ênfase nas alterações microbiológicas, químicas e sensoriais do pescado. O α-citral (29,4%) e o β-citral (20,8%) foram os compostos majoritários do OAT, seguidos do limoneno (11,9%). Na IAT foram identificados como compostos majoritários a isoquercetrina > ácido rosmarínico > luteolina. No 1º experimento avaliou-se a atividade antimicrobiana do OAT contra cepas isoladas de alimentos, a estabilidade microbiológica de filés refrigerados após imersão em solução de OAT, bem como as alterações microbiológicas durante a armazenagem sob refrigeração de jundiás inteiros previamente sedados com OAT durante o transporte in vivo. Os ensaios in vitro revelaram que o OAT apresenta ação inibidora forte contra Staphylococcus aureus e Enterococcus faecalis, e moderada contra Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, Salmonella Typhimurium, Salmonella Choleraesuis e Salmonella Enteritidis, mas não inibe Pseudomonas aeruginosa. Os filés imersos em OAT 30 ou 40 μL/L apresentaram menores contagens de micro-organismos mesófilos e psicrotróficos que o controle (p<0,05) ao longo do armazenamento. Os peixes sedados com 40 μL/L de OAT durante o transporte tiveram contagens de psicrotróficos menores que o controle após 7 e 28 dias (p<0,05), enquanto as contagens de mesófilos foram semelhantes ao controle durante o armazenamento. No 2º experimento foi investigado se o uso do OAT na água (0, 30 ou 40 μL/L) como sedativo durante o transporte de jundiás pode retardar as modificações químicas e sensoriais do pescado inteiro refrigerado. A exposição do jundiá a 40 μL/L de OAT durante o transporte retardou o início do rigor mortis, bem como a degradação de inosina 5´-monofosfato em inosina comparado ao controle (p<0,05), prolongando o frescor do pescado. Os peixes expostos a 30 ou 40 μL/L de OAT receberam menor escore sensorial de demérito que o controle (p<0,05) após 10 dias de armazenamento, enquanto os expostos a 40 μL/L de OAT apresentaram maior vida útil (35 dias em gelo) que o controle (p<0,05). No 3º experimento foi avaliado se o uso do OAT na água como sedativo durante o transporte de jundiás influencia a estabilidade lipídica dos filés do pescado durante o congelamento. A exposição 30 e 40 μL/L de OAT resultou em maior teor inicial de produtos primários da oxidação lipídica (dienos conjugados, DC) nos filés, enquanto os filés dos peixes expostos a 40 μL/L de OAT apresentaram menor teor de produtos secundários da oxidação lipídica (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico, TBARS) que os peixes controle após 6, 9 e 17 meses de congelamento (p<0,05). No 4º experimento avaliou-se a atividade antioxidante da IAT in vitro e a estabilidade lipídica e cor instrumental de filés congelados após a imersão em água destilada (controle) ou IAT (1, 2,5 ou 5%). O efeito antioxidante da IAT (1-5%) foi constatado pelos menores valores DC após 7 meses de congelamento, bem como valor de TBARS inferior ao controle após 4, 7 e 10 meses de congelamento nos filés tratados. Independente do tempo de armazenagem, o tratamento com IAT 5% reduziu a luminosidade, aumentou a tendência ao amarelo e o croma comparado aos filés controle, enquanto o tratamento com IAT 2,5% aumentou apenas a tendência ao amarelo. No entanto, a variação total de cor dos filés tratados com IAT 2,5 e 5% ao longo do congelamento foi menor que nos filés controle (p<0,05). Os resultados indicam que o OAT possui atividade antimicrobiana contra patógenos e micro-organismos indicadores de qualidade dos alimentos. Além disso, a utilização do OAT como um sedativo na água de transporte de jundiás prolongou o frescor e aumentou a vida útil do pescado inteiro refrigerado, além de retardar a oxidação lipídica dos filés durante o armazenamento congelado. A imersão de filés de jundiás na IAT retardou a oxidação lipídica e as mudanças na coloração durante o armazenamento congelado, podendo estender a vida útil dos filés. Estes resultados indicam o grande potencial da A. triphylla na área de processamento pescados, tanto no tratamento pré-abate (sedativo) como pós-abate (aditivo alimentar natural).

