Orientador: Athanase Billis / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-17T23:58:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ribeiro_MaisaMomessodeQuintal_D.pdf: 5438814 bytes, checksum: 7ebc71e57ee2f75f13a6adb902af916a (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A capacidade de prever os tumores órgão-confinados e a recorrência bioquímica pós-prostatectomia radical é o objetivo principal dos nomogramas pré-terapêuticos. A aferição da extensão tumoral do carcinoma em biópsias transretais aumenta o valor preditivo desses nomogramas. Os objetivos deste trabalho são avaliar características anatomoclínicas dos pacientes submetidos à prostatectomia radical entre 1997 e 2008 no Hospital das Clínicas da Universidade Estadual de Campinas, associando os aspectos morfológicos encontrados nas biópsias transretais com a extensão tumoral final, a situação das margens cirúrgicas, o estádio patológico e a recorrência bioquímica. Nas biópsias, a extensão tumoral foi avaliada através das seguintes formas: 1- Número e percentagem de fragmentos comprometidos por carcinoma; 2- Extensão total e percentual de carcinoma em milímetros de todos os fragmentos e 3- Maior extensão e maior percentual de carcinoma em um único fragmento. A presença de invasão perineural, de formações glomeruloides e de micronódulos colágenos nas biópsias foram associadas a diferentes variáveis clinicopatológicas. Foram incluídas no estudo todas as prostatectomias radicais submetidas inteiramente a exame histológico e estadiadas segundo os critérios da AJCC, 7ª edição. A extensão tumoral nas prostatectomias radicais foi avaliada através do sistema de contagem de pontos. Os valores de PSA ?0,2ng/mL foram considerados como marcadores bioquímicos de progressão tumoral. Para a associação entre variáveis contínuas foi utilizado o teste de Spearman. Para a comparação entre os diferentes métodos de extensão tumoral e o estádio patológico final >T2 e a situação das margens cirúrgicas foi utilizada regressão logística binária. O tempo de sobrevida livre de doença foi estudado usando o produto limite de Kaplan-Meier. Para avaliar o risco de recorrência bioquímica, foram realizadas análises uni e multivariadas, baseadas no modelo de Cox. Foram considerados significantes os valores de p?0,05. Todos os métodos de avaliação da extensão tumoral foram capazes de prever estádio patológico final >T2 e o comprometimento das margens cirúrgicas. Com a exceção da maior extensão e do maior percentual de carcinoma num único fragmento, todos os métodos estiveram associados a um maior risco de recorrência bioquímica. Somente a percentagem de fragmentos com carcinoma (%NFC), a maior extensão tumoral num único fragmento (MFC), o comprimento total da neoplasia em milímetros (ETC) e o percentual de carcinoma em todos os fragmentos (%ETC) mostraram diferença significativa no tempo de recorrência bioquímica pós-prostatectomia radical (Kaplan-Meier). O percentual do comprimento total de carcinoma (%ETC) apresentou maior valor preditivo que as demais aferições em relação ao estádio patológico final >pT2 e à recorrência bioquímica. O número de fragmentos comprometidos por carcinoma apresentou a melhor capacidade preditiva na avaliação do comprometimento das margens cirúrgicas. Em análise multivariada, o modelo que combinou PSA pré-operatório, graduação histológica de Gleason e %ETC mostrou maior capacidade preditiva de estádio patológico >pT2 e risco de recorrência bioquímica. Os micronódulos colágenos, as formações glomeruloides e a infiltração perineural foram achados infrequentes nas biópsias (13,7%, 11,9% e 20,8%, respectivamente). Não houve associação entre a presença de micronódulos colágenos com qualquer variável clínica, patológica ou recorrência tumoral. As formações glomeruloides estiveram diretamente relacionadas com a idade dos pacientes e com a graduação histológica de Gleason, tanto nas biópsias como nas prostatectomias radicais. A invasão perineural esteve diretamente relacionada à doença extraprostática (estádio patológico >T2). Não houve associação entre invasão perineural e recorrência bioquímica pós-cirurgia. Para o anatomopatologista em sua rotina diária é menos morosa e mais prática a simples aferição do número de fragmentos com carcinoma (NFC) e o percentual em relação ao total de fragmentos da amostra (%NFC). Essas aferições, associadas ao PSA pré-operatório e à graduação histológica de Gleason, constituem um modelo preditivo significante do estádio patológico final >T2 / Abstract: The focus of pre therapeutic nomograms is to preview organ-confined prostate cancer and biochemical recurrence. Measuring cancer extent on needle prostatic biopsies enhance the predictive value of nomograms. The objectives of this study were evaluate clinical and pathological characteristics of patients submitted to radical prostatectomy at University of Campinas from 1997 to 2008, correlating the morphological aspects on prostate needle biopsy with final tumoral extent, positive surgical margins, pathological stage and biochemical recurrence. Tumor extent was evaluated on needle biopsies as: 1- Number and percentage of cores with carcinoma; 2- Total length and percentage of cancer in mm in all cores; and, 3- The greatest length and percentage of cancer in a single core. Perineural invasion, collagenous micronodules and glomeruloid structures were also observed and correlated to different clinical and pathological variables. All surgical specimens were whole-mount processed and totally embedded. The pathological stage was defined by AJCC, 7th edition. Tumoral extent was evaluated by a semiquantitative point-count method. Biochemical progression was defined as PSA ?0.2ng/mL. Logistic regression was used to relate the variables to pathological stage>T2 and surgical margins. Spearman test was used to associate continuous variables. Time to biochemical (PSA) progression-free outcome was studied using the Kaplan-Meier product-limit analysis; the comparison between the groups was done using the log-rank test. For the risk of recurrence, univariate and multivariate analyses were based on Cox model. Two-sided P value <0.05 was considered statistically significant. All measurements significantly predicted stage >pT2 and positive