Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-05-03T19:24:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-05-03T19:25:41Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-03T19:25:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2016-08-31 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The species Plasmodium falciparum and P. vivax are important etiological agents that cause human malaria and represent one of the greatest challenges for public health in the world. These parasites present resistance to the antimalarials presently available for treatment. The main classes of antimalarials used in the world, namely the quinolone alkaloids and derivatives of artemisinin, owe their origins to the natural products quinine and artemisinin, isolated from antimalarial plants. Natural products isolated from antimalarial plants from the Amazon are promising sources of antimalarial substances. This work aimed to evaluate the in vitro susceptibility of field isolates of P. falciparum and P. vivax to extracts and substances isolated from antimalarial plants from the Brazilian Amazon. These Plasmodium field isolates represent the genotypes and phenotypes of the parasites that presently circulate in this region. The isolated compounds ellipticine (1, alkaloid indólico), O,O-diacetyl-4-nerolidylcatechol (2, terpene-phenylpropanoid), neosergeolide (3, quassinoid), 6α-acetoxygedunina (4) e 6α- hidroxydeacetilgedunina (5, limonoids) and the crude extracts of the aerial parts of Andropogon leucostachyus (methanol) and the branch ethanol and leaf chloroform extracts of Xylopia amazônica. These samples had previously been characterized in vitro against standardized strains of P. falciparum and were re-evaluated in the present study against the standardized K1 and 3D7 strains for comparative purposes. Thirty-two P. vivax field isolates and 2 previously stabilized P. falciparum field isolates (MRV and AL) were used. The effects of the isolated substances, extracts and commercial antimalarial standards were determined by applying the microtest and the DELI (Double-site enzyme-linked immunodetection) test. The median inhibitory concentration (IC50) was determined against P. falciparum strains MRV and AL for 1, 2, 3, 4 and 5 (IC50 0.48-0.77; 4.2-4.6; 0.004-0.01; 7.0-6.2 and 6.1-5.7 μM, respectively) and A. leucostachyus and X. amazônica ethanol and chloroform extracts IC50 7.0-7.2, 9.8-9.5 and 7.8-7.4 μg/mL, respectively). Of 32 P. vivax field isolates, 24 exhibited curves from which IC50 were interpretable. Twelve of these P. vivax isolates were evaluated using the microtest and exhibited sensitivity to 1, 2, 3, 4 and 5 (IC50 2.19; 4.01; 0.13; 5.32 and 5.76 μM, respectively) and A. leucostachyus and X. amazônica ethanol and chloroform extracts (IC50 14.0, 15.7 and 13.6 μg/mL, respectively). The 12 P. vivax field isolates evaluated using the DELI-test also exhibited sensitivity to 1, 2 and 3 (IC50 4.7; 9.0; and 0.01 μM, respectively). The field isolates exhibited good susceptibility to the natural products tested in some cases. Substance 3 was the most active against P. falciparum (IC50 0,004-0,01 μM) and P. vivax (IC50 0,01-0,13 μM). The P. vivax field isolates were only a little less sensitive than the standardized strains of P. falciparum used in previous studies of these same substances and extracts. These results show that P. vivax and P. falciparum field isolates exhibit different sensitivity profiles with respect to the natural products evaluated as well as to commerciallyavailable antimalarials. Despite the larger IC50 values exhibited against P. vivax versus P. falciparum field isolates, the natural products investigated exhibited good antiplasmodial activity against P. vivax. / As espécies de Plasmodium falciparum e P. vivax são entes etiológicos importantes, causadores da malária humana e representam um dos maiores desafios para a saúde pública no mundo. Estes parasitas têm apresentado resistências aos antimaláricos atualmente disponíveis para tratamento. As principais classes de antimaláricos utilizados no mundo, os alcaloides quinolínicos e os derivados da artemisinina, devem suas origens às substâncias quinina e artemisinina, substâncias naturais isoladas de plantas antimaláricas. Os produtos naturais isolados de plantas da Amazônia são fontes promissoras de substâncias antimaláricas. Este trabalho objetivou a avaliação da susceptibilidade in vitro de isolados de campo de P. falciparum e P. vivax a extratos e substâncias isoladas de plantas antimaláricas da Amazônia brasileira. Estes isolados de campo de P. falciparum representam o genótipo e fenótipo dos parasitas que circulam nessa região atualmente. Foram estudadas as substâncias isoladas elipticina (1, alcaloide indólico), O,O-diacetil-4-nerolidilcatecol (2, terpeno-fenilpropanoide), neosergeolida (3, quassinoide), 6α-acetoxigedunina (4) e 6α-hidroxi-desacetilgedunina (5 limonoides) e, os extratos brutos a partir de parte aérea de Andropogon leucostachyus (metanólico) e dos galhos e folhas de Xylopia amazônica (etanólico e clorofórmico, respectivamente). Esses produtos naturais já haviam sido caracterizados in vitro contra as cepas padronizadas de P. falciparum, e foram reavaliados no presente estudo contra cepas padronizadas K1 e 3D7 para fins de comparação. Foram utilizadas 32 isolados de campo de P. vivax e 2 isolados de campo de P. falciparum, esses últimos previamente estabilizados (MRV e AL). A determinação do efeito das substâncias isoladas, extratos e padrões de antimaláricos comerciais foi realizada aplicando-se o microteste e o DELIteste (Double-site enzyme-linked immunodetection). A concentração inibitória 50% (CI50) foi determinada contra as cepas MRV e AL de P. falciparum para 1, 2, 3, 4 e 5 (CI50 0,48-0,77; 4,2-4,6; 0,004-0,01; 7,0-6,2 e 6,1-5,7 μM, respectivamente) e os extratos de A. leucostachyus, X. amazônica (etanol e clorofórmio), (CI50 7,0-7,2; 9,8-9,5 e 7,8-7,4 μg/mL, respectivamente). Dos 32 isolados de P. vivax, 24 isolados apresentaram curvas interpretáveis da CI50, 12 desses isolados de P. vivax testados pelo microteste exibiram sensitividade a 1, 2, 3, 4 e 5 (CI50 2,19; 4,01; 0,13; 5,76 e 5,32 μM, respectivamente) e os extratos de A. leucostachyus, X. amazônica (etanol e clorofórmio), (CI50 14,0; 15,7 e 13,6 μg/mL, respectivamente). Os 12 isolados de P. vivax testados pelo DELI-teste exibiram sensitividade a 1, 2 e 3 (CI50 4,7; 9,0; e 0,01 μM, respectivamente). Os isolados de campo apresentaram boa susceptibilidade aos produtos naturais testados em alguns casos, sendo 3 a substância mais ativa contra P. falciparum (CI50 0,004-0,01 μM) e P. vivax (CI50 0,01-0,13 μM). Os isolados de P. vivax foram pouco menos sensíveis que as cepas padronizadas de P. falciparum previamente estudadas frente às mesmas substâncias e extratos. Estes resultados mostram que os isolados de campo de P. vivax e P. falciparum apresentam perfis de sensibilidade diferentes aos produtos naturais e também aos antimaláricos comerciais. Embora os valores de CI50 dos produtos naturais sejam maiores que aqueles encontrados para o P. falciparum, estas substâncias apresentaram boa atividade frente o P. vivax.

Submitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-03-04T20:15:19Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Manoel Lucas da Silva - 2011.pdf: 1006184 bytes, checksum: 822278eea13e5a9617ab8622362a7f8e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-03-05T10:50:05Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Manoel Lucas da Silva - 2011.pdf: 1006184 bytes, checksum: 822278eea13e5a9617ab8622362a7f8e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T10:50:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Manoel Lucas da Silva - 2011.pdf: 1006184 bytes, checksum: 822278eea13e5a9617ab8622362a7f8e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2011-11-11 / Outros / In this work, the enzyme alcohol dehydrogenase (ADH), extracted from sunflower seeds, was used in the preparation of base electrodes of carbon paste. Thus studies have been conducted concerning the electrochemical properties and the catalytic ability of this enzyme for the conversion of ethanol into acetaldehyde, which leads to oxidation of the cofactor β-nicotidamina adenine dinucleotide (NADH). We constructed three working electrodes (A, B and C) for use in the detection of ethanol in phosphate buffer 0.1 mol L-1 (supporting electrolyte) at pH 7.4 and 8.0. Other variables in this study was the mode of extraction of the enzyme using deionized water or 0.1 mol L-1 phosphate buffer (pH 7.4) and form of the enzyme in carbon powder, were used for this mineral oil Nujol ® and Teflon ® solutions and glutaraldehyde. The cyclic voltammetry and chronoamperometry were the two methods used to verify the action of the enzyme in solution. The results showed that the electrodes A and B have inferior performance compared with the electrode C. Finally, electrochemical experiments showed that the enzyme alcohol dehydrogenase derived from crude extract of sunflower seeds has catalytic activity for oxidation of ethanol, but the enzyme does not maintain this constant activity, probably due to the absence of the cofactor which can be in the crude extract in a very low concentration, acting as a limiting reagent in the reaction. / Neste trabalho, a enzima álcool desidrogenase (ADH), extraída das sementes de girassol, foi utilizada para a elaboração de eletrodos a base de pasta de carbono. Assim, foram realizados estudos a respeito das propriedades eletroquímicas e da capacidade catalítica desta enzima para a conversão do etanol em acetaldeído, que tem como consequência a oxidação do cofator β-nicotidamina adenina dinucleotídeo (NADH). Foram construídos três eletrodos de trabalho (A, B e C) para serem utilizados na detecção de etanol em solução tampão fosfato 0,1 mol L-1 (eletrólito de suporte) em pH 7,4 e 8,0. Outras variáveis deste estudo foram o modo de extração da enzima utilizando água deionizada ou tampão fosfato 0,1 mol L-1 (pH 7,4) e a forma de aglutinação da enzima no pó de carbono, para isso foram utilizados o óleo mineral Nujol® e soluções de Teflon® e glutaraldeído. As técnicas de voltametria cíclica e cronoamperometria foram os dois métodos utilizados para verificar a ação da enzima em solução. Os resultados mostraram que os eletrodos A e B tiveram o desempenho inferior em comparação com o eletrodo C. Por fim, os experimentos eletroquímicos mostraram que a enzima álcool desidrogenase derivada do extrato bruto das sementes de girassol tem atividade bioeletrocatalítica para a oxidação do etanol, mas a enzima não mantém essa atividade constante, provavelmente devido à ausência do cofator que no extrato bruto possa estar em uma concentração muito baixa, agindo como reagente limitante da reação.

