Este trabalho objetivou avaliar como a expressão de WNK4 (With No Lysine Kinase 4) é modulada por NFAT através da modulação por AngII (Angiotensina II) e Ciclosporina A (CsA). WNK4 é uma cinase que tem papel fundamental na regulação do transporte iônico ao longo do néfron distal, pois fosforila outras cinases (SPAK Proline Alanine-Rich Kinase e OSR1 Oxidative Stress Responsive 1) que fosforilam, e assim ativam, o co-transportador sódio-cloreto sensível aos tiazídicos (NCC), o que acarreta no aumento da reabsorção de sódio, cloreto e água, transporte esse sabidamente regulado pelo hormônio Angiotensina II. O estudo genético que revelou que mutações no gene de WNK geravam um quadro de hipertensão, hipercalemia e hipercalcemia, denominado de pseudohipoaldosteronismo tipo II (PHAII) ou Sídrome de Gordon, foi crucial para a descoberta da importância das WNKs. Este quadro é revertido quando se utiliza diuréticos tiazídicos, mostrando a relação com o NCC. Interessantemente, um quadro similar ocorre quando pacientes transplantados recebem tratamento com CsA. Estudos comprovam que AngII interfere agudamente no conteúdo da proteína de WNK4, por ativação da PKC e fosforilação da Kelchl3 (Kelh-like 3), culminando com inibição do complexo Ubiquitina-Ligase-E3, importante no processo de degradação da WNK4. Ainda não se sabe qual o papel do NFAT sobre a regulação de WNK4 e como AngII e CsA modulação a transcrição gênica de WNK4. Através dos métodos de westernblotting verificamos que CsA aumenta o conteúdo de WNK4. Por RT-PCR observamos também que AngII e CsA são capazes de aumentar significativamente o mRNA-WNK4 após 24h de incubação. Por ensaio da atividade da luciferase utilizando um vetor que apresenta o gene da luciferase sob o controle de promotor contendo elementos para ligação com NFAT, observamos que AngII parece aumentar atividade de NFAT. Observamos que CsA inibe significativamente a atividade da calcineurina através de ensaio enzimático e AngII não teve efeito significativo. Além disso, amplificamos o promotor do gene de WNK4 por PCR do DNA genômico e seguimos com a clonagem deste fragmento no vetor pGL4.10 (que apresenta o gene de luciferase como gene repórter). Neste constructo, vimos que tanto AngII como CsA são capazes de estimular o promotor do gene de WNK4. Após mutações pontuais para elementos NFAT no promotor de WNK4, observamos que o NFAT pode se ligar em diferentes elementos e essa diversidade gera efeitos estimulatórios e inibitórios na síntese proteica de WNK4, pois os elementos apresentam comportamentos diferentes na regulação da transcrição do gene repórter regulado pelo promotor do gene de WNK4. Assim, concluímos que AngII é capaz de estimular a síntese proteica de WNK4 por via dependente de NFAT. / This work aimed to understand how WNK4 expression is modulated by NFAT through AngII and CsA. Wnk4 is a kinase which plays a significant role in ionic transport regulation in distal nephron by inducing phosphorylation of other kinases such SPAK and OSR1, which ultimately lead to NCC phosphorylation. WNK4 activation increases sodium, water and chloride reabsorption in this segment and it´s already know that AngII can modulate this pathway. Genetic mapping studies showed that mutations in WNK gene lead to a hypertension, hyperkalemia and hypercalcemia condition, called Pseudohypoaldosteronism type II (PAH II) or Gordons Syndrome. This finding was crucial for WNKs discovery. Interestingly, this disease is controlled with thiazide diuretics treatment, showing that NCC participates in its pathogenesis. Curiously, a similar condition occurs when transplant recipient are treated with cyclosporine A. AngII changes the WNK4 protein content, thought PKC activation and KLHL3 phosphorylation, leading to an inhibition of ubiquitin-ligase E3 complex, which is important to WNK4 degradation. It is still unclear how NFAT may modulate WNK4 gene expression. We show, by western blotting technique, that CsA increased WNK4 expression, but AngII had not significant effect. After 24h, AngII and CsA increased mRNA-WNK4 by RT-PCR. Using luciferase assay, we observed that AngII increases NFAT activity and CsA decreases NFAT activity, both significantly. AngII did not show effect on calcineurin activity but CsA was able to decrease it, after incubation during 4h. WNK4 gene promoter was amplified by PCR using genomic DNA as a template, and the sequence obtained was cloned in a recombinant vector which has a luciferase gene reporter. Using this recombinant vector cloned with WNK4 gene promoter, we observed that both AngII and CsA increase WNK4 expression. We made a mapping of genome sites for NFAT binding at WNK4 promoter and we identified four elements for NFAT binding. Point mutations in these sites were engineered in order to evaluate the NFAT action in WNK4 promoter activity. We could see that NFAT had an ambiguous behavior and this effect is dependent on which element NFAT is bounded. In summary, we conclude that AngII may increase WNK4 expression through activation of NFAT.

