Orientador: Regina Celia Spadari-Bratfisch / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-20T12:32:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcondes_FernandaKlein_M.pdf: 4667978 bytes, checksum: f9546f7c08e60c1479f7c335ad4626f3 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Estudamos a influência do sexo e das fases do ciclo estral sobre a reação de estresse em ratos submetidos à natação, a 30°C. Analisamos as alterações de sensibilidade às catecolaminas em átrios direitos isolados e as concentrações plasmáticas de corticosterona de ratos machos e de ratas em estro ou em diestro submetidos a uma sessão de 5, 15, 30 ou 50 min de natação (estresse único), ou a três sessões de 5, 15 e 30 min, aplicadas em dias consecutivos. Em fêmeas, as sessões repetidas ocorreram durante o diestro, proestro e estro (grupo estro) ou durante o estro, metaestro e diestro (grupo diestro ). Curvas dose-resposta à isoprenalina, noradrenalina e adrenalina foram obtidas em átrios direitos isolados de ratos após 30 ou 50min de natação, ou após a última sessão do estresse repetido. O sangue foi coletado da veia renal esquerda, sob anestesia com pentobarbital, para determinação das concentrações plasmáticas de corticosterona por fluorimetria. Átrios direitos isolados de ratos machos submetidos à natação não apresentaram alterações de sensibilidade às catecolaminas. O tecido isolado de ratas em estro apresentaram subsensibilidade à isoprenalina após uma sessão de 50 min de natação. Átrios direitos isolados de ratas em diestro, desenvolveram subsensibilidade à noradrenalina e à adrenalina após uma sessão de 50 min de natação ou após o estresse repetido. Em ratos machos, as concentrações plasmáticas de corticosterona aumentaram após 5, 15 ou 30 min de natação, mas não após 50 mino Em ratas, houve aumento nos níveis plasmáticos de corticosterona em todos os grupos experimentais, mas o perfil de variação foi diferente daquele observado em machos. Houve grande variação na resposta hormonal ao estresse por natação dentro de cada grupo analisado. Em resposta ao estresse repetido, machos e fêmeas apresentaram elevação nos níveis plasmáticos de corticosterona após cada uma das sessões de natação. Entretanto, enquanto em machos os níveis aumentaram ainda mais após a última sessão, em fêmeas o aumento foi menor do que nas duas sessões anteriores. Nossos resultados demonstraram que o sexo e o ciclo estral exercem importante influência sobre a reação de estresse em ratos submetidos à natação. Aumentos significativos nos níveis plasmáticos de corticosterona são necessários, porém não suficientes, para induzir alterações de sensibilidade às catecolaminas. Há também uma grande variação individual na resposta hormonal à natação / Abstract: We studied the influence of sex and estrous cyc1e on the response of rats to swimming stress, at 30°C. The sensitivity to cathecolamines of isolated right atria and corticosterone plasma levels on male rats and female rats at estrus or diestrus were analysed after one swimming session of 5, 15, 30 or 50 min (single stress) or after three sessions of 5, 15 and 30 mino In female rats, repeated swimming sessions were applied during diestrus, metestrus and estrus (estrus group), or during estrus, metestrus and diestrus (diestrus group). Dose-response curves to isoprenaline, noradrenaline and adrenaline were obtained in right atria isolated from rats after a 30 min or 50 min session, or after the last swimming session of repeated stress. Blood was withdrawn from the left renal vein under pentobarbital anestesy, and corticosterone plasma levels were determined fluorimetrically. Right atria isolated from male rats submitted to swimming stress at 30°C did not present any alteration on sensitivity to catecholamines. Tissue isolated from rats at estrus exhibited subsensitivity to isop_enaline after a 50 min swimming session. Right atria isolated from rats at diestrus showed subsensitivity to noradrenaline and to adrenaline after a single 50 min swimming session or after repeated stress. Corticosterone plasma levels of mal e rats showed an increase after 5, 15 and 30 min of swimming, but not after a 50 min session compared to the control group. In female rats at estrus, corticosterone plasma levels were increased in all experimental groups. However the variation profile was different comparing male with female rats. There was a large variation ofthe hormonal response to swimming stress within each group. After repeated stress, corticosterone plasma levels of male and female rats increased. However, in the third session, whereas mal e rats exhibited a higher plasma corticosterone leves, female rats showed lower increase than those observed after the two previous sessions. Our results demonstrated that sex and estrous cyc1e have an important influence on the stress response to swimmming in rats. Significant increase on corticosterone plasma levels are necessary, but not sufficient, to induce changes on sensitivity to catecholamines. There is also a large individual variation on the hormonal response to swimming stress / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientadores: Sebastião Roberto Taboga, Ricardo Alexandre Fochi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-27T10:21:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Antoniassi_JuliaQuilles_M.pdf: 2795390 bytes, checksum: 43457dd2f5a6928d83f9fa9c05fd3820 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A próstata, glândula do sistema reprodutor que tem origem embrionária a partir do seio urogenital, sendo formada por quatro pares de lobos fortemente associado à uretra: lobo anterior ou glândula coaguladora (GC), lobo dorsal (LD), lobo dorsolateral (LDL) e lobo ventral (LV). A fisiologia prostática é regulada por hormônios esteroides, principalmente andrógenos e estrógenos. Enquanto os andrógenos induzem a diferenciação, desenvolvimento, e atividade secretora, os estrógenos parecem modular os efeitos androgênicos, mantendo o crescimento e fisiologia normal da próstata. Embora o cortisol seja um hormônio largamente utilizado em medicamentos por suas ações anti-inflamatórias e imunossupressoras, pouco se sabe sobre os efeitos colaterais desses medicamentos, principalmente na morfofisiologia prostática. Além disso, sabe-se que esse hormônio está altamente relacionado com o estresse e com alguns distúrbios de comportamento. Desta forma, este projeto visou avaliar, por métodos histológicos, histoquímicos, imunocitoquímicos e estruturais com parâmetros qualitativos e quantitativos, diversos aspectos morfofuncionais da glândula prostática ventral de machos de gerbilo (Meriones unguiculatus), após a aplicação por cinco dias de corticosterona em duas doses diferentes: 0,5mg/kg/dia e 1,5mg/kg/dia, além disso os grupos foram subdivididos em um grupo com um período de 5 dias de descanso após o tratamento e outro grupo que foi morto um dia após o fim do tratamento. Os dados apresentados mostram que a corticosterona possui propriedades antiproliferativas e antiapoptóticas sobre a próstata de gerbilos. Esse hormônio