Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-10-27T03:09:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 335689.pdf: 5690477 bytes, checksum: c9d0db6657180eff371d4b73ac165ac3 (MD5) Previous issue date: 2015 / O uso de plantas medicinais com fins terapêuticos é uma das mais antigas práticas medicinais da humanidade. A espécie Vernonanthura tweedieana (Asteraceae), conhecida popularmente como ?assa-peixe? e ?mata-pasto?, tem sido utilizada no Brasil para o tratamento de doenças respiratórias. Com o intuito de promover a investigação fitoquímica da espécie para avaliação da atividade biológica in vitro dos componentes majoritários, os extratos brutos hidroetanólicos de partes aéreas, de caules e raízes, e o extrato acetônico de lavagem foliar foram submetidos a sucessivos procedimentos cromatográficos. A partir dos diversos processos cromatográficos foi possível purificar e caracterizar 11 substâncias, sendo dois ácidos fenólicos, ácidos cafeico e protocatecuico; um derivado etoxilado do ácido cafeico, cafeato de etila; cinco flavonoides, naringenina, crisoeriol, eriodictiol, apigenina e luteolina; dois fenilpropanoides, 3-hidroxi-1-(4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-propan-1-ona e evofolina B; e uma lactona sesquiterpênica, glaucolídeo A. Com exceção do eriodictiol, já reportado para as folhas de V. tweedieana, as demais substâncias estão sendo relatadas pela primeira vez para a espécie. Avaliado biologicamente in vitro quanto às atividades leishmanicida (frente a Leishmania amazonensis) e tripanocida (frente a Trypanosoma cruzi), o eriodictiol apresentou fraca atividade tripanocida (com porcentagem de inibição de crescimento de 22,65%) e não apresentou atividade leishmanicida. Os resultados obtidos possibilitam aprofundar o conhecimento da composição química e do potencial biológico para a espécie V. tweedieana, considerando as poucas informações disponíveis na literatura.<br> / Abstract : The use of medicinal plants for therapeutic purposes is one of the oldest medicinal practices in humanity. The species Vernonanthura tweedieana (Asteraceae), popularly known as ?assa-peixe? and ?mata-pasto?, has been used in Brazil for the treatment of respiratory diseases. In order to promote the phytochemical investigation of the species to evaluate in vitro biological activity of major components, the hydroethanolic crude extracts from aerial parts, from stems and roots, and from leaf washing acetone extract were subjected to successive chromatographic procedures. From the various chromatographic processes was possible to purify and characterize 11 substances, two phenolic acids, caffeic and protocatechuic acid; one ethoxylated derivative of caffeic acid, ethyl caffeate; five flavonoids, naringenin, crysoeriol, eriodictyol, apigenin and luteolin; two phenylpropanoids, 3-hydroxy-1-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl) propan-1-one and evofolin B; and one sesquiterpene lactone, glaucolide A. With the exception of eriodictyol, which as reported to leaves of V. tweedieana, other substances are being related for the first time in this species. Biologically evaluated in vitro for the leishmanicidal (against Leishmania amazonensis) and trypanocidal (against Trypanosoma cruzi) activities, the eriodictyol had a weak trypanocidal activity (with growth inhibition percentage of 22.65%) and showed no leishmanicidal activity. The results allow greater understanding of the chemical composition and biological potential for the species V. tweedieana, considering the limited information available in the literature.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-22T04:07:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334480.pdf: 2182180 bytes, checksum: 4e848e3b031babd1940ddf358b23e5ff (MD5) Previous issue date: 2015 / Espécie nativa da Mata Atlântica, encontrada desde o sul da Bahia até o norte do Rio Grande do Sul, a palmeira juçara (Euterpe edulis Mart.) apresenta grande importância ecológica e econômica para o Brasil, em especial para os estados de Santa Catarina, Paraná e São Paulo. A exploração extrativista contínua e desordenada para a produção de palmito acarretou em risco de extinção da espécie, visto que a extração do palmito implica no sacrifício da planta. Recentemente, maior atenção vem sendo dada à exploração de seus frutos, muito semelhantes aos frutos do açaizeiro (Euterpe oleracea Mart.) cultivado na Amazônia e utilizado para a produção de açaí. Os frutos de juçara são arredondados e apresentam coloração violáceo-púrpura quando maduros, sua utilização para obtenção de polpa tornou-se uma forma de conciliar proteção ambiental da espécie com agregação de valor econômico. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o conteúdo de minerais, sua bioacessibilidade e determinar o perfil de compostos fenólicos em frutos de palmeira juçara coletados em Florianópolis/SC em diferentes estádios de maturação. Os minerais e sua bioacessibilidade, bem como o conteúdo de compostos fenólicos apresentaram mudanças com o avanço da maturação. A partir da utilização da metodologia de bioacessibilidade in vitro mostrou-se que os frutos coletados no final da maturação, nos estádios definidos como sexto e sétimo, apresentaram um melhor aproveitamento nutricional com relação aos minerais, especialmente para Mn, Se, Cu, Ca e Fe. Com o emprego da HPLC-ESI-MS/MS foram identificados ácidos fenólicos (protocatecuico, ?-cumárico e gálico), flavonoides (campferol, aromadendrina, hispidulina, quercetina, taxifolina, miricetina e rutina) e estilbeno (resveratrol). Os ácidos fenólicos e os flavonoides apresentaram as maiores concentrações, em sua maioria, nos frutos coletados até o terceiro estádio de maturação, com exceção da rutina e quercetina, que apresentaram os maiores teores no final do ciclo de maturação. Os resultados obtidos neste trabalho demonstram que o consumo de frutos de juçara pode contribuir significativamente para a ingestão diária recomendada de minerais e maximizar a ingestão dietética de compostos antioxidantes, os quais podem trazer benefícios à saúde do consumidor.<br> / Abstract : Native to Atlantic Forest, found from south Bahia to the north of Rio Grande do Sul, the juçara palm (Euterpe edulis Mart.) has great ecological and economic importance to Brazil, especially in the states of Santa Catarina, Paraná and São Paulo. The continuous and disorderly exploitation for palm heart production resulted in near extinction of the species, since palm heart extraction involves the sacrifice of the plant. Recently, more attention has been given to the exploitation of juçara fruits, very similar to the fruits grown in Amazon (Euterpe oleracea species) and used for the production of açaí. The juçara fruits are rounded, when ripe are violet-purple color, and its use to obtain pulp has become a way of reconciling environmental protection of the species with added economic value. This study aimed to evaluate the mineral content and its bioaccessibility and the profile of phenolic compounds in juçara fruit collected in Florianópolis/SC at different ripening stages. Minerals and their bioaccessibility, and the content of phenolic compounds showed changes during advancing maturity. The application of the in vitro bioaccessibility methodology showed that the fruits harvested at the end of ripening stages (sixth and seventh) showed a better mineral content, especially Mn, Se, Cu, Ca and Fe. With the use of HPLC-ESI-MS / MS were identified phenolic acids (protocatechuic, gallic and ?-coumaric acid), flavonoids (kaempferol, aromadendrin, hispidulin, quercetin, taxifolin, myricetin and rutin) and stilbene (resveratrol). The phenolic acids and flavonoids shown the highest concentrations, mostly in fruits collected until the third ripening stage, with the exception of rutin and quercetin, which showed the highest levels at the end of the ripening cycle. The results of this study show that the consumption of juçara fruit can significantly contribute to the recommended daily intake of minerals and maximize dietary intake of antioxidant compounds, which can benefit the consumer health.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:28:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 318595.pdf: 1675556 bytes, checksum: 288aca92e690ed7e43df99cab2b75293 (MD5) Previous issue date: 2013 / A espécie Cecropia glaziovii, popularmente conhecida no Brasil como embaúba, é amplamente utilizada na medicina popular como agente diurético e cardiotônico. Em relação às propriedades farmacológicas são descritas as atividades anti-hipertensiva, antioxidante e anti-herpética. Flavonoides, procianidinas, ácidos fenólicos e catequinas são relatados como metabólitos presentes no extrato aquoso de suas folhas. Especificamente em relação aos flavonoides C-glicosídeos, são descritas as atividades antioxidante, anti-inflamatória e no sistema nervoso central. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a estabilidade do extrato bruto (EB) e de uma fração enriquecida em flavonoides C-glicosídeos (FrMeOH). As amostras (EB e FrMeOH) foram submetidas a testes de estresse sob condições de temperatura (80 oC), luz UV (254 nm), hidrólise ácida (HCl 0,1N) alcalina (NaOH 0,1N) e neutra, e oxidação (H2O2 3%, 10% e 30%) durante períodos diversos; a estudos de estabilidade acelerada (40 oC ± 2 oC e 75% ± 5% UR), durante seis meses, e também foram avaliadas sob condições de refrigeração (4 oC). Foram selecionados três marcadores (ácido clorogênico, isoorientina e isovitexina) para monitorar o perfil quantitativo das amostras durante os experimentos por CLAE/DAD. O método por CLAE utilizado mostrou-se indicativo da estabilidade. Não foram verificadas alterações relevantes nos teores dos marcadores no experimento sob refrigeração durante 30 dias, e oxidação (H2O2 3% e 10%) durante cinco horas, no EB e FrMeOH. Com exceção dos experimentos anteriores, para os demais testes de estresse e para o estudo de estabilidade acelerada foram observadas alterações relevantes no teor de pelo menos um entre os três marcadores para as duas amostras. Durante os testes de estresse foi verificada a formação de três produtos de degradação no EB, e apenas um produto na FrMeOH. Os experimentos de estabilidade realizados demonstraram que o flavonoide O-glicosídeo (isoquercitrina), e o ácido fenólico (ácido clorogênico) apresentaram maior sensibilidade às condições impostas em relação aos flavonoides C-glicosídeos (isoorientina, isovitexina) <br>

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-graduação em Química / Made available in DSpace on 2012-10-21T11:50:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 214311.pdf: 475828 bytes, checksum: 1f3f6bd6c894d1cee5f588b3e3d4ff15 (MD5) / Este trabalho teve como objetivo realizar a correlação entre os resultados obtidos por diferentes técnicas utilizadas para avaliar a atividade antioxidante de compostos fenólicos. As técnicas empregadas para a obtenção dos dados experimentais in vitro foram: inibição da redução do azul de tetrazolium (NBT), potenciometria, voltametria e determinação do consumo de oxigênio. Para determinar os parâmetros físico-químicos, foram adotados cálculos teóricos semi-empirícos. Os compostos avaliados neste trabalho foram o ácido benzóico - BEN (e seus derivados: ácido gálico - GAL, ácido gentísico - GEN, ácido protocatéquico - PRO, ácido vanílico - VAN e galato de metila - GALme) e o ácido cinâmico - CIN (e seus derivados: ácido ferúlico - FER, ácido cafeico - CAF, ácido clorogênico - CLO, ácido cumárico - CUM e resveratrol - RES). Entre os compostos avaliados, os que apresentaram maior capacidade de estabilizar o radical ânion superóxido (ININBT) foram: CAF e CLO entre os derivados do ácido cinâmico; GAL e GALme, entre os derivados do ácido benzóico. Avaliando-se os voltamogramas obtidos, observou-se que os compostos que não possuem hidroxilas fenólicas (BEN e CIN) não apresentaram correntes de oxidação, sendo, portanto, inertes nas condições estudadas. Avaliando-se os valores de potencial de pico anódico, observou-se os menores potenciais para o CAF, CLO, GAL e GALme. Portanto, estes compostos são os que apresentam maior possibilidade de se oxidar. Os maiores saltos potenciométricos e os maiores consumos de oxigênio também foram obtidos para os mesmos compostos (CAF, CLO, GAL e GALme). Comparando a ordem relativa dos valores das técnicas experimentais, observou-se que a melhor correlação foi obtida para os resultados das técnicas eletroquímicas de potenciometria e voltametria (R2=0,8993), seguida da correlação entre os resultados de ININBT e potenciometria (R2=0,7916) e entre os resultados de ININBT com voltametria (R2=0,6636). Avaliando-se a estrutura química dos compostos estudados, observou-se que as maiores atividades foram obtidas para os compostos que possuem hidroxilas fenólicas, sendo que, quanto maior o seu número, maior o potencial antioxidante. Comparando os resultados obtidos para os derivados do ácido benzóico e os derivados do ácido cinâmico, observa-se que o grupo propenóico propiciou maior poder antioxidante, por aumentar a possibilidade de estabilização do elétron desemparelhado