Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-graduação em Farmacologia / Made available in DSpace on 2012-10-22T05:43:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 214258.pdf: 1297635 bytes, checksum: 49a0f749ba4797216ae231728523905a (MD5) / A influência da genética nas características relacionadas com os transtornos de ansiedade tem sido amplamente demonstrada tanto em humanos, quanto em modelos animais. No entanto, a comparação de linhagens de roedores em testes comportamentais de ansiedade/emocionalidade pode apresentar resultados não-reproduzíveis entre diferentes estudos e laboratórios, mesmo quando os genótipos são mantidos constantes. Então, além de se estudar os fatores genéticos, a identificação de fatores ambientais relevantes e as interações genótipo-ambiente parecem ser pontos importantes para aumentar a reprodutibilidade dos estudos genéticos e neurocomportamentais. Neste estudo, nós objetivamos avaliar a influência de fatores ambientais e genéticos sobre medidas comportamentais relacionadas à ansiedade e a possível relação entre modelos animais de ansiedade e alcoolismo. Para isso nós testamos um modelo genético animal (ratos das linhagens LEW e SHR) em: (a) três testes comportamentais de ansiedade, com algumas variações no ambiente de laboratório ou na situação de teste, (b) um protocolo de ingestão espontânea de etanol e (c) medidas de expressão gênica em duas regiões do cérebro relacionadas com comportamentos de ansiedade e alcoolismo. Além disso, um segundo modelo genético (ratos Floripa H e L) foi avaliado nos mesmos testes comportamentais de ansiedade e consumo de etanol. Os resultados mostraram que as linhagens LEW e SHR apresentaram diferenças relacionadas à ansiedade no teste da caixa branca/preta (CBP), tanto na fase clara como na fase escura do ciclo circadiano, e no labirinto em cruz elevado (LCE), tanto no teste como no reteste 24h depois, com os animais LEW parecendo mais "ansiosos" do que os animais SHR. Nós também mostramos que a posição da gaiola no biotério e o estado comportamental (sono/vigília) do animal logo antes do teste têm influência nos resultados dos testes comportamentais de ansiedade, com algumas destas influências sendo genótipo-dependentes. Foi ainda demonstrado que a linhagem considerada a mais "ansiosa" (LEW) no nosso modelo genético, foi a que consumiu maiores quantidades de etanol quando este foi oferecido em livre escolha a concentrações de 6% e 10%. Além disso, foram encontrados menores níveis de expressão gênica de NPY e maiores níveis de expressão gênica de receptores 5-HT1A no hipocampo, mas não no hipotálamo, dos ratos LEW em relação a ratos SHR. Outro gene investigado neste estudo, Grin2b, não diferiu no hipocampo ou no hipotálamo entre os ratos LEW e SHR. Finalmente, o protocolo de auto-administração de etanol aplicado às linhagens Floripa H e L sugeriu novamente uma correlação positiva entre os comportamentos de "ansiedade" e o consumo de álcool, pois a linhagem Floripa L, que foi a mais "ansiosa" neste modelo genético, também foi a que ingeriu maiores quantidades de etanol. Em conclusão, os resultados deste trabalho: (a) sugeriram que o teste e o reteste do LCE podem compartilhar componentes psicológicos comuns, (b) reforçaram as linhagens LEW e SHR como um importante modelo genético para o estudo da ansiedade, (c) mostraram que, apesar de sua robustez, as diferenças genéticas entre ratos LEW e SHR podem ser influenciadas por alguns detalhes do ambiente de laboratório, (d) sugeriram uma correlação positiva entre índices experimentais de ansiedade e consumo de etanol e (e) reforçaram a hipótese de participação do NPY e dos receptores 5-HT1A do hipocampo nas variações genéticas nestes comportamentos.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:13:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissRTTO.pdf: 5353289 bytes, checksum: 798a4d68f73c160d83e5820787d100b6 (MD5) Previous issue date: 2006-10-17 / This work is a critical analysis of Walter Freeman´s neurodynamic model in several aspects, especially the consciousness as an order parameter that constraints brain dynamics. According to our research, this proposal is not only based in empirical data, but also in ideas as: 1) mathematical metaphor valorization to explain the nature and man; 2) the consciousness as an integrative rational action that limits and selects local fluctuations. We found some gaps in the model, as the author himself admits, and also other interpretations for some empirical results. Therefore, the meaning of neurodynamic patterns found by Freeman remains open. His emergentism is defined by dualism and reductionism denial, and is based in circular causality between whole and parts. Motor cause (and material, we suppose) from the base to the top, and formal and final cause from top to base. It seems to be a pragmatic solution for the mind-brain problem, in order to make possible a wider scientific acceptance of mind effects on the body, contributing