A grande procura por mirtilos, principalmente por países do Hemisfério Norte, está associada aos benefícios nutracêuticos do seu consumo em relação a prevenção de doenças. Em resposta à esta alta demanda, produtores de regiões e países que antes não cultivavam a fruta, iniciaram seus plantios nos últimos anos, sendo o clima, fator limitante à expansão de novas áreas uma vez que o mirtileiro, originário de regiões temperadas, necessita acumular alto número de horas de frio hibernal para completar seu desenvolvimento. No Brasil, predomina-se o plantio de mirtileiros nos estados da região sul, além de pequenas regiões de altitude no estado de São Paulo e Minas Gerais, utilizando cultivares tradicionais. A introdução de novos materiais genéticos, de baixa exigência em frio, desenvolvidos pela Universidade da Flórida possibilitou avaliar o desempenho das plantas e a qualidade dos frutos das cultivares Emerald e Jewel plantadas em Piracicaba - SP, sem ocorrência de frio hibernal. No período de maio de 2014 a maio de 2015 foi realizada a caracterização das fases de crescimento vegetativo, brotação, florescimento, frutificação e produção de frutos dessas cultivares. O crescimento dos ramos ocorre até o início da produção, interrompendo-se em seguida. A cultivar Emerald apresenta dois picos de florescimento e frutificação, com a colheita principal ocorrendo de agosto a outubro, enquanto a cultivar Jewel apresenta dois picos de emissão de botão floral, mas apenas um pico de florescimento e uma colheita que ocorre entre os meses de outubro e janeiro. A produção ocorre durante o período de entressafra do mercado interno e externo, que possibilita melhores preços da fruta. É possível obter-se produção das cultivares de mirtileiros Jewel e Emerald em região subtropical, mas a exigência de um número de horas de frio para estimular a emissão de botão floral e o florescimento parece ser mais baixa que a recomendada na literatura. Em agosto e outubro de 2015 também foram determinados para essas cultivares, parâmetros da qualidade físico-química dos frutos como massa fresca de frutos, diâmetro, comprimento, formato, volume, firmeza, coloração de casca, teor de sólidos solúveis totais, pH, acidez titulável, ratio, compostos fenólicos totais, teor de antocianinas, quercetina e atividade antioxidante pelo sequestro dos radicais DPPH e ABTS, que foram armazenados à temperatura ambiente (22 °C) avaliados no dia de colheita, e a cada três dias, até o décimo segundo dia. Frutos de mirtilos colhidos em agosto são maiores e mais arredondados, porém apresentam menor teor de sólidos solúveis totais e maior acidez. Por outro lado, os frutos colhidos em outubro apresentam maior ratio, e coloração mais intensa. \'Emerald\' possui frutos com maior atividade antioxidante que \'Jewel\'. Os teores de antocianinas, quercetinas, compostos fenólicos totais e atividade antioxidante diferem entre as cultivares de acordo com as épocas e aumentam ao longo dos dias após a colheita, enquanto pH, acidez e firmeza decrescem. / The high demand for blueberries, mainly by the Northern Hemisphere markets, is associated with their nutraceutical attributes and the health benefits of its consumption. In response to this high demand, countries that had never cultivated the fruit, started growing blueberries in recent years. The climate is a limiting factor to the expansion of new areas as these species are originated from temperate regions, an so, has a high chill requirement for a full development. In Brazil, blueberry cultivation of traditional areas are restricted to the southern states, and to small areas of altitude in São Paulo and Minas Gerais state, using traditional cultivars. The introduction of new genetic material, with low chill requirement, released by the University of Florida made possible to evaluate the performance of plants and fruit quality of Emerald and Jewel cultivars planted in Piracicaba - SP, without the occurrence of temperatures below 7.2 °C. From May 2014 to May 2015 vegetative growth, bud break, flowering, fruiting and fruit production of these cultivars were assessed. Branches grew until flowering period. Emerald cultivar has two peaks of flowering and fruiting, with the main harvest occurring from August to October, while \'Jewel\' has two bud break peaks, but only a peak of flowering and the harvest takes place between October and January. The production occurs during the off-season of the domestic and northern hemisphere markets, resulting in higher fruit prices. The results indicate that it is possible to cultivate blueberry cultivars Jewel and Emerald in subtropical regions because the chill requirement to induce bud and flowering break is much lower than it is cited in the literature. In August and October 2015 \'Jewel\' and \'Emerald\' were assessed for parameters of physical and chemical quality of the fruit. It were evaluated fresh fruit mass, diameter, length, shape, volume, firmness, peel color, soluble solids content (SST), pH, titratable acidity (AT), SST/AT ratio, total phenolic compounds, total anthocyanins content, total quercetins content and antioxidant activity using DPPH and ABTS methods on the harvest day, and every three days, until the twelfth day of the fruits harvested and stored at room temperature (22 °C). Fruits from August harvest have higher diameter and are more roundish, but have lower soluble solids content and higher titratable acidity. On the other hand, the fruits harvested in October have higher SST/TA ratio and higher chroma value. \'Emerald\' has higher antioxidant activity than \'Jewel\'. The content of anthocyanins, quercetins, total phenolic compounds and antioxidant activity differ with cultivars and harvest periods and increases during storage, while pH, acidity and firmness decrease.

