Com o objetivo de avaliar o envolvimento da resposta imune humoral no desenvolvimento da anemia e das alterações quantitativas e qualitativas das plaquetas na erliquiose canina, sete cães adultos, livres de infecção, foram inoculados com E. canis e acompanhados durante 10 semanas. Três cães permaneceram como controles. Os animais foram submetidos a exame físico diário e avaliação laboratorial (hemograma, contagem de plaquetas, mielograma, bioquímica sangüínea, fragilidade osmótica eritrocitária e teste de Coombs), reação em cadeia da polimerase (PCR), pesquisa de anticorpos anti-E. canis, antiplaquetários e antimegacariocíticos (IFI), e teste da atividade de agregação plaquetária, em diferentes momentos durante o período de observação. Febre, esplenomegalia, linfadenomegalia, trombocitopenia, anemia não regenerativa, aumento das atividades séricas da ALT, AST e FA foram as principais alterações clínicas e de patologia clínica observadas, com pico máximo entre o 21&ordm; e 28&ordm; dias pós-infecção. Houve diminuição da capacidade de agregação plaquetária dos animais infectados (p<0,05) nos dias 14, 21, 28 e 35 pós-infecção e aumento do número das células megacariocíticas, principalmente seus precursores (megacarioblastos e pró-megacariócitos) no 14&ordm; dia pós-infecção. Não foram detectados anticorpos antiplaquetários ou antimegacariocíticos. O teste de Coombs, bem como a fragilidade osmótica eritrocitária, mantiveram-se inalterados, comprovando não ter ocorrido hemólise imunomediada. Conclui-se que a anemia desenvolvida durante a fase aguda da infecção experimental por E. canis, de característica eritroregenerativa, ainda que tardia, pelo menos nos animais estudados, não teve envolvimento de mecanismo imunológico direcionado contra as hemácias, e ainda, que a causa da trombocitopenia e da hipofunção plaquetária observada durante esta fase da doença não parece estar relacionada ao desenvolvimento de mecanismos imunológicos direcionados contra as plaquetas ou seus precursores. / In order to determine the involvement of humoral and immune response on development of anemia and quantitative and qualitative platelets disorders in experimental canine ehrlichiosis, seven adult naïve dogs were inoculated with E. canis and followed during 10 weeks. Three dogs were remained as control. Daily clinical evaluation and laboratorial exams (hematological, platelet counts, bone marrow evaluation, biochemistry, erythrocyte osmotic fragility and Coombs? test) polymerase chain reaction assay (PCR), anti-E.canis, antiplatelet and antimegakaryocyte antibodies detection (IFA) and platelet aggregation studies were evaluated at different moments during all the experimental period. Fever, splenomegaly, lymphadenomegaly, thrombocytopenia, non-regenerative anemia and increase on liver?s enzymes serum activity (ALT, AST and ALP) were the main clinical and laboratorial findings observed, with the highest point between days 21 and 28 post-infection. The infected animals showed a decrease in platelet aggregation responses (p<0.05) on days 14, 21, 28 and 35 post-infection and increase of megakaryocytic cells, mainly its precursors (megakaryoblasts and promegakaryocytes) on day 14 post-infection. It weren?t detected any antiplatelet or antimegakaryocyte antibodies, as well as, there were no variations on erythrocyte osmotic fragility and Coombs? tests results, which confirms the absence of immune-mediated hemolysis. It is concluded that the anemia observed during the experimental acute phase of the E. canis infection, with regenerative pattern, even though late, at least in the studied animals, wasn?t related with immune mechanism against the red blood cells, and that, the thrombocytopenia and platelet dysfunction observed during this phase of the disease don?t seen to be related with immune mechanisms against platelets or its precursors.

Introdução: A diarréia por Clostridium difficile é uma das principais causas de diarréia infecciosa associada à assistência à saúde. Objetivo: Descrever os casos e a incidência de diarréia por C. difficile em pacientes hematológicos e TCTH internados na enfermaria da Hematologia e do Transplante de Medula óssea do Hospital das Clinicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo (HC-FMUSP). Métodos: Foi utilizada uma ficha para coleta de dados de todos os pacientes na unidade de hematologia e TCTH do HC-FMUSP que tinham resultado positivo para toxina A/B do C. difficile durante o período de janeiro 2007 a junho de 2011 e criado um banco de dados no programa Epiinfo. Os desfechos avaliados foram forma grave de doença e óbito até 14 dias da diarréia. Qui-quadrado para tendência foi usado para avaliar a incidência de diarréia por C. difficile durante o período do estudo. Resultados: Um total de 69 episódios foi identificado em 64 pacientes em 439 pacientes suspeitos. Na distribuição temporal o qui-quadrado para tendência evidenciou que o número de casos suspeitos de diarréia por C. difficile permaneceu estável (p=0,418), em contraste com o aumento do número de casos confirmados (p=0,0006). A incidência de diarréia por C. difficile por 1.000 pacientes variou de 0,65 a 5,45 durante o período do estudo. O qui-quadrado para tendência evidenciou aumento do número de casos confirmados de C. difficile nas unidades de TMO (p=0,00004) e Hematologia (p=0,006). Já, a incidência de diarréia por C. difficile por 1.000 neutropênicos dia variou de 0,78 a 5,45 durante o período do estudo. A maioria 68% dos pacientes era do gênero masculino, a média de idade foi 38 anos. A doença de base mais comum foi Leucemia mielóide aguda (44%), destes 46% estavam neutopênicos, 45% TCTH alogênicos, 88% dos pacientes usaram antibióticos prévios. A maioria dos pacientes 88% recebeu tratamento com metronidazol via oral, 37% tiveram resposta parcial nos primeiros sete dias de tratamento, 57% terminaram o tratamento e três pacientes tiveram recidiva, 24% evoluíram para óbito. A análise bivariada dos fatores de risco associados com a forma grave de diarréia por C. difficile, identificou o tipo de transplante alogênico como o único fator de risco significantivo, já a análise multivariada