Die Verwendung von nukleinsäuretemplatgesteuerten Reaktionen stellt einen innovativen Ansatz zur Therapie von Krankheiten dar, deren Ursprung in einer genetischen Veränderung von Zellen liegt. Im Rahmen der hier vorliegenden Arbeit erfolgte eine Weiterentwicklung der RNA-templatgesteuerten Acyltransferreaktion nach Seitz et al. hinsichtlich des Aufbaus von aromatischen Amidbindungen, wie sie in vielen niedermolekularen Wirkstoffen vorkommen. Als Modellverbindungen dienten die Bcr-Abl-Tyrosinkinaseinhibitoren Nilotinib, Ponatinib und GZD824, die durch zentrale Benzanilidmotive charakterisiert sind und zur Therapie der chronischen myeloischen Leukämie eingesetzt werden. Das konzipierte Reaktionssystem beruht auf dem Mechanismus der nativen chemischen Ligation, weswegen die Bcr-Abl-Inhibitoren durch die Einführung einer Thiolgruppe modifiziert werden mussten. Es wurde gezeigt, dass diese Modifikation in den meisten Fällen nur zu einer geringen Beeinträchtigung der biologischen Aktivität führt. Der RNA-templatgesteuerte Aufbau der Benzanilidstrukturen konnte sowohl mit PNA- als auch mit DNA-verknüpften Inhibitorfragmenten basierend auf Ponatinib und GZD824 erzielt werden. In Gegenwart eines komplementären RNA-Templats erfolgte die benachbarte Hybridisierung der reaktiven Konjugate, infolgedessen ein Benzoyltransfer von einem thioestermodifizierten Donor auf ein ortho-Mercaptoanilinderivat als Akzeptor stattfand. Mit PNA/PNA-Reaktionssystemen wurde auch in Abwesenheit des RNA-Templats eine signifikante Produktbildung beobachtet, was auf hydrophobe Wechselwirkungen der Konjugate zurückgeführt wurde. Unter Verwendung von DNA/DNA- bzw. PNA/DNA-Konjugatpaaren blieb die templatunabhängige Produktbildung hingegen ausreichend gering. Die entsprechenden Reaktionssysteme wurden hinsichtlich der erzielten Produktausbeuten optimiert, wobei sowohl die Linkerlänge bzw. -struktur der reaktiven Konjugate als auch die Templatarchitektur variiert wurde. / The use of nucleic acid-templated reactions represents an innovative approach to the therapy of diseases that originate in genetic alterations of cells. In this work, the RNA-templated acyl transfer reaction invented by Seitz et al. was extended towards the formation of aromatic amide bonds which occur in a variety of small molecule drugs. The Bcr-Abl tyrosine kinase inhibitors nilotinib, ponatinib, and GZD824 were used as model compounds, as they are characterized by central benzanilide motifs and find application in the treatment of chronic myeloid leukemia. The designed reaction system is based on the mechanism of native chemical ligation which required the modification of the Bcr-Abl inhibitors by introducing a thiol group. It was shown that thiolation affected the biological activity only moderately. The RNA-templated formation of the benzanilide structures was achieved with both PNA- and DNA-linked inhibitor fragments of ponatinib and GZD824. The presence of a complementary RNA template enabled adjacent binding of the reactive conjugates, triggering a rapid benzoyl transfer from a thioester-linked donor to an ortho-mercaptoaniline derivative as an acceptor. With PNA/PNA reaction systems, significant product formation was observed in absence of the RNA template, which was attributed to hydrophobic interactions between the conjugates. However, the template-independent product formation remained low when DNA/DNA or PNA/DNA conjugate pairs were used. The product yields of the corresponding reaction systems were optimized by varying the linker length and structure of the conjugates as well as the template architecture.

Activities of the DEAD box (Asp-Glu-Ala-Asp) family of proteins- including RNA-dependent ATPase and RNA helicase- function in all organisms to sculpt RNA-RNA duplex and RNA-protein complexes, ensuring that necessary rearrangements are rapidly and properly resolved during genetic information processing. Identified as a prototypic member of the DEAD box family and documented as an ATPase and RNA helicase, p68 plays essential and diverse functions in the control of gene expression ranging from pre-mRNA/rRNA processing and mRNA decay/stability to transcriptional activation and initiation. Despite the early implied roles in organ maturation and tumor progression, the functional contributions of p68 to growth/differentiation regulation and cancer development remain undefined. Here, we show c-Abl-dependent phosphorylation of p68 markedly associates with abnormal cell growth and cancer development. Importantly, we characterize an unanticipated signaling module through which p68 functionally contributes to Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) and cell proliferation. p68, which appears to be phosphorylated by c-Abl at tyrosine 593, consequently promotes an EMT through its ability to recruit â-catenin into cell nucleus via a canonic Wnt/â-catenin axis independent way; accordingly, phosphor-p68 (phosphorylated at tyrosine 593 residue) also stimulates tumor cell growth, which requires the ATPase activity of the protein. These findings define a potential mechanism whereby phosphor-p68 recruits â-catenin into cell nucleus in ATP hydrolysis driven fashion and cooperatively regulates transcriptional programs that control an EMT. The dissertation thus demonstrates a tight coordination between DEAD box RNA helicase and cancer development.

