Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-02-19T11:47:49Z No. of bitstreams: 1 2013_WagnerLuisGali.pdf: 1361763 bytes, checksum: 12e7e871bbebd908b8a88387018d3f50 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-02-19T13:00:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_WagnerLuisGali.pdf: 1361763 bytes, checksum: 12e7e871bbebd908b8a88387018d3f50 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-19T13:00:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_WagnerLuisGali.pdf: 1361763 bytes, checksum: 12e7e871bbebd908b8a88387018d3f50 (MD5) / Introdução: As evidencias são inconclusivas a respeito da função do cardiodesfibrilador implantável (CDI) para prevenção secundária de mortalidade em pacientes com cardiopatia chagásica crônica (CCC) e taquicardia ventricular sustentada (TVS). O objetivo do estudo foi avaliar se a terapia com CDI aumentaria a sobrevida em pacientes chagásicos com TVS quando comparado com terapia exclusiva com amiodarona Métodos: Nós comparamos o prognóstico de pacientes consecutivos (pts) com CCC e taquicardia ventricular sustentada (TVS) tratados com CDI em combinação com amiodarona (grupo CDI) versus um controle histórico de pacientes com CCC e TVS que foram tratados exclusivamente com amiodarona. O desfecho primário do estudo foi mortalidade por todas as causas e o desfecho secundário foi mortalidade por causa específica e terapia apropriada do CDI. Resultados: O grupo CDI (76 pts; 48 homens; idade, 57 ± 11 anos; fração de ejeção do ventrículo esquerdo [FEVE], 39 ± 12%) e grupo controle (28 pts; 18 homens; idade, 54 ± 10 anos; FEVE, 41 ± 10%) tiveram características de base semelhantes, exceto por maior frequência de terapia com beta bloqueadores (90% versus 17%, P < 0.0001) no grupo CDI. Durante tempo médio de seguimento de 33 meses para o grupo CDI e 35 meses para o grupo controle; P = 0.22), houve 10 óbitos (4.7% ao ano) no grupo CDI e 9 óbitos (11% ao ano) no grupo controle. A terapia com CDI foi associada com diminuição do risco de morte por todas as causas de 72% (hazard ratio [HR], 0.28; 95% intervalo de confiança [IC], 0.11 a 0.72; P = 0.007). Houve 7 (25%) mortes cardíacas súbitas (MCS) no grupo controle e somente uma (1.3%) no grupo CDI, resultando em redução de risco de MCS de 95% (HR, 0.05; 95% IC, 0.01 a 0.045; P=0.006) para os pts tratados com CDI. O benefício da terapia com CDI foi relevante entre os pts com FEVE < 40% (HR, 0.23 95% IC, 0.07 a 0.72; P = 0.01) e não foi significante naqueles com FEVE ≥ 40% (HR, 0.19; 95% IC, 0.02 a 1.88; P = 0.15). Terapia apropriada do CDI ocorreu em 72% dos pacientes (26% ao ano). A frequência de terapias apropriadas do CDI foi similar entre os pacientes com FEVE < 40% e FEVE ≥ 40%. Conclusão: Comparado com terapia exclusiva com amiodarona, implante de CDI foi associado com redução significante do risco de mortalidade por todas as causas e morte súbita em pacientes chagásicos com taquicardia ventricular sustentada. Pacientes com FEVE < 40% apresentaram maior benefício na sobrevida significativo com a terapia com CDI do que os pacientes com FEVE ≥ 40%. Apesar da terapia concomitante com amiodarona, muitos pacientes tratados com CDI apresentaram terapias apropriadas independente da função sistólica do ventrículo esquerdo. / Background: Evidence is inconclusive concerning the benefit of implantable cardioverter-defibrillators (ICDs) for secondary prevention of mortality in patients with Chagas’ heart disease (ChHD). The aim of this study was to evaluate whether ICD therapy would prolong survival in patients with ChHD presenting with sustained ventricular arrhythmias, as compared with amiodarone therapy alone. Methods: The study population consists of patients with ChHD presenting with sustained ventricular arrhythmias. We compared the outcomes of a contemporary group of chagasic patients who underwent an ICD implantation with those of an historical control group treated with amiodarone alone. The primary endpoint of the study was all-cause mortality; the secondary endpoints were cause-specific mortality and appropriate ICD therapy. Results: The ICD group (76 patients; 48 men; age, 57 ± 11 years; left ventricular ejection fraction [LVEF], 39 ± 12%) and the control group (28 patients; 18 men; age, 54 ± 10 years; LVEF, 41 ± 10%) had comparable baseline characteristics, even though ICD-treated patients were more frequently treated with ß-blockers (90% versus 17%; P < 0.0001). There were 10 deaths (4.7% per year) in the ICD group and 9 deaths (11% per year) in the control group. Therapy with an ICD resulted in a decreased risk of all-cause mortality of 72% (HR, 0.28; 95% CI, 0.11 to 0.72; P = 0.007) and a reduced risk of sudden death of 95% (HR, 0.05; 95% CI, 0.01 to 0.045; P = 0.006) compared with amiodarone-only therapy. The survival benefit