Introdução: A microcefalia é um sinal clínico associado à heterogeneidade etiológica. As principais causas de microcefalia são as infecções congênitas e as anomalias congênitas. Em 2015, após o surto do zika vírus (ZIKV) e o aumento de casos de microcefalia, o Ministério da Saúde (MS) instituiu notificação compulsória para os recém-nascidos (RN) com microcefalia e/ou alterações do Sistema Nervoso Central (SNC). No Brasil, a distribuição geográfica do ZIKV ocorreu de maneira diferenciada nas regiões norte e sul, sendo que no extremo sul do país houve um menor número de infecções por esse vírus. Assim, o estado do Rio Grande do Sul (RS) tornou-se um local importante para a avaliação sistemática das causas de microcefalia neste país, independente da presença de transmissão continuada do ZIKV. Objetivos: Avaliar e descrever as causas de microcefalia dos RN notificados por microcefalia e/ou alterações do SNC no RS. Métodos: Estudo descritivo dos 162 RN com microcefalia notificada no período de dezembro de 2015 a dezembro de 2016. Destes, 99 casos foram avaliados de forma retrospectiva com base em revisão de banco de dados, e 63 casos foram avaliados de forma prospectiva em ambulatório específico do HCPA-Brasil. As etapas propostas para a avaliação (ou informações coletadas dos bancos de dados) foram: 1) histórico da gestante; 2) exame físico do RN; 3) exames para pesquisa de infecção congênita – toxoplasmose, rubéola, ZIKV e CMV (reação de cadeia da polimerase - PCR ou sorológicos); 4) exames de imagem do SNC; 5) avaliação genética (para os casos com história familiar ou suspeita de alteração genética). As crianças foram avaliadas do nascimento até conclusão diagnóstica, seguimento perdido ou término do estudo. O período de avaliação das crianças não foi superior a quatro meses. Resultados: Noventa e cinco casos (58,6%) apresentavam microcefalia grave, resultando em uma prevalência desta complicação ao nascimento de 6.5/10.000 RN. A causa foi definida em 73 dos 162 casos. Destes eram infecções congênitas 31 casos (19.3%), síndromes genéticas 19 casos (11.7%), e malformação isolada do sistema nervoso central 20 casos (12,4%). E a causa não foi identificada em 89 (54,9%). Dos 31 casos com infecções congênitas, três (9.7%) foram diagnosticados com ZIKV, seis (19.3%) com citomegalovírus, oito (25,8%) com toxoplasmose, e 14 (45.2%) com sífilis congênita. Nenhum caso de rubeola congênita foi diagnosticado e a imunidade adquirida para rubeola das mães dos RN notificados foi de 91.6%. Destes casos 14 (45.1%) apresentaram baixo peso ao nascer e 21 (66.7%) eram pequenos para idade gestacional. A microcefalia grave foi identificada em 12 (38.7%) e 6 59.2% dos casos apresentaram alterações cerebrais, o que reforça a gravidade da ação das doenças infecciosas. Conclusão: Este é o primeiro estudo a avaliar os casos de microcefalia e/ou alterações do SNC durante o surto de ZIKV no RS. A prevalência de casos de ZIKV no RS foi inferior a estados do Nordeste do Brasil. A maioria dos casos de infecção congênita apresentaram lesões neurológicas graves, principalmente os casos de ZIKV, o que pode ocasionar atraso no desenvolvimento neurológico e sequelas nestas crianças ao longo da primeira infância. No entanto, salientamos a importância das demais infecções congênitas e causas desconhecidas associadas à microcefalia no RS, independente da presença de ZIKV. / Introduction: Microcephaly is a clinical sign associated with etiological heterogeneity. The main causes of microcephaly are congenital infections and congenital anomalies. The Ministry of Health (MOH) has instituted compulsory notification for newborns with microcephaly and / or Central Nervous System (CNS) disorders in 2015, following the zika virus (ZIKV) outbreak and the increase in cases of microcephaly. In Brazil, the geographical distribution of ZIKV occurred in a differentiated way in the northern and southern regions, and in the southernmost part of the country there were fewer infections due to this virus. Thus, the state of Rio Grande do Sul (RS) has become an important site for the systematic evaluation of the causes of microcephaly in this country, regardless of the presence of continuous transmission of ZIKV. Objectives: To evaluate and describe the causes of microcephaly of newborns notified by microcephaly and / or CNS changes in RS. Methods: Descriptive study of the 162 newborns with microcephaly reported from December 2015 to December 2016. Of these, 99 cases were retrospectively evaluated based on a database review, and 63 cases were evaluated prospectively in an outpatient clinic specific to HCPA-Brazil. The proposed steps for the evaluation (or information collected from the databases) were: 1) history of the pregnant woman; 2) physical examination of the newborn; 3) screening tests for congenital infection - toxoplasmosis, rubella, ZIKV and CMV (polymerase chain reaction - PCR or serological); 4) imaging studies of the CNS; 5) genetic evaluation (for cases with family history or suspected genetic alteration). The children were evaluated from birth to completion of diagnosis, missed follow-up or termination of the study. The evaluation of them was not more than four months. Results: Ninety-five cases (58.6%) presented severe microcephaly, resulting in a prevalence of this complication at birth of 6.5 / 10,000 newborn. A definite cause was established in 73 of the 162 causes. The leading etiology was congenital infections in 31 cases (19.3%), genetic syndromes in 19 cases (11.7%), and isolated central nervous system malformation in 20 cases (12.4%). Of the 31 cases with congenital infections, three (9.7%) were diagnosed with ZIKV, six (19.3%) with cytomegalovirus, eight (25.8%) with toxoplasmosis, and 14 (45.2%) with congenital syphilis. No case of congenital rubella was diagnosed and the acquired immunity to rubella from the mothers of the newborns was 91.6%. Of these, 14 (45.1%) had low birth 8 weight and 21 (66.7%) were small for gestational age. Severe microcephaly was identified in 12 (38.7%) and 59.2% of the cases presented cerebral alterations, which reinforces the severity of the action of infectious diseases. Conclusion: This is the first study to assess the cases of microcephaly and / or CNS changes during the outbreak of ZIKV in RS. The prevalence of ZIKV cases in RS was lower than in the northeastern states of Brazil. Most cases of congenital infection have severe neurological lesions, especially cases of ZIKV, which can cause delay in neurological development and detectable sequelae in these children throughout their first infancy. However, we emphasize the importance of other congenital infections and unknown causes associated with microcephaly in RS, regardless of the presence of ZIKV.

