Ácido Hialurônico (HA) é um componente da matriz extracelular, responsável pela hidratação e manutenção do equilíbrio osmótico tecidual. Concentrações de HA estão elevadas em vários tipos de cânceres, incluindo próstata. Hialuronidases (HAases), são uma família de enzimas relacionadas com a propagação de infecções bacterianas, toxinas de venenos e progressão tumoral. A quebra do HA em pequenos fragmentos (3-25 dissacarídeos) promovidos pela ação das HAases tipo Hyal1, Hyal2 e Hyal3, está relacionada à promoção do câncer através da indução da angiogênese e estímulo a proliferação através de ativação da via tirosina quinase. Algumas isoformas de HAases, descritas como produto de splicing alternativo, possuem atividade enzimática diversificada. A heterogeneidade de expressão das HAases foi identificada em alguns tipos de câncer e pode ser correlacionada com o comportamento diferenciado dos tumores. Para este trabalho estudamos amostras de 55 pacientes submetidos a prostatectomia radical por carcinoma de próstata (CP) . A média de idade foi 66 anos e o tempo médio de seguimento 73,7 meses. Os pacientes foram divididos em dois grupos para análise dos resultados: 1- Escore de Gleason (EG) >=7 (30) e EG <=6 (25). 2- Comportamento tumoral (recidiva-19, e não recidiva-36), considerando o nível sérico de Antígeno Específico da Próstata (PSA) 0,2 ng/mL. O grupo controle foi representado por 11 pacientes com hiperplasia prostática benigna, submetidos à ressecção retropúbica. As HYAL foram identificadas por PCR, com uso de primers específicos para as variantes 1, 2, 3, 4 e 5 e wt da HYAL1, wt da HYAL2, e wt e variantes 1, 2 e 3 da HYAL3. As HYAL mais freqüentemente expressas pelo CP foram HYAL2-wt (65,4%), HYAL1-v1 (63,3%) e HYAL3-wt (47,2%). Em tecidos prostáticos benignos, a HYAL3-v1 foi expressa em 90,9% dos casos, estando presente em 36% dos tumores com EG baixo, e não expressa em tumores com EG alto (p=<0,001). Nos tumores sem recidiva HYAL1-v3 foi expressa em 30,5% dos casos versus 5,2% em casos que recorreram (p=0,041). HYAL3 v2, foi expressa por 33,3% dos tumores que não recorreram e não expressa em tumores que recorreram (p=0,002). Concluímos que a expressão de HYAL1-v3, HYAL3-v1 e HYAL3-v2 está relacionada a tumores mais diferenciados e com menores taxas de recidiva, podendo ser utilizadas como marcadores na prática clínica identificando candidatos a terapias mais conservadoras. / Hyaluronic acid (HA) is a component of the extracellular matrix that hydrates and maintains the osmotic balance of tissues. HA concentration is elevated in several cancers including prostate. Hyaluronidases (HAases) are a family of enzymes related to the spread of bacterial infections, toxins of venoms and probably cancer progression. Small fragments of HA are generated by HAase Hyal1, Hyal2 and Hyal3, stimulating endothelial proliferation and activating mitogen-activated protein kinase pathway. Several isoforms of HAases have been described as a product of alternative splicing, and are responsible for differences in the enzyme activity. The heterogeneity of HAses expression has been identified in tumors and could be related to the differences in their biological behavior. Fifty-five patients submitted to radical prostatectomy for prostate cancer (PC) were the subject of this study. The mean age was 66 years old and the mean follow-up was 73,7 months. Patients were divided into two groups for the analyses: 1- High Gleason score (GE) >=7 (30) and low Gleason score <=6 (25). 2- Tumor behavior; recurrence - 19 and nonrecurrence - 36. Biochemical recurrence was considered when PSA was higher than 0.2 ng/mL. The control was represented by 11 patients submitted to retropubic prostate resection for benign prostatic hyperplasia. The alternative splicing forms of HYAL were identified by PCR, and the primer sequences identified variants 1, 2, 3, 4, 5 e wt of HYAL1, wt of HYAL2, wt and variants 1, 2 and 3 of HYAL3. The HYAL more frequently expressed by PC was HYAL2-wt (65.4%), HYAL1-v1 (63.3%) and HYAL3-wt (47.2%). In benign prostate tissue the main expressed HAase was HYAL3-v1 in 90.9%, being present in 36% of low Gleason score tumors and not expressed by tumors with high Gleason score (p=<0.001). For tumors that not recurred there was expression of HYAL1-v3 in 30.5% of the cases vs. 5.2% in cases that recurred (p=0.041). The same difference was noted regarding the expression of HYAL3-v2, that was expressed by 33.3% of tumors that not recurred and not expressed by tumors that recurred (p=0.002). We conclude that there is a profile of HAase related to low Gleason score and non-recurrent PC that is characterized by expression of HYAL1-v3, HYAL3-v1 and HYAL3-v2 that could be used in clinical practice to choose a better treatment.