to a paradigm change in neuroscience. For Eliasmith, the role of non-linear dynamics would be description, discussion and analysis of complex cognitive systems, as brain. The interpretation of information and dynamic patterns found, however, is not evident nor consensual. This work corroborates such conclusions in particular case of Walter Freeman's model, still highlighting a non scientific role for his work, in the sense of valuing the systemic effects of consciouseness on the body. / Este trabalho é uma análise crítica do modelo neurodinâmico de Walter Freeman em seus diversos aspectos, em especial a concepção da consciência enquanto um parâmetro de ordem que restringe a dinâmica cerebral. Segundo nossa pesquisa, esta concepção de consciência fundamentase não só em dados empíricos, mas em pressupostos como: 1) a valorização da metáfora matemática para explicar a natureza e o homem; 2) a consciência enquanto ação racional integradora, que limita e seleciona as flutuações locais. Foram encontradas algumas lacunas no modelo, como o próprio autor admite, e outras interpretações para alguns resultados empíricos. Assim, o significado dos padrões neurodinâmicos encontrados pelo autor permanece em aberto. O emergentismo de Freeman define-se pela negação do dualismo e do reducionismo, fundamentandose na causalidade circular entre o todo e as partes. Causa motora (e material, entendemos) da base para o topo, e causas formal e final do topo para a base. Consideramos tratar-se de uma solução pragmática para o chamado problema mente-cérebro, a fim de possibilitar uma maior aceitação científica dos efeitos da mente sobre o corpo, contribuindo para uma mudança de paradigmas na neurociência. Para Eliasmith, o principal papel da dinâmica não-linear seria a descrição, discussão e análise de sistemas cognitivos complexos, como o cérebro. A interpretação das informações e padrões dinâmicos encontrados, contudo, não é evidente nem consensual. Este trabalho corrobora tais conclusões no caso particular do modelo de Walter Freeman, destacando, ainda, um papel não científico para seu trabalho, no sentido de valorizar os efeitos sistêmicos da consciência sobre o corpo.

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-07Bitstream added on 2015-04-09T12:48:19Z : No. of bitstreams: 1 000815774.pdf: 990933 bytes, checksum: ed44c3eb929aac22f3a32e14905d2c3d (MD5) / A tomografia computadorizada do encéfalo faz-se necessária como parte integrante do diagnóstico de lesões do sistema nervoso central, contudo é um exame restrito, já que se trata de uma técnica relativamente recente, especialmente na medicina veterinária do Brasil. Neste trabalho foram utilizados seis gatos domésticos, sem raça definida, machos ou fêmeas, com idade entre um e cinco anos, apresentados ao Hospital Veterinário da UNESP de Jaboticabal para exame de tomografia computadorizada sem sinais clínicos de desordens do sistema nervoso central. Dois animais com indicação de eutanásia por afecção sem relação ao sistema nervoso foram incorporados a este estudo. A proposta constituiu-se em estabelecer a descrição anatômica detalhada de imagens tomográficas do encéfalo normal de felinos, utilizando como referências imagens anatômicas de cortes transversais do encéfalo corado e peça craniana, com espessuras semelhantes aos planos das imagens da tomografia computadorizada. Foram realizados exames de tomografia computadorizada com e sem contraste iodado intravenoso dos animais vivos. Dos animais que sofreram eutanásia, um o encéfalo foi removido de imediato e conservado em formaldeído 10% para posterior realização de cortes transversais na espessura aproximada de 4mm e coloração pela técnica de Barnard, Robert e Brown. A cabeça do outro animal foi desarticulada em região atlanto-occiptal e congelada a -20º C. Em seguida, foi cortada transversalmente em espessura aproximada de 5mm. A descrição das estruturas anatômicas visibilizadas à tomografia servirá como guia, uma vez que permitirá transcrever com relativa precisão a região encefálica acometida por uma lesão, e assim correlacioná-la com o sinal clínico do paciente, proporcionando informações adicionais e consequente aprimoramento no exercício da clínica médica e cirúrgica nesta espécie animal / Computed tomography of the brain is necessary as part of the diagnosis of lesions of the central nervous system, however, is a restricted exam, since it is a relatively recent technique, especially in veterinary medicine in Brazil.In this study we used six domestic cats, males or females aged between one and five years, who came to the Veterinary Hospital of UNESP Jaboticabal for Computed Tomography (CT) examination without clinical signs of central nervous system disorders. Two animals euthanized stating condition unrelated to the nervous system were incorporated into this study. The proposal consisted in establishing detailed anatomical description of tomographic images of normal brain of cats, using as reference anatomical images