surgical margins. With the exception of the greatest length and percentage of cancer in a single core, all other methods were associated with a higher risk for biochemical recurrence. Only percentage of cores with carcinoma, greatest length of tumor in a single core and length and percentage of cancer in all cores significantly showed different time for PSA recurrence (Kaplan-Meier). Percentage of length of carcinoma in all cores was significantly and consistently stronger than other measures in all comparisons and combined to preoperative PSA and Gleason grade in multivariate analysis gained prediction for pathologic stage >T2 and was independent for risk of biochemical recurrence. The number of cores with carcinoma was stronger than other measures to predict positive surgical margins. Collagenous micronodules, glomeruloid structures and perineural invasion were infrequent findings on needle biopsies (13,7%, 11,9% e 20,8%, respectively). Collagenous micronodules were not related to any clinical or pathological variable, as well as tumoral recurrence. Glomeruloid structures were related to age and Gleason grade on needle biopsies and radical prostatectomies. Perineural invasion were directly associated to pathological stage >T2 (extraprostatic disease). There was no association between biochemical recurrence and perineural invasion, even in patients with organ-confined cancer. Percentage of total length of carcinoma in mm in all cores was statistically the strongest predictor of stage >pT2 and biochemical recurrence following radical prostatectomy, however, number and percentage of biopsy cores with cancer (the easiest way to measure tumor extent) are also statistically significant predictors and may be the favorite choice for the great majority of practical pathologists. Combined with preoperative PSA and Gleason grade on biopsy may improve the predictive value for stage >pT2 / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-28T15:50:17Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Elizabeth N. Andrade.pdf: 1864684 bytes, checksum: c599ae6a377eaefe4189fdca36efee53 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-28T15:50:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Elizabeth N. Andrade.pdf: 1864684 bytes, checksum: c599ae6a377eaefe4189fdca36efee53 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-28T15:50:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Elizabeth N. Andrade.pdf: 1864684 bytes, checksum: c599ae6a377eaefe4189fdca36efee53 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2010-03-17 / Introduction: Malaria is one of the most serious health problems affecting Brazilians, and it is in the Amazon area that one can find the largest number of people affected by the disease. In that region, the State of Amazonas is by far, the place that presents the highest incidence of the illness. Malaria brings a strong impact on personal and collective grounds and is considered the most debilitating disease affecting residents of that large area of land. Such epidemiological importance plus an outstanding harm to the hematopoietic sector imposes the need for studies that enhance a better understanding of the problem as proposed by this research. Methods: A study of a 29 patient group with falciparum malaria, primo-infected and no previous treatment, all older 15 years of age, admitted to the Tropical Medicine Foundation of Amazonas from 1998 to 1999. Clinical and laboratory data (hematology, biochemistry), myelogram and bone marrow biopsy collected from patients were analyzed to identify changes resulting from bone marrow impairment in acute malaria caused by Plasmodium falciparum. Results: The patients studied had low levels of parasitemia (52%), thrombocytopenia with platelet counts in peripheral blood, varying inversely to peripheral parasitemia (p value 0.016), hemolysis presumed positive by Coombs test in 16 patients; dyserithropoiesis, dysmegakariopoiesis and leukocyte phagocytosis in a total of 152 dyspoietics events involving the three medullary series and presence of lymphoid aggregates (17.24%) Conclusions: Acute malaria caused by Plasmodium falciparum in this study provided important changes that affect cell maturation in bone marrow, primarily in erythroid and megakaryocytic lineage, besides causing the appearance of uncertain evolutionary potential lymphoid aggregates. / Introdução: A malária é um dos mais graves problemas da saúde que afeta os brasileiros, sendo que se encontra na Região Amazônica a maior quantidade de pessoas afetadas pela doença. Naquela região, o Estado do Amazonas é aquele que apresenta a maior casuística da doença. A malária é uma doença com forte impacto pessoal e coletivo, sendo considerada a doença mais debilitante a afetar os moradores daquela região. A esta importância epidemiológica agrega-se o notório comprometimento do setor hematopoiético pela malária, impondo a necessidade de estudos que aumentem o entendimento sobre a questão como se propõe esta pesquisa. Metodologia: Foram estudados 29 pacientes portadores de malária por Plasmodium falciparum, primo infectados, virgens de tratamento, maiores de 15 anos, atendidos na Fundação de Medicina Tropical do Amazonas no período de 1998 a 1999. Dados clínicos, laboratoriais (hematológicos, bioquímicos), mielograma e biópsia de medula óssea coletados dos pacientes foram analisados visando identificar alterações decorrentes do comprometimento da medula óssea na malária aguda por Plasmodium falciparum. Resultados: Os pacientes estudados apresentaram nível de parasitemia baixo (52%); plaquetopenia com a contagem de plaquetas no sangue periférico variando negativamente com a parasitemia periférica (p valor 0,016); hemólise, presumida pelo teste de Coombs positivo, em 16 pacientes; diseritropoiese, dismegacariopoiese e fagocitose de leucócitos totalizando 152 eventos dispoiéticos acometendo as três séries medulares e presença de agregados linfóides (17,24%) Conclusões: A malária aguda por Plasmodium falciparum proporcionou neste estudo alterações medulares importantes que afetam a maturação celular na medula óssea, principalmente na linhagem eritróide e megacariocítica, além de ocasionar o aparecimento de agregados linfóides de potencial evolutivo incerto.