não identificou nenhum fator de risco independente. A análise bivariada de fatores de risco associados com óbito até 14 dias do diagnóstico de diarréia por C. difficile, identificou o tipo de transplante alogênico, forma grave de doença, internação em UTI e uso de linezolida como fatores de risco para óbito e Linfoma como protetor. Os fatores de risco independentes associados com óbito foram forma grave de doença, internação em UTi e uso de linezolida. Conclusão: A incidência de infecção por C. difficile durante o período do estudo aumentou, entretanto, a manifestação da forma grave da doença se manteve estável. Os fatores de risco independentes associados com óbito foram forma grave de doença, internação em UTI e uso de linezolida / Introduction: Diarrhea caused by Clostridium difficile is one of the main causes of infectious diarrhea associated with healthcare. Objective: To describe cases and the incidence of diarrhea by C.difficile in hematological and HSCT inpatients of the infirmary of Hematology and Bone Marrow Transplant of the Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo (HC-FMUSP). Methods: A form was used to collect data from all patients in the hematology and HSCT unit of the HCFMUSP who showed positive results for toxin A/B of the C. difficile during the period from January 2007 to June 2011, and to create a databank in the Epiinfo program. The outcomes evaluated were the severe form of the disease and death within 14 days of the [onset of] diarrhea. The Chi-squared test for tendency was used to evaluate the incidence of diarrhea by C. difficile during the study period. Results: A total of 69 episodes were identified in 64 patients in 439 suspect patients. In the temporal distribution, the chi-squared test for tendency evidenced that the number of cases of suspected diarrhea due to C. difficile remained stable (p=0.418), in contrast with the increase in number of confirmed cases (p=0.0006). The incidence of diarrhea by C. difficile per 1,000 patients varied from 0.65 to 5.45 during the study period. The chi-squared test for tendency demonstrated an increase in number of cases confirmed of C. difficile in the BMT TMO (p=0.00004) and Hematology (p=0.006) units. On the other hand, the incidence of diarrhea by C. difficile per 1,000 neutropenic individualsday varied from 0.78 to 5.45 during the study period. Most of the 68% of patients were of the male gender; the average age was 38 years. The most common underlying disease was acute myeloid leukemia (44%); of these, 46% were neutropenic, 45% HSCT allogeneic, and 88% of the patients had previously used antibiotics. Most of the patients (88%) received treatment with oral metronidazole, 37% had a response in the first seven days of treatment, 57% finished the treatment, three patients experienced relapse, and 24% died. The bivariate analysis of the risk factors associated with the severe form of diarrhea by C. difficile, identified the type of allogeneic transplant as the only significant risk factor, whereas the multivariate analysis did not identify any independent risk factor. Bivariate analysis of risk factors associated with death within 14 days of the diagnosis of diarrhea due to C. difficile, identified the type of allogeneic transplant, severe form of the disease, stay in the ICU, and use of linezolide as risk factors for death, and Lymphoma as a protector. Independent risk factors associated with death were the severe form of the disease, stay in the ICU, and use of linezolide. Conclusion: The incidence of infection by C. difficile during the study period increased; nevertheless, the manifestation of the severe form of the disease remained stable. The independent risk factors associated with death were the severe form of the disease, stay in the ICU, and use of linezolide

O objetivo do presente trabalho foi avaliar os parâmetros de vitalidade, comportamentais, laboratoriais e perfil oxidativo de neonatos muares, comparando-os com os equinos, durante o primeiro mês de vida. Os neonatos foram acompanhados logo após o nascimento, sendo avaliado o escore Apgar nos momentos 0, 5, 10, 30 e 60 minutos pós-parto, além do comportamento (tempo para se posicionar em decúbito esternal, iniciar reflexo de sucção, levantar, iniciar ingestão de colostro e eliminar mecônio) e a necessidade de realização de enema. Observou-se o tempo de delivramento e peso dos anexos fetais e dos potros. A proporção do peso dos potros em relação aos anexos fetais foi calculada no grupo dos muares. Foram realizados exames hematológicos e bioquímicos. Para a avaliação do perfil oxidativo foi mensurada a peroxidação lipídica utilizando o TBARS e a oxidação de proteína. Como sistema antioxidante foi mensurada a atividade enzimática da glutationa peroxidase e superóxido dismutase, e não enzimática as quantidades séricas de bilirrubinas total, indireta e direta. O escore Apgar ao nascimento, 5, 10 e 30 minutos de vida foi maior nos muares. Os muares iniciaram a ingestão de colostro mais precocemente que os equinos, e demoraram mais para eliminar o mecônio. O tempo para delivramento dos anexos fetais foi menor nas éguas gestantes de muar. Os demais parâmetros comportamentais e os pesos dos potros e anexos foram semelhantes nos dois grupos. Não houve correlação entre os pesos dos neonatos e dos anexos fetais nos muares. Nos muares, CHCM, plaquetas, albumina, cálcio, cloro, ferro e magnésio foram maiores. A contagem dos leucócitos totais, neutrófilos segmentados, linfócitos, assim como a relação neutrófilo:linfócito, fibrinogênio, BT, BD, BI, colesterol e CK foi menor nos muares quando comparado aos equinos. Houve interação entre grupo e tempo na contagem de hemácias, hematócrito, hemoglobina, leucócitos totais, neutrófilos segmentados, glicose, ureia, albumina, triglicérides, colesterol, CK e ferro. No perfil oxidativo não houve interação entre grupo e tempo para nenhuma variável analisada. O TBARS foi menor no grupo dos muares, enquanto que a atividade enzimática da GPx foi maior. Ocorreu uma queda progressiva do TBARS nos neonatos, sendo que a GPx se manteve constante do nascimento até os 7 dias, tendo um aumento significativo