of cross sections of the stained brain and cranial part, with thicknesses similar to the planes of the CT images. CT examinations were performed with and without intravenous iodinated contrast media for live animals. With one euthanized animal, the brain was removed and immediately preserved in 10% formalin for later achievement in cross-sectional thickness of approximately 4mm and staining technique of Barnard, and Robert Brown. The head of another animal was disarticulated in Atlanto-occipital region and frozen at -20ºC. Then sliced with thickness of about 5mm. The description of visualized anatomical structures using tomography is useful as a guide and allows transcribing with relative accuracy the brain region affected by an injury, and thus correlating it with the clinical symptoms of the patient, providing additional information and consequent improvement to veterinarians during the course of surgical clinic to this species

Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-21Bitstream added on 2015-01-26T13:30:38Z : No. of bitstreams: 1 000795302.pdf: 290369 bytes, checksum: 58bda7f024f4cce4b41311ea8576a046 (MD5) / Introdução: Não está claro na literatura se os valores do índice bispectral (BIS) e da taxa de supressão do traçado de eletroencefalograma (TS), estão relacionados à disfunção cognitiva pós-operatória (DCPO). Objetivo: Avaliar os valores de BIS e TS e sua relação com a DCPO após cirurgia de revascularização do miocárdio (CRM) em pacientes submetidos a anestesia com sevoflurano (SEVO) guiada pelo BIS. Tipo de estudo: Observacional prospectivo. Local do estudo: Hospital de ensino. Pacientes: Noventa pacientes adultos programados para CRM com ou sem circulação extra-corpórea (CEC). Intervenções: A anestesia foi induzida com propofol, remifentanil e atracúrio e mantida com concentrações expiradas de SEVO (ETSEVO) em valores de concentração alveolar mínima (CAMSEVO) adaptada à idade, tendo como alvo valores de BIS de 40-60. O Mini-Exame do Estado Mental (MEEM) para avaliação cognitiva dos pacientes foi aplicado na admissão hospitalar e três meses após a cirurgia. Variáveis estudadas: Os valores de BIS, TS, ETSEVO e CAMSEVO foram registrados a cada 5 minutos durante o procedimento. Redução de um desvio padrão (DP) ou mais no MEEM basal foi definida como DCPO. Resultados: A proporção de DCPO foi de 40%. Os pacientes foram alocados em dois grupos: com (n = 36) ou sem DCPO (n = 54). Não houve diferença significativa na incidência de DCPO entre os pacientes que foram submetidos à CRM com ou sem CEC (p = 1,0). Quanto às características dos pacientes, somente os valores de índice de massa corporal (IMC) foram maiores no grupo sem DCPO (p = 0,009). Valores médios de BSR, ETSEV e MACSEV foram maiores no grupo sem DCPO (p < 0,05). Em uma análise multivariada, valores menores de TS (Razão de Chances-RC 0,008, Intervalo de Confiança-IC 95% [0,001-0,53], p = 0,02), CAMSEVO (RC 0,001, IC 95% [0,001-0,08], p = 0,008), ETSEVO (RC 0,03, IC 95% [0,002-0,66], p = 0,02) e ... / Background: It is still controversial whether bispectral index (BIS) and burst suppression ratio (BSR) values are related to postoperative cognitive dysfunction (POCD). OBJECTIVE: To evaluate BIS and BSR values and their relation to POCD after coronary artery bypass grafting (CABG) surgery in patients undergoing BIS-guided sevoflurane (SEVO) anaesthesia. DESIGN: Prospective, observational study. SETTING: Teaching hospital. PATIENTS: Ninety adult patients scheduled for on- or off-pump CABG surgery. INTERVENTIONS: Anaesthesia was induced with propofol, remifentanil and atracurium and maintained with end-tidal SEVO (ETSEVO) at age-adapted minimum alveolar concentration (MACSEVO) targeting BIS values of 40-60. Mini-Mental State Examination (MMSE) for cognitive assessment of the patients was applied on hospital admission and at 3 months after surgery. MAIN OUTCOME MEASUREMENTS: BIS, BSR, ETSEVO and MACSEVO values were recorded every 5 minutes during the procedure. A decrease of 1 standard deviation or more from the basal MMSE was defined as POCD. RESULTS: The POCD proportion was 40%. The patients were allocated into two groups: with POCD (n=36) or no POCD (n=54). There was no difference of POCD incidence between patients who were submitted to on- versus off-pump CABG (P=1.0). With regard to the patient’s characteristics, only body mass index (BMI) was higher in the no-POCD group (P=0.009). Mean BSR, ETSEVO and MACSEVO values were higher in the no-POCD group (P<0.05). In a multivariable analysis, lower values of BSR (odds ratio-OR 0.008; 95%CI [0.001-0.53]; P=0.02), MACSEVO (OR 0.001; 95%CI [0.001-0.08]; P=0.008), ETSEVO (OR 0.03; 95%CI [0.002-0.66]; P=0.02) and BMI (OR 0.82; 95%CI [0.70-0.96]; P=0.01) were independent predictors of risk for POCD incidence. BIS values did not influence POCD incidence (OR 1.0; 95%CI [0.95-1.11]; P=0.40). CONCLUSION: BIS-guided SEVO anaesthesia titrated to a range between 40 and 60 is not a predictive factor ...

