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Expressão recombinante da canacistatina em células de inseto.Silva, Mylene de Melo 09 March 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-03-09 / Financiadora de Estudos e Projetos / Due to the great economic importance of sugarcane crop in Brazil, the occurrence of
infections by phytopathogens leading to decreased productivity and quality remains a serious
problem. As the plants have natural mechanisms of defense against the attack of fungi
and insects, amongst which the inhibitors of proteases are distinguished, the use of these
substances in the development of resistant plants or in pesticide production may be an interesting
alternative. One of the major classes of protease inhibitors acting against the attack
of pathogens is the cystatins, proteins that inhibit cysteine proteases specifically. Canecystatin
was the first cysteine protease inhibitor characterized from sugarcane. This gene
codes for a ~ 14 kDa protein that contains conserved regions common to the cystatin family.
Although the protein has previously been produced in a bacterial system of expression,
in this work we use this sugarcane cystatin as a model for the implementation of a heterologous
protein expression system in insect cells. This system has some advantages relatively
to the prokaryotic system such as the possibility of posttranslational modifications.
The recombinant protein was expressed in this system in a soluble form and purified using
affinity chromatography in a nickel column, rendering approximately 23 mg/L of pure protein.
The activity of the protein was assayed against papain, being capable of inhibiting the
activity of this cysteine protease efficiently. Furthermore, the stability of the protein was
analyzed in different conditions of pH and temperature. We conclude that the canecystatin
is a good model for the implementation of the Baculovirus Expression System at the Molecular
Biology Laboratory of the UFSCar / Devido à grande importância da cultura da cana-de-açúcar no Brasil, a ocorrência de
infecções por fitopatógenos constitui um grave problema que acarreta queda na produtividade
e na qualidade da lavoura canavieira. Uma vez que as plantas têm mecanismos naturais
de defesa contra o ataque de fungos e insetos, dentre os quais se destacam os inibidores
de proteases, a utilização dessas substâncias no desenvolvimento de plantas resistentes
ou na produção de pesticidas seria uma alternativa interessante. Um tipo de inibidor de
protease que atua na proteção contra o ataque de patógenos e como proteínas de reservas
em algumas sementes são as cistatinas, proteínas que inibem especificamente cisteínoproteases.
A Canacistatina foi o primeiro inibidor de cisteíno-protease caracterizado originado
da cana-de-açúcar. Apesar de já ter sido anteriormente produzida em sistema bacteriano
de expressão, a Canacistatina foi utilizada, nesse trabalho, como modelo de estudo
para implementação do sistema de expressão de proteínas heterólogas em células de inseto.
Esse sistema apresenta algumas vantagens sobre o sistema procariótico como a possibilidade de realizarem modificações pós-traducionais. A proteína recombinante foi expressa
nesse sistema na forma solúvel e purificada em cromatografia de afinidade em coluna de
níquel, resultando em um rendimento de 23 gramas por litro de cultura. A proteína purificada
foi submetida a testes de inibição enzimática contra a papaína, sendo capaz de inibir
satisfatoriamente a atividade dessa cisteíno-protease. Também foram realizados testes de
estabilidade desse inibidor em diferentes condições de pH e temperatura, mostrando-se
estável. A Canacistatina foi um modelo de estudo adequado para a implementação do sistema
de expressão de proteínas no Laboratório de Biologia Molecular da UFSCar
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Quantificação de mRNA de genes relacionados à resposta imune em bovinos infectados com endoparasitos do gênero Haemonchus sppIbelli, Adriana Mércia Guaratini 14 March 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-03-14 / Financiadora de Estudos e Projetos / Brazilian livestock production presents great impact for the national agriculture,
possessing the largest bovine commercial herd of the world. However, the
productivity is low and gastrintestinal diseases caused by Haemonchus spp are one
of the major constraints to the production. It is known that those parasites are
responsible for many immunological responses in the host. Cytokine polarization
Th1/Th2 has been studied to understand the infections caused by nematodes.