The goals of this research project were to investigate aspects of pollination biology of two native boreal species: Vaccinium myrtilloides (Canadian blueberry) and Vaccinium vitis-idaea (lingonberry) in central Saskatchewan. Accordingly, surveys of insect taxa visiting the flowers were performed, and determination of the effectiveness of these insect taxa to serve as pollinators was measured through pollen deposition and pollen tube growth in the style. Accompanying fieldwork, and morphological and anatomical studies were done for the two food rewards offered by flowers of both Vaccinium species: pollen released through poricidal anthers and nectar secreted from the nectary atop the inferior ovary. Pollen-ovule (P/O) ratios were determined for the two study species in Saskatchewan (V. myrtilloides, V. vitis-idaea) as well as for five other Vaccinium species from eastern Canada (Nova Scotia – V. angustifolium, V. boreale, V. caespitosum, V. corymbosum, and V. uliginosum). Pollen, released at maturity as tetrads, were converted to total pollen grains per flower to yield P/O ratios ranging from 238 (V. caespitosum) to 2,008 (V. vitis-idaea), but 736 for the latter in Saskatchewan. These P/O ratios are indicative of a breeding system ranging from facultative autogamy to facultative xenogamy. Additionally, the structure of mature stamens and pollen tetrads was studied in V. myrtilloides and V. vitis-idaea. Each anther was functionally bilocular; had a single-cell thickness (i.e., epidermis) with regularly occurring papillae; lacked an endothecium; and possessed two distal, hollow tubules each terminating in a pore. Overall pollen grain viability was 76-97% (V. myrtilloides) and 51-93% (V. vitis-idaea), with about 20% of tetrads having only 1-3 grains viable, and 12% and 27% of tetrads entirely non-viable in V. myrtilloides and V. vitis-idaea, respectively. Pollen tetrads occasionally were connected by a sticky substance resembling pollenkitt, but viscin threads were absent. One instance of precocious (in situ) germination of tetrads was recorded within anthers of V. myrtilloides. The floral nectary was a disk of secretory tissue situated between the stamens and the style. The epidermis possessed solitary stomata that were variable in number, but not different between V. myrtilloides and V. vitis-idaea. The nectary was vascularized by phloem alone; many traces were found for V. myrtilloides throughout the nectary, whereas V. vitis-idaea had few traces at the nectary base, concentrated at the inner side of the disk closest to the style base. Young sclerenchyma cells were found throughout the nectary parenchyma. Nectar production started on the day of anthesis for both species, although many flowers of V. vitis-idaea appeared to have no measureable nectar at that time. V. myrtilloides produced a larger range of nectar solutes per flower (0 - 3684.1 μg), than V. vitis-idaea iii (1.29 to 1147.62 μg) over both years; nectar volumes per flower never exceeded 5 μL. Nectar was measured daily in flowers aged 1 – 4 days in 2010 and 1 – 6 days in 2011, however, over the two years at the same study site there was no clear pattern of secretion and reabsorption throughout flower life for V. myrtilloides, and only a gradual increase for V. vitis-idaea as flowers aged. Insect visitors to flowers surveyed in 2010 included a large proportion of honeybees (Apis mellifera) as visitors to both species, whereas in 2011 there were no honeybees present at the field site. There was a larger proportion of hoverflies (Syrphidae) found on the flowers of V. vitis-idaea than on V. myrtilloides. Other visitors to V. myrtilloides were bees (Bombus, Andrena, Osmia, Colletes) and wasps (Vespidae), whereas flowers of V. vitis-idaea were visited by bees (Bombus, Andrena, Osmia, Lasioglossum, Colletes, Hylaeus), an ant (Formicidae) and a butterfly (Lycaenidae). Bombus spp. were shown to be pollinators of V. myrtilloides. Andrena spp. were probable pollinators, whereas honeybees appeared to be poor pollinators. Bombus spp. seemed probable pollinators of V. vitis-idaea and hoverflies to be barely more than visitors, though small sample sizes did not allow for conclusive evidence. The time that an insect spent on a virgin flower had no relationship to the pollination result. Among individuals of various Bombus spp. that did or did not sonicate flowers of V. myrtilloides, the action of “buzz pollination” was shown to result in an increase in the number of pollen tetrads deposited and in pollen tube growth.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:25:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_Nara_Cristina_Ristow.pdf: 1070166 bytes, checksum: b4c300a1528b3846038c18df172a3e8b (MD5) Previous issue date: 2009-07-10 / Blueberry is a temperate fruit species climate, cultivated in Europe, in the United State and Canada, where it has a great economic importance. Its cultivation has driven to a significant expansion in the last years, due to the fruit nutritional characteristics. Blueberries are rich in vitamins and minerals, low calorie and have high antioxidant concentration, establishing a demanding market in healthy foods. The supply of uniform plants with high quality and the development of an efficient and competitive production system added to marketing strategies are among the technologies to be adapted. The objectives of this work were: (i) to determine a suitable substrate to vegetative propagation by microcutting technique and blueberry plant growth; (ii) validate the technique of microcutting; (iii) to evaluate rooting and surviving capacity of blueberry microcuttings. Different experiments were done to achieve the objectives. It was evaluated growth of in vitro-originated plant of cultivar Georgiagem in different substrates. The microcuttings were kept under moist micro-environment conditions at both regulated temperature and light. It was evaluated the blueberry microcutting technique to the cultivars Georgiagem, O‟Neal and Misty under moist micro-environment method, two microcuttings collection period and two IBA concentrations. Was evaluated plant surviving of the cultivars Georgiagem and O‟Neal. Also, it was verified rooting potential of blueberry microcutting treated with different concentrations of indolbutiric acid (IBA) in powder formulation. It was concluded that the substrates such as pinus needle + soil and plantmax®, followed by plantmax® + perlite and rice rull + soil promoted better blueberry plant development of the cv. Georgiagem. The substrates sphagnum peat moss and the mixes of peat + perlite, peat + perlite + coconut fiber and peat + perlite + sawdust allowed higher rooting percentage. The results referent to microcutting rooting, showing high levels of rooting for the cultivars Misty, O'Neal and Georgiagem. The plant surviving of blueberry cultivars O‟Neal and Georgiagem propagated by microcutting method was superior to 90%. The application of 4000 mg/kg of IBA promoted the best rooting rates and root volume of blueberry microcuttings cultivar Climax, showing rooting percentage of 91,67. / O mirtileiro é uma espécie frutífera de clima temperado, cultivada na Europa, nos Estados Unidos e Canadá, onde tem grande importância econômica. Seu cultivo tem apresentado grande expansão nos últimos anos, devido às características nutricionais do fruto, que é rico em vitaminas e minerais, possui baixas calorias e uma alta concentração de antioxidantes, determinando a demanda do mercado exigente em alimentos saudáveis. A oferta de mudas uniformes e de qualidade e desenvolvimento de sistema