O presente estudo teve como objetivos avaliar a sensibilidade, a especificidade e a acurácia da Punção Aspirativa por Agulha Fina (PAAF) em nódulos submucosos da cavidade bucal e da região de cabeça e pescoço como ferramenta auxiliar de diagnóstico. Foram selecionados 50 pacientes consecutivamente que procuraram a Clínica da Disciplina de Estomatologia Clínica da FOUSP, portadores de lesões em boca e em região de cabeça e pescoço. O material obtido pela PAAF foi enviado a um mesmo patologista apenas com o diagnóstico clínico e após a emissão do laudo da PAAF o laudo do anátomo patológico era emitido servindo como padrão ouro. Após os cálculos, o resultado da sensibilidade foi de 75%, a especificidade foi de 96%, a acurácia foi de 58,8%, o valor preditivo positivo foi de 86% e o valor preditivo negativo foi de 93%. A significância foi estabelecida para 5% e o teste usado foi o teste de Kappa com valor de P<0,001 e um teste qui-quadrado, com valor de P=0,788. Pela análise dos resultados a PAAF teve uma alta sensibilidade para identificar lesões malignas, uma alta especificidade para identificar lesões benignas e uma baixa acurácia para se obter um diagnóstico definitivo. / The objectives of this present study are to evaluate the sensitivity, specificity and accuracy of Fine Needle Aspiration Biopsy (FNAB) in submucous nodules of oral cavity and nodules of head and neck region as an auxiliary tool of diagnoses. 50 patients that looked for the Clinic of the Discipline of Oral Stomatology of FOUSP were consecutively selected, carrying lesions in the oral cavity and the head and neck region. The material obtained by FNA was sent to only one pathologist with the clinical diagnosis and after the emission of FNAB report the biopsy report was emitted serving as the gold standard. After the calculation, the results of sensibility was 75%, the specificity was 96%, the accuracy was 58,8%, the positive predict value was 86% and the negative predict value was 93%. The significance was established for 5% and the tests used was Kappa with P<0,001 and a Chi-square with a P value of 0,778.With the results analysis the FNAB had a high sensibility to identify malignant lesions, a high specificity to identify benign lesions and a low accuracy to obtain final diagnoses.

Foram estudadas, pelo método da assinatura digital, 35 biópsias esofágicas provenientes de pacientes da província de Linxian, China, classificadas por dois observadores com ampla experiência em patologia gastrointestinal como normais, displasias ou carcinomas (8 casos normais, 6 displasias leves, 8 displasias moderadas, 4 displasias acentuadas, 4 carcinomas suspeitos de invasão e 5 carcinomas invasores). O objetivo do trabalho foi caracterizar os núcleos das populações celulares desses casos de forma que permitisse a derivação de informações diagnósticas e de possível implicação prognóstica a partir do estudo quantitativo das características nucleares de cada caso ou categoria diagnóstica. As biópsias foram coradas pelo método de Feulgen, sendo então selecionados e digitalizados 48 a 50 núcleos de cada uma delas. De cada núcleo foram extraídas 93 características cariométricas, arranjadas arbitrariamente em histograma designado como assinatura nuclear. Da média aritmética de cada característica dos núcleos de uma mesma biópsia resultou a assinatura digital do caso. A análise de funções discriminantes, baseada nas 15 características cariométricas que ofereceram melhor discriminação entre as categorias diagnósticas, mostrou que o grupo classificado como normal foi claramente distinto das demais categorias. A densidade óptica total aumentou progressivamente segundo a classificação das biópsias, do normal à displasia acentuada, sendo o valor do carcinoma semelhante ao da displasia moderada. A matriz de comprimento de seqüência apresentou o mesmo perfil, ou seja, ambas as características ofereceram discriminação clara entre as categorias diagnósticas, com exceção do carcinoma invasor, cujos valores foram superponíveis aos da displasia moderada. O estudo demonstrou a viabilidade da quantificação de características nucleares através das assinaturas nucleares digitais, que demonstraram diferenças estatisticamente significativas entre diferentes categorias diagnósticas e a elevação progressiva dos valores mensurados relacionados com o espectro das lesões, apresentando-as como um histograma (assinatura digital nuclear). / 35 esophageal biopsies of patients from the Linxian province in China, classified by two experienced gastrointestinal pathologists as normal, dysplasias or carcinomas ( 8 normal cases, 6 mild dysplasias, 8 moderate dysplasias, 4 severe dysplasias 4 carcinomas suspicious of invasion and 5 invasive carcinomas) were studied by the method of digital signature. The aim of this study was to characterize the nuclei of these cases cell populations in such a way that diagnostic and prognostic information could be derived from the nuclear quantitative features of each case or each diagnostic category. The biopsies were stained by the Feulgen method, a stechiometric reaction, 48 to 50 nuclei from each biopsy being selected and digitized. 93 kariometric features were obtained from each nucleus and placed arbitrarily in a histogram designated as nuclear signature. The nuclear signatures of a case resulted from the mean values of each nuclear feature of the same biopsy, divided by the standard deviation of the normal cell population. The analysis of discriminant functions, based on the 15 kariometric features with the best discrimination power among diagnostic categories, revealed that the group classified as normal was clearly distinct from the other groups. Optical density augmented progressively according to the biopsy classification from normal to severe dysplasia, the value for carcinoma being similar to that for moderate dysplasia. The run length matrix showed the same profile, that is, both features offered clear discrimination among diagnostic categories, except invasive carcinoma, whose values overlapped those for moderate dysplasia. The study demonstrated the feasibility of the examination of quantitative nuclear features, revealing statistically significant differences among the various diagnostic categories and the progressive elevation of measured values in relation to the increasing degree of the lesion, and demonstrating such differences as histograms (nuclear signatures).