A doença periodontal (DP) compreende um grupo de lesões que afetam os tecidos periodontais de proteção (gengivite) e suporte (periodontite), envolvendo a participação de células residentes, células estruturais e mediadores inflamatórios. Pesquisas recentes do laboratório mostraram a existência de um Sistema Renina-Angiotensina (SRA) local no tecido gengival de ratos e sugeriram que o SRA pode participar do início e da progressão da DP. Portanto, os objetivos deste trabalho foram investigar no tecido gengival humano com saúde clínica (SG, n=12), com gengivite (G, n = 10) e com periodontite (P, n=12): 1) a existência e eventuais diferenças na expressão e localização dos componentes do SRA local; 2) in vitro, a funcionalidade deste possível SRA local quanto à formação de peptídeos do SRA. Após a coleta dos tecidos gengivais, foram utilizadas as seguintes técnicas: contagem celular de infiltrado inflamatório, reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR), imunoistoquímica, ensaio fluorimétrico para medida da atividade da enzima conversora de Ang I (ECA) e cromatografia líquida de alto desempenho de fase reversa (HPLC). Os dados foram analisados por meio de ANOVA a 1 e 2 critérios e adotado nível de significância de 5%. Houve expressão gênica de RNAm sem diferenças estatísticas entre as três condições testadas para angiotensinogênio, renina, ECA, ECA2, receptor de Ang I tipo 1(AT1) e receptor do tipo MAS. Houve imunomarcação para os receptores de angiotensina AT1 e AT2 sem diferenças estatísticas entre as três condições testadas. Os testes fluorimétricos mostraram maior atividade da ECA nas amostras afetadas por gengivite em comparação às amostras com saúde gengival (p<0,05). Nos ensaios de HPLC, quando os homogenatos de tecido gengival foram incubados com Ang I, houve formação de Ang 1-7, Ang 1-9 e Ang II. Para as formações de Ang 1-7 e Ang II não houve diferenças estatísticas entre as três condições clínicas, enquanto que para Ang 1-9 houve maior formação nas amostras afetadas por periodontite em comparação às amostras com saúde gengival (p<0,05). Pôde-se concluir que existe um SRA local no tecido gengival humano com diferenças entre SG,G e P, com maior atividade nos tecidos gengivais acometidos pela gengivite e periodontite. / Periodontal disease (PD) comprises a group of lesions that affect protection (gingivitis) and support periodontal tissues (periodontitis) involving the participation of resident and structural cells as well as inflammatory mediators. Recent research in our laboratory showed the existence of a local gingival renin-angiotensin system (RAS) in rats and suggested that it might participate in the initiation and progression of PD. Therefore, the aims of this study were to investigate in human gingival tissue under three conditions, clinically healthy (HG, n = 12), gingivitis (G) and periodontitis (P): 1) the existence and differences in the expression and localization of the local RAS components; 2) the in vitro functionality of this local RAS regarding the formation of RAS peptides. After surgical procedure the human gingival tissue was analyzed using the following techniques: inflammatory cells counting, quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR), immunohistochemistry, fluorimetric tests to measure Angiotensin converting enzyme (ACE) activity and reverse phase high performance liquid chromatography (HPLC). Data were submitted to 1 and 2 way ANOVA with significance level established at 5%. There was genic expression (mRNA) for angiotensinogen, renin, ACE, ACE2, AT1 and Mas receptors, without statistically significant difference between all the three conditions analyzed. There was positive immunostaining for AT1 and AT2 receptors in all three conditions without statistically significant difference. Fluorimetric assays showed increased ACE activity in the samples affected by gingivitis as compared to healthy controls (p<0.05). In HPLC assays there was release of Ang-1-7, Ang-1-9 and Ang II after incubation of gingival tissue homogenates with Ang I. The formation of Ang-1-7 and Ang II was not statistically significant different between the three conditions whereas in periodotitis group there was an increase in Ang-1-9 formation when compared to healthy tissues (p<0.05). Therefore, one can conclude that there is a local RAS in the human gingival tissues that is different between the studied conditions HG, G and P, with higher activity in gingivitis and periodontitis.