However, the studies that try to understand immune response of cattle with
Haemonchus spp are still scarce. The goal of this work was to verify differences in
the mRNA abundance of genes involved in immune response of calves of Nelore
breed (Bos indicus) submitted to the first infection with Haemonchus spp, relating
these differences to patterns of cellular infiltrate. Genes were evaluated by real time
PCR and relative quantification was made by the software Relative Expression
Software Tool. Results showed up-regulation of the interleukins IL-4 (p≤0.05) and IL-
13 (p≤0.05) in the lymph node of challenged animals. No significant differences (p >
0.05) were found in mRNA abundance for the genes analyzed in abomasum. There
were no significant differences for mast cells and eosinophil counts in abomasal
tissue among analyzed groups. From the results, it can be concluded that for the
short infection time, there was increased polarization of Th2 in lymph node, but it was not seen in abomasal tissue. / RESUMO
A pecuária brasileira apresenta grande impacto para o setor agrícola nacional,
possuindo o maior rebanho bovino comercial do mundo. Em contrapartida, a
produtividade é baixa e as doenças causadas por endoparasitoses do gênero
Haemonchus são um dos principais limitantes na produção. Sabe-se que esses
parasitos são responsáveis por uma série de respostas imunológicas no hospedeiro.
A polarização de citocinas Th1/Th2 tem sido amplamente estudada visando
entender melhor as infecções causadas por parasitos gastrintestinais. Entretanto,
ainda são escassos os estudos que procuram entender a resposta imunológica de
bovinos endoparasitados com Haemonchus spp. Os objetivos deste trabalho foram
verificar diferenças na abundância de RNA mensageiro de genes relacionados à
resposta imune de bezerros da raça Nelore (Bos indicus) submetidos à primeira
infecção com Haemonchus spp, relacionando-as às respostas locais de infiltrados
celulares. Os genes foram quantificados por PCR em tempo real e a quantificação
relativa foi feita pelo programa computacional Relative Expression Software Tool. Os
resultados mostraram um aumento significativo das interleucinas IL-4 (p≤0,05) e IL-
13 (p≤0,05) nos linfonodos do grupo de animais desafiados. Não foram encontradas
diferenças significativas (p > 0,05) de abundância de mRNA para os genes
analisados no tecido abomasal. Não houve diferenças significativas (p > 0,05) para
contagens de mastócitos e eosinófilos no tecido abomasal entre os grupos
analisados. Assim, pode-se concluir que, para o curto período de infecção, houve
um aumento da polarização Th2 em linfonodo, mas não em abomaso.
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Prospecção de locos microssatélite e análise da variabilidade genética em uma população do Mato Grosso do Sul, visando a conservação da Arara Vermelha, Ara chloroptera (Psittacidae, Aves)Martins, Julia Mara 30 November 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-11-30 / Universidade Federal de Minas Gerais / Several Psittacidae species, as those of Ara genus, have biological characteristics frequently associate with extinction risk. These include corporal size, specialized food preferences, low rate of population growth, restricted habitat and geographic dispersal. Genetic studies are important tools because they provide helpfulness for the conservation of those species with high extinction risks. Microsatellite markers are frequently used in population and conservation studies, and are usually isolated from the genome of the targeted species or of the related species. The main goal of this study was evaluate the genetic variation of Ara chloroptera inhabiting a touristic area, named Buraco das Araras, in Mato Grosso do Sul. For such way, six microsatellite loci were isolated and characterized and were useful to assess the genetic variation of Ara chloroptera and presented also a good value to study other Neotropical parrot. The studied population showed a genetic variation value comparable to that previously observed in a non endangered congeneric species. A significant Hardy-Weinberg disequilibrium was detected, probably related to migrants. It was hypothesized the occurrence a throughout of the years alternation of
visiting individuals. The Buraco das Araras constitutes a favorable and helpful environment for reproduction and food of the red-and-green macaw and species conservation. / Certas espécies de psitacídeos possuem uma série de características normalmente associadas ao risco de extinção, como grande tamanho corporal, pequena diversidade de itens alimentares, alta especificidade de hábitat, pequena taxa de crescimento populacional e distribuição geográfica restrita,
como o gênero Ara. Estudos genéticos são importantes ferramentas para auxiliar a conservação de espécies sob risco de extinção. Um dos marcadores moleculares mais utilizados é o microssatélite, o qual deve ser isolado da própria espécie ou de espécies correlatas. O objetivo principal desse estudo foi
avaliar a variação genética de uma população de Ara chloroptera que habita uma região turística do Mato Grosso de Sul, conhecida por Buraco das Araras. Para tanto foram identificados e caracterizados seis locos de microssatélites na
espécie, os quais foram úteis para acessar a variação genética e também apresentaram potencial para utilização em estudos com outros psitacídeos neotropicais. A população estudada apresentou uma variabilidade genética comparável a observada em uma espécie congenérica não ameaçada. Mostrouse significativamente em desequilíbrio de Hardy-Weinberg, provavelmente devido aos imigrantes detectados. Foi hipotetizada a ocorrência de alternância de indivíduos visitantes ao através dos anos. O Buraco das Araras proporciona um ambiente favorável para reprodução e alimentação da arara vermelha, ajudando na conservação da espécie.