INTRODUÇÃO: O diagnóstico do câncer de próstata em pacientes com níveis séricos do antígeno prostático específico persistentemente elevados após biópsia prostática negativa representa um grande desafio para urologistas e patologistas. A baixa especificidade do antígeno prostático específico e a baixa sensibilidade da biópsia prostática guiada por ultra-som são os maiores obstáculos observados na prática clínica. Apesar do uso de diversos métodos para prever a presença de câncer na glândula, nenhum deles tem precisão absoluta, obrigando os pacientes a realizar novas biópsias. Neste contexto, a descoberta de novos marcadores diagnósticos para o câncer da próstata tornase necessária. OBJETIVO: Avaliar o valor diagnóstico da expressão de seis genes no tecido prostático de pacientes com câncer de próstata clinicamente localizado. MÉTODOS: O estudo consistiu na análise de 50 pacientes com diagnóstico de câncer da próstata, submetidos à prostatectomia radical por doença localizada. A seleção dos genes foi baseada em um estudo prévio que utilizou a tecnologia de microarray (Agilent Technologies 44k whole human genome, two-color) em pacientes com câncer de próstata, divididos de acordo com as características clínico-patológicas. Entre os 4.147 genes com expressão diferenciada entre os casos de câncer de próstata, seis genes (PSMA, TMEFF2, GREB1, TH1L, IgH3 e PGC) foram selecionados. Estes genes foram então testados quanto a seu valor diagnóstico no câncer da próstata através da técnica de reação em cadeia da polimerase quantitativa com transcriptase reversa. Na primeira etapa do estudo, amostras de tecido maligno de 33 pacientes com câncer de próstata foram avaliadas. O grupo controle foi composto de nove pacientes com hiperplasia benigna da próstata. Na segunda etapa do estudo foram analisadas amostras de tecido benigno dos demais 17 pacientes com câncer da próstata. O mesmo grupo controle foi utilizado para comparação. RESULTADOS: A análise demonstrou que o PSMA estava super-expresso (em média nove vezes) e o PGC sub-expresso (em média de 1,3 x 10-4 vezes) no tecido neoplásico de todos os casos de câncer quando comparados com os casos de hiperplasia benigna. Os demais genes demonstraram um padrão de expressão variado, não permitindo a diferenciação entre os tecidos malignos e benignos. Quando estes resultados foram testados no tecido prostático benigno dos pacientes com câncer, o PGC manteve o mesmo padrão de expressão em todos os casos e o PSMA, apresentou-se super-expresso em 88% dos pacientes (média de 12 vezes), em relação aos casos de hiperplasia benigna. CONCLUSÃO: A combinação da super-expressão do PSMA e sub-expressão do PGC no tecido prostático pode representar uma evidência objetiva de presença de Cap. Análises clínicas prospectivas adicionais são necessárias para confirmar estes resultados / Introduction and objective: Prostate cancer (PCa) diagnosis in men with persistently increased PSA after a negative initial prostate biopsy has become a great challenge for urologists and pathologists. Despite the use of several methods to increase the sensitivity of prostate biopsy, the false-negative rates remain substantial, leading many patients to undergo repeated procedures. We analyzed the diagnostic value of six genes in the prostatic tissue of patients with clinically localized PCa, in order to predict the presence of cancer. Methods: The study was comprised by 50 patients with clinically localized PCa who underwent radical prostatectomy. Gene selection was based on a microarray analysis of patients with PCa. Among the 4,147 genes with different expressions between two groups, six genes (PSMA, TMEFF2, GREB1, TH1L, IgH3 and PGC) were selected. These genes were tested for its cancer diagnostic role using the quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (qRT-PCR) method. In the first part of the study, malignant tissue samples from 33 patients were analyzed, and in the second part we analyzed benign tissue samples of the other 17 patients with PCa. The control group was comprised of prostatic tissue samples of patients with benign prostatic hyperplasia (BPH). Results: The analysis of malignant prostatic tissue by qRTPCR showed that PSMA was over-expressed (mean nine times) and PGC was under-expressed (mean 1.3 x 10-4 times) in all cases when compared to BPH. The other four tested genes showed a variable expression pattern not allowing a differentiation between benign and malignant cases. When we tested these results in the benign prostate tissues from patients with PCa, PGC maintained the expression pattern, and PSMA, despite over-expression in most cases (mean 12 times), two cases (12%) presented under-expression. Conclusions: PGC under-expression and PSMA over-expression in the tissue may represent an objective evidence of prostate cancer and constitute a powerful adjunctive method in patients with negative prostate biopsy. Further prospective clinical analyses are necessary to confirm theses results