of ICD was greatest in patients with LVEF < 40% (HR, 0.23 95% CI, 0.07 to 0.72; P = 0.01) and was not significant in those with LVEF ≥ 40% (HR, 0.19; 95% CI, 0.02 to 1.88; P = 0.15). Appropriate ICD therapy occurred in 72% of the patients (26% per year). Rates of appropriate ICD therapies were similar across patients with LVEF < 40% and LVEF ≥ 40%. Conclusions: Compared with amiodarone-only therapy, ICD implantation was associated with a significant reduced risk of all-cause mortality and sudden death in chagasic patients with sustained ventricular arrhythmias. Patients with LVEF < 40% derived significantly more survival benefit from ICD therapy than patients with LVEF ≥ 40%. Despite concomitant amiodarone therapy, most ICD-treated patients received appropriate ICD therapies regardless of the LV systolic function.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-graduação em Patologia Molecular, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-03-07T10:56:16Z No. of bitstreams: 1 2013_RaquelSilvadeNegreiros.pdf: 6245785 bytes, checksum: 5da9f4c315f41c976088353b8d4780e9 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-03-07T12:29:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_RaquelSilvadeNegreiros.pdf: 6245785 bytes, checksum: 5da9f4c315f41c976088353b8d4780e9 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-07T12:29:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_RaquelSilvadeNegreiros.pdf: 6245785 bytes, checksum: 5da9f4c315f41c976088353b8d4780e9 (MD5) / Diversos isolados e cepas de Trypanosoma cruzi são classificados em seis grupos genéticos ou discrete typing units (DTUs), TcI a TcVI. A cepa G estudada no presente trabalho pertence ao DTU TcI e foi isolada de um gambá da região Amazônica brasileira. Parasitos pertencentes a essa cepa apresentam um genoma não híbrido e menor que da cepa CL Brener. Além disso, tripomastigotas metacíclicas da cepa G são qualificados como pouco virulentas e, surpreendentemente, amastigotas axênicas são altamente infectivas. Dentro de um amplo projeto do nosso grupo de pesquisa que envolve o futuro sequenciamento do genoma da cepa G de T. cruzi, está inserida a análise proteômica de epimastigotas em larga escala que auxiliará na anotação dos genes. Para isso, foi realizada a análise por LC-MS/MS dos peptídeos gerados por digestão em gel do lisado proteico de epimastigotas. Foram feitas três buscas automatizadas em bancos de dados. Para a primeira busca, utilizando-se do banco de dados de Trypanosoma spp. e outros tripanossomatídeos, 1.460 proteínas foram identificadas. Para a segunda busca, no banco de dados apenas da cepa CL Brener, foram obtidas 953 identificações. Para ambas as buscas, foi utilizado o algoritmo do programa Sequest. Já com a utilização do algoritmo do PEAKS, foram detectadas 2.947 proteínas a partir do confronto dos espectros MS/MS com o banco de dados das cepas CL Brener e Sylvio X10/1. Considerando essa última abordagem, este é o proteoma mais abrangente realizado até hoje disponível independentemente do estágio de vida. Em todas as buscas, a via metabólica mais abundante em número de anotações foi metabolismo de purinas, o que está condizente com o alto requerimento energético de formas epimastigotas replicativas. A via glicólise também foi listada entre as dez vias metabólicas mais representativas em todas as buscas, provavelmente devido à presença de glicose no meio de cultivo e à preferência por essa hexose como fonte de carbono por epimastigotas. Todas as buscas resultaram na predominância de proteínas preditas a serem secretadas pela via não clássica e na identificação de diversas proteínas integrais de membrana potenciais, mostrando que a extração de proteínas por solubilização com SDS foi eficiente para o propósito de um proteoma abrangente. Particularmente, na busca 3, foram identificadas várias proteínas candidatas a alvos de drogas estudadas pelo nosso grupo, como leucil-aminopeptidase (LAP), oligopeptidase B (OPB), proliloligopeptidase (POP), metiltioadenosina fosforilase (MTAF) e catepsina B. Em relação às famílias multigênicas de T. cruzi, a terceira busca resultou na identificação de uma grande quantidade de membros das famílias de transsialidases (TS), mucin-associated surface proteins (MASP), mucinas, proteínas retrotransposon hot spot (RHS) e dispersed gene family 1 (DGF-1) e glicoproteínas de 63 kDa (gp63). Portanto, podemos concluir que a busca no banco de dados das cepas CL Brener e Sylvio X10/1 foi a mais satisfatória. Este proteoma representa um avanço significativo para o conhecimento do conjunto de proteínas expresso em T. cruzi e, também, um passo importante para a elucidação da sequência genômica da cepa G de T. cruzi. / Many isolates and strains of Trypanosoma cruzi are classified into six genetic groups or DTUs (discrete