Le gène gec1/gabarapl1 (glandular epithelial cell 1/gabarap like 1), identifié au sein de notre équipe, est un gène apparenté à la famille atg8 (autophagy related gene 8) et  la  sous-­‐famille  gabarap  (GABAA  receptor  associated  protein)  incluant  les  gènes  gabarap, gabarapl1, gabarapl2 et gabarapl3. Les protéines codées par ces gènes présentent de très fortes identités de séquences et des structures similaires. Le gène gabarapl1 est exprimé préférentiellement dans le SNC dans lequel il est le transcrit de la famille atg8 le plus fortement exprimé. Des études fonctionnelles ont démontré que la protéine GABARAPL1 intervient dans le trafic intracellulaire de récepteurs, et plus particulièrement  du  récepteur  GABAA  et  du  récepteur  aux  κ-­‐opioïdes,  via  son  interaction avec les microtubules. Cependant, le rôle de cette protéine ne se limite probablement  pas  au  seul  transport  de  ces  récepteurs.  Notre  équipe  a  d’ailleurs  récemment démontré que GABARAPL1 est impliquée dans le processus d’autophagie, un mécanisme de dégradation cellulaire. Dans  le  cadre  de  ma  thèse,  j’ai  eu  trois  objectifs :  (1)  l’étude  de  la  spécificité  d’anticorps anti-­‐GABARAPL1 commerciaux disponibles, (2) la cartographie détaillée de l’expression de GABARAPL1 dans le cerveau murin et (3) l’étude de la surexpression de GABARAPL1 dans un modèle neuronal in vitro en conditions de stress mitochondriaux. Etant donné la forte homologie entre GABARAPL1 et GABARAP, aucun anticorps spécifique  commercial  n’était  disponible  lorsque  nous  avons  débuté  mon  projet  de  recherche. Nous avons donc, dans un premier temps, étudié la spécificité des différents anticorps commerciaux anti-­‐GABARAPL1 disponibles et identifié un anticorps capable de détecter de façon spécifique cette protéine in vitro et in vivo. Grâce  à  cet  anticorps  spécifique,  nous  avons  ensuite  entrepris  l’étude  de  l’expression in vivo de la protéine GABARAPL1 dans le SNC de souris chez l’adulte et au cours du développement embryonnaire. Nous avons ainsi démontré que GABARAPL1 est exprimée dans les neurones immatures et les fibres neuronales à partir du 11e jour de  développement  et  son  expression  augmente  progressivement  jusqu’à  un  taux  maximal observé chez l’adulte. Chez l’adulte, GABARAPL1 est exprimée uniquement dans  les  neurones  et  plus  particulièrement  dans  ceux  impliqués  dans  les  fonctions  motrices et neuroendocrines. De plus, nous avons noté que le marquage ponctiforme de  GABARAPL1  co-­‐localise  partiellement  avec  p62  dans  des  cultures  neuronales  primaires, confirmant son association aux vésicules autophagiques in vivo. Pour caractériser la fonction cellulaire de GABARAPL1, nous avons surexprimé cette protéine dans des cellules neuronales SK-­‐N-­‐BE(2). L’étude de ce nouveau modèle neuronal a montré que la surexpression de DsRed-­‐GABARAPL1 semble potentialiser la réponse  autophagique  des  cellules,  ce  qui  permet  une  induction  plus  précoce  suite  à  des traitements induisant l’autophagie. De plus, la surexpression de GABARAPL1 inhibe la mort des cellules soumises à des stress ciblant les mitochondries (CCCP), ce qui  suggère  que  GABARAPL1  pourrait  protéger  les  neurones  contre  certains  stress  aggravant la progression des maladies neurodégénératives. L’ensemble  de  ces  travaux  a  permis  d’identifier  un  outil  spécifique  à  l’immunodétection de GABARAPL1, de cartographier son expression dans le SNC murin au cours du développement et chez l’adulte et finalement, de démontrer un rôle protecteur  de  GABARAPL1  contre  la  mort  neuronale  induite  par  un  stress  mitochondrial. / The gec1/gabarapl1 gene (glandular epithelial cell 1/gabarap like 1), identified within our team, is a gene related to the atg8 (autophagy related gene 8) family and the gabarap  (GABAA  receptor-­‐associated  protein)  subfamily  of  genes  including  gabarap,  gabarapl1, gabarapl2 and gabarapl3. The protein products of these genes present a very  strong  sequence  identity  and  are  structurally  similar.  The  gabarapl1  gene  is  expressed preferentially in the central nervous system, in which it is the most highly expressed  transcript  of  the  atg8  family.  Functional  studies  have  shown  that  the  GABARAPL1 protein is involved in intracellular trafficking of receptors, in particular the  GABAA  receptor  and  the  κ-­‐opioid  receptor,  via  its  interaction  with  cytoskeletal  elements. The role of this protein, however, is clearly not limited to the transport. Our team has also recently shown that GABARAPL1 is involved in the autophagic process, a cellular degradation mechanism. My  thesis  objectives  were  three-­‐tiered:  (1)  the  study  of  the  specificity  of  anti-­‐GABARAPL1 antibodies, (2) the detailed mapping of GABARAPL1 expression in the mouse  brain  and  (3)  the  study  of  GABARAPL1  overexpression  under  conditions  of  mitochondrial stress in an in vitro neuronal model. Given the high homology between GABARAPL1 and GABARAP, no commercially available  specific  antibody  was  available  when  we  started  my  research  project.  