Made available in DSpace on 2016-08-10T10:29:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CLARA MARIA CARDOSO COSTA MONTEIRO.pdf: 2892661 bytes, checksum: fe49a38a7866c07f7aeced992627f042 (MD5) Previous issue date: 2009-05-04 / The leishmaniasis (ACL) is a zoonotic disease whose etiologic agent, species of the genus Leishmania. And a disease of the skin and mucous membranes, primarily zoonotic involving a variety of wild and domestic mammals. Outbreaks of leishmaniasis occur by environmental changes due to deforestation, construction of dams, roads, mines, plant work areas, military groups with the penetration of man into the wild where are the vectors and reservoirs. There is considerable degree of exposure related to human settlement or agricultural occupation of the outskirts of cities. In these cases, there is the clearance of mammalian hosts and vectors adapting to the new environment, generating impacts on human health. The forms of the disease are characterized as localized cutaneous leishmaniasis, mucocutaneous leishmaniasis and diffuse anergic leishmaniasis. The diagnosis can be clinical, epidemiological and laboratory. Some preventive measures can be used as the vector control, the animal reservoirs and the treatment of patients. The measures in health education should be included in all services to develop control measures. They are used for the pharmacological treatment antimony compounds such as sodium stibogluconate (Pentostam ®) and antimony N-methyl-(Glucantime ®). There are medicines for the treatment of second line, such as amphotericin B (AB), Pentamidine, these are alternative drugs with significant side effects, and they are indicated only in cases of hypersensitivity phenomena to antimonials and / or high rates of secondary infection. Recurrence and resistance to treatment are factors that motivate the search for an ideal drug. Treatment of cutaneous leishmaniasis is a challenge because the avaible drugs are highly toxic. / A leishmaniose tegumentar americana (LTA) é uma zoonose que tem como agente etiológico, espécies do gênero Leishmania. E uma doença da pele e das mucosas, primariamente zoonótica que envolve uma variedade de mamíferos silvestres e domésticos. Surtos de leishmaniose ocorrem por mudanças ambientais decorrentes de desmatamento, construção de hidroelétricas, estradas, garimpos, instalação de frentes de trabalho, grupos militares com a penetração do homem no meio silvestre onde habitam os vetores e reservatórios. Há considerável grau de exposição relacionado a assentamentos populacionais agrícolas ou ocupação das periferias das cidades. Nestes casos, ocorre a domiciliação de hospedeiros mamíferos e vetores adaptando-se ao novo ambiente, gerando impactos sobre a saúde humana. As formas clínicas da doença são caracterizadas como Leishmaniose cutânea localizada, Leishmaniose mucocutânea e Leishmaniose difusa anérgica. O diagnóstico pode ser clínico, epidemiológico e laboratorial. Algumas medidas profiláticas podem ser empregadas como o combate ao vetor, aos animais reservatórios, além do tratamento das pessoas infectadas. As medidas educativas em saúde devem ser inseridas em todos os serviços que desenvolvam ações de controle. Através deste trabalho realizou-se um levantamento bibliográfico sobre a LTA enfatizando a terapêutica disponível nas diferentes formas clínicas da doença. Para o tratamento farmacológico são empregados compostos antimoniais pentavalentes como o estibogluconato de sodium (Pentostam®) e o antimoniato de N-Metil-Glucamina (Glucantime®). Existem medicamentos para o tratamento de segunda linha, como Anfotericina B (AB), Pentamidina. Estes são medicamentos alternativos com efeitos colaterais importantes, sendo indicados apenas nos casos de fenômenos de hipersensibilidade aos antimoniais e/ou altos índices de infecção secundária. A recidiva e a resistência ao tratamento são fatores que motivam a busca de um fármaco ideal. O tratamento da leishmaniose tegumentar americana é um desafio, pois os fármacos disponíveis apresentam elevada toxicidade.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:54:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 IARA BRITO BUCAR OLIVEIRA.pdf: 1533960 bytes, checksum: ce25fdb7cee220732c0a9ac44bb9332d (MD5) Previous issue date: 2014-05-09 / Introduction: The main objective of this study is to demonstrate the epidemiological and environmental characteristics of visceral leishmaniasis (VL) in children under 15 years of age in the period from 2007 to 2012. Methods: Descriptive, cross-sectional epidemiological study of VL cases in children under 15 years of age, diagnosed at the Hospital for Tropical Diseases (Araguaína) in the period from 2007 to 2012. Clinical data were gathered from medical reports; meteorological data were obtained at the Meteorological Measurement Department of the Federal University of Tocantins. Results: The study assessed 821 medical reports of patients under 15 years of age diagnosed with VL. The disease affected both genders, with no significant difference (p= 0.67); the urban area had the highest prevalence of the disease (99.03%; p=0.0001); the most affected ethnic group was mixed (pardo) race (85.5%) (p=0.0001). The age group with the highest prevalence of the disease was between 1 and 5 years (58.6%) (p=0.0001). The most used diagnostic criterion was laboratorial (92.3%) (p=0.0001). The