typing units), TcI to TcVI. G strain studied in the present work belongs to DTU TcI and was isolated from an opossum of Brazilian Amazon. G strain parasites have a non-hybrid and smaller genome than CL Brener strain. Moreover, G strain metacyclic trypomastigotes forms are characterized as low virulent and surprisingly axenic amastigote forms are highly infective. Within a broad project of our research group, which involves the subsequent genome sequencing of T. cruzi G strain, high-throughput proteomic analysis of epimastigotes is inserted to help gene annotation. For this, LC-MS/MS analysis of peptides generated by in-gel digestion of epimastigote protein lysate was accomplished. Three database automated searches were done. The search using the database of Trypanosoma spp. and other trypanosomatids allowed identification of 1.460 proteins. Secondly the search against T. cruzi CL Brener strain database resulted in 953 identifications. For both searches, Sequest algorithm was employed. With the use of PEAKS algorithm, 2.947 were detected from search against both CL Brener and Sylvio X10/1 strains database. Considering the last approach, this is the most abrangent proteome that has been revealed so far regardless the life stage of the parasite. In all searches, the most abundant metabolic pathway in number of annotations was purine metabolism, which is consistent with high energy requirement of replicative epimastigote forms. The glycolysis pathway also was related to the ten most representative metabolic pathways in all searches, probably due to the presence of glucose in culture medium and the preference for this hexose as carbon source by epimastigotes. All searches revealed the predominance of proteins secreted by non classical pathway and in the identification of many potential integral membrane proteins, showing that protein extraction was efficient for the purpose of an in-depth proteome. Notedly, with the search against both CL Brener and Sylvio X10/1 strains database, several drug target candidates studied by our group, as leucyl aminopeptidase (LAP), oligopeptidase B (OPB), prolyl oligopeptidase (POP), methylthioadenosine phosphorylase (MTAF) and cathepsin B were detected. In relation to multigenic families of T. cruzi, the third search resulted in the identification of a large amount of members of families of trans-sialidases (TS), mucin-associated surface proteins (MASP), mucins, retrotransposon hot spot (RHS) and dispersed gene family 1 (DGF- 1) proteins and 63 kDa glycoproteins (gp63). Therefore, we conclude that the search against both CL Brener and Sylvio X10/1 strains of T. cruzi was the most satisfactory. This proteome represent a significant advance in understanding the set of proteins expressed in T. cruzi and also an important step for elucidation of genome sequence of T. cruzi G strain.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, Doença de Chagas, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-03-31T15:01:18Z No. of bitstreams: 1 2013_EsterCardosoPaesRose.pdf: 9350602 bytes, checksum: cd045c2ef0d73b166b6b35a39b41c5ac (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-04-01T14:29:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_EsterCardosoPaesRose.pdf: 9350602 bytes, checksum: cd045c2ef0d73b166b6b35a39b41c5ac (MD5) / Made available in DSpace on 2014-04-01T14:29:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_EsterCardosoPaesRose.pdf: 9350602 bytes, checksum: cd045c2ef0d73b166b6b35a39b41c5ac (MD5) / A transferência de minicírculos de kDNA de Trypanosoma cruzi para o genoma do hospedeiro tem repercussão na biologia evolutiva e na medicina. A este respeito, a integração de minicírculos de kDNA em vários loci do genoma de aves e mamíferos implica em modificações genotípicas que estariam associadas com a patogênese da doença de Chagas. Nesse estudo, tal associação foi comprovada no modelo Gallus gallus, refratário ao T. cruzi. A inoculação de formas tripomastigotas do T. cruzi via orifício sobre a bolha de ar do ovo fértil de aves congênicas de Praga resultou na eclosão de pintos sem a infecção ativa, mas o kDNA do protozoário ficou retido no genoma. A reprodução das aves adultas kDNA-positivas gerou progênies com as mutações. O mapeamento dos sítios de integração dos minicírculos de kDNA feitos com a técnica tpTAIL-PCR revelou as mutações quimeras em múltiplos loci em vários cromossomos de células germinativas, no sêmen e nos ovócitos das aves. As integrações de kDNA ocorreram em loci preferenciais (hotspots), tais como genes constitutivos e do metabolismo celular, e em elementos transponíveis. A hipervariabilidade da sequência de nucleotídeos dos minicírculos explica a imensa diversidade das mutações de parentais e de progênies, porque gametas com integrações de kDNA diferentes