Orientador: Valdemiro Carlos Sgarbieri / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-17T02:46:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jacobucci_HelaineBeatriz_D.pdf: 1129830 bytes, checksum: 37cb3d4735acb6b02966f93620559d37 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Com o propósito de melhor harmonizar os vários aspectos pesquisados, a tese está apresentada em quatro capítulos. No primeiro capítulo se fez um apanhado geral dos aspectos químicos, nutricionais e funcionais (tanto tecnológicos como os fisiológicos) das fontes protéicas estudadas no decorrer do trabalho e descritos na literatura. No segundo capítulo estudou-se o poder imunoestimulante de uma caseína comercial (CC), da caseína isolada na forma de micelas íntegras (CM), de um isolado de proteína de soja comercial (IPS), um concentrado de globulinas (BSG) e um concentrado de albumina (BSA), isolados do soro de sangue bovino, um isolado protéico de soro de leite bovino (NZ), importado da Nova Zelândia, um isolado de soro de leite bovino produzido em planta piloto, em Rennes (Ren), França, e um concentrado de proteínas de soro de leite bovino (CSD), produzido em planta piloto (Tecnolat), ITAL, Campinas. A imunoestimulação foi medida no baço pelo processo de contagem de células formadoras de placa (CFP) após imunização de camundongos da linhagem A/Uni, com 5 x 106 hemáceas de carneiro. A formação de placas (reação antígeno-anticorpo) foi medida por contagem de células formadoras de placa com auxílio de um microscópio de fase e de uma lupa. O número de CFP, que representa a intensidade da reação antígeno-anticorpo foi expresso para o órgão todo (CFP/baço x 10-3). Foram estudados neste capítulo o poder imunoestimulante sobre as células de baço das várias proteínas, as influências da concentração da proteína na dieta, a combinação do CSD com as outras preparações protéicas e a influência de diferentes tratamentos (processamentos) sobre a imunoestimulação. Concluiu-se que o concentrado de soro de leite bovino produzido no ITAL, Campinas, foi o que apresentou maior poder imunoestimulante e que a imunoestimulação, para esse preparado, manteve-se na faixa de concentração de 7,5 a 20g de proteína/100g de dieta. Todas as fontes de proteína estudadas quando associadas (misturadas) ao CSD na dieta, influíram negativamente no poder imunoestimulante do CSD, exceto a BSA. Tratamentos térmicos acima de 50°C, exceto a pasteurização (72°C, 15 seg.) e a irradiação acima de 3KG influíram negativamente sobre o poder imunoestimulatório do CSD. A desidratação do concentrado em ¿Spray dryer¿ não afetou significativamente o poder de imunoestimulação do CSD. No terceiro capítulo procurou-se estudar as influências da composição em aminoácidos dos materiais protéicos, CSD, caseína, hidrolisado enzimático da caseína e, conseqüentemente, do estado de estruturação dessas proteínas, no consumo de dieta, ganho de peso corporal, proteínas sanguíneas e estímulo à síntese de glutationa, no fígado. No quarto capítulo realizou-se uma avaliação nutricional e imunológica de quatro dietas de composição básica semelhante, variando-se apenas o componente protéico. As dietas estudadas foram, uma fórmula comercial tomada como referência (FC), uma dieta à base de caseína micelar (CM), outra à base de CSD e finalmente uma mistura 50:50 CSD/CM. Para a avaliação do estímulo imunológico utilizaram-se camundongos da linhagem A/Uni com 6-8 semanas de idade e a técnica de imunoestimulação com injeção de hemáceas de carneiro (5 x 106 células), seguido da determinação do número de células formadoras de placa (CFP), contadas em suspensão de células de baço de animais, cinco dias após imunização. As CFP representam reações antígenoanticorpo, anticorpos que representam a imunoglobulina M (IgM), reação imune primária em resposta ao imunógeno das hemáceas de carneiro. Os resultados da imunoestimulação foram mais baixos para a dieta CM, mais elevados para as dietas CSD e FC e intermediários para CM/CSD (50:50). Estatisticamente não houve diferença entre as dietas CSD e FC nem entre CSD/CM e FC (p > 0,05), porém houve diferença estatística em favor da dieta CSD em relação à CM e CSD/CM (p < 0,05). Em relação ao poder de estímulo à glutationa, a dieta CSD revelou maior concentração hepática (8,02 ??0,59 ?moles/g de tecido). Não houve diferença estatística para glutationa entre FC e CSD/CM (6,55 ??0,96 ?moles/g de tecido) de glutationa hepática. Demonstrou-se uma correlação altamente positiva (CPF = 3,3395 + 9,0913 x GSH, r = 0,94) entre os estímulos à síntese de IgM (baço) e de GSH (fígado). Os parâmetros nutricionais consumo de dieta, ganho de peso, quociente de eficiência alimentar (QEA), digestibilidade aparente da proteína (Dap%), valor biológico aparente (VBap%), balanço de nitrogênio (BN) e quociente de eficiência protéica (PER), foram todos bastante elevados e não diferiram entre os tratamentos (p > 0,05). Tomados no todo, os resultados confirmam que, elevados valores nutricionais podem não representar elevadas propriedades funcionais-fisiológicas, avaliados nesta pesquisa como poder imunomodulador e estímulo à síntese de glutationa / Abstract: With the purpose of better harmonize the various aspects studied in this thesis, it was organized in four chapters. The first chapter consisted of an overview of the chemical nutritional and functional (technologic and physiologic) properties of the protein sources studied in this thesis, utilizing data from recent literature. The main objective of the second chapter was to comparatively demonstrate the immunestimulating power of various protein systems of food origen, including: a commercial casein preparation (CC), a casein isolated in pilot plant in the form of whole micelles (CM), a commercial soy protein isolate (SPI), a bovine serum albumin (BSA) and a bovine serum globulin (BSG) isolated in laboratory from bovine serum, a bovine whey protein isolate (NZ) imported from New Zealand, a bovine whey protein isolate produced in Pilot plant in Rennes (Ren), Rennes France, a bovine whey protein concentrate (WPC) produced in Pilot Plant, ITAL, Campinas. The immunestimulation was measured in spleen cells by counting Plaque