Made available in DSpace on 2016-01-26T12:51:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 olavodecarvalhofreitas_tese.pdf: 3007919 bytes, checksum: a2e9958bdf4343aa56118ce9a9e02dac (MD5) Previous issue date: 2008-04-16 / The renin-angiotensin system activation has been regarded as more and more important, namely interaction with obesity, by accumulation of visceral adipose tissue, a major risk for hypertension development. Obesity is associated with several abnormalities, such as sodium retention, renal hyperfiltration, left ventricular hypertrophy and microalbuminuria. Objective: To evaluate kidney and heart remodeling, following pharmacological double blockade of the renin-angiotensin system, in spontaneously hypertensive rats, and in normotensive and spontaneously hypertensive obese-induced adult rats. Material and Method: Forty spontaneously hypertensive Wistar rats were subdivided into 4 groups of 10, as follows: 10 animals were treated with pharmacological double blockade of the renin-angiotensin system, and received enalapril and losartan for 4 weeks; 10 non-blocked; 10 rats rendered obese in adult life by means of a hypercaloric diet without block, and 10 hypertensive obese-induced, blocked animals. Forty normotensive rats (controls) were subdivided into 4 groups of 10 animals, as follows: 10 normal rats; 10 normal and blocked; 10 obese-induced without block and 10 obese-induced, blocked. Blood pressure, heart and kidney weights (relatively to body weight), heart and kidney collagen levels, and proteinuria, were evaluated in all animals. Results: Increased heart and kidney weight/body weight and tissue collagen and proteinuria levels were found in hypertensive and obese hypertensive rats. Pharmacological double blockade of the reninangiotensin system brought significant reduction (CI 95 %) in heart weight/body weight in obese-hypertensive rats, and reduction of renal collagen levels and proteinuria in hypertensive and obese-hypertensive rats. The normotensive obese rats increased renal collagen levels and proteinuria. Such changes were significantly reduced (CI 95 %) by means of renin-angiotensin system blocked. Conclusions: Pharmacological double blockade of the reninangiotensin system brings benefits, particularly, to kidney remodeling, with reduction of the proteinuria in hypertensive, hypertensive-obese and normotensive-obese rats. / A ativação do sistema renina-angiotensina tem sido relacionada, cada vez mais, como importante interação com a obesidade, porque o acúmulo do tecido adiposo visceral é um risco maior para o desenvolvimento da hipertensão. A obesidade está associada com várias anormalidades, tais como, a retenção de sódio, a hiperfiltração renal, a hipertrofia ventricular esquerda e a microalbuminúria. Objetivo: Avaliar o remodelamento do coração e rins, após duplo bloqueio farmacológico do sistema renina-angiotensina, em ratos espontaneamente hipertensos e em normotensos e espontaneamente hipertensos, induzidos à obesidade na vida adulta. Material e Método: Ratos Wistar espontaneamente hipertensos em número de 40 foram subdivididos em 4 grupos de 10 animais, a saber: 10 ratos foram tratados com bloqueio farmacológico duplo do sistema renina-angiotensina e receberam enalapril e losartan por 4 semanas; 10 ratos não foram bloqueados; 10 ratos foram tornados obesos na vida adulta por meio de dieta hipercalórica e não foram bloqueados e 10 ratos hipertensos e obesos-induzidos, foram bloqueados. Os ratos normais (controles), normotensos, em número de 40, foram subdivididos em 4 grupos de 10 animais, a saber: 10 ratos normais; 10 normais e bloqueados; 10 induzidos à obesidade, sem bloqueio e 10 obesosinduzidos e bloqueados. A pressão arterial, os pesos de coração e rins (em relação ao peso corporal), os níveis de colágeno desses órgãos e a proteinúria foram avaliados em todos os animais. Aumento do peso do coração e dos rins em relação ao peso corporal, aumento dos níveis de colágeno nesses órgãos e da proteinúria, foram encontrados nos ratos hipertensos e nos hipertensos e obesos. O bloqueio farmacológico duplo do sistema renina-angiotensina trouxe reduções significativas (IC 95 %) do peso do coração (em relação ao peso corporal) nos ratos hipertensos e obesos, do colágeno renal e da proteinúria nos animais hipertensos e hipertensos e obesos. Os ratos normotensos e obesos apresentaram aumento do colágeno renal e da proteinúria. Tais alterações foram significativamente reduzidas (IC 95 %) com o bloqueio do sistema renina-angiotensina. Conclusões: O duplo bloqueio farmacológico do sistema reninaangiotensina traz benefícios à remodelação, particularmente dos rins, com redução da proteinúria nos ratos hipertensos, nos hipertensos obesos-induzidos e nos normotensos e obesos.