de produção eficiente e competitivo, aliado a estratégias de marketing , estão dentre as medidas a serem adotadas para o aumento da área cultivada. Assim, os objetivos deste trabalho foram: (i) definir um substrato adequado para a propagação vegetativa através da técnica de microestaquia e para o crescimento de mudas de mirtileiro; (ii) validar a técnica de microestaquia; (iii) avaliar a capacidade de enraizamento e sobrevivência de microestacas de mirtileiro. Para atingir os objetivos, foram realizados diferentes trabalhos. Avaliou-se o crescimento de mudas de mirtileiro, cultivar Georgiagem, oriundas de multiplicação in vitro em diferentes substratos. Da mesma forma, foram avaliados diferentes substratos para a técnica de microestaquia mantidas em condições de micro-ambiente úmido com temperatura e luz controlada. Foi avaliada a técnica de microestaquia para cultivares de mirtileiro do grupo southern highbush em dois períodos de coletas, sob micro-ambiente úmido, e a sobrevivência de mudas, obtidas através desta técnica. Foi verificado o efeito do AIB no enraizamento de microestacas de mirtileiro grupo rabbiteye da cultivar Clímax. Nas condições em que foram realizados os trabalhos, conclui-se que: Os substratos acícula de pinus + solo e plantmax®, seguido pelos substratos plantmax® + perlita e casca de arroz + solo, promoveram maior desenvolvimento das mudas de mirtilo, cultivar Georgiagem. Os substratos testados turfa de musgo sphagnum e as misturas turfa + perlita, turfa + perlita + fibra de coco, turfa + perlita + serragem, permitiram a obtenção de um maior percentual de enraizamento. Os resultados referentes ao enraizamento de microestacas, mostraram-se eficiente, apresentando elevados índices de enraizamento para as cultivares Misty, O‟Neal e Georgiagem. A sobrevivência das mudas de mirtileiro cultivares O‟Neal e Georgiagem, propagadas pelo método de microestaquia foram superiores a 90%. A aplicação de 4.000 mg kg-1 de AIB proporcionou os melhores índices de enraizamento e crescimento radicular de microestacas de mirtileiro cultivar Climax, com percentuais de enraizamento de 91,67%.

Made available in DSpace on 2016-05-02T13:54:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao completa Patricia Scotini Freitas.pdf: 380463 bytes, checksum: 593d35f67c31f8a091c16952ef946b32 (MD5) Previous issue date: 2007-04-27 / Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de Nïvel Superior / Blueberry Vaccinium corymbosum is a vegetable very rich in anthocyanins which have strong antioxidant capacity and other potential health benefits and because of that is widely consumed in the world as medicinal plant In this work the mutagenic potential of the crude extract from this plant was studied in mice after acute treatment using the comet and micronucleus assay Animals were treated orally with three different concentrations of the extract (1000 1500 and 2000 mg/kg) Peripheral blood cells of Swiss mice were collected 4 and 24 hours after the treatment for the comet assay and 48 and 72 hours for the micronucleus test The results have shown that the extract of Vaccinium corymbosum did not induce statistically significant increases in the average number of damages to desoxyribonucleic acid in peripheral blood cells However a significant increase in the mean of the micronucleated polychromatic erythrocytes was observed at three tested doses It is suggested that its consumption could be moderate until a definitive risk for humans is established / Vaccinium corymbosum é um vegetal muito rico em antocianinas que tem uma grande capacidade antioxidante e outros potenciais benefícios à saúde e por este motivo é altamente utilizado no mundo inteiro como planta medicinal Neste trabalho foi analisado o potencial mutagênico da administração aguda do extrato bruto de frutos desta planta em células de camundongos utilizando o ensaio cometa e o teste do micronúcleo Os animais foram tratados oralmente com três diferentes concentrações do extrato (1000, 1500 e 2000 mg/kg de peso corporal) Células do sangue periférico de camundongos foram coletados 4 e 24 horas após o tratamento para a realização do ensaio cometa e 48 e 72 horas para o teste do micronúcleo Os resultados mostraram que o extrato de Vaccinium corymbosum não induziu aumentos estatisticamente significativos de danos ao ácido desoxirribonucléico nas células de sangue periférico Entretanto o teste do micronúcleo evidenciou um aumento significativo na média de eritrócitos policromáticos micronucleados nas três concentrações testadas Sugere-se que o consumo deste extrato seja moderado até que seu risco definitivo para os seres humanos seja melhor estabelecido

Made available in DSpace on 2017-07-25T19:30:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Paula Pasqualini.pdf: 1305407 bytes, checksum: e0a308695b165383f1cd7da356df3b66 (MD5) Previous issue date: 2013-12-06 / In recent years, the cultivation of blueberry (Vaccinium ashei Reade) has attracted the attention of producers, traders and consumers. However, its expansion is limited by unavailability of appropriate varieties to the different Brazilian regions, difficulties in their propagation and shortage of seedlings of quality. Understanding the processes involved in seed germination is important when seeking to obtain genetic variability and new cultivars adapted to different edaphoclimatic conditions. Yet, the micropropagation is an alternative for obtaining a large number of healthy plants, in a short time, through clonal propagation. In this context, aiming to support the crop establishment in the Campos Gerais region, it was sought in this paper to study the seminiferous propagation and micropropagation of the blueberry, being its objectives to evaluate the germination behavior and viability levels of Vaccinium ashei Reade seeds, Briteblue and Climax cultivars, by means of germination and tetrazolium tests; elaboration of protocol for establishing blueberry in vitro (Vaccinium ashei Reade) cv. Brightwell, in WPM medium, in the presence of 2iP and evaluate the influence of silver thiosulfate in this initial phase of tissue culture. In relation to the seminiferous propagation, it was observed through the germination test that blueberry seeds of cultivars Briteblue and Climax submitted to treatments derived from the combination of variables - exposure or not to KOH, substrates (SP and MS/2) and temperatures (10⁰C and 25⁰C) - requires over 46 days for the issuing of the first normal seedling, and after 6 months from the beginning of the test the germination percentage does not exceed 40%. Otherwise, the tetrazolium test, based on staining of tissues, allows the establishment of different levels of viability for seeds of cvs Briteblue and Climax. In the micropropagation of blueberry cv. Brightwell, the use of medium culture WPM, added of 5 mg.L-1 2iP, in the in vitro establishment stage from nodal segments allows to obtain primordial leaves and shoots after 30 days of cultivation, whereas the use of 45 mM of STS at this stage supports the development of vegetative buds and leaves. / Nos últimos anos, o cultivo do mirtileiro (Vaccinium ashei Reade) tem despertado a atenção de produtores, comerciantes e consumidores. No entanto, a sua expansão é limitada em razão da indisponibilidade de variedades adequadas às diferentes regiões brasileiras, dificuldades de propagação e escassez de mudas de qualidade. Entender os processos envolvidos na germinação das sementes é importante quando se busca obter variabilidade genética e novas cultivares adaptadas a condições edafoclimáticas