Araguaína Sul primary healthcare unit had the record with the highest rate of cases (20.8%). The highest incidence rate occurred in 2008, following a reduction showing a negative and significant correlation (p<0.04). The highest incidence coefficient occurred in the age group of under 1 year of age, while the highest mortality and lethality coefficients took place in 2008 and 2011. Most patients (96.2%) reached the cure of the disease. Regarding mortality, the most affected age group was between one and five years of age (47.8%). The climatic condition had a small effect on the epidemiology of the disease. Conclusions: In Araguaína, visceral leishmaniasis is an urban-based, endemic disease, with higher prevalence in children between one and five years of age, showing a high incidence coefficient and strongly contributing to child mortality rates. Among the environmental factors assessed by this study, temperature was the one aspect that influenced the VL incidence coefficient, showing that milder temperatures may increase the number of cases of this disease. / Introdução: O objetivo principal deste estudo é demonstrar as características epidemiológicas e ambientais da LV em menores de 15 anos de idade no período de 2007 a 2012. Método: É um estudo epidemiológico descritivo e transversal de casos diagnosticados de LV em menores de 15 anos, no Hospital de Doenças Tropicais (Araguaína-TO) no período de 2007 a 2012. As informações clínicas e óbitos foram obtidos dos prontuários de pacientes. Os dados meteorológicos foram cedidos pela Casa de Medições Meteorológica da Universidade Federal do Tocantins. Resultados: Foram analisados 821 prontuários de pacientes menores de 15 anos de idade com diagnóstico de LV. Não houve diferença significativa de número de casos entre os sexos (p= 0,67), com maior prevalência dos casos da zona urbana (99,03%) (p= 0,0001), sendo a raça parda a mais acometida com (85,5%) (p=0,0001). A faixa etária com maior prevalência foi entre um a cinco anos (58,6%) (p=0,0001). O Critério diagnóstico mais usado foi o Laboratorial (92,3%) (p=0,0001). A UBS Araguaína Sul registrou o maior número de casos (20,8%). O maior coeficiente de incidência ocorreu em 2008, seguido de um declínio apresentando correlação negativa e significativa (p<0,04). O maior coeficiente de incidência ocorreu na faixa etária menor de um ano e os maiores coeficientes de mortalidade e letalidade ocorreram nos anos de 2008 e 2011. A evolução clínica para a cura ocorreu na maioria dos pacientes (96,2%). A maior taxa de mortalidade por LV ocorreu na faixa etária de um a cinco anos (47,8%). A condição climática pouco influenciou na epidemiologia da doença. Conclusões: Assim, a LV na cidade de Araguaína é uma doença com características urbana, endêmica, com predileção para crianças menores de cinco anos de idade, com alto coeficiente de incidência, quando comparado a outros estudos, contribuindo para a mortalidade infantil nas faixas etárias estudadas, não se obteve correlação da doença com os fatores ambientais, com exceção da temperatura onde apesar de apresentar uma correlação negativa foi significativa demonstrando que em temperatura mais amenas houve um incremento no número de casos.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:54:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 NICOLY AGUIAR.pdf: 1322443 bytes, checksum: 65dbdd6f424841fb3d62e00660fd042b (MD5) Previous issue date: 2015-08-28 / Visceral leishmaniasis (VL) is considered a neglected disease and has expanded and urbanized. The objectives of this study were to describe the demographic characteristics of visceral leishmaniasis; Assess the incidence rate; Describe the mortality rate and mortality and correlate average annual temperature and mean annual rainfall with the incidence rate. It is a descriptive, retrospective, ecological epidemiological study of the use of secondary data for the period 2007-2012 developed in the two most populous urban centers in the State of Tocantins, obtained from the Information Resulting System Notification and Secretary of State Tocantins Health. The average temperature in degrees Celsius and rainfall in millimeters were provided by the National Institute of Meteorology. It was adopted as a criterion for inclusion municipalities with a population in excess of 100,000 in this case Palmas and Araguaína. 358 reports of confirmed cases of VL in those over 15 years of age were analyzed. The highest incidence of the disease occurred among people of Masculine sex (70.7 %%), residing in urban areas (99.03%), and the brown race the most affected (85.5%). The age group with the highest incidence was between twenty to thirty-four years (40.2%). There was a significant difference (p <0.05) between variables. The most widely used diagnostic criterion was the Lab (98.3%). The highest incidence rate occurred in 2008, followed by a significant downward trend in cases (p <0.001). The greatest mortality and lethality coefficients occurred in 2008 and 2010. The clinical course for healing occurred in most patients (90.2%). The percentage of co-infected with HIV observed in this study was 4.5%. The weather conditions did not influence the epidemiology of the disease. It is concluded that LV is a disease with urban characteristics, endemic, with a predominance of males and records of people who are in an economically