também alterou a frequência dos receptores dos principais hormônios reguladores desse órgão, como andrógenos e estrógenos. Em relação aos receptores de glicocorticóides (GR), foi observada uma redução da sua expressão quando a concentração sérica da corticosterona encontrava-se elevada. As alterações na expressão dos receptores supracitados levaram ao surgimento de displasias prostáticas importantes. Houve uma variação nos efeitos desencadeados por esse hormônio de acordo com a dose aplicada, sendo que uma maior dose apresentou efeitos mais discretos e uma menor dose mostrou ser mais impactante. Os efeitos da corticosterona nos receptores nucleares foram revertidos ou atenuados após o período de descanso, o que não foi observado para os padrões de proliferação e apoptose celular / Abstract: The prostate, gland of reproductive system, has embryonic origin from the urogenital sinus and consists four lobes that are strongly associated with the urethra: anterior lobe or coagulating gland (CG), dorsal lobe (LD), dorsolateral lobe (LDL) and ventral lobe (LV). Steroid hormones, mainly androgens and estrogens, regulate the prostate physiology. While androgens induce differentiation, development and secretory activity, estrogens appear to modulate androgen effects, maintaining normal growth and prostate physiology. Although cortisol is widely used in drugs because their anti-inflammatory and immunosuppressive actions, little is known about the side effects of these drugs, especially in the prostate morphophysiology. Furthermore, it is known that this hormone is highly correlated with stress and some behavioral disorders. Thus, this research aimed evaluate, by histological methods, histochemical, immunocytochemical with structural and qualitative and quantitative parameters, various morphological and functional aspects of the ventral prostate gland of male gerbil (Meriones unguiculatus) after application of corticosterona. This hormone was applicated for five days with two doses of corticosterone: 0.5mg/kg/day and 1.5mg/kg/day, in addition, the groups were divided into a group with a 5-day period of rest after the treatment and another group was killed one day after the end treatment. The data showed that corticosterone has antiproliferative and anti-apoptotic properties on the prostate gerbils. This hormone also changed the frequency of AR, ER?, ER? e GR. We observed a reduction of glucocorticoids receptors expression when serum concentration of corticosterone was elevated. These changes led to the emergence of important prostatic dysplasia. There was a variation in effects triggered by this hormone in accordance with the applied dose, being that a higher dose reported effects more discrete and a lower dose was shown to be more impactful. The effects of corticosterone on nuclear receptors have been reversed or attenuated after rest period, which was not observed for apoptosis and cell proliferation patterns / Mestrado / Biologia Celular / Mestra em Biologia Celular e Estrutural

O objetivo do presente trabalho foi investigar as repercussões de uma relação social estável sobre diferentes parâmetros de comportamento, neuroquímica e atividade imune de camundongos dominantes e submissos. Machos adultos (com aproximadamente 90 dias de idade) mantidos em duplas desde o desmame, foram determinados como dominantes ou submissos, após três avaliações consecutivas do comportamento, onde foram observadas a presença ou ausência de ataques ou fugas e posturas de submissão. Em alguns experimentos, grupos de cinco animais mantidos em uma mesma caixa foram utilizados para comparação com resultados obtidos de animais que conviveram em duplas. Foram utilizadas apenas as duplas de camundongos onde a hierarquia social foi claramente observada. Os resultados mostraram que os animais submissos apresentaram em relação aos dominantes: 1) diminuição no tempo gasto na zona central do campo aberto; 2) diminuição no número de entradas nos braços abertos e diminuição no tempo gasto na exploração dos braços abertos do labirinto em cruz elevado; 3) aumento no tempo gasto na exploração dos braços fechados do labirinto em cruz elevado; 4) diminuição no número de entradas e no tempo gasto na exploração do terço final dos braços fechados do labirinto em cruz elevado; 5) aumento na taxa de renovação de dopamina no hipotálamo; 6) diminuição da taxa de renovação de dopamina no corpo estriado; 7) maior número de metástases induzidas pelo melanoma murino experimental B16F10; 8) aumento do percentual de células T CD8+ no timo após 14 dias de inoculação do mesmo melanoma; 9) diminuição no burst oxidativo basal de neutrófilos e monócitos sangüíneos, mas não naquele induzido por bactérias; 10) menor atividade de células NK presentes no baço e no sangue. Em relação aos animais mantidos em número de cinco, os animais submissos apresentaram: menor percentual de células NK no sangue. Já os animais dominantes, apresentaram em relação aos animais mantidos em grupos: 1) aumento da taxa de renovação de noradrenalina no hipotálamo; 2) aumento na taxa de renovação de dopamina no corpo estriado; 3) menor percentual de células NK no sangue. O status social, no entanto, não provocou diferenças: 1) nos níveis absolutos de dopamina, noradrenalina e serotonina; 2); nos metabólitos de serotonina; 3) nos níveis séricos basais de corticosterona; 4) no peso e número de células do baço e timo; 5) no percentual de células T CD4+ e CD8+ no baço e 6) no percentual de linfócitos, neutrófilos e monócitos sangüíneos. Em conjunto, os presentes resultados mostraram que animais dominantes e submissos mantidos por 90 dias em uma hierarquia social estável, apresentaram diferenças comportamentais e neuroquímicas, e responderam de forma diferente a um mesmo estímulo imune, no caso, o desenvolvimento de metástases induzida nos pulmões pela administração do melanoma experimental murino B16F10. Estes resultados sugerem que diferentes mecanismos, que não a ativação do eixo HPA, estejam envolvidos com o aumento de susceptibilidade ao desenvolvimento do tumor observado nos indivíduos submissos / The objective of the present work was to investigate the repercussions of a stable social relationship on different parameters of the behavior, neurochemical and immune activity of dominant and submissives mice. Adult males (with approximately 90 days of age) kept in pairs since wean it, had been determined as dominant or submissives, after three consecutive evaluations of the behavior, where presences or absences of attacks or escapes and positions of submission had been observed. In some experiments, groups of five animals kept in one same box had been used to compare the results gotten between these and the animals coexisting in pairs. The pairs had been used only where the social hierarchy clearly was observed. The results had shown that the submissives animals in relation to the dominant ones had presented: 1) reduction in the time spent in the central zone of the open field; 2) reduction in the number of entrances in the open arms and reduction in the time spent in the exploration