Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-04-30Bitstream added on 2014-06-13T20:29:32Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_ja_me_rcla.pdf: 782919 bytes, checksum: 52bf93088b58465e8339d891ad9a3145 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O uso de plantas medicinais é uma prática muito antiga e utilizada pela maioria dos povos em todo o mundo. Lupinus albus (L. albus), conhecido popularmente como tremoço branco, vem sendo usado na medicina popular, em forma de sementes cruas, como regulador de níveis de glicemia e colesterol. Embora descrito na literatura que suas proteínas e alcaloides isolados têm potencial para isto, não se tem qualquer informação científica em relação à eficiência de suas sementes cruas. O objetivo deste trabalho foi avaliar os possíveis efeitos, citotóxicos, genotóxicos e antigenotóxicos, mutagênicos e antimutagênicos, carcinogênicos e anticarcinogênicos e também o potencial imunomodulador do extrato aquoso de sementes cruas de L. albus, por meio de ensaios de micronúcleo em medula óssea, Focos de criptas aberrantes em cólon, contagem diferencial de leucócitos, níveis de glicemia e colesterol do soro de camundongos da espécie Mus musculus, bem como determinar e quantificar, por meio de cromatografia gasosa, alcaloides e ácidos graxos desse extrato. Foi avaliado nos camundongos seus efeitos nas concentrações equivalente a 3 sementes/dia (como utilizado na medicina popular) e 9 sementes/dia. A análise fitoquímica do extrato revelou a presença do alcaloide lupanina, dos ácidos graxos oleico, linoleico, palmítico e esteárico. Porém não foi possível observar, por meio de ensaios bioquímicos, os efeitos hipoglicêmicos de L. albus em ambos os protocolos seguidos. Foi observado que os níveis de colesterol apresentaram melhora, para o protocolo com administração da DMH. No ensaio de MN em medula óssea, não foi observado efeito citotóxico, porém foi possível observar efeito genotóxico e mutagênico para o extrato testado na concentração maior no tratamento sub-crônico. Foram também observados efeitos antigenotóxico e... / The use of medicinal plants is a very old practice, used by most of the people around the world. Lupinus albus (L. albus), popularly known as white lupine, has been used in popular medicine in form of raw seeds, as a regulator of blood glucose and cholesterol. Although literature describes that their isolated proteins have the this potential, there is no scientific information regarding the efficiency of their raw seeds. The aim of this study was to evaluate the possible genotoxic, antigenotoxic, mutagenic, antimutagenic, anticarcinogenic and carcinogenic effects, and also the immune modulatory potential of aqueous extract of raw seeds of L. albus, by means of bone marrow micronucleus, aberrant crypt foci in colon, leukocyte counting, blood glucose and serum cholesterol levels of mice Mus musculus, as well as to determine and quantify alkaloids and fatty acids of these extracts, by gas chromatography. The effects of concentrations equivalent to 3 seeds/day (as used in popular medicine) and 9 seeds/day were evaluated in mice. Chemical analysis of the extract showed the presence of the alkaloid lupanine and oleic, linoleic, palmitic and stearic fatty acids. However, according to biochemical assays, it was not possible to observe hypoglycemic effects of L. albus in both followed protocols. It was observed that cholesterol levels showed an improvement in the protocol using DMH. No cytotoxic effects were observed in the MN assay in bone marrow, but genotoxic and mutagenic effects were recorded in highest concentration of the tested extract. Antigenotoxic and antimutagenic effects were also observed, demonstrating a preventive action for the two concentrations tested due to the promotion of harm reduction for pre-extract treatment. When the extract of L. albus was administered simultaneously with DMH, a reduction in damage was... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by Márcio Maia (marciokjmaia@gmail.com) on 2016-09-08T17:34:01Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3383101 bytes, checksum: e52ccda15daee8307b55ff0e71eeea15 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-08T17:34:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3383101 bytes, checksum: e52ccda15daee8307b55ff0e71eeea15 (MD5) Previous issue date: 2015-08-31 / Cissampelos sympodialis Eichl., (Menispermaceae) is popularly known as “milona". This species has shown potential to interfere with the pathophysiology of asthma by exerting multiple synergistic effects. Warifteine, a bisbenzilsioquinoline alkaloid has been considered as the main bioactive substance present in the leaves and roots of this species. The present work used a metabolomics approach combined with multivariate data analysis to study quantitative and qualitative chemical variations in the leaf extracts during the phenological development of the plant (between 60 and 210 days after seedling, and the corresponding extracts were coded as CsL60, CsL90, CsL120, CsL150, CsL180 e CsL210) and its relation with the relaxing effect using in vitro guinea pig tracheal. 