aos 30 dias. A oxidação de proteína não teve efeito de tempo e de grupo. A SOD não foi influenciada pelo grupo, permanecendo constante nos tempos analisados, com exceção da 1 hora, com menor atividade em relação às 6 horas, 7 e 30 dias. As concentrações das bilirrubinas foram menores nos muares. Tendo em vista os resultados encontrados, este estudo oferece dados de referência comportamentais, hematológicos, bioquímicos e oxidativos para muares saudáveis no primeiro mês de vida, podendo ser útil para o diagnóstico e tratamento de neonatos comprometidos. / The aim of the present study was to evaluate vitality, behavioral and laboratory parameters and oxidative profile of newborn mules, comparing with horses during the first month of life. The foals were monitored just after delivery and Apgar score was assessed at 0, 5, 10, 30 and 60 minutes postpartum. Foals postpartum behavior were timed (time to get in sternal recumbency, to start suckle reflex, to stand, to ingest colostrum and to eliminate meconium) and the need of enema was evaluated. Time to eliminate placenta and weight were recorded and foals weight. The relationship between placental and foal weight was calculated for the mules group. Laboratory evaluation included hematological and biochemical parameters, while lipid peroxidation was measured using TBARS and protein oxidation. Glutathione peroxidase activity, superoxide dismutase and total, indirect and direct bilirubin were used to evaluate the antioxidant profile. Apgar score at birth, 5, 10 and 30 minutes after birth was higher in mules. Mules started nursing colostrum earlier than horses, however elimination of meconium started later. Mares pregnant with mules eliminated fetal membranes earlier. Foals and placental weight were similar between groups. There was no correlation between placental and foals weight. Mules had higher MCHC, platelets, albumin, calcium, chloride, iron and magnesium, while total leukocytes, segmented neutrophils, lymphocytes, neutrophil:lymphocyte ratio, fibrinogen, BT, BD, BI, cholesterol and CK were lower in mules compared to horses. Interaction was found between group and time for red blood cells, hematocrit, hemoglobin, total leukocytes, segmented neutrophils, glucose, urea, albumin, triglycerides, cholesterol, CK and iron. Oxidative profile results showed no interaction between group and time for the analyzed variables. TBARS was lower in mules, while GPx activity was higher. There was a progressive TBARS decrease over time in the studied neonates, with GPx remaining constant at birth and 7 days, with a significant increase at 30 days. Time and group did not affect protein oxidation. SOD did not have a group effect and its activity was constant between analyzed times, except at 1 hour, when activity was lower than 6 hours, 7 and 30 days. Bilirrubins were lower in mules. Based on the differences found between species, this study offers reference values for behaviour, hematology, biochemistry and oxidative aspects in healthy mule neonates during the first month of life, and it can be useful for diagnosis and treatment of compromised neonates.

Foram coletadas 137 amostras sanguíneas de 132 espécimes diferentes, pertencentes a sete espécies de Strigiformes (n=92) e onze espécies de Falconiformes (n=45), entre os meses de setembro de 2008 e julho de 2009. As amostras foram submetidas a hemograma completo, pesquisa de hemoparasitos através da avaliação do esfregaço sanguíneo, sexagem através da técnica de PCR e mensuração da atividade de colinesterases plasmáticas através do método de Ellman (1961). Apenas sete corujinhas-do-mato (Megascops choliba) apresentaram hemoparasitos (5,3 % do total de rapinantes). Houve diferença significativa conforme o estado de saúde da ave, sendo que a todos os animais clinicamente hígidos não estavam infectados, porém 20,4% dos animais com desordens clínicas apresentavam hemosporídeos. Quantitativamente, a parasitemia mediana dos animais infectados foi de 3,8 hemácias parasitadas por 10.000 hemácias, um índice de infecção relativamente baixo. A grande maioria dos parâmetros hematológicos não apresentou diferenças estatísticas em função da presença ou ausência de hemoparasitos, o que na maioria dos casos caracterizou uma infecção branda e pouco patogênica. A atividade de colinesterases plasmáticas apresentou uma distribuição normal, com uma média geométrica de 0,8333 micromoles/mL e desvio padrão geométrico de 1,7087 µmols/mL. A atividade de colinesterases plasmáticas apresentou diferenças estatísticas significativas entre Falconiformes (0,5705±1,6497 µmols/mL) e Strigiformes (1,0070±1,5620 µmols/mL). Não houve diferenças significativas entre machos ou fêmeas e adultos ou jovens dentre os Falconiformes ou Strigiformes. Falconiformes não hígidos apresentaram valores surpreendentemente mais baixos do que os clinicamente hígidos. Entre os Strigiformes, os espécimes de cativeiro apresentaram valores mais baixos de atividade de colinesterases plasmáticas do que os de vida livre. A atividade de colinesterases plasmáticas foi significativamente diferente entre os animais com hemoparasitos (mediana geométrica = 2,0132 µmols/mL) e sem hemoparasitos (mediana geométrica = 0,8331 µmols/mL). Este estudo contribui com informações relevantes sobre a ocorrência de hemosporídeos em aves de rapina do Estado de São Paulo, alertando as Instituições sobre a necessidade de monitoração destes protozoários sanguíneos. Além disso, contribui com dados inéditos sobre a atividade de colinesterases plasmáticas em rapinantes. / 137 blood samples were collected from 132 different specimen, belonging to seven species of Strigiformes (n=92) and eleven species of Falconiformes (n=45), from September 2008 to July 2009. Samples were submitted to complete hemogram, survey for hemoparasites through evaluation of blood smears, sex identification by PCR and measurement of plasmatic cholinesterases by the method of Ellman (1961). Only seven black-capped-screech-owls (Megascops choliba) were positive for hemoparasites (5,3% of total raptors). There were significative difference according to avian health status; all the clinicaly