geraram progênies com mutações diferentes no mesmo locus do genoma. Este tipo de herança não-Mendeliana favorece a diversidade genética e contribui para a especiação. A mobilização dos minicírculos e a recombinação das quimeras em outros sítios secundários do genoma também foi documentada. A topologia das integrações do kDNA foi analisada nas quimeras formadas nos genes da distrofina (NW_001471534.2) e da enzima málica (NW_003763650.1). Verificou-se que na maioria desses casos a região variável da sequência era diferente ou se achava recombinada. Especificamente, o estudo sugere que as integrações frequentes do kDNA do T. cruzi nos genes da distrofina e da enzima málica, modificando a fisiologia celular, podem ter um papel na patogênese da doença. / The transfer of the Trypanosoma cruzi kDNA minicircle sequences to the host’s genome is considered important to the evolutionary biology and medicine. It has been hypothesized that the integration of the minicircle sequences induces the host´s genotype modifications that may be associated with the pathogenesis of Chagas disease. In this study, the Gallus gallus chicken model system refractory to the T. cruzi infections was used. The inoculation of T. cruzi trypomastigotes through small orifice on the egg shell above the air chamber generated infection-free chicks, which retained the protozoan kDNA minicircle in the genome. The vertical transfer of the kDNA mutations was obtained by breeding kDNA-positive aves. The kDNA chimeras were documented by the tpTAIL-PCR, and the minicircle integrations were shown in several loci of germ line cells. The minicircle sequences integrated at several hotspots in coding regions and in transposable elements. The highly diverse minicircle sequences may explain the unlimited differences in the chimeras documented in parental and progeny. The gametes harboring diverse kDNA chimeras translated progeny with different patterns of mutation at single locus. This non-Mendelian heritage favors the unbridled diversity that contributes to speciation. The minicircle mobilization and chimera recombination was also documented. The topology of the kDNA mutations were examined in the dystrophin (NW_001471534.2) and in the malic enzyme (NW_003763650.1) genes. In these hotspots, the differences among the minicircle variable regions may be the result of hitchhiking and recombination at the secondary site. This study suggests that multiple kDNA integrations in the dystrophin and in the malic enzyme genes, introducing modification in the cell physiology, may be associated to the pathogenesis of Chagas disease.

Orientador: Eros Antonio de Almeida / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-17T09:50:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DeBiasi_CarlaPatriciaSantoro_M.pdf: 728047 bytes, checksum: 7236f0abe166e5dd7e4cd5a7ca53519d (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Causada pelo parasito Tripanossoma cruzi, a doença de Chagas é responsável pela morte de 50 mil brasileiros por ano. Possui grande impacto na produtividade do trabalhador e mostra-se capaz de provocar incapacidade precoce em aproximadamente 670 mil pessoas em todo o mundo anualmente. A reação aguda iniciada pelo parasito pode desencadear desde um quadro de febre, sudorese, cefaléia, hepatoesplenomegalia e adenomegalia, até um quadro grave de miocardite ou encefalite. Na fase crônica podem ocorrer insuficiência cardíaca congestiva de caráter progressivo, arritmias ou bloqueios cardíacos, perda de força muscular respiratória, aumento da freqüência respiratória, ineficácia ventilatória ou aumento do espaço morto. Tendo em vista tais alterações, os objetivos deste trabalho foram investigar o grau de acometimento da força muscular respiratória e o impacto desta sobre o padrão respiratório de chagásicos e avaliar o reflexo do acometimento cardíaco sobre a capacidade funcional. Para a análise dos dados do presente estudo foi realizado exame de ecocardiografia e eletrocardiograma para classificar os indivíduos chagásicos em grupo A e B. Prova de função pulmonar por meio da espirometria, teste de caminhada de seis minutos e verificação da força muscular máxima por meio de um manovacuômetro também foram realizados. A partir da avaliação proposta, observou-se que, apesar de apresentarem alteração da função cardíaca em diferentes níveis de acometimento, indivíduos idosos portadores de doença de Chagas, quando avaliados em níveis submáximos, não evidenciaram alteração alguma de força muscular e padrão respiratório, bem como do desempenho funcional. O padrão respiratório mostrou-se alterado apenas nos pacientes portadores de doença pulmonar concomitante à Doença Chagas. Conclui-se, portanto, que a presença de cardiopatia secundária à doença de Chagas, nos graus de gravidade estudados, não