active age group with high incidence rate, when compared to other studies. The association was not significant between the average rainfall and the incidence rate, as well as between temperature and the incidence rate. / A leishmaniose Visceral (LV) é considerada uma doença negligenciada e tem se expandido e urbanizado. Os objetivos deste estudo foram: Descrever as características demográficas da Leishmaniose visceral; Avaliar o coeficiente de incidência; Descrever o coeficiente de mortalidade e letalidade e correlacionar temperatura anual média e pluviosidade anual média com o coeficiente de incidência. Trata-se de um estudo epidemiológico descritivo, retrospectivo, ecológico com a utilização de dados secundários referentes ao período de 2007 a 2012 desenvolvido no dois centros urbanos mais populosos do Estado do Tocantins, obtidos do Sistema de Informação de Agravos de Notificação e Secretaria de Estado da Saúde do Tocantins. As médias de temperatura em graus Celsius e de precipitação pluviométrica em milímetros foram fornecidas pelo Instituto Nacional de Meteorologia. Foi adotado como critério de inclusão municípios com população acima de 100.000 habitantes, neste caso, Palmas e Araguaína. Foram analisados 358 notificações de casos confirmados de LV em maiores de 15 anos de idade. A maior incidência da doença ocorreu entre pessoas do sexo masculino (70,7%%), residentes na zona urbana (99,03%), sendo a raça parda a mais acometida (85,5%). A faixa etária com maior incidência foi entre vinte a trinta e quatro anos (40,2%). Houve diferença significativa (p<0,05) entre as variáveis estudadas. O Critério diagnóstico mais usado foi o Laboratorial (98,3%). O maior coeficiente de incidência ocorreu em 2008, seguido de uma tendência significativa de diminuição dos casos (p< 0,001). Os maiores coeficientes de mortalidade e letalidade ocorreram nos anos de 2008 e 2010. A evolução clínica para a cura ocorreu na maioria dos pacientes (90,2%). O percentual de coinfectados com o HIV observados nesse estudo foi de 4,5%. A condição climática não influenciou na epidemiologia da doença. Conclui-se que a LV é uma doença com características urbana, endêmica, com predileção pelo sexo masculino e com registros de pessoas que encontram-se numa faixa etária economicamente ativa e com alto coeficiente de incidência, quando comparado a outros estudos. A associação não foi significativa entre a precipitação pluviométrica média e o coeficiente de incidência, assim como entre temperatura e o coeficiente de incidência.

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2018-09-28T15:09:19Z No. of bitstreams: 1 Gisele Dias Marques.pdf: 2425530 bytes, checksum: ee67f24361e92924f652d5333aeb8750 (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2018-09-28T15:09:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Gisele Dias Marques.pdf: 2425530 bytes, checksum: ee67f24361e92924f652d5333aeb8750 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-28T15:09:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gisele Dias Marques.pdf: 2425530 bytes, checksum: ee67f24361e92924f652d5333aeb8750 (MD5) Previous issue date: 2017-09-14 / A Leishmaniose é uma doença emergente em países em desenvolvimento. Com características de zoonose rural, tem sido descrita com frequência em centros urbanos e acomete cães e humanos. Este estudo teve como objetivo analisar fichas de Protocolo de Campo Veterinário utilizado pela Vigilância Sanitária no município de Itaqui, estado do Rio Grande do Sul, entre os anos de 2009 e 2016. Foram analisadas 1.392 fichas, onde constatou-se com essas avaliações 54,74% de cães negativos para LVC e 44,54% dos cães pesquisados positivos para LVC. Os bairros de maior incidência foram: Centro (209), Chácara (56), Cidade Alta (50), Capelinha (40) e Ponte Seca (39). Com o uso de ferramentas de Sistema de Informações Geográfica (SIG) foi possível detectar zonas com maior ocorrência de casos. Nos bairros Centro e Ponte Seca, foi identificado como o primeiro local de infecção em cães, relacionando a esses casos as zonas ribeirinhas e os adensamentos de vegetação, fatores de risco para proliferação de vetores. Estudos na área da epidemiologia ilustram a prevalência da doença em grupos populacionais comparando ou diferenciando em áreas de risco definidas. / Leishmaniasis is an emerging disease in developing countries. With characteristics of rural zoonosis, it has been frequently described in urban centers and affects dogs and humans. The objective of this study was to analyze records of the Veterinary Field Protocol used by Sanitary Surveillance in the municipality of Itaqui, state of Rio Grande do Sul, between 2009 and 2016. A total of 1.392 records were analyzed, 54,74% of dogs negative for LVC and 44,54% of dogs tested positive for LVC. The most important neighborhoods were: Centro (209), Chácara (56), Cidade Alta (50), Capelinha (40) and Ponte Seca (39). With the use of Geographic Information System (GIS) tools, it was possible to detect areas with higher occurrence of cases. In the Centro and Ponte Seca districts, it was identified as the first infection site in dogs, relating to these cases riverine zones and vegetation densities, risk factors for vector proliferation. Studies in the area of epidemiology illustrate the prevalence of the disease in population groups comparing or differentiating in defined risk areas.