of the open arms of the plus maze; 3) increase in the time spent in the exploration of the closed arms of the plus maze; 4) reduction in the number of entrances and time spent in the exploration of the final third of the closed arms of the plus maze; 5) increase in the turnover of dopamine in the hypothalamus; 6) reduction in the turnover of dopamine in the corpus striatum; 7) increased number of metastasis in the lungs induced by murino melanoma experimental B16F10; 8) increase of the percentage of cells T CD8+ in the thymus after 14 days of inoculation of the same melanoma; 9) reduction in the basal oxidative burst of neutrophil and monocytes sanguine, but not in the induced by bacteria; 10) decreased NK cells activity measured in the blood and spleen. In relation to the animals kept in number of five, the submissives animals had presented: 11) reduction in the percentile of NK cells in the blood. While the dominant animals had presented in relation to the animals kept in groups: 1) increase in the turnover of norepinephrine in hypothalamus; 2) increase in the turnover of dopamine in the fluted body; 3) reduction in the percentile of NK cells in the blood. The social status, however, did not provoke differences: 1) in the absolute levels of dopamine, norepinephrine and serotonin; 2) in the metabolites of serotonin; 3) in the serum levels of corticosterone; 4) in the weight and number of cells of the spleen and thymus; 5) in the percentage of cells T CD4+ and CD8+ in the spleen and 6) in the percentage of lymphocytes, neutrophil and monocytes in the blood. Together, the results obtained had shown that dominants and submissives animals kept 90 days living in a stable social hierarchy had presented behavior and neurochemical differences, and had answered of different form to one same immune stimulation, in this case, the induced development of metastasis in the lungs for experimental melanoma murino B16F10, where the submissives had been more susceptible than the dominant ones. This results suggest that other mechanisms, different of HPA activation, may be involved with the decreased resistance of submissive mice to B16F10 tumor dissemination

Estudos recentes associaram fortemente a fisiopatologia da Depressão ao estresse crônico e suas conseqüências, desde o comportamento alterado até a disrupção do eixo HPA e mudanças na expressão gênica. A depressão é uma doença que afeta milhões de pessoas ao redor do mundo, causando um grande impacto na qualidade de vida dos pacientes. Evidências sugerem o papel contributivo do stress de início da vida (ELS) para Depressão Maior (MD). O paradigma do estresse crônico variável é amplamente utilizado, mas seus impactos não foram estudados no início da vida. Portanto, para entender melhor esta condição, os filhotes de ratos Wistar machos (P1-P21) foram expostos ao paradigma Multimodal ELS. Foram avaliados os níveis plasmáticos de corticosterona (cort) e os órgãos relacionados ao eixo HPA. Adicionalmente, estes foram avaliados durante a idade adulta no teste de consumo de sacarose (TCS), no teste de nado forçado (TNF) e no teste da caixa claro-escuro (TCE). Os resultados indicam que os filhotes não se habituaram ao ELS multimodal. Em P21, o peso das glândulas adrenais dos animais ELS é significantivamente maior, e o timo e o peso corporal diminuíram, quando comparados com o grupo controle. O timo também se mantém significativamente reduzido quando comparado ao grupo controle em P90. Além disso, os ratos adultos submetidos ao protocolo ELS apresentaram menor ingestão de sacarose e maior latência para o compartimento claro na TCE, quando comparados ao grupo controle. Um outro modelo animal que apresenta estresse intermitente e tem sido amplamente utilizado é o modelo da restrição do material de ninho. Neste modelo a redução do material do ninho promove uma disrupção no cuidado materno, e gera alterações no desenvolvimento encefálico e comportamental da prole. O ELS leva a um surgimento precoce da inibição do medo contextual e à maturação acelerada do hipocampo. Nós postulamos que a corticosterona desempenha um papel funcional na regulação do tempo de maturação das regiões subjacentes à aprendizagem e expressão de ameaças, incluindo o hipocampo e a amígdala. Nossa hipótese é que alterações nos níveis plasmáticos de corticosterona podem afetar o tempo de processos de maturação cerebral e comportamental. Portanto nosso objetivo foi avaliar como um bloqueador da síntese de corticosterona altera o comportamento de medo condicionado e expressão de BDNF em animais controle ou submetidos ao modelo ELS de redução de material do ninho. Tanto nos grupos controle como ELS utilizamos animais Naïve, ou que receberam Veículo ou Metirapona (MET; 50mg/kg) em P12. Em P18, P21 ou P28 grupos independentes de camundongos foram expostos a uma única sessão de condicionamento do medo, seguido 24 h depois por um único teste de contexto. A análise do comportamento de congelamento no teste de contexto revelou que o tratamento com MET bloqueou a aceleração na inibição do medo contextual em camundongos fêmeas submetidos ao ELS. Curiosamente, em filhotes machos controles tratados com MET, houve um atraso na curva de desenvolvimento de medo contextual. Observamos que houve um correlato do efeito do tratamento com Metirapona na expressão do BDNF em regiões límbicas (hipocampo ventral e amígdala basolateral). Com base nos presentes resultados, a CORT provavelmente desempenha um papel importante no momento do desenvolvimento típico e das mudanças associadas ao ELS no comportamento e na maturação do cérebro. A epilepsia é uma condição neurológica crônica caracterizada pela predisposição persistente a gerar crises epilépticas, e pelas consequências neurobiológicas, cognitivas, psicológicas e sociais desta condição. A depressão é uma comorbidade psiquiátrica muito comum em pacientes com epilepsia. Cada vez mais dados sugerem que a epilepsia, depressão e outros possíveis distúrbios psiquiátricos como a ansiedade compartilham mecanismos patogênicos. Nesse sentido, foram encontradas anormalidades na linhagem WAR (Wistar Audiogenic Rat) que a tornam um modelo interessante para o estudo do estresse, a Epilepsia e as comorbidades neuropsiquiátricas envolvidas. Com base nisso, o presente estudo teve comoxiv Godoy, L.D. objetivo avaliar na linhagem WAR: 1. Cuidados maternos na linhagem WAR nas condições controle e sob estresse 2. Comportamentos de tipo depressivo basal e após o kindling audiogênico (crises convulsivas crônicas- KAu). Não houve diferença no tempo em postura de amamentação ativa, licking/grooming ou tempo da mãe no ninho, e no número de ataques e comportamentos agressivos. Observamos um aumento na latência de ratas WAR para recuperar os filhotes após separação materna, e enquanto 100% das ratas Wistar agruparam toda a ninhada, nas fêmeas WAR foi observado apenas 40%. 