foi capaz de alterar, por si só, tanto a força muscular e padrão respiratórios, como o desempenho funcional submáximo. Além disso, apenas os pacientes que apresentaram doença pulmonar associada demonstraram alteração do padrão respiratório / Abstract: Caused by Tripanossama Cruzi parasite, the Chagas disease is responsible by death of 50 thousand brazilians every year. It causes considerable impact on workers' productivity and it is able to lead to premature incapacity in almost 670.000 people around the world every year. The acute reaction started by the parasite can cause fever, sweating, headache, hepatosplenomegaly, adenomegaly, or even a serious situation of myocarditis and encephalitis. In the chronic phase can occur progressive congestive heart failure, arrhythmias or heart blocks, loss of respiratory muscle strength, increase of respiratory frequency, ventilatory inefficiency or dead space increased. Considering these changes caused by the disease, the objectives of this work were investigate the level of respiratory strength damage and its impact on the respiratory pattern in Chagas patients, and also evaluate the repercussion of the heart disease in the functional capacity. To analyze the datas of this work, echocardiography and eletrocardiography were done in order to classify the Chagas Patients into two groups: "A" and "B". Pulmonar function test through the spirometry, walking six minutes test, and evaluation of maximum respiratory muscle strength using a manometer were also performed. With the proposed evaluation, we observed that, in spite of showing heart dysfunction in many levels of damage, elderly patients with Chagas disease, when evaluated in submaximal levels of physical efforts, showed no changes in strength respiratory muscle, pattern respiratory and functional performance. The pattern respiratory was damaged only in patients with associted lung disease. In conclusion, the presence of cardiopaty, secondarily to Chagas disease on the levels presented by the patients of this study, was not able to change the respiratory muscle strenght, the respiratory pattern and the submaximum functional performance by itself. Moreover, only patients with associated lung disease had damaged respiratory pattern / Mestrado / Gerontologia / Mestre em Gerontologia

Orientador: Nelson Eduardo Duran Caballero / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-21T15:45:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lourenco,RoseliMariadeConti_D.pdf: 2708322 bytes, checksum: 794f4d201e21485d488c9944121cadeb (MD5) Previous issue date: 1996 / Doutorado

Orientador: Julia Keiko Sakurada / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T15:09:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Assis_AngelaMariade_M.pdf: 2780125 bytes, checksum: ed0382f3c176db7f9c21e4d7373bbba3 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Para investigar a doença de Chagas experimental, camundongos BALB/c normais e C.B-17 scid/scid deficientes em linfócitos T e B funcionais foram inoculados com diferentes doses dos estoques tripomastigota de cultura (Tc) e tripomastigota sangüícola (Ts) da cêpa Y de Trypanosoma cruzi. Os resultados obtidos com camundongos BALB/c mostraram que somente a dose 105 do estoque Ts foi capaz de matar 60% dos animais e com os camundongos SCIO a infecção foi letal com todas as doses e ambos os estoques do parasita. Esse perfil foi significantemente alterado, após a repopulação dos animais com 2x107 células esplênicas do camundongo BALB/c, e desafiados, em tempos diferentes, com o estoque Tc, mostrando um desvio no nível de parasitemia e controle da mortalidade. Os animais repopulados com células tímicas, apresentaram uma modificação no nível de parasitemia quando desafiado com baixa dose de parasita do estoque de virulência atenuada (Tc). Os estudos de imunoproteção realizados em camundongos SCIO através da imunização passiva com várias doses do soro anti- T. cruzi obtidos de animais cronicamente infectados, foi no sentido de verificar o efeito dos anticorpos na ausência de imunidade celular. Observou-se um deslocamento no período de pré-patência nos animais que receberam uma única dose do anticorpo e as doses adicionais de anticorpos não alteraram a infecção. O conjunto de resultados mostrou que as células esplênicas foram efetivas no controle da parasitemia e mortalidade, enquanto que as células tímicas foram eficientes em controlar o nível de parasitemia, ressaltando a importância da imunidade celular e humoral no desenvolvimento de uma resposta protetora durante o período de infecção / Abstract: In order to investigate the experimental Chagas disease, normal BALB/c mice and deficient C.B-17 scid/scid in functional T and B Iymphocytes were inoculated with different doses of Tc and Ts storages of the Y