Studies showed that the ultraviolet irradiation and the cold in woven of plants present some effect on the metabolism of phenolics compounds. The polyphenols are a group of substances present in the wine responsible for causing a series of benefits to the man's health and they are also important in the quality of the wine. The present work was proposed with the objective of comparing wines coming from grapes in wine varieties Cabernet Sauvignon and Chardonnay exposed to cold, ultraviolet irradiation and a subsequent storage, verifying their effects in the quality of wine through physiochemical analyses, biochemistries and sensorial. In the physiochemical analyses of the variety Cabernet Sauvignon were found small differences in the values of total acidity, however for the phenolics compounds, it happened larger variations, with the following results: Cold-irradiated 9723.3 mg EAG, Irradiated 6631.7 mg EAG, Cold-control 2696.7 mg EAG, Control 2258.3 mg EAG and Pattern 1150.0 mg EAG. In the determination of the % of inhibition of the antioxidant activity there were also significant differences, reflecting the same previous order with the following values: Cold-irradiated 97. 17%, Irradiated 88.50%, Cold-control 61.3%, Control 55.24% and Pattern 41.50%. For the variety Chardonnay, the values of the analyses physiochemical just obtained small differences in the pH, in the total and volatile acidity. For the values of the phenolics compounds, a larger variation was observed, where the values were: Cold-irradiated 91.44 mg EAG, Irradiated 76.06 mg EAG, Cold-control 70.13 mg EAG, Pattern 8.99 mg EAG and Control 8.94 mg EAG. Was observed in the determination of the % of inhibition of the antioxidant activity, that showed significant differences reflecting the same order previous with the following values: Cold-irradiated 91.35%, Irradiated 75.94%, Cold-control 70.67%, Control 24.13% and Pattern 9.13%. In the sensorial analysis of the wines of the two cultivate, just the trained panel of judges knowledgeable in wines distinguished the alterations correctly in the wines for the triangular test. The results demonstrate that the ultraviolet irradiation, the cold and the storage of the grapes increase the amount of polyphenols and antioxidant activity modifying the quality of the wine. / Estudos mostraram que a irradiação ultravioleta e o frio em tecidos de plantas apresentam algum efeito sobre o metabolismo de compostos fenólicos. Os polifenóis são um grupo de substâncias presentes no vinho responsáveis por causar uma série de benefícios à saúde do homem e também são importantes na qualidade do vinho. O presente trabalho foi proposto com o objetivo de comparar vinhos provenientes de uvas em variedades viníferas Cabernet Sauvignon e Chardonnay expostas ao frio, irradiação ultravioleta e um posterior armazenamento, verificando seus efeitos na qualidade do vinho através de análises físicoquímicas, bioquímicas e sensoriais. Nas análises físico-químicas da variedade Cabernet Sauvignon foram encontradas pequenas diferenças nos valores de acidez total, porém para os compostos fenólicos, ocorreram variações maiores, apresentando os seguintes valores: Frioirradiado 9723,3 mg EAG, Irradiado 6631,7 mg EAG, Frio-controle 2696,7 mg EAG, Controle 2258,3 mg EAG e Padrão 1150,0 mg EAG. Na determinação da % de inibição da atividade antioxidante também houveram diferenças significativas, refletindo a mesma ordem anterior com os seguintes resultados: Frio-irradiado 97,17%, Irradiado 88.50%, Frio-controle 61,3%, Controle 55,24% e Padrão 41,50%. Para a variedade Chardonnay, os valores das análises físico-químicos mostraram pequenas diferenças no pH, na acidez total e volátil. Para os valores dos compostos fenólicos, a variação foi maior ainda, atingindo os seguintes valores: Frio-irradiado 91,44 mg EAG, Irradiado 76,06 mg EAG, Frio-controle 70,13 mg EAG, Padrão 8,99 mg EAG e Controle 8,94 mg EAG. Foi observado diferenças significativas na determinação da % de inibição da atividade antioxidante, que mostraram os resultados a seguir: Frio-irradiado 91,35%, Irradiado 75,94%, Frio-controle 70,67%, Controle 24,13% e Padrão 9,13%. Na análise sensorial do vinho das duas cultivares, apenas o painel composto de julgadores conhecedores de vinhos distinguiu corretamente as alterações nos vinhos pelo teste triangular. Os resultados demonstram que a irradiação ultravioleta, o frio e o armazenamento das uvas aumentam a quantidade de polifenóis e a atividade antioxidante modificando a qualidade do vinho.