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 429460.pdf: 854298 bytes, checksum: 0d76bb40742d75ad97c97bf135494e05 (MD5) Previous issue date: 2010-09-13 / A manipula??o neonatal ? considerada uma interven??o que ocasiona efeitos duradouros no comportamento emocional e na reatividade ao estresse em animais adultos. O per?odo imediatamente ap?s o nascimento ? um per?odo cr?tico quando o c?rebro imaturo ? permanentemente alterado por horm?nios ester?ides gonadais e da supra-renal. Estudos pr?vios demonstraram que a manipula??o neonatal pode influenciar mecanismos de regula??o do equil?brio hidroeletrol?tico e na fun??o renal. Os componentes do sistema renina-angiostensina (SRA) no rim s?o altamente expressos durante o desenvolvimento renal e est?o ligados a est?gios espec?ficos da nefrog?nese e vasculariza??o, tendo maior express?o em ratos rec?m-nascidos. Esse sistema tem papel fundamental nos mecanismos de inflama??o e defesa de c?lulas e tecidos do organismo. A angiotensina II ? o principal horm?nio efetor nessa cascata e ? tamb?m considerada um horm?nio pr?-oxidante, e liga-se a dois tipos de receptores: AT1 e AT2, que t?m fun??es opostas. O estresse oxidativo (EO) ? definido como um desequil?brio entre a forma??o de esp?cies reativas de oxig?nio (ERO) e mecanismos de defesa antioxidante. Essas EROs quando em excesso causam dano a v?rios componentes celulares. O objetivo dessa pesquisa foi avaliar o efeito da manipula??o neonatal sobre o SRA e o balan?o oxidativo renal de ratos. Verificou-se que os animais manipulados apresentaram aumento na express?o de renina e do receptor AT2 e uma diminui??o do receptor AT1. Foi encontrado um aumento de ANG II plasm?tica e tamb?m de TBARS no rim. Estes resultados indicam que a manipula??o neonatal altera o sistema renina-angiotensina e justificam as altera??es renais j? descritas.

O exercício físico modula o sistema renina angiotensina (SRA), que tem um importante papel na fisiologia cardíaca, especialmente na promoção da hipertrofia cardíaca. O SRA pode ser dividido em dois eixos principais: o eixo clássico – representado pelo receptor AT1 (AT1R) ativado pela angiotensina II (ANG II) – e o eixo alternativo – que é ativado pela interação da angiotensina 1- 7 (ANG 1-7) com o receptor MAS (MASR). O balanço entre os eixos do SRA pode determinar um remodelamento cardíaco fisiológico ou patológico. Estudos têm demonstrado que altos volumes de exercício físico podem desencadear possíveis efeitos deletérios ao sistema cardiovascular. Neste contexto, nosso objetivo foi avaliar a hipertrofia cardíaca, o eixo clássico e o eixo alternativo do SRA no miocárdio de camundongos submetidos a variados volumes e intensidades de treinamento em natação. Para tal, camundongos balb/c foram divididos em três grupos: (I) sedentário (SED), (II) treinados 2x ao dia (T2) sem sobrecarga e (III) treinado 3x ao dia com sobrecarga de 2% do peso corporal (T3), totalizando 6 semanas de treinamento efetivo. Ambos os grupos treinados desenvolveram hipertrofia cardíaca, sem diferença nos níveis de fibrose. Bioquimicamente, observamos um aumento nos níveis do receptor MASR somente no grupo T2, enquanto que os níveis de AT1R aumentaram somente no grupo T3. Contudo, não foi observada alteração na concentração dos peptídeos ANGI, ANGII e ANG 1-7 no tecido cardíaco entre os grupos. Além do mais, o grupo T3 demonstrou um aumento na expressão de miosina de cadeia pesada- β em comparação ao grupo SED e redução da expressão da isoforma- @ em relação ao grupo T2. Em conclusão, nossos resultados sugerem que ambos os protocolos de exercício promoveram uma hipertrofia cardíaca semelhante, mas o protocolo com maior volume e intensidade promoveu