Furanoeliangolidos são produtos naturais biologicamente ativos que contêm um esqueleto 11-oxabiciclo[6.2.1]undecano. Neste trabalho nós estudamos duas propostas sintéticas para síntese de um modelo simplificado do furanoeliangolido goiazensolido, através de uma reação de Diels-Alder seguida de clivagem da ligação central dos anéis. No desenvolvimento da primeira proposta nós preparamos o composto mesilato, porém as tentativas de efetuar a reação de eliminação resultaram em mistura complexa ou em produtos indesejados. Na proposta seguinte preparamos o éster, e testamos dois caminhos alternativos, entre várias possibilidades, para dar continuidade à síntese. No primeiro caminho o éster foi hidrolisado ao ácido, mas não foi possível obter a amida de Weinreb correspondente. No segundo caminho, o éster foi reduzido ao álcool, que foi oxidado ao aldeído; quando tratado com o ânion da hidrazona, o aldeído forneceu a hidrazona correspondente ao invés do esperado produto de adição de carbânion. Outras alternativas deverão ser investigadas no futuro. / Furanoheliangolides are biologically active natural products containing a 11-oxabicyclo[6.2.1]undecane skeleton. In this work we have investigated two different approaches to synthesize a model of the core structure of goyazensolide. Both approaches involve a Diels-Alder reaction and a bond breaking reaction to produce the polycyclic structure. In the first proposal we prepared mesylate compound. Attempts to effect an elimination reaction, however, resulted either in complex mixture or in undesired products. In the second proposal we prepared ester and investigated two alternative paths, out of several possibilities, to proceed the synthesis. In the first, ester was hydrolyzed to acid, but it was not possible to obtain the corresponding Weinreb amide. In the second path the ester was reduced to alcohol, that was oxidized to aldehyde; this, when treated with the anion from hydrazone, furnished hydrazone instead of the expected product of carbanion addition. Further studies should be developed in the future.

As lignanas naturais possuem vários tipos de estruturas que exibem uma vasta gama de atividades biológicas. As lignano-lactonas naturais, tais como a arctigenina (1) e os derivados da podofilotoxina (2), representadas nas estruturas abaixo, são conhecidas por apresentarem atividades citotóxicas e, há várias décadas, vêm despertando enorme interesse em virtude de suas propriedades anti-cancerígenas e anti-HIV. Apesar de haver numerosos tipos de síntese racêmica e vários exemplos de síntese assimétrica desses compostos, os métodos sintéticos tradicionais geralmente empregados não são convenientes para a preparação em larga escala desses compostos opticamente puros, em virtude da necessidade de utilizar quantidades estequiométricas de fontes quirais e/ou grande seqüência de etapas sintéticas. Em vista disso, um método mais eficiente para realizar a síntese enantiosseletiva desses produtos naturais é através da catálise assimétrica utilizando materiais de partida proquirais. Trabalhos anteriores realizados em nosso laboratório serviram para testar alguns métodos sintéticos descritos na literatura. Entretanto, como esses métodos são relativamente longos e produzem baixos rendimentos, optamos por testar um método alternativo para a obtenção de lignano-lactonas naturais biologicamente ativas, tais como a parabenzlactona (51) e a oxoparabenzlactona (52), cujas estruturas são mostradas a seguir. Esses dois compostos, além de apresentarem propriedades biológicas úteis, podem ser transformados em outros produtos naturais de interesse, tais como as lignanas do tipo dibenzilbutirolactonas, ariltetralinas e furofurânicas. Os materiais de partida utilizados nessa nova metodologia sintética foram os derivados protegidos de 3-hidroximetil--butirolactona (50), os quais, neste trabalho, foram sintetizados através da hidrogenação enantiosseletiva de derivados insaturados produzidos a partir do ácido 3,3-dimetilacrílico (81). Os estudos de hidrogenação enantiosseletiva foram realizados utilizando catalisadores quirais de ródio e rutênio. Diversos derivados de butenolidas foram estudados com intuito de se obter o intermediário 50 de maneira enantiosseletiva e com rendimentos satisfatórios. Os resultados obtidos nas reações de hidrogenação catalítica dessas butenolidas com complexos quirais de ródio e rutênio mostraram que a quelação do substrato com o centro metálico do catalisador assimétrico é fortemente afetada pelo tipo de substituinte ligado no esqueleto da butenolida. De maneira geral, os produtos de hidrogenação foram obtidos com larga faixa de pureza óptica (2-100% ee) dependendo do tipo de substituinte. Esses resultados indicam uma importante influência dos grupos protetores da função hidroxila alilíca nas reações de hidrogenação assimétrica dos derivados das butenolidas estudados. A fim de se investigar o mecanismo de complexação dos substratos com os catalisadores quirais, simulações computacionais foram realizadas com o catalisador quiral cloreto de [(S)-(?)-2,2?-bis-(difenilfosfino)-1,1-binaftil]cloro(p-cimeno) rutênio e os substratos derivados da 3-hidroximetilbutenolida. Os resultados dos estudos computacionais realizados até o momento mostraram que a ocorrência de mais de um ponto de complexação entre o substrato e o centro metálico do catalisador quiral diminui a energia de ativação do intermediário-chave, aumentando a atividade catalítica e resultando em alta estereosseletividade. Uma vez concluídos os estudos de hidrogenação enantiosseletiva, prosseguiu-se os estudos para a obtenção dos produtos naturais de interesse, a partir de um dos intermediários racêmicos derivados da 3-hidroximetilbutenolida, contendo o metoximetil-éter como grupo protetor. O aldeído intermediário 87, obtido em baixo rendimento, deverá ser transformado nos diversos produtos naturais de interesse. Por causa de sua grande instabilidade, já descrita na literatura, novas metodologias estão sendo testadas para a obtenção do aldeído 87 com melhor rendimento. As lignanas naturais possuem vários tipos de estruturas que exibem uma vasta gama de atividades biológicas. As lignano-lactonas naturais, tais como a arctigenina (1) e os derivados da podofilotoxina (2), representadas nas estruturas abaixo, são conhecidas por apresentarem atividades citotóxicas e, há várias décadas, vêm despertando enorme interesse em virtude de suas propriedades anti-cancerígenas e anti-HIV. Apesar de haver numerosos tipos de síntese racêmica e vários exemplos de síntese assimétrica desses compostos, os métodos sintéticos tradicionais geralmente empregados não são convenientes para a preparação em larga escala desses compostos opticamente puros, em virtude da necessidade de utilizar quantidades estequiométricas de fontes quirais e/ou grande seqüência de etapas sintéticas. Em vista disso, um método mais eficiente para realizar a síntese enantiosseletiva desses produtos naturais é através da catálise assimétrica utilizando materiais de partida proquirais. Trabalhos anteriores realizados em nosso laboratório serviram para testar alguns métodos sintéticos descritos na literatura. Entretanto, como esses métodos são relativamente longos e produzem baixos rendimentos, optamos por testar um método alternativo para a obtenção de lignano-lactonas naturais biologicamente ativas, tais como a parabenzlactona (51) e a oxoparabenzlactona (52), cujas estruturas são mostradas a seguir. Esses dois compostos, além de apresentarem propriedades biológicas úteis, podem ser transformados em outros produtos naturais de interesse, tais como as lignanas do tipo dibenzilbutirolactonas, ariltetralinas e furofurânicas. Os materiais de partida utilizados nessa nova metodologia sintética foram os derivados protegidos de 3-hidroximetil-?