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2018-09-28T15:48:23Z No. of bitstreams: 1 Laura Ilarraz Massia 06072017.pdf: 1328355 bytes, checksum: 8a7632d06256c43e7c8999831a3405b3 (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2018-09-28T15:48:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Laura Ilarraz Massia 06072017.pdf: 1328355 bytes, checksum: 8a7632d06256c43e7c8999831a3405b3 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-28T15:48:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Laura Ilarraz Massia 06072017.pdf: 1328355 bytes, checksum: 8a7632d06256c43e7c8999831a3405b3 (MD5) Previous issue date: 2017-05-29 / A leishmaniose é uma das doenças mais negligenciadas no mundo e ocorre, principalmente, nos países em desenvolvimento. O Brasil concentra 96% dos casos de leishmaniose visceral (LV) das Américas, com uma incidência de 4,35 casos por 100.000 habitantes. Os métodos usuais de controle dessa enfermidade falharam na prevenção de novas epidemias. A LV deve ser compreendida sob a abordagem Saúde Única, que prevê a unificação das ciências médica e veterinária através da colaboração mútua para o controle de enfermidades entre espécies. O objetivo desse projeto foi avaliar a percepção dos profissionais de saúde quanto à ocorrência da LV, em Uruguaiana (RS). Um estudo observacional transversal foi realizado através de um questionário autoaplicado em dezembro de 2016 e janeiro de 2017. Participaram 187 profissionais de saúde, sendo 138 integrantes da Estratégia da Saúde da Família, 22 agentes de endemias e 27 veterinários. Identificaram-se deficiências de conhecimento dos profissionais de saúde a respeito da epidemiologia e da sintomatologia da doença. É necessário investir em estratégias de capacitação sobre a leishmaniose visceral, visando corrigir deficiências de conhecimento e implementar a discussão sobre o tema. / Leishmaniasis is one of the most neglected diseases in the world and occurs mainly in developing countries. Brazil concentrates 96% of the cases of visceral leishmaniasis (VL) in the Americas, with an incidence of 4.35 cases per 100,000 inhabitants. The usual methods of controlling this disease have failed to prevent new epidemics. LV should be handled with the One Health approach, which provides the unification of the medical and veterinary sciences through mutual collaboration for the control of diseases among species. The objective of this project was to evaluate the perception of health professionals regarding the occurrence of VL in Uruguaiana (RS). A cross-sectional observational study was carried out through a self-administered questionnaire, in December 2016 and January 2017. 187 health professionals participated, of which 138 were members of the Family Health Strategy, 22 agents of endemics and 27 veterinarians. Health professionals' knowledge deficiencies regarding the epidemiology and symptomatology of the disease were identified. It is necessary to invest in training strategies on visceral leishmaniasis, in order to correct deficiencies of knowledge and to implement the discussion on the subject.

Introdução: Das formas clínicas das leishmanioses, a forma clássica da leishmaniose visceral (LV) é a forma mais grave da doença, afetando órgãos como baço, fígado e linfonodos. Como a doença apresenta um comprometimento intersticial secundário à infecção pela Leishmania, existe o envolvimento de outros órgãos. No pulmão, o envolvimento se manifesta pela pneumonite intersticial. Essa alteração foi provada por estudo anatomopatológico em hamsteres, cães e homens. Embora as pesquisas pulmonares na doença avaliem as alterações ultraestruturais provocadas pela leishmaniose, não existem estudos que avaliem o impacto dessas sobre a função pulmonar. Objetivo: Caracterizar o distúrbio ventilatório em pacientes internado com LV por espirometria. Métodos: Foram avaliados transversalmente 20 pacientes com diagnóstico confirmado por Kalazar detect, mielograma e/ou sorologia. Os parâmetros medidos foram a capacidade vital forçada (CVF), volume expiratório forçado do primeiro segundo (VEF1), índice de Tiffeneau e fluxo expiratório forçado (25-75%). Posteriormente, foram utilizados, na análise estatística, o teste não paramétrico de Mann-Whitney, teste exato de Fisher, não paramétrico de Wilcoxon e o coeficiente de correlação de Speraman. Nível de significância com p < 0,05. Resultados: A espirometria mostrou-se alterada em 14 pacientes (70%). O padrão de distúrbio ventilatório apresentado foi somente restritivo. Em relação aos dados laboratoriais, os pacientes com hipoalbuminemia apresentaram espirometria alterada. Não foi achada correlação estatisticamente significativa entre tempo de medicação, consumo de tabaco, infecção, sintomas respiratórios, ocupação, tempo de sintomas. Conclusão: Os achados da espirometria evidenciaram volumes pulmonares reduzidos, com diminuição da CVF e, em 55% dos pacientes com VEF1, também diminuído. Neste estudo, demonstrou-se que a alteração da função pulmonar está, provavelmente, relacionada à fibrose pulmonar que ocorre na LV, como descrito / The clinical forms of leishmaniasis, the classic form of visceral leishmaniasis (VL) is the most severe form of the disease, affecting organs such as the spleen, liver and lymph nodes. As the disease presents an interstitial deterioration secondary to the infection by Leishmania, there is the involvement of other organs. In the lung, the involvement is manifested by the interstitial pneumonitis. This