2. Para avaliar os comportamentos de tipo depressivo, os ratos foram submetidos a 20 estímulos acústicos duas vezes ao dia (KAu) (Wistar-KAu, WAR-KAu), enquanto os respectivos grupos controle permaneceram sem estímulo (Wistar, WAR). Posteriormente, os grupos foram submetidos ao TCS e TNF Não houve diferença entre o grupo WAR e Wistar no TCS , porém o grupo WAR-KAu grupo apresentou um aumento significativo em relação aos grupos controles. No TNF ambos os grupos WAR e WAR-KAu apresentaram redução significativa de escalada na sessão teste quando comparados ao Wistar. Tomados em conjunto, esses achados indicam que o ELS pode gerar suceptibilidade às comorbidades psiquiátricas associadas ao estresse, e que os modelos experimentais em questão permitem investigar como os efeitos dos glicocorticoies se relacionam com o neurodesenvolvimento, especificamente na maturação do comportamento de medo e de estruturas límbicas. Além disso, dados preliminares indicam que, embora a linhagem WAR não apresente diferenças comportamentais maternas em condições basais, pode apresentar alterações sob o efeito de eventos estressantes. Também, com base nos achados, a susceptibilidade de crises convulsivas pode estar relacionada às alterações nas estratégias comportamentais em situações estressantes na vida adulta, que também pode constituir vulnerabilidade às comorbidades psiquiátricas. / Recent studies have strongly associated the pathophysiology of depression with chronic stress and its consequences, from altered behavior to HPA axis disruption and changes in gene expression. Depression is a disease that affects millions of people around the world, causing a major impact on the quality of life of patients. Evidence suggests the contributory role of early life stress (ELS) for Major Depression (MD). The variable chronic stress paradigm is widely used, but its impacts were not studied early in life. Therefore, to better understand this condition, male Wistar rat pups (P1-P21) were exposed to the Multimodal ELS paradigm. Plasma levels of corticosterone (CORT) and organs related to the HPA axis were evaluated. Additionally, these were evaluated during adulthood in the sucrose consumption test (SCT), the forced swimming test (FST) and the light-dark box test (LDT). The results indicate that pups did not habituate to multimodal ELS. In P21, the weight of the adrenal glands of the ELS animals is significantly greater, and the thymus and body weight decreased, when compared with the control group. The thymus also remains significantly reduced when compared to the control group in P90. In addition, adult rats submitted to the ELS protocol presented lower intake of sucrose and greater latency to light compartment in the LDT when compared to the control group. Another animal model that presents intermittent stress and has been widely used is the constraint model of nest material. In this model, the reduction of nest material promotes disruption in maternal care and causes changes in the encephalic and behavioral development of offspring. ELS leads to an early onset of contextual fear inhibition and accelerated maturation of the hippocampus. We postulate that CORT plays a functional role in regulating the maturation time of the regions underlying the learning and expression of threats, including the hippocampus and amygdala. Our hypothesis is that changes in plasma CORT levels may affect the timed brain and behavioral maturation processes. Therefore, our objective was to evaluate how a CORT synthesis blocker (Metyrapone; MET) alters conditioned fear behavior and BDNF expression in animals reared under control conditions or submitted to the ELS model of limited nesting bed. Both in control and ELS groups included Naïve animals or animals that received vehicle or MET; 50 mg/kg in P12. In P18, P21 or P28 independent groups of mice were exposed to a single session of fear conditioning, followed 24 hours later by a single context test. Analysis of the freezing behavior in the context test revealed that MET treatment blocked the acceleration of contextual fear suppression at P22 induced by ELS, with no difference between the P19 or P29 groups. This effect was observed mainly in female mice. Interestingly, in control male pups treated with MET, there was an altered contextual fear developmental curve. MET showed significant reduction in freezing in PND22, increase in freezing in PND29 followed by delayed suppression in P39. We observed that MET behavioural data were further supported by BDNF expression in limbic regions (ventral hippocampal and basolateral amygdala). Based on the current results, CORT probably plays an important role at the time of typical development and changes associated with ELS in the behavior and maturation of the brain. Epilepsy is a chronic neurological condition characterized by a persistent predisposition to epileptic seizures, and by neurobiological, cognitive, psychological and social consequences. Depression is a very common psychiatric comorbidity in patients with epilepsy. Increasingly data suggest that epilepsy, depression and other possible psychiatric disorders such as anxiety share pathogenic mechanisms. In this sense, abnormalities in the WAR strain (Wistar Audiogenic Rat) have been found that make it an interesting model for the study of stress, Epilepsy and neuropsychiatric comorbidities involved. Based on this, the present study aimed to evaluate in the WAR strain: 1. Maternal care under control and under stress conditions 2. Basal depressive type behaviors and after audiogenic kindling (chronic seizures-KAu).xvi Godoy, L.D. There was no difference for active breastfeeding posture, licking/grooming or time of mother in the nest and in the number of attacks and aggressive behaviors in maternal aggression test. WAR rats showed a higher latency to recover pup in pup retrieval test, whereas 100% of the Wistar rats grouped the entire litter, and in WAR it was only 40%. 2. In order to evaluate the depressive type behaviors, the rats were submitted to 20 acoustic stimuli twice a day (AuK) (Wistar-AuK, WAR-AuK), while the respective control groups remained without stimulus (Wistar, WAR). Subsequently, the groups were submitted to sucrose consumption test (SCT) and forced swim test (FST). There was no difference between the WAR and Wistar groups in the SCT, however the WAR-KAu group presented an increase in sucrose consumption in relation to the control groups 3 or 13 dasy after the AuK. In FST, both WAR and WARKAu groups showed a significant decrease in the test session when compared to Wistar. Taken together, these findings indicate that ELS may induce susceptibility to psychiatric comorbidities associated with stress, and that the current experimental models allow investigating how the effects of glucocorticoids are related to neurodevelopment, specifically in the maturation of fear behavior and limbic structures. In addition, preliminary data indicate that, although the WAR strain does not show maternal behavioral differences at baseline, it may present changes under stressful events. Also, based on the findings, the susceptibility of seizures may be related to changes in behavioral strategies in stressful situations in adult life, which may also constitute vulnerability to psychiatric comorbidities.