Forming Cells (PFC) using A/Uni mice after immunization with sheep red blood cells (SRBC = 5 x 106 cells). The Plaque (antigen-antibody reaction) was quantified in spleen cell suspensions by using a phase microscope and a lup. The number of plaque forming cells (PFC) was considered for the whole spleen and expressed as (PFC/spleen x 10-3). The immunestimulating power on the spleen cells was studied for various protein sources. The influence of dietary protein concentration, the combination of WPC with other protein preparations and the influence of various treatments on the protein was also studied. It was conclude that the whey protein concentrate produced in ITAL (WPC) presented the highest immunestimulating power, that the immunestimulation for this preparation remained constant in the range of concentration 7.5 to 20g protein/100g diet, that all the protein sources studied, when mixed with WPC in the diet, showed a negative influence on the immunestimulating power of WPC alone. Heat treatment (>50°C), except pasteurization (72°C, 15 seg), and gamma-irradiation above 3KG, had a negative influence on the immunestimulation by WPC. The dehydration of the WPC by spray drying did not significantly affect the immunestimulation by WPC. The third chapter aimed at studying the influence of amino acid composition (WPC, CC, and CC-hidrolysates) and, consequently of the structural state of the casein molecules, in the diet consumption, body weight gain, blood protein profile, and on liver glutathione synthesis stimulation. The fourth chapter consists of the nutritional and immunological evaluation of four protein diets (CF, WPC, WPC:CM (50:50) and CM alone) in an otherwise similar composition. For the immunological property, A/Uni mice with 6-8 weeks of age, immunestimulated with sheep red blood cells (SRBC), 5 x 106 cells, following determination of the number of plaque forming cells (PFC) 5 days after immunization was used. PFC number indicates the antigen-antibody reaction between the SRBC-antigen and immunoglobulin M formed by the spleen cells. PFC was lowest for CM protein diet, highest for the WPC and CF diets and intermediate for CM/WPC (50:50) diet. No statistic difference was measured between WPC and CF or between WPC/CM and CF (p > 0.05), however there was statistic difference (p < 0.05) in favour of WPC, compared with CM and WPC/CM (50:50) (p < 0.05). Regarding glutathione stimulation, the WPC diet showed the highest activity (8.02 ± 0.59 µmoles GSH/g tissue). No statistic difference was shown between the CF and WPC/CM diets (6.55 ± 0.96 µmoles/g) for liver glutathione. A very strong positive correlation (CPF = 3.3395 + 9.0913 x GSH, r = 0.94) between spleen CPF counting (spleen IgM) and liver GSH, was demonstrated for the WPC protein diet. The nutritional parameters such as diet consumption body weight gain, diet efficiency ratio (QEA), apparent protein digestibility (Dap%), protein apparent biological value (BVap%), nitrogen balance (NB), and protein efficiency ratio (PER), they were all high but did not show statistic difference among them (p > 0.05). Considering all data this work confirm that protein nutritive value may not represent high functional properties, in this research applied to the immunestimulation and GSH biosynthesis / Doutorado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Doutor em Alimentos e Nutrição

Orientadores: Lauro Tatsuo Kubota, Nelci Fenalti Hoehr / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-05T05:16:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marzal_PercyCalvo_D.pdf: 1469754 bytes, checksum: 089db3068a7acb221eecbb8dd258a085 (MD5) Previous issue date: 2005 / Doutorado / Quimica Analitica / Doutor em Ciências

Orientadores: Lair Zambon, Ilma Aparecida Paschoal / Tese (doutorado) - Universidade EStadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-13T20:51:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Beneti_Ricardo_D.pdf: 4405453 bytes, checksum: 2accda2f9b1e24bbcc45d24dbf9886bf (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Objetivos: O desenvolvimento da DPOC e a alteração da função pulmonar ocorrem em apenas 15% dos fumantes regulares. Este fato sugere que fatores genéticos contribuem para o desenvolvimento desta doença. As Glutationa S-Transferase (GST) são uma família de enzimas que protegem contra o estresse oxidativo e sua agressão ao epitélio pulmonar. O propósito deste estudo é determinar a influência das GST no desenvolvimento da DPOC em uma população brasileira. Método: 151 pacientes com DPOC foram incluídos em dois centros de referência de Pneumologia no Brasil, Estado de São Paulo. Amostras de sangue periférico foram coletadas para realização da PCR e determinação dos genótipos da GSTP1, GSTT1 e GSTM1. 178 doadores de sangue não-tabagistas e 168 pacientes com carcinoma pulmonar, tabagistas, constituíram os grupos controle. A análise estatística incluiu a regressão logística multivariada para exclusão de fatores de confusão. Resultados: Todos os pacientes eram portadores doença moderada, grave ou muito grave, conforme as diretrizes da Iniciativa Global para a DPOC (GOLD). Não houve significância na análise da GSTP1 e GSTM1 para o risco de DPOC. No entanto, obteve-se uma alta prevalência da nulidade da GSTT1 no grupo portador de DPOC, com uma razão das chances de 3,3 em relação ao grupo-controle de doadores de sangue (IC95%: 1.93-5.67) e 4,2 em relação ao grupo-controle de portadores de carcinoma (IC95%: 2.33-5.57). A nulidade da GSTT1 esteve ainda correlacionada com estádios mais graves da DPOC (p=0,0484). Conclusões: Concluímos que a ocorrência da nulidade da GSTT1 está altamente relacionada com o risco de DPOC na população brasileira estudada, e com a gravidade da obstrução de fluxo aéreo nestes pacientes / Abstract: Background: The development of chronic obstructive pulmonary disease (COPD) and lung function decline only occur in 15% of heavy smokers. This fact suggests a genetic predisposition to this pathology. The Glutatione S-Transferase (GST) are a family of enzymes that protect against oxidative stress detoxifying many substances of tobacco smoke. The purpose of this study is to determine the influence of the GST in the development of COPD in a Brazilian population. Methods: 151 patients with COPD were enrolled at two centers of Lung Health in São Paulo State, Brazil. Blood samples were collected to perform PCR determination of GSTP1, GSTT1 and GSTM1 genotypes. 