higid animal were not infected, but 20,4% of animals with clinical desorders presented haemosporidians. Quantitatively, the average parasitemia was 3,8 parasited erythrocytes in 10.000 erythrocytes, a infection rate relatively low. The most of hematologic parameters did not present statistic differences in function of presence or absence of hemoparasites, what in most of the cases characterized a low and not much pathogenic infection. The plasmatic cholinesterase activity presented normal distribution, with geometric average of 0,8333 micromoles/mL and geometric standard deviation of 1,7087 µmols/mL. The plasmatic cholinesterase activity presented statistic differences between Falconiformes (0,5705±1,6497 µmols/mL) and Strigiformes (1,0070±1,5620 µmols/mL). There were not significative differences between males of females and adults or youngs between Falconiformes or Strigiformes. Non-higid Falconiformes presented surprisiling much low values than those clinically higid. Between Strigiformes, the captivity specimens present much lower plasmatic cholinesterase activity values than free ranging animals. The plasmatic cholinesterase activity was signifactively different among animal with hemoparasites (geometric average = 2,0132 µmols/mL) and without hemoparasites (geometric average = 0,8331 µmols/mL). This research contributes with relevant information about the haemosporidian occurence in raptors of State of São Paulo, alerting the Institutions about the necessity of monitorizing haemoprotozoa. Besides that, contributes with unpublished data about the plasmatic cholinesterase activity in raptors.

O urubu-de-cabeça-preta (Coragyps atratus) é uma ave de vida livre com ampla distribuição no Brasil. Esta espécie é comumente encontrada em áreas urbanas concentrando-se em locais de deposição de lixo. O fato de se alimentarem de carcaças em decomposição facilita o contato de urubus-de-cabeça-preta com muitos patógenos. No entanto, ainda não está clara qual a real implicação de muitos desses microrganismos para a saúde dos mesmos. Assim, o objetivo desse estudo foi investigar a ocorrência de alguns patógenos selecionados, avaliar o perfil hematológico e a microbiota cloacal de C. atratus em ambiente urbano. Para isso, amostras de sangue, soro e swab cloacal foram obtidos de 120 urubus de vida-livre capturados na Fundação Parque Zoológico de São Paulo, SP. A prova de soroaglutinação rápida (SAR) foi utilizada na detecção de anticorpos contra Salmonella Pullorum/Gallinarum, Mycoplasma synoviae e M. gallisepticum. O teste de aglutinação em látex (AL) foi utilizado para a pesquisa de antígeno de Cryptococcus neoformans. Foram utilizadas técnicas convencionais de hematologia, microbiologia e testes de sensibilidade microbiana. Das amostras de soro analisadas pela SAR, 15% foram reagentes para M. gallisepticum. Anticorpos contra S. Pullorum/Gallinarum e M. synoviae não foram detectados. Nenhuma amostra foi positiva para C.neoformans ou para hemoparasitas. A média e o desvio padrão dos seguintes valores hematológicos foram obtidos para 61 aves: eritrócitos (1.8x10¹²/L); leucócitos (13,11x10/L); hemoglobina (10,4 g/dL); hematócrito (48,44%); VCM (275,1 fL); HCM (42 pg); CHCM (15,8 g/dL); proteína sérica total (3,76 g/dL); heterófilos (78%); linfócitos (13,5%); eosinófilos (5,4%); monócitos (2,8%); basófilos (0,1%); trombócitos (14,14x10/L). De 75 colônias bacterianas isoladas de 20 swabs cloacais, 78,7% foram Gram-positivas e 21,3% Gram-negativas, sendo Enterococcus sp. o gênero mais frequente. Aproximadamente 86,7% das cepas isoladas foram resistentes a pelo menos um dos antibióticos testados. Cepas de Bacillus sp. e Enterococcus casseliflavus apresentaram resistência a sete dos oito antibióticos testados. Leveduras não foram isoladas em nenhumas das culturas. As informações obtidas nessa pesquisa são de suma importância, uma vez que poucos estudos avaliam o estado de saúde de urubus no mundo. / Black vulture (Coragyps atratus) is a free-living bird widely distributed across Brazil. These birds feed on rotting carcasses and large groups are commonly found in urban areas, including rubbish dumps. By feeding on decomposing carcasses, they are often exposed to innumerous pathogens. However, the role of infectious microorganisms on vultures health still need to be clarify. Thus, the aim of this study was to investigate the occurrence of selected infectious agents, the hematological profile and cloacal microbiota of black vulture in urban areas. Therefore, blood, serum and cloacal swabs were obtained from 120 free-living vultures trapped in Fundação Parque Zoológico de São Paulo, SP. The rapid seroagglutination test (RST) was performed for detection of antibodies against Salmonella Pullorum/Gallinarum, M. synoviae and M. gallisepticum. Furthermore, latex agglutination test was used to detect Cryptococcus neoformans \' antigen. Conventional techniques for hematology, microbiology and antimicrobial susceptibility testing were performed. From the serum samples analyzed by RST, 15% were positive for M. gallisepticum, antibodies against S. Pullorum/Gallinarum and M. synoviae were not detected. None sample was positive to Cryptococcus neoformans or hemoparasites. Mean and standard deviation from the following hematological values were obtained for 61 birds: erythrocytes (1.8x10¹²/L); leukocytes (13.11x10/L); hemoglobin (10.4 g/dL); hematocrit (48.44%); MCV (275,1 fL); MCH (42 pg); MCHC (15,8 g/dL); total serum protein (3.76 g/dL); heterophils (78%); lymphocytes (13.5%); eosinophils (5.4%); monocytes (2.8%); basophils (0,1%); thrombocyte (14.14x10/L). From 75 bacterial colonies isolated from 20 cloacal swabs, 78.7% were Gram-positive and 21.3% were Gram-negative. Enterococcus sp. was the most frequent genus. Approximately 86.7% of the isolated strains were resistant to at least one of the antibiotic tested. Bacillus sp. and Enterococcus casseliflavus strains shown resistance to seven in eight antibiotics tested. Yeasts were not isolated. The information obtained in this research is of paramount important since few studies have been carried out on the vultures health condition in the world.