O objetivo do trabalho foi avaliar a técnica de biópsia retal em equinos e as alterações histopatológicas encontradas na mucosa retal em animais clinicamente saudáveis e em animais com alterações do trato gastrintestinal. Foram utilizados 32 equinos divididos em três grupos: 10 animais clinicamente saudáveis (grupo 1), sete animais com alterações do trato gastrintestinal com diagnóstico estabelecido (grupo 2) e 15 animais com manifestações clínicas inespecíficas do trato gastrintestinal (grupo 3). Os equinos do grupo 1 foram biopsiados duas vezes, a segunda biópsia sendo realizada 48 horas após a primeira. As biópsias retais foram realizadas com os animais em estação, utilizando-se pinça de biópsia tipo jacaré. As amostras de mucosa retal foram coradas por hematoxilina-eosina (HE), azul de alciano com ácido periódico de Schiff a 2,5% e azul de toluidina. No grupo 1, não foram observadas diferenças significativas entre a primeira e a segunda biópsia, mas três equinos apresentaram pequenas alterações que podem ser decorrentes da palpação retal. Na primeira avaliação, sete animais desse grupo apresentaram padrão semelhante, permitindo estabelecer um padrão de normalidade histológica para a mucosa retal: epitélio superficial preservado; criptas uniformes e alinhadas perpendicularmente à superfície com grande número de células caliciformes com mucinas ácidas em maior quantidade; linfócitos intra-epiteliais na superfície do epitélio em número de até 15 linfócitos para cada 100 colonócitos; pequeno número de linfócitos, plasmócitos e eosinófilos infiltrando a lâmina própria e a submucosa. Os outros três equinos deste grupo apresentaram um aumento na intensidade das células inflamatórias (discreto a moderado na intensidade de linfócitos e plasmócitos na lâmina própria e submucosa, e moderado na intensidade dos eosinófilos na submucosa). Os equinos do grupo 2, todos com síndrome cólica, apresentaram as seguintes alterações histopatológicas: proctite linfoplasmocítica simples (4/7) e proctite eosinofílica (1/7). No grupo 3 (12 equinos com diarreia crônica e três com emagrecimento progressivo), apenas um animal apresentou mucosa retal com padrão de normalidade. Nos outros animais foram observadas: proctite linfoplasmocítica simples (6/15), proctite erosiva (3/15), proctite linfoplasmocítica com aumento de neutrófilos (2/15), proctite eosinofílica (2/15), proctite linfoplasmocítica com aumento de neutrófilos e eosinófilos (1/15) e infiltração por linfócitos atípicos/linfoma (1/15). Concluiu-se que: a técnica de biópsia retal avaliada é de fácil execução e segura; embora algumas alterações histológicas possam ser observadas na mucosa retal de equinos clinicamente saudáveis, causadas ou não por palpação retal, há um padrão de normalidade que deve ser usado para a avaliação de equinos com alterações gastrintestinais; apenas em alguns casos as alterações histológicas encontradas na mucosa retal em equinos permitem um diagnóstico definitivo, mas elas podem direcionar o raciocínio diagnóstico em outros, sendo este um importante exame complementar a ser indicado em casos de equinos com alterações gastrintestinais inespecíficas. / The purpose of this study was to asses the rectal biopsy techique in horses and the histopathological changes found in the rectal mucosa in clinically healthy animals and in animals with clinical signs of intestinal disorders. 32 horses were divided into three groups: 10 animals clinically healthy (group 1), seven animals with gastrointestinal disorders with an established diagnosis (group 2) and 15 animals with nonspecific clinical manifestations of the gastrointestinal tract (group 3). The horses in group 1 had two biopsies, the second biopsy was performed 48 hours after the first. Rectal biopsies were performed on the animals station, using alligator biopsy forceps. The samples of rectal mucosa were stained with hematoxylin end eosin (HE), alcian blue PAS pH 2.5% and toluidine blue. In group 1, no significant differences between the first and second biopsy were observed, but three horses showed small changes that may result from rectal palpation. In the first evaluation, seven animals of this group showed a similar pattern, establishing a standard of normality for histological rectal mucosa: Surface epithelial preserved; crypts of uniform length, diameter and perpendicular arrangement to the surface with acid mucins strongly dominated over neutral mucins in the goblet cell population; intraepithelial lymphocytes in the surface of the epithelium with sparse population of approximately 15 cells per stretch of 100 epithelial cells; sparse individual lymphocytes, plasma cells and eosinophils infiltrating the lamina propria and submucosa. The other three horses in this group had an increase in the intensity of inflammatory cells (mild to moderate in intensity of lymphocytes and plasma cells in the lamina propria and submucosa, and moderate intensity of eosinophils in the submucosa). The horses in group 2, all with colic syndrome, showed the following pathological changes: simple lymphocyticplasmacytic proctitis (4/7) and eosinophilic proctitis (1/7). In group 3 (12 horses with chronic diarrhea and three with progressive weight loss), only one animal showed rectal mucosa with normal histology. It was observed in the other animals: simple lymphocytic-plasmacytic proctitis (6/15), erosive proctitis (3/15), lymphocyticplasmacytic proctitis with increased neutrophils (2/15), eosinophilic proctitis (2/15), lymphocytic-plasmacytic proctitis with increased neutrophils and eosinophils (1/15) and atypical lymphocytes infiltration/lymphoma (1/15). It was concluded that: the rectal biopsy technique evaluated is effective and safe; although some histological changes can be observed in the rectal mucosa of clinically healthy horses, whether or not caused by rectal palpation, there is a normal range that should be used to the evaluation of horses with gastrointestinal disorders; only in some cases the histological changes found in the rectal mucosa in horses allow a definitive diagnosis, but they can lead to a diagnostic logic in others, which is an important complementary test to be indicated in cases of horses with nonspecific gastrointestinal disturbances.