O splicing alternativo é o processo pelo qual diversos transcritos podem ser gerados a partir de um único gene, sendo de extrema importância para diversidade do repertório transcricional e proteico. Diferentes variantes de splicing são expressas entre os diferentes tecidos e estágios de desenvolvimento garantindo o funcionamento normal da célula, portanto, qualquer alteração neste padrão pode resultar no aparecimento de doenças. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi o estabelecimento de metodologias para identificação de variantes de splicing em câncer de mama sob influência do oncogene ERBB2, o qual é um marcador de mau prognóstico altamente expresso em cerca de 30% dos tumores de mama. Foram estabelecidas duas estratégias para construção de bibliotecas de cDNA. A construção de bibliotecas de cDNA enriquecidas para splicing alternativo, baseada na formação e captura de moléculas de heteroduplexes em combinação com a amplificação de RNAm, foi realizada a partir de RNA total de linhagem celular de mama e a partir de um grupo de cinco amostras tumorais, todas com alta expressão de ERBB2. Foram identificadas 79 possíveis variantes de splicing alternativo em câncer de mama, das quais 18 foram selecionadas para validação por RT-PCR. Foi obtida uma taxa de vallidação de 94% e foram identificadas duas novas variantes de splicing alternativo. A regulação da expressão mediada por ERBB2 de três variantes de splicing foi confirmada por duas metodologias distintas, eletroforese em chip e estratégia baseada na ligação de sondas específicas, que revelou desbalanço de expressão entre as variantes, demonstrando a influência do oncogene na regulação de variantes de splicing. A segunda abordagem utilizada, foi a construção de bibliotecas de cDNA para avaliação do transcriptoma total, utilizando sequênciamento de alto desempenho. Foram utilizados RNA total de duas linhagens celulares de mama que diferem apenas na expressão do gene ERBB2. Foram identificadas 2.865 novas variantes de splicing, das quais 20, que reportaram a identificação de um novo éxon, foram selecionadas para validação, com uma taxa de validação de 90%. Seis destas variantes apresentaram aumento de expressão na linhagem com alta expressão de ERBB2. Além disso, foi detectado um enriquecimento de algumas categorias de variantes na linhagem celular com alta expressão de ERBB2, reforçando a influência do oncogene na regulação do splicing alternativo, podendo resultar em variantes de splicing associadas a este grupo de câncer de mama, que podem ser candidatas a marcadores moleculares. / Alternative splicing is a process, by which many differente transcripts can be generated by one single gene, significantly expanding the transcriptional and proteomic diversity. Different splicing variants are generated among different transcripts and developmental stages, assuring normal cell function. Therefore, alterations in the splicing process can lead to diseases outcome. In this context, the aim of this study was the establishment of methodologies for the identification of alternative splicing in breast cancer influenced by ERBB2 oncogene, which is a poor prognostic molecular marker, highly expressed in 30% of human breast cancer. Two strategies were established for the construction of cDNA libraries. Alternative enriched splicing libraries, based on heteroduplex capture combined with mRNA amplification, were constructed from total RNA from a cell line and also from five tumor samples, all of them presenting high ERBB2 expression. Seventy nine putative splicing variants were identified and 18 of them were selected for RT-PCR validation. A high validation level was obtained (94%) and two novel alternative splicing variants were identified. ERBB2 mediated regulation was confirmed for three variants by two distinct methodologies, electrophoresis on a chip and probe specific ligation approach. The alteration in the expression balance of variants suggests the influence of the oncogene in the splicing pattern regulation. The second strategy was the construction of cDNA libraries for global transcriptome analysis based on deep sequencing. Total RNA from two mammary epithelial cell lines expressing different ERBB2 levels were used and 2,865 novel splicing variants were identified. Twenty novel events reporting the inclusion of novel exons were selected for RT-PCR validation with 90% validation rate. Six variants presented higher expression in the cell line with high levels of ERBB2. Moreover enrichment in splicing events was detected in the ERBB2 high expressing cell line, supporting the ERBB2 influence in alternative splicing regulation, possibly resulting in splicing variants associated to this subgroup of cancer that can be tested as molecular markers.