As  such, we conducted a study on the specificity of different commercially available anti-­‐GABARAPL1 antibodies and identified an antibody that specifically recognized this protein in vitro and in vivo experiments. With this specific antibody, we then undertook a study of the in vivo expression of the GABARAPL1 protein in the adult mouse central nervous system and throughout embryonic development. In this study, we demonstrate that GABARAPL1 is expressed in immature neurons and neural fibers in the embryo from the 11th day of embryonic development and its expression gradually increases to a maximum in adults. In adults, GABARAPL1 is expressed in neurons, in particular, in those involved in motor control and  neuroendocrine  functions.  The  punctate  labeling  of  GABARAPL1  partially  co-­‐localizes with p62 in primary neuronal cultures, confirming its association with autophagic vesicles in vivo. To  characterize  the  cellular  function  of  GABARAPL1,  we  overexpressed  this  protein in neuronal SK-­‐N-­‐BE (2) cells. The study of our neuronal cell model revealed that  overexpression  of  DsRed-­‐GABARAPL1  appears  to  prime  cells  for  autophagy,  resulting in an earlier induction of autophagy after treatments that induce this processes.  In  addition,  overexpression  of  this  protein  delays  cell  death  in  a  CCCP-­‐induced mitochondrial stress model, suggesting that GABARAPL1 could protect neurons  against  certain  stresses  known  to  contribute  to  the  development  of  neurodegenerative diseases. Together,  this  work  has  identified  a  specific  tool  for  the  immunodetection  of  GABARAPL1, produced a detailed map of GABARAPL1 expression in the developing and  adult  murine  central  nervous  system  and  finally,  demonstrated  a  protective  role  for GABARAPL1 against neuronal death induced by mitochondrial stress.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Atualmente hà um aumento no interesse em desenvolver novos agentes terapÃuticos a partir de molÃculas biologicamente ativas presentes em fontes naturais, e os organismos marinhos tem-se destacado. Dentro deste contexto, as algas marinhas vermelhas tÃm recebido muita atenÃÃo por apresentar propriedades biolÃgicas e farmacolÃgicas ativas, como: antibacteriana, antioxidante, antiviral, antitumoral, antitrombÃtica, prÃ-trombÃtica, antinociceptiva, antinflamatÃria, anticoagulante e anticancerÃgena. Pesquisas recentes mostram que muitos bioativos obtidos de origem marinha apresentam grande potencial para aplicaÃÃes neurofarmacolÃgicas. Assim o objetivo desta dissertaÃÃo foi avaliar os efeitos dos polissacarÃdeos sulfatados totais (PST) obtidos da alga marinha vermelha Gracilaria cornea no Sistema Nervoso Central, em modelos clÃssicos de animais (labirinto em cruz elevada (LCE), campo aberto, Placa perfurada, rota rod, nado forÃado e suspensÃo de cauda) para screening de drogas com atividades relacionadas com as desordens neurocomportamentais, como ansiedade e depressÃo. Para a realizaÃÃo dos experimentos foram utilizados camundongos Swiss, machos, pesando de 25-32g, provenientes do biotÃrio da Universidade Federal do CearÃ. Os animais foram tratados agudamente com PST nas doses de 0,1, 1 ou 10 mg/kg, via intraperitoneal. Trinta minutos apÃs o tratamento, os animais foram submetidos aos testes comportamentais de locomoÃÃo (campo aberto e rota rod), ansiedade (LCE e placa perfurada) e depressÃo (nado forÃado e suspensÃo de cauda). Os resultados mostraram que PST, na dose de 10 mg/kg, apresentou efeito ansiolÃtico nos modelos de LCE e placa perfurada, pois aumentou todos os parÃmetros analisados no LCE, assim como o nÃmero de mergulhos nos orifÃcios da placa perfurada. Este efeito està provavelmente relacionado com o sistema gabaÃrgico, pois o flumazenil, antagonistas dos receptores GABAA/ BenzodiazepÃnicos, reverteu o efeito ansiolÃtico dos PST no LCE. No teste de campo aberto a dose de 10 mg/kg aumentou o nÃmero de quadrantes e o nÃmero de rearing, tento uma aÃÃo exitatÃria, jà no teste de rota rod nÃo houve alteraÃÃo, mostrando que a atividade motora dos animais nÃo foi prejudicada. Na avaliaÃÃo da atividade depressiva, os PST nÃo alteraram o tempo de imobilidade nos testes de nado forÃado e de suspensÃo de cauda, embora a dose de 10mg/kg apresentou uma diminuiÃÃo no parÃmetro analisado, porÃm nÃo significativo. ConclusÃo: os polissacarÃdeos sulfatados totais extraÃdos da Gracilaria cornea, na dose de 10 mg/Kg, sugerem uma aÃÃo ansiolÃtica no Sistema Nervoso Central, possivelmente relacionado com o sistema gabaÃrgico, desprovida de aÃÃo antidepressivo. / Currently there is an increased interest in developing new therapeutic agents from biologically active molecules present in natural sources from marine organisms has been posted. Within this context, red marine algae have received much attention for presenting active biological and pharmacological properties such as antibacterial, antioxidant, antiviral, antitumor, antithrombotic, pro-thrombotic, antinociceptive, anti-inflammatory, anticancer and anticoagulant. Recent surveys show that many bioactive obtained from marine sources have great potential for neuropharmacological applications. Thus the aim of this thesis was to evaluate the effects of sulfated polysaccharides total (PST) obtained from the red seaweed Gracilaria cornea in the Central Nervous System in classic animal models elevated plus maze (EPM), open field, hole board, rota rod, forced swim and tail suspension for the screening of drugs with activities related to neurobehavioral disorders such as anxiety and depression. For the experiments Swiss male mice were used, weighing 25-32g, from the vivarium of the Federal University of CearÃ. The animals were treated acutely with PST at doses of 0.1, 1 or 10 mg/kg intraperitoneally. Thirty minutes after