Durante a sepse ocorre liberação de mediadores inflamatórios, que contribui para o comprometimento do sistema nervoso central e alterações na secreção dos hormônios hipofisários. Contudo, não está elucidado se essas alterações persistem em animais sobreviventes à sepse. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi estudar as alterações neuroimunoendócrinas em animais sobreviventes à sepse polimicrobiana experimental. A sepse foi induzida pelo método de ligadura e perfuração cecal (CLP) (uma perfuração com agulha 14G) e os animais foram observados durante cinco ou dez dias. Os animais naive ou sobreviventes foram submetidos ao desafio osmótico intraperitoneal com salina hipertônica (2M), ou desafio imune intravenoso com LPS (1.5 mg/kg), ou ao estresse por imobiliza- ção. Após 30 minutos do desafio osmótico ou 60 minutos para os demais estímulos, os animais foram decapitados para coleta de sangue e do hipotálamo. O sangue foi coletado para dosagem de nitrato, citocinas e hormônios (vasopressina, ocitocina, ACTH e corticosterona); e o hipotálamo para a quantificação dos níveis de citocinas e dos conteúdos de sinaptofisina e beta-amilóide. No presente estudo, nós observamos um aumento periférico dos mediadores inflamatórios: nitrato e IL-1?, e centralmente da citocina IL-6 no hipotálamo de animais sobreviventes à sepse. Além disso, dependendo do estímulo, observou-se uma atenuada (desafio osmótico) ou exacerbada (desafio imune) secreção da vasopressina e/ou ocitocina em animais sobreviventes à sepse. Adicionalmente, também encontramos uma diminuição no conteúdo hipotalâmico de sinaptofisina, e nenhum sinal de acúmulo de beta-amilóide. Concluímos que as alterações na secreção de vasopressina e ocitocina observadas podem estar associadas à neuroinflamação sustentada e disfunção sináptica com evidências de processo neurodegenerativo. Este modelo de sepse pode fornecer informações importantes para a compreensão das alterações fisiopatológicas à longo prazo. / Inflammatory mediators released during sepsis contribute to central nervous system impairment and alterations in the secretion of pituitary hormones. However, it is unclear whether these changes persist in sepsis survivor animals. In this context, the objective of this work was to study the neuroimunoendocrine alterations in sepsis survivor animals. Sepsis was induced by the cecal ligation and perforation (CLP) method and the animals (perforated once with a 14G needle) were observed for five or ten days. Naive or sepsis survivors were submitted to intraperitoneal osmotic challenge with hypertonic saline (2M), or intravenous immune challenge with LPS (1.5 mg/kg), or immobilization stress. After 30 minutes of the osmotic challenge or 60 minutes for the other stimuli, the animals were decapitated for collection of blood and the hypothalamus. Blood was collected for the determination of nitrate, cytokines and hormones (vasopressin, oxytocin, ACTH and corticosterone); and the hypothalamus for quantification of cytokine levels, and synaptophysin and beta-amyloid contents. In the present study, we observed a peripheral increase of inflammatory mediators: nitrate and IL-1?, and centrally of the IL-6 cytokine in the hypothalamus of sepsis survivor animals. In addition, depending on the stimulus, an attenuated (osmotic challenge) or exacerbated (immune challenge) secretion of vasopressin and/or oxytocin was observed in sepsis survivor animals. In addition, we also found a decrease in the hypothalamic content of synaptophysin, and no signal of beta amyloide accumulation. We conclude that alterations in vasopressin and oxytocin secretion may be associated with sustained neuroinflammation and synaptic dysfunction with evidence of neurodegenerative process. This model of sepsis may provide important informations for understanding long-term pathophysiological alterations.