Submitted by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-06-30T13:43:29Z No. of bitstreams: 1 DIS_PAMELA_DE_MEDEIROS_ENGELMANN_COMPLETO.pdf: 4731701 bytes, checksum: 84078b031517fd9e5d98eb0cff7eaf16 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-30T13:43:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_PAMELA_DE_MEDEIROS_ENGELMANN_COMPLETO.pdf: 4731701 bytes, checksum: 84078b031517fd9e5d98eb0cff7eaf16 (MD5) Previous issue date: 2017-03-10 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / In Brazil, landfills are the unic form of final waste disposal that being still permitted by law. However, the leachate produced during the organic matter decomposition process has a complex composition and can cause contamination of the surface and groundwater of the landfill region. Thus, the monitoring of these areas is extremely important for the characterization of the leachate produced and to avoid environmental damages. Thus, the present study had the objective of monitoring the area of a Brazilian landfill using conventional parameters (metals, anions, ammonia and physicochemical parameters), stable isotopes of dissolved inorganic carbon (?13C-DIC) and dissolved organic carbon (?13C-DOC) allied to multivariate analysis techniques. Samples of raw leachate, leachate of stabilization lagoons, groundwater and surface water adjacent to the landfill were characterized. The conventional and alternative parameters together with the multivariate analysis showed that old cell (C3) is in a more advanced process of stabilization of the organic matter, probably already in the methanogenic phase. The data show that the organic matter stabilization lagoons are being efficient, improving the quality of the leachate. The values found for alkali metals, nitrate and chloride indicate contamination in one of the groundwater monitoring wells (PZ3) and, moreover, the sand extraction area (BG1) present at the side of the landfill study also show variation when compared with local white. Thus, isotopic ratio data for groundwater and surface waters were important to confirm the presence of contamination at the PZ3 and BG1 sampling sites, since an isotopic enrichment of the ?13C-DIC was observed at these sites. / No Brasil, os aterros sanit?rios s?o ?nica forma de deposi??o final de lixo permitida por lei. Por?m, o lixiviado resultante do processo de decomposi??o da mat?ria org?nica tem uma composi??o complexa e pode causar contamina??o das ?guas superficiais e subterr?neas da regi?o. Assim, o monitoramento destas ?reas ? extremamente importante para a caracteriza??o do lixiviado produzido e para evitar danos ao meio ambiente. O presente estudo teve como objetivo monitorar a ?rea de um aterro sanit?rio utilizando par?metros convencionais (metais, ?ons e par?metros f?sico-qu?micos), is?topos est?veis do carbono inorg?nico dissolvido (?13C-DIC) e do carbono org?nico dissolvido (?13C-DOC) aliados a t?cnicas de an?lise multivariada. Foram caracterizadas amostras de lixiviado bruto, lixiviado das lagoas de estabiliza??o, de ?guas subterr?neas e superficiais adjacentes ao aterro. Os par?metros convencionais e alternativos, juntamente com a an?lise multivariada, mostraram que a c?lula de deposi??o de res?duos antiga (C3) encontra-se em um processo mais avan?ado de estabiliza??o da mat?ria org?nica, provavelmente j? na fase metanog?nica. Os dados mostram que as lagoas de estabiliza??o est?o sendo eficientes, melhorando a qualidade do lixiviado. Os valores encontrados para metais alcalinos, nitrato e cloreto indicam contamina??o em um dos po?os de monitoramento de ?gua subterr?nea (PZ3) e, al?m disso, a jazida (BG1) presente ao lado do aterro apresenta varia??o quando comparadas aos brancos. Assim os dados da raz?o isot?pica das ?guas subterr?neas e superficiais foram importantes para confirmar a presen?a de contamina??o nos pontos PZ3 e BG1, uma vez que foi observado um enriquecimento isot?pico da ?13C-DIC nesses locais.

A demanda pelo aumento da produtividade do milho faz com que seja constante a busca por melhores técnicas no manejo da nutrição das plantas, por produtos que sejam eficazes na proteção das plantas contra os fitopatógenos, melhorando de forma direta e indireta a quantidade e qualidade dos grãos. A cada ano vem-se aumentando o plantio do milho em área e produtividade no estado do Tocantins, de modo que, os estudos aqui realizados tiveram por objetivo fornecer informações sobre o controle e resistência às doenças foliares em genótipos de milho, produtividade e qualidade sanitária de grãos cultivados na região sul do estado de Tocantins. No primeiro capítulo, foi avaliada a adubação nitrogenada na severidade das doenças foliares, produtividade e respostas bioquímicas em híbridos de milho. As doses testadas influenciaram na severidade das doenças avaliadas. Maiores produtividades e massa de mil grãos foram obtidas com maiores doses de nitrogênio. Houve correlação entre as enzimas Catalase (CAT) e Superóxido dimutase (SOD), com a área abaixo da curva de progresso da mancha de bipolaris (Bipolaris maydis), demonstrando maior atividade nas doses onde houve maior severidade da doença. Houve menor concentração do aminoácido prolina, onde ocorreu maior severidade. Os teores de aminoácidos totais foram maiores onde houve a utilização da maior dose de N. No segundo capítulo, foi verificado o efeito do controle de doenças e a produtividade do milho em função da aplicação de fosfito e fungicida. O controle das doenças foi mais efetivo com a aplicação do fungicida isolado e também com a mistura do fosfito ao fungicida. Melhores produtividades foram