O aquarismo é uma atividade mundialmente difundida e um segmento extremamente grande da indústria de animais de estimação. O Brasil, em 2007, exportou o valor de US$ 5.871.576,73 em peixes. Devido à biologia dos peixes, todo seu manejo pode desencadear uma resposta fisiológica de estresse, que, dependendo da duração, tipo e espécie de manejo leva a uma resposta imunossupressora, que pode acarretar doença e morte aguda e consequentemente grande prejuízo à produção desses animais. O uso de imunoestimulantes, como suplementação dietética pode prover defesa inata e resistência a patógenos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a viabilidade da utilização de mananoligossacarídeo de levedo de cerveja (Saccharomyces cerevesiae), como imunoestimulante adicionado à ração oferecida a peixes da espécie Cyprinus carpio durante 45 dias. Para avaliar a imunidade dos peixes, foram feitas avaliações hematológicas periódicas e, no final do período determinado, os peixes foram desafiados imunologicamente com estresse e infectados com Aeromonas hydrophila. As carpas do grupo controle tiveram uma taxa de crescimento de 0,05 g/dia, conversão alimentar de 14,09 e eficiência protéica de 0,25, enquanto o grupo imunoestimulado obteve a taxa de crescimento de 0,11g/dia, conversão alimentar de 6,15 e eficiência protéica de 0,57. Não houve diferença estatística entre o resultado da hematologia dos animais do grupo controle e do grupo imunoestimulado. Dos animais infectados experimentalmente, 88% morreram em menos de 24 horas por choque endotóxico e, no exame post mortem, não houve diferença entre os grupos. A carpa que recebeu alimentação controle e foi infectada teve anemia macrocítica normocrômica, trombocitopenia, linfopenia, monocitose e aumento do número de CGE. A carpa que recebeu alimentação com MOS, foi infectada e sobreviveu, não apresentou alteração nos parâmetros hematológicos. A ração com MOS foi zootecnicamente melhor para a nutrição das carpas. Com base na taxa de sobrevivência e na avaliação hematológica, não há como responder se a ração suplementada com MOS foi imunologicamente melhor do que a ração controle. / The aquarium hobby is an activity wordwide spread and a segment extremely large of the pet industry. Brazil, in 2007, exported an amount of US$ 5.871.576,73 of fishes. Due to the biology of the fishes, all its management can trigger a physiological response leading to stress, that depending on the duration, type and specie, can conclude in immunosuppressive response, leading to disease and acute death, creating a great prejudice. The use of immunostimulants, as dietary supplementation may provide an innate defense against pathogens. This study aims to evaluate the feasibility of using mannan oligosaccharide of brewer yeast (Saccharomyces cerevesiae) as immunostimulants added to the feed for koi fishes (Cyprinus carpio) during 45 days. To evaluate the immunity of the fishes, periodic hematologic evaluations were made and at the end of the determined period, the fishes were immunologically challenged with stress and inoculation with Aeromonas hydrophila. The control group had a growth rate of 0,05g/day, feed conversion of 14,09 and protein efficiency ratio of 0,25, while the treatment group had growth rate of 0,11g/day, feed conversion of 6,15 and protein efficiency ratio of 0,57. The hematological results showed no statistical difference between the control group and immunostimulant group according. Analyzing the experimental infected animals, 88% died within 24 hours, due to endotoxic shock, and in the post mortem examination, there were no difference between groups. The koi that received control feed and it was infected had macrocytic normochromic anemia, thrombocytopenia, lymphopenia, monocytosis and increased of special granulocytic cells. The koi that received the MOS feed, was infected with A. hydrophila and survived, had no alteration on haematological parameters. The feed with MOS was zootechnical better than the control feed to carps. Based on the rate of survival and hematology, there are no possibility of answering if supplemented feed with MOS was immunologic better than control feed.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:18:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Clara da Silva Negreiros Botelho.pdf: 723451 bytes, checksum: 1e37e85e4e70439cfb2171e80f21bc04 (MD5) Previous issue date: 2010-03-08 / The canine monocytic ehrlichiosis, an infectious disease of worldwide distribution, is caused by the rickettsia Ehrlichia canis, an obligatory intracellular parasite of mononuclear cells and transmitted by the dog tick Rhipicephalus sanguineus. The clinical and hematological abnormalities are varied, depending on the strain of Ehrlichia spp., the immune response of the dog and the concomitant presence of other diseases. Among the various hematological disorders, thrombocytopenia is a common feature. The disease can manifest itself through a variety of clinical veterinarians, particularly those