178 blood donors (nonsmokers) and 168 lung cancer patients (smokers) constituted the control groups. Multiple logistic regression was used to adjust for confounding factors. Results: All COPD patients had moderate, severe or very severe disease, according to the Global Initiative for Obstructive Lung Disease (GOLD). There was no difference in the frequency of GSTP1 and GSTM1 polymorphisms between COPD and control cases. However, there was a high prevalence of null GSTT1 in the COPD group, with an adjusted odds ratio (adjORs) of 3.3 when compared to the blood donor group (95%CI: 1.93-5.67) and 4.2 when compared to the lung cancer group (95%CI: 2.33-5.57). The GSTT1 null genotype was also correlated with more severe stages of COPD (p=0.0484). Conclusions: We conclude that GSTT1 is associated with higher risk of COPD development in this Brazilian population, and also with the severity of airflow obstruction seen in these patients / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Celio Kenji Miyasaka / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-08T03:26:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cavalheiro_LauraAndrade_M.pdf: 809451 bytes, checksum: 708c6f3b4585edd72f8cc635a5c73faf (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: As proteínas presentes no soro de leite têm demonstrado um grande número de efeitos benéficos, como atividade anticarcinogênicas, efeito antiulcerogênica e função imunoestimulatória. Esta propriedade imunoestimulatória está sendo relacionada à possível manipulação da glutationa intracelular. Os linfócitos são importantes células do sistema de defesa celular e humoral. Este trabalho teve como objetivo estudar os efeitos da suplementação com soro de leite sobre os linfócitos de ratos Wistar. Cento e vinte animais foram divididos em 4 grupos (n = 30), sendo um grupo controle (C) e os demais suplementados com caseinato de cálcio (K), isolado protéico de soro de leite (I) e hidrolisado protéico de soro de leite (H). Os ratos foram mantidos em gaiolas individuais com água e ração à vontade. Aos 18 dias de suplementação amostras de sangue foram recolhidas para realização de hemograma. Dez dias depois, os animais foram sacrificados e os linfócitos mesentéricos retirados, contados em câmara de Neubauer e incubados (5x107células/ml) em presença de peróxido de hidrogênio. A viabilidade celular foi avaliada antes e depois da incubação. Também foram avaliadas as atividades enzimáticas da glutationa redutase (GSH-Red) e da glutationa peroxidase (GSH-Px). Apesar de um maior consumo de ração, os animais do grupo C não foram os que apresentaram maior ganho de peso. Estatisticamente, seu ganho de peso foi maior que o do grupo K, menor que do grupo I e não diferiu significantemente do grupo H. Os animais do grupo H apresentaram número de linfócitos 134% maior quando comparado aos grupos I e K e 158% mais elevado em relação ao grupo C. Na análise de sangue o número de linfócitos (x10³ celulas/mL) dos animais dos grupos H e I foram estatisticamente maiores que os demais grupos. Os linfócitos dos animais do grupo H tiveram a sua viabilidade diminuída apenas 4,08% após incubação com peróxido de hidrogênio enquanto que no grupo C a diminuição de viabilidade foi de 28,9%. A enzima GSH-Red dos animais do grupo H (38,22 pmols . min-1. mg proteina-1) se mostrou maior que dos animais do grupo C (17,64 pmols . min-1. mg proteina-1). Não houve diferenças entre os grupos na determinação de GSH-Px. Assim, verificou-se a qualidade nutricional atribuída ao soro de leite e que este pode interferir no metabolismo de linfócitos / Abstract: The whey proteins have demonstrated some beneficial effects, as anticarcinogenic activity, antiulcerogenic effect and immunostimulanting function. These immunostimulanting properties have being related to the possible manipulation of intracellular glutathione. The lymphocytes are important cells of the cellular and humoral defense system. The aim of this work was to study the effect of the whey proteins supplementation on lymphocytes of Wistar rats. One hundred and twenty animals were randomly distributed in 4 groups (n = 30): one control group (C) while the others were supplemented with calcium caseinate (K), whey protein isolated (I) and whey protein hydrolysate (H). The rats were maintained in individual cages with water and ration ad libitum. After 18 days of supplementation, blood samples were collected for hemogram accomplishment. Ten days later, the animals were killed and the mesenteric lymphocytes were counted in Neubauer¿s camara and incubated (5x107células/ml) in the presence of hydrogen peroxide. The cellular viability was evaluated before and after the incubation. The enzymatic activities of glutathione reductase (GSH-Red) and of glutathione peroxidase (GSH-Px) were also evaluated. Animals of group C had the highest feed consumption, although its body weight gain was the same as group H, greater than group K and lesser than group I. The group H animals have presented number of lymphocytes 134% greater when compared with groups I and K and 158% more than group C animals. The blood analysis have shown that the number of lymphocytes (x103 cells/mL) of group H animals were bigger than the others groups / Mestrado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Mestre em Alimentos e Nutrição

