Aspidosperma species belonging to the Apocynaceae family are restricted to the Americas. Ethnopharmacological studies have shown the use of these species as a potential agent against malaria and trypanosomatids, also used as antibiotics, anti-inflammatory and antitumor. The search for new chemical entities with antimicrobial activity has significant importance due to the versatility of microorganisms to acquire resistance to the therapeutic arsenal, and due to the prevalence of neglected diseases, such as leishmaniasis. These are endemic in developing countries have few therapeutic options, which are toxic and have limited effectiveness. The aim of this study was to evaluate the crude extracts and fractions from different parts of the species A. macrocarpon, A. tomentosum and A. pyrifolium, as the antimicrobial action and realize bioguided chemical study of the species with high activity against the microorganisms tested, and less toxic to mammalian cells. About antibacterial activity alkaloidal fraction from A. pyrifolium stem presented moderate minimal inhibitory concentration (MIC): 125 and 250 g/mL for Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis, respectively. The ethyl acetate fraction of A. macrocarpon stem had a weak MIC of 250 g/mL on Candida parapsilosis. The activity of the extract of the stem bark of A. macrocapon against Leishmania amazonensis promastigotes showed inhibitory concentration (IC50) of 151.5 g/mL and selectivity index (SI) of 6.52 on LLCMK2 cells, this species were considered the most promising for the bioguided chemical study. The chloroform and ethyl acetate fractions of the A. macrocarpon stem bark showed IC50 29.00  1.65 and 29.50  0.95 g/mL, respectively on promastigotes forms of L. amazonensis. The bioguided study with chloroform fraction led to subfraction of monoacylglycerols, wich were the most active on L. amazonensis, with IC50 2.31  0.08 and 2.29  0.14 g/mL on promastigotes and intracellular amastigotes, respectively. SI showed that this fraction were 42 fold more toxic to L. amazonensis than to macrophages. Studies related to the mechanism of action of monoacylglycerols evaluated by optical microscopy, scanning electron (SEM) and transmission electron microscopy (TEM) showed abnormalities such as mitochondrial swelling, concentric membranes inside the mitochondria, presence of perforations on the cell surface of the parasite and autophagic vacuoles. These data together with results of flow cytometry showed necrosis and autophagy as a possible mechanism of cell death. Quercetin was identified as the active substance of the ethyl acetate fraction against evolutionary forms of L. amazonensis. This substance had, IC50 of 61.93  1.36 and 63.86  3.25 M/mL on promastigotes and intracellular amastigotes, respectively. Quercetin was evaluated in combination with amphotericin B (Q + A) and miltefosine (Q + M), the combinatorial effect of both was considered synergistic against all forms of L. amazonensis. The combinations Q+A and Q+M showed antagonistic action on macrophages and human erythrocytes. Evaluation of the combination using SEM and TEM associated with literature data indicate apoptotic cell death after treatment with both combinations. These findings are relevant as a first step in the search for new therapies for the treatment of cutaneous leishmaniasis. / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As espécies do gênero Aspidosperma pertencentes à família Apocynaceae são restritas às Américas. Estudos etnofarmacológicos revelaram a utilização destas espécies como agente potencial contra a malária e tripanosomatídeos, como antimicrobianos, anti-inflamatórios e antitumorais. A pesquisa em busca de novas entidades químicas com ação antimicrobiana apresenta significativa importância devido à versatilidade dos micro-organismos em adquirir resistência ao arsenal terapêutico, e devido à prevalência de doenças consideradas negligenciadas, como as leishmanioses. Estas são endêmicas nos países em desenvolvimento e possuem poucas opções terapêuticas, sendo estas tóxicas e de eficácia limitada. O objetivo do estudo consistiu em avaliar os extratos brutos e frações de diferentes partes das espécies de A. macrocarpon, A. tomentosum e A. pyrifolium, quanto à ação antimicrobiana e realizar o estudo químico bioguiado da espécie mais ativa sobre os micro-organismos testados e menos tóxica para células de mamíferos. Sobre a atividade antibacteriana a fração alcaloídica da casca de A. pyrifolium apresentou concentração inibitória mínima (CIM) moderada de 125 e 250 μg/mL para Staphylococcus aureus e Bacillus subtilis, respectivamente. A fração acetato de etila do caule de A. macrocarpon apresentou CIM fraca de 250 μg/mL sobre Candida parapsilosis. A atividade do extrato da casca do caule de A. macrocapon contra formas promastigotas de Leishmania amazonensis apresentou concentração inibitória (CI50) de 151,5 g/mL e índice de seletividade (IS) de 6,52 sobre células LLCMK2, sendo a espécie mais promissora para a realização do estudo químico bioguiado. As frações de clorofórmio e acetato de etila obtidas da casca do caule de A. macrocarpon demonstraram CI50 de 29,00  1,65 e 29,50  0,95 g/mL respectivamente, sobre as formas promastigotas de L. amazonensis. O estudo bioguiado do fracionamento da fração clorofórmio conduziu à obtenção da subfração com monoacilglicerois (MAG) como a mais ativa sobre as formas evolutivas de L. amazonensis, com CI50 2,31  0,08 e 2,29  0,14 g/mL sobre promastigotas e amastigotas intracelulares, respectivamente e IS sobre macrófagos J774-A1 de 42, para ambas as formas evolutivas. Estudos relacionados ao mecanismo de ação da fração MAG avaliados por microscopia óptica, eletrônica de varredura (MEV), e transmissão (MET) evidenciaram alterações como inchaço mitocondrial, membranas concêntricas dentro da mitocôndria, presença de perfurações na superfície celular do parasito e vacúolos autofágicos. Estes dados quando analisados em conjunto com resultados da citometria de fluxo indicaram a autofagia e necrose como provável mecanismo de morte celular. Após o fracionamento da fração acetato de etila foi identificada a quercetina como substância ativa sobre as formas evolutivas de L. amazonensis, com CI50 de 61,93  1,36 e 63,86  3,25 M/mL sobre promastigotas e amastigotas intracelulares, respectivamente. A quercetina foi avaliada em combinação com anfotericina B (Q+A) e miltefosina (Q+M), o efeito combinatório de ambas foi considerado sinérgico sobre as formas evolutivas de L. amazonensis. As combinações Q+A e Q+M demonstraram ação antagônica sobre macrófagos e eritrócitos humanos. A avaliação da combinação por MEV e MET associada aos dados da literatura indicaram provável morte celular por apoptose de ambas as combinações. Estes achados nos ensaios in vitro são relevantes como primeiro passo na busca por novas terapias para o tratamento da leishmaniose cutânea.