working in endemic areas, should always consider the possibility of infection with Ehrlichia spp., especially in dogs with nonspecific signs of illness. This study aimed to evaluate clinical and hematologic recuperation of dogs naturally infected with Ehrlichia sp. and treated with doxycycline. The trial was performided at the Laboratory of Experimental Chemotherapy from the Department of Animal Parasitology of the Institute of Veterinary of the Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. About the total of 90 Beagles dogs kept in kennels experimental laboratory, twelve were selected, with clinical signs such as fever, anorexia, vomiting, weight loss, pale mucous membranes, hepatomegaly and splenomegaly and the presence of ticks R. sanguineus and find hematologic thrombocytopenia. The laboratory diagnosis was confirmed by direct identification of morulae of Ehrlichia sp. in blood smears stained with Giemsa. After weighing all of 12 dogs, they were individually treated with doxycycline at a dose of 10mg/kg body weight every 12 hours for 21 days, during which assessments were made of clinical and hematologic exams. Some clinical changes were observed during the evaluation period as fever, anorexia, vomiting, diarrhea, pale mucous membranes, splenomegaly and lymphadenopathy presenting these standard parameters the 21 days of treatment. The abnormalities found were thrombocytopenia and normochromic normocitic anemia. In the days +14 and +21, the mean counts of red blood cells and hematocrit value were within normal physiological parameters for the species. There was a statistically significant difference between days -1 and +21 by red blood counts and hematocrit values. At the end of treatment, all animals were normalized to platelet count, statistically significant differences between days -1 and +21. It is concluded that there was clinical-hematological normalization at the end of the treatment period and that it administered at a dose of 10mg/kg over 21 days produced no clinical and hematological reactions. Key words: Antibioticotherapy, Ehrlichia spp., Hematology. / A ehrlichiose monoc?tica canina, doen?a infecciosa de distribui??o mundial, ? causada pela riqu?tsia Ehrlichia canis, parasita intracelular obrigat?rio de c?lulas mononucleares caninas e transmitida pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus. As anormalidades cl?nicas e hematol?gicas s?o variadas, dependendo da linhagem de Ehrlichia spp., da resposta imune do c?o e da presen?a concomitante de outras doen?as. Entre as diversas anormalidades hematol?gicas, a trombocitopenia ? um achado predominante. Como a doen?a pode se manifestar atrav?s de uma grande variedade de sinais cl?nicos, os m?dicos veterin?rios, particularmente aqueles que trabalham em regi?es end?micas, devem sempre considerar a possibilidade de infec??o por Ehrlichia spp., especialmente em c?es com sinais n?o espec?ficos da doen?a. O presente estudo teve como objetivo avaliar a recupera??o cl?nicohematol?gica de c?es naturalmente infectados por Ehrlichia sp. e tratados com doxiciclina. O estudo foi realizado nas depend?ncias do Laborat?rio de Quimioterapia Experimental em Parasitologia Veterin?ria do Departamento de Parasitologia Animal da UFRRJ. Selecionou-se 12 animais da ra?a Beagle, do total de 90 c?es mantidos no canil experimental do laborat?rio, com sinais cl?nicos, como febre, anorexia, v?mito, emagrecimento, mucosas hipocoradas, hepato e esplenomegalia, al?m da presen?a de carrapatos R. sanguineus e do achado hematol?gico de trombocitopenia. O diagn?stico laboratorial foi confirmado pela identifica??o direta de m?rulas de Ehrlichia sp. em esfrega?os sangu?neos corados por Giemsa. Ap?s a pesagem dos 12 c?es, os mesmos foram tratados individualmente com doxiciclina, na dose de 10mg/kg de peso corporal, por via oral, a cada 12 horas por um per?odo de 21 dias, durante os quais foram realizadas avalia??es de par?metros cl?nicos e hematol?gicos. Algumas altera??es cl?nicas foram observadas ao longo do per?odo de avalia??o como febre, anorexia, v?mito, diarr?ia, mucosas hipocoradas, esplenomegalia e linfadenomegalia apresentando-se estes par?metros normalizados ao 21? dia de tratamento. As altera??es hematol?gicas encontradas foram trombocitopenia e anemia normocit?ca normocr?mica. Nos dias +14 e +21, as contagens m?dias de hem?cias e valor de hemat?crito estavam dentro dos par?metros fisiol?gicos normais para a esp?cie. Houve diferen?a estat?stica significativa entre os dias -1 e +21 na contagem de hem?cias e nos valores de hemat?crito. Quanto a trombocitopenia, no fim do tratamento, todos animais estavam com plaquetometria normalizada, havendo diferen?a estat?stica significativa entre os dias -1 e +21. Conclui-se que houve uma normaliza??o dos quadros cl?nico-hematol?gicos ao final do per?odo de tratamento e que o mesmo administrado na dose de 10mg/Kg ao longo de 21 dias n?o produziu rea??es cl?nicas e hematol?gicas adversas. Palavras-chave: Antibioticoterapia, Ehrlichia spp., Hematologia.