O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos do enriquecimento ambiental (EA) sobre a memória e a morfologia hipocampal, estriatal e cortical, estado oxidativo e níveis do fator neurotrófico derivado do encéfalo (BDNF), em ratos Wistar submetidos à hipóxia-isquemia (HI) neonatal. No capítulo 1 foram examinados os efeitos do EA sobre o prejuízo na memória observado no labirinto aquático de Morris (LAM) e sobre a atrofia hipocampal e cortical em animais hipóxicos-isquêmicos adultos. Ratos Wistar machos, no 7º dia pós-natal (DPN) foram submetidos ao modelo de Levine-Rice de HI neonatal, no qual a artéria carótida comum direita é ocluída permanentemente e, na seqüência, os animais foram mantidos em uma atmosfera hipóxica (90 min, 8% O2-92% N2). Duas semanas após a HI, os animais foram estimulados em um ambiente enriquecido (1h/dia, por 9 semanas). No LAM, os animais HI mantidos em ambiente padrão apresentaram pior performance quando comparados aos grupos CT e o grupo HI enriquecido teve mesmo comportamento que os grupos CT. Uma significante atrofia hipocampal e cortical foi identificada nos animais hipóxico-isquêmicos, porém, nesta análise, o EA não resultou em proteção significativa. O capítulo 2 teve como intuito investigar se a manutenção em ambiente enriquecido precocemente (8º-30 DPN) seria efetiva na recuperação da atrofia hipocampal pela HI, e, se os efeitos cognitivos vistos no EA diário seriam extensivos a outro tipo de memória e, também a outros períodos do desenvolvimento. Ratos e ratas Wistar machos foram submetidos à HI (conforme descrito acima) e, no dia seguinte, foram colocados em um ambiente enriquecido. Na seqüência, a memória de reconhecimento, no teste de reconhecimento de objetos e a memória espacial no LAM são analisadas. Na vida adulta, os animais foram submetidos a mais uma sessão experimental no LAM. O déficit cognitivo observado na memória de reconhecimento nos animais HI foi revertido pela estimulação. Porém, o prejuízo na memória espacial foi parcialmente revertido pelo EA; a memória de trabalho nas fêmeas, no período da adolescência, foi mais claramente beneficiada por este efeito. E, corroborando os resultados do primeiro experimento, a HI resultou em dano tecidual ao hipocampo e também ao estriado, sem indicação de efeito significativo pela estimulação. O capítulo 3 teve como objetivo investigar se a modulação do estado oxidativo e os níveis de BDNF cerebrais podem estar envolvidos no efeito neuroprotetor cognitivo do EA em animais adultos submetidos à HI. Ratos Wistar machos foram utilizados neste experimento; os procedimentos de HI e EA foram os mesmos do primeiro experimento. Os animais foram sacrificados 24 horas após o término do período de enriquecimento (85º DPN), quando hipocampo e córtex foram dissecados para a posterior determinação dos parâmetros de estresse oxidativo (quantificação de radicais livres, dano em macromoléculas e atividade da enzima superóxido dismutase - SOD) e dos níveis de BDNF. Os resultados demonstraram uma diminuição na quantidade de radicais livres no hipocampo esquerdo dos animais HI e um aumento destes níveis no córtex direito; e, também, um aumento na atividade da SOD no hipocampo direito dos animais HI e uma diminuição desta atividade no hipocampo esquerdo nos animais não estimulados. Além disso, os níveis de BDNF foram aumentados no hipocampo dos animais HI mantidos em ambiente padrão. Estes resultados sugerem que o efeito neuroprotetor cognitivo do EA diário pode não ser dependente da expressão de BDNF nem do estado oxidativo do hipocampo e córtex. / This study was undertaken to investigate the environmental enrichment (EE) effects over memory function and hippocampus and cortex morphology, oxidative status and brain-derived neurotrophic factor (BDNF) levels, consequent to neonatal hypoxiaischemia (HI) in Wistar rats. The objective of chapter 1 was to examine, in adulthood, the effects of daily EE on memory deficits in the Morris water maze (MWM) and hippocampal and cerebral damage, caused by neonatal HI. Male wistar rats at the 7th postnatal day were submitted to the Levine-Rice model of neonatal HI, comprising permanent occlusion of the right common carotid artery and a period of hypoxia (90 min, 8%O2-92%N2). Two weeks after the HI event, animals were stimulated by the enriched environment (1h/day for 9 weeks). In the MWM, non-stimulated HI animals had worse performance than controls and HI-enriched rats showed memory performance as good as that of controls. There was a reduction of both hippocampal volume and cortical area, ipsilateral to arterial occlusion, in HI animals; EE did not affect these morphological measurements, despite its clear cognitive neuroprotective effect. The chapter 2 investigated whether early continuous housing in an enriched environment would be effective in recovering hippocampal atrophy consequent to the neonatal HI, as well as if the benefits of continuous EE would extending to other memory types, both in adult and adolescent female and male rats. As described above, animals were submitted to HI and, starting 1day after the event, they were housed in an enriched environment (8th-30th PN day). Performances of animals in the novel-object recognition were assessed in the adolescence period and in the MWM task in the adolescence and, again, in adulthood. Cognitive deficits arising after neonatal HI in the novel-object recognition test were completely recovered by the environmental stimulation, in animals of both genders. However, spatial memory impairment in the MWM was partially prevented by EE; the effect was observed especially in female adolescent rats on the working memory. Corroborating the findings of the first experiment, there was no enrichment effect over hippocampus volume and striatum area. These data indicate that early housing in an enriched environment recovered performance in the object recognition task and, in adolescent females, in the working memory spatial task after a neonatal hypoxicischemic event. No effects of enrichment were revealed in adult animal performance nor in tissue atrophy of hippocampus and striatum consequent to HI. The chapter 3 was designed to investigate whether the modulation of brain oxidative