Denna uppsats behandlar borgenärsskyddet vid värdeöverföringar. Det primära målet för begränsningar vid värdeöverföringar är att skydda borgenärer. Borgenärsskyddet i svensk rätt återfinns i 17 kap. 3 § aktiebolagslagen i form av beloppsspärren, som benämns som principen om skyddet för det bundna kapitalet, och försiktighetsregeln. De lege lata ger inte lagregeln något nämnvärt skydd för bolagets borgenärer. Framförallt kritiseras kravet på att aktiekapitalet inte fyller den funktion som lagstiftaren åsyftat. Behovet av en mer modern lösning kring borgenärsskyddet vid värdeöverföring bör således ses över. Vid studier av andra rättskällor finns flertalet lösningar i ett försök att på ett mer reellt sätt uppnå det primära syftet. En lösning som framförts i kalifornisk rätt är § 500 California Corporations Code, där lagstiftaren utformat två alternativa tester. En värdeöverföring får endast genomföras om aktiebolaget disponerar över behållna vinstmedel (retained earnings) eller, om bolaget inte disponerar över behållna vinstmedel, bolaget skall disponera över tillgångar som minst motsvarar en och en fjärdedel (1,25) av bolagets totala skulder samtidigt som omsättningstillgångarna minst skall motsvara dess kortfristiga skulder. Bolaget måste även efter värdeöverföringen vara solvent, jfr. § 501 California Corporations Code. Denna reglering är en strängare reglering än § 6.40 MBCA, en modellakt utarbetad i USA. Den kaliforniska modellens förtjänster ligger i att den i förväg kan förutse om en värdeöverföring är lovlig eller olovlig, samtidigt som den är mer flexibel ifråga om bolagets storlek eller branschtillhörighet. Bristerna med § 500 California Corporations Code har sin grund i att aktiebolag tätt inpå en konkurs kan disponera över behållna vinstmedel, samtidigt som modellen är relativt dålig på att förutspå om ett bolag efter en värdeöverföring skulle riskera att vara på obestånd. Jag har istället valt att kombinera § 500 Cal. Corp. Code (b) med den svenska försiktighetsregeln och ett explicit solvenskrav. Genom denna kombination skulle denna lösning vara väl applicerbar i svensk rätt och ett starkt alternativ till att ersätta den nu gällande regleringen i 17 kap. 3 § ABL.

Syftet med uppsatsen är att klargöra i vilken utsträckning styrelser i svenska noterade bolag i dag ansvarar för bristfällig hantering av ickefinansiella risker, samt utreda om regelverket bör uppdateras och i sådana fall på vilket sätt. I uppsatsen drivs en tes innebärande att det finns ett behov av tydligare regler gällande ickefinansiell riskhantering i aktiemarknadsbolag.   I dag finns bestämmelser som ställer krav på rutiner gällande risker som får konsekvenser för bolagets finansiella rapportering, vilket innebär att lagstiftaren ansett att det finns ett behov av tvingande regler på området. Däremot finns det inga tydliga bestämmelser om risker som inte är finansiella. I uppsatsen ifrågasätts om det verkligen är rimligt att göra denna åtskillnad. Vi ser ofta exempel på företagskriser som beror på bristande ickefinansiell riskhantering – minns de senaste årens mutskandaler i Telia Sonera, turerna kring SCA:s företagsjet och köttfusket inom ICA Gruppen.   Aktieägarna bör ha en rätt att informeras om sådana omständigheter som kan vara till nackdel för företaget, precis som de har en rätt att hållas informerade om de finansiella risker som omger verksamheten. En bättre riskhantering gynnar också bolagsstyrningen i stort, vilket leder till bättre ekonomisk och organisatorisk utveckling för företagen och ökat välstånd för samhället som helhet.