em sua estrutura química. A partir dos cálculos teóricos, foi possível obter parâmetros que estão correlacionados com a atividade antioxidante. Entre os parâmetros calculados, os mais adequados foram: o Log P, que se correlacionou significativamente com o número de hidroxilas fenólicas (R2=-0,6771) e podem ser utilizados para prever os resultados de potenciometria e de consumo de oxigênio; e a Energia de Dissociação da ligação O-H calculada para a molécula ionizada para prever os resultados de ININBT. O Potencial de Ionização e a Energia de Ativação não foram considerados adequados para prever a atividade antioxidante. Este trabalho demonstrou que dados experimentais in vitro obtidos através de técnicas eletroquímicas e fotométricas, bem como cálculos teóricos de Log P e de Energia de Dissociação da ligação O-H, podem ser empregados para prever a atividade antioxidante de compostos fenólicos.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2012-10-21T17:12:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 202341.pdf: 549888 bytes, checksum: c1446e37648bb8bbaffad047c703e965 (MD5) / Os compostos fenólicos (CF) são substâncias presentes numa grande variedade de plantas. Eles podem atuar nos vegetais como antioxidantes, antimicrobianos, fotorreceptores, atraentes visuais e repelentes de predadores. Muitos estudos mostraram que os CF possuem inúmeras

Orientadores: Caio Glauco Sanchez, Rodnei Bertazzoli / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecanica / Made available in DSpace on 2018-07-26T12:30:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pellegrino_RosangelaRodriguesLeme_M.pdf: 2600829 bytes, checksum: c928ac2b68a68cadd0273ac6f3f50c77 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Atualmente há uma grande preocupação com a preservação do meio ambiente, principalmente em relação ao destino de efluentes aquosos industriais contendo compostos orgânicos, dentre estes compostos destacam-se os solventes clorados e aromáticos, os pesticidas e os fenóis. O tratamento convencional para este tipo de efluente é a biodegradação, que necessita de grandes áreas físicas, além da geração de grandes quantidades de lodo. A engenharia eletroquímica oferece uma alternativa para o tratamento de efluentes contendo compostos orgânicos através de reações redox, sem geração de lodo. Neste estudo foi abordada a oxidação eletroquímica do fenol utilizando um reator de fluxo do tipo "flow-by" com eletrodos planos, onde o catodo é de platina e o ano do do tipo ADE de Ti/IrO2- Ta2O5 45-55 mol %. O interesse em se estudar esse composto deve-se ao fato do fenol ser amplamente utilizado e ou gerados em uma grande variedade de processos industriais, por apresentar uma estrutura semelhante a uma série de outros compostos orgânicos e por possuir um mecanismo de eletro oxidação conhecido na literatura. A oxidação eletroquímica foi conduzida através da eletrólise a corrente constante de uma solução de fenol 100 mg.L-1 em Na2SO4 em pH 3 ajustado em H2SO4 por um tempo de 5 horas. Durante a eletrólise foi avaliado a influência da densidade de corrente aplicada, da distância anodo/catodo e da velocidade linear do fluido. A concentração do fenol foi monitorada através de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. Acompanhou-se também a taxa de remoção da Demanda Química de Oxigênio (DQO) e do Carbono Orgânico Total (COT). Foi realizado uma estimativa do consumo elétrico necessário para a remoção de um quilograma de fenol. Na faixa de densidade de corrente avaliada observa-se que quanto maior a densidade de corrente aplicada, maior é a taxa de conversão do fenol e maior é a remoção de DQO e COT, porém o consumo elétrico é maior. Em relação a distância anodo/catodo, a medida em que se aumenta a distância ocorre a diminuição da taxa de conversão do fenol e aumenta o consumo elétrico. Quanto menor a distância, maior é a remoção de DQO e COT. A velocidade linear do fluido exerce influência sobre a porcentagem de remoção de DQO e COT. Quanto maior a velocidade maior a remoção de DQO e COT e menor é o consumo elétrico. Nas condições estudadas obtevese uma taxa de remoção de fenol em torno de 48% e uma taxa de remoção de DQO e COT de 25,40 % e 20,58% respectivamente / Abstract: Industrial aqueous streams containing organic compounds are conventionally treatment by long term biological degradation, generating a huge amount of