A melatonina (MEL) é um hormônio que participa do controle de uma série de processos fisiológicos em situações de higidez e durante processos de defesa. Além da produção noturna pela glândula pineal, células do sistema imunológico também produzem MEL. Diversos estudos demonstram que a produção de MEL pela pineal e células imunes é controlada por agentes endógenos (TNF, catecolaminas) e exógenos (LPS, zimosan) que ativam/controlam o desenvolvimento de processos de defesa. Em macrófagos, a produção de MEL induzida por zimosan, por exemplo, aumenta a fagocitose destas células. Na glândula pineal, glicocorticoides podem tanto potencializar quanto reduzir a síntese de MEL dependendo do padrão de estimulação adrenérgica imposto sobre a glândula. Contudo, não existem relatos sobre os efeitos dos glicocorticoides sobre a produção de MEL por células imunocompetentes. Tendo em vista a importância da produção de MEL no funcionamento adequado de macrófagos, o presente estudo investigou os efeitos da corticosterona (CORT) sobre a produção de MEL induzida por diferentes estímulos em macrófagos da linhagem RAW 264.7. Constatamos que os efeitos induzidos pela CORT sobre a produção de MEL dependem do contexto aos quais essas células foram submetidas. Tanto CORT quanto zimosan aumentam a produção de MEL. Todavia, quando as células são pré-incubadas com CORT, a produção de MEL induzida pelo zimosan é inibida. Em ambos os casos, os efeitos da CORT parecem ser dependentes da ativação dos receptores de glicocorticoides (GR). Com relação à produção de MEL induzida por zimosan, o efeito dos GRs está associado com a inibição da via do NF?B. Este trabalho pode ser relevante para a compreensão dos efeitos da CORT sobre o funcionamento das células imunes em condições de estresse crônico, uso excessivo de corticoides e diante de desafios imunológicos / Melatonin (MEL) is a hormone that participates in the control of a series of physiological processes in healthiness situations and during defense processes. In addition to the nocturnal production by the pineal gland, cells of the immune system also produce MEL. Several studies have shown that the production of MEL by pineal and immune cells is controlled by endogenous (TNF, catecholamines) and exogenous (LPS, zymosan) agents that activate / control the development of defense processes. In macrophages, the production of MEL induced by zymosan, for example, increases the phagocytosis of these cells. In the pineal gland, glucocorticoids may both potentiate and reduce MEL synthesis depending on the adrenergic stimulation pattern imposed on the gland, however there are no reports on the effect of glucocorticoids on the production of MEL by immunocompetent cells. The present study investigated the effects of corticosterone (CORT) on the production of MEL induced by different stimuli in RAW 264.7 macrophages. We found that the effects induced by CORT on the production of MEL depend on the context to which these cells were submitted. Both CORT and zymosan increase MEL production, however, when cells are preincubated with CORT, the production of MEL induced by zymosan is inhibited. In both cases, the effects of CORT appear to be dependent on the activation of glucocorticoid receptors (GR). With respect to zymosan induced MEL production, the effect of GRs is associated with the inhibition of the NF?B pathway. This work might support the understanding of the effects of CORT on the functioning of immune cells under conditions of chronic stress, excessive use of corticosteroids and immunological challenges

Este trabalho tem o objetivo avaliar o efeito da adrenalectomia bilateral no processo neurodegenerativo e cicatricial na via nigro estriatal dopaminérgica lesada pela 6- hidroxidopamina (6-OHDA) em ratos, e deste modo contribuir para a interpretação dos efeitos dos hormônios adreno esteróides nos processos neurodegenerativos e neurotróficos nas lesões do sistema nervoso central. Ratos Wistar adultos jovens foram submetidos à cirurgia de retirada bilateral das glândulas adrenais ou cirurgia simulada para a mesma. Após 2 dias, os animais foram submetidos à cirurgia estereotáxica para lesão do sistema nigro estriatal dopaminérgico através da injeção unilateral de 6-OHDA na substância negra. Os animais receberam diariamente doses de reposição hormonal de corticosterona (10mg/kg) ou solução veículo. Após um período de 72 horas, 1 semana e 3 semanas, os animais foram sacrificados por decapitação, e as regiões do mesencéfalo ventral e corpo estriado foram dissecados bilateralmente. O tecido foi processado para o método de Western blot onde foram analisados os seguintes marcadores: tirosina hidroxilase (TH enzima que participa da via de conversão da dopamina), proteína ácida fibrilar glial (GFAP proteína do filamento intermediário do citoesqueleto do astrócito), bem como as moléculas da matriz extracelular fosfacan, neurocan, sulfato de condroitina e NG2, a proteína Laminina e finalmente, o fator de crescimento fibroblástico-2 (FGF-2) na região do mesencéfalo ventral, onde observa-se ações tróficas nos neurônios dopaminérgicos nigras que podem exercer efeitos no processo inflamatório pelas suas ações gliogênica e angiogênica. Deste modo, a neurodegeneração dopaminérgica foi avaliada pelos níveis da TH, a ativação astrocitária pelos níveis da GFAP, o processo de cicatrização pela regulação das moléculas da matriz extracelular e as respostas tróficas pelo FGF-2. Pelos resultados obtidos é possível que hormônios glicocorticóides adrenais modulem os elementos envolvidos na neurodegeneração e reparo e cicatrização do sistema dopaminérgico. / This study has the objective to evaluate the effect of the bilateral adrenalectomy in the neurodegenerative process and cicatrization on the nigroestriatal pathway injury through 6-hydroxydopamine (6-OHDA) in rat, and in this way contribute for the interpretation of the adreno esteroides hormones effects in the neurodegenerative and neurotrophics process in the central nervous system.injury Adult rats wistar were submitted in a surgery to take the bilateral adrenal gland or a simulate surgery of the same. After 2 days the animals was involved into a stereotaxic surgery to nigroestriatal dopaminergic lesion with a unilateral injection of the 6-OHDA in the nigra. The animals received daily corticosterone hormonal (10mg/kg) or vehicle solution. After a period of 72 hours, 1 week and 3 weeks, the animals were decapitated, and the regions of the ventral midbrain and striatum it was bilaterally dissected. The tissue was processed by Western blot method and analyzed for the following markers: tyrosine hydroxylase (TH - enzyme that join of the dopamine conversion pathway), glial fibrilar acid protein (GFAP protein of the intermediary filament of the astrocyte citoesqueleto, the moleculars extracellular matrix phosphacan, neurocan, chondroitin sulfate and NG2, the Laminin protein and finally, the neurotrophic factor (FGF-2) in the region of ventral midbrain, where watched trophic actions in the dopaminergic neurons that could have effects in the inflammatory processes by your gliogenic and angiogenic actions. In this way, the dopaminergic neurodegeneration was evaluated by the TH levels, the astrocytary activation by the GFAP levels, the cicatrization processes by the molecules regulation of the extracellular matrix and the trophics FGF-2 answers. By the results it is possible that adrenal glucocorticoid hormones modulate the elements involved in neurodegeneration, repair and cicatrization of the dopaminergic system.