treatment, the animals were subjected to behavioral tests of locomotion (open field and rota rod), anxiety (LCE and hole board) and depression (forced swim and tail suspension). The results showed that PST, at a dose of 10 mg/kg, showed anxiolytic effects in models of EPM and hole board, it increased all parameters analyzed in the EPM, as well as the number of dives in the holes of the perforated plate. This effect is probably related to the GABAergic system because flumazenil, antagonists of GABA/Benzodiazepine receptor, reversed the anxiolytic effects of PST in the EPM. In the open field test dose of 10 mg/kg increased the number of quadrants and the number of rearing, try one exitatÃria action already in the route test rod did not change, showing that the motor activity of the animals was not affected. In the assessment of depressive activity, the PST did not alter the immobility time in the forced swim and tail suspension tests, although the dose of 10mg/kg showed a decrease in the parameter analyzed nonsignificant. Conclusion: total sulfated extracted from Gracilaria cornea, at a dose of 10 mg/kg, polysaccharides suggest an anxiolytic action in the central nervous system, possibly associated with the GABAergic system, devoid of antidepressant action.

A cocaína é uma droga amplamente utilizada, e seu abuso está associado a inúmeros problemas de ordem física, psiquiátrica e social. Anormalidades em recém-nascidos têm sido reportadas devido aos efeitos tóxicos da cocaína durante o desenvolvimento fetal. O mecanismo pelo qual a cocaína causa danos neurológicos é muito complexo e envolve interações da droga com diversos sistemas de neurotransmissão, como o aumento dos níveis extracelulares de dopamina e radicais livres e a modulação de fatores de transcrição. Neste estudo investigamos a toxicidade causada pela cocaína em culturas primárias de estriado e mesencéfalo e cultura de linhagem de células dopaminérgicas (PC 12). Observamos que a exposição à cocaína causou morte destas células. Na cultura primária de mesencéfalo, a morte celular foi revertida pelo prétratamento com superóxido dismutase (SOD). A exposição à cocaína também induziu a inibição do prolongamento dos neuritos nessas culturas primárias. Já na cultura de células PC 12, a cocaína ativou os fatores de transcrição NF-kB e CREB (após 6 horas), que regulam a transcrição de genes envolvidos na morte celular. O GBR 12909 (inibidor da recaptação de dopamina), a lidocaína (anestésico local) e a dopamina não ativaram o NF-kB de maneira semelhante à cocaína, porém, a diminuição da atividade do NF-kB após pré-tratamento das células com SCH 23390, antagonista do receptor D1, sugere que a ativação do NF-kB pela cocaína ocorre, pelo menos parcialmente, via ativação de receptores D1. O NF-kB parece exercer um papel protetor nas células PC 12, pois sua inibição com PDTC e Salicilato de Sódio aumentou a indução de morte celular pela cocaína. O aumento do RNAm do BDNF, também pode estar relacionado à proteção exercida por este fator de transcrição. A diminuição do Bcl-2, o aumento da atividade da caspase 3 e o aumento da caspase 3 clivada sugerem a participação da via de apoptose na morte celular induzida pela cocaína. A compreensão dos mecanismos de morte celular regulados pela cocaína no cérebro futuramente contribuirá para o desenvolvimento de novas terapias para dependentes, a qual poderá ajudar na interrupção do desencadeamento dos processos degenerativos. / Cocaine is a drug deeply used and its abuse is associated with physical, psychiatric and social problems. Abnormalities in newly born have been demonstrated due to the toxics effects of cocaine during fetal development. The mechanism by which cocaine causes neurological damages is very complex and involves interactions of the drug with several neurotransmitter systems, such as the increase of extracellular levels of dopamine and free radicals, and modulation of transcription factors. In this study we investigated the cocaine toxicity in striatum and mesencephalic primary cultures, and dopaminergic cells (PC 12). We observed that cocaine exposure causes death to these cells. In the mesencephalic primary culture, the cellular death was blunted by superoxide dismutase (SOD) pretreatment. Cocaine exposure also induced inhibition of neurite lengthening in these primary cultures. In PC 12 cells, cocaine activated the transcription factors NFkB and CREB (after 6 hours), which regulate genes involved in cellular death. GBR 12909, an inhibitor of dopamine reuptake; lidocaine, a local anesthetic; and dopamine did not activate NFkB as cocaine did, however, the attenuation of NFkB activity after the pretreatment of the cells with SCH 23390, a D1 receptor antagonist, suggests that the activation of NFkB by cocaine is, at least partially, due to activation of D1 receptors. NFkB seems to have a protective role in these cells, because its inhibition with PDTC and Sodium Salicilate increased cellular death caused by cocaine. The increase in BDNF RNAm, can also be related to the protective role of this transcription factor. The decrease in Bcl-2, the increase in caspase 3 activity, and the increase in caspase 3 cleavage suggest that apoptose participates in the development of cocaineinduced cell death. The understanding of the mechanisms by which cocaine induces cell death in the brain will contribute to the development of new therapies for drug abusers, which can help the interruption of the progress of degenerative processes.