non biodegradable sludge. In this field electrochemistry may offer an alternative for treating aqueous affluents by oxidation via simultaneous oxygen evolution at an anode surface. Electrochemical technology has offered an efficient means of controlling pollution as it provides degradation of organic pollutants via redox reactions without the disadvantages of the conventional treatment. Indeed, electrons are the only reactant added to the treatment process that produces on by-products or sludge at all. In this study an electrochemical cell reactor was designed for electro oxidation of phenolic solutions on Ti/IrO2- Ta2O5 anodes surface. The experiments were conducted at constant current. Dependence of phenol removal rate on current density, on the cathode/anode gap and on the flow was studied. Phenol concentration decay during the experiments was followed by HPLC analysis. Chemical oxygen demand (COD) and total organic carbon (TOC) were also used as optimization parameters of the electrolytic process. Energy consumption for phenol abatement was also calculated. Results shown that removal rate increased for increased current densities, smaller anode/cathode gap and higher flow rate. Best results were 48% of phenol removal, 25.4 % of DQO removal and 20.6% of TOC removal / Mestrado / Termica e Fluidos / Mestre em Engenharia Mecânica

Orientador: Paulo Mazzafera / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T01:37:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Shimizu_MiltonMassao_D.pdf: 10534578 bytes, checksum: cb892e38ba8d86aa0c1e3086aed08ff7 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A polifenoloxidase (PPO) há muito vem sendo estudada, seja na resistência em plantas a pestes e doenças, como também pela sua importância na indústria de alimentos. O primeiro capítulo apresenta o estudo da PPO da raiz de soja das variedades Cristalina (suscetível) e Hartwig (resistente) submetidas a dano mecânico, tratadas com metiljasmonato e infectadas com os nematóides Meloidogyne javanica e Heterodera glycines. Antes porém, uma rápida caracterização da PPO de soja mostrou que o triton X-100 aumentava a eficiência de extração, o dodecilsulfato de sódio (SDS) não aumentava a atividade e o ácido clorogênico era o melhor substrato da enzima. Nas plantas submetidas a dano mecânico e tratadas com metiljasmonato houve aumento da atividade da PPO, principalmente em Hartwig. Foi nesta variedade também a maior atividade detectada com a inoculação dos dois nematóides. As análises de fenóis totais não mostraram diferenças quantitativas ou qualitativas entre os tratamentos. Nos estudos moleculares foram isolados inicialmente cinco clones de PPO de raiz de soja, mas apenas dois destes fragmentos, JH1 e JH2, foram usados no preparo de sondas para estudos de Southern blot, que mostraram até 4 genes codificando para PPO. A análise de expressão por RT-PCR mostrou o aumento de transcrição somente com JH1, o que sugere que os genes para PPO não respondem da mesma forma ao mesmo estímulo. Cristalina tratada com metiljasmonato apresentou aumento de resistência a ambos os nematóides, enquanto em Hartwig não houve mudanças visíveis. No segundo capítulo foram feitas análises da PPO em folhas novas e velhas, raízes e palmito das palmeiras juçara, açaizeiro e pupunheira, onde maior atividade foi detectada em juçara, açaizeiro e pupunheira, respectivamente. De modo geral, folhas novas apresentaram maior atividade do que as velhas, e estas, atividade um pouco maior do que raízes. Na caracterização da PPO, o ácido clorogênico mostrou ser seu melhor substrato, com a melhor temperatura de reação entre 25oC (açaízeiro e pupunha) e 30oC (juçara). As melhores atividades foram observadas entre pH 5,5 e 6,0 do meio de reação. Houve inibição por inibidores específicos, tais como ácido salicilhidroxâmico, brometo de cetiltrimetilamônia e tropoleno. Os Ki's foram determinados para as PPOs de juçara e açaizeiro com ácido salicilhidroxâmico (2,82 µM e 1,96 µM, respectivamente) e tropoleno (6,55 µM e 1,25 µM, respectivamente). SDS levou à perda de atividade da enzima. PPO de juçara e açaizeiro mostrou-se relativamente resistente a temperaturas altas. O Km para ácido clorogênico foi menor para pupunheira (0,59 mM), seguido de juçara (1,19 mM) e açaizeiro (1,91 mM). Análises de fenóis solúveis totais e, ácido clorogênico mostraram que pupunha tem considerável