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Estudo de associação entre microssatélites localizados no cromossomo OAR3 e características de crescimento e resistência aos nematódeos gastrintestinais em ovinosGouveia, João José de Simoni 15 August 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-08-15 / Financiadora de Estudos e Projetos / The sheep production has been growing surprinsingly in the last years in Brazil, but in despite of this, it can not be considered competitive yet, principally because the lack of structure and organization of the sector. Among the problems
faced by the Brazilian sheep producers we could cite the gastrointestinal parasites and the relatively low productivity of the native breeds when compared with the exotic ones. The knowledge of the genetic factors controlling these traits can help in the improvement of then without impair the correlated traits. Through molecular biology and statistical technics is possible to identify genes/chromosomal regions associated with these traits and once the region is confirmed as really important in the control of the characteristic this information could be used in breeding programs through marker assisted selection. Many regions were identified as candidate for growth and nematode resistance traits in sheep and other ruminants, and among of them is the Q arm of the sheep chromosome OAR3. Because of this, the aim of this study was to investigate three microssatelite markers located in the Q arm of the OAR3 and its relationship with growth and nematode resistance traits in sheep from three genetic
groups: Santa Inês X Santa Inês, Dorper X Santa Inês e Suffolk X Santa Inês. The association analysis revealed two alleles of the BL4 marker with significative effect in the Santa Inês x Santa Inês genetic group and one allele form the same marker with significative effect in the genetic group Dorper x Santa Inês on birth weight. It was also observed one allele from the BL4 marker associated with slaughter weight in the
Santa Inês x Santa Inês genetic group. We did not observe any association between the markers studied and nematode resistance. Our results suggest that there are one or more genes in the studied region related with growth traits, but more studies are required to confirm the importance of this region in the control of these traits and to identificate the candidate genes. / A ovinocultura, apesar de apresentar um crescimento significativo nos últimos anos, ainda não pode ser considerada no Brasil como uma exploração competitiva. Isto se deve principalmente pela falta de organização e estruturação do setor produtivo. Dentre os problemas da ovinocultura nacional podemos citar as parasitoses gastrintestinais e a baixa produtividade das raças locais quando comparadas com raças importadas. O entendimento dos fatores genéticos que controlam as características produtivas pode auxiliar na melhoria dos rebanhos para uma característica importante sem significar prejuízo a outras características. Através de técnicas de biologia molecular e estatística pode-se identificar
genes/regiões cromossômicas responsáveis pelo controle dessas características e uma vez que essas regiões sejam identificadas e comprovadas como importantes, essa informação pode ser utilizada em programas de melhoramento genético através de seleção assistida por marcadores. Algumas regiões já foram identificadas como sendo candidatas a conter genes importantes tanto para resistência aos nematódeos gastrintestinais quanto para características de crescimento em ovinos e outras espécies de ruminantes. Dentre estas regiões está o braço Q do cromossomo OAR3 dos ovinos. Por isso, o objetivo deste trabalho foi estudar três marcadores microssatélites localizados no braço Q do cromossomo ovino OAR3 e suas relações com as características de crescimento (peso ao nascimento e peso ao abate) e resistência aos nematódeos gastrintestinais utilizando ovinos pertencentes a três grupos genéticos (Santa Inês X Santa Inês, Dorper X Santa Inês e Suffolk X Santa Inês). A análise de associação revelou a presença de dois alelos do marcador BL4 com efeito significativo no grupo genético Santa Inês x Santa Inês e um alelo do mesmo marcador com efeito significativo no grupo genético Dorper x Santa Inês para peso ao nascimento. Também foi observado efeito de um alelo do marcador BL4 com efeito significativo no grupo genético Santa Inês x Santa Inês para peso ao abate. Não foi observado efeito significativo de nenhum marcador na característica de resistência aos nematódeos gastrintestinais. Os resultados deste trabalho sugerem a presença de um ou mais genes na região estudada para características de crescimento, porém mais estudos são necessários para confirmar a real importância desta região no controle destas características bem como a identificação de possíveis genes candidatos.