alteration has been proved by anatomopathological studies in hamsters, dogs and men. Although the researches concerning this lung disease assess the ultrastructural alterations caused by leishmaniasis, there are no studies evaluating the impact of these on lung function. Objective: To characterize the ventilatory disorder in patients hospitalized with VL by spirometry. Methods: 20 patients were transversely evaluated with diagnosis confirmed by Kalazar Detect, myelogram and / or serology. The measured parameters were the forced vital capacity (FVC), forced expiratory volume in one second (FEV1), Tiffeneau index and forced expiratory flow (25-75%). Thereafter, the non-parametric Mann-Whitney test, Fisher\'s exact test, non-parametric Wilcoxon and Spearman correlation coefficient were used in the statistical analysis. Significance level of p < 0.05. Results: The spirometry was altered in 14 patients (70%). The presented ventilatory disorder pattern was only restrictive. Regarding the laboratory data, patients with hypoalbuminemia presented altered spirometry findings. It was not found statistically significant correlation between time of medication, smoking, infections, respiratory symptoms, occupation, time of symptoms. Conclusion: The findings of spirometry showed reduced lung volumes, with decreased FVC and in 55% of patients with FEV1 also decreased. In this study it was shown that the change in lung function is probably related to pulmonary fibrosis that occurs in the VL as described in anatomicopathological studies conducted earlier

Leishmania braziliensis é o agente responsável pela maior parte dos casos de leishmaniose tegumentar e mucocutânea no Brasil. Entre as espécies incriminadas como vetoras, na região Sudeste encontram-se Nyssomyia intermedia e Nyssomyia neivai. A comprovação destas espécies como responsáveis pela transmissão de Leishmania sp. depende de vários fatores, entre estes, a competência vetorial, definida como a capacidade da espécie se infectar e repassar a infecção para um hospedeiro vertebrado. Objetivo: O presente estudo teve como objetivo avaliar experimentalmente a competência vetorial de Ny. intermedia e Ny. neivai para transmitir L. braziliensis. Métodos: Fêmeas de primeira geração de ambas as espécies foram alimentadas em hamster infectado com L. braziliensis e após a oviposição, desafiados a um segundo repasto sanguíneo em hamsters susceptíveis (limpos). Adicionalmente, foram obtidos dados do desenvolvimento imaturo das duas espécies. Resultados: em relação ao ciclo imaturo, observou-se que a maior mortalidade ocorreu no primeiro instar larval para ambas as espécies, 27,6% para Ny. intermedia e 53,9% para Ny. neivai. O quarto instar larval teve a maior duração, com mediana de 8 a 12 dias. Quanto à susceptibilidade à infecção das fêmeas colonizadas de ambas as espécies 0,89% das fêmeas de Ny. intermedia e 8,33 % das fêmeas de Ny. neivai apresentaram infecção por L. braziliensis. Nenhuma fêmea de Ny. intermedia realizou um segundo repasto sanguíneo, enquanto que 3 fêmeas de Ny. neivai realizaram. Destas, duas estavam infectadas e o hamster potencialmente infectado ficou em observação por dois meses. Amostras de tecido do hamster exposto demostraram, por meio de PCR, a presença de L. braziliensis. Conclusão: Nyssomyia intermedia apresentou desenvolvimento de formas flageladas porém não repassou a infecção a um hospedeiro suscetível. Nyssomyia neivai, além de se infectar com a L. braziliensis, também repassou a infecção a um hospedeiro suscetível, demostrando assim sua competência vetora. / Leishmania braziliensis is the agent related to cases of cutaneous and mucocutaneous leishmaniasis in Brazil. Among the sandflies involved in the Leishmania sp transmission in the Southeast Region, Ny. intermedia and Ny. neivai are suspected vectors. However, the incrimination of these species as vectors in the transmission of Leishmania sp. depends of several factors, including vector competence, defined as the ability of the species to develop the agent and transmit it to a vertebrate host. Objective: The present study aimed to demonstrate the vector competence to Ny. intermedia and Ny. neivai for L. braziliensis. Methods: To develop the experiments,specimens of both species were reared under laboratory conditions and the adults obtained were used to evaluate the vector competence. Thefemales were fed in infected hamsters and after oviposition, challenged to take a bloodmeal in suscetible hamsters (without infection). All females fed on infected hamster were dissected. The hamster bitted in the exposition were follow up for two months, after that, were euthanatized to evaluate the infection by PCR. Result: The highest immature mortality occurred in the first instar larval for both species, 27.6% for Ny. intermedia and 53.9% for Ny. neivai. The fourth larval instar had the longest duration, with a median varying between 8 to 12 days. About the females of Ny intermedia, only 0.89% of them develop the flagellates. For Ny. neivai, among 36 females feed on infected hamster, 2 were infected. None female of Ny intermedia take a second blood meal and 3 of Ny. neivai have had. The hamsters bitted by the infected females were follow up for 60 days. After that the hamster were euthanatized and the infection was observed. Conclusion: The vector competence of Ny. neivai to transmit Leishmania braziiensis was demonstrated. The susceptibility of Ny. intermedia to develop this leishmania was corroborated.