1H-NMR data from extracts were submitted to PCA analysis and the concentration of the identified compounds was quantified by 1H qNMR. The contents of warifteine and methylwarifteine were determined by HPLC and the total phenolic content of extracts was determined using the Folin-Ciocalteu method, using galic acid as standard. Extracts submitted to 1H-NMR spectroscopy were simultaneously screened to determine their potency in relaxing in vitro guinea-pig tracheal pre-contracted with carbachol. To investigate the relationship between chemical profile and pharmacological activity we used PLS regression. The method was able to identify and to quantitate 20 primary and secondary metabolites in the extracts. The concentration of the major alkaloids decrease from 2.0 ± 0.32 μg/mL for warifteine and 1.0 ± 0.14 μg/mL for methylwarifteine to undetectable levels from 90 days onwards after seedling for warifteine and 120 days for methylwarifteine. Phenolic compounds and derivatives of the flavonols quercetin and kaempferol behave in na opposite fashion, increasing its levels towards fructification (from 0.1 ± 0.05 to 1.0 ± 0.12 mmol/L for quercetin and from 0.4 ± 0.12 to 1.0 ± 0.16 mmol/L for kaempferol). The metabolomics study based on 1H-NMR spectroscopy with PCA was able to discriminate all extracts demonstrating that the phenological cycle is associated with clear differences in chemical composition, mainly due to variations in the concentration of sugars and quinic acid derivatives. The extract obtained during fructification (CsL210) was the most distinctive amongst all samples mainly due to signals from quinic acid derivatives, kaempferol and quercein derivatives. The content of major alkaloids decreased from 2.0 ± 0.32 μg/mL for warifteine and 1.0 ± 0.14 μg/mL to methylwarifteine to undetectable levels from 90 days onwards after seedling for warifteine and 120 days for methylwarifteine. The phenolic compounds and flavonoids quercetin (0.1 ± 0.05 a 1.0 ± 0.12 mmol/L) and kaempferol (0.4 ± 0.12 a 1.0 ± 0.16 mmol/L) behaved in an opposite fashion, increasing its concentration towards fructification. The six extracts relaxed the trachea pre-contracted with carbachol guinea pig, and the CsF210 extract (EC50 = 74.6 ± 7.9 μg/mL) more potent compared to CsL90 extracts (EC50 = 231.6 ± 38.9 μg/ml) and CsL180 (EC50 = 239.7 ± 15.1 μg/ml) in the presence of functional epithelium. There was no correlation between the content of alkaloids as determined by HPLC and the spasmolytic activity of the extracts. PLS analysis revealed a moderate correlation between 1H-NMR signals for quercetin and kaempferol derivatives and the spasmolytic activity of extracts. Taken together our results demonstrate for the first time that bisbenzylisoquinoline alkaloids warifteine and methylwarifteine do not seem to participate in the spasmolytic actions of polar Cissampelos sympodialis extracts. / Cissampelos sympodialis Eichler, pertence a família Menispermaceae, sendo conhecida popularmente como “milona". A espécie tem demonstrado por meio de testes pré-clínicos, potencial de interferir em processos relacionados com a fisiopatologia da asma, exercendo múltiplos efeitos sinérgicos. A warifteína, um alcaloide bisbenzilisoquinolínico, tem sido apontada como a principal substância bioativa presente nas folhas e nas raízes desta espécie. O presente estudo utilizou metodologia metabolômica baseada em RMN e combinação com análise multivariada para analisar a variação química qualitativa e quantitativa dos constituintes presentes nos extratos hidroalcoólicos das folhas durante o desenvolvimento da planta (entre 60 a 210 dias após o plantio, codificados como CsF60, CsF90, CsF120, CsF150, CsF180 e CsF210) e a relação com o efeito in vitro sobre traqueia isolada de cobaia. Os dados de RMN-1H dos seis extratos das folhas foram submetidos à análise por PCA e os teores dos compostos identificados foram quantificados por RMNq-1H. O teor de warifteína e metilwarifteína foram determinados por CLAE e o teor de fenólicos totais determinado pelo método de Folin-Ciocalteu, utilizando ácido gálico como o composto fenólico padrão. Os extratos submetidos à análise por RMN-1H foram simultaneamente testados quanto à sua potência em relaxar in vitro a traqueia de cobaia pré-contraída com carbacol. Para estudar a relação entre o perfil químico e a atividade farmacológica foi empregada a técnica de PLS (Partial Least Squares). O estudo foi capaz de identificar e quantificar vinte substâncias dentre metabólitos primários e secundários presentes em todos os extratos das folhas. Os teores dos alcaloides majoritários decaem de 2,0 ± 0,32 μg/mL para warifteína e 1,0 ± 0,14 μg/mL para metilwarifteína a níveis não detectáveis, a partir de 90 dias após o plantio para a warifteína e a partir de 120 dias para metilwarifteína. Os compostos fenólicos e os flavonóis quercetina (0,1 ± 0,05 a 1,0 ± 0,12 mmol/L) e caempferol (0,4 ± 0,12 a 1,0 ± 0,16 mmol/L) se comportam de forma contrária, aumentando os seus níveis no sentido da frutificação. Através da análise de PCA foi possível diferenciar todos os extratos, demonstrando que o ciclo vegetativo está associado com diferenças claras na composição química, principalmente devido a variações na concentração de açúcares, compostos fenólicos e derivados do ácido quínico. O extrato (CsF210) originado das folhas no período da frutificação foi o mais distinto entre as amostras, sendo os sinais atribuídos aos derivados do ácido quínico, quercetina e caempferol responsáveis por esta discriminação. Os seis extratos foram capazes de relaxar a traqueia de cobaia pré-contraída com carbacol, sendo o extrato CsF210 (CE50 = 74,6 ± 7,9 μg/mL) mais potente em relação aos extratos CsF90 (CE50 = 231,6 ± 38,9 μg/mL) e CsF180 (CE50 = 239,7 ± 15,1 μg/mL) na presença de epitélio funcional. Não houve correlação entre o teor de alcaloides determinados por CLAE e a atividade espasmolítica dos extratos. Por outro lado, a análise por PLS demonstrou correlação entre os sinais de derivados dos flavonóis quercetina e caempferol e a potência espasmolítica dos extratos. Em conjunto nossos resultados demonstram pela primeira vez que os alcaloides bisbenzilisoquinolínicos warifteína e metilwarifteína não parecem estar envolvidos nas ações espasmolíticas dos extratos polares de Cissampelos sympodialis.

Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2017-02-23T13:59:50Z No. of bitstreams: 1 arquivo total.pdf: 8371353 bytes, checksum: 37a714300ceed716cdf730db2ac6e992 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-23T13:59:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivo total.pdf: 8371353 bytes, checksum: 37a714300ceed716cdf730db2ac6e992 (MD5) Previous issue date: 2015-08-14 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / This work consists of four chapters. The Chapter 1 describes a review of all alkaloids reported in the literature for the Annonaceae family, with its botanical occurrence and biological activities. 934 alkaloids have been reported in publications in the period from 1929 to 2012. Chapter 2 this is the isolation and identification of alkaloids Annonaceae family species, Anaxagorea dolichocarpa. By chromatographic and spectroscopic methods could be the isolation and identification of azaphenanthrenes alkaloids: eupolauramine, sampangine and imbiline 1 already reported to Anaxagorea dolichocarpa, the roots being reported for the first time, the 3- metoxisampangina alkaloid first isolated Anaxagorea dolichocarpa and the alkaloid Imbiline 4, first reported in the literature. The Chapter 3 reports the pharmacological studies on activities antitumor, Leishmanial and immunomodulatory of the isolated alkaloids. The imbiline 1 stood out by presenting significant antitumor activity and was also effective in immunomodulatory activity against inhibition of nitric oxide production. For Leishmanial activity, all substances were active, especially the sampangine. Chapter 4 refers to a theoretical study of the reported aporphines alkaloids in the review of published alkaloids Annonaceae and azaphenanthrenes of Annonaceae alkaloids. The study was performed by machine learning using molecular docking and molecular descriptors for Leishmanial activity. / Este trabalho consta de quatro capítulos. O Capitulo 1 descreve uma revisão dos alcaloides relatados na literatura para a família Annonaceae e suas atividades biológicas. Foram relatados 934 alcaloides em publicações no período de 1929 a 2012. O Capítulo 2 trata do Isolamento e identificação de alcaloides da espécie da família Annonaceae, Anaxagorea dolichocarpa. Através de métodos cromatográficos e espectroscópicos foi possível isolar e identificar os alcaloides azafenantrenos: eupolauramina, sampangina e imbilina 1 já relatados para Anaxagorea dolichocarpa, sendo reportados para as raízes pela primeira vez, o alcaloide 3-metoxisampangina isolado pela primeira vez para Anaxagorea dolichocarpa e o alcaloide Imbilina 4, relatado pela primeira vez na literatura. O Capitulo 3 relata os estudos farmacológicos nas atividades antitumorais, antileishmania e imunomoduladora dos alcaloides isolados. O alcaloide imbilina 1 destacou-se por apresentar significativa atividade antitumoral e também foi efetiva na atividade imunomoduladora frente a inibição da produção de óxido nítrico. Para a atividade antileishmania, todas as substâncias apresentaram atividade, com destaque para a sampangina. O Capítulo 4 refere-se a um estudo teórico dos alcaloides aporfínicos relatados na revisão publicada dos alcaloides de Annonaceae e alcaloides azafenantrenos de Annonaceae. O estudo foi realizado por máquina de aprendizagem utilizando descritores moleculares e docking molecular para a atividade antileishmania.

Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2017-07-10T13:59:53Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4398305 bytes, checksum: c95cf82f72f9c0e04311709786123245 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-10T13:59:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4398305 bytes, checksum: c95cf82f72f9c0e04311709786123245 (MD5) Previous issue date: 2016-05-27 / Alkaloids are secondary metabolites of great medical importance, covering a diverse group of nitrogen containing molecules in its structure, the number of alkaloid containing the tetrahidroisoquinolínico skeleton 1-substituted is extensive and impressive pharmacological versatility of this class arouses interest in experimental pharmacologists, the importance. This work has as objective, the synthesis of tetrahydroisoquinolines and provide material for future pharmacological studies both in-vivo and in-vitro. For the synthesis of phenyltetrahydroisoquinolinics alkaloids, benzyltetrahydroisoquinilinic and phenyltetrahydro-β-carboline the Pictet-Spengler reaction was aplicated. With the aim of expanding the pharmacological studies of the alkaloid (1-(3-dimethoxy-4-hydroxyphenyl)-7-methoxy-1,2,3,4,-tetrahydroisoquinoline (MTHP) your synthesis was repeated. 