Orientador: Maria Salete Costa Gurgel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-09T01:46:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CardosoFilho_Cassio_M.pdf: 1571004 bytes, checksum: 252da74a9dd5114a82f05ed36b7face1 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Introdução: As deleções dos genes GSTM1 e GSTT1 têm sido associadas ao aumento do risco de várias neoplasias, porém não há consenso sobre suas influências no câncer de mama. Objetivo: Avaliar a ocorrência das deleções homozigóticas dos GSTM1 e GSTT1 em mulheres com câncer de mama esporádico (CME) ¿ casos - e em mulheres sem câncer ¿ controles - e comparar as características clínicas e biológicas dos CME entre mulheres portadoras e não-portadoras das referidas deleções. Casuística e Método: Foram avaliados 177 casos e 169 controles, com determinação das freqüências das referidas deleções pelo PCR. Estas foram correlacionadas às características clínicas e biológicas através do cálculo de odds ratio com seus respectivos intervalos de confiança de 95%. Resultados: Dos casos e controles, respectivamente, 46% e 45% não apresentaram qualquer deleção, 37% e 35% apenas do GSTM1, 11% e 10% apenas do GSTT1, 6% e 9% apresentaram ambos os genes deletados. Observou-se freqüência menor da deleção do GSTM1 em mulheres pardas (p=0,1128), OR=0,48 (0,24 ¿ 0,98). O risco foi menor de ocorrência de tumores grau nuclear 3 em pacientes com deleção do GSTT1 (p=0,04), OR=0,37 (0,15 - 0,90). A deleção homozigótica de pelo menos um dos genes associou-se com mulheres que não amamentaram (p=0,0202), OR=0,41 (0,19 ¿ 0,88), e com a ausência de expressão dos receptores hormonais (p=0,0300), ORadj=2,25 (1,03 ¿ 4,90). Já a deleção de ambos os genes associou-se ao aumento de risco da ocorrência de tipos histológicos diferentes do carcinoma ductal invasivo clássico (p=0,0571), ORadj=12,09 (1,03 ¿ 142,03). Conclusões: mulheres com CME e antecedente de miscigenação com etnia negra tiveram menor freqüência da deleção do GSTM1, enquanto os tumores com grau de diferenciação nuclear mais favorável relacionaram-se à deleção do GSTT1. Já as pacientes com pelo menos um dos genes deletados apresentaram maior risco de tumores que não expressam receptores hormonais, e a deleção combinada de ambos os genes associou-se ao aumento de risco para tipo histológico não ductal clássico / Abstract: Introduction: The GSTM1 and GSTT1 gene deletions have been associated with an increased risk of various neoplasms, although there is a lack of consensus about their influence on breast cancer. Objective: To evaluate the occurrence of homozygous deletions of the GSTM1 and GSTT1 genes in women with sporadic breast cancer (SBC) ¿ cases ¿ and in women without cancer ¿ controls ¿ and compare the clinical and biological characteristics of SBC among women with and without the referred deletions. Case Study and Method: The study evaluated 177 cases and 169 controls, determining the frequency of the abovementioned deletions by PCR. These were correlated with the clinical and biological characteristics by calculating the odds ratios and their 95% confidence intervals. Results: Of the cases and controls, 46% and 45% did not present any deletion, 37% and 35% had only GSTM1 deletion, 11% and 10% had only GSTT1 deletion, 6% and 9% had both genes deleted, respectively. A lower frequency of GSTM1 deletion was observed in mulatto women (p=0.1128), OR=0.48 (0.24 ¿ 0.98). The risk of occurring nuclear grade 3 tumors was lower in patients with GSTT1 deletion (p=0.04), OR=0.37 (0.15 ¿ 0.90). Homozygous deletion of at least one gene was associated with women who had not breastfed (p=0.0202), OR=0.41 (0.19 ¿ 0.88), and with absence of hormone receptor expression (p=0.0300), ORadj=2.25 (1.03 ¿ 4.90). The deletion of both genes was associated with an increased risk of occurring histologic types different from classic invasive ductal carcinoma (p=0.0571), ORadj=12.09 (1.03 ¿ 142.03). Conclusions: women with SBC and a history of miscegination with the black race had a lower frequency of GSTM1 deletion, while tumors with a more favorable degree of nuclear differentiation were related to GSTT1 deletion. Patients with at least one gene deleted had a higher risk for tumors that did not express hormone receptors, and the combined deletion of both genes was associtated with a greater risk for the non-classic ductal histologic type / Mestrado / Tocoginecologia / Mestre em Tocoginecologia

Orientador: Jaime Amaya-Farfan / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-15T06:19:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_GiovanaErmeticedeAlmeida_D.pdf: 896103 bytes, checksum: 9bd11829f054f3e4de67f748821a4ab4 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A atividade física (AF) de resistência provoca diversas respostas fisiológicas, dentre elas a alteração dos padrões de células sangüíneas e atividade enzimática. Recursos alimentares são freqüentemente utilizados para aumentar o rendimento esportivo e minimizar os danos causados pelo exercício. O tipo de proteína e sua forma são determinantes dos efeitos que estas podem proporcionar. As proteínas do soro do leite (PSL) são fontes de aminoácidos indispensáveis, dentre eles, os de cadeia ramificada que estão envolvidos na sinalização da síntese protéica e no metabolismo energético, e os sulfurados que se destacam por serem precursores para a formação de glutationa. Este trabalho foi realizado com o objetivo de verificar os efeitos do consumo de dietas contendo proteínas do soro do leite, nas formas intacta e pré-hidrolisada, no desempenho, composição corporal e parâmetros bioquímicos e hematológicos de ratos submetidos à atividade física em esteira. Foram utilizados animais machos divididos em dois grupos de acordo com a prática (treinados) ou não (sedentários) de AF, sendo estes subdivididos em três grupos conforme o tipo de proteína (AIN-93M): caseína (controle), e PSL nas formas intactas ou pré-hidrolisadas como única fonte de proteínas, totalizando 6 grupos experimentais. Os ratos ativos correram cinco dias por semana, durante nove semanas consecutivas seguindo protocolo de treinamento com velocidade e tempo progressivos. O desempenho dos animais foi crescente ao longo do experimento em todos os grupos e a evolução de peso foi similar independentemente da dieta ou da prática de AF. Os resultados hematológicos e bioquímicos mostraram efeito redutor do treinamento sobre os parâmetros analisados sem interferência especifica da dieta, à exceção da concentração de glutationa total em eritrócitos que foi significativamente superior em animais sedentários que consumiram PSL intactas. A composição química da carcaça revelou um perfil lipídico reduzido em animais treinados em comparação aos sedentários, com