distintas. Já a micropropagação é uma alternativa para a obtenção de um grande número de mudas sadias, em curto espaço de tempo, através de propagação clonal. Nesse contexto, visando favorecer o estabelecimento da cultura na região dos Campos Gerais, buscou-se neste trabalho estudar a propagação seminífera e a micropropagação do mirtileiro, sendo seus objetivos determinar o comportamento germinativo e níveis de viabilidade de sementes de Vaccinium ashei Reade cultivares Briteblue e Climax por meio dos testes de germinação e de tetrazólio; elaborar protocolo para estabelecimento in vitro de mirtileiro (Vaccinium ashei Reade) cv. Brightwell, em meio WPM, na presença de 2iP e avaliar a influência do tiossulfato de prata nesta fase inicial da cultura de tecidos. Em relação à propagação seminífera, observou-se através do teste de germinação que sementes de mirtilo das cultivares Briteblue e Climax submetidas a tratamentos oriundos da combinação das variáveis - exposição ou não ao KOH, substratos (SP e MS/2) e temperaturas (10⁰C e 25⁰C) - demandam acima de 46 dias para a emissão da primeira plântula normal e, após 6 meses do início do teste, a porcentagem de germinação não ultrapassa 40%. Já o teste de tetrazólio, baseado na coloração dos tecidos, permite o estabelecimento de diferentes níveis de viabilidade para sementes das cvs Briteblue e Climax. Na micropropagação do mirtileiro cv. Brightwell, o uso do meio de cultura WPM, acrescido de 5 mg.L-1 de 2iP, no estágio de estabelecimento in vitro a partir de segmentos nodais, permite a obtenção de primórdios foliares e brotações após 30 dias de cultivo, sendo que o uso de 45 μM de STS nesta fase favorece o desenvolvimento das gemas vegetativas e folhas.

O presente estudo teve como objetivos: determinar o teor dos polifenóis: flavonóides e antocianos totais presentes nos extratos de mirtilo (Vaccinium ashei) e amora preta (Rubus sp) por espectrofotometria; desenvolver e validar uma metodologia analítica para a caracterização dos extratos por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), identificar, isolar e quantificar os principais compostos; avaliar a atividade anticolinesterásica, antioxidante frente à difenilpicrilhidrazol (DPPH) e anti-quimiotática in vitro; realizar a dosagem de aminas biogênicas no cérebro, investigar as possíveis atividades antinociceptiva, antiinflamatória, antiepiléptica, cognitiva e neuroprotetora do extrato de Vaccinium ashei, e o efeito neuroprotetor de um composto isolado a partir de Rubus: a cianidina, em vários modelos experimentais in vivo, em ratos e camundongos. Os perfis cromatográficos apresentaram compostos comuns às duas amostras; onde foram identificados 4 flavonóides, sendo hiperosídeo, quercitrina e isoquercitrina comuns a ambos extratos, e a rutina confirmada apenas em Rubus. Cinco antocianidinas foram identificadas em Vaccinium: delfinidina, cianidina, petunidina, peonidina e malvidina, e a cianidina em Rubus. Os resultados demonstraram, diferenças nas quantidades totais de polifenóis, flavonóides e antocianos. Todos os extratos, apresentaram atividade seqüestradora do radical DPPH in vitro. A atividade antiquimiotática in vitro foi comprovada para a fração flavonoídica. Os ensaios biológicos realizados in vivo demonstraram que o extrato preparado a partir de uma mistura de diferentes cultivares de Vaccinium ashei apresentou efeitos antinociceptivos nos testes da formalina sub-plantar, contorções abdominais, placa quente e tail flick. Produziu também efeito neuroprotetor, avaliado pelo ensaio cometa e pelo método de TOSC. Também causou aumento da atividade locomotora, assim como exerceu um efeito ansiolítico em roedores adultos. Facilitou a memória de curta duração e a Memória de longa duração e produziu um aumento de 5-HT no estriado e hipocampo de ratos adultos. Foi observado também que a cianidina isolada exerceu atividade neuroprotetora conforme avaliado pelo método de TOSC em ratos adultos. Não foram observadas diferenças significativas no modelo de epilepsia, entre o grupo tratado e o grupo controle, assim como não foram detectadas alterações no sistema dopaminérgico. Em síntese, os dados analisados em conjunto, permitem sugerir que o extrato de Vaccinium ashei e compostos isolados a partir de Rubus sp., como a cianidina, apresentam importante efeito neuroprotetivo, antinociceptivo e cognitivo, e nesta ação está envolvida a participação direta ou indireta dos receptores serotonérgico, acetilcolinérgicos, opióides e de citocinas pró-inflamatórias. Neste sentido, foram obtidos avanços significativos acerca dos mecanismos de ação de ambos gêneros o que torna o seu extrato e seus princípios ativos interessantes para o aproveitamento e desenvolvimento de novos alimentos funcionais e/ou nutracêuticos. / The objectives of this study were: comparing total phenolics, total anthocyanins and antioxidant capacity in appropriate berry samples from selected cultivars of the Vaccinium ashei and Rubus. A reliable HPLC procedure for determining the profile, quantifying and isolating of major compounds present in the extracts have been developed. The potential effects of the extracts were observed by chemotaxis assay, by acetilcholinesterasic inhibition, and their antioxidant properties evaluated using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) in vitro. Otherwise, we examined the antinociceptive, antiinflammatory, cognitive, anti-epileptic and neuroprotective effects of the extract of Vaccinium ashei in several experimental models in vivo, as well as biogenic amine concentration, in specific brain regions in rats and mice. In addition, it was tested the efficacy of oral administration of cyanidin-3-glucoside extracted from Rubus sp. in lipid peroxidation in brain rats (TOSC). An HPLC method for the analysis of anthocyanidins and flavonoids in berries extracts have been developed. The data obtained show that various compounds are common in the fruits analyzed, and four flavonoids were identified: hyperoside, quercetrin and isoquercitrin occurring in both fruits, and rutin occurring only in Rubus. Five anthocyanidins were identified in Vaccinium: delphinidin, cyanidin, peonidin, petunidin, and malvidin, and in Rubus cyanidin 3-glucoside was the major anthocyanin. We found that the flavonoids fractions significantly have inhibited migration celullar and acetilcholynestarase, and both total extract and fractions exhibited strong antioxidant activity. The extract (a mixture from the different cultivars) significantly enhanced short and long-term memory in the inhibitory avoidance task, induced an increase in the number of crossings during open field habituation, and had an anxiolytic effect in the elevated plus-maze task. These processes are accompanied by alterations in serotonin (5-HT) in the striatum, and the hippocampus. Cyanidin 3-glucoside isolated significantly reduced lipid peroxidation in hippocampal tissue in rats. In conclusion, the data from the current study show that the Vaccinum extract produce an important neuroprotective, cognitive and antinociceptive effect, which could be related with a direct or indirect interaction with the serotonergic, cholinergic, opioids receptors and pro-inflammatory cytokines. On the other hand, the extract don’t have protected the pentilenotetrazole-induced convulsions in mice, or influenced the memory retention in old rats when accessed in the step-down inhibitory avoidance, and showed no anxiolytic action in an elevated plus maze. The Vaccinium ashei extract did not alter locomotor activity, and the dopamine concentration in adult or old rats.