Com o objetivo de avaliar a evolução clínica, a persistência da infecção e a resposta imune humoral e celular, sete cães adultos desprovidos de anticorpos anti-Ehrlichia canis foram inoculados com E. canis e acompanhados durante vinte semanas. Três cães permaneceram como controle. Exame físico diário e avaliação laboratorial (hemograma, bioquímica sanguínea, fragilidade osmótica eritrocitária, teste de Coombs, teste de redução de tetrazólio nitroazul), reação em cadeia da polimerase (PCR), pesquisa de anticorpos anti-E. canis (IFI) e quantificação dos linfócitos T CD4+ e CD8+ por citometria de fluxo foram realizados, em diferentes momentos, durante o período de observação. A infecção foi comprovada pela presença de mórulas em linfócitos/monócitos no sangue circulante, soroconversão, com títulos de anticorpos entre 1.280 a 20.480 e a reação positiva ao PCR. Febre, esplenomegalia, linfadenomegalia, trombocitopenia, anemia não regenerativa, aumento das atividades séricas de ALT, AST e FA, foram as principais alterações clínicas e de patologia clínica observadas, com pico máximo entre 21 e 28 dias. Também nesses momentos foram observados o aumento de linfócitos T CD8+ e a diminuição dos linfócitos T CD4+. O aumento do metabolismo oxidativo dos neutrófilos, quando estimulados, entre o 28&ordm; e 35&ordm; dia p.i., o aumento de reticulócitos na circulação sanguínea nessa ocasião, a redução dos linfócitos T CD4+ e o aumento de linfócitos T CD8+ indicaram a resposta do hospedeiro, na tentativa de eliminar a infecção. No auge da infecção entre o 21&ordm; e 49&ordm; dia p.i., houve a inversão da relação CD4:CD8, principalmente o aumento dos linfócitos T CD8+. A fragilidade osmótica eritrocitária manteve-se inalterada, bem como o teste de Coombs, comprovando não ter ocorrido a hemólise imunomediada. Nos cães infectados não foram detectados a presença de anticorpos IgM anti-E. canis em nenhum momento de observação. O aumento de reticulócitos na circulação sanguínea a partir do 28&ordm; dia p.i. sugere ser temporária a supressão da atividade eritropoética. O baixo número de linfócitos T CD4+, coincidindo com a esplenomegalia e a PCR positiva até a vigésima semana p.i., sugere a relação entre a persistência da infecção, com a localização esplênica de E. canis e ativação de um mecanismo de escape pelo microrganismo, representado pelo baixo limiar de ativação de linfócitos T CD4+. Por outro lado, o aumento de linfócitos T CD8+ no auge da infecção coincidindo com a melhora clínica, sugere o envolvimento do mecanimo de citotoxicidade na patogenia da erliquiose canina. O bloqueio parcial da atividade dos linfócitos T CD4+, constitui-se provavelmente em um dos mecanismos de escape da E. canis, enquanto a contínua liberação de TNF-&alpha; pelas células citotóxicas, como parte do mecanismo do hospedeiro para a eliminação do parasita pode resultar na pancitopenia terminal observado freqüentemente nos cães cronicamente infectados por E. canis. / The clinical evolution, the persistence of infection and humoral and cellular immune response were evaluated on seven adult naïve dogs experimentally inoculated with an E. canis strain and followed during 20 weeks. Three dogs were remained as control. Daily clinical evaluation and laboratorial exams (hematological, biochemistry, erythrocyte osmotic fragility, Coombs´ test, neutrophils oxidative metabolism by nitroblue tetrazolium reduction test), polymerase chain reaction assay (PCR), anti-E. canis antibodies detection by indirect immunofluorescence assay (IFA) and quantification of CD4+ and CD8+ T lymphocytes by flow cytometry technique were evaluated, at different moments during all the experimental period. The presence of E. canis morulae, seroconversion with high antibodies titers (1,280 to 20,480) and positive PCR had confirmed the infection in all the inoculated animals. Fever, splenomegaly, lymphadenomegaly, thrombocytopenia, non-regenerative anemia and increase on liver´s enzymes serum activity (ALT, AST and ALP) were the main clinical and laboratorial changes observed, with the highest point between days 21 and 28 post-infection (p.i.). Also at these moments were observed increase of CD8+ T lymphocytes and reduction of the CD4+ T lymphocytes. The increase in the stimulated neutrophils oxidative metabolism between days 28 and 35 p.i., and the increase of reticulocytes in the same period, allied to the reduction of the CD4+ T lymphocytes and the increase of CD8+ T lymphocytes, indicated the host´s immune response in the attempt to eliminate the infection. On the peak of the infection, from the 21st to the 49th post-infection day, there was an inversion in the CD4:CD8 ratio of blood lymphocytes, mainly caused by increase of the CD8+ T lymphocytes. There was no variation on erythrocyte osmotic fragility and Coombs? test results, which suggested the absence of immune-mediated hemolysis. It wasn´t detected any anti-E. canis IgM antibodies in the infected group of dogs. The increase of reticulocytes only from the 28th post-infection day suggests a temporary erythropoietic suppression. The low number of CD4+ T lymphocytes, coinciding with the splenomegaly and the positive PCR until the twentieth week p.i., suggest that there is a relation between the persistent infection, the splenic localization of E. canis and an evasion mechanism, represented for the low threshold of activation of CD4+ T lymphocytes. On the other hand, the increase of CD8+ T lymphocytes in the peak of infection, coinciding with clinical improvement, suggests the involvement of the cytotoxicity mechanism on canine ehrlichiosis pathogenesis. The partial blockage of CD4+ T lymphocytes activity could probably be one of the E. canis escape mechanisms, while the continue TNF-&alpha; release by host´s cytotoxic cells, as a mechanism to eliminate the parasite, could result in terminal pancytopenia commonly observed in dogs chronically infected with E. canis.