-butirolactona (50), os quais, neste trabalho, foram sintetizados através da hidrogenação enantiosseletiva de derivados insaturados produzidos a partir do ácido 3,3-dimetilacrílico (81). Os estudos de hidrogenação enantiosseletiva foram realizados utilizando catalisadores quirais de ródio e rutênio. Diversos derivados de butenolidas foram estudados com intuito de se obter o intermediário 50 de maneira enantiosseletiva e com rendimentos satisfatórios. Os resultados obtidos nas reações de hidrogenação catalítica dessas butenolidas com complexos quirais de ródio e rutênio mostraram que a quelação do substrato com o centro metálico do catalisador assimétrico é fortemente afetada pelo tipo de substituinte ligado no esqueleto da butenolida. De maneira geral, os produtos de hidrogenação foram obtidos com larga faixa de pureza óptica (2-100% ee) dependendo do tipo de substituinte. Esses resultados indicam uma importante influência dos grupos protetores da função hidroxila alilíca nas reações de hidrogenação assimétrica dos derivados das butenolidas estudados. A fim de se investigar o mecanismo de complexação dos substratos com os catalisadores quirais, simulações computacionais foram realizadas com o catalisador quiral cloreto de [(S)-(?)-2,2?-bis-(difenilfosfino)-1,1?-binaftil]cloro(p-cimeno) rutênio e os substratos derivados da 3-hidroximetilbutenolida. Os resultados dos estudos computacionais realizados até o momento mostraram que a ocorrência de mais de um ponto de complexação entre o substrato e o centro metálico do catalisador quiral diminui a energia de ativação do intermediário-chave, aumentando a atividade catalítica e resultando em alta estereosseletividade. Uma vez concluídos os estudos de hidrogenação enantiosseletiva, prosseguiu-se os estudos para a obtenção dos produtos naturais de interesse, a partir de um dos intermediários racêmicos derivados da 3-hidroximetilbutenolida, contendo o metoximetil-éter como grupo protetor. O aldeído intermediário 87, obtido em baixo rendimento, deverá ser transformado nos diversos produtos naturais de interesse. Por causa de sua grande instabilidade, já descrita na literatura, novas metodologias estão sendo testadas para a obtenção do aldeído 87 com melhor rendimento. Estudos sobre a síntese enantiosseletiva de lignano-lactonas naturais contendo importantes atividades biológicas. Os estudos foram realizados utilizando catalisadores quirais de ródio e rutênio e foram avaliados a influência de grupos protetores da função hidroxila da butenolida estudada, frente ao catalisador analisado. / Natural lignans have several types of structures exhibiting a wide variety of biological activities. Natural lignan-lactones, such as arctigenin (1) and the podofilotoxin derivatives (2), are well known for their cytotoxic activities, and both their anti-cancer and anti-HIV properties have attracted much research interest in the last decades. Although numerous racemic syntheses and several examples of the asymmetric synthesis of these compounds have been largely employed, they are not useful for the large-scale preparation of optically pure compounds because stoichiometric amounts of chiral sources and/or la long sequence of synthetic reaction steps are necessary for their accomplishment. A more efficient method for the enantioselective synthesis of these natural products uses asymmetric catalysis with prochiral substances as starting materials. Previous works developed at our laboratory have employed some synthetic methods described in the literature to investigate the synthesis of some natural products. However, these methods involve several synthetic steps and lead to low yields. These facts have thus stimulated us to develop an alternative method for the obtention of biologically active natural lignan-lactones such as parabenzlactone (51) and oxo-parabenzlactone (52). Besides their useful biological properties, these compounds can also be transformed into other interesting natural products, such as aryltetralin, dibenzylbutyrolactone, and furofuran lignans. Protected derivatives of 3-hydroxymethyl-?-butyrolactone (50) were used as the starting materials of this new methodology. These derivatives were synthesized using the enantioselective hydrogenation of the unsaturated material produced from 3,3-dimethylacrylic acid (81). Enantioselective hydrogenation studies were performed using rhodium and ruthenium chiral catalysts Several butenolides derivatives were studied aiming at the obtention of a satisfactory yield of the enantioselective intermediate (50). The catalytic hydrogenation of these butenolide derivatives with rhodium and ruthenium chiral complexes showed that chelation of the substrate with the metallic center of the asymmetric catalyst strongly depends on the substituent attached to the butenolide skeleton. The hydrogenation products were obtained with a large range of optical purity (2-100% ee), depending on the substituent type. These results indicate that the presence of protective groups in the allylic hydroxyl function has a strong effect on the asymmetric hydrogenation reaction of the studied butenolides. Some computer simulations were performed in order to investigate the mechanism of substrate complexation with the chiral catalyst. [(S)-(?)-2,2?-bis-(diphenylphosphino)-1,1?-binaphtyl]chloro(p-cymene) chloride ruthenium was the chiral catalyst and 3-hydroxymethylbutenolide derivatives were used as substrates. The computer simulation results obtained to date have shown that when there is more than one point of complexation between the metallic center of the chiral catalyst and the unsaturated substrate, the activation energy of the key intermediate is lowered, thus enhancing the catalytic activity and resulting in high stereoselectivity. Once the enantioselective hydrogenation studies were concluded, we pursued the synthesis of natural products from one of the racemic derivatives, the one containing a methoxymethylether as protective group. Once the intermediate aldehyde 87 is obtained, a large number of interesting natural products could be synthesized. New methodologies are now under investigation in order to obtain aldehyde 87, which is difficult to achieve due to its low stability, as described in the literature.