significância estatística somente em relação aos grupos que receberam PSL, mostrando ser um efeito positivo e dependente da ação conjunta da dieta e da AF. Dados de peso dos órgãos apontam possível influência das PSL sobre o fígado e pâncreas, mas o peso e o comprimento dos fêmures não mostraram alteração nem pelo tipo de dieta nem pelo treinamento. Assim, concluiu-se que os resultados obtidos nesse estudo são, em sua maioria, decorrentes do efeito do treinamento, e que as PSL ao nível oferecido na dieta (12%), mesmo apresentando diferente forma físico-química, não causaram variações hematológicas e bioquímicas significativas quando avaliadas, respectivamente, após 24 horas da última sessão de treino e passadas 48 horas do teste de desempenho final. Ressalta-se, entretanto, o potencial antioxidante dessas proteínas pelo incremento da glutationa intracelular / Abstract: Endurance exercise leads to many physiological responses, as changes in the blood cells and enzymatic activity. Food resources are often used to improve the sport performance and diminish injuries caused by exercise. The type and form of protein are determinant of the effects that they can provide. Milk whey proteins (MWP) are sources of indispensable amino acids, among them the branched-chain amino acids are involved in protein synthesis signaling and energetic metabolism, and sulfur ones point out in order to be precursors for glutathione formation. This work was conducted with the objective of verifying the effects of consuming diets containing MWP, in intact or pre-hydrolyzed forms over performance, body composition, biochemical and hematological parameters in rats undergoing a treadmill exercise. Male animals, segregated into two groups according to the practice (trained) or not (sedentary) of exercise, were used. They were subsegregated into three groups regarding the type of protein in the diet (AIN-93M): casein (control), and intact or pre-hydrolyzed MWP as the only source of protein, for a total of 6 groups. Active rats run 5 d/wk, during nine consecutive weeks, following a progressive time and speed protocol. The performance of the animals increased for all groups along the experiment and weight evolution remained similar independent of the diet and exercise. Hematological and biochemical results showed that training had a diminishing effect over the analyzed parameters without specific interference of the diet, except for total glutathione concentration in erythrocytes that was significantly higher in the sedentary animals that consumed intact MWP. Carcass chemical composition revealed a decreased lipid profile in trained animals compared to sedentary, with statistical significance only related to the groups that received MWP showing a positive dependence from the combined action of diet and exercise. Analyses of organ weight data suggest a possible influence of MWP upon liver and pancreas, but weight and length of femurs did not show to be changed either by diet or exercise. Thus, it was concluded that outcomes obtained in this study are mostly due to training, and that MWP at the level offered in the diet (12%), even in different physical-chemical forms, did not cause significant hematological and biochemical variation when analyzed, respectively, 24 hours after the last training session and 48 hours from the final performance test. It should be noted, however, the antioxidant potential of these proteins by increased intracellular glutathione / Doutorado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Doutor em Alimentos e Nutrição

Orientador: Laura Sterian Ward / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-10T20:51:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bufalo_NatassiaElena_M.pdf: 3282180 bytes, checksum: 0aa23171bc5ca7c18ed18eb22b3a23d2 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Tanto a doença de Graves como o câncer da tiróide são doenças de etiologia multifatorial e envolvem uma interação entre meio ambiente e fatores genéticos de predisposição. O ábito e fumar é um fator de risco reconhecido para o desenvolvimento da doença de Graves, particularmente para a oftalmopatia de Graves. Ao contrário, estudos epidemiológicos têm freqüentemente demonstrado a redução no risco ao carcinoma diferenciado da tiróide entre tabagistas. A herança de polimorfismos de genes relacionados com a metabolização e com a detoxificação de xenobióticos, assim como a herança de genes relacionados com a vida e a morte celular, desempenham um importante papel na suscetibilidade a doenças. Os objetivos foram determinar a influência dos polimorfismos dos genes CYP1A1, GSTM1, GSTT1, GSTP1 e 72TP53 no risco para a doença de Graves e o papel do gene CYP1A1 na tumorigênese tiroidiana. Para avaliar o papel destes genes na doença de Graves foi estudado um total de 400 pacientes com doença de Graves, comparados com 574 indivíduos-controle. Para analisar o papel destes genes no câncer da tiróide foi estudado 248 pacientes com nódulos tiroidianos, comparados com 277 indivíduos-controle, todos pareados para sexo, idade e etnia. As análises genotípicas foram feitas em DNA extraído de sangue periférico, através de amplificação por PCR, seguido de restrição enzimática para os genes CYP1A1, GSTP1 e 72TP53 e PCR-duplex para os genes GSTM1 e GSTT1. Não se encontrou relação entre os genótipos de GSTM1 e GSTT1 e a suscetibilidade à doença de Graves. Contudo, as variantes de GSTP1 (p<0.0001), CYP1A1 m1 (p<0.0033) e Pro/ProTP53 (p<0.0035) foram mais freqüentes em pacientes com doença de Graves do que nos controles. A análise de regressão logística multivariada corrigida parasexo, idade e etnia indicou que o hábito de fumar e a herança das variantes dos genes GSTP1, CYP1A1 e Pro/ProTP53 são importantes fatores de risco para a doença de Graves. Em relação aos nódulos tiroidianos, o genótipo selvagem do gene CYP1A1 foi mais freqüente entre pacientes com carcinoma papilífero (74.26%) do que na população-controle (62.45%) (p= 0.0147), diminuindo o risco para o desenvolvimento deste câncer (OR=0.564; 95% IC= 0.357 - 0.894). A análise de regressão logística multivariada corrigida para sexo, idade e etnia mostrou uma correlação inversa