Submitted by Dominick Jesus (dominickdejesus@hotmail.com) on 2016-02-01T19:48:28Z No. of bitstreams: 2 Tese_Rogério Benedito da Silva Añez.pdf: 6851824 bytes, checksum: cdf0f40fa8ed58049c22ab2bf9203091 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-01T19:48:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese_Rogério Benedito da Silva Añez.pdf: 6851824 bytes, checksum: cdf0f40fa8ed58049c22ab2bf9203091 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2009-02-10 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / In this present paper was realized a ethnopharmacological study with Aspidosperma nitidum and A. marcgravianum known as “carapanaúba”at “Nossa Senhora Aparecida (Silves-AM) community and “Urubuí (Presidente Figueiredo-AM) community. However, the livers at those communities know and indicates just A. nitidum using it for treatment of liver and stomach diseases. The stem bark is the part used by community livers for treatment of this disease above. For the purpose of this paper, leaves and bark of A. nitidum and A. marcgravianum were analysed in anatomy studies aiming to identify anatomic structures and so to verify how specie of the two was indicated in folk medicine. Samples of leaf and bark of A. nitidum and A marcgravianum were subimmited to histological process according to usual techniques of optical microscope. Both of these species have structural similarity in leave and in bark. However, for the limb coloration, presence or absence of sclereids and the morphology of mid bundle, these characteristic can be used to separate the species taxonomically. Laticifers can be found in bark and leaf of A. nitidum and A. marcgravianum. In phytochemical screening the main detected compounds at leaves and bark from two species are cumarina, condensed tannins, cardiotonic glicosides and alkaloids. Detailed studies for alkaloids isolation and purification to A. nitidum and A. marcgravianum are recommended. So this way, it can be indicate barks for communities explorations, as they had done lately, and the exploration from the leaves for industries, in later study of bioprospection. / No presente trabalho foi realizado o estudo etnofarmacológico com Aspidosperma nitidum e A. marcgravianum, conhecidas pelas comunidades Nossa Senhora Aparecida (Silves-AM) e Urubuí (Presidente Figueiredo-AM) como “carapanaúba”. Entretanto, os moradores dessas comunidades conhecem e indicam como carapanaúba apenas Aspidosperma nitidum tendo o seu uso mais comum para o tratamento de afecções do fígado e do estômago. A casca do caule é a parte utilizada pelos comunitários para tratar as enfermidades descritas. Pela proposta elaborada neste estudo, folhas e casca de Aspidosperma nitidum e Aspidosperma marcgravianum tiveram a anatomia investigada com o objetivo de identificar estruturas anatômicas e ainda averiguar qual seria dentre elas a indicada na medicina popular. Amostras da folha e da casca de A. nitidum e A. marcgravianum foram submetidas ao processo histológico segundo técnicas usuais de microscopia de luz. Ambas espécies possuem similaridades estruturais na folha e na casca. Contudo, quanto a coloração do limbo, presença e ausência de esclereides e conformação do sistema vascular da folha, essas características podem ser usadas na separação taxonômica entre as espécies estudadas. Destaca-se a presença de laticíferos na casca e na folha de A. nitidum e A. marcgravianum. No screening fitoquímico os principais compostos detectados nas folhas e casca das duas espécies foram cumarinas, taninos condensados, glicosídeos cardiotônicos e alcalóides. Estudos detalhados para isolamento e purificação de alcalóides de A. nitidum e A. marcgravianum são recomendados. Dessa forma, indica-se a continuidade da exploração da casca nas comunidades tradicionais, como sempre foi feito, e a exploração das folhas pela indústria, nos trabalhos futuros de bioprospecção.