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a participação do sistema glutamatérgico nos efeitos induzidos pela anfetamina em camundongos sensibilizados e desafiados com ovalbumina, através do tratamento prévio com MK-801, um antagonista de receptores glutamatérgicos NMDA. Em relação aos animais tratados apenas com anfetamina, observamos que o tratamento prévio com MK-801: 1) reverteu a diminuição no número de leucócitos totais bem como o número de eosinófilos e neutrófilos no lavado broncoalveolar (LBA); 2) reverteu a diminuição da porcentagem de expressão das moléculas L-selectina e ICAM-1 em granulócitos do LBA; 3) reverteu a diminuição das citocinas IL-10 e IL-13 no sobrenadante do LBA; 4) reverteu a diminuição na contração da traquéia; 5) reverteu a desgranulação de mastócitos pulmonares; 6) não alterou a produção de IgE total e IgE-OVA; 7) não reduziu os níveis de corticosterona plasmáticos. Tomados em seu conjunto, quer nos parecer que os efeitos induzidos pela anfetamina implicam na ativação do sistema glutamatérgico via receptores NMDA. Possivelmente, as diferenças dos efeitos do MK-801, da anfetamina ou a combinação de fármacos se devam a uma ativação (modulação) diferenciada sobre o eixo hipotálamo pituitária adrenal (HPA) e/ou sistema nervoso autônomo simpático (SNAS) o que poderia explicar os efeitos opostos observados na resposta inflamatória alérgica pulmonar de camundongos. / The aim of this study was to evaluate the involvement of the glutamatergic system in the effects induced by amphetamine in mice OVA-sensitized and challenged by the pretreatment with MK-801, an NMDA glutamate receptor antagonist. In relation to animals treated only with amphetamine we found that pretreatment with MK-801: 1) reverted the decrease in the total leukocytes and in the total number of eosinophils and neutrophils within the bronchoalveolar lavage fluid (BAL) 2) reverted the decrease in the percentage of expression of adhesion molecules L-selectin and ICAM-1 in BAL granulocytes, 3) reverted the decrease in IL-10 and IL-13 in BAL supernatant and 4) reverted the decrease in methacoline-induced tracheal contraction; 5) reverted the degranulation of mast cells in the lungs; 6) did not alter the production of total IgE and IgE-OVA, 7) did not decrease the plasma levels of corticosterone. Taken together, it seems feasible to suggest that the effects induced by amphetamine requires the participation of the glutamatergic system via NMDA receptors. Possibly, differences in MK-801, amphetamine or MK-801 + amphetamine effects on hypothalamic pituitary adrenal axis (HPA) and/or sympathetic autonomic nervous system (SNAS) might explain the opposite effects now observed for these drugs given alone or in combination in the pulmonary allergic inflammatory response in mice.

Os conceitos de bem-estar animal são uma realidade dentro da avicultura mundial. Sabe-se que aves estressadas apresentam diminuição no crescimento e na conversão alimentar, desajustes fisiológicos e hormonais, bem como aumento da suscetibilidade a doenças em decorrência de modificações induzidas pelo estresse na resposta imune. Além disso, eventos estressantes vêm sendo relacionados com distúrbios na integridade da microbiota intestinal. Nesse sentido, buscamos neste trabalho estudar os efeitos do estresse térmico por calor nas temperaturas de 26±1ºC, 31±1ºC e 36±1ºC sobre os índices zootécnicos, a integridade intestinal e a imunidade inata de frangos de corte, correlacionado e discutindo os achados experimentais dentro de uma perspectiva neuroimune. Nossos resultados mostraram que o estresse por calor (31±1ºC e 36±1ºC) em frangos de corte: (1) diminuiu o ganho de peso e o consumo de ração, porém só observamos diminuição da conversão alimentar e da mortalidade nas aves submetidas ao estresse de 36±1ºC; (2) diminuiu o peso relativo da bursa de Fabrícius, porém apenas a temperatura de 36±1ºC diminuiu o peso relativo do timo; (3) diminuiu o burst oxidativo basal de macrófagos, porém apenas a temperatura de 31±1ºC foi capaz de diminuir o burst oxidativo dessa célula na presença de S. aureus. (4) aumentou os níveis séricos de corticosterona; e (5) observamos presença de discreta enterite caracterizada por aumento de infiltrado inflamatório linfo-plasmocitario na lamina própria do jejuno. Tomados em seu conjunto, os presentes dados permitem afirmar que o estresse térmico por calor tenha produzido alterações na atividade neuroimune dos frangos de corte modificando, nos mesmos a atividade do eixo HPA; essas alterações teriam influenciado o desempenho produtivo e a imunidade, propiciado do aparecimento de processos inflamatórios intestinais. / The concept of animal welfare is a reality in the world poultry industry. Stressed chickens present a decrease in growth performance and feed conversion, physiological and hormonal changes as well as an increased susceptibility to diseases. Recurrent changes induced by in stress in human and animals immune functions were also reported after stress in poultry. Besides that, stressed events were reported to be related to intestinal microbiota integrity disturbances. In this sense, we evaluated the effects of heat stress (26±1ºC, 31±1ºC and 36±1ºC) on broiler chickens performance parameters, intestinal morphology and innate immunity, correlating and discussing the observed data under a neuroimmune perspective. Ours results showed the heat stress (31±1ºC and 36±1ºC) in broiler chickens (1) decreased body weight gain and feed consumption, however feed conversion and mortality decreased only in chickens submitted to 36±1ºC, (2) decreased the bursa of Fabricius relative weight in 31±1ºC and 36±1ºC, but thymus relative weight decreased only in the 36±1ºC stressed chickens, (3) decreased macrophage basal oxidative burst, however only the 31±1ºC heat stress decreased S. aureus induced oxidative burst, (4) increased corticosterona serum levels, and (5) induced an enteritis characterized by increased presence of lymphocytes and plasmocytes within the lamina propria of jejunum. These obtained results suggested that heat stress-induced changes in broiler chickens were a consequence of a neuroimune activity disturbance, most probably, on animals HPA axis activity. Thus, a possible increase in corticosterona serum levels induced by the heat stress underlay the effects of this stressor on birds\' performance and immune function, leading to the appearance of intestinal histophatological signs of inflammation.