A presente investigação teve por objetivo o isolamento de metabólitos secundários biologicamente ativos de nudibrânquios, moluscos conhecidos por produzirem ou acumularem substâncias a partir de suas presas. Foram investigados extratos de quatro espécies de nudibrânquios marinhos juntamente com suas respectivas presas. Além disso, também foi investigado o extrato ativo da esponja marinha Agelas sventres. O estudo realizado com o extrato bruto da esponja marinha Agelas sventres levou ao isolamento de uma série de alcalóides bromopirrólicos, compostos tipicamente encontrados em esponjas do gênero Agelas. Dentre os compostos isolados, a oroidina apresentou atividade inibitória frente à enzima Pdr5p de Saccharomyces cerevisiae. O estudo do nudibrânquio Tambja stegosauriformis e de sua presa, o briozoário Bugula sp., levou ao isolamento de diversos alcalóides da classe das tambjaminas. As tambjaminas C, D, K e o produto de hidrólise da tambjamina B foram observados nos dois animais; o produto de hidrólise da tambjamina A foi encontrado apenas no extrato do nudibrânquio, enquanto que a tambjamina A e um isômero da tambjamina J foram encontrados apenas no extrato do briozoário. O estudo do nudibrânquio Okenia zoobotryon e de sua presa, o briozoário Zoobotryon verticillatum, resultou no isolamento de um único alcalóide indólico conhecido, 2,5,6-tribromo-Nmetilgramina, presente nos dois animais. Resultados semelhantes foram obtidos a partir da investigação do extrato do nudibrânquio Hypselodoris lajensis e de sua presa, uma esponja do gênero Dysidea, com o isolamento de um único diterpeno, a lactona da furodisinina. Embora ambas substâncias sejam conhecidas, este foi o primeiro isolamento destes compostos a partir de espécies de nudibrânquios. Finalmente, a partir do extrato do nudibrânquio Pleurobranchus areolatus foram isoladas duas novas dicetopiperazinas modificadas, estruturalmente semelhantes às rodriguesinas A e B, outras dicetopiperazinas isoladas a partir da ascídia Didemnum sp., provável presa desta espécie de nudibrânquio. Vale ressaltar a utilização de análises por LC-UV-MS e MS/MS neste trabalho, que auxiliaram na identificação uma série de compostos presentes nos extratos estudados no presente trabalho, mesmo em quantidades muito pequenas. / Abstract The present investigation aimed the isolation of biologically active secondary metabolites from different species of nudibranchs, mollusks that can produce or accumulate substances from their preys. We investigated the extracts of four nudibranchs species and their respective preys. The active extract of the marine sponge Agelas sventres, has also been investigated. From the extract of the marine sponge Agelas sventres we could isolate a series of bromopyrrolic alkaloids, substances that are typically found in sponges of Agelas genus. Among the isolated compounds, oroidin was found to inhibit the activity and function of the Pdr5p enzyme from Saccharomyces cerevisiae. From the extract of the nudibranch Tambja stegosauriformis and its prey, the bryozoan Bugula sp., several known tambjamines alkaloids were isolated. The tambjamines C, D, K, and the aldehyde of the tambjamine B were found in both animals; aldehyde of tambjamine A was identified only in the nudibranch extract, whereas tambjamine A and an isomer of tambjamine J were found on the bryozoan. The study of the extract of the nudibranch Okenia zoobotryon and its prey, the bryozoan Zoobotryon verticillatum, resulted in the isolation of a single known brominated indole alkaloid, 2,5,6-tribromo-N-metilgramine, present on both animals. Similar results were obtained in the study of extract of the nudibranch Hypselodoris lajensis along with its prey, a Dysidea sponge, that led to the isolation of a single diterpene, the furodysinin lactone. Although both compounds are known, this is the first report on the isolation of those compounds from nudibranch species. Finally, the investigation of the extract from the nudibranch Pleurobranchus areolatus provided two new modified diketopiperazines, closely related to modified diketopiperazines, the rodriguesins A and B, isolated from the ascidian Didemnum sp. It is important to note the use of LC-UV-MS and MS/MS analysis in this work, which were important in the identification of several compounds present in the studied extracts in very small amounts.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2015-11-18T08:17:52Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1425978 bytes, checksum: 47bf341b7bf97215f27f8b01fcb80154 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-18T08:17:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1425978 bytes, checksum: 47bf341b7bf97215f27f8b01fcb80154 (MD5) Previous issue date: 2015-07-15 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O câncer é uma doença caracterizada pelo aumento descontrolado da proliferação celular. Em geral ocorrem paralelamente ao aumento do crescimento e perda da diferenciação celular. Assim as células cancerígenas perdem suas características originais de diferenciação e se tornam atípicas. As leucemias são neoplasias malignas que acometem as células do sangue e tem origem na medula óssea. São cânceres de grande incidência e de difícil tratamento, havendo, portanto, uma constante procura por terapias mais eficientes. O presente trabalho investigou a ação citotóxica do extrato hidroalcóolico de Croton urucurana em células leucêmicas humanas U937 e THP-1. As linhagens de células U937, THP-1 foram plaqueadas em volume de 100 μL/poço (1x10 6 cels/mL) em placas de 96 poços, tratadas com extrato nas concentrações finais de 50 μM, 100 μM, 200 μM e 400 μM e 800 μM para os testes de viabilidade celular com MTT (-3-(4,5-dimetil-2-tiazol) 2,5-difenil-2-H-brometo de tetrazom). Após 48h a viabilidade foi avaliada pelo MTT e