O presente estudo teve como objetivos: determinar o teor dos polifenóis: flavonóides e antocianos totais presentes nos extratos de mirtilo (Vaccinium ashei) e amora preta (Rubus sp) por espectrofotometria; desenvolver e validar uma metodologia analítica para a caracterização dos extratos por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), identificar, isolar e quantificar os principais compostos; avaliar a atividade anticolinesterásica, antioxidante frente à difenilpicrilhidrazol (DPPH) e anti-quimiotática in vitro; realizar a dosagem de aminas biogênicas no cérebro, investigar as possíveis atividades antinociceptiva, antiinflamatória, antiepiléptica, cognitiva e neuroprotetora do extrato de Vaccinium ashei, e o efeito neuroprotetor de um composto isolado a partir de Rubus: a cianidina, em vários modelos experimentais in vivo, em ratos e camundongos. Os perfis cromatográficos apresentaram compostos comuns às duas amostras; onde foram identificados 4 flavonóides, sendo hiperosídeo, quercitrina e isoquercitrina comuns a ambos extratos, e a rutina confirmada apenas em Rubus. Cinco antocianidinas foram identificadas em Vaccinium: delfinidina, cianidina, petunidina, peonidina e malvidina, e a cianidina em Rubus. Os resultados demonstraram, diferenças nas quantidades totais de polifenóis, flavonóides e antocianos. Todos os extratos, apresentaram atividade seqüestradora do radical DPPH in vitro. A atividade antiquimiotática in vitro foi comprovada para a fração flavonoídica. Os ensaios biológicos realizados in vivo demonstraram que o extrato preparado a partir de uma mistura de diferentes cultivares de Vaccinium ashei apresentou efeitos antinociceptivos nos testes da formalina sub-plantar, contorções abdominais, placa quente e tail flick. Produziu também efeito neuroprotetor, avaliado pelo ensaio cometa e pelo método de TOSC. Também causou aumento da atividade locomotora, assim como exerceu um efeito ansiolítico em roedores adultos. Facilitou a memória de curta duração e a Memória de longa duração e produziu um aumento de 5-HT no estriado e hipocampo de ratos adultos. Foi observado também que a cianidina isolada exerceu atividade neuroprotetora conforme avaliado pelo método de TOSC em ratos adultos. Não foram observadas diferenças significativas no modelo de epilepsia, entre o grupo tratado e o grupo controle, assim como não foram detectadas alterações no sistema dopaminérgico. Em síntese, os dados analisados em conjunto, permitem sugerir que o extrato de Vaccinium ashei e compostos isolados a partir de Rubus sp., como a cianidina, apresentam importante efeito neuroprotetivo, antinociceptivo e cognitivo, e nesta ação está envolvida a participação direta ou indireta dos receptores serotonérgico, acetilcolinérgicos, opióides e de citocinas pró-inflamatórias. Neste sentido, foram obtidos avanços significativos acerca dos mecanismos de ação de ambos gêneros o que torna o seu extrato e seus princípios ativos interessantes para o aproveitamento e desenvolvimento de novos alimentos funcionais e/ou nutracêuticos. / The objectives of this study were: comparing total phenolics, total anthocyanins and antioxidant capacity in appropriate berry samples from selected cultivars of the Vaccinium ashei and Rubus. A reliable HPLC procedure for determining the profile, quantifying and isolating of major compounds present in the extracts have been developed. The potential effects of the extracts were observed by chemotaxis assay, by acetilcholinesterasic inhibition, and their antioxidant properties evaluated using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) in vitro. Otherwise, we examined the antinociceptive, antiinflammatory, cognitive, anti-epileptic and neuroprotective effects of the extract of Vaccinium ashei in several experimental models in vivo, as well as biogenic amine concentration, in specific brain regions in rats and mice. In addition, it was tested the efficacy of oral administration of cyanidin-3-glucoside extracted from Rubus sp. in lipid peroxidation in brain rats (TOSC). An HPLC method for the analysis of anthocyanidins and flavonoids in berries extracts have been developed. The data obtained show that various compounds are common in the fruits analyzed, and four flavonoids were identified: hyperoside, quercetrin and isoquercitrin occurring in both fruits, and rutin occurring only in Rubus. Five anthocyanidins were identified in Vaccinium: delphinidin, cyanidin, peonidin, petunidin, and malvidin, and in Rubus cyanidin 3-glucoside was the major anthocyanin. We found that the flavonoids fractions significantly have inhibited migration celullar and acetilcholynestarase, and both total extract and fractions exhibited strong antioxidant activity. The extract (a mixture from the different cultivars) significantly enhanced short and long-term memory in the inhibitory avoidance task, induced an increase in the number of crossings during open field habituation, and had an anxiolytic effect in the elevated plus-maze task. These processes are accompanied by alterations in serotonin (5-HT) in the striatum, and the hippocampus. Cyanidin 3-glucoside isolated significantly reduced lipid peroxidation in hippocampal tissue in rats. In conclusion, the data from the current study show that the Vaccinum extract produce an important neuroprotective, cognitive and antinociceptive effect, which could be related with a direct or indirect interaction with the serotonergic, cholinergic, opioids receptors and pro-inflammatory cytokines. On the other hand, the extract don’t have protected the pentilenotetrazole-induced convulsions in mice, or influenced the memory retention in old rats when accessed in the step-down inhibitory avoidance, and showed no anxiolytic action in an elevated plus maze. The Vaccinium ashei extract did not alter locomotor activity, and the dopamine concentration in adult or old rats.