INTRODUÇÃO: O objetivo deste estudo foi avaliar prospectivamente os anticorpos anti-HLA após o transplante renal e associar estes achados com episódios de rejeição aguda, marcação por C4d e sobrevida do enxerto. MÉTODOS: Foram avaliados 926 soros de 111 pacientes no primeiro ano pós-transplante ou até a perda do enxerto. Os anticorpos foram analisados por PRA-ELISA (Panel Reactive Antibodies by Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay). Anticorpos anti-HLA doador-específicos foram detectados por provas-cruzadas e caracterizados pelo método de microesferas marcadas com antígenos HLA. Episódios de rejeição aguda foram classificados conforme os Critérios de Banff 97, atualizados em 2003. RESULTADOS: Conforme o PRA-ELISA pós-transplante os pacientes foram classificados em 5 Grupos: Grupo A (n=80): sem evidência de anticorpos pré e pós-transplante; Grupo B (n=8): pacientes com anticorpos de novo; Grupo C (n=5): pacientes sensibilizados que permaneceram com mesmo nível de PRA-ELISA; Grupo D (n=4): pacientes sensibilizados que elevaram o nível de PRA-ELISA e Grupo E (n=14): pacientes sensibilizados que diminuíram o nível de PRA-ELISA durante o primeiro ano pós-transplante. A incidência de rejeição aguda foi de 23,4%. Pacientes dos Grupos B, C e D apresentaram mais episódios de rejeição aguda (respectivamente, 57%; 60% e 100%) que os dos Grupos A (18%) e E (7%), (p<0,001). Rejeições ocorridas no Grupo A foram histologicamente menos severas do que as dos outros Grupos (p=0,03) e com menor incidência de C4d+ (p<0,001). Entre os pacientes com rejeição aguda, 44% deles apresentaram anticorpos no momento da rejeição, sendo que em 90% dos casos esses anticorpos foram doadorespecíficos. Rejeição mediada por células, ou seja, sem anticorpos e com C4d-, ocorreu em 56% dos casos. A incidência global de rejeição mediada por anticorpos (RMA) foi de 11%. A sobrevida do enxerto censurada para óbito foi menor em pacientes com rejeição aguda (p<0,001), especialmente naqueles com anticorpos anti-HLA doador-específicos (p<0,001), com C4d+ (p=0,003) e nos casos de RMA (p<0,003). CONCLUSÃO: Nossos dados sugerem que a monitorização dos anticorpos anti-HLA após o transplante renal pode ser útil no diagnóstico das respostas mediadas por anticorpos e tem implicações em termos de sobrevida do enxerto. / INTRODUCTION: The aim was to follow prospectively anti-HLA antibodies (Abs) after kidney transplantation and to evaluate their association with acute rejection episodes, C4d staining and graft survival. METHODS: We analyzed 926 sera from 111 transplanted patients until graft lost or during 1 year posttransplant. The antibodies were analyzed using Panel Reactive Antibodies by Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay (PRA-ELISA). Donor-specific antibodies (DSA) were detected by crossmatch tests and characterized by single antigen beads. Acute rejections (AR) were classified by Banff 97 criteria, updated in 2003. RESULTS: According to post-transplant PRAELISA the patients were classified in 5 groups: Group A (n=80): no evidence of Abs pre and post-transplant; Group B (n=8): patients with Abs de novo; Group C (n=5): sensitized patients who sustained the same PRA-ELISA levels; Group D (n=4): sensitized patients who increased PRA-ELISA levels and Group E (n=14): sensitized patients who decreased PRA-ELISA levels during the first year. The overall incidence of acute rejection was 23,4%. Patients from Groups B, C and D had more AR (respectively, 57%; 60% and 100%) than patients from Groups A (18%) and E (7%), (p<0.001). Patients from Group A had lower Banff scores than other groups (p=0.03) and lower rates of C4d positivity on AR biopsies (p<0.001). Among patients with AR, 44% of them had antibodies which appeared/increased during the AR episodes, and 90% were DSA. AR were pure cell-mediated (C4d-/Abs-) in 56% of the cases. The overall incidence of antibody-mediated rejection (AMR) was 11%. One-year censored graft survival was lower in patients with AR (p<0.001), specially in those with DSA (p<0.001), C4d+ (p=0.003), and AMR (p<0.003). CONCLUSION: Our data suggest that monitoring of anti- HLA antibodies post-transplantation is an useful tool for the diagnosis of antibody-mediated responses, and has prognostic implications in terms of graft survival.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-04-17T14:54:19Z No. of bitstreams: 1 paulojosegoncalvesdesouza.pdf: 567744 bytes, checksum: 0ace800b9b9c6f29b969d2bc1f9986cc (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-04-18T13:43:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 paulojosegoncalvesdesouza.pdf: 567744 bytes, checksum: 0ace800b9b9c6f29b969d2bc1f9986cc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-18T13:43:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 paulojosegoncalvesdesouza.pdf: 567744 bytes, checksum: 0ace800b9b9c6f29b969d2bc1f9986cc (MD5) Previous issue date: 2016-07-08 / Introdução: O PSA ( antígeno prostático específico ) é a principal ferramenta no rastreamento do Câncer de Próstata. Estudos buscam melhoria no diagnóstico criando combinações do PSA com suas variáveis: PSAlivre/PSAtotal; Densidade do PSA; Velocidade do PSA; associação com a idade do paciente; etnia e hereditariedade para Câncer de Próstata. O diagnóstico do Câncer de Próstata é realizado através da análise do tecido prostático, obtido através da biópsia prostática, guiada por ultrassonografia, sendo considerado o procedimento padrão. O objetivo deste trabalho é avaliar a frequência de Câncer de Próstata em homens: submetidos 18 fragmentos de biópsia prostática e comparar com a positividade se analisados apenas os 12 fragmentos iniciais. Material e método: Entre maio de 2008 a outubro de 2013, foram analisados 216 prontuários de pacientes, submetidos à biópsia prostática com 18 fragmentos, que apresentavam PSAtotal ≥ 2,5ng/ml, PSAlivre/PSAtotal ≤ 19%, densidade PSA ≥ 0,15 ng/ml/cc, com toque retal normal, e ausência de nódulos prostáticos à ultrassonografia transretal. As biópsias prostáticas por agulha foram guiadas por Ultrassonografia transretal e distribuídas da seguinte maneira: 3 fragmentos base direita; 3 fragmentos base esquerda; 3 fragmentos 1/3 médio direito; 3 fragmentos 1/3 médio esquerdo; 3 fragmentos ápice direito e 3 fragmentos ápice esquerdo. Estes foram numerados de 1 a 18 e separados em 2 grupos: grupo 1 com os fragmentos 1 a 12, sendo 2 fragmentos de cada região prostática e o grupo 2 com os fragmentos 