status and/or BDNF content in adulthood are involved in functional neuroprotection caused by EE after neonatal HI. Protocols of the HI and EE utilized in this experiment were the same as of the first experiment. Male rats were sacrificed 24 hours after the enrichment period, i.e., at PN day 85. We have determined BDNF levels and several oxidative stress parameters, specifically the free radicals levels, macromolecules damage and superoxide dismutase (SOD) activity, in hippocampus and frontal cortex samples. It was found a decrease in free radical content in the left hippocampus of HI animals and an increase in non-stimulated rats in the right cortex; also, increased SOD activity in the right hippocampus of HI and a decrease of enzyme activity in the left hippocampus of stimulated groups were found. Moreover, BDNF levels were increased in the hippocampus of the non-stimulated HI group. These results suggest that the neuroprotective cognitive effect of daily environmental enrichment may not be dependent on BDNF expression nor on the oxidative status in hippocampus and cortex.

A cafeína é o psicoestimulante mais consumido no mundo, cujo alvo molecular é o bloqueio não-seletivo dos receptores de adenosina A1 e A2A. A administração de cafeína parece melhorar o desempenho cognitivo em humanos e animais, embora esse efeito tenha sido mais bem caracterizado em animais do que em humanos e, sugere-se que parte desses efeitos seja pelo bloqueio preferencial dos receptores A2A e não dos receptores A1. Recentemente, com o auxílio de técnicas de eletrofisiologia relatou-se a participação dos receptores de adenosina na transmissão sináptica pelo fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF). O BDNF faz parte da família das neurotrofinas e sua sinalização em seus receptores do tipo tirosina cinase B (TrkB) é fundamental para os processos de aprendizado e memória. Neste estudo procurou-se primeiramente verificar se a administração aguda de cafeína ou ao longo da vida adulta até o envelhecimento poderia melhorar o desempenho de camundongos expostos à tarefa de reconhecimento de objetos. A grande maioria dos estudos feitos com animais para avaliar os efeitos da cafeína até o presente momento utilizou tarefas com componentes aversivos ou estímulos de reforço. A tarefa de reconhecimento de objetos consiste em analisar a habilidade natural dos animais em reconhecer uma novidade em um ambiente que foi previamente apresentado. A tarefa de reconhecimento de objetos consiste em analisar a habilidade natural dos animais em reconhecer uma novidade em um ambiente que foi previamente apresentado. Além disso, a análise do imunoconteúdo do BDNF e do seu receptor TrkB foi realizada com o intuito de relacionar os efeitos comportamentais com possíveis alterações nessas proteínas que estão envolvidas em processos de aprendizado e memória. Na tarefa de reconhecimento de objetos, camundongos adultos (3-4 meses de idade) tratados agudamente com cafeína apresentaram melhores índices de reconhecimento e maiores níveis de BDNF e TrkB do que seus respectivos controles. Em camundongos, que foram tratados com cafeína durante doze meses (dos seis aos dezoito meses de idade), foi verificado um efeito preventivo ao declínio cognitivo decorrente da idade, pois os animais aos 18 meses de idade tratados com cafeína durante a vida adulta apresentaram melhor desempenho na tarefa de reconhecimento de objetos e ainda semelhante ao grupo de camundongos adultos. Este dado mostra que a cafeína melhora a memória de reconhecimento, sendo este efeito relacionado a um aumento no imunoconteúdo hipocampal de BDNF e TrkB. A cafeína preveniu o aumento do imunoconteúdo de BDNF e TrkB relacionados com a idade. Estes resultados indicam que o consumo de cafeína na idade adulta pode prevenir o declínio da memória de reconhecimento que ocorre com o envelhecimento e este efeito preventivo pode envolver uma diminuição no imunoconteúdo hipocampal de BDNF e TrkB. / Caffeine is one of the most psychostimulants consumed in the world, and its molecular target is the non-selective A1 and A2A adenosine receptors blockade. Caffeine administration seems to improve the cognitive performance in humans and animals, although this effect had been better characterized in animals than in humans, and it was suggested that some of these effects were preferential A2A and not A1 blockade. Recently, electrophysiology studies reported the participation of adenosine receptors in the synaptic transmission by brain-derived neurotrophic factor (BDNF). BDNF is one of neurotrophins family members and its signaling in their tyrosine kinase B (TrkB) receptor type is essential to the learning and memory processes. At the moment, animal studies evaluated the effects of caffeine in tasks with aversive or reinforcement components. This study verified if acute administration of caffeine or throughout adult life to the aging could improve performance in the object recognition task. The object recognition task examines the natural ability of the animals to recognize a novelty in an environment that was previously presented. Furthermore, the analysis of BDNF and its receptor TrkB immunocontent was held with the aim of linking the behavioral effects with possible changes in these proteins that are involved in learning and memory processes. In the object recognition task, adult mice (3-4 months-old) treated acutely with caffeine had better rates of recognition and increased BDNF and TrkB immunocontent than their respective controls. Chronic caffeine treatment (from six to eighteen months-old) was found a preventive effect to age-related cognitive decline. 18 months-old mice treated with caffeine during adulthood showed better performance in object recognition task and yet similar to the adult group. This finding shows that caffeine improves recognition memory, and this effect was related to an increase in the hippocampal BDNF and TrkB immunocontent. Caffeine prevented age-related increase in BDNF and TrkB immunocontent. These results indicate that consumption of caffeine in adulthood may prevent the decline of recognition memory that occurs with aging and this preventive effect may involve a decrease in hippocampal BDNF and TrkB immunocontent.

O presente estudo tem por objetivo investigar a influência da privação dietética de ácidos graxos ω3 no sistema glutamatérgico no hipocampo de ratos Wistar em parâmetros ontogenéticos e relacionados à neuroproteção. Os ratos foram alimentados, desde a gestação até a vida adulta, com duas dietas diferentes: uma dieta contendo ácidos graxos ω3 (grupo controle, C) e outra deficiente nestes ácidos graxos (grupo deficiente, D). Nos experimentos ontogenéticos, foram avaliados os imunoconteúdos das subunidades de receptores glutamatérgicos ionotrópicos do tipo NMDA (NR2 A/B) e AMPA (GluR1), bem como da isoforma alfa da cinase dependente de cálcio e calmodulina do tipo II (αCaMKII). Também foram avaliados a capacidade do glutamatode ligar-se a seus receptores e a captação de [3H]glutamato em fatias de hipocampo. Para investigar o efeito da privação de ácidos graxos ω3 na resposta cerebral frente à injúria isquêmica, fatias de hipocampo foram submetidas à privação de glicose e oxigênio (OGD), um modelo de isquemia in vitro. O grupo D apresentou imunoconteúdo reduzido de todas as proteínas avaliadas aos 02 dias de vida, o que foi sendo normalizado aos 21 dias (exceto pela αCaMKII) e aos 60 dias. O mesmo padrão foi observado na capacidade de ligação do glutamato aos seus receptores. Porém a captação de [3H]glutamato não foi afetada pelas dietas. Nos experimentos de OGD, o grupo D apresentou maior dano celular e uma queda na captação de [3H]glutamato mais acentuada que o grupo controle. Ainda, a privação de ácidos graxos ω3 influenciou a resposta celular anti-apoptótica após OGD, afetando a fosforilação das proteínas GSK3β e ERK1/2, mas não a fosforilação da Akt. Estes resultados sugerem que os ácidos graxos ω3 são importantes para o desenvolvimento do sistema glutamatérgico e para a proteção celular após dano isquêmico, além de ser importante para ativação de rotas de sinalização anti-apoptóticas. / The effect of dietary deprivation of essential omega-3 fatty acids on parameters of the glutamatergic system related to brain ontogeny and neuroprotection was investigated in this study. Rats were fed with two different diets: omega-3 diet (control group) and omega-3 deprived-diet (D group). In ontogeny experiments, it was evaluated the hippocampal immunocontent subunits of the of ionotropic glutamatergic receptor NMDA and AMPA (NR2 A\B and GluR1, respectively) and the alfa isoform of the calcium-calmodulin protein kinase tipe II (αCaMKII), as well as the binding and uptake of [3H]glutamate. To assess the influence of omega-3 fatty acids deprivation on brain responses to ischemic insult, hippocampal slices were submitted to oxygen and glucose deprivation (OGD), a model of in vitro ischemia. The D group showed lower immunocontent of all proteins analyzed at 02 days of life (P2) than the control group, and it was normalized at P21 (except for αCaMKII) and P60. The same pattern was found for [3H]glutamate binding, while [3H]glutamate uptake was not affected. In the OGD studies, the D group showed higher cell damage and stronger decrease in the [3H]glutamate uptake. Moreover, omega-3 deprivation influenced anti-apoptotic cell response after OGD, affecting GSK-3beta and ERK1/2, but not Akt phosphorylation. Taken together, these results suggest that omega-3 fatty acids are important for the glutamatergic development and cell protection after ischemia, and also seem to play an important role on activation of anti-apoptotic signaling pathways.