Inflammatory processes are known to protect vertebrates from injuries and infections. However, from an immunological perspective the role of leukocytes in snakes inflammatory process is poorly understood. Within this context, leukocyte classification in these animals is not clearly defined, with authors disagreeing on existent cell types and their classification. Due to the great variation of snakes leukocytes on cytochemistry, an analysis focused exclusively on optical morphology is insufficient to determine different cell types. Thus, additional methods, as flow cytometry, are important to better understand the function and origin of each cell type. In particular, studies of chronic stress induced by captivity in reptiles demonstrate that serum corticosterone levels rise during the adaptation period and are associated with immune suppression. However, it is not known how the leukocyte functions of reptiles are altered under these conditions. The objective of this research was to adapt leukocyte density gradients (ficoll and percoll) for snake blood samples, and characterize recovered cells based on size, presence of granules and internal complexity (organelle), and on their cellular innate functions (oxidative burst and phagocytosis), in front of bacterial, fungal and chemical challenges, by flow cytometry; enabling the qualitative and quantitative assessment of innate activities presented by cells constituting the immune system of Boa constrictor, Bothrops jararaca and Crotalus durissus. Additionally, the study proposes to correlate innate leukocyte functions performances with serum corticosterone concentrations, in recent wild-caught viperids (B. jararaca and C. durissus), at two moments of adaptation to captivity (5 and 60 days of captivity). Comparison between gradient methods for leukocyte isolation did not show any statistical difference in types and proportion of leukocytes populations between snakes of the same species. When verified by means of flow cytometric cell sorting and confirmed by optical microscopy, populations were mainly composed of azurophils, heterophils, large lymphocytes and small lymphocytes. Concerning innate leukocyte functions, heterophils, lymphocytes and azurophils were involved in the phagocytosis response. Regarding oxidative burst activity, only azurophils presented a significative and strong oxidative burst when compared to their respective baseline. During adaptation to captivity process, B. jararaca heterophils phagocytic activity showed a positive correlation with serum corticosterone levels. However, the percentage of phagocytosis presented by azurophils and the quantity of particles ingested by lymphocytes, presented a negative correlation with serum corticosterone concentrations. For C. durissus, phagocytosis displayed by lymphocytes also presented a negative correlation with serum corticosterone levels. In both vipers species, oxidative burst activity showed no correlation with serum corticosterone concentrations. We believe that the data generated in this research will contribute to the development of new diagnostic tests, phylogenetic analyzes, ecotoxicological and ecoimmunological studies, as well as assisting in the clinic-sanitary management of snakes in captivity. / O processo inflamatório é conhecido por proteger os vertebrados de lesões e infecções. No entanto, sob uma perspectiva imunológica, as funções dos leucócitos no processo inflamatório das serpentes são pouco compreendidas. Neste contexto, a caracterização leucocitária nestes animais ainda não está definida, havendo discordância na literatura sobre os tipos celulares existentes e suas classificações. Devido à grande variação citoquímica apresentada por estas células, uma análise focada apenas na morfologia óptica é insuficiente para determinar os diferentes tipos celulares. Assim, o empego de métodos mais avançados, como a citometria de fluxo, são importantes para o melhor entendimento da função e da origem de cada tipo celular. Em particular, estudos sobre o estresse crônico induzido pelo cativeiro em répteis demonstram que níveis séricos de corticosterona aumentam durante o período de adaptação, e estão associados à imunossupressão; no entanto, ainda não está claro como as funções leucocitárias são alteradas nestas condições. Neste cenário, o objetivo do presente estudo foi pesquisar gradientes de densidade (ficoll e percoll) para a recuperação de leucócitos provenientes do sangue periférico de serpentes, e caracterizar, por meio da citometria de fluxo, as células recuperadas com base no tamanho, presença de grânulos e complexidade interna (organelas), e em suas funções celulares inatas (burst( oxidativo e fagocitose) frente a desafios bacterianos, fúngicos e químicos, possibilitando, desta forma, a avaliação qualitativa e quantitativa das funções apresentadas pelos leucócitos constituintes do sistema imunológico de três serpentes neotropicais, Boa constrictor, Bothrops jararaca e Crotalus durissus. Ainda, o estudo propôs correlacionar o desempenho destas funções com as concentrações séricas de corticosterona em viperídeos (B. jararaca e C. durissus) recém capturados da natureza, em dois momentos de adaptação ao cativeiro (após cinco e 60 dias de cativeiro). A comparação entre os dois métodos de recuperação leucocitária (ficoll e percoll) não apresentou diferença estatística em relação aos tipos e proporção dos leucócitos recuperados do sangue periférico de serpentes de mesma espécie. Nas três espécies, após análise por citometria de fluxo, as populações leucocitárias obtidas nos citogramas foram identificadas mediante procedimento de sorting celular, com posterior análise por microscopia óptica, sendo compostas por azurófilos, heterófilos, linfócitos grandes e linfócitos pequenos. Em relação às funções leucocitárias, heterófilos, linfócitos e azurófilos apresentaram capacidade de fagocitose nas três espécies. Com relação ao burst oxidativo, apenas os azurófilos apresentaram uma atividade significativa em relação aos respectivos valores basais para as espécies investigadas. Na fase de adaptação ao cativeiro, a atividade fagocítica dos heterófilos de B. jararaca mostrou correlação positiva com os níveis séricos de corticosterona. Entretanto, a porcentagem de fagocitose apresentada pelos azurófilos e a quantidade de partículas ingeridas pelos linfócitos apresentaram correlações negativas. Para C. durissus, a porcentagem de fagocitose dos linfócitos também apresentou correlação negativa com os níveis de corticosterona. Em ambas as espécies, não houve correlação entre a atividade de burst oxidativo e as concentrações séricas de corticosterona. Acreditamos que os dados gerados nesta pesquisa contribuirão para o desenvolvimento de novos testes diagnósticos, análises filogenéticas, estudos ecotoxicológicos e ecoimunológicos, além de auxiliar no manejo clínico-sanitário de serpentes em cativeiro.