ARAUJO, D. P. Atividade anti-inflamatória e neuroprotetora da fração de Aspidosperma pyrifolium rica em derivado glicosilado do ácido salicílico. 2017. 141 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Farmacologia Pós-Graduação (posgfarmacologia@gmail.com) on 2017-08-31T14:19:38Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_ dparaujo.pdf: 4402876 bytes, checksum: ff7ad728ad291379acc04af1fdd28c20 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-08-31T16:42:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_ dparaujo.pdf: 4402876 bytes, checksum: ff7ad728ad291379acc04af1fdd28c20 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-31T16:42:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_ dparaujo.pdf: 4402876 bytes, checksum: ff7ad728ad291379acc04af1fdd28c20 (MD5) Previous issue date: 2017-08-11 / Parkinson's disease (PD) is characterized by the progressive and slow degeneration of the neurons of the substantia nigra causing the reduction of dopamine (DA) in the striatum. Since inflammation is involved in the pathogenesis of PD and Aspidosperma pyrifolium Mart it presents therapeutic anti-inflammatory potential, the present study investigated the toxic, anti-inflammatory and neuroprotective effects of the aqueous fraction of the ethanolic extract of the seeds of Aspidosperma pyrifolium Mart. (APSE-Aq). Initially, preliminary oral acute toxicity should be investigated by hippocratic screening (10, 100, 500 and 1000mg/kg, o.u.). The antioxidant potential of APSE-Aq (10, 25, 50, 100 and 200 μg/mL) was assessed by in vitro assays using the DPPH radical sequestering ability and as standard the vitamin E (50 μg / mL); and the oxidative metabolism of activated neutrophils with PMA by the chemiluminescence assay using luminol and lucigenin probes, the groups with composition by APSE-Aq (0,1, 1, 10, 20 and 50 μg/mL) and as standard quercetin (50 μg/mL). The anti-inflammatory activity was tested by 1% carrageenan-induced paw edema (50,100 and 200mg/kg o.u). A neuroprotective activity was investigated through the PD model using 6-hydroxydopamine (6-OHDA) in the right striatum of male Wistar rats and treated with APSE-Aq (100 and 200mg/kg o.u.) for 14 days after injury. The APSE-Aq did not cause the death of animals. Signs of toxicity were observed, especially in the dose of 1000mg observed in the hippocratic screening, such as: analgesia, anesthesia, cyanosis and hypnosis presented. APSE-Aq presented a sequestering ability of the DPPH radical, as well as modulated the oxidative metabolism of neutrophils by acting on the MPO-H2O2-HOCl system and reducing O2- production. No paw edema by carrageenan, APSE-Aq showed anti-inflammatory activity, as well as reduced immunoreactivity for TNF-α. In the PD model, motor activity improvement was observed through a reduction in apomorphine-induced rotations, increase in locomotor activity and rearing in the open field test, contralateral leg use without cylinder test and reduction of rotarod falls. APSE-Aq reduced lipid peroxidation and nitrite/nitrate in the prefrontal cortex (PFC), hippocampus (HC) and striatum (S), increased DA and DOPAC content and reduced GABA and glutamate in S. An immunoreactivity for tyrosine hydroxylase and dopamine transporter was reduced and increased TNF-α in the 6-OHDA group with respect to the group injured and treated with APSE-Aq. Our results suggest that APSE-Aq has a potential neuroprotective effect and this effect is possibly related to its antioxidant and anti-inflammatory capacity, which makes the species a potential alternative therapeutic target for Parkinson's disease. / A doença de Parkinson (DP) é caracterizada pela degeneração progressiva e lenta dos neurônios da substância negra acarretando na redução de dopamina (DA) no estriado. Visto que a inflamação está envolvida na patogênese da DP e que estudos anteriores demonstram o potencial terapêutico anti-inflamatório do Aspidosperma pyrifolium Mart., o presente estudo investigou os efeitos tóxicos, anti-inflamatório e neuroprotetor da fração aquosa do extrato etanólico das sementes do Aspidosperma pyrifolium Mart. (APSE-Aq). Inicialmente, investigou-se a toxicidade aguda oral, preliminar, através do screening hipocrático (10, 100, 500 e 1000mg/Kg, v.o.). O potencial antioxidante do APSE-Aq (10, 25, 50, 100 e 200µg/mL) foi avaliado através de ensaios in vitro através da capacidade sequestradora do radical DPPH, como padrão foi utilizado à vitamina E (50µg/mL); e sobre o metabolismo oxidativo de neutrófilos ativados com PMA através do ensaio de quimioluminescência usando sondas de luminol e lucigenina, os grupos foram compostos pelo APSE-Aq (0,1, 1, 10, 20 e 50µg/mL) e como padrão a quercetina (50µg/mL). A atividade anti-inflamatória foi avaliada através do edema de pata induzido por carragenina 1% (50,100 e 200mg/Kg v.o.). A atividade neuroprotetora foi investigada através do modelo de DP usando 6-hidroxidopamina (6-OHDA) no estriado direito de ratos machos Wistar e tratados com APSE-Aq (100 e 200mg/Kg v.o.) por 14 dias após a lesão. O APSE-Aq não provocou a morte de animais. Foram evidenciados sinais de toxicidade, principalmente na dose de 1000mg observadas no screening hipocrático, tais como: apresentou analgesia, anestesia, cianose e hipnose. O APSE-Aq apresentou capacidade sequestrante do radical DPPH, bem como modulou a o metabolismo oxidativo de neutrófilos ao atuar sobre o sistema MPO-H2O2-HOCl e ao reduzir a produção de O2-. No edema de pata por carragenina, o APSE-Aq apresentou atividade antiedematogênica, bem como reduziu a imunorreatividade para TNF-α. No modelo de DP foi observada melhora da atividade motora através da redução nas rotações induzidas pela apomorfina, aumento na atividade locomotora e rearing no teste de campo aberto, utilização da pata contralateral no teste do cilindro e redução das quedas no rotarod. O APSE-Aq reduziu a peroxidação lipídica e nitrito/nitrato no córtex pré-frontal (CPF), hipocampo (HC) e corpo estriado (CE), aumentou o conteúdo de DA e DOPAC e reduziu GABA e glutamato no CE. A imunorreatividade para tirosina hidroxilase e transportador de dopamina aumentaram, e TNF- α reduziu nos lesionados com 6-OHDA e tratados com APSE-Aq quando comparado ao grupo da 6-OHDA sem tratamento. Nossos resultados sugerem que o APSE-Aq apresenta um potencial neuroprotetor e este efeito está, possivelmente, relacionado à sua capacidade antioxidante e anti-inflamatória o que torna está espécie um potencial alvo terapêutico alternativo para a doença de Parkinson.