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The chemical profile of a fermented product depends upon the raw basic material and the fermentative microbiota. The yeast microbiota is responsible for fermentation and contributes to fermented product aroma by several mechanisms. The study of this microbiota is relevant because the microorganisms utilize the constituents of the raw basic material and transform them into aroma or flavour impacting components. Autochthonous yeasts belonging to the blueberry microbiota of two different cultivars, Florida M and Climax, were investigated by analyzing the fermentative capacity, the hydrogen sulfide (H2S) production, the film-forming ability, killer feature, sensitivity and neutrality to killer factor. Three methods employed to distinguish autochthonous yeast species were used: MALDI-TOF MS, PCR and PCR-RFLP of ITS region of rRNA gene and, if necessary, genetic sequencing of the D1/D2 26S rRNA region. The species Hanseniaspora uvarum, Hanseniaspora opuntiae, Candida sorboxylosa, Metschnikovia kunwiensis, Candida bentonensis, Candida oleophila/Candida railenesis and Candida quercitrusa were found on the surface of Florida M. Hanseniaspora uvarum, Issatchenkia terricola, Candida sorboxylosa, Candida asiatica, Candida oleophila/railenensis, Issatchenkia hanoiensis and Kazachstania intestinalis were of berries of Climax variety. Only three species were found in both varieties: H. uvarum, C. sorboxylosa and C. oleophila/railenensis. The species H. uvarum was the predominant in both cultivars, representing 70.4% and 78% of yeasts isolated from the surface of the Florida M and Climax, respectively. The killer feature was not detected in any strain isolated from Florida M. From strains isolated from Climax, only one strain C. asiatica 133 MCMCF/14 was killer against the 26B. Moreover, the K. intestinalis 91 MCMCF/14 was the only sensitive when tested against both the patterns killer S. cerevisiae K1 (Lallemand), EMBRAPA 1B, EMBRAPA 91B and the killer yeast C. asiatica 133 MCMCF/14. All strains showed low fermentative capacity and all of them were non-Saccharomyces yeasts. All yeasts isolated from Florida M produced H2S. Only four strains from Climax did not produce H2S. The highest evolution of H2S was observed with the genus Issatchenkia and with the majority strains of C. sorboxylosa. The species C. oleophila/C. railenensis showed low production of this parameter. The fermentation process of fermented products from blueberries of both Florida and Climax can be severely affected by this kind of autochthonous yeasts. / O perfil químico de um produto fermentado depende da matéria prima de base e da microbiota que participam do processo fermentativo. No presente estudo, leveduras pertencentes à microbiota do mirtilo foram investigadas, isolando-se estes micro-organismos da superfície de duas diferentes cultivares de mirtilo, Florida M e Climax. Foram avaliadas a capacidade fermentativa, produção de sulfeto de hidrogênio (H2S), formação de filme, característica killer, sensibilidade e neutralidade a este fator. Três metodologias para identificação foram empregadas: espectrometria de massas MALDI-TOF, análise da região ITS do gene rRNA por PCR-RFLP e, quando necessário, sequenciamento genético da região D1/D2 do 26S do gene rRNA. A cultivar Florida M apresentou em sua superfície as espécies Hanseniaspora uvarum, Hanseniaspora opuntiae, Candida sorboxylosa, Metschnikovia kunwiensis, Candida bentonensis, Candida oleophila/Candida railenensis e Candida quercitrusa. Na cultivar Climax, foram encontradas as espécies Hanseniaspora uvarum, Issatchenkia terricola, Candida sorboxylosa, Candida asiatica, Candida oleophila/Candida railenesis, Issatchenkia hanoiensis e Kazachstania intestinalis. Apenas três espécies foram comuns as duas cultivares, sendo elas H. uvarum, C. sorboxylosa, Candida oleophila/Candida railenesis. H. uvarum foi a espécie predominante em ambas cultivares, representando 70,4% e 78% do total de leveduras isoladas da cv. Florida M e Climax, respectivamente. A característica killer não foi detectada em nenhuma linhagem isolada da cv. Florida M. Na cv. Climax, apenas a linhagem C. asiatica 133 MCMCF/14 se comportou como killer. A linhagem K. intestinalis 91 MCMCF/14 foi a única que demonstrou sensibilidade em relação a todas as linhagens killer padrão K1 (Lallemand), EMBRAPA 1B, EMBRAPA 91B. Esta mesma linhagem se mostrou sensível também à linhagem isolada da cultivar Climax C. asiatica 133 MCMCF/14. Todas as linhagens isoladas de ambas cultivares apresentaram baixa capacidade fermentativa e todas elas foram identificadas como sendo não-Saccharomyces. Houve de moderada a alta produção de H2S em 21 e 34% nas linhagens isoladas das cultivares Florida M e Climax, respectivamente. A produção máxima de H2S se destacou principalmente em linhagens das espécies I. terricola e C. sorboxylosa. A maioria das linhagens de leveduras da espécie C. oleophila/C. railenensis apresentaram baixa produção deste gás. O processo de produção de fermentados de mirtilo tanto da cultivar Florida M como da cultivar Climax pode ser severamente afetado por este tipo de leveduras autóctones.