O enriquecimento ambiental (EA) é um modelo experimental capaz de promover a melhora no aprendizado e na formação de memórias hipocampo-dependentes, bem como a redução de manifestações comportamentais relacionadas ao estresse, incluindo a ansiedade. Embora a relação causal entre estresse e ansiedade ainda não está esclarecida, algumas evidências apontem para a importância da sinalização de hormônios glicocorticoides (via receptores GR e MR) no sistema nervoso central, principalmente na amígdala e no hipocampo, além do fator neurotrófico BDNF e de algumas vias de sinalização intracelular, como proteínas quinases MAPK e o fator de transcrição CREB. No presente trabalho verificamos que o EA previne o surgimento de sintomas do tipo ansioso desencadeado por estresse agudo em ratos, efeito verificado imediatamente após o estresse, e que tal efeito pode estar relacionado à modulação, no complexo amigdalóide basolateral, da sinalização nuclear de GR, da atividade de ERK (pertencente à família das MAPK) e de CREB, bem como à alteração na expressão do receptor de BDNF. / Environmental enrichment (EE) is an experimental model that promotes improvements in learning and memory, as well as reduction in stress-induced behaviors, including anxiety. Although the casual relationship between stress and anxiety remains unclear, some studies show the importance of glucocorticoids hormones signaling (via GR and MR receptors) in the central nervous system, primarily in the amygdala and the hippocampus. In addition, the significance of the neurotrophic factor BDNF and some intracellular signaling pathways, such as protein kinases MAPK and the transcription factor CREB, has been described. In this study we found that EE prevents the emergence of anxiety-related behavior triggered by acute stress in rats, an effect observed just after the stress stimulus. This effect may be related to the modulation, in the basolateral amygdala, of nuclear GR signaling, ERK (a MAPK protein) and CREB activity, as well as to changes in the expression of BDNF receptor.

Fibromyalgia (FM) is characterized by chronic non-inflammatory widespread pain (CWP) and changes in sympathetic function. In attempt to elucidate the pathophysiological mechanisms of FM we used a well-established CWP animal model. We aimed to evaluate changes in cardiac autonomic balance and baroreflex function in response to CWP induction in rats. Therefore, it was used 30 male Wistar rats (250-350 g) with 2 to 3 months. CWP was induced by two injections of acidic saline (pH 4.0, n=16) five days apart into the left gastrocnemius muscle, whereas control animals were injected twice with normal saline (pH 7.2, n = 14). To evaluate changes in cardiovascular responses, one day after the second injection of acidic saline (n=8) or normal saline (n=6) animals were instrumentated to blood pressure recordings and posterior analysis of pulse interval (PI) and systolic arterial pressure (SAP) variability, and spontaneous baroreflex sensitivity (BRS) was performed. To determine the involvement of areas of the CNS (NTS , RVLM and CVLM ), two days after the second injection of acidic saline (n=8) or normal saline (n=8) animals were anesthetized, perfused, the brains removed and cut in a cryostat. The brain sections were subjected to immunofluorescence protocol for Fos protein. Results are expressed as mean ± SEM. Differences between groups were analyzed using by t test, paired and unpaired. Values of p < 0.05 were considered statistically significant. After induction of CWP, there was an increase of power in the low frequency (LF) band of PI spectrum (12.75±1.04 nu), a decrease in the high frequency (HF) band (87.25±1.04 nu) and an increase of LF/HF ratio (0.16±0.01), when compared to control animals (7.83±1.13 nu LF; 92.16±1.13 nu HF; 0.08±0.01 LF/HF). In addition, there was an increase of power in the LF band of SAP spectrum (7.93±1.39 mmHg2) when compared to control animals (2.97±0.61 mmHg2). BRS was lower in acidic saline injected rats (0.59±0.06 ms/mmHg) when compared to control animals (0.71±0.03 ms/mmHg). By immunofluorescence , we found that in all investigated areas the percentage of Fos immunoreactive cells was significantly higher ( p < 0.001) in saline acidic compared to neutral saline group. Our results showed that induction of CWP in rats shifts cardiac sympathovagal balance towards sympathetic predominance and decreases BRS, data which corroborate findings in humans with FM, and also that activation of NTS, CVLM and RVLM appears to indicate the involvement of these areas in an attempt to control the cardiac autonomic dysfunction. / A fibromialgia (FM) é caracterizada por dor muscular crônica difusa não-inflamatória (DMCD) e mudanças na função simpática. No intuito de elucidar os mecanismos fisiopatológicos da FM, foi utilizado um modelo animal de dor crônica difusa bem estabelecido na literatura. Desta forma, o objetivo do estudo foi avaliar a modulação autonômica cardíaca e a função do barorreflexo, em resposta