A incidência da obesidade e do diabetes do tipo 2 tomou proporções epidêmicas nos últimos anos, atingindo bilhões de indivíduos em todo o mundo. A descoberta de formas inovadoras capazes de reduzir as alterações metabólicas associadas a estas doenças é fundamental para minimizar o seu impacto na qualidade de vida da população e na economia dos países. Muitos estudos têm demonstrado que os compostos bioativos de alimentos possuem efeitos benéficos à saúde. O camu-camu e o cupuaçu são frutas nativas da região amazônica com potencial agroeconômico ainda inexplorado, que contêm um grande número de compostos fitoquímicos que podem atuar sobre o metabolismo corporal. Desta forma, o objetivo deste estudo foi verificar os efeitos dos compostos fenólicos de extratos do camu-camu e do cupuaçu no desenvolvimento da obesidade e do diabetes tipo 2 em ensaios in vivo e in vitro, e identificar os possíveis metabólitos envolvidos nestes efeitos. Os extratos ricos em compostos fenólicos da polpa comercial destes frutos foram extraídos em fase sólida, caracterizados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE/DAD) e avaliados quanto à inibição da atividade de enzimas digestivas in vitro. Os extratos obtidos foram então testados em duas diferentes concentrações (2,25 e 4,5 mg de equivalentes de catequina/Kg de peso corporal para o cupuaçu; 7 e 14 mg de equivalentes de ácido gálico/Kg de peso corporal para o camu camu) em um modelo animal de obesidade e resistência insulínica induzida por dieta com alto teor de lipídios e sacarose em camundongos C57BL/6J. Foram investigados os efeitos destes compostos sobre as homeostases glicídica e lipídica através de análises séricas, testes de tolerância à insulina e à glicose e conteúdo de lipídios hepáticos e fecais. O extrato do camu camu apresentou flavonóis, ácido elágico e elagitaninos em sua composição. A suplementação com o extrato de compostos fenólicos do camu camu reduziu o ganho de peso corporal e diminuiu a intolerância à glicose e à insulina, independente da dose administrada. No entanto, a administração destes extratos não apresentou efeitos sobre o metabolismo lipídico. Estes resultados foram associados a um possível efeito de saciedade, com consequente redução da ingestão da dieta e da glicolipotoxicidade, e com um efeito anti-inflamatório devido à diminuição dos níveis de proteína C reativa. Já o extrato de cupuaçu apresentou flavanóis, flavonas e proantocianidinas em sua composição. A suplementação com o extrato de cupuaçu na maior dose testada melhorou a homeostase da glicose e principalmente dos lipídios, protegendo o tecido hepático dos danos causados pela dieta com alto teor de lipídios e sacarose. Estes efeitos foram associados à inibição de enzimas digestivas, com consequente menor absorção de lipídios provenientes da dieta, reduzindo assim a resistência à insulina no fígado, a hiperglicemia e a dislipidemia. Ainda, foi avaliada a distribuição de metabólitos no trato gastrointestinal de camundongos após a administração aguda do extrato de cupuaçu. Foi possível identificar a complexa mistura de polifenóis presentes no extrato de cupuaçu ao longo do trato gastrointestinal, que posteriormente foi metabolizada pela microbiota. Entre os metabólitos encontrados estão as agliconas hipolaetina e isoscutelareína, e os metabolitos microbianos da epicatequina como o 3,4-diHPP-2-ol e a 5-(3,4-dihidroxiphenil)-&#947;-valerolactona. De acordo com estes resultados, as diferenças na composição de compostos fenólicos encontradas entre os extratos das duas frutas foram responsáveis pelos diferentes resultados nos protocolos in vivo e a identificação dos metabólitos microbianos possibilita o conhecimento dos compostos possivelmente implicados nos