strain of Trypanosoma cruzi. The results obtained showed a lethal infection only in SCIO mice. This profile was changed significantly after the repopulation of SCIO mice with 2x107 splenic cells of BALB/c mice and challenges with the Tc storage at different intervals, showing a deviation of the parasitemia levels and the mortality control. In the animais repopulated with thymic cells a change was observed in the parasitemia leveI. To verify the role of the antibody in the absence of cellular immunity, SCIO mice were immunized passively with various doses of anti- T.cruzi serum obtained from infected animais. A dislocation was then observed, in the pre-patent period only in the animais that received a unique dose of antibodies. The group of results indicated that the splenic cells were effective in the control of the parasitemia and mortality levei, while the thymic cells were effective in the control of parasitemia levei, stressing the importance of cellular and humoral immunity in the development of a protecting response during the period of infection / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Sergio de Albuquerque / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T23:08:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Burgos_ValdeliceOliveira_M.pdf: 11459665 bytes, checksum: 9acb93c0b764a639f8b47c37f73bb667 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Nas pesquisas clínicas a respeito da fisiopatologia da doença de Chagas, cada vez mais vem ganhando corpo a idéia de que os portadores desta moléstia apresentam o que poderia definir-se como uma dificuldade do organismo doente em manter a homeostase através da regulação de suas funções, quer sejam motoras, secretoras ou metabólicas. Uma das principais causas, relacionadas à diversidade de alterações anatomopatológicas que o parasito T. cruzi promove no hospedeiro está diretamente ligada às características morfológicas da cepa, que podem apresentar um tropismo tecidual diferenciado. As formas largas de T. cruzi apresentam miotropismo e tropismo glandular. Os parâmetros foram avaliados em ambos os sexos na fase aguda, analisando comparativamente a parasitemia, a histopatologia, a morfometria (cariometria e análise de superfície) do pâncreas. O modelo experimental utilizado foi o camundongo albino (Mus musculus) da linhagem Swiss, machos e fêmeas. O inóculo empregado foi de 2 x 104 formas tripomastigotas sanguícolas da cepa RAL, e em dias pré-determinados 3º, 6º, 8º, 10º, 12º, 14º e 16º dias experimentos, os animais foram sacrificados e retirados o sangue e amostras do pâncreas, para as dosagens da glicemia e das enzimas lipase e amilase (total). O pico parasitemico ocorre em dias diferentes, no 12Q (pico parasitemico para as fêmeas), e 14Q (pico parasitemico para os machos), com um aumento apreciável do número de parasitas para os machos. Ao comparar as iIhotas pancreáticas dos grupos infectados com os grupos controles de ambos os sexos, houve uma atrofia nas células a e hipertrofia nas células ß das iIhotas pancreáticas de ambos os sexos dos grupos infectados. Entretanto, os ácinos pancreáticos das fêmeas infectadas demonstraram uma maior hipertrofia , já em relação a glicêmica houve uma redução significativa em relações a ambos os sexos. Houve redução do peso nos grupos infectados em relação ao grupo controle, entretanto mais significativa no grupo macho infectado. Contudo, a amilase não apresentou variações significativas entre os grupos infectadas machos e fêmeas, mas quanto ã lipase houve uma variação significativa entre os grupos machos e fêmeas, mas não significativas entre grupos infectados e controles do mesmo sexo. Observando todos os aspectos avaliados, verificou-se que no presente trabalho ocorreram alterações bioquímicas e histológicas do pâncreas de animais infectados com a cepa RAL de T. cruzi. A cepa RAL de T. cruzi apresenta um comportamento atípico em relação às outras cepas estudadas e descritas na literatura, promovendo alterações pancreáticas mais intensas nos animais fêmeas que nos machos / Abstract: Searching the physiopatology of Chagas' disease in clinical researches, the idea that the bearers of this disease present what could be defined as a difficulty of the sick organism in maintaining the homeostasis through the regulation of their functions as motive, secretors or metabolic. One of the main causes related to the diversity of anatomopathological alterations that the parasite T.cruzi promotes in the host is direct/y linked to the morphologic characteristics of strains the that can show a tissular differentiated tropism. The parameters were evaluated in both sexes were in the acute phase, analyzing the comparative parasitemia, histopathology, and morfometry (cariometric and surface analysis) of the pancreas. The experimental model