Introdução: Um dos primeiros sistemas de defesa contra os microrganismos é a via dos receptores Toll-like (TLRs). A ativação destes receptores leva à síntese de citocinas, dando início à resposta imune inata. Em modelos animais, o TLR2, TLR4 e TLR9 parecem estar relacionados com o reconhecimento de antígenos de Leishmania. A relação entre TLRs e leishmânia pode ser um mecanismo chave no desenvolvimento da doença ou no controle da mesma. Até o momento não existem estudos de TLRs na leishmaniose cutânea humana. Objetivo: Determinar o padrão de expressão e as células associadas com o TLR2, TLR4 e TLR9 na leishmaniose cutânea. O objetivo secundário é correlacionar a quantidade de TLRs com a quantidade de citocinas e células inflamatórias na pele. Métodos: Cem biópsias de pacientes com leishmaniose cutânea causadas por Leishmania (V.) braziliensis foram selecionadas inicialmente. Apenas os casos confirmados (presença de amastigotas no raspado, teste de Montenegro positivo, imunoistoquímica com presença de antígenos de Leishmania e reação em cadeia da polimerase com DNA de Leishmania (V.) braziliensis foram incluídos. Um grupo controle de pele normal foi incluído para comparação (quatro casos). A expressão de TLR2, TLR4 e TLR9 foi determinada por técnica imunoistoquímica, da mesma forma que os fenótipos celulares (células NK, macrófagos, células dendríticas, células CD4 e CD8) e citocinas (IL-1, IL-6, IL-12, TNF-alfa, IFN-gama). Dupla-marcação foi realizada para identificar as células que expressaram os TLRs analisados. Análise semi-quantitativa foi utilizada para avaliação da expressão de TLRs na epiderme, enquanto na derme foi realizada análise quantitativa. O nível de significância foi estabelecido com p<0,05. Resultados: Doze casos preencheram os critérios de inclusão. Os pacientes eram todos masculinos, com lesões apenas em membros inferiores e mediana de idade de 23 anos [16-47]. A expressão de TLR2, TLR4 e TLR9 na epiderme da pele normal foi alta. Quando comparados com pele normal, tanto TLR4 quanto TLR2 mostraram menor expressão no epitélio dos pacientes com leishmaniose e não houve expressão de TLR9. A média de células expressando TLR2 na derme foi de 136,36±82,46 células/mm2, ao passo que a média de células expressando TLR4 foi de 3,21±4,11 células/mm2. A contagem de TLR9 foi de 86,15±88,36 células/mm2 predominando em áreas de formação de granulomas. A regressão linear não demonstrou relação entre a contagem de células marcadas ou citocinas com TLR2 ou TLR4. O aumento proporcional da expressão de TLR9 relacionou-se com maior expressão de IL-12 e IL-4 (p < 0,05). A dupla marcação demonstrou que os macrófagos expressaram TLR2. A dupla marcação não mostrou expressão de TLR2 nas células dendríticas e nas células NK. Conclusão: A leishmaniose cutânea localizada associa-se com a presença de TLR2, TLR4 e TLR9. No epitélio a expressão de TLR2 e TLR4 em pacientes com leishmaniose está diminuída em relação aos pacientes controles. A expressão do TLR2 na derme é estatisticamente maior que a de TLR4 e TLR9, a qual é expressa pelos macrófagos. A expressão de TLR9 ocorre principalmente nas áreas de granulomas havendo relação com a expressão de IL-12 e IL-4 / Introduction: One of the first systems of defense against microorganisms is the Toll-like receptors (TLRs) pathway. The activation of these receptors promotes the cytokine synthesis, initiating the innate immune response. In animal models, TLR2, TLR4 and TLR9 appear to be related to the recognition of antigens of Leishmania. The relationship between TLRs and Leishmania can be a key mechanism in the development of the disease or it control. Until now, there are not studies about TLRs in human cutaneous leishmaniasis. Objective: To determine the expression pattern and the cells associated with TLR2, TLR4 and TLR9 in cutaneous leishmaniasis. The secondary objective is to correlate the amount of TLRs with the amount of cytokines and inflammatory cells. Methods: One hundred biopsies from patients with cutaneous leishmaniasis caused by Leishmania (V.) braziliensis were initially selected. Only confirmed cases of cutaneous leishmaniasis were included in the analysis (presence of amastigotes in the scraping, positive Montenegro test, immunohistochemistry with the presence of Leishmania antigens and polymerase chain reaction with DNA from Leishmania (V.) braziliensis. A control group (4 cases) of normal skin was included for comparison. The expression of TLR2, TLR4 and TLR9 was determined by immunohistochemistry, as well as cell phenotypes (NK cells, macrophages, dendritic cells, CD4 and CD8) and cytokines (IL-1, IL-6, IL-12, TNF-alpha, IFN-gamma). Double-staining was used to determine the cells expressing TLRs. Semi-quantitative analysis was used for evaluation of the expression of TLRs in the epidermis. Quantitative analysis was performed to evaluate the expression in the dermis. The level of significance was defined as p <0.05. Results: 12 cases fulfilled inclusion criteria. The patients were all male, with lesions in lower limbs and median age of 23 years [16-47]. The expression of TLR2 and TLR4 in the epidermis of normal skin was high. When compared with normal skin, TLR2 and TLR4 showed lower