à indução de dor muscular crônica difusa em ratos. Para tanto, foram utilizados 30 ratos Wistar machos (250 a 350g) com 2 a 3 meses. A DMCD foi induzida por duas injeções de solução salina ácida (pH 4,0, n=16) com cinco dias de intervalo, no músculo gastrocnêmio esquerdo, enquanto que os animais controle foram injetados duas vezes com solução salina neutra (pH 7,2, n=14). Para avaliar as alterações nas respostas cardiovasculares, um dia após a segunda injeção de solução salina ácida (n=8) ou salina neutra (n=6) os animais foram instrumentados para gravações da pressão arterial, e posterior análise da variabilidade do intervalo de pulso (IP) e da pressão arterial sistólica (PAS), como também da sensibilidade espontânea do barorreflexo (SBR) foi realizada. Para avaliar a ativação de neurônios em núcleos do Bulbo envolvidos com a modulação autonômica cardíaca (NTS, RVL e CVL), dois dias após a segunda injeção de salina ácida (n = 8) ou de solução salina normal (n=8), os animais foram anestesiados, perfundidos, o cérebro removido e cortado num criostato. As secções do cérebro foram submetidas ao protocolo de imunofluorescência para a proteína Fos. Os resultados são expressos como média ± EPM. Diferenças entre os grupos foram analisados pelo teste t, pareado e não-pareado. Valores de p < 0,05 foram considerados estatisticamente significativos. Após a indução de dor crônica difusa nos ratos (n=8), as variações do intervalo de pulso apresentaram maior oscilação em baixa frequência (LF) (12,75±1,04 un), menor oscilação em alta frequência (HF) (87,25±1,04 un) e maior valor da relação LF/HF (0,16±0,01), quando comparadas ao grupo controle (n=6) (7,83±1,13 un LF; 92,16±1,13 nu HF; 0,08±0,01 LF/HF). Em adição, houve maior oscilação em LF da pressão arterial sistólica (PAS) (7,93±1,39 mmHg), comparado ao grupo controle (2,97±0,61 mmHg). A sensibilidade espontânea do barorreflexo foi menor nos ratos injetados com salina ácida (0,59±0,06 ms/mmHg) quando comparada ao grupo controle (0,71±0,03 ms/mmHg). Através da imunofluorescência, observou-se que em todas as regiões investigadas a porcentagem de células imunorreativas à Fos foi significativamente maior (p<0,001) no grupo salina ácida, em comparação ao grupo salina neutra. Nossos resultados mostraram que a indução da DCMD em ratos desloca o balanço simpatovagal cardíaco em direção a uma predominância simpática e diminui SBR, dados que corroboram achados em seres humanos com FM, e ainda, que a ativação de neurônios do NTS, CVL e RVL parece indicar o envolvimento dessas áreas na modulação da disfunção autonômica cardíaca.

Background: From technological advances the patients survival with tumors of central nervous system has increased and due to this situation, it was necessary evaluate the quality of life and emotional state of both patients and their caregivers. Purposes: Distinguish in socio-demographic terms children caregivers with brain tumors treated at a public hospital in Aracaju-SE, as well as to investigate this group perception as their quality of life, anxiety and depression. Methods: 32 caregivers participated of a convenience pattern and three instruments were used: socio-demographic questionnaire, WHOQOL-bref and HADS. Data were analyzed using statistical program SPSS, 15.0. Results: The pattern showed that 100% of caregivers are female, with age greater than or equal to 18 years (32.1 ± 6.8), 96.6% were mothers (p <0.0001) and 65.6% have three or more children (p = 0.0001). Furthermore, 46.9% have primary education (p = 0.004), 43.8% were from Sergipe s counties (p = 0.01) and 75% didn t receive help to take care child (p=0.005). 46.9% caregivers didn t have a paid employment prior to the child's illness and with disease s advent, this proportion rose to 90.6% (p <0.001), although in both cases the predominant income was the minimum wage.The physical domain had the best rating among caregivers (58.7), followed by social domain (57.6). The environmental showed the worst one among caregivers (43.8), followed by psychological (55.6). There was a relevant association of environmental field with the physical domains only (p <0.0001) and social (p = 0.05). The psychological domain was positively correlated with the physical one. (p = 0.01).The prevalence of anxiety was 50% while depression was 46.9%. Conclusions: The perception of caregivers quality of life was moderate, the average caregivers QOL among the areas was 53.9. The social domain were associate with presence for anxiety and the physical and environment were associate with presence for depression. / Fundamentação: A partir dos avanços tecnológicos a sobrevida dos pacientes com tumores no Sistema Nervoso Central aumentou e com isso surgiu a necessidade de avaliar a qualidade de vida e o estado emocional tanto destes pacientes quanto de seus cuidadores. Objetivos: Caracterizar em termos sócio-demográfico cuidadores de crianças com neoplasia cerebral atendidas em um hospital público de Aracaju/SE, bem como investigar a percepção desse grupo quanto a sua qualidade de vida, ansiedade e depressão. Métodos: Participaram do estudo 32 cuidadores de uma amostra por conveniência. Foram utilizados 3 instrumentos: um questionário sócio-demográfico, WHOQOL-abrev e HADS. Os dados obtidos foram analisados utilizando-se o programa estatístico SPSS, 15.0. Resultados: A amostra indicou que 100% dos cuidadores são do gênero feminino, com idade superior ou igual a 18 anos (32,1± 6,8), 96,6% são mães (p < 0,0001) e 65,6% delas possuem três filhos ou mais (p = 0,0001). Além disso, 46,9% possuem ensino fundamental (p = 0,004), 43,8% eram procedentes do interior do Estado de Sergipe (p = 0,01) e 75% não recebiam ajuda externa para cuidar da criança (p = 0,005). 