used was the both sexes of albino mouse (Mus musculus) of the lineage Swiss. RAL strain of T .cruzi was used with the inoculum of 2 x 104 blood trypomastigotes forms. In pre-determined days the animals were killed being pancreas and blood collected for the evaluation of glycemy, enzymes lipase and amylase (total). The high parasitemy happens in different days, being in the 12° for the females, and the 14° for the males with an appreciable increasing of the parasites number for the males. When comparing the pancreatic islets of the infected groups with the control groups of both sexes, there was an atrophy in a-cells and hypertrophy in ß-cells of the pancreatic islets of both sexes of the infected groups, however, the pancreatic acids of infected females demonstrated a larger hypertrophy, and a glycemic reduction only accentuated in relation to the infected males. Amylases didn't show significant variations among the groups infected (males and females), but the lipases had a significant variation among the male and female groups, but no significant between infected groups and controls of the same sex. Observing all the appraised aspects in the present work we noted biochemical alterations and histological destruction of the pancreatic gland of animals infected with the T.cruzi RAL strain. The T .cruzi RAI,. strain presents an atypical behavior in relation to the other studied strains- described in the literature, promoting more intense pancreatic alterations in the female animals that in males / Mestrado / Mestre em Parasitologia

Orientador : Laura Sterian Ward / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T10:42:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_JoycedoRosarioda_M.pdf: 2636836 bytes, checksum: 3860aa88acc2da37db9980bc8eccb293 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A Doença de Chagas atinge milhões de pessoas na América Latina, inclusive o Brasil. Pode evoluir com complicações cardíacas e gastrointestinais. Nos pacientes chagásicos, a amiodarona é considerada droga de escolha para o tratamento de arritmias graves e fatais e é bem tolerada devido ao seu baixo potencial inotrópico negativo. Geralmente, recomenda-se a suspensão da amiodarona quando a função tiroidiana se torna anormal ou ocorre o aparecimento de bócio, no entanto, para os chagásicos, a amiodarona pode ser a única opção para o tratamento de arritmias refratárias. Métodos. Neste estudo de caso - controle, comparamos 72 chagásicos (52 mulheres, 20 homens, idade entre 31 a 78 anos), usando amiodarona por periodo prolongado (11±5 anos), incluindo 22 pacientes que desenvolveram bócio, 33 chagásicos que não usavam amiodarona Resultados. Todos os pacientes foram examinados e tiveram avaliações da função cardíaca e tiroidiana periodicamente. O seguimento de 72 pacientes por 9±5.4 anos demonstrou que apenas 31 (43%) mantiveram níveis séricos de TSH normais; 14 (19%) apresentavam elevação; 4 (5.5%) tiveram níveis suprimidos e 23 (32%) pacientes apresentaram flutuações dos níveis de TSH. Entre os 22 pacientes com bócio, a função tiroidiana foi mais freqüentemente anormal (p=0.002). Apenas 3 (14%) pacientes mantiveram níveis normais de TSH, 8 (36%) apresentaram elevação, 2 (9%) tiveram níveis suprimidos e 9 pacientes apresentaram níveis flutuantes de TSH. Por outro lado os pacientes sem bócio a maioria permaneceu em eutiroidismo sem evidência de alteração cardíaca que pudesse ser atnbuida à disfunção cardiaca e as arritmias foram adequadamente controladas pela amiodarona.Conclusões. Concluímos que, apesar de requerer intenso cuidado, a amiodarona pode ser mantida nos pacientes chagásicos com arritmias graves, mesmo naqueles com disfunção tiroidiana ou bócio / Abstract: Background. The current medica! practice recommends drug withdrawn when thyroid tests become abnormal or goiter develops during amiodarone therapy. However, in patients with resistant or lífe-threatening arrhythmias it is sometimes considered essential to continue amiodarone. Methods. In this case-control study we compared 72 Chagas' disease patients (52 females, 20 men., aged 31 to 78 years) wíth long term use (11±5 years) of amiodarone, including 22 patients that developed a goíter, with 33 Chagas' patients that did not use amiodarone, followed-up for 2 to 20 years (7±11 years). Results. Ali patíents were examíned and had periodic cardiac and thyroid function evaluations. Follow-up of 72 patients for 9±5.4 years showed that only 31 (43%) maíntained normal serum TSH leveis; 14 (19%) presented elevated; 4 (5.5%) had low and 23 (32%) patients presented fluctuations ofthe TSH levei. Among the 22 patients with goiter, thyroíd function tests were more frequently abnormal (p=0.002). Only 3 (14%) patients maintained normal TSH, 8 (36%) had elevated, 2 (9%) had low and 9 patients