4 alkaloids were obtained, 2 phenyltetrahydroisoquinolinic (1-(3,5-dimethoxy-4-hydroxyphenyl)-7-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (73%) and 1-(2-hydroxyphenyl)-7-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (54%)), 1 phenyltetrahydro-β-carboline (1-(3,5-dimethoxy-4-hydroxyphenyl)-1,2,3,4,-tetrahydro-β-carboline (38%)) and 1 benzyltetrhydroisoquinilínic (1-(1-ethyl-3,4-metilenodioxidofenil)-6,7-dimethoxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (87%)). From the material available for the pharmacological MTHP tests showed low toxicity without genotoxicity, its immunomodulatory mechanism in asthma is related to regulation of TH2 profile. / Alcaloides são metabólitos secundários de grande importância medicinal, abrangendo um grupo diverso de moléculas contendo nitrogênio na sua estrutura. O número de alcaloides que contém o esqueleto tetrahidroisoquinolínico 1-substituído é extenso e a impressionante versatilidade farmacológica desta classe desperta o interesse nos farmacologistas experimentais. Visto a importância dos alcaloides isoquinolínicos, o nosso trabalho tem como objetivo a síntese de derivados tetrahidroisoquinolínicos e fornecer material para futuros estudos farmacológicos tanto in-vivo como in-vitro. Para a síntese dos alcaloides feniltetrahidroisoquinolínicos, benziltratrahidroisoquinilínicos e feniltetrahidro-β-carbolínicos foi utilizado a reação de Pictet-Spengler. Com o objetivo de ampliar os estudos farmacológicos a respeito do alcaloide (1-(3-dimetoxi-4-hidroxifenil)-7-metoxi-1,2,3,4,-tetrahidro isoquinolina (MTHP) refizemos a sua síntese como descrito na literatura. Obtivemos 4 alcaloides, sendo 2 deles feniltetrahidroisoquinolínicos (1-(3,5-dimetoxi-4-hidroxifenil)-7-metoxi-1,2,3,4,-tetrahidro isoquinolina (73%) e 1-(2-hidroxifenil)-7-metoxi-1,2,3,4,-tetrahidro isoquinolina (54%)), 1 feniltetrahidro-β-carbolínicos (1-(3,5-dimetoxi-4-hidroxifenil)-1,2,3,4,-tetrahidro-β-carbolina (38%)) e 1 benziltratrahidroisoquinilínicos (1-(1-etil-3,4-metilenodioxidofenil)-6,7-dimetoxi-1,2,3,4,-tetrahidro isoquinolina(87%)). A partir da disponibilização de material para os testes farmacológicos do MTHP, apresentou baixa toxicidade sem genotoxicidade, seu mecanismo imunomodulador na asma está relacionado a regulação do perfil TH2.

Submitted by JOÃO LUCAS BRUNO PRATES null (jhonylprates@yahoo.com.br) on 2017-08-30T20:18:59Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de mestrado - João Lucas.pdf: 6449742 bytes, checksum: 4da0e1cbddc21aa321ccfa9245fbb63b (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-09-01T13:02:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 prates_jlb_me_araiq.pdf: 6449742 bytes, checksum: 4da0e1cbddc21aa321ccfa9245fbb63b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-01T13:02:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 prates_jlb_me_araiq.pdf: 6449742 bytes, checksum: 4da0e1cbddc21aa321ccfa9245fbb63b (MD5) Previous issue date: 2017-07-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Na presente pesquisa foram sintetizados vários derivados piridínicos objetivando a descoberta de constituintes com atividade antiparasitária potencial. Estes compostos foram planejados a partir do alcaloide (–)-espectalina isolado de Senna spectabilis (Fabaceae), empregando alguns processos usuais da química medicinal como a simplificação molecular, isosterismo clássico e funcional. Deste procedimento experimental, foram sintetizados 18 substâncias, sendo todas obtidas por meio de reações simples, a partir de compostos comerciais. Das substâncias sintéticas produzidas, 14 foram submetidas à avaliação para atividade em Trypanosoma cruzi, visando potenciais antichagásicos, e em Leishmania infantum para identificar potenciais leishmanicidas. Os compostos testados mostraram-se inativos na inibição destes protozoários. Contudo, dois análogos (48 e 52) apresentaram atividade inibitória das cepas de Plasmodium falciparum, com CI50 = 5,0 µM e índice de seletividade bastante interessante (IS >50). / In the present research, several pyridine derivatives were synthesized aiming at the discovery of new constituents with potential antiparasitic activity. All compounds were planned from the (-)-spectaline alkaloid isolated from Senna spectabilis (Fabaceae), employing some usual medicinal chemistry procedures, such as molecular simplification, classical and functional isosterism. From this experimental procedure, 18 compounds were synthesized, and all of these were obtained by means of simple reactions, from commercial compounds. Of the synthetic substances produced, 14 were evaluated for activity in Trypanosoma cruzi, aimed at the search for potential antichagasics, and against Leishmania infantum to identify potential leishmanicidal derivatives. All compounds tested were inactive to the inhibition of these protozoa. However, two analogues (48 and 52) showed inhibitory activity against Plasmodium falciparum strains, with IC50 = 5.0 μM and an interesting selectivity index (IS> 50).