expression in the epidermis. There was no expression of TLR9 in the epidermis in cases of cutaneous leishmaniasis and normal skin. The mean number of cells expressing TLR2 in the dermis was 136.36±82.46 cells/mm2, while the average of cells expressing TLR4 was 3.21±4.11 cells/mm2. The count of TLR9 was 86.15±88.36 cells/mm2, and it was found mainly in the areas of granuloma formation. Linear regression showed no relationship between the number of labeled cells or cytokines with TLR2 or TLR4. There was an association between TLR9 and two cytokines (IL-12 and IL-4). This correlation suggested that the proportional increase in the expression of TLR9 was related to greater expression of IL-12 and IL-4 (p<0.05). The double staining showed that macrophages and endothelial cells expressed TLR2. The double staining showed no expression of TLR2 in dendritic cells and NK cells. Conclusion: The localized cutaneous leishmaniasis associated with the presence of TLR2, TLR4 and TLR9. The expression of TLR2 in the dermis was statistically greater than that of TLR4 and TLR9, which is expressed by macrophages. The expression of TLR9 occurs primarily in the areas of granulomas was associated with the expression of IL-12 and IL-4

As leishmanioses são um conjunto de doenças causadas pela infecção com protozoários do gênero Leishmania. No Brasil, o parasita L. infantum provoca a manifestação de uma doença sistêmica e crônica, conhecida como leishmaniose visceral (VL), que, quando não tratada, pode levar o indivíduo à óbito. A gravidade da leishmaniose visceral vem sendo associada ao aumento do nível sistêmico de IL- 6 em pacientes sintomáticos. Ainda não está claro como o aumento dessa citocina coordena a progressão da doença. Nós demonstramos durante a infecção por L. infantum experimental há produção dessa citocina nos órgãos alvos. Em decorrência dessa via, animais deficientes para IL-6 (IL-6-/-) são suscetíveis a infecção por apresentar maior número de parasitos nos órgãos alvo e por desenvolverem uma fraca resposta inflamatória em função da diminuição do infiltrado inflamatório. Como consequência, há o aumento de CXCL2 que medeia o recrutamento de neutrófilos no baço. Apesar de aumentada em animais IL-6-/- os neutrófilos apresentam um estado menos ativado. A produção dos principais mediadores de morte dos parasitos, como espécies reativas de oxigênio (ROS) e o óxido nítrico (NO), estão comprometidas e favorecem a disseminação do parasito em animais IL-6-/-. Por outro lado, a Il-6 não interfere na produção de citocinas pró-inflamatórias e na proliferação de linfócitos Th1, atuando somente em linfócitos Th17 no início da infecção, sugerindo que o controle da resposta inflamatória é dependente de mecanismos inatos. Em humanos, identificamos dois genes modulados pela via de sinalização da IL-6. Os genes Hsbp1 e AR estão up-regulados em pacientes com a doença ativa e são genes associados com a migração e a produção de neutrófilos na medula óssea, possivelmente envolvidos com a neutropenia em pacientes com LV. Juntos, os dados mostram que a via de sinalização da IL-6 tem papel importante na modulação da resposta imune de neutrófilos, e em promover proteção durante a LV. / Leishmaniasis is a group of diseases caused by infection with protozoa of the genus Leishmania. In Brazil, the parasite L. infantum causes the manifestation of a systemic and chronic disease, known as visceral leishmaniasis (VL), which, when left untreated, can lead to death. The severity of visceral leishmaniasis has been associated with an increase in the systemic level of IL-6 in symptomatic patients. It is not yet clear how the increase in this cytokine coordinates the progression of the disease. We demonstrated during the infection by experimental L. infantum there is production of this cytokine in the target organs. As a result of this pathway, IL-6 ( IL- 6-/-) deficient animals are susceptible to infection because they present a higher number of parasites in the target organs and they develop a poor inflammatory response due to the decrease of the inflammatory infiltrate. As a consequence, there is an increase in CXCL2 that mediates the recruitment of neutrophils in the spleen. Although increased in IL-6-/- animals the neutrophils have a less activated state. The production of the main mediators of parasite death, such as reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO), are compromised and favor the spread of the parasite in IL-6-/- animals. On the other hand, IL-6 does not interfere in the production of proInflammatory cytokines and Th1 lymphocyte proliferation, acting only on Th17 lymphocytes at the beginning of the infection, suggesting that the control of the inflammatory response is dependent on innate mechanisms. In humans, we identified two genes modulated by the IL-6 signaling pathway. The Hsbp1 and AR genes are up-regulated in patients with the active disease and are genes associated with the migration and production of neutrophils in the bone marrow, possibly involved with neutropenia in patients with VL. Together, the data show that the IL-6 signaling pathway plays an important role in modulating the neutrophil immune response, and in promoting protection during LV.