presented fluctuacting serum TSH leveis. Likewise the non-goitrous patients, most individuais remained clinically euthyroid with no evidence of cardiac impairment that could be attributed to thyroíd dysfunction and the arrhythmías were adequately controlled by amiodarone. Conclusions. We conclude that, although requesting greater care, amiodarone treatrnent may be continued in Chagas' disease patients with resistant or life-threatening arrhythmias, even in those presenting thyroíd functíon abnormalities or goiter / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Humberto de Araujo Rangel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T08:16:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_MarcosGarcia_M.pdf: 1468128 bytes, checksum: 509b553e635606c76700ca3af2c9578d (MD5) Previous issue date: 1977 / Resumo: A atividade proteinásica de uma fração solúvel, rotulada como FS, obtida a partir de lisados da forma epimastigota de T. cruzi foi investigada em diferentes pH, utilizando diferentes tampões e o método de Anson modificado. A atividade proteolítica em pH 7,0 foi particularmente investigada utilizando-se diferentes substratos protéicos. A caracterização da proteinase neutra foi tentada utilizando-se os métodos de detecção de atividade proteolítica em gel de agarose, após eletroforese, imunoeletroforese simples e imunoeletroforese cruzada. Os resultados obtidos mostram que: 1. A FS exibe atividade proteolítica em uma ampla faixa de pH (entre 1,0 e 9,0), ocorrendo picos de atividade na zona ácida (pH 2,6 a 3,6), na zona alcalina (pH 8,5) e a zona neutra. 2. A atividade proteinásica da zona neutra apresentou um ótimo de atividade em pH 7,0, quando se utilizou tampão fosfato e homoglobina bovina ou humana como substratos. Um mesmo Km foi encontrado para as duas hemoglobinas que quando testadas frente a diferentes concentrações de FS, obteve-se uma relação praticamente linear entre dose e efeito quando os valores de 'delta¿DO se situam entre 0 e 0,500. 3. A proteinase neutra é capaz de agir sobre SNC, SAB, SAH e GGH, não alterando contudo o motivo antigênico desses substratos... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientadora : Julia Keiko Sakurada / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T14:33:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Britto_MariaHelenaSeabraSoaresde_M.pdf: 6213780 bytes, checksum: 91f381a054a67b9a52f1bb1c78d01132 (MD5) Previous issue date: 1988 / Resumo: No presente trabalho procuramos estudar a variação dos isotipos de imuneglobulinas, IgM, IgG1, IgG2a e IgG2b, a especificidade de anticorpos produzidos contra a cepa Y do T. cruzi, bem como a atividade funcional destes anticorpos durante a infecção experimental de camundongos CBA/J, sensível, C57BL/I0 e F1 (CBA/J x C57BL/10), resistentes. O conjunto de resultados obtidos nos permitiram concluir que: 1) A alteração isotípica ocorre após a primeira semana de infecção, 7º dia; 2) Cada linhagem de camundongos apresenta um perÍodo de síntese máxima com uma variação isotípica característica: a linhagem CBA/J no 282 dia, com a predominância de IgG1, IgG2a e IgG2b, apresentando alteração em relação ao normal de 2,0 a 3,0 vezes; a linhagem C57BL/10, no. 35º dia, com alteração da relação normal de 4,0 a 5,0 vezes com a participação de IgM, IgG2a e IgG2b; e, o F1 no 21° dia, com IgM e IgG2a aumentadas de 2,0 a 3,0 vezes em relação aos controles normais; 3) A análise da especificidade dos anticorpos por imunefluorescência não mostrou variação significativa na cinética de aparecimento e nem nos títulos de anticorpos anti-T. cruzi nos plasmas das três linhagens de camundongos até'o 14º dia após infecção. A partir do 21º dia surgiram variações nos títulos entre as linhagens, que se estabeleceram a partir do 28º dia, com titulos inferiores na linhagem suscetível; 4) A análise da especificidade, por imuneprecipitação não mostrou variação no padrão de peptídeos reconhecidos pelos plasmas das três linhagens de camundongos. O reconhecimento destes peptídeos iniciou-se no 142 dia e estabilizou-se a partir do 28º dia após a infecção. 5) Testes de imunoproteção Passiva demonstraram a presença de anticorpos protetores nos plasmas das linhagens de camundongos resistentes, C57BL/l0 e F1 obtidos a partir do 28º dia após a infecção; embora as atividades destes anticorpos sejam distintas, Já que os plasmas de C57BL/l0 n~o, foram capazes de controlar a parasitemia. 6) Nossos resultados, sugerem que a resistência à infecção pode ser correlacionada com a produção de anticorpos específicos contra um pequeno número de determinantes e, que as linhagens resistentes, C57BL/l0 e F1, produzem estes anticorpos precocemente e em níveis superiores aos da linhagem suscetível CBA/J / Abstract: Not informed. / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas