Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2329.pdf: 1318463 bytes, checksum: 91365257065327c5dbaf7e6100a4e5b1 (MD5) Previous issue date: 2009-12-21 / Universidade Federal de Sao Carlos / Fractures of delayed consolidation and fractures with non-union are commonly found in medical practice and are associated with high morbidity and mortality. Within this context, biochemical and biophysical resource have been studied in an attempt enhance bone healing. Among these may be highlighted the use of bioactive materials and low level laser therapy (LLLT). Several studies suggest that both resources are able to stimulate proliferation of osteoblasts and osteogenesis at the fracture site, promoting a greater deposition of bone mass and accelerating the process of consolidation. So the main purpose of the present work was to evaluate the effects of low-intensity laser (λ = 830nm), with fluencies of 60J/cm² and 120J/cm² and a bioactive ceramic, Biosilicato®, used alone or associated on bone consolidation of the tibial fractures in healthy rats. For the study 60 male Wistar rats were randomly divided in 6 groups: group bone defect control (GCF); group bone defect irradiated with LLLT, at 60 J/cm2 (GL60); group bone defect irradiated with LLLT, at 120 J/cm2 (GL120); group bone defect filled with Biosilicate® (GB); group bone defect filled with Biosilicate® , irradiated with LLLT, at 60 J/cm2 (GB60); and group bone defect filled with Biosilicate®, irradiated with LLLT, at 120 J/cm2 (GB120). A low-energy GaAlAs 830nm, CW, 100 mW, 60 and 120 J.cm² was used in this study. The rats were anesthetized by intraperitoneal injection of ketamine and xylazine 2% and a standardized 2.0-mm-diameter bone defect was created by using a motorized drill under copious irrigation with saline solution. Laser irradiation was initiated immediately after the surgery procedure and it was performed every 48 h for 14 days. After 14 day post-surgery, biomechanical analysis revealed no statistical differences between experimental groups. However, the morphological and morphometric analysis showed that the laser, in the two fluencies evaluated showed values statistically higher than control group and the Biosilicate®. Interestingly, the groups treated with Biosilicate® and laser, in two fluencies, showed statistically lower values of newly formed bone in the area of the defect even when compared with the control group. The scanning electron microscopy showed an intense presence of the biomaterial in bone defects of their animals. From the results obtained in this study, we concluded that the low-intensity laser was more effective in the process of bone repair when compared with biomaterial or the two resources associated. / Fraturas com atraso na consolidação e fraturas com não-união óssea são comumente encontradas na prática médica e estão associadas a altos índices de morbidade e mortalidade. Dentro deste contexto, recursos biofísicos e bioquímicos têm sido estudados na tentativa de minimizar o tempo de consolidação óssea. Dentre estes, podem ser destacados o uso dos materiais bioativos e do laser terapêutico de baixa potência (LLLT). Vários estudos sugerem que ambos os recursos são capazes de estimular a proliferação de osteoblastos e a osteogênese no local da fratura, promovendo uma maior deposição de massa óssea e acelerando o processo de consolidação. Diante disso, este estudo teve o objetivo de verificar os efeitos do laser de baixa intensidade (λ = 830nm), com fluências de 60J/cm² e 120J/cm² e de uma vitrocerâmica bioativa, Biosilicato®, utilizados independentemente ou associados na consolidação óssea de fraturas tibiais em ratos saudáveis. Para o estudo, foram utilizados 60 ratos, da linhagem Wistar, distribuídos aleatoriamente nos seguintes grupos: grupo GCF: controle, com fratura e sem tratamento; grupo GL60: fratura tratado com LLLT, fluência de 60J/cm²; grupo GL120: fratura tratado com LLLT, fluência de 120J/cm²; grupo GB: fratura tratado com Biosilicato®; grupo GB60: fratura tratado com Biosilicato® e LLLT, fluência de 60J/cm² e grupo GB120: fratura tratado com Biosilicato® e LLLT, fluência de 120J/cm². Foi utilizado um laser de baixa potência As-Ga-Al, 830nm, CW, 100 mW, 60 e120 J/cm². Os ratos foram anestesiados por injeção intraperitonial de Ketamina e Xilasina. Em seguida, realizou-se defeitos ósseos de 2mm de diâmetro nas tíbias dos animais. A irradiação laser iniciou-se imediatamente após a cirurgia e a cada 48 horas totalizando, 7 aplicações em 14 dias. O sacrifício foi realizado no 14º dia. A análise biomecânica das tíbias não revelou diferenças estatísticas entre os grupos experimentais. No entanto, a análise morfológica e morfométrica revelaram que o grupo laser, nas duas fluências avaliadas, apresentou valores estatisticamente maiores que o grupo controle e o grupo Biosilicato®. Interessante, os grupos tratados com a associação do biomaterial e laser, nas duas fluências, apresentaram valores estatisticamente menores de osso neoformado, mesmo quando comparados ao grupo controle. A microscopia eletrônica de varredura mostrou uma intensa presença do biomaterial nos defeitos ósseos dos respectivos animais. A partir dos resultados obtidos neste estudo, pode-se concluir que o laser terapêutico de baixa potência foi mais eficaz no processo de reparo ósseo quando comparado ao biomaterial, ou mesmo com as duas modalidades de tratamento associadas.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3621.pdf: 12488772 bytes, checksum: 3b893af6e3b0ea869fd5eda12f270c8a (MD5) Previous issue date: 2011-02-24 / Financiadora de Estudos e Projetos / Several resources have been studied in order to accelerate the process of bone repair. Among these resources, bioactive materials and low level laser therapy (LLLT) have gained prominence. Several studies suggest that both resources are able of stimulating osteoblast proliferation and osteogenesis at the fracture site, promoting a greater deposition of bone mass, which is fundamental for the consolidation process. Within this context, this project aimed to assess the effects of LLLT (_ = 830nm), with the fluencies of 120J/cm ² and scaffold Biosilicate®, used associated or not, on consolidation of induced tibial bone defects in the rats. In this study it was used 40 male Wistar rats (3 months ± 250g) divided into four groups (with 10 animals each): group control bone defect without any treatment (GC), group bone defect irradiated with LLLT 830nm (GL); group bone defect treated with implantation of scaffolds Biosilicate ® (GB); group bone defect treated with implantation of scaffolds Biosilicate ® and LLLT 830nm (GBL). The animals were submitted to laser irradiation (Ga-As-Al, 830nm, 100mW) at a single point on the bone defect for eight sessions, on alternate days. The euthanasia of animals occurred at day 15 after surgery, 24 hours after the last laser treatment session. Morphological analysis revealed that the laser group, showed better tissue organization in relation to other groups. Furthermore, morphometric analysis revealed that the irradiated animals showed a higher amount of newly formed bone compared to the other groups. The expression of COX-2 and RUNX-2/CBFA-1 were higher in GB and GBL groups. Also, biomechanical analysis revealed no statistical differences among experimental groups. From the results obtained in this study, it is possible to suggest that both treatments had osteogenic potential 15 days after surgery, but the LLLT was more effective in bone repair when compared to the biomaterials, or even when the two treatment modalities were associated. / Vários recursos têm sido estudados com o intuito de acelerar o processo de reparação óssea. Dentre esses recursos, os materiais bioativos e a Terapia Laser de Baixa Intensidade (LLLT) vêm se destacando, vários estudos sugerem que ambos os recursos são capazes de estimular a proliferação de osteoblastos e a osteogênese no local da fratura, promovendo maior deposição de massa óssea, fundamental para o processo de consolidação. Dentro deste contexto, esse projeto teve como objetivo verificar os efeitos da LLLT (_ = 830nm), com fluência de 120J/cm² e do scaffold de Biosilicato®, utilizados independentemente ou associados na consolidação de defeitos ósseos induzidos em tíbias de ratos. Foram utilizados 40 ratos machos da linhagem Wistar (3 meses de idade ± 250 gramas) distribuídos em 4 grupos experimentais com 10 animais cada: grupo controle com defeito ósseo e sem tratamento (GC); grupo defeito ósseo tratado com Laser 830nm (GL); grupo defeito ósseo tratado com implante de scaffolds de Biosilicato® (GB); grupo defeito ósseo tratado com implante de scaffolds de Biosilicato® e Laser 830nm (GBL). Os animais foram submetidos a irradiação Laser (Ga-As-Al, 830nm, 100mW) em um único ponto sobre o defeito ósseo por oito sessões de tratamento, em dias alternados. A eutanásia dos animais aconteceu no 15º dia após a cirurgia, 24 horas após a última sessão de tratamento Laser. A análise morfológica revelou que o grupo Laser, apresentou melhor organização tecidual em relação os demais grupos experimentais. Além disso, a análise morfométrica evidenciou uma maior quantidade de osso neoformado no grupo tratado com Laser comparado aos animais dos demais grupos. A expressão à COX-2 e a RUNX-2/CBFA-1 mostrou-se mais intensa nos grupos GB e GBL e na análise biomecânica não houve diferença estatística entre os grupos experimentais. A partir dos resultados obtidos neste estudo, pode-se sugerir que ambos os tratamentos apresentaram potencial osteogênico 15 dias após a cirurgia, porém a Terapia Laser de Baixa Intensidade foi mais eficaz no processo de reparo ósseo, quando comparado ao biomaterial, ou mesmo quando as duas modalidades de tratamento foram associadas.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5657.pdf: 4882476 bytes, checksum: ecaf13ba1de9758d6f63d658eefadedc (MD5) Previous issue date: 2012-02-17 / Financiadora de Estudos e Projetos / The objective of this study was to analyze the effects of Low level laser therapy (LLLT) associated with aerobic physical exercise on the muscle regeneration process during 2 periods of rest after of the muscle injury in rats. Forty rats were divided into 2 groups (A and B), and 4 subgroups each: GC (Control Group) - cryolesioned untreated; GE (Exercise Group) - cryolesioned treated with aerobic physical exercise; GL (Laser Group) - cryolesioned treated with laser; GEL (Exercise and Laser Group) - cryolesioned treated with laser and aerobic physical exercise. The tibialis anterior (TA) of the middle belly was injured by a cooling iron bar (cryoinjury). The animals in Group A remained at rest for 3 days, while Group B remained at rest for 7 days. The laser parameters were: 780 nm, 15 mW, during 10 s, 0.152 J e 3.8 J/cm². Physical exercises with or without laser were performed during 5 days, each session lasting 12 min at a treadmill velocity of 17 m/min. The AT muscles were removed for histological and morphometric analysis. The damage area was significantly smaller for the GEL, when remained at rest for 3 and 7 days respectively, (4.4±0.42 % and 3.5±0.14 %, p < 0.05) compared to GL (18.6±0.64 % and 7.5±0.13 %), GE (21±0.26 % and 8.7±0.32 %) and GC (23.9±0.37 % and 21.4±0.38 %). In addition, the number of blood vessels were significantly higher for the GEL, when remained at rest for 3 and 7 days respectively, (71.2±13.51 % and 104.5±11,78, p < 0.05) compared to the GL (60.6±11.25 and 93.5±16.87), GE (51.6±7.3 and 93.8±15.1) and GC (34.4±2.54 and 65.7±14.1). Therefore, the laser applied before the physical exercise on the treadmill stimulated an angiogenesis and accelerated the process of muscle regeneration. / O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos da laserterapia e do exercício físico aeróbio sobre a regeneração do músculo tibial anterior de ratos com diferentes períodos de repouso após a lesão. Foram utilizados para este estudo 40 ratos Wistar que foram submetidos à cirurgia para criolesão no músculo tibial anterior (TA). Os animais foram divididos em 2 grupos (A e B). Os animais do Grupo A permaneceram em repouso por 3 dias, enquanto o Grupo B permaneceu em repouso por 7 dia. Cada grupo foi subdividido em 4 grupos: o GC (Grupo Controle) lesionado e não tratado; o GE (Grupo Exercício) lesionado e tratado com exercício físico na esteira; o GL (Grupo Laser) - lesionado e tratado com laser e; o GEL (Grupo Exercício e Laser) lesionado e tratados com exercício físico na esteira e laser. Os parâmetros do laser utilizado foram 780 nm, 15 mW de potência, tempo de 10 s, com energia de 0,125J e dose de 3,8 J/cm2. O exercício físico com ou sem laser foi realizado durante 5 dias, cada sessão teve a duração de 12 minutos e a velocidade da esteira foi 17 m/min. Os músculos TA foram retirados para análise histológica e morfométrica. A área de lesão foi significativamente menor no GEL, quando o repouso foi mantido por 3 e 7 dias respectivamente, (4,4±0,42 % e 3,5±0,14 %, p < 0.05) comparado ao GL (18,6±0,64 % e 7,5±0,13 %), GE (21±0,26 % e 8,7±0,32 %) e GC (23,9±0,37 % e 21,4±0,38 %). Ainda, o número de vasos sanguíneos foi significantemente maior no GEL, quando o repouso foi mantido por 3 e 7 dias respectivamente, (71,2±13,51 % e 104,5±11,78, p < 0.05) comparado ao GL (60,6±11,25 e 93,5±16,87), GE (51,6±7,3 e 93,8±15,1) e GC (34,4±2,54 e65,7±14,1). Portanto, o laser aplicado antes do exercício físico na esteira estimulou a angiogênese e acelerou o processo de regeneração muscular.

Submitted by Bruna Rodrigues (bruna92rodrigues@yahoo.com.br) on 2016-09-14T14:47:04Z No. of bitstreams: 1 TesePRGA.pdf: 5283158 bytes, checksum: c57ad9ff767d07147f784d369b1084cf (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-15T13:55:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TesePRGA.pdf: 5283158 bytes, checksum: c57ad9ff767d07147f784d369b1084cf (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-15T13:56:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TesePRGA.pdf: 5283158 bytes, checksum: c57ad9ff767d07147f784d369b1084cf (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-15T13:56:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TesePRGA.pdf: 5283158 bytes, checksum: c57ad9ff767d07147f784d369b1084cf (MD5) Previous issue date: 2015-03-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Millions of bone fractures occur annually worldwide and the consequent bone repair process is complex, involving many biological events until it reaches the restoration of the tissue integrity. During that process some problems can occur due to delays in the bone healing, which does not allow the proper joining of the tissue. Thus, it is necessary to search for new technologies that work in restoring the integrity of the bone tissue and that promote the osteoconduction and the osteoinduction. In this sense, the use of bioactive materials in the bone repair process is a promising alternative. Following this, two studies (I and II) were developed in order to investigate a new fibrous glassy scaffold, and these studies were based in three lines of research: (i) the characterization of the new fibrous glassy scaffold; (ii) the biocompatibility evaluation of this bioactive material; (iii) the analysis of the biological performance of this new scaffold in the bone repair. More specifically, in the study I the developed scaffolds were characterized in terms of porosity, mineralization and morphological features. Additionally, fibroblast and osteoblast cells were seeded in contact with extracts of the scaffolds to assess cell proliferation and genotoxicity after 24, 72 and 144 h. Finally, scaffolds were placed subcutaneously in rats for 15, 30 and 60 days. In regards to study II, the morphological structure of the scaffolds upon incubation in phosphate buffered saline (PBS) (via scanning electron microscope) was assessed after 1, 7 and 14 days and, also, the in vivo tissue response to the new biomaterial was evaluated using implantation in rat tibial defects. The histopathological, immunohistochemistry and biomechanical analyzes after 15, 30 and 60 days of implantation were performed to investigate the effects of the material on bone repair. The scaffolds presented interconnected porous structures (porosity of ~75%), and the precursor bioglass could mineralize a hydroxycarbonate apatite (HCA) layer in SBF after only 12 h. The PBS incubation indicated that the fibers of the glassy scaffold degraded over time. With regards to the biological investigations, the biomaterial elicited increased fibroblast and osteoblast cell proliferation, and no DNA damage was observed. The in vivo experiment showed degradation of the biomaterial over time, with soft tissue ingrowth into the degraded area and the presence of multi-nucleated giant cells around the implant. At day 60, the scaffolds were almost completely degraded, and an organized granulation tissue filled the area. Additionally, the histological analysis of the implants in the bone defects revealed a progressive degradation of the material with increasing implantation time and also its substitution by granulation tissue and woven bone. Histomorphometry showed a higher amount of newly formed bone area in the control group (CG) compared to the biomaterial group (BG) 15 days post-surgery. After 30 and 60 days, CG and BG showed a similar amount of newly formed bone. The novel biomaterial enhanced the expression of RUNX-2 and RANK-L, and also improved the mechanical properties of the tibial callus at day 15 after surgery. These results indicate that the new fibrous glassy scaffold is bioactive, non-cytotoxic, biocompatible and promising for using in bone tissue engineering. / Milhões de fraturas ósseas ocorrem anualmente no mundo todo e o processo de reparo é complexo, envolvendo muitos eventos biológicos até que se atinja a restauração da integridade do tecido. Problemas nessa regeneração podem ocorrer, levando a não união óssea. Assim, faz-se necessária a busca por novas tecnologias que atuem na restauração da integridade do tecido ósseo e promovam a osteocondução e a osteoindução. Para tanto, uma alternativa promissora é a utilização de materiais bioativos para o reparo ósseo. Seguindo essa linha, foram realizados dois estudos (I e II) acerca de um novo scaffold vítreo fibroso, sendo estes estudos baseados em três linhas de investigação: (i) caracterização do novo scaffold vítreo fibroso; (ii) avaliação da biocompatibilidade desse material bioativo e (iii) análise do desempenho biológico desse novo scaffold no reparo ósseo. Mais especificamente, no estudo I foi feita a caracterização dos scaffolds em termos de porosidade, mineralização e características morfológicas. Adicionalmente, fibroblastos e osteoblastos foram cultivados em contato com extratos dos scaffolds para avaliação da proliferação celular e genotoxicidade após 24, 72 e 144 h. Finalmente, nesse mesmo estudo, os scaffolds foram implantados subcutaneamente em ratos por 15, 30 e 60 dias. No que se refere ao estudo II, foram feitas avaliações da estrutura morfológica dos scaffolds (via microscopia eletrônica de varredura) imersos em tampão fosfato salino (PBS) após 1, 7 e 14 dias, além de investigações do efeito no reparo ósseo do novo scaffold utilizando implantação do mesmo em defeitos ósseos tibiais em ratos. Análises histopatológicas, imunohistoquímicas e biomecânicas foram realizadas 15, 30 e 60 dias após a implantação. Os scaffolds apresentaram estruturas altamente porosas (porosidade de ~75%) e interconectadas, e o biovidro precursor mineralizou uma camada de hidroxicarbonatoapatita (HCA) em SBF (simulated body fluid) após o curto período de 12 h. A incubação em PBS indicou que as fibras do scaffold apresentaram sinais de degradação com o passar do tempo. Sobre os testes biológicos, o novo biomaterial levou a um aumento da proliferação de fibroblastos e osteoblastos, e nenhum dano ao DNA foi observado. Os experimentos de implantação do material no subcutâneo indicaram degradação do biomaterial acompanhada do crescimento interno de tecido mole e presença de células gigantes multinucleadas ao redor do implante. Após 60 dias, os scaffolds estavam quase completamente absorvidos e um tecido de granulação organizado preenchia a área de implantação. Adicionalmente, as análises histológicas dos scaffolds em defeitos ósseos revelaram uma degradação progressiva do biomaterial e substituição do mesmo por tecido de granulação e tecido ósseo neoformado. A histomorfometria mostrou uma maior quantidade de osso neoformado no grupo controle (CG) comparado ao grupo biomaterial (BG) 15 dias após a cirurgia. No entanto, depois de 30 e 60 dias, CG e BG apresentaram quantidades similares de osso neoformado. Além disso, o novo biomaterial aumentou a expressão de RUNX-2 e RANK-L, e também melhorou as propriedades mecânicas do calo tibial 15 dias após a cirurgia. Os resultados indicam que o novo scaffold vítreo fibroso é bioativo, não-citotóxico, biocompatível e promissor para utilização na engenharia do reparo ósseo.

Submitted by Vasti Diniz (vastijpa@hotmail.com) on 2017-09-06T12:44:39Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1491913 bytes, checksum: 48f18b769a4ddee1245aef6c202388b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-06T12:44:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1491913 bytes, checksum: 48f18b769a4ddee1245aef6c202388b1 (MD5) Previous issue date: 2017-02-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Basal Cell Carcinoma (BCC) is a frequent neoplasm in humans and its main etiological factor is exposure to solar radiation. Although genetic and epigenetic changes can activate proto-oncogenes, inactivate tumor suppressor genes and repair mechanism genes, the cell has several mechanisms that contribute to the maintenance of genomic stability. Mutations in repair genes can lead to tumor progression and loss of genome integrity leading to the onset of cancer. Nucleotide excision repair (NER) is an important mechanism primarily used to repair injuries caused by UV. The objective of this study was to evaluate single nucleotide polymorphisms (SNP) of XPA and XPC genes and the risk of developing BCC. One hundred samples of paraffined tissue from patients from the State of Paraíba with histopathological diagnosis of BCC were analyzed for each polymorphism. The results were obtained by a newly developed genotyping method, the Dideoxy Unique Allele Specific - PCR, a method that presents high sensitivity and low cost. Graphpad Prism 6.01 software was used for the statistical analysis and application of Chi-square and Fisher's exact test. The SNP rs535425175 of the XPC gene showed a significant association with the BCC in the analyzed samples (X2 = 14.51 and P <0.005). Whereas the SNPs rs745769173 of the XPA gene and rs761106780 of the XPC gene are in the Hardy-Weinberg equilibrium, not showing any association with the neoplasia. The results suggest that the SNP rs535425175 of the XPC gene may be considered a risk factor associated with the development of BCC. / O Carcinoma Basocelular (CBC) é uma neoplasia frequente em seres humanos e seu principal fator etiológico é a exposição à radiação solar. Embora alterações genéticas e epigenéticas possam ativar proto-oncogenes, inativar genes supressores de tumor e genes do mecanismo de reparo, a célula apresenta vários mecanismos que contribuem para a manutenção da estabilidade genômica. Mutações em genes de reparo podem levar a progressão tumoral e à perda da integridade do genoma levando ao surgimento do câncer. O reparo por excisão de nucleotídeo (NER) é um importante mecanismo utilizado principalmente para reparar lesões causadas por UV. O objetivo deste trabalho foi avaliar polimorfismos de nucleotídeo único (SNP) dos genes XPA e XPC e o risco de desenvolver CBC. Foram analisadas 100 amostras de tecido parafinado de pacientes do Estado da Paraíba com diagnóstico histopatológico de CBC para cada polimorfismo. Os resultados foram obtidos por um método de genotipagem recentemente desenvolvido, o Didesoxi Único Alelo Específico – PCR, método que apresenta alta sensibilidade e de baixo custo. O software Graphpad Prism 6.01 foi utilizado para as análises estatísticas e aplicação de teste Qui-quadrado e Exato de Fisher. O SNP rs535425175 do gene XPC apresentou associação significativa com o CBC nas amostras analisadas (X2=14,51 e P<0,005). Enquanto que os SNP rs745769173 do gene XPA e rs761106780 do gene XPC estão no equilíbrio de Hardy-Weinberg, não apresentando associação com a neoplasia. Os resultados sugerem que o SNP rs535425175 do gene XPC pode ser considerado um fator de risco associado ao desenvolvimento de CBC. Palavras-chaves: Carcinoma Basocelular, Família XP, Reparo por excisão de nucleotídeo, Polimorfismo de nucleotídeo único, Genotipagem. VII

Made available in DSpace on 2015-03-03T14:03:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sarah_DVM_DISSERT_PARCIAL.pdf: 746876 bytes, checksum: f638a2adc04ebb6e7a39258725abbfde (MD5) Previous issue date: 2009-09-28 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Uma glucana insol?vel foi isolada de fermento biol?gico (Saccharomyces cerevisiae), o qual foi submetido a um tratamento com base e o res?duo acidificado. An?lises qu?micas e resson?ncia magn?tica nuclear (NMR) em uma e duas dimens?es (1D e 2D) mostraram que uma ?-(1 3) glucana linear foi purificada, a qual n?o estava contaminada com outros carboidratos, prote?nas ou compostos fen?licos. Os efeitos desta glucana na cicatriza??o de feridas foi avaliado em ?lceras venosas humanas por an?lise histopatol?gica ap?s 30 dias de tratamento. A ?-(1 3) glucana favoreceu a cicatriza??o das ?lceras, promovendo o aumento da hiperplasia epitelial, das c?lulas inflamat?rias, angiog?nese e prolifera??o fibrobl?stica. Este foi o primeiro estudo que investigou o efeito da ?-(1 3) glucana na cicatriza??o de ?lceras venosas em humanos. Os achados sugerem que a glucana ? um potente modificador da resposta biol?gica na cicatriza??o de feridas

Made available in DSpace on 2015-03-03T15:19:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AndreaLO.pdf: 448824 bytes, checksum: 4a360d0db40a607834f5c380870bc7f5 (MD5) Previous issue date: 2009-02-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The genome of all organisms is subject to injuries that can be caused by endogenous and environmental factors. If these lesions are not corrected, it can be fixed generating a mutation which can be lethal to the organisms. In order to prevent this, there are different DNA repair mechanisms. These mechanisms are well known in bacteria, yeast, human, but not in plants. Two plant models Oriza sativa and Arabidopsis thaliana had the genome sequenced and due to this some DNA repair genes have been characterized. The aim of this work is to characterized two sugarcane cDNAs that had homology to AP endonuclease: scARP1 and scARP3. In silico has been done with these two sequences and other from plants. It has been observed domain conservation on these sequences, but the cystein at 65 position that is a characteristic from the redox domain in APE1 protein was not so conservated in plants. Phylogenetic relationship showed two branches, one branch with dicots and monocots sequence and the other branch with only monocots sequences. Another approach in order to characterized these two cDNAs was to construct overexpression cassettes (sense and antisense orientation) using the 35S promoter. After that, these cassettes were transferred to the binary vector pPZP211. Furthermore, previously in the laboratory was obtained a plant from nicotiana tabacum containing the overexpression cassette in anti-sense orientation. It has been observed that this plant had a slow development and problems in setting seeds. After some manual crossing, some seeds were obtained (T2) and it was analyzed the T2 segregation. The third approach used in this work was to clone the promoter region from these two cDNAs by PCR walking. The sequences obtained were analyzed using the program PLANTCARE. It was observed in these sequences some motives that may be related to oxidative stress response / O genoma de todos os organismos est? sujeitos a les?es que podem ser causados por fatores end?genos e ambientais. Uma vez no genoma, as les?es podem levar a forma??o e ac?mulo de muta??es, as quais podem ser prejudiciais ao desenvolvimento do organismo. As vias de reparo de DNA s?o um mecanismo que permite o organismo detectar e corrigir essas les?es ou minimizar seus efeitos. V?rias vias de reparo de DNA s?o conhecidas e bem caracterizadas em animais e microorganismos. Em plantas, as vias de reparo ainda n?o s?o bem caracterizadas, mas muitas pesquisas t?m revelado a participa??o de todas as vias conhecidas no reparo do genoma das plantas, sendo os modelos mais estudados Arabidopsis thaliana e Oriza sativa. A via de reparo de interesse deste trabalho ? a via de BER, a qual apresenta v?rias prote?nas atuando no reparo do DNA. Por?m, a classe de prote?nas da via BER focadas s?o as AP endonucleases, respons?veis pela hidr?lise do s?tio AP. Este trabalho teve como objetivo caracterizar dois cDNAs de cana-de-a??car: scARP1 e scARP3, hom?logos a AP endonucleases de A.thaliana e identificados num trabalho de data-mining do projeto SUCEST. Para tanto, foram constru?dos cassetes de super-express?o, contendo o cDNA scARP1 sob o controle do promotor forte 35S. Al?m disso, anteriormente no laborat?rio foi obtido uma planta de icotiana tabacum contendo o cassete de super-express?o (35S+scARP1) em orienta??o anti-senso. Foi analisado o desenvolvimento desta planta, e foram obtidas tamb?m algumas sementes (T2) desta planta. Estas sementes foram germinadas e analisadas quanto ? presen?a do cassete de super-express?o e desenvolvimento. Al?m disso, para estes dois genes foram clonados as regi?es promotoras por PCR walking. Os fragmentos obtidos foram clonados, sequenciados e, analisados por meio do programa PLANTCARE. Os motivos encontrados nessas regi?es dos genes de cana-de-a??car foram comparados com potenciais regi?es promotoras das plantas de Arabidopis, O. sativa e S. bicolor. Estas an?lises mostraram a presen?a de diferentes motivos relacionados ? respostas ao estresse oxidativo

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-02-29T22:55:50Z No. of bitstreams: 1 StefaniaJeronimoFerreira_TESE.pdf: 1963411 bytes, checksum: 83b197f2ea9b0bdbd5ac4b4732412733 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-03-02T19:57:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 StefaniaJeronimoFerreira_TESE.pdf: 1963411 bytes, checksum: 83b197f2ea9b0bdbd5ac4b4732412733 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-02T19:57:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 StefaniaJeronimoFerreira_TESE.pdf: 1963411 bytes, checksum: 83b197f2ea9b0bdbd5ac4b4732412733 (MD5) Previous issue date: 2015-02-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / As vias de reparo por excis?o de base (BER) e por excis?o de nucleot?deo (NER) desempenham um papel crucial na manuten??o da integridade gen?mica. Polimorfismos em genes das vias BER e NER, que modulam a capacidade de reparo do DNA, podem estar relacionados ao risco de desenvolvimento e progn?stico do c?ncer oral. O presente trabalho teve como objetivo investigar a frequ?ncia de polimorfismos de nucleot?deos simples, em dois genes da via de reparo do DNA por excis?o de base (XRCC1 ? rs25487 e APEX1 ? rs1130409) e dois genes da via de reparo por excis?o de nucleot?deo (XPD ? rs13181 e XPF ? rs1799797), em pacientes com carcinoma de c?lulas escamosas oral (CCEO), buscando associa??es com o risco de desenvolver esta neoplasia maligna e o seu progn?stico. Um total de 92 amostras de DNA de pacientes com CCEO e 130 controles foram genotipadas utilizando o m?todo da rea??o em cadeia da polimerase em tempo real. O software estat?stico GraphPad Prism version 6.0.1. foi utilizado para a aplica??o dos testes apropriados. Odds ratio (OR) e hazard ratio (HR), e seus intervalos de confian?a (IC) de 95%, foram calculados pela regress?o log?stica. A avalia??o do progn?stico foi realizada por meio da curva de Kaplan-Meier e an?lise multivariada de Cox. A presen?a das variantes polim?rficas nos genes XRCC1, APEX1, XPD, e XPF n?o foram associadas ao risco de desenvolver CCEO. A intera??o da presen?a da variante polim?rfica com o h?bito de fumar n?o foi significativa para nenhum dos polimorfismos analisados. J? a presen?a do polimorfismo em XPD, somada ao h?bito de beber, aumentou o risco de desenvolver CCEO (OR 1,86, 95% IC: 0,86 ? 4,01, p=0,03). Apenas o SNP do APEX1 (rs1130409) esteve associado a uma diminui??o da sobrevida espec?fica (HR 3,94, 95% IC: 1,31 ? 11,88, p=0,01). O presente estudo sugere uma intera??o entre o consumo de ?lcool e a presen?a do polimorfismo estudado no gene XPD. Al?m disso, indica um pior progn?stico para pacientes que possuem o polimorfismo estudado em APEX1. / Base excision repair (BER) and nucleotide excision repair (NER) pathways play critical role in maintaining genome integrity. Polymorphisms in BER and NER genes which modulate the DNA repair capacity may affect the susceptibility and prognosis of oral cancer. This study was conducted with genomic DNA from 92 patients with oral squamous cell carcinomas (OSCC) and 130 controls. The cases were followed up to explore the associations between BER and NER genes polymorphisms and the risk and prognosis of OSCC. Four single-nucleotide polymorphisms (SNPs) in XRCC1 (rs25487), APEX1 (rs1130409), XPD (rs13181) and XPF (rs1799797) genes were tested by polymerase chain reaction ? quantitative real time method. The GraphPad Prism version 6.0.1 statistical software was applied for statistical analysis of association. Odds ratio (OR), hazard ratio (HR), and their 95 % confidence intervals (CIs) were calculated by logistic regression. Kaplan-Meier curve and Cox proportional hazard model were used for prognostic analysis. The presence of polymorphic variants in XRCC1, APEX1, XPD and XPF genes were not associated with an increased risk of OSCC. Gene-environment interactions with smoking were not significant for any polymorphism. The presence of polymorphic variants of the XPD gene in association with alcohol consumption conferred an increased risk of 1.86 (95% CI: 0.86 ? 4.01, p=0.03) for OSCC. Only APEX1 was associated with decreased specific survival (HR 3.94, 95% CI: 1.31 ? 11.88, p=0.01). These results suggest an interaction between polymorphic variants of the XPF gene and alcohol consumption. Additionally APEX1 may represent a prognostic marker for OSCC.