46,9% dos cuidadores não possuía uma ocupação remunerada antes da doença da criança e com o advento da doença, essa proporção se elevou para 90,6% (p < 0,001), no entanto em ambos os casos a renda predominante foi a de um salário mínimo. O domínio físico obteve a melhor avaliação entre os cuidadores (58,7), seguido pelo domínio social (57,6). O domínio ambiental foi o que apresentou pior avaliação entre os cuidadores (43,8), seguido pelo psicológico (55,6). Houve uma associação significativa do domínio ambiental somente com os domínios físicos (p < 0,0001) e social (p = 0,05). O domínio psicológico se correlacionou positivamente com o domínio físico (p = 0,01). A prevalência de ansiedade na amostra foi de 50%, enquanto que a prevalência de depressão foi de 46,9%. Conclusões: A percepção da qualidade de vida dos cuidadores foi moderada, pois a média da QV dos cuidadores entre os domínios foi de 53,9. O domínio social esteve associado à presença de ansiedade e os domínios social e ambiental estiveram associados à depressão.

Submitted by Claudinei Pracidelli (cpracide@ipen.br) on 2015-06-09T18:38:57Z No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2015-06-09T18:38:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / As últimas estimativas da Organização Mundial da Saúde mostram a ocorrência de 14,1 milhões de novos casos de câncer em 2012. Sendo que desses casos, 8,2 milhões virão a óbito. Os tumores paravertebrais e intracraniais, também chamados de cânceres do Sistema Nervoso Central, tem origem no cérebro, nervos cranianos e meninges. Uma nova modalidade de braquiterapia começou a ser usada nesta última década. Neste procedimento, placas poliméricas flexíveis, carregando fósforo-32, são colocadas próximas ou em contato ao tumor para o tratamento. Este tratamento apresenta vantagens em relação aos demais porque aplica uma alta taxa de dose no tumor poupando tecidos sadios. A produção destas placas ainda é pouco estudada, embora já existam resultados satisfatórios no seu uso para o tratamento dos cânceres do sistema nervoso central. Neste trabalho foram realizados estudos iniciais para a produção deste tipo de placas poliméricas para braquiterapia. Foram avaliadas as propriedades mecânicas e a capacidade de imobilização de material radioativo de duas resinas comercias, uma poliuretânica e outra epoxídica, com e sem presença de substrato de policarbonato. Os testes iniciais apontaram o uso da resina epoxídica como melhor alternativa e com o uso dela foram feitos os primeiros protótipos e testes. O uso do policarbonato como substrato não foi necessário em uma das metodologias, facilitando o procedimento, mas oferecendo uma barreira menor de segurança. Os ensaios de tração mostraram que a adição de solução ácida à resina epóxi alterou suas características mecânicas, mas houve uma pequena melhora em sua flexibilidade. Os testes de adesão evidenciaram uma melhor adesão da resina à face texturizada do policarbonato. A termogravimetria mostrou que a solução ácida adicionada a resina fica presa à estrutura mesmo com elevações de temperatura acima de 100°C. A resina epoxídica utilizada teve a capacidade de incorporar o material radioativo em forma de solução ácida e manter-se estanque após testes de esfregaço e imersão em líquido quente. De acordo com os resultados obtidos, a produção destas placas com resina epoxídica é possível e atende às normas internacionais de segurança contra vazamento de material radioativo para fontes utilizadas em braquiterapia. / Dissertação (Mestrado em Tecnologia Nuclear) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Orientador : Jose Antonio Rocha Gontijo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T14:12:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_PauloCesarde_D.pdf: 2188887 bytes, checksum: 309e674186fe399fd0cfec935fee1d78 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: No presente estudo, foi investigado os efeitos da administração intracerebroventricular (i.c.v) aguda de insulina sobre os mecanismos centrais responsáveis pela regulação da excreção tubular renal de sódio após injeção prévia de NG-nitro-1-arginine methylester (LNAME) em ratos não anestesiados. Ratos Wistar-Hannover Masculinos foram radomizados em cinco grupos: a) injeção i.c.v. de 0.15 M de NaCl em ratos (controle, N = 10), b) injeção i.c.v. de dose-resposta (1.26, 12.6 e 126 ng/3µL) em ratos (N = 10), c) Injeção i.c.v. de 60µg de L-NAME associada com NaCl (N = 10) ou d) com insulina 126ng (N = 10), e e) Injeção de insulina subcutânea em ratos (N = 5). A insulina injetada centralmente no ventrículo lateral direito de ratos promoveu uma elevação da excreção urinária de sódio (NaCl: 855.6 ± 85.1?