quantidade de fenóis, semelhante até ao teor encontrado em açaí e um pouco superior a juçara, mas ácido clorogênico foi aproximadamente dez vezes menor em pupunha que nas outras duas palmeiras. ¿Tissue printings¿ de cortes do caule das palmeiras mostraram que pupunha apresenta pouca reação de oxidação devido à baixa atividade da enzima e não à uma possível menor quantidade de fenóis ou mais especificamente, de ácido clorogênico. Nos estudos moleculares, os mesmos primers detectaram seqüências de PPO em palmito de açaizeiro e juçara. Apenas um foi comum com palmito da pupunheira. Foram isolados dois clones de PPO, PPOEd17 (juçara) e PPOAc45 (açaí). Não foi possível isolar nenhum clone de PPO de pupunha. Estes fragmentos apresentaram similaridade baixa entre eles, ao redor de 52%, e foram usados na fabricação das sondas usadas no Southern blot, que indicaram a presença de apenas um gene nas três palmeiras. A análise de expressão por RT-PCR detectou transcrição significativa apenas nos palmitos de juçara e açaí, mostrando que a baixa oxidação observada em palmito pupunha se deve à baixa expressão do gene codificando para essa enzima. Ainda assim, a falta de substrato específico, o CGA, não pode ser excluída como um fator que contribui para a menor oxidação, pois as análises mostraram a presença de outros fenóis em pupunha em quantidades parecidas ou até superiores, mas que podem não ser tão bons substratos para a PPO, provocando a sua menor oxidação / Abstract: Most of the studies on polyphenol oxidase (PPO) are concerned with its participation in the response of plants to insect attack and its importance in food quality. The first chapter of this thesis presents the study of PPO from roots of two soybean (Glycine max) varieties differing in their resistance to nematodes. The aim was to study the role of PPO at the time of inoculation and consequently analyses were carried out at 6, 12, 24, 48 and 72 h after inoculation. Roots of Cristalina (susceptible) and Hartwig (resistant) were subjected to mechanical damage, treated with methyl jasmonate and inoculated with the nematodes Meloidogyne javanica and Heterodera glycines. Initial tests showed that the presence of triton X-100 in the extraction buffer increased the efficiency of PPO extraction. Sodium dodecylsufate (SDS) did not affect the enzyme activity and chlorogenic acid was the best substrate. Plants subjected to mechanical damage and treated with methyl jasmonate showed an increase of PPO activity, mainly in Hartwig. This variety also showed the highest activity following nematode inoculation. Analyses of phenolic compounds did not show quantitative or qualitative differences among the treatments. Using degenerate primers and PCR we isolated five clones of PPO from soybean root, but only two (JH1 and JH2) were used for Southern blot analysis. Probes made from these clones indicated 4 genes coding for PPO in soybean. Only JH1 showed an increase of PPO transcription with semi-quantitative RT-PCR based expression analysis. The results suggest that different stimuli might induce transcription of different PPO genes in soybean. Cristalina treated with methyljasmonate showed an increase of resistance to both nematodes, while no changes were observed with Hartwig. In the second chapter of this thesis PPO was studied in palm plants which differ in the oxidation of the extracted heart of palm (palmito). Analyses of PPO in young and mature leaves, roots and heart of palm showed that activity was higher in juçara (Euterpe edulis) and açaizeiro (Euterpe oleraceae). In general, the activity was higher in young tissues. Enzyme assay showed chlorogenic acid (CGA) as the best substrate and the best temperature reaction was 25ºC for açaízeiro and pupunha (Bactris gassipae) and 30ºC for juçara. The best activities of PPO were between pH 5.5 and 6.0. PPO was inhibited by specific inhibitors, such as salicylhydroxamic acid, cetyltrimethylammonium bromide and tropolone. Ki's were determined for salicylhydroxamic acid (1,96 µM for açaí and 2.82 µM for juçara) and tropolone (1.25 µM for açaí and 6.55 µM for juçara) with the PPOs from juçara and açaizeiro, respectively. SDS in the reaction medium led to the loss of activity of the enzyme. PPO of juçara and açaizeiro were relatively resistant to the temperature. The Km for chlorogenic acid was lower for pupunheira (0.53 mM), followed by