o sobrenadante utilizado para dosagem da enzima Lactato Desidrogenase (LDH). Microscopia de fluorescência foi usada para avaliar a apoptose. O extrato foi capaz de induzir apoptose em ambas as linhagens de células testadas nas concentrações 400 e 800 μg/mL (p≤0,05). O aumento percentual da morte celular por apoptose foi associado a alterações no potencial de membrana mitocondrial sugerindo o envolvimento da via intrínseca de ativação da apoptose. / Cancer is a disease characterized by the uncontrolled rise of in the cellular proliferation. In general, it occurs in parallel to the increased growth and loss of cellular differentiation. Thus, the cancer cells lose their original properties of this cellular differentiation and become atypical. The leukaemia is a malign bone neoplasia, which affects the blood cells and have its source in the bone marrow. They are called cancers with great incidence and tough treatment, being, therefore a constant search for more efficient therapies.Thepresent study investigated the toxic action of the hydro alcoholic extract of the Croton urucuranain leukaemic cells U937, THP-1 which were plated in volume of 100 μL/pool (1x106 cels/mL) in plaques of 96 pools, treated in extracts in the final concentrations of 50 μM, 100 μM, 200 μM, 400 μM and 800 μM for the tests of cellular viability with MTT (-3- (4,5-dimethyl-2-thyazole) 2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide). After 48h the viability was tested by the MTT and the supernatant used to dosage the lactate dehydrogenase (LDH). The fluorescent microscopy was used to evaluate the apoptosis. The extract was capable to induce the apoptosis in both lineages of the tested cells, in the concentrations of 400 and 800 μg/mL (p≤0,05). The percentage increase of the cellular death by apoptosis was associated with alterations in the mitochondrial membrane potential, which suggests an involvement in the intrinsic activation path of the apoptosis.

Orientador: Wagner Vilegas / Coorientador: Lourdes Campaner dos Santos / Banca: Isabele Rodrigues Nascimento / Banca: Vera Lucia Garcia Rehder / Banca: João Carlos Palazzo de Mello / Banca: José Arimatéia Dantas Lopes / Resumo: O objetivo desse trabalho foi a investigação da composição química de plantas do Cerrado, aplicando técnicas que permitam uma análise quali e quantitativa rápida e eficaz. As espécies estudadas neste projeto foram Miconia rubiginosa e Miconia stenostachya, pertencentes à família Melastomataceae. As espécies foram coletadas no Estado de São Paulo e os infusos foram preparados e particionados com acetato de etila e água. A fração acetato de etila da M. rubiginosa foi fracionada por Cromatografia em Contracorrente de Alta Velocidade (HSCCC), sendo isolados os compostos (-)-(2R,3R)-epicatequina (Mr1), casuarictina (Mr2), canferol-3-O-β-galactopiranosídeo (Mr3) e schizandrisídeo (Mr4). A fração acetato de etila da M. stenostachya foi fracionada por cromatografia de permeação em gel utilizando Sephadex LH-20, que possibilitou o isolamento da (+)-(2R,3S)-4'-O-metilgalocatequina (Ms1), (-)-(2R,3R)-4'-O-metilepigalocatequina (Ms2), miricetina-3-O-α-rhamnopiranosídeo (Ms3) e (-)-(2R,3R)-epicatequina (Ms4). Foram desenvolvidos métodos de separação dos enantiômeros da naringenina e catequinas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplada a detectores de Dicroísmo Circular e Arranjo de Diodos (HPLC-CD-DAD). Os métodos desenvolvidos forneceram separação adequada com boa resolução. Foram obtidos os espectros de dicroísmo circular (CD) de todas as substâncias isoladas, permitindo a identificação dos enantiômeros. Uma metodologia de clean-up foi desenvolvida para a preparação de amostras para análise por cromatografia quiral. O método que utiliza cartucho de C18 (STRATA Phenomenex®) foi o que apresentou melhor seletividade. O método desenvolvido no HPLC-CD-DAD permitiu identificar a (-)-(2R,3R)-epicatequina no infuso de M. rubiginosa. O mesmo método foi aplicado para investigar a espécie Maytenus obtusifolia... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective of this project was to investigate the chemical composition of Cerrado plants, using techniques that allow a quick and efficient qualitative and quantitative analysis. In this project we studied the species Miconia rubiginosa and Miconia stenostachya which belong to the Melastomataceae family. Miconia species were collected at São Paulo State and water infusions were prepared and partitioned with EtOAc and water. The ethyl acetate fraction of M. rubiginosa was fractioned by High Speed Countercurrent Chromatography (HSCCC), and afforded (-)-(2R,3R)-epicatechin (Mr1), casuarictin (Mr2), kaempferol-3-O-β-galactopyranoside (Mr3), and schizandriside (Mr4). The ethyl acetate fraction of M. stenostachya was submitted to gel permeation chromatography over Sephadex LH-20, that led to the isolation of (+)-(2R,3S)-4'-O-methylgallocatechin (Ms1), (-)-(2R,3R)-4'-O-methylepigallocatechin (Ms2), myricetin-3-O-α-rhamnopyranoside (Ms3), and (-)-(2R,3R)-epicatechin (Ms4). Methods were developed for the enantiomeric separation of naringenin and catechins by High Performance Liquid Chromatography with Circular Dichroism and Diode Array Detectors (HPLC-CD-DAD). The developed methods provided good separation and resolution. CD spectra of all these substances were obtained, allowing the identification of the enantiomers. A clean-up methodology was developed for the preparation of plant samples previous to the chiral HPLC analysis. The method using C18-cartridge (Phenomenex STRATA®) showed the best selectivity. The method developed using HPLC-CD-DAD allowed to identify (-)-(2R,3R)-epicatechin in the infusion of M. rubiginosa. The same method was applied to investigate the commonly used... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2018-04-02T17:33:31Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_SecagemFatiasBanana.pdf: 4836791 bytes, checksum: 92a60742b424a34033c5f5e51955ec05 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2018-04-03T20:55:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_SecagemFatiasBanana.pdf: 4836791 bytes, checksum: 92a60742b424a34033c5f5e51955ec05 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-03T20:55:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_SecagemFatiasBanana.pdf: 4836791 bytes, checksum: 92a60742b424a34033c5f5e51955ec05 (MD5) Previous issue date: 1998-09-21 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Desenvolveu-se um processo de secagem de banana-prata em Leito Vibro- Fluidizado visando a produção de bananas desidratadas com propriedades organolépticas e funcionais adequadas ao consumo na forma de snacks. Rodelas de 1 centimetro de espessura seccionadas em quatro partes iguais foram pré-tratadas por imersão em soluções apropriadas para o fortalecimento da estrutura celular e então submetidas a um fluxo de ar a altas temperaturas (130 e 150ºC) e curto tempo (13 e 8 minutos, respectivamente) em uma etapa de pré-secagem HTST, proporcionando a rápida formação de uma camada externa rígida e impermeável, que auxiliou na expansão do produto. Após a pré-secagem, o produto foi seco até um teor de umidade próximo ao teor de umidade de equilíbrio, em um Secador de Bandejas à temperatura de 70ºC, com uma velocidade de ar de 3,0 m/s. O produto foi caracterizado pela densidade real, teor de umidade, cor e reidratação com o objetivo de verificar quais as melhores condições de processo. Em todos os ensaios, a vibração melhorou as taxas de transferência de calor, gerando um produto mais expandido e consequentemente com maior grau de hidratação. A vibração também auxiliou na preservação da cor. A cinética de secagem mostrou uma taxa constante na secagem HTST, e seguiu a Lei de Fick no 2º estágio da secagem. O pré-tratamento recomendado é uma imersão por trinta minutos em uma solução de PEG (P.M. 1000g/mol) na concentração de 2% com 0,5% de metabissulfito de sódio. Às condições de secagem que tiveram efeito mais positivo sobre o produto foram, temperatura de 150ºC, velocidade do ar de 1,0m/s, tempo de exposição de 8 minutos e freqüência de vibração de 10,1 Hz, O produto final assim obtido apresentou coloração clara, boa expansão, baixa densidade real. alta capacidade de absorção de água e teor de umidade na faixa de 4% e exigiu menor consumo de energia do que na secagem em leito fluidizado convencional. / A vibro-fluidized bed drying process for banana pieces was developed, in order to produce dehydrated products with improved organoieptic and functional properties, adequated for the use as snacks. Banana slices in form of dises, 1,0 cm - thick, seccioned in four equal parts were pretreated by immersion in appropriated solutions, to strengthen the celular structure and exposed to a flow of air at high temperature (130° and 150° C) for a short time (13 and 8 min, respectively) as a HTST drying step, creating a rigid and impermeable surface layer, that enhanced the expansion of the product. The product was then transfered to a 2nd stage (tray) dryer, and dryed close to the equilibrium moisture eontent, with air at 70ºC and 3 m/s velocity. The product was characterized by its density, misture eontent, color and rehydration rate, in order to evaluate the best process conditions. The vibration improved the heat transfer rates, inducing product expansion and, as a consequence, higher rehydration degree. The vibration also assisted in color preservation. A constant drying rate was found for the HTST drying and Fick^ 2nd law fitted well the 2nd stage drying data. The recommended pretreatment is an immersion of the banana pieces during 30 min, in a 2% aqueous PEG - 1000 solution containing 0.5% sodium metabisulfite. The best drying conditions were: drying air temperature. 150ºC, drying air velocity, 1.0 m/s; time of contact, 8 min and vibration frequency of 10.1 Hz. The product obtained showed light color, good expansion, low density, high water absorption capacity and moisture eontent close to 4%, The vibrated process required lower energy comsuption compare to conventional fluidized-bed drying.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3635.pdf: 8020167 bytes, checksum: 8359f4a43b9f12af94901bc609b7f92d (MD5) Previous issue date: 2011-01-21 / Financiadora de Estudos e Projetos / PART I: Polymeric nanoparticles and bioassay-guided phytochemical investigation of Trichilia elegans e Trichilia catigua (Meliaceae) for the control of leaf-cutting ants Leaf-cutting ants are known as severe agricultural pests. Several compounds have been proposed for their control such as organophosphorus, pyrethroids and sulfluramid insecticides. However, non-target animals and environmental contamination are common problems and therefore new strategies to control these pests have been requested. In this context, this work involved the bioassay-guided study of T. elegans e T. catigua (Meliaceae) and also the development and characterization of three different nanoparticles, containing either ricinine, xanthyletin or rauianin for the control of leaf-cutting ants. Phytochemical investigations from active extracts and fractions have allowed to isolate 23 compounds (3 new), including sterols, coumarins, phenolic compounds, oxazol derivative, flavonoids and limonoids. The compound 3-(4'-hydroxyphenyl)-2-propenoic acid (4''-carboxyl)-phenyl ester (14), from T. elegans, showed high biologic activity against leaf-cutting ants. Additionally, the limonoid cedrelone, from T. catigua, was active against the symbiotic fungus of leaf-cutting ants (L. Leucoagaricus gongylophorus). The solvent displacement technique adopted here showed to be very