TORRES, Z. E. S. Contribuição ao conhecimento químico de plantas do nordeste do Brasil: Aspidosperma ulei Markgr. 2012. 263 f. Tese (Doutorado em Química) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2014-11-28T21:30:10Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_zestorres.pdf: 24783990 bytes, checksum: 37dce6fea0a2a80f7f17dddf842d1f5d (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-11-25T12:36:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_zestorres.pdf: 24783990 bytes, checksum: 37dce6fea0a2a80f7f17dddf842d1f5d (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-25T12:36:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_zestorres.pdf: 24783990 bytes, checksum: 37dce6fea0a2a80f7f17dddf842d1f5d (MD5) Previous issue date: 2012 / Aspidosperma ulei Markgr. popularly known as pitiá or piquiá, is a tree of a rough and gray trunk bark. This work reports the phytochemical analysis of the leaves, and the re-investigation of the trunk and roots of an A. ulei specimen collected at the locality of Garapa- Acarape Country – Ceará State. The ethanol extracts of all parts were obtained. Acid/base extraction was performed with the extracts from the trunk and root heartwoods and root bark, in order to obtain the alkaloids fraction. For the leaves and trunk bark small portions of the ethanol extract were submitted to conventional chromatography over silica gel followed by semipreparative HPLC to afford the triterpene ursolic acid, an inositol derivative the methyl-chiro-inositol, and the alkaloids β-yohimbine, yohimbine, 3,4,5,6-tetradehydro-β-yohimbine, 19,20-dehydro-α-yohimbine and 19(E)-hunteracine. From the alkaloidal fractions of the trunk and the root heartwood, were obtained, by semi preparative HPLC, the alkaloids 20(E)-17-nor-subincanadine E, reported for the first time for the species and also an natural product, and the 12-hydroxy-N-acetyl-21(N)-dehydro-plumeran-18-oic acid, on unknown indole alkaloid. From the alkaloidal fraction of the root bark, after semipreparative HPLC, were obtained the indole alkaloids uleine, 20-epi-dasycarpidone, 20-epi-N-nordasycarpidone, N-noruleine, olivacine and the booneine lactone. Ursolic acid and 20(E)-17-nor-subincanadine E were assayed as citotoxic and showed significative results against four tumour cell lines. The identification and characterization of all compounds were realized by means of spectroscopic techniques such as IR, MS and uni and bidimensional NMR, including pulse sequences such as HSQC, NOESY, COSY and HMBC, after comparison to the literature data. / Aspidosperma ulei Markgr, popularmente conhecida como pitiá ou piquiá, apresenta-se como uma árvore com casca áspera e acinzentada. No presente trabalho foi realizado o estudo fitoquímico dos extratos etanólicos das folhas de Aspidosperma ulei, além de uma reinvestigação fitoquímica do caule e raiz de um espécime coletado na localidade Garapa, Município de Acarape, no estado do Ceará. Para os extratos etanólicos dos lenhos do caule e raiz e da casca da raiz foram realizados tratamentos por extração ácido/base para obtenção das frações alcaloídicas. Para as folhas e a casca do caule, alíquotas dos extratos etanólicos de ambas foram submetidas a cromatografias convencionais sobre sílica gel e por CLAE, possibilitando o isolamento do triterpeno ácido ursólico, um derivado do inositol, o metil-chiro-inositol e dos alcaloides indólicos β-ioimbina, ioimbina, 3,4,5,6-tetra-desidro-β-ioimbina, 19,20-desidro-17α-ioimbina e 19(E)-hunteracina. Das frações alcaloídicas dos lenhos do caule e da raiz foram obtidos por CLAE, 20(E)-17-nor-subincanadina E, relatado pela primeira vez como produto natural, além do ácido 12-hidroxi-N-acetil-21(N)-desidro-plumerano-18-óico, um alcaloide indólico também inédito como produto natural. Da fração alcaloídica da casca da raiz foram obtidos por CLAE a uleína, 20-epi-dasicarpidona, 20-epi-N-nordasicarpidona, N-desmetiluleína, olivacina e a δ-lactona booneína. O ácido ursólico e a 20(E)-17-nor-subincanadina E foram submetidos a testes de atividade citotóxica e apresentaram resultados significativos frente a 4 linhagens de células tumorais. A identificação e caracterização dos compostos isolados foram realizadas por técnicas espectroscópicas como IV, EM e RMN uni e bidimensional, inclusive técnicas como HSQC, NOESY, COSY e HMBC, além de comparação com dados da literatura.