uma ativação diferencial dos receptores do SRA e reativação de genes fetais. Estudos que avaliem protocolos com maior duração são necessários para esclarecer se estas mudanças representam uma ativação precoce dos mecanismos relatados para o desenvolvimento de um fenótipo com características patológicas. / Exercise promotes physiological cardiac hypertrophy and induces the activation of the renin angiotensin system (RAS), which plays an important role in cardiac physiology, both through the classical axis – represented by the angiotensin II receptor type 1 (AT1) activated by angiotensin II (ANG II) – and the alternative axis – which is activated by the angiotensin 1-7 interaction with the MAS receptor. However, very intense exercise protocols could have deleterious effects on the cardiovascular system. In this context, we aimed to analyze the cardiac hypertrophy phenotype, as well as the classical (ANGII/AT1) and alternative (ANG1-7/MAS) RAS axes, in the myocardium of mice submitted to varying volume and intensity swimming exercises for the development of cardiac hypertrophy. To this end, male balb/c mice were divided into three groups: (I) sedentary (SED), (II) swimming twice a day (T2) without overload, and (III) swimming three times a day with a 2% body weight overload (T3), totaling six weeks of training. Both training groups developed cardiac hypertrophy. Interestingly, we observed an increase in MAS receptor levels only in group T2, while AT1 levels increased only in group T3. However, no change was observed regarding the levels of angiotensin peptides ANG-I, ANG-II, and ANG1-7, in either group. In addition, group T3 displayed a higher expression of myosin heavy chain-β (MHC-β) and lower expression levels of the alpha isoform (MHC-@). Fibrosis was not observed in any of the groups. In conclusion, our results suggest that both exercise protocols promoted a similar cardiac hypertrophy phenotype, but the protocol applying increased volume and intensity resulted in differential activation of RAS receptors and fetal gene reactivation. Studies applying longer duration protocols could elucidate if these changes represent early activation of mechanisms related to hypertrophy development with phenotypic pathological characteristics.

Orientador: Angelina Zanesco / Banca: Camila de Moraes / Banca: Edilamar Menezes de Oliveira / Resumo: O objetivo do estudo foi analisar o Sistema Renina-Angiotensina circulante, concentrações plasmáticas de Nitrito/Nitrato e biomarcadores do estresse oxidativo em mulheres normotensas e hipertensas no climatério. Noventa e seis voluntárias participaram do estudo, sendo sessenta e sete voluntárias normotensas (NT) e vinte e nove voluntárias hipertensas (HT) com idade de 52,07±0,88 e 55,48±1,51 anos, respectivamente. Parâmetros antropométricos (peso corporal, índice de massa corporal - IMC) cardiovasculares (pressão arterial sistólica - PAS, pressão arterial diastólica - PAD) e bioquímicos (perfil lipídico, glicemia, atividade da enzima conversora de angiotensina - Ativ. ECA, concentrações de Angiotensina I - Ang I, Angiotensina II - Ang II e Angiotensina-(1-7) - (Ang-(1-7), concentrações de nitrito/nitrato (NOx-), atividade da SOD e catalase e concentrações séricas de MDA) foram analisados. Não foram observadas diferenças entre os parâmetros antropométricos, hormonais, perfil lipídico e biomarcadores do estresse oxidativo entre as voluntárias NT e HT. Por outro lado, foram observadas diferenças significativas na PAS, PAD, glicemia, os peptídeos do SRA [Ang I, Ang II e Ang-(1-7)] e as concentrações de NOx-. Quando divididas em perimenopausa e pós-menopausa, observamos diferença estatisticamente significativa, com redução da atividade da SOD, aumento das concentrações de NOx- e do SRA (ativ. ECA e Ang II) para as mulheres hipertensas após a menopausa enquanto que o mesmo não ocorreu nas mulheres normotensas. Portanto, mulheres HT após a menopausa apresentam elevação da atividade do SRA medidos pela atividade da ECA e Ang II. Esses dados mostram que a elevação do sistema renina-angiotensina é potencializada no período após a menopausa em mulheres com a presença de hipertensão arterial / Abstract: Not available / Mestre