efficient for the preparation of nanoparticle formulations containing either xanthyletin or rauianin. In addition, a novel method was developed for the encapsulation of ricinine. These natural insecticides were nanoencapsulated for the first time and the results observed here showed a better activity, more water dispersivity and stabilization of nanoparticles if compared to free compounds. / PARTE I: Nanopartículas poliméricas e estudo fitoquímico biomonitorado de Trichilia elegans e Trichilia catigua (Meliaceae) associados ao controle de formigas cortadeiras. As formigas cortadeiras são conhecidas por serem uma séria praga para a agricultura e vários compostos diferentes têm sido propostos para o controle destas, tais como, organofosforados, piretróides e sulfluramidas. No entanto, problemas com animais não-alvo e contaminações ambientais são extremamente comuns e assim novas estratégias de controle desses insetos se fazem necessárias. Nesse contexto, este trabalho envolveu o estudo biomonitorado de Trichilia elegans e T. catigua (Meliaceae) e também o desenvolvimento e caracterização de nanopartículas poliméricas, contendo ricinina, xantiletina ou rauianina para o controle de formigas cortadeiras. O estudo fitoquímico dos extratos e frações ativas permitiu o isolamento de 23 compostos (3 inéditos), incluindo esteróides, cumarinas, compostos fenólicos, derivado de oxazole, flavonóides e limonóides. O composto 3-(4'-hidroxifenil)-2- propenoato de 4''-carboxilfenil (14), isolado de Trichilia elegans apresentou alta atividade contra formigas cortadeiras. O limonóide cedrelona isolado de T. catigua foi ativo contra fungo simbionte (L. gongylophorus Leucoagaricus) da formiga cortadeira. O método de nanoprecipitação se mostrou eficiente para encapsulção de xantiletina e rauianina. Em adição um método novo, aqui denominado deposição interfacial/deslocamento do solvente, foi desenvolvido visando à encapsulação de ricinina. Estes formicidas naturais foram encapsulados pela primeira vez e os resultados aqui observados demonstraram maior atividade, dispersão em meio aquoso e estabilidade das nanopartículas em comparação aos compostos livres.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3275.pdf: 4812231 bytes, checksum: bd5d722fcaf4a38feeaf1986c754351b (MD5) Previous issue date: 2010-09-23 / Universidade Federal de Minas Gerais / The Rhabdodendron amazonicum is a species of the monogeneric family Rhabdodendraceae, whose species are concentrated in the Amazon, Guianas and northern Bahia-Brazil. Phytochemical study of ethanolic extract of Rhabdodendron amazonicum leaves led to the isolation of a esterified steroid with cinnamic acid, the sitosteril cinnamate, two compounds of the class of ionone sesquiterpenes, Blumenol C and rhabdodendronlactona (unpublished). Another compound nor-ionone was identified via GC-MS analysis, selecting the chromatogram peak corresponding to ion m/z 208, which was identified as 1,5,5-trimethyl-6β-hydroxy-6-but-2-enyl-cyclohexa-1-ene-3- one. The identification of this compound reinforce the proposed biogenesis for rhabdodendronlactona from Blumenol C. Phytochemical study of methanolic extract of stem Conchocarpus inopinatus led to the isolation of three alkaloids: one acridones (methylarborinine), one quinolones (1-methyl-2-phenyl-4- quinolone) and one furoquinoline (dictamnine) and two coumarins, the marmesin and scopoletin. All substances, except for scopoletin were submitted to the inhibition tests of electron transport basal, phosphorylating and uncoupled. But only the marmesin showed inhibitory activity in the basal and uncoupled electron transport. Through measures of chlorophyll fluorescence, analyzing the parameters related to transient OJIP, could suggest the marmesin action in the pool of quinones, inhibiting the transport of electrons from this region. However, to confirm this mechanism of action would require the implementation of other partial reactions involving donors and acceptors of electrons, which were not possible due to the low quantity of isolated compound. / A Rhabdodendron amazonicum é uma espécie da família monogenérica Rhabdodendraceae, cujas espécies estão concentradas na Amazônia, Guianas e no norte da Bahia-Brasil. O estudo fitoquímico do extrato etanólico das folhas da Rhabdodendron amazonicum levou ao isolamento de um esteróide esterificado com o ácido cinâmico, o cinamato de sitosterila, dois compostos da classe dos sesquiterpenos iononas, blumenol C, e a rhabdodendronlactona (inédita). Um outro composto nor-ionona foi identificado via a análise CG-EM, selecionando no cromatograma o pico correspondente ao íon m/z 208, o qual foi identificado como 1,5,5-trimetil-6β-hidroxi-6-but-2-enilciclohex- 1-eno-3-ona. A identificação deste composto reforça a proposta de biogênese para a rhabdodendronlactona a partir do blumenol C. O estudo fitoquímico do extrato metanólico do caule da Conchocarpus inopinatus levou ao isolamento de 3 alcalóides, sendo 1 acridônico (metilarborinina), 1 quinolônico (1-metil-2-fenil-4-quinolona) e 1 furoquinolínico (dictamina); e duas cumarinas: a marmesina e a escopoletina. Todas as substâncias, com exceção da escopoletina, foram submetidas aos ensaios de inibição do transporte de elétrons basal, desacoplado e fosforilante. Mas somente a marmesina apresentou atividade de inibição no transporte de elétrons basal e desacoplado. Através de medidas de fluorescência da clorofila a, analisando os parâmetros relacionados aos transientes OJIP, pode-se sugerir a ação da marmesina no pool das quinonas, impedindo o transporte de elétrons a partir desta região. Porém para confirmar tal mecanismo de ação, seria necessário a realização de outras reações parciais envolvendo doadores e aceptores de elétrons, o que não foi possível devido à pouca quantidade do composto isolado.