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Estudos das proteínas ligantes à DCRA e DSCR1 (envolvidas com a síndrome de Down) utilizando a metodologia do duplo-híbrido.Silveira, Henrique César Santejo 24 January 2003 (has links)
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Previous issue date: 2003-01-24 / The genes DCRA and DSCR1 are located in the Down Syndrome Critical Region , a specific portion of human chromosome 21 responsible for the main traits of the disease. In the present work we have used the two-hybrid system as an approach to find proteins that interact with DCRA and DSCR1. This method is based on the properties of the yeast GAL4 protein, which
consists of separable domains responsible for DNA-binding and transcriptional activation.
The open reading frames of DCRA and DSCR1 were cloned in frame with the GAL4 DNA-binding domain. These constructions were used to analyse
protein interactions using a human foetal brain cDNA library, cloned in frame with the GAL4 transcriptional activation domain. No DCRA protein partners were found in any of the screenings performed; nevertheless, the analysis allowed the detection of several false
positive clones. In the analysis of DSCR1 we identified two proteins, UXT (ubiquitously
expressed transcript) and APLP1 (amyloid precursor-like protein 1). These results may help elucidate a new function for DSCR1 in the nucleus, probably related gene expresion. / Os genes DCRA e DSCR1 estão localizados no cromossomo 21 mais especificamente na Região Crítica da Síndrome de Down que, em triplicata é
responsável por alguns fenótipos da Síndrome. Neste projeto, visando encontrar proteínas que interagem com as proteínas DCRA e DSCR1, foi
empregado o método do Duplo- Híbrido que utiliza as propriedades da proteína GAL 4 de levedura Saccharomyces Cerevisiae. Com esta finalidade fez-se a sub-clonagem das ORFs DCRA e DSCR1
em plasmídeos que contém um domínio de ligação ao DNA da proteína GAL 4. Estas construções foram utilizadas para analisar possíveis interações proteícas utilizando uma biblioteca de cérebro fetal construída em um plasmídeo em fase com o domínio de ativação da transcrição da proteína GAL 4.
Nas análises com a proteína DCRA não foi possível confirmar nenhuma interação, porém possibilitou o estabelecimento de vários falso positivos dentro
da técnica. Por outro lado, identificação de novos ligantes a proteína DSCR1, que são as proteínas UXT e APLP1, revela um novo papel da DSCR1 dentro da célula, provavelmente relacionado à regulação gênica.
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Caracterização cromossômica do cupuaçu Theobroma grandiflorum (Willd. ex Spreng.) Schum. (Sterculiaceae) cultivado na Amazônia.Santos, Otávia Cunha 05 December 2002 (has links)
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Previous issue date: 2002-12-05 / Não consta.
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Estudos transcricionais em leucócitos de portador da síndrome de Down, através da técnica de análise serial da expressão gênica (SAGE).Malagó Junior, Wilson 22 January 2004 (has links)
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Previous issue date: 2004-01-22 / Universidade Federal de Minas Gerais / A síndrome de Down (SD) é a anomalia genética mais freqüente em
humanos e apresenta características como retardo mental, malformações
cardíacas, defeitos do sistema imunológico, risco aumentado de desenvolvimento
de leucemia e doença de Alzheimer, entre outras. Seus fenótipos são causados
pela trissomia total ou parcial do cromossomo 21 (CH21) e provavelmente se
originam devido a um desequilíbrio dos produtos gênicos deste cromossomo.
Inserido em um contexto de Genômica Funcional , o presente trabalho analisou o
perfil de expressão gênica de leucócitos de portador da SD na busca de
informações sobre o provável padrão molecular anômalo do transcriptoma do
paciente. Para tanto, utilizou-se a técnica de Análise Serial da Expressão Gênica
(SAGE). Foram listadas e analisadas diferenças entre os transcriptomas de
leucócitos de indivíduos normais e de portador de SD. Verificou-se que a condição
de SD comparada a não portadores apresenta baixa expressão relativa de
transcritos envolvidos com o sistema imune e o metabolismo, além de transcritos
ribossomais. Alguns transcritos diferencialmente expressos foram selecionados
como possíveis candidatos ao envolvimento com a SD no contexto celular de
leucócitos. Eles serviram também para validar os dados da SAGE. Assim, foi
realizado o primeiro estudo de análise de expressão gênica em larga escala
envolvendo transcriptoma de portadores de SD e utilizando a SAGE. Com isto foi
disponibilizado um conjunto de dados importantes para estudos futuros que visem
esclarecer a patogênese da SD.