Introdução: A hipertrofia ventricular esquerda é importante fator de risco de morbidade e mortalidade cardiovascular. Sua associação com variantes funcionais do sistema renina-angiotensina é controversa. Objetivos: Avaliar a associação entre massa ventricular esquerda e função sistólica e diastólica do ventrículo esquerdo e os polimorfismos inserção/deleção do gene da enzima de conversão da angiotensina e M235T do gene do angiotensinogênio. Métodos: Estudo observacional realizado numa amostra da população da cidade de Vitória (Espírito Santo), utilizando como base a metodologia do projeto Mônica da Organização Mundial da Saúde. Realizamos avaliação clínica, perfil antropométrico, análise laboratorial e ecocardiograma em 652 indivíduos previamente genotipados para polimorfismos da enzima de conversão da angiotensina e do angiotensinogênio. Analisamos massa ventricular esquerda indexada pela área de superfície corpórea e pela altura2,13. Classificamos o ventrículo esquerdo em padrões geométricos: padrão normal, remodelamento concêntrico, hipertrofia concêntrica e hipertrofia excêntrica. A função sistólica ventricular esquerda foi avaliada pela fração de ejeção medida ao modo unidimensional. A função diastólica foi analisada pelo fluxo mitral (onda E, onda A, relação E/A, tempo de desaceleração e tempo de relaxamento isovolumétrico) e pelo Doppler tecidual (velocidade miocárdica em região próxima ao anel mitral septal e lateral: ondas E e A e relação E/E). Resultados: A média de idade da população estudada foi 51 ± 10 anos sendo 59% dos participantes do sexo feminino e 20,8% obesos. Em nossa amostra, 47% dos indivíduos foram classificados como hipertensos. Não houve associação entre hipertensão arterial e os genótipos analisados. Após análise univariada, não encontramos associação entre os polimorfismos inserção/deleção da enzima de conversão da angiotensina e M235T do angiotensinogênio e índice de massa ventricular esquerda, padrões geométricos do ventrículo esquerdo, função sistólica avaliada pela fração de ejeção e os vários parâmetros de função diastólica analisados. / Introduction: Left ventricular hypertrophy is an important risk factor for cardiovascular morbidity and mortality. Its association with the reninangiotensin system genetic variants is controversial. Objectives: To assess the association between left ventricular mass, left ventricle systolic and diastolic functions, and polymorphisms of the insertion/deletion angiotensin converting enzyme and M235T angiotensinogen genes. Methods: Observational study in adults from Vitoria (Brazil) using the methodology of the Monica project of the World Health Organization. We performed clinical examination, anthropometric assessment, laboratory analysis and transthoracic echocargiography studies in 652 adults who were previously genotyped for polymorphisms of the angiotensin-converting enzyme and angiotensinogen. We measured left ventricular mass indexed to body surface area and height 2,13, left ventricular ejection fraction, and diastolic function using mitral flow and tissue Doppler. Left ventricle was classified into following geometric patterns: normal, concentric remodeling, concentric hypertrophy and eccentric hypertrophy. Left ventricular systolic function was assessed by ejection fraction by analysis of the M-mode echocardiogram. Diastolic function was assessed using mitral flow (E wave, A wave, E/A ratio, deceleration time and isovolumic relaxation time), and Doppler tissue imaging (mitral annulus velocity in septal and lateral region: E` and A` waves, and E/E`ratio). Results: Mean age of the studied population was 51±10 years; 59% of the subjects were women and 20,8% were obese. Forty seven percent of the individuals were classified as hypertensive. Hypertension was not associated with any of the studied genotypes. Univarate analysis showed no correlation between polymorphisms of the insertion/deletion angiotensin-converting enzyme and M235T angiotensinogen gene variants, left ventricular mass index, left ventricular geometric patterns, and systolic and diastolic functions. Taking together these data indicated no evidence for the association of ACE and angiotensinogen gene variants with cardiac mass and function assessed by echocardiography.