entre o hábito de fumar e a herança do gene CYP1A1 e a suscetibilidade ao carcinoma papilífero. Conclui-se que os polimorfismos de GSTP1, CYP1A1 e TP53 podem estar associados à suscetibilidade relacionada com o tabagismo para a doença de Graves e que o genótipo de CYP1A1 pode estar associado à redução no risco para o carcinoma papilífero entre fumantes / Abstract: Graves's disease and differentiated thyroid cancer are multifactorial diseases with environmental and genetic interactions. Cigarette smoking is a well-recognized risk factor for Graves¿ disease and, particularly, for Graves¿ ophthalmopathy. Conversely, epidemiologic studies have consistently reported a reduced risk of differentiated thyroid cancer in tobacco consumers. Inheritance of germline polymorphisms genes related with metabolizing and detoxification of xenobioticos, besides genes involved in major DNA repair/apoptosis pathways, might have an important role in the susceptibility to these diseases. To assess the influence of the GST, CYP and TP53 gene polymorphisms in the risk of Graves' disease and the CYP1A1 role in thyroid tumorigenesis, we used a PCR strategy to genotype for GSTT1, GSTM1, GSTP1, CYP1A1 and codon 72 of TP53 a group of 400 Graves¿ disease patients compared to 574 control individuals with similar environmental exposure features and 248 patients with thyroid nodules and 277 controls with similar ethnic backgrounds. DNA was extracted from a blood sample and submitted to PCR-RFLP for CYP1A1, GSTP1 and 72TP53 genes and PCR-duplex GSTM1 and GSTT1 genes assays. GSTM1 and GSTT1 genotypes were equally distributed in Graves' disease and controls. However, GSTP1 variants (p<0.0001), CYP1A1 variants (p<0.0033), and Pro/ProTP53 (p<0.0035) appeared more frequently in Graves¿ disease than in controls. A multivariate analysis indicated that cigarette smoking and the inheritance of GSTP1 variants, CYP1A1 variants and Pro/ProTP53 were important risk factors of risk for Graves¿ disease. Among the thyroid nodules, the wild-type CYP1A1 m1 genotype was more frequent in papillary carcinomas patients (74.26%) than in the control population (62.45%) (p= 0.0147) indicating that the variants of these genes reduce the risk for this cancer (OR=0.564; 95% IC= 0.357 to 0.894). Multiple logistic regression analysis showed an inverse correlation between cigarette smoking and CYP1A1 germline inheritance and the susceptibility to papillary carcinomas. We concluded that GSTP1, CYP1A1 and TP53 germline polymorphisms may be associated with smoking-related Graves¿ disease susceptibility and CYP1A1 genotype might be associated to the reported reduced risk to papillary carcinomas among smokers / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Ciências Básicas

Orientador: Maria Salete Costa Gurgel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T12:25:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Franco_RicardoLaier_M.pdf: 1204778 bytes, checksum: 4a5d4c7eb9039f14fc0392b4e8d9abb5 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Introdução: A glutationa S-transferase (GST) é um sistema enzimático localizado no citosol celular e é responsável pela eliminação de toxinas. Estudos realizados in vitro mostraram que a presença deste sistema nas células do carcinoma de mama pode promover a eliminação do quimioterápico, levando assim à diminuição da eficácia desta modalidade terapêutica em mulheres com carcinoma de mama que expressam tal sistema enzimático em suas células. Objetivo: O presente estudo teve como objetivo avaliar a associação entre a expressão da enzima GST Pi em células tumorais e a sobrevida global e livre de doença em mulheres com carcinoma de mama submetidas a tratamento quimioterápico. Sujeitos e Métodos: Entre janeiro de 1995 e junho de 1997, 554 pacientes foram submetidas a tratamento cirúrgico para câncer de mama no CAISM-UNICAMP. Destas, 160 tinham entre 18 e 70 anos ao diagnóstico, doença não metastática, foram submetidas à quadrantectomia/mastectomia com margens livres e linfadenectomia axilar, seguida de quimioterapia adjuvante, e foram acompanhadas até agosto de 2006. Os blocos de parafina estavam disponíveis para 95 destas pacientes. Neles foi realizada a pesquisa da GST Pi através da reação de imuno-histoquímica e sua expressão foi correlacionada com os dados clínicos obtidos de seus respectivos prontuários. Resultados: Dos 95 casos, 36 (38%) foram positivos para a expressão da GST Pi e 59 (62%) negativos. A expressão da GST Pi nas células tumorais não mostrou associação com a idade ao diagnóstico, tipo histológico do tumor, estágio da doença e expressão de receptores de estrogênio e progesterona. Os cânceres de mama com positividade para a enzima GST Pi mostraram associação significativa com tumores de grau histológico I e negatividade para a expressão da proteína HER-2. Não se observou associação com a sobrevida livre de doença e sobrevida global, após seguimento médio de 10,68 anos. Conclusões: Os achados deste estudo indicam que pacientes com tumores positivos para a enzima GST Pi têm o mesmo prognóstico do que pacientes com tumores negativos para GST Pi após serem tratados com quimioterapia / Abstract: Introduction: The glutathione S-transferase is an enzymatic system located in the cytosol of the cells and it is responsible for the elimination of toxins. 