O presente estudo teve como objetivos: determinar o teor dos polifenóis: flavonóides e antocianos totais presentes nos extratos de mirtilo (Vaccinium ashei) e amora preta (Rubus sp) por espectrofotometria; desenvolver e validar uma metodologia analítica para a caracterização dos extratos por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), identificar, isolar e quantificar os principais compostos; avaliar a atividade anticolinesterásica, antioxidante frente à difenilpicrilhidrazol (DPPH) e anti-quimiotática in vitro; realizar a dosagem de aminas biogênicas no cérebro, investigar as possíveis atividades antinociceptiva, antiinflamatória, antiepiléptica, cognitiva e neuroprotetora do extrato de Vaccinium ashei, e o efeito neuroprotetor de um composto isolado a partir de Rubus: a cianidina, em vários modelos experimentais in vivo, em ratos e camundongos. Os perfis cromatográficos apresentaram compostos comuns às duas amostras; onde foram identificados 4 flavonóides, sendo hiperosídeo, quercitrina e isoquercitrina comuns a ambos extratos, e a rutina confirmada apenas em Rubus. Cinco antocianidinas foram identificadas em Vaccinium: delfinidina, cianidina, petunidina, peonidina e malvidina, e a cianidina em Rubus. Os resultados demonstraram, diferenças nas quantidades totais de polifenóis, flavonóides e antocianos. Todos os extratos, apresentaram atividade seqüestradora do radical DPPH in vitro. A atividade antiquimiotática in vitro foi comprovada para a fração flavonoídica. Os ensaios biológicos realizados in vivo demonstraram que o extrato preparado a partir de uma mistura de diferentes cultivares de Vaccinium ashei apresentou efeitos antinociceptivos nos testes da formalina sub-plantar, contorções abdominais, placa quente e tail flick. Produziu também efeito neuroprotetor, avaliado pelo ensaio cometa e pelo método de TOSC. Também causou aumento da atividade locomotora, assim como exerceu um efeito ansiolítico em roedores adultos. Facilitou a memória de curta duração e a Memória de longa duração e produziu um aumento de 5-HT no estriado e hipocampo de ratos adultos. Foi observado também que a cianidina isolada exerceu atividade neuroprotetora conforme avaliado pelo método de TOSC em ratos adultos. Não foram observadas diferenças significativas no modelo de epilepsia, entre o grupo tratado e o grupo controle, assim como não foram detectadas alterações no sistema dopaminérgico. Em síntese, os dados analisados em conjunto, permitem sugerir que o extrato de Vaccinium ashei e compostos isolados a partir de Rubus sp., como a cianidina, apresentam importante efeito neuroprotetivo, antinociceptivo e cognitivo, e nesta ação está envolvida a participação direta ou indireta dos receptores serotonérgico, acetilcolinérgicos, opióides e de citocinas pró-inflamatórias. Neste sentido, foram obtidos avanços significativos acerca dos mecanismos de ação de ambos gêneros o que torna o seu extrato e seus princípios ativos interessantes para o aproveitamento e desenvolvimento de novos alimentos funcionais e/ou nutracêuticos. / The objectives of this study were: comparing total phenolics, total anthocyanins and antioxidant capacity in appropriate berry samples from selected cultivars of the Vaccinium ashei and Rubus. A reliable HPLC procedure for determining the profile, quantifying and isolating of major compounds present in the extracts have been developed. The potential effects of the extracts were observed by chemotaxis assay, by acetilcholinesterasic inhibition, and their antioxidant properties evaluated using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) in vitro. Otherwise, we examined the antinociceptive, antiinflammatory, cognitive, anti-epileptic and neuroprotective effects of the extract of Vaccinium ashei in several experimental models in vivo, as well as biogenic amine concentration, in specific brain regions in rats and mice. In addition, it was tested the efficacy of oral administration of cyanidin-3-glucoside extracted from Rubus sp. in lipid peroxidation in brain rats (TOSC). An HPLC method for the analysis of anthocyanidins and flavonoids in berries extracts have been developed. The data obtained show that various compounds are common in the fruits analyzed, and four flavonoids were identified: hyperoside, quercetrin and isoquercitrin occurring in both fruits, and rutin occurring only in Rubus. Five anthocyanidins were identified in Vaccinium: delphinidin, cyanidin, peonidin, petunidin, and malvidin, and in Rubus cyanidin 3-glucoside was the major anthocyanin. We found that the flavonoids fractions significantly have inhibited migration celullar and acetilcholynestarase, and both total extract and fractions exhibited strong antioxidant activity. The extract (a mixture from the different cultivars) significantly enhanced short and long-term memory in the inhibitory avoidance task, induced an increase in the number of crossings during open field habituation, and had an anxiolytic effect in the elevated plus-maze task. These processes are accompanied by alterations in serotonin (5-HT) in the striatum, and the hippocampus. Cyanidin 3-glucoside isolated significantly reduced lipid peroxidation in hippocampal tissue in rats. In conclusion, the data from the current study show that the Vaccinum extract produce an important neuroprotective, cognitive and antinociceptive effect, which could be related with a direct or indirect interaction with the serotonergic, cholinergic, opioids receptors and pro-inflammatory cytokines. On the other hand, the extract don’t have protected the pentilenotetrazole-induced convulsions in mice, or influenced the memory retention in old rats when accessed in the step-down inhibitory avoidance, and showed no anxiolytic action in an elevated plus maze. The Vaccinium ashei extract did not alter locomotor activity, and the dopamine concentration in adult or old rats.