Submitted by Geyciane Santos (geyciane_thamires@hotmail.com) on 2015-07-03T13:57:04Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcia Caroline Pires Vilhena.pdf: 2598425 bytes, checksum: 39041ac9767e335dfd63902e21daf173 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-13T15:29:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcia Caroline Pires Vilhena.pdf: 2598425 bytes, checksum: 39041ac9767e335dfd63902e21daf173 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-13T15:38:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcia Caroline Pires Vilhena.pdf: 2598425 bytes, checksum: 39041ac9767e335dfd63902e21daf173 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-13T15:38:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcia Caroline Pires Vilhena.pdf: 2598425 bytes, checksum: 39041ac9767e335dfd63902e21daf173 (MD5) Previous issue date: 2012-06-26 / Não informada / Aspidosperma marcgravianum Woodson (Apocynaceae) is popularly known as carapanaúba a high quality wood. The bark is used in the Amazonian folk medicine as infusion to treat malaria, diabetes, gastrointestinal disturbances, in uterus and ovarian inflammation, against cancer and as contraceptive. The few papers available do not confirm the folk use, but the about 50 known indolic alkaloids isolated from A. marcgravianum are often used to explain the toxic effect on Artemia franciscana and the described anti-bacterial activity. The present work aimed to study the in vivo and in vitro effects and mechanisms of action of the alkaloids extracted from Aspidosperma marcgravianum. The bark was extracted with ethanol in Soxhlet apparatus generating the ethanol extract (EETOH, 3% yield). The EETOH was partitioned with chloroform in different pH, yielding the chloroform fraction (FCHCl3); further partition yielded the total alkaloids fraction (TAF). FCHCl3 purification in silica gel column chromatography (CC) yielded six fractions of different alkaloids (F13-23, F24-32, F55-73, F33-43, F44-54 and F74-76). FAT standardization in HPLC showed 11 major peaks with retention times from 3.5 to 27.0 min similar to those obtained for the purified fractions. To know the main pharmacological effects induced of A. marcgravianum, mice were orally treated with EETOH and TAF (1 g/kg). EETOH produced evident muscular relaxation and reduced mice motility, as well as dyspnea; death was not observed within 24 h. Comparatively, TAF produced faster and more intense effects that killed all the animals. In rat isolated atrium, FAT (10 to 100 μg/mL) produced negative chronotropic effect related to the drug concentration, positive inotropic effect at low concentration but contraction inhibition at high one. The diaphragm muscle contractions were potentiated by TAF; this action was neither related to an anticholinesterase activity nor to Ca2+-ATPase inhibition. The diaphragm tetanus after repetitive electrical stimulation (30-50 Hz) was not sustained in presence of FAT (10 to 100 μg/mL) but the initial muscle responses were not proportionally blocked; similar effects were observed for the purified fractions at 1 μg/mL. Since the alkaloids did not induce muscle contracture, neither inhibited SERCA 1 activity, nor reduced the initial responses upon repetitive muscle stimulation, the effect on contraction might putatively be explained by increased action potential duration. This effect would increase the muscle membrane refractoriness and would block the tetanus responses, but at the same time it would increase the myofibrils active state resulting in increased contraction of diaphragm and heart muscles. Usually increased action potential duration is due to potassium channel blockade. The present experiments, however, do not provide any direct evidence for this latter effect. / Aspidosperma marcgravianum Woodson (Apocynaceae) é conhecida como carapanaúba. Além da qualidade da madeira, a casca da espécie é utilizada como infuso na medicina popular da Região Amazônica para tratar malária, diabetes, males do estômago, inflamações do útero e do ovário, contra câncer, e como contraceptivo. Poucos trabalhos científicos confirmam essas ações, mas já são conhecidos cerca de 50 alcaloides indólicos, que parecem ser os responsáveis pela atividade tóxica às larvas de Artemia franciscana e pela atividade antimicrobiana. Este trabalho teve como objetivo estudar os efeitos e o(s) mecanismo(s) de ação dos alcaloides de Aspidosperma marcgravianum Woodson em roedores. O pó das cascas do caule foi extraído em Soxhlet obtendo-se o extrato etanólico (EETOH, rendimento 3%). O EETOH foi particionado com clorofórmio em diferentes pH, dando origem à fração clorofórmica (FCHCl3) e, esta, à fração mais purificada contendo os alcaloides totais (FAT). A purificação da FCHCl3 por cromatografia em coluna (CC), separou seis frações de diferentes alcalóides (F13-23, F24-32, F55-73, F33-43, F44-54 e F74-76). A padronização da FAT em CLAE mostrou 11 picos principais com tempos de retenção que variaram de 3,5 a 26,9 min, coincidentes com os das frações purificadas. Para identificar os principais efeitos farmacológicos de A. marcgravianum, o extrato etanólico (EETOH) e a fração alcaloídica (FAT) foram administrados por via oral (1 g/kg, v.o.), em camundongos. O EETOH produziu diminuição da motilidade e relaxamento muscular evidentes, além de sinais de dispnéia, sem cianose; não houve morte em 24 horas de observação. A FAT produziu os mesmos efeitos, porém rápidos e intensos, com 100% de letalidade. Em átrios isolados de rato, a FAT (10 a 100 μg/mL) produziu efeito cronotrópico negativo proporcionalmente às concentrações e efeito inotrópico positivo na menor concentração e inotrópico negativo na maior concentração. As contrações do músculo diafragma de rato foram potenciadas na presença da FAT; esta ação não foi relacionada a uma atividade anticolinesterásica da FAT ou à inibição da atividade da Ca2+-ATPase de músculo esquelético. Na presença da FAT (10 a 100 μg/mL) o tétano do músculo diafragma de rato não foi sustentado, mas a contração inicial à estimulação tetânica (30 e 50 Hz) não foi inibida na mesma proporção; efeitos semelhantes foram observados com as frações purificadas (1 μg/mL). Estes efeitos indicam que o período refratário da fibra muscular foi aumentado na presença dos alcalóides. O prolongamento do potencial de ação, talvez por bloqueio de canais de potássio na repolarização celular, potenciaria a contração e inibiria a resposta à estimulação tetânica. As experiências, no entanto, não indicam diretamente a ação dos alcalóides nas correntes iônicas do potencial de ação.