Os mecanismos envolvidos nas atividades toxicológicas e/ou farmacológicas dos compostos orgânicos de selênio são pouco conhecidos. Os compostos orgânicos de selênio (disseleneto de difenila e ebselen) e organotelúrio (ditelureto de difenila) foram alvo dos trabalhos realizados“in vitro”, neste estudo. Os compostos organocalcogênios apresentaram efeitos diversos sobre o influxo de 45Ca2+ medido em sinaptossomas de cérebro de rato, dependendo das condições e agentes despolarizantes usados. Ebselen, (PhSe)2 e (PhTe)2 alteram a captação de 45Ca2+ de maneira distinta quando expostos a aminopiridina ou KCl. Enquanto (PhTe)2 inibe a captação de cálcio em todas as condições experimentadas, (PhSe)2, apresenta este efeito apenas quando incubado em condições basais ou sob a ação de aminopiridina. Ebselen, por sua vez, aumenta a captação de cálcio em altas concentrações em condições basais e sob a ação de aminopiridina, porém, apresenta efeito inverso quando os sinaptossomas são despolarizados por KCl. Ebselen evitou a inibição da captação de 45Ca2+ “in vitro” provocada por cloreto de mercúrio(HgCl) em sinaptossomas de cérebro de rato em condições basais do ensaio, no entanto, ebselen não afetou a inibição da captação de glutamato “in vitro” por HgCl, indicando que ebselen pode atuar dependendo das proteínas-alvo consideradas.Os compostos de mercúrio, MeHg e HgCl, inibiram a captação de glutamato em córtex cerebral de ratos de 17 dias e ebselen reverteu somente o efeito do MeHg porém, não, o do HgCl. Disseleneto de difenila não alterou os parâmetros avaliados na exposição de ambos os compostos de mercúrio.Os compostos de mercúrio estudados provocaram a morte celular das fatias de córtex, porém, ebselen protegeu as fatias dos efeitos lesivos provocados por MeHg e não pelo HgCl.

Dissertação de Mestrado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, da Universidade do extremo Sul Catarinense, UNESC, para obtenção do título de Mestre em Ciências da Saúde. / O envelhecimento é uma deterioração progressiva de todos os mecanismos homeostáticos acompanhada por declínio cognitivo. Tal fato assume grande importância uma vez que, ao longo das últimas décadas, o aumento da expectativa de vida e, da população idosa representa um aumento na incidência e na prevalência das demências. Recentes avanços da biologia em modelos animais, associados com estudos moleculares e celulares do cérebro, estão começando a elucidar tais mecanismos e seus potenciais papéis no declínio cognitivo. O extrato de Ginkgo biloba (EGb), é muito utilizado para demência e comprometimento cognitivo, principalmente relacionados ao envelhecimento, e parece atuar modificando as vias de sinalização do BDNF, NGF e GDNF. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da administração diária de EGb na função cognitiva em animais jovens e, em processo de envelhecimento. Foram utilizados ratos Wistar machos adultos com 2, 6, 16 e 24 meses de vida. Os animais foram submetidos à avaliação comportamental de habituação ao campo aberto ou esquiva inibitória 24h após o último tratamento. Após, os animais que foram submetidos ao campo aberto sofreram eutanásia e as estruturas cerebrais (hipocampo e córtex pré-frontal) foram retiradas para análises dos níveis de BDNF, NGF e GDNF. Os resultados mostram que os animais com 2 e 6 meses reconheceram o ambiente novo após a segunda exposição ao campo aberto, ou seja, não apresentaram dano na memória de habituação. Porém, animais com 16 e 24 meses apresentaram dano na memória de habituação. Este efeito foi revertido com a administração de EGb durante 30 dias em animais com 24 meses de idade, mas não com 16 meses. Os animais submetidos à tarefa de esquiva inibitória tiveram um perfil semelhante. Além disso, foi observado que houve aumento dos níveis de BDNF no córtex pré-frontal de ratos com 6 e 24 meses de idade e tratados com EGb. No hipocampo, apenas houve aumento dos níveis de BDNF em ratos com 24 meses e tratados com EGb. Os resultados também mostram que houve aumento dos níveis de NGF no córtex pré-frontal de ratos com 16 meses de idade tratados com água ou EGb. No hipocampo, apenas houve aumento dos níveis de NGF em ratos com 6 meses e tratados com EGb. Adicionalmente, foi observado aumento dos níveis de GDNF no córtex pré-frontal de ratos com 6 meses de idade tratados com água. Também houve aumento dos níveis de GDNF no córtex pré-frontal de animais com 16 meses e tratados com água ou EGb. No hipocampo, não houve alteração dos níveis de GDNF em nenhum dos grupos experimentais. Os resultados desse estudo indicam que o EGb reverteu o dano cognitivo induzido pelo envelhecimento em ratos com 24 meses de idade e este efeito pode ser explicado, pelo menos em parte, pelo aumento dos níveis de BDNF no córtex pré-frontal e hipocampo desses ratos. Em animais jovens o EGb não induziu dano cognitivo.