efeitos benéficos. Novos estudos podem contribuir para um melhor entendimento dos mecanismos, bem como quais metabólitos estão associados aos efeitos benéficos que os compostos presentes nestas duas frutas apresentaram neste estudo. / The incidence of obesity and type 2 diabetes reached epidemic proportions in recent years, arriving to billions of people around the world. The discovery of innovative ways that can reduce the metabolic abnormalities associated with these diseases is essential to minimize its impact on the population\'s quality of life and the economy of the countries. Many studies have demonstrated that food bioactive compounds have beneficial health effects. Camu-camu and cupuassu are native fruits of the Amazon region with unexplored agroeconomic potential, which contain a large number of phytochemical compounds that can act on body metabolism. Thus, the objective of this study was verify the effects of phenolic compounds of camu-camu and cupuassu extracts on the development of obesity and type 2 diabetes in vivo and in vitro, and identfy the possible metabolites involved in these effects. The phenolic compound-rich extracts were obtained from commercial frozen fruit pulps by solid phase extraction, characterized by high-performance liquid chromatography (HPLC/DAD) and evaluated for inhibition of digestive enzymes activities in vitro. Then, the extracts were tested at two different doses (2.25 and 4.5 mg catechin equivalents/kg body weight for cupuassu; 7 and 14 mg of gallic acid equivalents/kg body weight for camu camu) in an animal model (C57BL/6J mice) of obesity and insulin resistance induced by high fat high sucrose diet. The effects of extract supplementation on glucose and lipid homeostasis were assessed by serum analysis, insulin and glucose tolerance tests in mice, and contents of fat in liver and fecal samples. Camu camu extract presented flavonols, ellagic acid and ellagitannins in its composition. Supplementation with camu camu phenolic extract reduced weight gain and decreased glucose and insulin intolerance independent of the dose administered. However, no effects on lipid metabolism were found. These findings were associated with a possible effect of satiety with a consequent reduction in energy intake and glicolipotoxicity, and anti-inflammatory properties. Cupuassu extract presented flavanols, flavones and proanthocyanidins in its composition. Supplementation with cupuacu extract at the highest dose improved glucose homeostasis and plasmatic lipid levels, protecting the liver tissue from damage caused by diet rich in lipids and sucrose. These effects were associated with inhibition of digestive enzymes, with consequent lower absorption of lipids from the diet, thereby reducing the insulin resistance in the liver, the hyperglycemia and dyslipidemia. Furthermore, the distribution of metabolites in the gastrointestinal tract of mice was evaluated after acute administration of cupussu extract by HPLC-ESI-QTOF. We identified the complex mixture of polyphenols present in cupuassu extract along the gastrointestinal tract, which was subsequently metabolized by the intestinal microbiota. Among detected metabolites are hypolaetin and isoscutellarein aglycones and microbial metabolites of epicatechin as 3,4-diHPP-2-ol and 5-(3,4-dihydroxyphenyl)-&#947;valerolactone. According to these results, the differences in the composition of phenolic compounds found between the two fruit extracts were responsible for the different effects in vivo and identification of microbial metabolites enables the knowledge of the compounds potentially implicated in the beneficial effects. New studies can contribute to a better understanding of the metabolism and mechanisms of action.