Orientador: Christiane Pienna Soares / Banca: Dulce Helena Siqueira Silva / Banca: Denise Coutinho Endringer / Banca: Raquel Alves dos Santos / Banca: Massuo Jorge Kato / Resumo: A quimioprevenção do câncer é definida como o uso de produtos naturais ou sintéticos para atrasar, bloquear ou reverter o processo de carcinogênese. Produtos naturais apresentam uma diversidade de estruturas químicas que servem de modelo para o desenvolvimento de novos princípios ativos antitumorais e quimiopreventivos. Alcaloides guanidínicos presentes nas folhas de Pterogyne nitens apresentam atividade antitumoral e foram selecionados para os ensaios. O ácido gálico foi escolhido como modelo e seus derivados tiveram atividade quimiopreventiva descrita por ser produto natural antioxidante presente nas folhas de Alchornea glandulosa. Uma coleção de 70 substâncias foi classificada em 6 grupos de acordo com sua estrutura. Derivados de ácidos fenólicos, alcaloides guanidínicos, fenamatos, carvonas, xantonas, flavonas e chalconas preniladas foram avaliadas em ensaios de citotoxicidade por SRB em células MCF-7 e MDA-MB-231, e a atividade quimiopreventiva por meio de indução da enzima quinona-redutase (NQO1) em células Hepa 1c1c7, inibição in vitro de aromatase (CYP19), inibição de NF-κB ativado por TNFα e inibição da produção de NO em células RAW 264.7 estimuladas por LPS. Além disso, alcaloides guanidínicos nitensidina A (NTA), nitensidina B (NTB) e nitensidina T (NTT) foram avaliados pelo ensaio de MTT e a indução de apoptose por coloração com Hoechst 33342 e iodeto de propídio, ambos em células HepG2. A genotoxicidade do ácido gálico (GA) e galato de metila (G1) foi avaliada em células HepG2 pelo ensaio do cometa. GA e G1 apresentaram inibição de NF-κB (CI50 = 19,8 μM e 12,1 μM, respectivamente), sendo que GA provocou quebras de DNA significantes (P < 0,05) nas concentrações de 12 μM e 40 μM verificados pelo ensaio do cometa. Galato de propila (G3) e galato de butila... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Cancer chemoprevention is defined as the use of natural or synthetic products to delay, block or reverse the carcinogenesis process. Natural products presents a diversity of chemical structures that serve as template for the development of new active antitumor and chemopreventive agents. Guanidine alkaloids from the leaves of Pterogyne nitens have antitumor activity and were selected for the assays. Gallic acid, an antioxidant natural product present in the leaves of Alchornea glandulosa, was selected as template and its derivatives chemopreventive activity is reported. A collection of 70 compounds were classified into six groups according to their structure. Phenolic acid derivatives, guanidine alkaloids, fenamates, carvones, xanthones, prenylated flavones and chalcones were evaluated in cytotoxicity assays through SRB in MCF-7 and MDA-MB-231 cell lines, and chemopreventive activity by means of quinone-reductase (NQO1) induction in Hepa 1c1c7 cell line, in vitro aromatase (CYP19) inhibition, TNFα-activated NF-κB inhibition and NO production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Guanidine alkaloids nitensidine A (NTA), nitensidine B (NTB) and nitensidine T (NTT) were evaluated through MTT assay and apoptosis induction with Hoechst 33342 and propidium iodide stain, both in HepG2 cell line. Genotoxicity of gallic acid (GA) and methyl gallate (G1) was evaluated in HepG2 cells by the comet assay. GA and G1 presented NF-κB inhibition (IC50 = 19.8 μM and 12.1 μM, respectively), and it resulted in significant (P < 0.05) DNA strand breaks at 12 μM and 40 μM as verified by the comet assay. Propyl gallate (G3) and butyl gallate (G4) inhibited NO production (IC50 = 7.9 μM e 2.0 μM, respectively). Butyl gallate and pentyl gallate (G5) inhibited CYP19 in approximately 60% at 90 μM, allowing a structure-activity... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria Aparecida Marin-Morales / Banca: Grasiela Dias de Campos Severi-Aguiar / Banca: Elaine Cristina Mathias da Silva Zacarin / Resumo: O uso de plantas medicinais é uma prática muito antiga e utilizada pela maioria dos povos em todo o mundo. Lupinus albus (L. albus), conhecido popularmente como tremoço branco, vem sendo usado na medicina popular, em forma de sementes cruas, como regulador de níveis de glicemia e colesterol. Embora descrito na literatura que suas proteínas e alcaloides isolados têm potencial para isto, não se tem qualquer informação científica em relação à eficiência de suas sementes cruas. O objetivo deste trabalho foi avaliar os possíveis efeitos, citotóxicos, genotóxicos e antigenotóxicos, mutagênicos e antimutagênicos, carcinogênicos e anticarcinogênicos e também o potencial imunomodulador do extrato aquoso de sementes cruas de L. albus, por meio de ensaios de micronúcleo em medula óssea, Focos de criptas aberrantes em cólon, contagem diferencial de leucócitos, níveis de glicemia e colesterol do soro de camundongos da espécie Mus musculus, bem como determinar e quantificar, por meio de cromatografia gasosa, alcaloides e ácidos graxos desse extrato. Foi avaliado nos camundongos seus efeitos nas concentrações equivalente a 3 sementes/dia (como utilizado na medicina popular) e 9 sementes/dia. A análise fitoquímica do extrato revelou a presença do alcaloide lupanina, dos ácidos graxos oleico, linoleico, palmítico e esteárico. Porém não foi possível observar, por meio de ensaios bioquímicos, os efeitos hipoglicêmicos de L. albus em ambos os protocolos seguidos. Foi observado que os níveis de colesterol apresentaram melhora, para o protocolo com administração da DMH. No ensaio de MN em medula óssea, não foi observado efeito citotóxico, porém foi possível observar efeito genotóxico e mutagênico para o extrato testado na concentração maior no tratamento sub-crônico. Foram também observados efeitos antigenotóxico e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The use of medicinal plants is a very old practice, used by most of the people around the world. Lupinus albus (L. albus), popularly