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Estudos moleculares da Selenocisteína Sintase (SELA) de Escherichia coli.Cassago, Alexandre 05 May 2005 (has links)
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Previous issue date: 2005-05-05 / Financiadora de Estudos e Projetos / The study of translation processes attracts the interest of a wide range of
research groups due to its main role in general cellular metabolism. In
particular, the investigation of new amino acid residues, such as selenocysteine
and pyrrolysin, which result in an expansion of the genetic code from the
traditional 20 residues to a total of 22 residues up to the current time. The
amino acid, selenocysteine represents the main biological form of the selenium
element and its synthesis and co-translational incorporation into selenoproteins
are due to an in-frame UGA stop codon using complex molecular machinery.
On Escherichia coli, the main proteins involved in this pathway are:
Selenocysteine Synthase (SELA), Selenocysteine Elongation Factor (SELB or
EFSec), Selenophosphate Synthetase (SELD) and a tRNAsec
uca specific for this
pathway named Selenocysteine Insertion tRNA (SELC).
The SELA protein, the subject of this study, was firstly purified by
Forchhammer in 1991 and the sole structural analysis realized to this day was
developed by Engelhardt in 1992, using the Scanning Transmission Electron
Microscope (STEM) technique. With a monomer of approximately 50kDa, SELA
assumes an homodecamerical spatial configuration, each dimmer capable of
binding to a tRNAsec
uca with the serine amino acid which will be converted in
selenocysteine, in a reaction dependant of the enzymatic cofactor piridoxal
5 fosfato.
On this work it was possible to develop a new purification protocol for the
SELA protein, considerably reducing the steps and consequently the time
involved for obtaining purified protein. The process also yielded better protein
production when compared to literature, from 1mg/ml starting with 10 liters to
approximately 4.5mg/ml starting with 3 liters of bacterial medium.
As for the structural experiments, it was possible to predict by Dynamic
Light Scattering (DLS) the molecular mass as about 442kDa, Circular Dichroism
(CD) predicted the secondary structure as mainly composed by α-helices and
Small Angle X-ray Scattering (SAXS) showed the global structure of SELA with
a maximum diameter of 185Å, a molecular mass of about 527kDa and a radius
of gyration of 67.3 Å / O estudo de processos de tradução atrai o interesse de diversos grupos
de pesquisa pelo seu papel central no metabolismo geral da célula. Em
particular o estudo da via de síntese de novos aminoácidos, como o
selenocisteína e o pirrolisina, que resultam na expansão do código genético
dos tradicionais 20 aminoácidos para atualmente um total de 22 aminoácidos.
O aminoácido selenocisteína representa a principal forma biológica do
elemento selênio, sendo sua síntese e sua incorporação co-traducional em
selenoproteínas uma resposta a um códon de terminação UGA em fase de
leitura através de uma complexa maquinaria molecular.
Em Escherichia coli as principais proteínas envolvidas nessa via são:
Selenocisteína Sintase (SELA), Fator de Elongação de Selenocisteína (SELB
ou EFSec), Selenofosfato Sintetase (SELD) além de um tRNAsec próprio dessa
via denominado tRNA de Inserção de Selenocisteína (SELC).
A proteína SELA alvo de estudo deste trabalho, foi primeiramente
purificada por Forchhammer em 1991 e o único trabalho estrutural até agora
realizado foi desenvolvido por Engelhardt em 1992, a partir da técnica de
escaneamento por microscopia eletrônica de Transmissão (STEM). Possuindo
um monômero de aproximadamente 50kDa a proteína SELA assume uma
configuração espacial homodecamérica, em que cada dímero é capaz de ligarse
a um tRNAsec portando o aminoácido serina que será convertido em
selenocisteína, numa reação dependente do cofator enzimático piridoxal
5 fosfato.
Nesse trabalho foi possível o desenvolvimento de um novo protocolo de
purificação para a proteína SELA, reduzindo consideravelmente os passos e
conseqüente tempo na obtenção da proteína purificada. Também aumentando
os rendimentos obtidos pela literatura, de 1mg/mL a partir de 10 litros, para
aproximadamente 4,5mg/mL a partir de 3 litros de cultura bacteriana.