Obesity is associated with inflammation, oxidative stress and mitochondrial dysfunction. In addition, it is known that obesity does not only affect peripheral tissues, but also leads to brain alterations. The increased prevalence and difficulties in treatment show the necessity to explore different therapeutic approaches. Due to its anti-inflammatory properties, the use of omega-3 polyunsaturated fatty acids may be a strategy. Objective: Evaluate the nutraceutical potential of omega-3 in mice submitted to obesity induced by high-fat diet. Methods: Male Swiss mice received either a normolipid diet (control) or a high-fat diet (obese). After 6 weeks, the groups were divided in Control + Saline, Control + Omega-3, Obese + Saline and Obese + Omega-3, and 400 mg/kg/day of fish oil (or saline) was administered orally, for 4 weeks. Food intake and body weight were monitored throughout the experiment. When the experiment completed 10 weeks, the animals were euthanized and the visceral adipose tissue (mesenteric fat) and brain were removed. The cerebral structures hypothalamus, hippocampus, prefrontal cortex and striatum were isolated. Results: Omega-3 did not influence food intake or body weight, but reduced visceral fat. In visceral fat, omega-3 reduced the oxidative damage, as well as alleviated alterations in antioxidant defense and in the Krebs cycle, caused by the intake of high-fat diet. The mitochondrial respiratory chain was not altered by obesity or omega-3 in visceral fat. In brain structures, omega-3 reduced the inflammation, the oxidative damage, as well as alleviated alterations in antioxidant defense and in energy metabolism (Krebs cycle and mitochondrial respiratory chain). Conclusion: It was concluded that omega-3 had a beneficial effect on the visceral fat and brain of obese animals, since it partially reversed the alterations caused by the consumption of high-fat diet, without worsening the parameters analyzed. / Submitted by Aline Haas de Melo (aline.mello@unisul.br) on 2017-08-31T18:42:07Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Tese Aline - versão final.pdf: 3298729 bytes, checksum: 8b0ada660f4ccdad28f9fef75543e1ca (MD5) / Approved for entry into archive by Silvane Cauz (silvane.cauz@unisul.br) on 2017-08-31T19:44:31Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Tese Aline - versão final.pdf: 3298729 bytes, checksum: 8b0ada660f4ccdad28f9fef75543e1ca (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-31T19:44:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Tese Aline - versão final.pdf: 3298729 bytes, checksum: 8b0ada660f4ccdad28f9fef75543e1ca (MD5) Previous issue date: 2017-08-07 / A obesidade está associada à inflamação, estresse oxidativo e disfunção mitocondrial. Além disso, sabe-se que a obesidade não afeta apenas tecidos periféricos, mas também leva a alterações cerebrais. O aumento da prevalência e as dificuldades no tratamento mostram a necessidade da exploração de outras abordagens terapêuticas. Devido a suas propriedades anti-inflamatórias, o uso de ácidos graxos poli-insaturados ômega-3 pode ser uma estratégia. Objetivo: Avaliar o potencial nutracêutico do ômega-3 em camundongos submetidos à obesidade induzida por dieta hiperlipídica. Métodos: Camundongos Swiss machos receberam dieta normolipídica (controle) ou dieta hiperlipídica (obeso). Após seis semanas, os grupos foram divididos em Controle + Salina, Controle + Ômega-3, Obeso + Salina e Obeso + Ômega-3 e 400 mg/kg/dia de óleo de peixe (ou salina) foi administrado via oral, por quatro semanas. O consumo alimentar e o peso corporal foram acompanhados durante todo experimento. Quando o experimento completou dez semanas, os animais foram eutanasiados e o tecido adiposo visceral (gordura mesentérica) e o cérebro foram removidos. As estruturas cerebrais hipotálamo, hipocampo, córtex pré-frontal e estriado foram isoladas. Resultados: O ômega-3 não influenciou no consumo alimentar nem no peso corporal, mas reduziu a gordura visceral. Na gordura visceral, o ômega-3 reduziu o dano oxidativo, bem como amenizou as alterações na defesa antioxidante e no ciclo de Krebs, causadas pela ingestão de dieta hiperlipídica. A cadeia respiratória mitocondrial não foi alterada pela obesidade nem pelo ômega-3 na gordura visceral. Em estruturas cerebrais, o ômega-3 reduziu a inflamação, o dano oxidativo, assim como amenizou as alterações na defesa antioxidante e no metabolismo energético (ciclo de Krebs e cadeia respiratória mitocondrial). Conclusão: Conclui-se que o ômega-3 apresentou efeito benéfico na gordura visceral e no cérebro de animais obesos, visto que reverteu parcialmente as alterações causadas pelo consumo de dieta hiperlipídica, sem causar piora dos parâmetros analisados.