known as white lupine, has been used in popular medicine in form of raw seeds, as a regulator of blood glucose and cholesterol. Although literature describes that their isolated proteins have the this potential, there is no scientific information regarding the efficiency of their raw seeds. The aim of this study was to evaluate the possible genotoxic, antigenotoxic, mutagenic, antimutagenic, anticarcinogenic and carcinogenic effects, and also the immune modulatory potential of aqueous extract of raw seeds of L. albus, by means of bone marrow micronucleus, aberrant crypt foci in colon, leukocyte counting, blood glucose and serum cholesterol levels of mice Mus musculus, as well as to determine and quantify alkaloids and fatty acids of these extracts, by gas chromatography. The effects of concentrations equivalent to 3 seeds/day (as used in popular medicine) and 9 seeds/day were evaluated in mice. Chemical analysis of the extract showed the presence of the alkaloid lupanine and oleic, linoleic, palmitic and stearic fatty acids. However, according to biochemical assays, it was not possible to observe hypoglycemic effects of L. albus in both followed protocols. It was observed that cholesterol levels showed an improvement in the protocol using DMH. No cytotoxic effects were observed in the MN assay in bone marrow, but genotoxic and mutagenic effects were recorded in highest concentration of the tested extract. Antigenotoxic and antimutagenic effects were also observed, demonstrating a preventive action for the two concentrations tested due to the promotion of harm reduction for pre-extract treatment. When the extract of L. albus was administered simultaneously with DMH, a reduction in damage was... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

As doenças neurodegenerativas tais como as doenças de Alzheimer, Parkinson e desordens cerebrovasculares constituem-se em uma das principais causas de morbidade e de mortalidade na vida adulta. Além disso, o desequilíbrio entre os sistemas de geração e de proteção antioxidante celulares, chamado de estresse oxidativo, desempenha um papel importante nos danos neuronais causados pelos processos isquêmicos, provocando alterações funcionais em macromoléculas e promovendo a lipoperoxidação de membranas. Substâncias com dupla atividade anticolinesterásica e antioxidante vêm sendo consideradas como uma nova abordagem terapêutica para o tratamento farmacológico da doença de Alzheimer, incentivando a investigação e o estudo de produtos naturais para o desenvolvimento de fármacos novos e eficientes. Nesse estudo empregamos um modelo in vitro de fatias hipocampais de ratos, submetidas à privação de oxigênio e glicose (POG) e os métodos de avaliação da toxicidade dos alcalóides empregados foram a liberação da enzima lactato desidrogenase (LDH) citosólica e redução do MTT (viabilidade mitocondrial). Os alcalóides boldina e vincamina promoveram um aumento de 40 % na liberação de LDH nas fatias que sofreram POG na concentração de 100 μM, além de aumentos significativos na liberação desta enzima também nas fatias controles. Psicolatina e reserpina também tiveram efeitos neurotóxicos. Foi verificado que a POG em fatias hipocampais promove uma diminuição nas medidas do potencial antioxidante total (TRAP) e reatividade antioxidante total (TAR), de 63 % e 16,5 %, respectivamente, além de causar um aumento nos níveis de malonodialdeído liberado pelas fatias, detectado pelo ensaio de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBA-RS). Entretanto, este efeito foi revertido pela presença de boldina nas concentrações de 10 μM e de 50 μM. Este mesmo alcalóide, com reconhecida atividade antioxidante, também demonstrou ser um seqüestrador de radicais peroxila mais potente que o padrão Trolox. Além disso, os alcalóides indólicos monoterpênicos coronaridina, venalstonina, andrangina, vincadiformina e voacristina, além da boldina, exibiram potentes atividades antioxidante e anticolinesterásica em ensaios autobiográficos in vitro. / Neurodegenerative disorders, such as Alzheimer, Parkinson and cerebrovascular diseases are one of the major causes of morbidity and mortality in the middle aged and the elderly. Also, the imbalance between the activity of free radicals generation and scavenging systems, called oxidative stress, plays a important role in the neuronal damages caused by ischemia, leading to functional alterations in macromolecules and promoting lipoperoxidation in membranes. Acetylcholinesterase inhibitors and antioxidant compounds have been extensively investigated as new pharmacological strategies for the symptomatic treatment of Alzheimer disease. In this way, natural products are potentially important in an attempt to develope newer and safer drugs. In the present study, we selected the in vitro model of oxygen and glucose deprivation (OGD) in hippocampal slices and the methods used to assess the neurotoxicity of the alkaloids were cellular lactate dehydrogenase (LDH) release and reduction of MTT salt (mitochondrial activity). Both alkaloids boldine and vincamine 100 μM promoted a 40 % increase in LDH release in POG slices, as well as significant increases in the activity of this enzyme in control slices. Psychollatine and reserpine had also neurotoxic effects. It was also verified that OGD decreased the measurements of total antioxidant potential (TRAP) in 63 % and the total antioxidant reactivity (TAR) levels in 16.5 %, as well as an increase in the malondialdehyde levels by slices, which was detected by thiobarbituric acid-reactive substances (TBA-RS). However, this effect was prevented by the presence of boldine 10 μM and 50 μM. This alkaloid is a known antioxidant and it displayed a potent scavenger activity for peroxyl radicals, when compared with Trolox. Another finding is that the monoterpene indole alkaloids coronaridine, venalstonine, andrangine, vincadifformine, voacristine and also boldine exhibited both potent antioxidant and acetylcholinesterase inhibitor activities in in vitro autobiographic assays.

Orientador: Marilia de Moraes Castro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-16T08:54:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cardoso_PolianaRamos_M.pdf: 9377524 bytes, checksum: 3ae09511f3adb4c573d5459c04c08e1a (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Esta tese tem como principal objetivo contribuir para o conhecimento morfológico das glândulas dos órgãos vegetativos aéreos de Passiflora alata Curtis e P. edulis Sims e localização dos compostos bioativos responsáveis pela reconhecida importância farmacológica apresentada por estas espécies. Técnicas em microscopias fotônica e eletrônica de varredura são utilizadas na observação da morfologia das glândulas, visualização dos compostos fenólicos presentes no interior destas estruturas e exame da micromorfologia dos cristais; a espectrometria por energia dispersiva de raios-x é empregada na identificação dos átomos constituintes dos cristais. Testes histoquímicos convencionais e de fluorescência são aplicados nas glândulas para a caracterização in situ do exsudato; estes procedimentos são acoplados à análise do exsudato em espectrometria de massas (MS). Os principais pontos abordados na tese são: a validação das glândulas presentes nos pecíolos e lâminas foliares de ambas as espécies como nectários extraflorais (NEF); identificação das glândulas estipulares de P. alata como coléteres; a localização de alcalóides e flavonóides no interior dos idioblastos dispersos nos tecidos vasculares, majoritariamente no floema, do caule e da folha destas espécies. A morfologia, coloração e variação no número de NEF peciolares de P. alata indicam que estas glândulas atuam como egg mimics, estruturas miméticas de ovos de borboletas Heliconiini - principal consumidor de espécies de Passiflora - que previnem a oviposição destes insetos. Ainda, estas glândulas apresentam idioblastos dispersos no parênquima cujo conteúdo é composto por terpenos e, neste contexto, a morfologia crateriforme pode propiciar um microambiente de contenção de voláteis nos NEF peciolares de P. alata. A análise dos cristais presentes no parênquima nectarífero dos NEF peciolares de ambas as espécies identificou cristais do tipo agregado cristalífero, cuja composição é de oxalato de cálcio, e areia cristalífera, constituída por átomos de ferro, em P. alata e drusas de oxalato de cálcio em P. edulis. O registro de ferro armazenado fora do cloroplasto é inédito. A análise química qualitativa do exsudato proveniente dos NEF peciolares e laminares de ambas as espécies evidenciou açúcares e, em menor concentração relativa, flavonóides e alcalóides - exceto nos NEF peciolares de P. alata. A detecção de diferentes tipos de açúcares no exsudato das glândulas estipulares de P. alata corrobora sua identificação como coléteres. Em ambas as espécies, a localização dos idioblastos dispersos nos tecidos vasculares contendo alcalóides e flavonóides sugere uma translocação destes compostos pelos elementos de tubo crivado para diferentes órgãos e acúmulo nos idioblastos. A técnica usada para estimar a atividade antioxidante de compostos in vitro com o uso do reagente DPPH foi adaptada para a observação in situ desta reação, evidenciando esta atividade nos idioblastos contendo flavonóides em ambas as espécies. Os estudos histoquímicos aliados às análises do néctar em MS sugerem uma relação entre as diferentes concentrações de alcalóides e flavonóides no interior e fora da planta, em que a alta concentração destes compostos apresenta efeito dissuasivo, comprometendo o desenvolvimento de herbívoros, enquanto a baixa concentração não acomete o crescimento dos coletores mutualistas. Este trabalho inova ao integrar técnicas distintas na caracterização das estruturas secretoras e do exsudato por elas produzido / Abstract: The purpose of the present study is to contribute to the morphological knowledge of the glands present in aerial vegetative organs of Passiflora alata Curtis e P. edulis Sims and in situ localization of bioactive compounds responsible for the recognized pharmacological importance of both species. Scanning electron and photonic microscopy techniques are applied to the observation of glands morphology, visualization of phenolic compounds into these structures and the examination of crystals micromorphology; the energy dispersive xray spectrometry is applied to identify the constituent atoms of crystals. Conventional histochemical tests and fluorescence are applied to the glands for in situ characterization of exudate; these procedures have been coupled with the analysis of exudate in mass spectrometry (MS). The main points of this research are the validation of the glands present in the petiole and leaf blade of both species as extrafloral nectaries (EFN) and of stipular glands of P. alata as colleters; the in situ localization of alkaloids and flavonoids within the idioblast scattered through the vascular tissue, mainly in the phloem, in stem and leaves of these species. The morphology, color and variation in number of petiolar ENF of P. alata indicate that these glands act as egg mimics, mimetic structures of the Heliconiini butterflies eggs - the main consumer of Passiflora species - that prevent oviposition of these insects. Nevertheless, these glands possess idioblasts that synthesize terpenes. In this context, the crateriform morphology of petiolar ENF of P. alata may provide a microenvironment for holding volatile. The analysis of crystals present in the petiolar nectariferous parenchyma of both species identified aggregate crystals, whose composition is calcium oxalate, and crystal sand, consisting of iron atoms in P. alata, and druses of calcium oxalate in P. edulis. This is the first record of iron stored outside the chloroplast. The qualitative chemical analysis of the exudate from petiolar and laminar ENF of both species detected sugar and lower concentrations of flavonoids and alkaloids - except in the petiolar ENF of P. alata. The identification of different types of sugars found in stipular glands exudate of P. alata confirms its identification as colleters. In both species, the location of idioblasts containing alkaloids and flavonoids scattered through the vascular tissue suggest a translocation of those compounds through sieve-tube members of phloem to different organs and their consequent accumulation inside the idioblasts. The technique used in order to estimate the antioxidant activity of compounds in vitro with the aid of DPPH reagent was adapted for in situ observation of this reaction, showing this activity in idioblasts synthesizing flavonoids in both species. Histochemical studies coupled with nectar analysis in MS suggest a relationship between the different concentrations of alkaloids and flavonoids inside and outside the plant, where high concentration of these compounds has a deterrent effect, endangering the development of herbivores, while low concentration does not affect the mutualistic collectors growth. This work innovates by integrating different techniques for the characterization of the secretory structures and the exudate produced by them / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Biologia Vegetal

Orientadores: João Ernesto de Carvalho, Mary Ann Foglio / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-06T02:42:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Denny_Carina_D.pdf: 2044243 bytes, checksum: 37d9912d0a46cbfff8c47cde834817fd (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Modelos de avaliação da citotoxicidade têm proporcionado a obtenção de importantes dados preliminares, ajudando a selecionar extratos de plantas com propriedade antitumoral para estudos futuros. Como parte de um programa de screening de plantas medicinais brasileiras e produtos naturais com propriedades anticâncer, o presente trabalho apresenta a atividade da Virola sebifera (Myristicaceae), uma árvore endêmica do Cerrado brasileiro. O objetivo geral desse trabalho foi avaliar as propriedades in vitro e in vivo de amostras da V. sebifera. além de isolar e identificar seus compostos ativos. O primeiro estudo descreve a atividade antiproliferativa em cultura de células tumorais humanas de duas lignanas e dois policetídeos isolados das folhas da V. sebifera. Assim, reportamos o isolamento e elucidação estrutural de um novo policetídeo 3,5-diidro-2-(l'-oxo-3'-hexadecenil)-2-ciclohexano-l-ona com alta atividade antiproliferativa contra 8 linhagens de células tumorais humanas. No segundo estudo, purificamos a fração ativa (FR4) a partir do extrato bruto diclorometânico, com atividade in vitro (IC50- 5,19-10,57 (xg/mL - ensaio do SRB) pãrã âs mesmas linhagens celulares. Pãrã ãvãliãr ã atividade in vivo da fração ativa utilizamos o ensaio da hollow fiber. Assim, foram estabelecidas as condições de crescimento para as linhagens celulares MCF-7, NCI-ADR e OVCAR03 em fibras (hollow fibers) implantadas no abdômen (i.p.) e no dorso (s.c.) de camundongos imunocompetentes. Os animais foram tratados com FR4 (500mg/kg), doxorubicina (6mg/kg) ou veículo intraperitonealmente. Após 14 dias de tratamento, as fibras foram retiradas, seguindo-se a coloração do MTT para determinação da densidade de células viáveis. A fração FR4 demonstrou efeito significante contra células de mama (MCF-7) e ovário (OVCAR03). A confirmação das propriedades anticâncer in vitro e in vivo da Virola sebifera apresentadas nesse estudo, nos permite avançar em pesquisas futuras, orientando a seleção de outros modelos e estudos de mecanismo de ação / Abstract: Cytotoxicity screening models provide important preliminary data to help select plant extracts with potential antitumor properties for future work. As part of a screen program searching for Brazilian medicinal plants and natural products with anticancer properties, the present investigation reports the anticancer activity the Virola sebifera (Myristicaceae), an endemic tree from the Brazilian Cerrado. The overall aim of this work was the evaluation of in vitro and in vivo properties of samples from V. sebifera, there for the isolation and identification of the active compounds. The first study describes the antiproliferative properties against human cell lines of two lignans and two polyketides isolated from leaves of V. sebifera. Herein we report the isolation and structure elucidation of a novel polyketide 3,5-dihydro-2-(r-oxo-3J-hexadecenyl)-2-cyclohexen-l-one with high antiproliferative activity against 8 human cancer cell lines. In the second study, we purified the active fraction (FR4) from the crude dichloromethanic extract with in vitro activity (IC5ri=5.19 - 10.57 pg/mL - SRB assay) against the same cell lines. In addition, the hollow fiber assay was used to study the effect in vivo of the active fraction (FR4). Using this model, we have established growth conditions for MCF-7, NCI-ADR and OVCAR03 cells implanted at the intraperitoneal (i.p.) and subcutaneous (s.c.) compartments of immunocompetent mice. Then, the animals were treated with FR4 (500 mg/kg). doxorubicin (6mg/kg) or vehicle only intraperitoneally. After 14 days the fibers were retrieved, followed by determination of living cell density by MTT staining. FR4 showed significant effect against breast (MCF-7) and ovarian (OVCAR03) tumor cells. The anticancer properties of Virola sebifera in vitro and in vivo was confirmed in this study. These findings may guide future studies in other models and detailed studies on the mechanisms of action / Doutorado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Doutor em Odontologia