Quanto aos experimentos estruturais foi possível a partir de
Espalhamento Dinâmico de Luz (DLS) a predição da massa molecular em
aproximadamente 442kDa, por Dicroísmo Circular (CD) a predição das
estruturas secundárias como predominantemente constituída por hélices-α e
experimentos de Espalhamento de raio X a Baixo Ângulo (SAXS), a
determinação da estrutura global da proteína SELA com um diâmetro máximo
de 185Å, sua massa molecular em aproximadamente 527kDa e um raio de giro
de 67,3Å.
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Polimorfismos de genes associados à resposta imune humoral em indivíduos naturalmente infectados pelo Plasmodium vivax no Estado do ParáCassiano, Gustavo Capatti [UNESP] 27 February 2014 (has links) (PDF)
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000812646.pdf: 3278478 bytes, checksum: eebfd378cb8c54ce9d512fd14c333c5e (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A malária é uma das principais causas de morbidade e mortalidade nas áreas tropicais e subtropicais do mundo. O desenvolvimento de uma resposta imune eficaz é capaz de reduzir a mortalidade e os sintomas clínicos da doença. No entanto, este é um processo complexo, e um dos objetivos dos imunologistas é entender as razões pelas quais os indivíduos diferem em suas respostas imunes contra o parasito. O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência de polimorfismos em genes coestimulatórios do sistema imune na resposta imune humoral contra proteínas de estágio sanguíneo do Plasmodium vivax, principal espécie causadora de malária no Brasil. Para tanto, nós genotipamos, pelo método de PCR-RFLP, nove SNPs em sete genes (CD28, CTLA4, ICOS, CD86, CD40, CD40L e BLYS). A amostra foi constituída por 227 indivíduos infectados com P. vivax no município de Goianésia do Pará, no Estado do Pará. As respostas de anticorpos IgG específicos contra as proteínas N- (ICB2-5) e C-terminal (MSP-119) da MSP-1, da DBP e da AMA-1 do P. vivax foram determinadas por ELISA. IgM e as subclasses de IgG contra a ICB2-5 também foram avaliadas. Para estudar os polimorfismos dos genes coestimulatórios, nós primeiramente investigamos o impacto da estratificação da população na distribuição dos polimorfismos com o auxilio de marcadores informativos de ancestralidade e demonstramos que a frequência dos SNPs ICOS +1564T>C, CD40L -726T>C e CD86 +1057G>A varia de acordo com a ancestralidade. Polimorfismos em genes coestimulatórios foram associados com a resposta de anticorpos contra proteínas do estágio sanguíneo do P. vivax, mais especificamente contra a DBP, e as porções N- e C-terminal da MSP-1. Além disso, haplótipos formados pelos genes CD28, CTLA4 e ICOS foram associados com a resposta de anticorpos IgG4 contra a região N-terminal da MSP-1. Este é o primeiro estudo de associação genética envolvendo polimorfismos em genes ... / Malaria is one of the main causes of morbidity and mortality in the tropics and subtropics areas of the world. Although the immunity is only partial, it is important in reducing the amount of illness and death caused by malaria. However, the immunity against malaria is complex, and one of the main goals of vaccine developers is to understand why people differ in their immune response to the parasite. The present research aims to investigate the genetic mechanisms related to humoral immune response against P. vivax blood stages antigens, predominant malaria species in Brazil. Nine single nucleotide polymorphisms (SNPs) in 7 genes (CD28, CTLA4, ICOS, CD86, CD40, CD40L e BLYS) were determined by PCR-RFLP. A total of unrelated 227 individuals infected with P. vivax from the Goianésia do Pará, Pará state, participated in this study. Level and prevalence of IgG antibodies against N-terminal (ICB2-5) and C-terminal (MSP-119) regions of MSP-1, DBP and AMA-1 of P. vivax were measured by ELISA. First, we evaluate the influence of genomic ancestry on distributions of co-stimulatory genes polymorphisms in an admixed Brazilian population using ancestry informative markers. ICOS, CD40L and CD86 polymorphisms were associated with genomic ancestry. There were significant association between CD28 -372G>A, ICOS +1564T>C, and CD40L -726T>C SNPs with antibodies anti-DBP prevalence. Moreover, CD40 -1C>T and CD86 +1057G>A SNPs were associated with antibody levels anti-PvMSP-119. The CD28 -372G>A and CD40 -1C>T SNPs were associated with IgM prevalence against ICB2-5. Haplotypes formed by polymorphisms in CD28, CTLA4, and ICOS genes were associated with IgG4 antibodies against ICB2-5. This is the first study to associate polymorphisms in costimulatory genes with humoral immune response against P. vivax. These data may add important information for understanding the immunological aspects involved in vivax malaria