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2014-08-22T13:26:36Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao_Thays_Versao_Final.pdf: 1497222 bytes, checksum: f398ada0d986db4d3fa3c1da26df807a (MD5) / Made available in DSpace on 2014-08-22T13:26:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao_Thays_Versao_Final.pdf: 1497222 bytes, checksum: f398ada0d986db4d3fa3c1da26df807a (MD5) Previous issue date: 2013-09-03 / In order to define the safety of phytotherapeutic use of plants is important an evaluation of the toxic potential by clinical, laboratory and histopathological studies in animals after exposure to extract of parts of the plant in different intervals of time. Due to bark infusion from species of Aspidosperma is employed without proof of its toxic potential in treatment of the diabetes mellitus, hypercholesterolemia and gastric disorders, this study proposes an experimental test with ethanolic extract of Aspidosperma subincanum to verify if induces acute and subchronic toxicity in heart, liver and kidneys of mices (Mus musculus). The animals (male and female) received orally a 75 mg/kg, 150 mg/kg and 300 mg/kg of the extract for subchronic intoxication evaluation by daily exposure along of 28 days. In the acute toxicity evaluation were used female mices that received an only dose of 300mg/kg and 2000 mg/kg of the extract and observed during to 14 days. Pharmacological tests were conducted to check the possible action of the extract in central nervous system in male mices submitted to 200 mg/kg, 400 mg/kg and 750 mg/kg by oral, subcutaneous and intraperitoneal ways. The animals showed some signs of neurotoxicity whose intensity was proportional to extract concentration and died with oral dose of 2000 mg/kg. Hematological parameters did not showed any significant abnormalities. Biochemical tests did not presented any changes, except ALT and AST measures which presented significant increases in exposed groups in relation to control group. Concerning histopathological exam it was possible to detect lesions that suggest the existence of injuries in liver (microvacuolization and hyperemia) and kidney (hyperemia and hemorrhage). Thus, it can be concluded that ethanolic extract of Aspidosperma subincanum is toxic orally, both acute and subcronically, in mices and the estimated median lethal dosis (LD50) was below 2000 mg/kg. / Para se determinar a segurança do consumo de fitoterápicos é imperativo uma avaliação do pontecial tóxico por meio de exames clínicos, laboratoriais e histopatológicos de animais após exposição ao extrato de partes da planta em diferentes intervalos de tempo. Pelo fato de infusos da casca de espécies do gênero Aspidosperma serem empregados, sem comprovação de seu pontencial tóxico, no tratamento do diabetes mellitus, da hipercolesterolemia e de distúrbios gástricos, propõe-se um ensaio experimental com o objetivo de avaliar se o extrato etanólico de Aspidosperma subincanum (EEAs) induz toxicidade aguda e subcrônica no coração, fígado e rins de camundongos (Mus musculus). Os animais (machos e fêmeas) receberam por via oral a dose de 75, 150 e 300 mg/kg do extrato para a avaliação de intoxicação subcrônica por 28 dias de exposição diária ao extrato. Na avaliação da toxicidade aguda foram utilizados camundongos fêmeas que receberam a dose única de 300 e 2000 mg/kg do extrato e observados por 14 dias. Testes farmacológicos foram conduzidos para verificar a possível ação desse extrato no sistema nervoso central, sendo utilizados camundongos machos e as doses de 200, 400 e 750mg/kg por via oral, subcutânea e intraperitoneal. Os animais apresentaram alguns sinais de neurotoxicidade e os sinais tiveram intensidade proporcional à concentração do extrato, sendo letais na dose de 2000 mg/kg via oral. Dentre os exames laboratoriais realizados, o eritrograma, plaquetograma e leucograma, não apresentaram nenhuma alteração significativa. Nas provas bioquímicas não foram observadas alterações dignas de nota, à exceção de ALT e AST que apresentaram elevação significativa nos grupos expostos em relação ao grupo controle. Em relação ao exame histopatológico, observaram-se alterações compatíveis com injúrias estruturais hepáticas (microvacuolização e hiperemia) e renais (hiperemia e hemorragia). Conclui-se que o EEAs pode ser considerado tóxico quando administrado por via oral, tanto agudo como subcronicamente, em camundongos e a dose letal mediana (DL50) estimada encontra-se abaixo de 2000 mg/kg.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-09-24T14:37:52Z No. of bitstreams: 2 Carvalho, Luciana Silva de.pdf: 980535 bytes, checksum: 9bf02a18612ac7a17b02a9aeae08e783 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2014-09-28T02:06:42Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Carvalho, Luciana Silva de.pdf: 980535 bytes, checksum: 9bf02a18612ac7a17b02a9aeae08e783 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-28T02:06:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Carvalho, Luciana Silva de.pdf: 980535 bytes, checksum: 9bf02a18612ac7a17b02a9aeae08e783 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-08-30 / The objective of this research was to estimate the acute toxicity, subchronic and the pharmacological effects of the ethanol extract of the stem bark of guatambu (Aspidosperma subincanum) in rodents. To carry out the acute toxicity it was used albino female mice (Mus musculus) that received a single oral dose of 300 mg/kg and 2000 mg/kg of the extract. As for the subchronic toxicity test were evaluated mice (Mus musculus) males and females that received the oral dose of 75 mg/kg, 150 mg/kg and 300 mg/kg of the extract daily for 28 days. To achieve the pharmacological tests, it was used a dose of 125 mg/kg, 250 mg/kg and 500 mg/kg orally in male mice.The animals showed some signs of neurotoxicity such as tremors, changes in the gait and convulsions. Such signals have the intensity proportional to the concentration of the extract, and were lethal in the dose of 2000 mg/kg.It was observed that in acute or subchronic conditions, depending on the dose, the timing and frequency of exposure and routes of administration, the ethanol extract of Aspidosperma subincanum should be considered a toxic agent. / O objetivo desta pesquisa foi estimar a toxicidade aguda, subcrônica e os efeitos farmacológicos da casca do caule de guatambu (Aspidosperma subincanum) a fim de verificar a possível ação do extrato etanólico desta planta no sistema nervoso central de roedores. Para a determinação da toxicidade aguda foram utilizados camundongos albinos (Mus musculus), fêmeas, que receberam por via oral a dose única de 300 mg/kg e 2000 mg/kg do extrato. Para o teste da toxicidade subcrônica foram avaliados camundongos albinos (Mus musculus) machos e fêmeas que receberam por via oral a dose de 75 mg/kg, 150 mg/kg e 300 mg/kg do extrato, diariamente, durante 28 dias. Para a realização dos testes farmacológicos, utilizou-se a dose de 125 mg/kg, 250 mg/kg e 500 mg/kg por via oral em camundongos machos. Os animais apresentaram alguns sinais de neurotoxicidade, tais como, tremores, alterações de marcha e convulsões. Tais sinais tiveram a intensidade proporcional à concentração do extrato, e foram letais na dose de 2.000 mg/kg. Observou-se que em condições agudas ou subcrônicas, dependendo da dose administrada, do tempo e freqüência de exposição e das vias de administração, o extrato etanólico de Aspidosperma subincanum deve ser considerado um agente tóxico.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:26:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 KORTZ_Alessandra_2012.pdf: 9274749 bytes, checksum: d0ff255829e7affe4ffbd746dcdef364 (MD5) Previous issue date: 2012-05-15 / Financiadora de Estudos e Projetos / Durante o Pleistoceno, os neotrópicos passaram por fases de flutuações climáticas, e muitos estudos sugerem que havia condições mais frias e mais secas do que as atuais em algumas regiões, e que houve expansão e/ou retração na distribuição das formações vegetais. Entretanto, a maior parte do debate sobre as mudanças na vegetação durante o Quaternário teve foco nas florestas úmidas e pouca atenção tem sido dada ao papel das mudanças climáticas no Pleistoceno na diversificação de espécies da América do Sul tropical, com enfoque nas áreas secas. As florestas tropicais sazonalmente secas (SDTFs, na sigla em inglês) apresentam um alto nível de endemismo e permanecem pobremente caracterizadas em termos biogeográficos, sendo um dos ecossistemas mais ameaçados. Os dados de ocorrência atual de espécies do gênero Aspidosperma (Apocynaceae), que possuem espécies representativas do dossel em formações de SDTFs, foram utilizados para a produção de modelos de distribuição potencial, em cenários climáticos atual e do último máximo glacial (LGM) para verificar a existência de áreas potenciais historicamente estáveis. Os modelos de distribuição gerados indicaram padrões de distribuição peculiares para as espécies, relacionados a condições climáticas e ambientais específicas em formações de SDTFs, o que aponta que essas formações devem ser tratadas como heterogêneas. De maneira geral, as áreas potenciais foram maiores e mais contínuas, relacionando diferentes populações das espécies para os cenários climáticos do pleistoceno quando comparadas às atuais. As espécies foram confirmadas como representativas de formações de SDTFs, em dois padrões gerais: um mais associado à caatinga e ao carrasco no nordeste do Brasil e outro localizado preferencialmente na porção sudeste, em formações de floresta estacional semidecidual. As áreas historicamente estáveis mostraram particularidades para cada espécie que, analisadas em conjunto, apresentaram notável semelhança com essas áreas estáveis de SDTFs apontadas recentemente na literatura, ainda que tenha sido utilizada uma metodologia diferente. Essas áreas também foram de modo geral coincidentes com localidades onde há registros de condições semiáridas no LGM.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-03-27T13:35:23Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Emmeline Flor Ribeiro - 2014.pdf: 1787776 bytes, checksum: c8a4106ef03ff49855997007460d4558 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-03-27T14:47:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Emmeline Flor Ribeiro - 2014.pdf: 1787776 bytes, checksum: c8a4106ef03ff49855997007460d4558 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-27T14:47:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Emmeline Flor Ribeiro - 2014.pdf: 1787776 bytes, checksum: c8a4106ef03ff49855997007460d4558 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-12-09 / Aspidosperma subincanum Mart. is a medicinal herb used for the treatment of hypercholesterolemia, diabetes and digestive illnesses. The bitter tonic of its bark is known by the indigenous population to stimulate circulatory functions. Although a previous study showed that EEAS induces hypotension associated with bradycardia and vasodilation, no scientific data have been described to evaluate the diuretic effects of this Brazilian medicine plant. The aim of the present study was to evaluate the diuretic activity of an ethanol extract of Aspidosperma subincanum (EEAS), and possible mechanisms of action, using Wistar rats. EEAS, 60, 120 and 300 mg/Kg, or furosemide (20 mg/Kg) were orally administered and the rats were kept individually in metabolic cages for 24h for urine collection 1, 2, 4, 6, 8, 12 and 24h after treatments. To evaluate the involvement of prostanoids in the diuretic action of EEAS, the