Made available in DSpace on 2016-04-12T12:32:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 596.pdf: 1353914 bytes, checksum: bee2473adf5a37f943c4f715f4043519 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / A Leucemia Mielóide Crônica (LMC) é uma neoplasia mieloproliferativa crônica, cuja incidência é de 1,5 casos por 100.000 habitantes ao ano, com predomínio do gênero masculino. A predisposição hereditária parece não existir e o único fator bem caracterizado de risco é a exposição à radiação ionizante. O geoprocessamento é uma ferramenta informacional de auxílio aos profissionais e estudiosos da área da saúde capaz de mapear as doenças e permitir a análise de riscos sócio-ambientais. O objetivo deste estudo foi caracterizar a distribuição dos casos de LMC e de exposição a tóxicos industriais dos pacientes residentes no estado de Pernambuco com registro no Hospital Hemope nos últimos cinco anos. O estudo tipo série de casos incluiu todos os pacientes com diagnóstico de LMC, idade igual ou superior a 18 anos, de ambos os gêneros, atendidos no período de janeiro de 2004 a dezembro de 2009 e procedentes das diversas regiões de desenvolvimento do Estado. Para coleta e análise dos dados foram utilizados os registros dos prontuários de saúde e os aplicativos Excel 2003 e Terra View. No período do estudo foram diagnosticados 201 casos de LMC, com mediana de idade de 49 anos (extremos 18 a 93) e maior pico de incidência entre os 40 e 50 anos (24 por cento). Houve predomínio do sexo masculino (1,1:1) e de residentes de áreas urbanas (86 por cento). A incidência da LMC para as 12 regiões de desenvolvimento do Estado variou entre 0,5 e 3,8 casos por 100.000 habitantes/ano com média de 1,8 casos. As Regiões do Agreste Meridional e Sertão do Pajéu apresentaram maior incidência de casos de LMC, no entanto, não houve variação significante no número de casos ao longo dos anos e nem foram identificados determinantes sócio-ambientais relevantes associados. Apenas 10 por cento dos prontuários apresentaram registro sobre contato do pacientes com tóxicos industriais. A taxa de incidência da LMC encontrou-se dentro da frequência esperada, porém, com variações entre os municípios e as diferentes regiões de desenvolvimento do Estado. O estudo por geoprocessamento auxiliou na análise da distribuição espacial dos casos para uso dos dados como estudo de linha de base. A interface entre o profissional e o serviço de saúde pública é essencial para reconhecer e responder as preocupações com mudanças no perfil epidemiológico de doenças crônicas, frente aos novos cenários de desenvolvimento econômico

1 Abstract BCR/ABL is a constitutively active tyrosine kinase that has been shown to be at the heart of the development of chronic myeloid leukemia (CML) and about 30% of acute lymphoblastic leukemia (ALL). With the recent advent of tyrosine kinase inhibitors (TKIs), exemplified by Imatinib, Nilotinib, Dasatinib and Bosutinib, patients with Ph+ CML or ALL are candidates for the therapy with these agents. From the available TKIs, Imatinib is considered as front-line therapy for CML patients in chronic phase, while for Ph+ ALL patients, 2nd generation TKIs (nilotinib, dasatinib, bosutinib) might be considered as more effective therapeutic option. Since the treatment with TKIs is a long-term affair, a substantial proportion of patients acquire some sort of mutation in kinase domain of BCR- ABL, which could be a reason of treatment failure. To date, over ninety BCR/ABL kinase domain mutations have been identified, affecting over 50 amino acids. Recurrent BCR/ABL kinase domain mutations have already been in vitro tested to approximate for their in vivo behavior. Our goal is to invent in vitro technique that would allow testing TKI sensitivity of novel BCR/ABL kinase domain mutations, identified at very low MRD levels. The technique makes use of site-directed mutagenesis to create the novel BCR/ABL kinase domain...

京都大学 / 0048 / 新制・課程博士 / 博士(工学) / 甲第19986号 / 工博第4230号 / 新制||工||1654(附属図書館) / 33082 / 京都大学大学院工学研究科都市環境工学専攻 / (主査)教授 酒井 伸一, 教授 米田 稔, 准教授 平井 康宏 / 学位規則第4条第1項該当 / Doctor of Philosophy (Engineering) / Kyoto University / DFAM

The presence of the translocation t(9;22)(q34;q11), leading to the BCR::ABL1 fusion transcript, is the hallmark of chronic myeloid leukemia (CML). Nevertheless, atypical presentation at diagnosis can be challenging. However, although most patients with CML are diagnosed with the e13a2 or e14a2 BCR:: ABL1 fusion transcripts, about 5% of them carry rare BCR::ABL1 fusion transcripts, such as e19a2, e8a2, e13a3, e14a3, e1a3, and e6a2. In particular, the e6a2 fusion transcript has been associated with clinically aggressive disease frequently presenting in accelerated or blast crisis phases. To date, there is limited evidence on the efficacy of front-line second-generation tyrosine kinase inhibitors for this genotype. Here, we report two patients, in whom the diagnosis of CML was challenging. The use of primers recognizing more distant exons from the common BCR::ABL1 breakpoint region correctly identified the atypical BCR::ABL1 e6a2 fusion transcript. Treatment with the second-generation tyrosine kinase inhibitor nilotinib was effective in our patient expressing the atypical e6a2 BCR::ABL1 fusion transcript.

No description available.

No description available.