As doenças tropicais negligenciadas (DTNs) causam um imenso sofrimento para a pessoa acometida e em muitos casos podem levar o indivíduo a morte. Elas representam um obstáculo devastador para a saúde e continuam a ser um sério impedimento para a redução da pobreza e desenvolvimento socioeconômico. Das 17 doenças desse grupo, a leishmaniose, incluindo a leishmaniose cutânea, tem grande destaque devido sua alta incidência, os gastos para o tratamento e as complicações geradas em processos de coinfecção. Ainda mais agravante, os investimentos direcionados ao controle, combate e principalmente a inovação em novos produtos é ainda muito limitado. Atualmente, a academia tem um importante papel na luta contra essas doenças através da busca de novos alvos terapêuticos e também de novas moléculas com potencial terapêutico. É nesse contexto que esse projeto teve como meta a implantação de uma plataforma para a identificação de moléculas com atividade leishmanicida. Como alvo terapêutico, optamos pela utilização da enzima diidroorotato desidrogenase de Leishmania Viannia braziliensis (LbDHODH), enzima de extrema importância na síntese de novo de nucleotídeos de pirimidina, cuja principal função é converter o diidroorotato em orotato. Esta enzima foi clonada, expressa e purificada com sucesso em nosso laboratório. Os estudos permitiram que a enzima fosse caracterizada cineticamente e estruturalmente via cristalografia de raios- X. Os primeiros ensaios inibitórios foram realizados com o orotato, produto da catálise e inibidor natural da enzima. O potencial inibitório do orotato foi mensurado através da estimativa do IC50 e a interação proteína-ligante foi caracterizada através de estudos cristalográficos. Estratégias in silico e in vitro foram utilizadas na busca de ligantes, através das quais foram identificados inibidores para a enzima LbDHODH. Ensaios de validação cruzada, utilizando a enzima homóloga humana, permitiram identificar os ligantes com maior índice de seletividade que tiveram seu potencial leishmanicida avaliado in vitro contra as formas promastigota e amastigota de Leishmania braziliensis. A realização do presente projeto permitiu a identificação de uma classe de ligantes que apresentam atividade seletiva contra LbDHODH e que será utilizada no planejamento de futuras gerações de moléculas com atividade terapêutica para o tratamento da leishmaniose. Além disso, a plataforma de ensaios otimizada permitirá a avaliação de novos grupos de moléculas como uma importante estratégia na busca por novos tratamentos contra a leishmaniose / Neglected tropical diseases (NTDs) pose a devastating obstacle to health and remain a serious impediment to poverty reduction and socioeconomic development. Of 17 diseases listed among NTDs, the leishmaniasis, including cutaneous and mucocutaneous leishmaniasis, are characterized by high number of cases and high costs for the treatment, usually of low efficacy and highly toxic. Even more problematic, the investment devoted to combat to control and to develop new therapies remains limited. Nowadays, the Academy has had an important role in the fight against NTDs, contributing in the search of new therapeutic targets and in the development of lead compounds. Within this context, the present project aimed the development of a pipeline for identification of leishmanicidal compounds based on the selective inhibition of the enzyme dihydroorotate dehydrogenase from Leishmania Viannia braziliensis (LbDHODH). LbDHODH acts in the de novo biosynthetic pathway of pyrimidine nucleotides, by catalysing the conversion of dihydroorotate to orotate and has been considered an important macromolecular target against proliferative and parasitic diseases. LbDHODH was successfully cloned, expressed and purified. The target enzyme was characterized by kinetic studies and its structure was solved by X-ray crystallography techniques. Inhibition assays were performed in presence of orotate, product of catalysis and natural inhibitor of DHODH. Its inhibitory potential was evaluated by the estimative of IC50 and the protein-ligand interaction was characterized by crystallographic studies. In silico and in vitro strategies were used in the search for LbDHODH inhibitors. Cross-validation studies were performed against the human homologue enzyme. Inhibitors displaying higher selectivity index were evaluated against both promastigote and amastigote forms of Leishmania braziliensis. Our work allowed the identification of a new class of compounds that display selective inhibition of LbDHODH and show leishmanicidal activity. They will be used as prototypes for the development of new generations of LbDHODH inhibitors. Moreover, our pipeline can be used to screen large number of chemical libraries as tool for the identification of different chemical entities that can contribute to the development of new therapeutic strategies for the treatment of leishmaniasis.