%/min; 126 ng de insulina: 2055 ± 310.6?%/min; P = 0.005) e potássio (NaCl: 460.4 ± 100?%/min; 126ng insulina: 669.2 ± 60.8?%/min; P = 0.025). A excreção urinaria de sódio elevada observada após a microinjeção i.c.v. de 126 ng de insulina foi atenuada significativamente com administração prévia de L-NAME (126 ng insulina: 1935 ± 258.3?%/min; L-NAME + 126 ng de insulina do: 582.3 ± 69.6?%/min; P = 0.01). A natriurese induzida pela insulina i.c.v. ocorreu através da elevação da excreção tubular renal de sódio nos segmentos pós-proximais, a despeito de uma filtração glomerular inalterada. Embora o racional para a redução da excreção urinária de sódio induzida pela prévia administração i.c.v. de L-NAME seguida da administração de insulina i.c.v. permanece ainda desconhecida, podemos sugerir que um dos gatilhos responsáveis pela sinalização eferente da insulina no SNC possa ser de natureza nitrérgica / Abstract: In the present study, we investigated the effects of acute intracerebroventricular (icv) insulin administration on central mechanisms regulating urinary sodium excretion in simultaneously centrally NG-nitro-L-arginine methylester (L-NAME)-injected unanesthetized rats. Male Wistar-Hannover rats were randomly assigned to one of five groups: a) icv 0.15 M NaCl-injected rats (control, N = 10), b) icv dose-response (1.26, 12.6 and 126 ng/3 µL) insulin-injected rats (N = 10), c) rats icv injected with 60 µg L-NAME in combination with NaCl (N = 10) or d) with insulin (N = 10), and e) subcutaneously insulininjected rats (N = 5). Centrally administered insulin produced an increase in urinary output of sodium (NaCl: 855.6 ± 85.1 ?%/min; 126 ng insulin: 2055 ± 310.6 ?%/min; P = 0.005) and potassium (NaCl: 460.4 ± 100 ?%/min; 126 ng insulin: 669.2 ± 60.8 ?%/min; P = 0.025). The urinary sodium excretion response to icv 126 ng insulin microinjection was significantly attenuated by combined administration of L-NAME (126 ng insulin: 1935 ± 258.3 ?%/min; L-NAME + 126 ng insulin: 582.3 ± 69.6 ?%/min; P = 0.01). Insulin induced natriuresis occurred by increasing post-proximal sodium excretion, despite an unchanged glomerular filtration rate. Although the rationale for decreased urinary sodium excretion induced by combined icv L-NAME and insulin administration is unknown, it is tempting to suggest that perhaps one of the efferent signals triggered by insulin in the CNS may be nitrergic in nature / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

O CRF é um regulador do eixo HPA, gerando respostas neuroendócrinas, autônomicas, comportamentais ao estresse, assim como a Ucn-I. Os benzodiazepínicos agem por um efeito inibitório sobre o CRF e um efeito ainda discutido sobre a Ucn-I.Para análise das áreas relacionadas à resposta ao estresse pela imunorreatividade da proteína Fos, da expressão do mRNA do CRF e da Ucn-I, e dos efeitos do alprazolam, ratos foram submetidos aos estresses de restrição e eletrochoque, e ao alprazolam. No estresse de restrição as áreas com maior imunorreatividade da proteína Fos foram PVH e AMIme, e no estresse de eletrochoque foram AMIme e PAGdl. Com o alprazolam houve uma baixa imunorreatividade nas áreas PVH, PAGlat e CC no grupo restrição e, PVH, LSV e PAGlat no grupo choque, com alta imunorreatividade nas áreas EW e LSV no grupo restrição e PAGdl no grupo choque. O fármaco gerou uma diminuição da expressão do mRNA do CRF no PVH no grupo restrição e um aumento no grupo choque, e um aumento da expressão do mRNA da Ucn-I no EW no grupo restrição e uma diminuição no grupo choque. / The CRF is a regulator of the HPA axis, with neuroendocrine, autonomic and behavioral responses to the stress, such as the Ucn-I. The benzodiazepines performing an inhibitory effect on the CRF and a possibly effect on the Ucn-I. It was analyzed the stress related areas by Fos protein and the expression of the CRF and Ucn- I mRNA. Rats were submitted to the restraint and electroshock stress, and to the alprazolan. The restraint stress showed greater Fos-ir in the following areas PVH and AMIme and AMIme and PAGdl in the the electroshock stress. The alprazolam had an inhibition effect in the following areas PVH, PAGlat and CC in the restraint group, and PVH, LSV and PAGlat in the electroshock group. The alprazolan had an excitatory effect in the following areas EW and LSV in the restraint group, and PAGdl in the electroshock group. The alprazolan caused reduction of CRF mRNA in the PVH in the restraint group and increase in the electroshock group, and increase of Ucn-I mRNA in the EW in the restraint group, with reduction in the electroshock group.