animals received piroxicam (5 mg/Kg, i.p.), a nonselective inhibitor of cyclooxygenase, before treatment with EEAS 120 mg/Kg. The control groups received only saline (NaCl, 0,9%), or saline and piroxicam. The urinary volume, the water consumption, electrolyte excretion and pH were measured. The oral administration of EEAS 60 and 120mg/Kg increased significantly the urine and electrolyte excretion of Na+ and K+ continuously throughout the study period, wherein increased the urinary output from the first hour after treatment, and increased the electrolytes from the second hour onwards after treatment. EEAS 60 and 120 mg/Kg caused a relative increase in cumulative diuresis around of 77% and 142,95%, respectively, compared with the control group. EEAS 300 mg/Kg increased the urinary excretion from 8 h after treatment. From 4 h until the end of the experiment, the group treated with EEAS 120 mg/kg provided a major excretion of Na+ than the furosemide group, while the group treated with EEAS 60 mg/Kg provided a similar excretion of Na+ when compared to the group that received furosemide. The furosemide group showed significantly higher amounts of K+ in the urine when compared with the others group. The urinary excretion of EEAS was reduced by piroxicam 2 h, 4 h and 8 h after treatments by around 54.2%, 50.3% and 38.9%, respectively. Piroxicam reduced Na+ excretion between 4 and 8 h after treatments by 38.4 and 39.0%, respectively. And still inhibited the K+ excretion by around 28.2% at 4 h and 47.1% at 8 h. The results suggest that EEAS could present compound(s) responsible for diuretic activities, and the mechanism could involve prostanoids system. / O Aspidosperma subincanum Mart. é uma planta medicinal conhecida popularmente por ser utilizada no tratamento de hipercolesterolemia, diabetes e doenças digestivas. O tônico amargo de sua casca é conhecido pela população indígena por estimular as funções circulatórias. Embora, um estudo prévio tenha demonstrado que o extrato etanólico de Aspidosperma subincanum (EEAS) induz hipotensão associada à bradicardia e vasodilatação, nenhum estudo científico avaliou os efeitos diuréticos dessa planta medicinal brasileira. O objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade diurética do EEAS e possíveis mecanismos de ação, utilizando ratos Wistar. EEAS, 60, 120 e 300 mg/Kg, ou furosemida (20 mg/Kg) foram administrados, via oral, e os ratos foram colocados individualmente em gaiolas semi-metabólicas durante 24 h para a coleta de urina, nos períodos de 1, 2, 4, 6, 8, 12 e 24 h após os tratamentos. Para avaliar o envolvimento da via dos prostanoides no possível efeito diurético do EEAS, os animais receberam piroxicam (5 mg/Kg, i.p.), um inibidor não seletivo das cicloxigenases, previamente ao tratamento com EEAS 120 mg/Kg. Os grupos controle receberam apenas salina (NaCl, 0,9%), ou salina e piroxicam. O volume urinário, o consumo de água, a excreção de eletrólitos e o pH foram medidos. A administração oral de EEAS 60 e 120 mg/Kg aumentou significativamente a excreção urinária e de eletrólitos Na+ e K+ durante o período de estudo, sendo que houve aumento do volume urinário a partir da primeira hora após os tratamentos, e aumento da excreção de eletrólitos a partir de 2 h após os tratamentos. EEAS 60 e 120 mg/Kg causaram aumento relativo na diurese cumulativa de 24 h em aproximadamente 77% e 142,95%, respectivamente, comparado com grupo controle. EEAS 300 mg/Kg causou aumento da excreção urinária a partir de 8 h após tratamento. De 4 h até o final do experimento, o grupo tratado com EEAS 120 mg/kg proporcionou maior excreção de Na+ do que o grupo tratado com furosemida, enquanto o grupo tratado com EEAS 60 mg/Kg proporcionou excreção similar ao grupo furosemida, sendo que neste grupo ocorreu maior excreção de K+ na urina quando comparado com os outros grupos. A excreção urinária do EEAS foi reduzida por piroxicam nos períodos de 2 h, 4 h e 8 h após os tratamentos na proporção de 54.2%, 50.3% e 38.9%, respectivamente. O piroxicam também inibiu a excreção de Na+ entre 4 e 8 h após os tratamentos, na proporção de 38.4 e 39.0%, respectivamente. Ainda inibiu excreção de K+ na ordem de 28.2% em 4 h e 47.1% em 8 h. Os resultados mostram que o EEAS apresenta compostos ativos responsáveis pela atividade diurética em ratos, e o mecanismo de ação parece envolver a via dos prostanoides.

A four component reaction involving the coupling of functionalized aldehydes, amines, acid chlorides, and [pi]- and organometallic nucleophiles has been developed to prepare multifunctional substrates that may be employed in subsequent ring-forming reactions to generate diverse arrays of functionalized heterocyclic scaffolds. Allyl metals, Grignard reagents, silyl ketene acetals, silyl enol ethers, and silyloxy furans have been utilized as the nucleophile in the four component reaction (4CR). The 4CR has been sequenced with intramolecular Heck reactions, Diels-Alder and [3+2] cycloadditions, ring closing metathesis (RCM), and Dieckmann condensations to provide a number of diverse heterocyclic structures. The practical utility of this approach to diversity-oriented synthesis (DOS) was further exemplified by its application to the first total synthesis of the isopavine alkaloid roelactamine, which was completed in only four steps from commercially available materials. The application of this methodology towards the synthesis of the Aspidosperma alkaloids rosicine and pseudotabersonine is also presented. To this end, an imine pentadienylation/double RCM strategy has been adopted to rapidly access the pentacyclic core of the aspidospermine alkaloids. This sequence involved the use of a pentadienyl aluminum reagent, which was found to react with aryl imines to give branched products in good yields. / text