obtidas onde houve aplicação do fosfito, tanto em mistura quanto isolado. O terceiro capítulo objetivou estudar a severidade de doenças foliares e produtividade de genótipos de milho, cultivados no cerrado do estado do Tocantins. As doenças observadas nos experimentos foram a mancha de bipolaris (Bipolaris maydis), ferrugem polissora (Puccinia polysora), antracnose foliar (Colletotrichum graminicola) e mancha de curvularia (Curvularia sp), sendo que a mancha de bipolaris teve maior incidência e severidade em todos os genótipos estudados. A maioria dos cultivares demostrou potencial produtivo nos dois experimentos. No quarto capítulo, analisou-se a qualidade sanitária de grão assintomáticos e ardidos de cultivares de milho no estado do Tocantins. O gênero de fungo mais encontrado nos grãos ardidos e assintomáticos foi o do Fusarium, sendo verificada alta incidência em todos os grãos avaliados. / The demand for increasing maize productivity it makes it a constant search for better techniques in the management of plant nutrition and products that are effective in protecting plants against pathogens, directly improving the quantity and quality of grain. Every year comes by increasing the planting of corn in area and productivity in the Tocantins state, so that the studies conducted here aimed to provide information on the control of foliar diseases in corn genotypes, productivity and sanity quality beans grown in the southern state of Tocantins. In the first chapter it was evaluated nitrogen fertilization on foliar disease severity, productivity and biochemical responses in corn hybrids. The tested doses influenced the severity of disease evaluated. Higher productivity and thousand grain weight were obtained with higher doses of nitrogen. There was a correlation between catalase (CAT) and superoxide dimutase (SOD) enzymes, with progress curve Area Under Bipolaris leaf spot, demonstrating increased activity at doses where there was a greater disease severity. There was a lower concentration of the amino acid proline, where higher severity. The total amino acid content was higher where there was the use of the highest dose of N. In the second chapter, it was verified the effect of disease control and corn yield by applying phosphite and fungicide. The disease control was more effective with the application of fungicide isolated and with the mixture of the phosphite to the fungicide. Best yields were obtained where there was application of phosphite, both in mixture as isolated. The third chapter aimed to study the occurrence of diseases and maize genotypes grown in the state of Tocantins cerrado. The diseases observed in the experiments were spot Bipolaris, polissora rust, anthracnose leaf blight and stain Curvularia, and the bipolar stain had higher incidence and severity in all genotypes. Most cultivars demonstrated good production potential in both experiments. In the fourth chapter, we analyzed the health quality asymptomatic grain and rot of corn cultivars in the state of Tocantins. The fungal genus mostly found in rancid and asymptomatic grains was the Fusarium, and we found a high incidence in all evaluated grains.

Epitélios confluentes de queratinócitos autólogos, cultivados segundo metodologia padronizada por Rheinwald e Green em 1975, têm sido usados como enxertos em diferentes situações clínicas. Contudo, a presença de componentes xenobióticos empregados nesta metodologia implica na possibilidade de transmissão de zoonoses, príons e viroses aos pacientes, além de envolver questões éticas relacionadas à utilização de animais. Tais preocupações têm direcionado pesquisadores a buscar alternativas que superem este impasse; no entanto, as formulações obtidas até o momento não são completamente satisfatórias. Assim, nossa proposta neste estudo, foi omitir ou substituir os componentes xenobióticos tradicionalmente utilizados no meio para queratinócitos, por similares humanos. Como resultado, padronizamos um meio de cultura onde omitimos o emprego de toxina colérica, substituímos o soro fetal bovino por lisado de plaquetas humanas na concentração de 2,5% e a insulina de origem bovina foi substituída por insulina recombinante humana na mesma concentração do método original (5 &mu;g/mL). Com os resultados obtidos foi possível concluir ser viável o cultivo de queratinócitos humanos, mantidos em meio de cultura livre de componentes xenobióticos. / Confluent epithelia of autologous keratinocytes, cultivated according to standardized methodology by Rheinwald and Green in 1975, have been used as grafts in different clinical situations. However, the presence of xenobiotics components applied in this method implies the possibility of transmission of zoonoses, príons, and viruses to patients, besides involving ethical issues related to the use of animals for components obtainment. Such concerns have driven researchers to seek alternatives that overcome this deadlock, as the formulations obtained so far are not completely satisfactory. Thus, our proposal in this study was to omit or replace the xenobiotics components traditionally used in the medium to keratinocytes culture, by human similar. As a result, we have standardized a culture medium whereby we omitted the use of cholera toxin, replaced fetal bovine serum by human platelet lysate at a 2.5% concentration and bovine insulin was replaced by recombinant human insulin at the same concentration as the original method (5 &mu;g/mL). With the results obtained we could conclude that the method to be viable to cultivate human keratinocytes, kept in culture medium free of xenobiotics components.

A identificação de mecanismos moleculares é importante para entender os eventos fisiológicos que ocorrem durante o processo de maturação sexual. O objetivo deste trabalho foi semiquantificar o RNAm para os receptores de gonadotrofinas em células da granulosa de folículos dominantes em crescimento de novilhas Nelore pré-púberes, buscando associação com a fertilidade precoce. As novilhas foram separadas em Precoce (P, n=6) e Não Precoce (NP, n=16), de acordo com o diagnóstico positivo de gestação aos 15 meses de idade. Realizou-se exame ultra-sonográfico dos ovários durante 17 dias para a identificação da onda folicular, o folículo dominante com 8-9 mm foi aspirado via trans-vaginal. O RNA total foi extraído das amostras e convertido a DNA complementar que teve uma região amplificada para a expressão dos genes para os receptores de gonadotrofinas. A semiquantificação foi feita por análise digital onde levou-se em consideração a intensidade média das bandas (unidade arbitrária - UA) em gel de poliacrilamida (8%) corado com uma solução de TBE-brometo de etídio (0,02%). Foi utilizado o RNAm para o gene do GAPDH como controle interno para corrigir a expressão dos receptores de gonadotrofinas em função da quantidade de RNA em cada amostra. Não houve diferença entre P e NP na quantidade de RNAm para o receptor de FSH (FSHr, 1,14±0,07 e 1,19±0,04 UA) e de LH (LHr 0,79±0,12 e 0,78±0,05 UA, respectivamente). Foi detectada a presença de splicing alternativo do RNAm para o receptor de LH (LHrs), pelo aparecimento de banda com peso molecular diferente, em todos os animais do experimento, constatando-se através do sequenciamento que o material apresentava a deleção do exon 10. As novilhas P apresentaram maior percentagem de LHrs em relação ao LHr (LHrs/LHr) (83,66±4,26%) quando comparadas a NP (70,05±3,39%). A quantidade de RNAm para receptores de gonadotrofinas parece não estar relacionada com o aparecimento de fertilidade precoce, mas a maior percentagem de deleção do exon 10 no RNAm para o LHr pode estar envolvida com a fertilidade precoce em novilhas Nelore. / Identification of molecular mechanisms is important to understand the physiological events occurring during the process of sexual maturation. The objective of this work was to semiquantify the mRNA for gonadotropins receptors from granulosa cells of developing dominant follicles in pre-pubertal Nellore heifers and associate the results to precocious fertility. The heifers were sorted in Precocious (P, n=6) and Non Precocious (NP, n=16), according to positive pregnancy at 15 months of age. Ovarian ultrasound examination was performed through 17 days for follicular wave identification, the growing dominant follicle was aspirated at 8-9 mm. Total mRNA was extracted from the granulosa cells samples, converted to complementary DNA and had a region amplified for gene expression for gonadotropins receptors. The semiquantification was performed by digital analysis of intensity average for the bands (arbitrary unit - AU) in poliacrilamida gel (8%) stained with etidio TBE-bromide solution (0,02%). mRNA for GAPDH gene was used as internal control to correct the expression of gonadotropins receptors to the amount of mRNA in each sample. There was no difference between P and NP in the amount of mRNA for FSH receptors (FSHr, 1,14±0,07 and 1,19±0,04 AU) and LH receptors (LHr 0,79±0,12 and 0,78±0,05 AU, respectively). Heifers presented alternative splicing of mRNA for LH receptors (LHrs) evidenced through sequencing, as the absence of exon 10. P heifers presented greater percentage of LHrs in relation to LHr (LHrs/LHr) (83,66±4,26%) when compared the NP (70,05±3,39%). The amount of mRNA for gonadotropins receptors was not related with precocious fertility, but the greater percentage of exon 10 deletion from mRNA for LHr was associate the precocious fertility in Nelore heifers.

Submitted by Andreza Leão (andrezaflh@gmail.com) on 2018-06-18T16:56:19Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EfeitosHistoriasComportamento.pdf: 737163 bytes, checksum: cbb3f818c7dced3189a48f779ee71f4a (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Borges (aline@ufpa.br) on 2018-08-14T17:11:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EfeitosHistoriasComportamento.pdf: 737163 bytes, checksum: cbb3f818c7dced3189a48f779ee71f4a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-14T17:11:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EfeitosHistoriasComportamento.pdf: 737163 bytes, checksum: cbb3f818c7dced3189a48f779ee71f4a (MD5) Previous issue date: 2011-11-24 / Investigando os efeitos de uma longa história de reforçamento contínuo do comportamento alternativo ao especificado por regra sobre o seguimento subsequente de regra discrepante, 08 estudantes universitários foram expostos a um procedimento de escolha de acordo com o modelo. A tarefa consistia em apontar, em sequência, para três estímulos de comparação que tinham apenas uma característica em comum com o estímulo modelo e diferiam nas demais. O experimento era constituído por quatro fases. A Fase 1 era de linha de base, na Fase 2 era apresentada a regra correspondente, na Fase 3 havia uma mudança não sinalizada na contingência de reforço programada e a Fase 4 iniciava com a regra discrepante. Os resultados mostraram que na Fase 1, a maioria dos participantes apresentou um desempenho variável. Na Fase 2, todos os participantes seguiram a regra correspondente. Na Fase 3, seis participantes continuaram seguindo a regra da fase anterior e apenas dois participantes passaram a emitir a sequência correta. Na Fase 4, quatro participantes seguiram a regra discrepante, três abandonaram o seguimento de regra e passaram a emitir a sequência correta, e um participante abandonou a regra discrepante, mas passou a emitir uma sequência que não era reforçada. Estes dados sugerem que os participantes que apresentaram um comportamento sob controle de regra na Fase 3, tenderam a seguir a regra discrepante na Fase 4; e, os participantes que apresentaram um comportamento sob controle das consequências imediatas na Fase 3, tenderam a deixar de seguir a regra discrepante na Fase 4. Discute-se o papel da história do comportamento alternativo ao especificado por regra na explicação do comportamento de seguir regras. / Investigating the effects of a long history of continuous reinforcement of an alternative behavior of the one specified by a rule on subsequent discrepant rule-following, 08 undergraduate students were exposed to a matching-to-sample procedure. The task consisted of pointing, in a sequence, to each of three comparison stimuli that had only one thing in common with the sample stimulus and differed in other characteristics. The experiment had four phases. Phase 1 was baseline. Phase 2 begun with a rule corresponding to the contingencies. Phase 3 had an un-signaled change in the reinforcement contingencies, and Phase 4 started with discrepant rule. The results showed that on Phase 1 most of participants had a variable performance. On Phase 2, all participants followed the corresponding rule. On Phase 3, six participants continued to follow the rule of the previous phase and two participants emitted the correct sequence. On Phase 4, four participants followed the discrepant rule; three abandoned rule-following and began to emit the correct sequence; and one abandoned the discrepant rule, but began to emit a sequence that wasn’t reinforced. The data suggests that the participants that presented behavior under rule control on Phases 3, tended to follow the discrepant rule on Phase 4; and, the participants that showed a behavior under control of immediate consequences on Phases 3, tended to abandon the discrepant rule-following on Phase 4. The role of the history of behavior alternative to the one specified by the rule is discussed.

Submitted by Eunice Novais (enovais@uepg.br) on 2018-03-26T22:27:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Mônica Jasper.pdf: 2787713 bytes, checksum: 30c38776e0c5dd496b477a5b4ceed945 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-26T22:27:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Mônica Jasper.pdf: 2787713 bytes, checksum: 30c38776e0c5dd496b477a5b4ceed945 (MD5) Previous issue date: 2016-07-27 / A ferrugem do figo (Ficus carica L) é causada por Cerotelium fici (Cast.) Arth., doença que causa desfolha prematura e danos significativos na produtividade de frutos de figo. O objetivo geral do trabalho é estudar a epidemiologia de C. fici, assim como métodos de controle da doença para o manejo em sistemas orgânicos. Avaliou-se a melhor temperatura e fotoperíodo para a germinação in vitro de uredósporos de C. fici, através da utilização de temperaturas de 10, 20, 23, 30 e 35ºC, e fotoperídos de escuro contínuo de 12 horas de luz, em BOD, com diferentes quantidades de suspensão de esporos. A temperatura ótima para a germinação dos uredósporos de C. fici situou-se entre 20 e 30ºC. O fotoperíodo de 12 horas proporcionou menores porcentagens de germinação de esporos do que o escuro contínuo. A germinação dos esporos foi favorecida pelo aumento da quantidade de suspensão de 0,5 mL para 1 mL, devido ao secamento da gota de suspensão quando as quantidades são menores. Depois, foram testadas diferentes concentrações de óleos essenciais extraídos de plantas para inibição da germinação de uredósporos de C. fici em placas de poliestireno contendo supensão de esporos na concentração de 104 esporos mL-1 e meio de cultura ágar-água a 2%. Foram avaliadas as concentrações de 1, 10, 100 e 1000 ppm de óleo essencial, em duas repetições de experimento. Depois, avaliou-se as concentrações de 5, 10, 15 e 20 ppm dos mesmos óleos essenciais, também em duas repetições do experimento. Os óleos essenciais utilizados foram os de alecrim, alfazema, camomila, canela, capim limão, citronela, coentro, cravo da índia, erva cidreira, erva doce, eucaliptos, gengibre, hortelã, laranja, lima, manjericão, melaleuca, orégano e tomilho. Utilizando concentrações de 1 a 1000 ppm de cada óleo, destacaram-se os óleos de canela, orégano, alecrim, citronela, capim limão, alfazema, coentro e cravo da índia com efeitos superiores aos demais na inibição da germinação de uredósporos. Concentrações maiores de óleo essencial apresentam melhor controle da germinação dos uredósporos de ferrugem. Nas concentrações de 5 a 20 ppm, o melhor controle da germinação de esporos foi constatado com óleo de canela, seguido dos óleos de capim limão e alfazema, diferindo dos óleos de manjericão, erva doce, hortelã, coentro, lima, camomila, melaleuca, citronela, gengibre e alecrim. Posteriormente, foram testados 9 tratamentos para controle de ferrugem em mudas de figo em casa de vegetação (óleos essenciais de alecrim, alfazema, canela, capim limão, citronela, cravo da índia, coentro e orégano mais a testemunha com aplicação de água), em quatro concentrações (5, 10, 15 e 20 ppm), com duas repetições do experimento. Foi avaliada a severidade da ferrugem e calculada a Área Abaixo da Curva de Progresso da Doença (AACPD). Os óleos essenciais extraídos de canela, alfazema, capim limão, alecrim, citronela, orégano, cravo da índia e coentro obtiveram resultados na diminuição da severidade de ferrugem da figueira, com os melhores resultados associados ao óleo essencial de canela, seguido do óleo de alfazema, nas maiores concentrações. O aumento da concentração dos óleos essenciais, de 5 para 20 ppm, mostrou tendência linear de incremento no controle da ferrugem. / Rust fig (Ficus carica L) is caused by Cerotelium fici (Cast.) Arth., a disease that causes premature defoliation and significant damage to fruit production. The general objective is to study the epidemiology of C. fici, as well as disease control methods for the management in organic systems. We evaluated the best temperature and photoperiod for in vitro germination of C. fici urediniospores, through the use of temperatures of 10, 20, 23, 30 and 35 ° C, and the fotoperídos of 12-hours of light ou dark complete, in BOD with different amounts of spore suspension. The optimum temperature for germination of urediniospores was between 20 and 30 ° C. The 12-hour photoperiod provided smaller spore germination percentages than the continuous darkness. Germination of spores was favored by increasing the amount of suspension 0.5 mL to 1 mL, due to the suspension droplet drying while the amounts are smaller. Then, different concentrations of essential oils extracted from plants were tested for inhibition of germination of urediniospores in microtiter plates containing spores in this suspension concentration of 104 spores mL-1 and agar- water 2% culture. Concentrations of 1, 10, 100 and 1000 ppm of essential oil were evaluated, in two repeats of the experiment. Then we assessed concentrations of 5, 10, 15 and 20 ppm of these essential oils also into two repetitions of the experiment. The essential oils used were those of rosemary, lavender, chamomile, cinnamon, lemon grass, lemongrass, coriander, clove, lemongrass, fennel, eucalyptus, ginger, mint, orange, lime, basil, melaleuca, oregano and thyme. Using concentrations of 1-1000 ppm of each oil, stood out the cinnamon oil, oregano, rosemary, citronella, lemongrass, lavender, coriander and cloves with effects superior to others in inhibiting urediniosporal germination. Higher concentrations of essential oil have better control of germination of rust urediniospores. In concentrations of 5-20 ppm, better control of spore germination was found in cinnamon oil, followed by lemon grass oil and lavender, differing from basil oil, fennel, mint, cilantro, lime, chamomile, melaleuca, lemongrass, ginger and rosemary. Subsequently, we tested nine treatments for rust control in fig seedlings in the greenhouse (essential oils of rosemary, lavender, cinnamon, lemongrass, citronella, clove, coriander and oregano over the witness with application of water), in four concentrations (5, 10, 15 and 20 ppm) with two replications of the experiment. The severity of rust and calculated the area under disease progress curve were evaluated. The essential oils from cinnamon, lavender, lemon grass, rosemary, lemongrass, oregano, clove and coriander obtained results in the reduction of the fig tree rust severity, with the best results associated with cinnamon essential oil, followed by lavender oil, in higher concentrations. Increasing the concentration of essential oils from 5 to 20 ppm, showed linear trend of increment in controlling the disease

Submitted by Silvana Teresinha Dornelles Studzinski (sstudzinski) on 2015-07-02T12:32:26Z No. of bitstreams: 1 JosemarLorenzetti.pdf: 1207665 bytes, checksum: cdc148ecd292ba9381e8d6110c6c5442 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-02T12:32:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JosemarLorenzetti.pdf: 1207665 bytes, checksum: cdc148ecd292ba9381e8d6110c6c5442 (MD5) Previous issue date: 2011 / Nenhuma / Esta dissertação trata das potencialidades locais que são ou podem vir a ser utilizadas para o desenvolvimento da Economia Solidária, tendo em vista o contexto da região de Sinop, no norte do Estado de Mato Grosso. Na busca de alternativas e a fim de superar as dificuldades e limites do modelo econômico instaurado neste espaço, apresentamos sua trajetória históricosocial e econômica, desde a colonização da década de 1970, e as potencialidades do discurso hegemônico que então nele se consolidaram. Ao delinearmos as diferenças entre os modelos de economia capitalista e solidária, com um trabalho bibliográfico e de campo, por meio de questionários e entrevistas, identificamos evidências de potencialidades da região de Sinop, válidas como lastro de um modelo alternativo de desenvolvimento, tais como a existência de setores da economia adaptáveis a modelos associativos e a disposição para o trabalho coletivo. Ao refletirmos sobre as diferentes potencialidades encontradas no contexto da pesquisa, finalizamos o trabalho com a abordagem do contributo da educação, especialmente das instituições formais, que possuem um importante papel na consolidação de modelos alternativos. / This dissertation deals with local potentialities in which are or may come to be used for the development of solidarity economy, in view of the context of the region of Sinop, in the north of the State of Mato Grosso. In search of alternatives and with the aim to overcome difficulties and limitations of the economic model established in this space, we present its economic and social-historical path, since the colonization in the 1970s decade and the potentialities of hegemonic discourse that then they were consolidated. We delineate the differences between the models of capitalist and solidarity economy, with a bibliographical and field work, through questionnaires and interviews, we identify evidences of potentialities of the region of Sinop, valid as indicative of an alternative model of development, such as the existence of sectors of economy adaptable to associative models and the willingness for a cooperative work. We think over the different potentialities encountered in the context of the research, we concluded the work with an approach of the contribution of education, especially to formal institutions that have an important role in the consolidation of alternative models.