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:25:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ Tania_Regina_Pelizza.pdf: 1759590 bytes, checksum: b5a9c36983f13efd79f7249a3d65731b (MD5) Previous issue date: 2009-12-14 / The present study aimed to group several aspects related to blueberry propagation (Vaccinium spp). Therefore, the trial was separated into five chapters. The first chapter investigated the ex vitro rooting of blueberry cultivars (Bluebelle, Woodard and Georgiagem) in the substrates (Plantmax®; Plantmax® + old saw (1:1); old saw; Plantmax® + vermiculite (1:1) and vermiculite. It was evaluated the percentage of rooting, callus formation, surviving explants, length and number of roots, length of the largest root, height of explants, number of shoots and total fresh mass. In the second chapter it was studied the process of acclimatization and growth of micropropagated blueberry plants cultivar Climax by using different substrates (carbonized rice hull + Húmus Fértil®, Plantmax® + vermiculite and soil + young saw of pinus) and two covering systems (with or without plastic covering on plants). The trial was assessed during 210 days. In this work it was evaluated the surviving percentage, increment of height, fresh and dry biomass of the aerial part and root of the plants. The third chapter investigates the microcuttings process of the blueberry Climax by comparing different substrates (Plantmax® + carbonized rice rusks (1:1); Húmus Fértil® and Vermicompound of cattle) and two types of microcuttings (median and apical). It was evaluated the rooting percentage, surviving, callus formation, number and length of roots, length of the largest root, number of leaves and shoots. The effect of phytorregulators Benzylaminopurine (BAP) and gibberellins (GA3) in different concentrations (control, 250mg/L of BAP, 250mg/L of BAP + 250mg/L of GA3) on growth of minicuttings O neal at five evaluations (0, 30, 60, 90 and 120 days) is assessed in the fourth chapter. It was measured: minicuttings height, number of leaves, number and mean length of lateral shoots. And, the fifth chapter evaluated the growth of micropropagated blueberry plants cultivar Georgiagem, using different concentrations of GA3 (0, 50, 100 and 150 mg/L) regarding period (0, 30 and 60 days). It was measured: plant height, number and mean length of shoots, fresh and dry biomass of aerial part and root. The best substrates for ex vitro rooting of blueberry explants were vermiculite and old saw. Among cultivars, Bluebelle and Woodard showed the greatest results. The substrate and covering system indicated for acclimatization and growth of blueberry plants Climax are Plantmax® + carbonized rice hull without plastic covering. Median microcuttings promoted better results for rooting of the blueberry Climax . The combination of Plantmax® + carbonized rice rusks is the best substrate for microcutting rooting of blueberry. The phytoregulators BAP + GA3 showed similar behavior to the control treatment regarding mean length of shoot and number of leaves. The growth in height and shoots number of the blueberry minicuttings O Neal increased by time and are independent of the use of phytoregulator. Blueberry plants Georgiagem positively responds to gibberellins action, mainly the aerial part of the plant. The concentration at 50mg L-1 de GA3 is sufficient to obtain blueberry plant response regarding growth. / presente estudo teve por objetivo abordar vários aspectos relacionados à propagação do mirtileiro (Vaccinium spp). Para isso, os trabalhos foram divididos em cinco capítulos, sendo no primeiro capítulo abordado o enraizamento ex vitro de (três) cultivares de mirtileiro (Bluebelle, Woodard e Georgiagem) (em cinco diferentes) nos substratos Plantmax®; Plantmax® + serragem curtida (1:1); serragem curtida; Plantmax® + vermiculita (1:1) e vermiculita. Foi avaliada a percentagem de enraizamento, formação de calo, explantes sobreviventes, comprimento e número de raízes, comprimento da maior raiz, altura dos explantes, número de brotações e massa fresca total. No segundo capítulo é abordado o processo de aclimatização e crescimento de plantas micropropagadas de mirtileiro da cultivar Climax com o uso de diferentes substratos (casca de arroz carbonizada + Húmus Fértil®, Plantmax® + vermiculita e solo + serragem jovem de pinus) com o uso de dois sistemas de cobertura (com e sem cobertura plástica sobre as plantas) avaliado ao longo de 210 dias. Neste trabalho foi avaliada a percentagem de sobrevivência, o incremento de altura, a biomassa fresca e seca da parte aérea e do sistema radicular das plantas. O terceiro capítulo aborda o processo da microestaquia de mirtileiro Climax comparando substratos (Plantmax® + casca de arroz carbonizada (1:1); Húmus Fértil® e Vermicomposto Bovino) e duas porções do ramo (mediana e apical). Foi avaliada a percentagem de enraizamento, sobrevivência, formação de calo, número e comprimento médio de raízes, comprimento da maior raiz, número médio de folhas e de brotações. O uso de fitorreguladores benzilaminopurina (BAP) e giberelina (GA3) em diferentes concentrações (testemunha sem reguladores, 250 mg/L de BAP, 250 mg L-1 de BAP + 250 mg L-1 de GA3), no crescimento de miniestacas de O Neal em cinco tempos de avaliação (0, 30, 60, 90 e 120 dias) é abordado no quarto capítulo. Foi avaliada a altura das miniestacas, número de folhas, número e comprimento médio de brotações laterais. A seguir aborda-se o crescimento de plantas micropropagadas de mirtileiro Georgiagem com o uso de diferentes concentrações de GA3 (0, 50, 100 e 150 mg L-1) em função do tempo (0, 30 e 60 dias) onde foi avaliada a altura de planta, número e comprimento médio de brotações, biomassa verde e seca da parte aérea e da raiz. Os melhores substratos para enraizamento ex vitro de explantes de mirtileiro foram vermiculita e serragem curtida. Dentre as cultivares, Bluebelle e Woodard apresentaram melhores resultados. O substrato e sistema de cobertura indicados para a aclimatização e o crescimento de plantas de mirtileiro Climax são Plantmax® + vermiculita sem cobertura plástica. Microestacas medianas proporcionaram melhores resultados para o enraizamento de mirtileiro Climax . A combinação de Plantmax® + casca de arroz carbonizada é (mostrou ser) o melhor substrato para enraizamento de microestacas de mirtileiro. Os fitorreguladores BAP + GA3 apresentaram respostas iguais à testemunha quanto ao comprimento médio de brotações e número de folhas. O crescimento em altura e o número de brotações das miniestacas de mirtileiro O Neal aumentaram com o tempo e foram independentes do uso de fitorregulador. Plantas de mirtileiro Georgiagem respondem positivamente à ação da giberelina, sendo que está se dá principalmente sobre a parte aérea da planta. A concentração de 50 mg L-1 de GA3 é suficiente para obter resposta das plantas de mirtileiro quanto ao seu crescimento.