O aquarismo é uma atividade mundialmente difundida e um segmento extremamente grande da indústria de animais de estimação. O Brasil, em 2007, exportou o valor de US$ 5.871.576,73 em peixes. Devido à biologia dos peixes, todo seu manejo pode desencadear uma resposta fisiológica de estresse, que, dependendo da duração, tipo e espécie de manejo leva a uma resposta imunossupressora, que pode acarretar doença e morte aguda e consequentemente grande prejuízo à produção desses animais. O uso de imunoestimulantes, como suplementação dietética pode prover defesa inata e resistência a patógenos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a viabilidade da utilização de mananoligossacarídeo de levedo de cerveja (Saccharomyces cerevesiae), como imunoestimulante adicionado à ração oferecida a peixes da espécie Cyprinus carpio durante 45 dias. Para avaliar a imunidade dos peixes, foram feitas avaliações hematológicas periódicas e, no final do período determinado, os peixes foram desafiados imunologicamente com estresse e infectados com Aeromonas hydrophila. As carpas do grupo controle tiveram uma taxa de crescimento de 0,05 g/dia, conversão alimentar de 14,09 e eficiência protéica de 0,25, enquanto o grupo imunoestimulado obteve a taxa de crescimento de 0,11g/dia, conversão alimentar de 6,15 e eficiência protéica de 0,57. Não houve diferença estatística entre o resultado da hematologia dos animais do grupo controle e do grupo imunoestimulado. Dos animais infectados experimentalmente, 88% morreram em menos de 24 horas por choque endotóxico e, no exame post mortem, não houve diferença entre os grupos. A carpa que recebeu alimentação controle e foi infectada teve anemia macrocítica normocrômica, trombocitopenia, linfopenia, monocitose e aumento do número de CGE. A carpa que recebeu alimentação com MOS, foi infectada e sobreviveu, não apresentou alteração nos parâmetros hematológicos. A ração com MOS foi zootecnicamente melhor para a nutrição das carpas. Com base na taxa de sobrevivência e na avaliação hematológica, não há como responder se a ração suplementada com MOS foi imunologicamente melhor do que a ração controle. / The aquarium hobby is an activity wordwide spread and a segment extremely large of the pet industry. Brazil, in 2007, exported an amount of US$ 5.871.576,73 of fishes. Due to the biology of the fishes, all its management can trigger a physiological response leading to stress, that depending on the duration, type and specie, can conclude in immunosuppressive response, leading to disease and acute death, creating a great prejudice. The use of immunostimulants, as dietary supplementation may provide an innate defense against pathogens. This study aims to evaluate the feasibility of using mannan oligosaccharide of brewer yeast (Saccharomyces cerevesiae) as immunostimulants added to the feed for koi fishes (Cyprinus carpio) during 45 days. To evaluate the immunity of the fishes, periodic hematologic evaluations were made and at the end of the determined period, the fishes were immunologically challenged with stress and inoculation with Aeromonas hydrophila. The control group had a growth rate of 0,05g/day, feed conversion of 14,09 and protein efficiency ratio of 0,25, while the treatment group had growth rate of 0,11g/day, feed conversion of 6,15 and protein efficiency ratio of 0,57. The hematological results showed no statistical difference between the control group and immunostimulant group according. Analyzing the experimental infected animals, 88% died within 24 hours, due to endotoxic shock, and in the post mortem examination, there were no difference between groups. The koi that received control feed and it was infected had macrocytic normochromic anemia, thrombocytopenia, lymphopenia, monocytosis and increased of special granulocytic cells. The koi that received the MOS feed, was infected with A. hydrophila and survived, had no alteration on haematological parameters. The feed with MOS was zootechnical better than the control feed to carps. Based on the rate of survival and hematology, there are no possibility of answering if supplemented feed with MOS was immunologic better than control feed.

The SOD2 gene encodes the mitochondrial antioxidant enzyme manganese superoxide dismutase (MnSOD), which converts superoxide (O2●-) to hydrogen peroxide (H2O2). Down-regulation of SOD2 has been reported in many cancer cells of diverse tissue origins, and forced over expression of this enzyme in carcinoma cells decreases their tumorigenicity. These findings suggest that SOD2 functions as an intiation or promotion tumor suppressor; however, it remains to be determined whether loss of SOD2 expression is sufficient for tumor formation since homozygous SOD2 knock-out mice die within weeks after birth. Additionally, due to the shortened lifespan of the constitutive SOD2 knock-out mouse limited studies have been performed in assessing the role of SOD2 in tissue-specific development in vivo. Using Cre-loxP genetics, we now have the capability to generate mice in which SOD2 may be knocked out in a cell type-specific manner and these mice can be used to query the effect of loss of SOD2 expression in tissue development, function, and oncogenesis. We primarily focused our studies on the hematopoietic system, but expanded our research to solid organs such as the liver and mammary gland as well. Our findings demonstrate that SOD2 does not act as a tumor suppressing enzyme in any of these unchallenged systems, and in fact the loss of SOD2 may act to delay tumor formation. T-cell specific SOD2 knock-out demonstrated significant immunodeficiency as illustrated by a decreased immune response to influenza challenge secondary to decreased T-cell populations. Furthermore, hematopoietic stem cell specific SOD2 knock-out showed a severe anemia in the red blood cell population due to increased mitochondrial superoxide. Additional analysis revealed the anemia to be a result of a porphyria due to the inactivation of the heme synthesis enzyme ferrochelatase. The observed phenotypes in all conditional hematological SOD2 knock-out models were rescued by the addition of mitochondrially targeted anti-oxidants. In conclusion, the tissue specific loss of SOD2 in various hematological organs appeared to demonstrate significant developmental and functional aberrations, but the role in tumor initiation appears to be limited if any. The data presented here also suggest the potential for novel anti-oxidant therapy in a variety of hematological diseases.