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Sistemática, evolução e biologia reprodutiva de Utricularia com ênfase para Utricularia amethystina Salzm. Ex A.St.-Hil. & Girard (Lentibulariaceae)Menezes, Cristine Gobbo [UNESP] 06 March 2015 (has links) (PDF)
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000829682.pdf: 2233866 bytes, checksum: 6e568d064401ca32d3b1185887d5f8c4 (MD5) / Utricularia L. é um gênero cosmopolita, ausente apenas nos desertos e regiões polares, rico em espécies e altamente polimórfico em hábitos, morfologia polínica, seminal e das armadilhas. Muitas espécies do gênero possuem genomas miniaturizados, resultado de uma drástica redução de regiões não-codificadoras, dentre outras características moleculares peculiares. Utricularia amethystina é descrita como uma das mais polimórficas espécies do gênero, possui um histórico taxonômico complexo (mais de 30 sinonímias) e distribuição ampla entre as Américas. Seu polimorfismo se reflete no tamanho da planta, tamanho e forma da corola, e também na pigmentação floral - U. amethystina pode apresentar flores púrpuras (em diferentes tonalidades), amarelas e brancas - dentre outras características. O polimorfismo da pigmentação floral pode afetar a interação com o polinizador e o fluxo gênico entre os morfotipos, sendo por este motivo alvo de nosso interesse. Exploramos se o polimorfismo em caracteres seminais estaria relacionado aos morfotipos florais e buscamos características úteis para a taxonomia U. amethystina e espécies próximas. Também descrevemos as estratégias reprodutivas de Utricularia, com ênfase nos polinizadores e estratégia de polinização de U. amethystina. Além disso, investigamos o fluxo gênico entre os morfotipos florais utilizando diferentes regiões do DNA cloroplastidial previamente reportados como ―barcodes‖. E exploramos a evolução das transições de cor de flores na família Lentibulariaceae e dos genes relacionados à via de síntese das antocianinas, a principal classe de pigmentos presentes em flores e frutos. Identificamos caracteres seminais úteis para a taxonomia de Utricularia e observamos alto polimorfismo intraespecífico em U. amethystina. Utricularia amethystina, é na verdade um complexo de espécies, dentre as quais é possível encontrar fluxo gênico entre morfotipos ... / Utricularia L. is a cosmopolitan genus from Lentibulariaceae and the richest genus in species among the carnivorous plants. Its species are highly polymorphic in many traits such as habit, pollen, seed and trap morphology. Many species has a compact genome resulted from the deletion of non-coding regions, and other peculiar molecular features. Utricularia amethystina is described as one of the most polymorphic species in the genus, it has a complex taxonomic history and is found across the American continents. Its polymorphism is reflected on plant height, corolla's size and shape, and floral pigmentation - U. amethystina might show many shades of purple, yellow and white flowers. However, the most remarkable trait is the polymorphism on pigmentation of flowers, because it might undermine the pollinator attraction, and by this way interrupt the gene flow among its morphotypes. With this in mind, we have surveyed the seed traits, looking for characters useful for taxonomic purposes for U. amethystina and related species. The reproductive strategies found on the genus are also described, focusing on U. amethystina and describing its pollinator. We also have investigated the gene flow among the U. amethystina morphotypes based on barcodes regions from cpDNA. Besides this, were evaluated the evolution of genes related with the transitions on pigmentation of flowers of the Lentibulariaceae. We identified useful seed characters for the genus' taxonomy. U. amethystina is a complex with distinct lineages related one each other with high support from molecular survey with cpDNA, from which only two populations from different floral phenotypes (purple and white) were clustered in all analyses. Some lineages also showed evidences for positive selection on matK gene. The pigmentation evolution showed the expected pattern with purple flowers as the ancestral state from which the transitions occurred. We also observed that the transitions are ...
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