'In vitro¿ studies showed that the presence of this enzymatic system in breast carcinoma cells can accelerate the elimination of the drug used in the chemotherapy. This would decrease the efficacy of this kind of treatment in women with GST Pi -positive breast cancer cells. Objectives: The scope of the present study was to evaluate the association between GST Pi-positive breast cancer and overall and disease free-survival in women with breast carcinoma submitted to chemotherapy. Methods: Between January, 1995 and July, 1997, 554 patients were undergone to breast cancer surgical treatment at CAISM-UNICAMP. Out of 554 patients, 160 were between 18 and 70 years old in the diagnosis, did not have metastatic disease, were submitted to quadrantectomy/mastectomy with free surgical margins and axillary dissection followed by adjuvant chemotherapy and had complete follow-up until August, 2006. The paraffin blocks were available for 95 of these patients. The immunohistochemical reactions were done and the GST Pi expression was correlated with the clinical data obtained from their respective medical records. Results: Of the 95 cases studied, 36 (38%) were positive for the GST Pi expression and 59 (62%) did not express the enzymatic system. The expression of GST Pi in breast cancer cells showed no relation with age, histological type, stage of disease and estrogen and progesterone receptor status. The GST Pi-positive breast cancers showed a significant relation with lower histological grade tumors and with negativity of the expression of HER-2. Also, the expression of GST Pi had no relation with overall and disease free survival after a median follow-up of 10.68 years. Conclusions: The findings of this study indicate that patients with GST Pi-positive tumors have the same prognosis as patients with GST Pi-negative tumors after chemotherapy / Mestrado / Tocoginecologia / Mestre em Tocoginecologia

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / The protective role of dimethylsulfoxide (DMSO), lipoic acid (LA) and ternatin (TN), known free radical scavengers and cell membrane protectants were evaluated in an experimental model of testis ischemia/reperfusion. One hundred and twenty young male Wistar rats, mean weight 172.5Â15g, were randomized in five equal groups (GS - Sham, GC â Control, GD â Dimethylsulfoxide, GA â Lipoic acid and GT/D â Ternatin/DMSO). Rats of each group were distributed into four subgroups (T-0, T-1, T-3 and T-6), each comprising six animals. All surgical procedures were performed under inhalatory ether anesthesia. Experimental rats received intraperitoneal (i.p.) injections of 3% aqueous solution of DMSO (10 ml/kg, GD), LA (10 mg/kg, GA) or TN/DMSO (12 mg/kg, suspended in 3% aqueous solution of DMSO), GT/D) 24, 12 and 4 hours before cord detorsion. Last dose was given 1 hour before ischemia induction or second Sham operation. Sham (GS) and Control (GC) rats received NaCl 0.9% 10 ml/Kg i.p. Thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and reduced glutathione (GSH) levels (Âmol/g wet tissue) were assayed in testis. Total Antioxidant Power (TAP) (ÂM) was measured in blood plasma. Data were first analyzed by Kolmorogov-Smirnov test to assess differences in the general shapes of distribution. Comparisons between groups were made using the t test for normally distributed data and the Mann-Whitney U test for non-normally distributed data. P values of <0.05 were considered to indicate statistical significance. Comparisons between antioxidant-treated and saline-treated rats (Control group, GC) were made using Dunnettâs test. Spermatic cord torsion induced significant decrease in testis MDA levels during ischemia and reperfusion in DMSO (GD) and LA (GA) and in TN/DMSO (GT/D) treated rats during reperfusion, compared with respective controls. MDA levels were significantly increased in GC compared with Sham (GS) rats at the end of the ischemia and during reperfusion as well as one hour after detorsion (T-1) in GC rats compared with T-0, in the same group, indicating additional damage imposed by the afflux of oxygenated blood (reperfusion) to the ischemic tissues. GSH levels decreased significantly in saline-treated (GC) compared with Sham-operated rats and increased significantly in DMSO and LA treated rats at the end of ischemia and during reperfusion. The model utilized in this study did not induce systemic effects. TAP was significantly increased during reperfusion (T-1) in LA (GA) and TN/DMSO (GT/D) pretreated rats, compared with respective controls. The results of the present study reinforce the hypothesis that ischemia and reperfusion are free radicals generating processes. The different antioxidants studied here have demonstrated great efficacy in cell membrane protection by decreasing lipid peroxidation in all experiments. Increased reduced glutathione levels in DMSO and LA treated rats support the view that these substances can exert a protective effect against testis oxidative stress injury caused by ischemia/reperfusion in rats subjected to torsion of the spermatic cord lasting three hours. TN protective effects in reducing lipoperoxidation were more pronounced in ischemic tissues. / O efeito protetor do dimetilsulfÃxido (DMSO), do Ãcido lipÃico (LA) e da ternatina (TN), conhecidos seqÃestradores de radicais livres e protetores da membrana celular foram avaliados utilizando um modelo experimental de isquemia/reperfusÃo do testÃculo. Cento e vinte ratos Wistar jovens com peso mÃdio de 174 g foram distribuÃdos ao acaso em cinco grupos (GS - Simulado, GC â Controle, GD â DimetilsulfÃxido. GA â Ãcido lipÃico e GT/D â Ternatina/DMSO) numericamente iguais e posteriormente redistribuÃdos em quatro subgrupos (T-0, T-1, T-3 e T-6), com seis animais cada. Todos os procedimentos cirÃrgicos foram realizados sob os efeitos da anestesia geral inalatÃria. Os animais receberam injeÃÃes intraperitoniais (i.p.) de soluÃÃo aquosa de DMSO a 3% (10 ml/kg, GD), LA (10 mg/kg, GA) ou TN+DMSO (12 mg/kg, GT/D, em soluÃÃo aquosa de DMSO a 3%) 24, 12 e 4 horas antes da destorÃÃo do cordÃo espermÃtico. A Ãltima dose foi administrada uma hora antes da induÃÃo da isquemia ou da segunda operaÃÃo simulada (Sham). Os ratos do grupo Simulado (GS) e do grupo Controle (GC) receberam de NaCl 0,9% (10 ml/Kg) i.p. Foram determinadas as concentraÃÃes de substÃncias reativas ao Ãcido tiobarbitÃrico (TBARS) e glutationa reduzida (GSH) no tecido (testÃculo), e a capacidade antioxidante total (CAP) do plasma. Para determinaÃÃo do padrÃo de distribuiÃÃo das amostras utilizou-se o teste de Kolmorogov-Smirnov. As comparaÃÃes entre os grupos foram feitas utilizando-se o t teste ou o teste U de Mann-Whittney quando assim indicado. Para as comparaÃÃes dos grupos tratados com antioxidantes ao grupo Controle (GC) utilizou-se o teste de Dunnett. Valores de p<0,05 foram considerados significantes. A torÃÃo do cordÃo espermÃtico induziu uma reduÃÃo significante das concentraÃÃes de MDA, no tempo mÃximo de isquemia e na reperfusÃo, em tratos prÃ-tratados com DMSO (GD) e LA (GA) e durante a reperfusÃo naqueles prÃ-tratados com TN/DMSO (GT/D), comparados com seus respectivos controles. Os nÃveis de MDA estavam significantemente elevados nos ratos do grupo GC comparados aos animais do grupo GS, no tempo mÃximo de isquemia e durante a reperfusÃo, bem como uma hora apÃs a destorÃÃo (T-1) comparada ao T-0, demonstrando o dano adicional decorrente do afluxo de sangue oxigenado (reperfusÃo) ao tecido isquÃmico. As concentraÃÃes de GSH diminuÃram nos ratos prÃ-tratados com soluÃÃo salina e aumentaram significativamente nos ratos prÃ-tratados com DMSO ou LA, no tempo mÃximo de isquemia e durante a reperfusÃo. O modelo isquÃmico utilizado nÃo foi capaz de gerar efeitos sistÃmicos. A capacidade antioxidante total aumentou significantemente durante a reperfusÃo (T-1) nos ratos prÃ-tratados com LA (GA) e TN/DMSO (GT/D) comparados aos respectivos controles. Esses resultados fortalecem a hipÃtese de que a isquemia e reperfusÃo sÃo processos geradores de radicais livres. Os diferentes antioxidantes estudados mostraram grande eficiÃncia na proteÃÃo da membrana celular, reduzindo a peroxidaÃÃo lipÃdica, em todos os experimentos. O aumento dos nÃveis de glutationa reduzida, nos ratos prÃ-tratados com DMSO e LA, mostra que estes antioxidantes exercem uma proteÃÃo eficaz contra o estresse oxidativo induzido pela isquemia/reperfusÃo em ratos submetidos à torÃÃo do cordÃo espermÃtico por trÃs horas. Os efeitos protetores da ternatina se manifestam com maior intensidade no tecido isquÃmico, no controle da peroxidaÃÃo lipÃdica.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / INTRODUÃÃO: Recentemente nÃs demonstramos que o sildenafil tem efeito protetor contra a lesÃo gÃstrica induzida por AINEs em ratos, atravÃs de uma diminuiÃÃo na aderÃncia de leucÃcitos e aumento do fluxo sanguÃneo gÃstrico (Santos CL et al, BJP, 2005). O etanol induz lesÃo hemorrÃgica gÃstrica em ratos atravÃs de um aumento na produÃÃo de radicais livres e diminuiÃÃo da concentraÃÃo de glutationa na mucosa. OBJETIVOS: O objetivo deste trabalho foi investigar se o sildenafil possui efeito protetor contra a lesÃo induzida por Ãlcool, e avaliar o papel da via NO/GMPc/KATP no efeito gastroprotetor do sildenafil. MÃTODOS: O sildenafil (0.1, 0.3, 1, ou 3 mg/Kg, v.o) foi administrado 30 min antes do etanol 100% (4 ml/Kg, v.o). Depois de 1 h, os ratos foram sacrificados e os estÃmagos abertos para determinaÃÃo da Ãrea da lesÃo usando planimetria computadorizada. AlÃm disso, fragmentos de tecidos foram removidos para anÃlise microscÃpica e dosagem de glutationa e hemoglobina (teste colorimÃtrico - Bioclin). Os outros grupos foram tratados com L-NAME (1 ou 3 mg/kg, i.p), L-NAME (3 mg/kg, i.p) + L- Arg (200mg/kg, ip), ODQ (10 mg/Kg, v.o), glibenclamida (0.1, 0.3, 1 ou 3 mg/Kg, v.o), glibenclamida (1 mg/Kg) + diazÃxido (3mg/Kg, i.p) ou salina. ApÃs 30 min os ratos receberam sildenafil (1mg/kg) e depois de mais 30 min etanol 100% (4ml/kg, v.o), com o sacrifÃcio ocorrendo 1 h depois. RESULTADOS: O etanol 100% causou lesÃo gÃstrica (158.9 Â 9.3 mm2), hemorragia na mucosa (3787.0 Â 512.9 Âg/100mg) e reduÃÃo da concentraÃÃo de glutationa (78.7 Â 9.5 Âg/g). O Sildenafil protegeu, de forma dose-dependente, a mucosa gÃstrica do efeito do Ãlcool, com o efeito mÃximo na dose de 1 mg/Kg (44.5 Â 7.7 mm2). O sildenafil tambÃm reverteu a diminuiÃÃo da glutationa (143.6 Â 15.7 Âg/g) induzida por etanol. O L-NAME sozinho (151.1 Â 20.9 mm2), o ODQ (137.9 Â 41.6 mm2) e a glibenclamida sozinha (137.1 Â 16,7 mm2) reverteram a proteÃÃo do sildenafil. Mas, nos animais tratados com L-NAME + L-arginina (30.9 Â 10.5 mm2) ou glibenclamida + diazÃxido (60.3 Â 2.0 mm2) nÃo houve mudanÃas no efeito do sildenafil. CONCLUSÃES: O sildenafil protege a mucosa gÃstrica contra a lesÃo induzida por Ãlcool, atravÃs da ativaÃÃo da via NO/GMPc/KATP e por um aumento dos nÃveis de GSH no estÃmago / INTRODUCTION: Recently, we demonstrated that sildenafil has protective effects against NSAID- induced gastric damage in rats, by a decrease in leukocytes adherence and increase in gastric blood flow (Santos CL et al, BJP, 2005). Ethanol induced gastric hemorrhagic damage in rats, by an increase in free radical production and decrease in mucosal glutathione concentration. AIMS: Aim of was work is to investigate if sildenafil has a protective effect against ethanol- induced gastric damage and the role of the way NO/cGMP/KATP in this event. METHODS: Sildenafil (0.1, 0.3, 1, or 3 mg/Kg, p.o) was administrated 30 min before ethanol 100% (4 ml/Kg, p.o). After 1 hour, rats were sacrificed and the stomachs opened along the greater curvature and the mucosal lesion area was measured by computer planimetry program. Furthermore, pieces of gastric mucosal were removed for microscopic analysis and glutathione measure, and hemoglobin concentrations (colorimetric test Bioclin). Other groups had been dealt with L-NAME (1 or 3 mg/kg, i.p), L-NAME (3 mg/kg, i.p) + L- Arg (200mg/kg, i.p), ODQ (10 mg/Kg, p.o), glibenclamide (0.1, 0.3, 1 ou 3 mg/Kg, p.o), glibenclamide (1 mg/Kg) + diazÃxide (3mg/Kg, i.p) ou saline. After 30 min the rats had received sildenafil (1mg/kg), and after more 30 min ethanol 100% (4ml/kg, p.o), with the sacrifice occurring 1 h later. RESULTS: Absolute ethanol induced gastric damage (158.9 Â 9.3 mm2), and gastric mucosal hemorrhage (3787.0 Â 512.9 Âg/100mg) and reduced gastric glutathione concentration (78.7 Â 9.5 Âg/g). Sildenafil protected, in a dose dependent manner, the ethanol- induced gastric damage , with the maximum effect in the dose of 1 mg/Kg (44.5 Â 7.7 mm2). Sildenafil also reversed the decreased in gastric glutathione (143.6 Â 15.7 Âg/g) induced by ethanol. Alone L-NAME (151.1 Â 20.9 mm2), ODQ (137.9 Â 41.6 mm2) and glibenclamide alone (137.1 Â 16,7 mm2) reverted the protection of the sildenafil. But, in the animals trated with L-NAME + L-arginine (30.9 Â 10.5 mm2), or glibenclamide + diazÃxido (60.3 Â 2.0 mm2) did not have changes in the effect of the sildenafil. CONCLUSION: Sildenafil had a gastric protective effect against ethanol- induced gastric damage through the activation of the NO/cGMP/KATP pathway, at least in part through a increase in stomach GSH