O dermatófito Trichophyton rubrum é um fungo filamentoso, antropofílico, que invade tecidos queratinizados causando infecções superficiais e cutâneas. Algumas drogas são usadas para o tratamento das dermatofitoses, sendo o ácido undecanóico (AUN) uma delas. O AUN é o mais tóxico dos ácidos graxos saturados de cadeia média, utilizado como medicamento de uso tópico. O estudo de expressão gênica e mecanismos regulatórios são fundamentais para ampliar o conhecimento dos mecanismos moleculares envolvidos na resposta à exposição a estes agentes citotóxicos. Portanto, o objetivo deste trabalho foi caracterizar os mecanismos moleculares envolvidos no processo adaptativo da exposição ao ácido undecanóico, através da análise global do transcriptoma e mecanismos regulatórios como o processamento alternativo. Para tanto o micélio de T.rubrum foi submetido ao ácido undecanóico por 3 e 12 h de exposição, em triplicata biológica, e o RNA resultante foi submetido ao sequenciamento por RNAseq. O sequenciamento gerou aproximadamente 58 milhões de reads por biblioteca, as quais foram filtradas e alinhadas com o genoma de referência utilizando-se os softwares FASTQC e bowtie2, respectivamente. A análise de expressão gênica diferencial foi feita por meio do pacote do Bioconductor DESeq e, para esta análise, foi utilizada a amostra de 0h como referência. Foram identificados 492 genes diferencialmente expressos em resposta ao AUN, sendo 385 e 210 genes modulados em resposta a 3 e 12 horas de exposição, respectivamente. Estes genes estão relacionados a vários processos celulares envolvendo transporte transmembrana, degradação de xenobióticos, metabolismo de lipídeos e aminoácidos, secreção de enzimas proteolíticas e patogênese, sugerindo que o AUN ativa duas principais vias de sobrevivência em resposta a este agente estressor, a degradação e o efluxo da droga. Posteriormente, foram realizadas as análises de processamento alternativo quanto ao uso diferencial de exons por meio do algoritmo HTSeq e DEXSeq e retenção de introns utilizando-se algoritmos construídos na linguagem Perl. Os genes envolvidos em algum tipo de processamento alternativo estão relacionados com funções metabólicas variadas como tradução, transporte vesicular, metabolismo lipídico, biogênese ribossomal, sequência de ligação ao DNA, regulação da transcrição e processamento do pré-mRNA. Estes resultados contribuem para uma melhor compreensão dos mecanismos moleculares envolvidos na resposta de sobrevivência perante a exposição ao AUN. / The dermatophyte Trichophyton rubrum is a filamentous fungus, anthropophilic that invades keratinized tissue causing superficial infections on the skin. Some drugs are used for the treatment of dermatophytosis, being the undecanoic acid (AUN) one of them. The AUN the most toxic of the saturated medium chain fatty acids, is used as a topical medicine. The study of gene expression and the regulatory mechanisms are fundamental to understand the molecular mechanisms involved in response to exposure of these cytotoxic agents. So, the aim of this study was to characterize the molecular mechanisms involved in the adaptive process of the exposure to undecanoic acid, by the global analysis of the transcriptome and regulatory mechanisms such as alternative splicing. To this end, the mycelium of T. rubrum was exposed to undecanoic acid for 3 or 12 hours in biological triplicate, and the resulting RNA was sequenced by RNA-Seq. The sequencing generated approximately 58 million of reads per library, which were filtered and aligned with the reference genome using the softwares and Bowtie2 and FASTQC, respectively. The analysis of differential gene expression was performed through the Bioconductor package DESeq and, for this analysis, we used as reference sample the 0h time. We identified 492 differentially expressed genes in response to UDA, being 385 and 210 genes modulated in response to 3 and 12 hours of exposure, respectively. These genes are related to various cellular processes involving the transmembrane transport, xenobiotics degradation, lipids and amino acids metabolism, secretion of proteolytic enzymes and pathogenesis, suggesting the activation of two major survival pathways in response to this stressor, degradation and drug efflux, by UDA. Also, the alternative splicing analysis was performed through the differential use of exons using the algorithms HTSeq and DEXSeq and intron retention using algorithms built in Perl language. The genes involved in some kind of alternative splicing are associated with various metabolic functions such as translation, vesicular transport, lipid metabolism, ribosomal biogenesis, DNA binding sequence, transcription regulation and processing of pre-mRNA. These results contribute to increase the knowledge of the molecular mechanisms involved in the survival response upon exposure to the AUN.