A expressão dos receptores AT1 e AT2 da Angiotensina II (Ang II) em astrocitomas humanos está associada a um pior prognóstico. Para investigar os mecanismos moleculares da ação da Ang II em gliomas, foi analisado por DNA microarray o transcriptoma da linhagem celular C6 tratada com Ang II e antagonistas de AT1 e AT2 nos intervalos de 3 e 6 horas. Os genes diferencialmente expressos obtidos foram submetidos a análises de enriquecimento funcional, diagramas de Venn e interatomas. As alterações observadas no transcriptoma a partir do tratamento com Ang II revelaram genes envolvidos em funções biológicas e vias de sinalização pró-tumorais tais como ciclo celular, migração, ErbB, MAPK e mTOR. Além disso, a identificação das proteínas centrais nos interatomas avaliados forneceu evidências para estudos futuros com foco nesses alvos. Embora a transdução de sinal de AT2 seja distinta da observada em AT1, ambas apresentaram categorias funcionais em comum que podem estar relacionadas ao pior prognóstico observado em pacientes cujos gliomas expressam esses receptores. / The expression of AT1 and AT2 receptors of Angiotensin II (Ang II) in human astrocytomas was associated with a worse prognosis. To investigate the molecular mechanisms of Ang II actions in gliomas, the transcriptomic profile of C6 cells treated with Ang II and antagonists of AT1 and AT2 was evaluated. The differentially expressed genes obtained were submitted to functional enrichment, Venn diagram and transcriptome network analyzes. Ang II treatment caused gene expression changes involved in pro-tumor functions and signaling pathways such as cell cycle, migration, ErbB, mTOR and MAPK. Furthermore, the identification of central proteins in the interactomes provided evidences for future studies focused on these targets. Taken together, these results provided insights into how the transcriptome of glioma cells is affected by Ang II. Moreover, although the signal transduction of AT2 is distinct from the observed for AT1, they present functional categories in common that may be underlying the worst prognosis observed in gliomas expressing Ang II receptors.

A hiperglicemia é um fator de risco na progressão da ND, que associada à atividade do SRA sistêmico e/ou intrarrenal e à síntese de ET1, resulta em perda da função renal. Objetivo: Investigar o papel da hiperglicemia e a relação com a síntese de Ang II e ET-1 no tecido renal no início da ND. Métodos: Ratos Wistar foram organizados em controle; diabéticos via STZ; tratados com losartan e outros com BQ123. Foram avaliados os parâmetros metabólicos e de função renal. Resultados: O losartan preveniu o efeito da STZ na expressão de renina medular, injúria tubular, expressão de desmina e de RNAm para TNF&#945; e Nox4. O BQ123 não alterou o efeito da STZ em nenhum dos parâmetros estudados. Conclusão: A hiperglicemia tem predominância na injúria renal nos primeiros estágios da ND. Nessa condição, a Ang II sistêmica e/ou intrarrenal via receptor AT1 amplia os efeitos da hiperglicemia nos eventos iniciais da ND. / Hyperglycemia and a risk factor in the progression of ND, which associated with the RAS activity of systemic and/or intrarrenal and the synthesis of ET-1, results in loss of renal function. Aim: To investigate the role of hyperglycemia and a relationship with a synthesis of Ang II and ET-1 in the renal tissue at the beginning of DN. Methods: Wistar rats were organized in control; Diabetics via STZ; Treated with losartan and others with BQ123. Metabolic and renal function parameters were evaluated. Results: Losartan prevented the effect of STZ on the expression of medullary renin, tubular injury, desmin and mRNA expression for TNF&#945; and Nox4. BQ123 did not alter the STZ effect in any of the parameters studied. Conclusion: Hyperglycemia has a predominance of renal injury in the early stages of ND. In this condition, Ang II systemic and/or intrarenal via the AT1 receptor amplifies the effects of hyperglycemia in the initial events of ND.

Submitted by Suzana Dias (suzana.dias@famerp.br) on 2018-10-25T18:25:42Z No. of bitstreams: 1 ElizabethCestario_tese.pdf: 1605128 bytes, checksum: 627109b3f3b0eb4f3992e765cc2dbc5c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-25T18:25:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ElizabethCestario_tese.pdf: 1605128 bytes, checksum: 627109b3f3b0eb4f3992e765cc2dbc5c (MD5) Previous issue date: 2018-06-27 / Resistant hypertension (RHT) is a clinical entity, difficult to manage. To identify the contribution of the volume as well as the renin activity from the maintenance of blood pressure levels could individualize the treatment. Objectives: To demonstrate the efficacy of therapy of sequential nephron blocking (SNB) in relation to the double blockade of the renin-angiotensin-aldosterone system associated with beta-blockers (DBRAS) in patients with RHT with > 85%-adherence rate after 20 weeks of treatment. Casuistic and Methods: A prospective study was conducted, open, randomized, parallel comparison between two regimens for RHT: SNB versus RAASDB. SNB consists in a progressive increase of sodium depletion with thiazide, followed by a blockade of mineralocorticoid receptor, followed by progressive doses of loop diuretics and finally blocking sodium channels. RAASDB consists in reinforcing the effect of angiotensin receptor blocker (ARB) with an angiotensin converting enzyme inhibitors (ACEI), followed by betablockers to decrease the renin secretion. Seventy two patients were randomized (35 to SNB 13M/22F and 37 to RAASDB14M/23F) coming from the tertiary outpatient clinic (HB-FAMERP). We used the criteria of VII Guidelines for Hypertension and V Guidelines for ABPM and HBPM SBC-SBH. The BP was monitored with the SpaceLabs 90207 ABPM using appropriate software of the equipment and issuing reports. Results: Baseline clinical characteristics and laboratory parameters of the 72 patients with primary resistant hypertension randomized to SNB (n=35) or RAASDB (n=37) were similar across both study groups. At the end of the study, a significant reduction of the office pressure was observed (SBP and DBP) in both postintervention groups (SNB group: initial SBP: 174.5 ± 21.08; final SBP: 127.0 ± 14.74; Initial DBP: 105.3 ± 15.5, final DBP: 78.11 ± 9.28 (p <0.0001), RAASDB group: initial SBP: 178.4 ± 21.08, final SBP: 134.4 ± 23.25, initial DBP: 102.7 ± 11.07, final DBP: 77.33 ± 13.75 (p <0.0001). Central systolic pressure had a greater reduction in the SNB group (p <0.005). ABPM had a significant reduction of SBP and DBP in both groups (SNB group p <0.0001 for SBP and DBP pre x post-intervention, RAASDB group p <0.0001 for SBP and DBP pre x post-intervention). No discontinuation due drug-related adverse events in both study groups. Conclusion: SNB and RAASDB associated with the beta-blocker in RHT patients with full adherence to the treatment showed excellent therapeutic efficacy. However, the SNB group disclosed a greater absolute reduction of central blood pressure values. / Hipertensão arterial resistente (HAR) é uma entidade clínica de difícil manejo. Identificar a contribuição do volume e da atividade da renina na manutenção dos níveis pressóricos poderia individualizar o tratamento. Objetivos: Demonstrar a eficácia da terapêutica do bloqueio sequencial do néfron (BSN) em relação ao bloqueio duplo do sistema renina-angiotensina-aldosterona associado ao betabloqueador (BDSRA) em pacientes com HAR com taxa de adesão > 85%, após 20 semanas de tratamento. Casuística e Métodos: Foi realizado um estudo prospectivo, aberto, randomizado, paralelo de comparação entre dois regimes terapêuticos para HAR: BSN versus BDSRA. BSN consiste em um aumento progressivo da depleção de sódio com diurético tiazídico, seguido de bloqueio do receptor mineralocorticoide, seguido de doses progressivas de diuréticos de alça e finalmente bloqueio dos canais de sódio. BDSRA consiste em reforçar o efeito do bloqueador do receptor da angiotensina I (BRA) com um inibidor da enzima conversora da angiotensina (IECA), seguido de um betabloqueador para diminuir a secreção de renina. Foram randomizados setenta e dois pacientes HAR (35 para BSN 13M/22F e 37 para DBSRA 14M/23F) procedentes do ambulatório terciário (HB-FAMERP). Foram usados os critérios das VII Diretrizes de Hipertensão e V Diretrizes de MAPA e MRPA SBC-SBH. A PA foi monitorada com equipamento o SpaceLabs 90207 com para programação do equipamento e emissão de relatórios. Resultados: As características clínicas e os parâmetros laboratoriais dos 72 pacientes com HAR randomizados para BSN (n=35) ou DBSRA (n=37) foram semelhantes em ambos os grupos. No final do estudo, houve redução significante da pressão de consultório (PAS e PAD) em ambos os grupos pós-intervenção (Grupo BSN: PAS inicial: 174,5 ±21,08; PAS final: 127,0 ± 14,74; PAD inicial:105,3 ±15,5; PAD final: 78,11 ±9,28 (p<0,0001); Grupo DBSRA: PAS inicial: 178,4 ±21,08; PAS final: 134,4 ± 23,25; PAD inicial:102,7 ±11,07; PAD final: 77,33 ±13,75 (p<0,0001). A maior redução da pressão sistólica central foi observada no grupo BSN (p<0,005.) A MAPA apresentou redução significativa da PAS e PAD em ambos os grupos (Grupo BSN p<0,0001 para PAS e PAD pré x pós-intervenção. Grupo DBSRA p<0,0001 para PAS e PAD pré x pós-intervenção). Não houve abandono do tratamento devido a eventos adversos da medicação. Conclusão: BSN e DBSRA associados ao betabloqueador em hipertensos resistentes com adesão plena ao tratamento apresentaram excelente eficácia terapêutica. Entretanto, o grupo BSN mostrou maior redução absoluta dos valores da pressão arterial sistólica central.