13 a 18, sendo 1 fragmento de cada região prostática, cada fragmento foi analisado separadamente. Foi realizada comparação da positividade entre os 18 fragmentos e apenas os 12 iniciais. Os pacientes com diagnóstico de câncer nos 12 fragmentos iniciais foram comparados com aqueles apenas na avaliação de todos os 18 fragmentos com relação aos valores do PSA e volume prostático. Resultados: Foram avaliados 216 homens com idade média de 64 +- 8,0 anos, com extremos de 34 a 90 anos. A incidência de pacientes com Câncer de Próstata em 12 fragmentos foi de 42/216 (19,44%) e em 18 fragmentos a incidência foi de 58/216 (26,85%); com aumento de 38% na capacidade de detecção, o que nos revela 7,45% a mais de tumores. Ao compararmos os pacientes que apresentaram positividade da biópsia já nos 12 primeiros fragmentos (42 pacientes), com aqueles com positividade apenas na avaliação de todos os 18 fragmentos (16 pacientes), verificamos que: os pacientes com positividade apenas com 18 fragmentos apresentaram maior valor de PSA e próstata maiores. O que leva a consideração que pacientes com próstata maiores e maiores valores de PSA se beneficiariam de um maior número de fragmentos. Conclusões: A análise de 18 fragmentos de biópsia de próstata em relação a 12 fragmentos, mostrou aumento de positividade na detecção de câncer de próstata e estes pacientes tiveram benefício com o aumento do número de fragmentos e apresentaram maior PSA e maior volume de próstata. / Introduction: PSA (Prostate-Specific Antigen) is the main tool for screening for prostate cancer, and studies now seek to improve the diagnosis by creating combinations of PSA with its variables, free/total PSA, PSA density, PSA velocity, and an association with the patient's age, ethnicity and heredity for prostate cancer.The diagnosis of prostate cancer is achieved by the analysis of prostatic tissue obtained by prostate biopsy guided by ultrasound, and it is considered the standard procedure. The objective of this study was to evaluate prostate cancer frequency in men undergoing prostate biopsy of 18 fragments and to compare that with positivity, when only the first 12 fragments were analyzed. Materials and methods: from May 2008 to October 2013, 216 medical records of patients undergoing prostate biopsy that had total PSA between 2.5 and 10 ng/ml, free/total PSA ≤ 19%, PSA density ≥ 0.15 ng/ml/cc3 with normal digital rectal exam and absence of prostate nodules of trans rectal ultrasonography were analyzed. The trans rectal ultrasound guided biopsies involving using needles were distributed as follows:3 right base fragments, 3 left base fragments, 3 1/3 right mid fragments, 3 1/3 left mid fragments, 3 right apex and 3 left apex fragments. These fragments were numbered from 1 to 18 and separated into 2 groups: Group 1 - 1 to 12, with two fragments of each prostatic region - and Group 2 - 13 to 18, with one fragment from each prostatic region (each fragment being analyzed separately).Positive comparison was made between the 18 fragments and only the first 12.Patients diagnosed with cancer in the first 12 fragments were compared with those for which all 18 fragments were analyzed regarding the values of PSA and prostate volume. Results: 216 men with mean age of 64 + - 8.0 years, with extremes 34-90 years were evaluated. The prevalence of patients with prostate cancer in 12 fragments was 42/216 (19.44%), and in 18 fragments it was 58/216 (26.85%); with an increase of 38% in the detection capacity, which shows 7.45% more tumors. When comparing the patients who had positive biopsy in the first 12 fragments (42 patients) with those with positivity only in the evaluation of all 18 fragments (16 patients), it was found that patients with positivity only in the 18 fragments showed higher PSA value and larger prostates. This leads to consider that patients with larger prostates and higher PSA values would benefit from a greater number of fragments. Conclusions: the analysis of 18 prostate biopsy samples compared to 12 fragments showed a positive increase in prostate cancer detection. Also, the patients who were benefited from the increase in the number of fragments had higher PSA and larger prostate volume.

Orientadores: Luiz Carlos Zeferino, Fernando Carlos de Landér Schmitt / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-19T10:11:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alvarenga_CesarAugusto_D.pdf: 4979947 bytes, checksum: 8da78ad01d29e47c7c97bb4d231ee04b (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A maioria dos carcinomas invasivos da mama são classificados como carcinoma ductal invasivo, sem outras especificações (CDI-SOE), enquanto que cerca de 25% são definidos como tipos especiais histológicos (TEH). Esses TEH de carcinomas da mama são categorizados em pelo menos 17 entidades patológicas distintas. Como a maioria dos estudos realizados na literatura em relação à classificação molecular (luminais A e B, sobre expressão de HER2, "basal-like") tenham utilizado somente CDI-SOE e lobulares invasivos, um estudo com mais TEH seria necessário. A CK19 pode ser utilizada como método de avaliação do linfonodo sentinela através de uma técnica molecular chamada de OSNA (amplificação de ácido nucléico de um passo). A expressão de sua positividade foi avaliada somente nos carcinomas ductais, lobulares, medulares e de pequenas células. Realizado tissue microarray (TMA) no IPATIMUP (Porto-Portugal) de 157 casos selecionados dos arquivos do Instituto de Patologia de Campinas. Obtido um total de 121 e 116 casos no TMA do perfil molecular e da CK19, respectivamente, estes incluíram carcinomas tubulares, mucinosos, papilares encapsulados e invasivo, lobulares, micropapilares, medulares, metaplásicos, apócrinos e mistos. Foram utilizados marcadores imunoistoquímicos tais como: RE, RP, RA (somente nos apócrinos), HER2, Ki67, P-caderina, CK5, EGFR e p63 para classificá-los quanto à classificação molecular e CK19 para avaliar sua expressão na mama antes da realização da técnica de OSNA em linfonodo sentinela. Tubulares, papilares e mucinosos foram todos luminais A e B, dado semelhante ao perfil de expressão genética; medulares e metaplásicos foram quase todos "basais-like" (76.2% e 90%, respectivamente), enquanto que ao nível transcriptômico, todos os casos pertencem ao subtipo "basallike"; micropapilares foram luminais A e B e sobre-expressão de HER2, sendo que ao nível transcriptômico são praticamente todos luminais B devido à alta expressão de HER2; apócrinos foram os mais heterogêneos de todos com casos luminais A e B, sobre-expressão de HER2 e "basais-like", dado diferente ao nível transcriptômico que revela o subtipo "molecular apócrino" (RE-/RA+/HER2- ou +). O risco relativo do Ki67 aumentou entre os TEH, sendo que o carcinoma medular teve 110 vezes mais risco de aumento do Ki-67 em relação ao tubular. A CK19 foi expressa em 98.2% dos TEH de carcinomas da mama, dado idêntico ao estudo anterior de Chu et al, sendo que sua positividade aumentou nos casos em que o bloco de parafina foi inteiramente estudado, pois sua marcação foi focal em muitos casos avaliados no TMA. Isso pode produzir eventualmente resultados falso-negativos nas "corebiopsies" / Abstract: Most invasive breast carcinomas are classified as invasive ductal carcinoma, not otherwise specified (IDC-NOS), while approximately 25% are defined as special histological types (HST). These HST of breast carcinomas are categorized into at least 17 distinct pathological entities. Most studies in the literature regarding the molecular classification (luminal A and B, HER2- overexpression, "basal-like") were evaluated only in IDC-NOS and in lobular invasive carcinoma, a study with more HST of breast carcinoma would be necessary. The CK19 can be used as a method of evaluation of sentinel lymph node using a molecular technique called OSNA (one step acid nucleic amplification). The expression of CK19 positivity was assessed only in ductal, lobular, medullary and small cell carcinomas. It was performed tissue microarray (TMA) in IPATIMUP (Porto-Portugal) of 157 cases selected from the archives of the Instituto de Patologia de Campinas, a private laboratory. A total of 121 and 116 TMA cases in the molecular profiling and in the CK19 studies was obtained, respectively, including tubular, mucinous, papillary encapsulated and invasive, lobular, micropapillary, medullary, metaplastic, apocrine and mixed carcinomas. It was used immunohistochemical markers such as ER, PR, RA (only in apocrine carcinomas), HER2, Ki67, P-cadherin, CK5, EGFR and p63 to classify them as the molecular classification and as the CK19 expression in the breast before performing the technique of OSNA in sentinel lymph node. Tubular, papillary and mucinous were all luminal A and B, as similar as the geneexpression profiling; medullary and metaplastic were almost all "basal-like" (76.2% and 90%, respectively), while at transcriptome level, all cases belong to subtype "basal-like"; micropapillary was luminal A and B and HER2- overexpression and in the transcriptomic level was virtually all luminal B due to high expression of HER2; apocrine was the most heterogeneous tumours of our study with luminal A and B, HER2-overexpression and "basal-like" cases. This data was different from transcriptomic level that revealed the "molecular apocrine" subtype (RE-/ RA+/ HER2- or +). The relative risk of Ki67 increased between HST, because medullary carcinomas had 110 times more risk of increased Ki-67 than tubular carcinomas. The CK19 was expressed in 98.2% of HST of breast carcinomas, data identical to the Chu et al study, and the positivity increased in cases where the entire paraffin block had been fully studied, because its labeling was focal in many cases evaluated on TMA. This CK19 focal expression can produce false-negative results in the breasts "corebiopsies" / Doutorado / Oncologia Ginecológica e Mamária / Doutor em Ciências da Saúde

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:28:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3535_1.pdf: 4497210 bytes, checksum: aa2e672b4d17f24b8c8446cc122032b6 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / A hipomelanose macular progressiva é uma dermatose caracterizada por máculas hipocrômicas localizadas principalmente em tronco, que tendem a confluir na linha média. Em pacientes melanodérmicos, as lesões contrastam com a pele normal prejudicando a auto-estima dos pacientes. Sua etiologia permanece especulativa, sendo sugerida a participação do Propionibacterium acnes, um membro da flora cutânea normal. Objetivo: Avaliar a presença do Propionibacterium acnes na pele lesional e não lesional de pacientes com hipomelanose macular progressiva, por meio da reação em cadeia da polimerase em tempo real quantitativa e cultura bacteriológica de fragmento de pele e, determinar o ponto de corte para o número de cópias de genoma de Propionibacterium acnes, como marcador de sua positividade na pele lesional de pacientes com hipomelanose macular progressiva, utilizando a reação em cadeia da polimerase em tempo real quantitativa e considerando a cultura como padrão-ouro. Pacientes e Métodos: Estudo exploratório, observacional com grupo de comparação foi realizado envolvendo 36 pacientes, atendidos nos ambulatórios de dermatologia do Hospital Universitário Oswaldo Cruz, Recife, Pernambuco, Brasil, entre março e maio de 2008. Todos os pacientes foram submetidos a exame sob luz de Wood, pesquisa micológica e biópsias de pele lesional e não lesional do dorso. Os fragmentos de biópsia de pele foram submetidos a exame histopatológico, cultura bacteriológica e reação em cadeia da polimerase em tempo real quantitativa, utilizando oligoiniciadores específicos para a região 16S do RNA ribossomal do Propionibacterium acnes. A pele lesional foi comparada a não lesional quanto à positividade da reação em cadeia da polimerase em tempo real quantitativa e da cultura, considerada padrão-ouro. Com o programa Statistical Package for Social Sciences, versão 12.0, procedeu-se à determinação de associação com os testes de Wilcoxon e de McNemar, em nível de significância de 0,05, e do ponto de corte com a curva ROC para valores máximos. Resultados: Houve predomínio significante do Propionibacterium acnes na pele lesional, comparada com a pele não lesional (p<0,001), demonstrado por cultura bacteriológica e reação em cadeia da polimerase em tempo real quantitativa. O ponto de corte para o número de cópias de genoma de Propionibacterium acnes como marcador de sua positividade na pele lesional de pacientes com hipomelanose macular progressiva igualou-se a 1.333, com sensibilidade de 87,9% e especificidade de 100,0%. Conclusão: Apesar do Propionibacterium acnes ser um saprófita do folículo pilossebáceo, ele esta mais presente em pele lesional dos pacientes com hipomelanose macular progressiva, sugerindo sua participação no desenvolvimento dessa dermatose