Este trabalho tem por finalidade o estudo da resistência à pressão hidrostática do reparo realizado com chapa de aço de baixo carbono, colada com adesivo estrutural à base de epóxi em tubulações de aço com furo. Tubulações de parede fina, sob pressão interna, a tensão na direção longitudinal é a metade da tensão circunferencial do tubo, deste modo, o fator de forma da área do reparo, ou seja, a variação das dimensões da chapa nas direções longitudinal e circunferencial do tubo foi investigado. A influência da força de falha do reparo, quando varia-se a dimensão da chapa nas direções citadas, foram analisadas estatisticamente utilizando-se um planejamento fatorial de experimentos. Altos valores de resistência hidrostática do reparo foram encontrados (em torno de 240 bar) quando comparados com as pressões normais de trabalho (em torno de 70 bar) de uma tubulação similar as utilizadas nos testes. Os resultados da pressão de falha do reparo dos 10 grupos analisados apresentaram desvios padrão pequenos, menor que 12 %, demonstrando a eficiência dos procedimentos adotados na confecção do reparo. Os estudos demonstram a não existência de um fator de forma na resistência do reparo devido a variação nas dimensões da chapa nas direções longitudinal e circunferencial do tubo bem como a alta influência na resistência do reparo quando aumenta a área da chapa. Os resultados apontam para o desenvolvimento de um novo procedimento de reparo de contingência. / In this work, the resistance to hydrostatic pressure of repair with steel plate low carbon, glued with structural adhesive epoxy in the steel pipes with hole was investigated. Thin-wall pipes under internal pressure, the tension in the longitudinal direction is half the circumferential stress the pipe, thus the shape factor of repair area, that is, the change of the plate size in the longitudinal and circumferential directions tube was evaluated. The influence of repair failure strength when vary the size of the plate in the mentioned directions, were statistically analyzed using a factorial experiments desing. High values of the hydrostatic resistance in the repair were found (around 240 bar) compared with the normal working pressure (around 70 bar) in a similar pipe used in the tests. The results of repair failure pressure of the 10 groups analyzed small standard deviations, less than 12%, demonstrating the efficiency of the procedures adopted in the bonding mechanism. The study demonstrated of any existence of the form factor in the repair resistance due to variation in the dimensions of the plate in the longitudinal and circumferential direction, even as the high influence in the repair resistance with the increase from the area plate. The results point to the development of a new contingency repair procedure.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:18:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AnaHSO.pdf: 1397021 bytes, checksum: 1db8d16eef2d0b39d08b8b794e469761 (MD5) Previous issue date: 2009-02-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Esp?cies reativas de oxig?nio (EROs) s?o produtos do metabolismo celular capazes de reagir com biomol?culas, como prote?nas, lip?deos e ?cido nucl?ico. Essas rea??es podem causar modifica??es delet?rias para a c?lula. Fotossensibilizadores como o azul de metileno (MB), s?o capazes de produzir EROs, como o oxig?nio singlete (1O2), uma das formas mais reativas do oxig?nio molecular. O 1O2 ? capaz de oxidar guaninas, gerando les?es no DNA, como 7,8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG), o mais frequente produto da oxida??o, que durante a replica??o pode emparelhar com adenina levando ? muta??es. Foi de interesse desse estudo, caracterizar a citotoxicidade, o potencial mutag?nico e o padr?o de express?o prot?ica, durante o estresse oxidativo induzido pelo MB, usando como modelo cepas de Escherichia coli proficiente em reparo e deficientes em MutY-Glicosilase, uma enzima de reparo envolvida na corre??o de pares 8-oxoG:Adenina. Essas cepas foram tratadas com MB em presen?a ou aus?ncia de luz. O crescimento, sobreviv?ncia, a taxa de mutag?nese e padr?o de s?ntese prot?ica, foram analisados. O tratamento afetou o crescimento bacteriano, induzindo morte celular, mutag?nese, e mudan?as no padr?o de s?ntese prot?ica em ambas as cepas. Entretanto a cepa deficiente em MutY mostrou uma maior sensibilidade em rela??o a cepa proficiente. Adicionalmente, a cepa deficiente em MutY apresentou um padr?o de express?o prot?ica diferenciado quando comparado com a cepa proficiente. Esses resultados sugerem o envolvimento da MutY na corre??o de les?es de DNA n?o caracterizadas e que a aus?ncia de MutY induz altera??es no padr?o de express?o prot?ica