juçara (1.19 mM) and açaizeiro (1.917 mM). Analyses of total soluble phenols and chlorogenic acid showed that pupunha has a considerable amount of phenols but a siginificantly lower amount of chlorogenic acid when compared with the other two palms. ¿Tissue printings¿ of cut stems of pupunha showed an absence of oxidation indicating that low activity of PPO and not low phenol was responsible two PPO clones were isolated, one from heart of palm of juçara (PPOEd17) and other from açaizeiro (PPOAc45). We were not able to isolate any clone from pupunha. These clones had low similarity (52%) and they were used as probes in Southern blot analysis. The results indicated that only one PPO gene was present in the three palms. Using semi-quantitative RTPCR based expression analysis it was possible to detect significant PPO transcription only in the heart of palm of juçara and açaizeiro, confirming that that low the oxidation observed in pupunha is due to low expression of the gene coding for PPO. However, the low chlorogenic acid content cannot be excluded as another factor contributing to the lower oxidation in this palm, since other phenols present would not be as good substrates as CGA / Doutorado / Biologia Vegetal / Doutor em Biologia Vegetal

Orientador: Avelino Rodrigues de Oliveira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T01:54:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Musumeci_MariaRaphaela_D.pdf: 2493138 bytes, checksum: e7f8cf3f51346d74cff2a6545a19d351 (MD5) Previous issue date: 1974 / Resumo: O desenvolvimento de compostos neo-sintetizados acumulados após inoculação com Phytophthora citrophthora foi verificado em tecidos de duas espécies cítricas - Citrus aurantium L. (laranjeira azeda) e Citrus sinensis Osbeck (laranjeira doce), respectivamente resistente s suscetível a esse fungo. Casca, lenho e ramos dos dois hospedeiros foram colocados em placas de Petri e inoculados com uma suspensão micelial do fungo. Em diferentes períodos após a inoculação os tecidas foram extraídos com Etanol 95% á quente e os extratos concentrados foram cromatografados e bioensaiados. 0 exame a luz ultra-violeta detectou nos cromato gramas de extratos de cascas e ramos de laranjeira azeda inoculada, um composto fluorescente com Rf 0,30 em Benzeno ; Éter (80:20). Esse composto foi denominado "composto 1" (C1) e é sintetizado pelos tecidos do hospedeiro rasistente 24 horas após a inoculação. A região do ramo importante para a síntese desse composto foi a casca, não se observando o desenvolvimento do nos tecidos do lenho. O C1 foi desenvolvido também em resposta a lesão mecânica nos tecidos de casca não inoculados e incubados por 72 horas. O C1 foi produzido pelos tecidos de laranjeira azeda em resposta a inoculação com os patógenos Phytophthora parasitica e Phytophthora cinnamomi e não foi produzido após a inoculação com os não patógenos Phytophthora infestans e Ceratocystis paradoxa. Os tecidos da laranjeira doce não desenvolveram o em resposta a inoculação com o patógeno ...Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The development of newly synthetized compounds which a cumulate after inoculation with Phytophthora citrophthora was verified in tissues of two Citrus varieties - Citrus aurantiurn L (sweet orange) and Citrus sinensis Osbeck (sour orange), respectively resistant and susceptible to this fungus. Detached bark, wood and stems of both hosts were placed in Petri dishes and inoculated with a mycelial suspension of the fungus. At different periods after inoculation the tissues were extracted with hot 95% Ethanol and the concentrated extracts we re chromatagraphed and bioassayed. A fluorescent compound with Rf 0.30 in Benzenb:Ether (80:20) was detected in chromatograms of bark and stems of inoculated sour orange by observation under the ultraviolet light. This compound was named Compound 1 and it was developed in the resistant hast tissues 2 4 hours after inoculation. Compound 1 was detected only in bark extracts when bark and wood were inoculated separately. Compound 1 was also developed after 72 h in response to mechanical injury in incubated and noniculated bark tissues. Compound 1 was produced by sour orange in response to inoculation with the pathogens P.parasitica and P.cinnamomi, but not after inoculation with the non-pathogens P.infestans and C.paradoxa. Sweet orange tissues did not develop Compound 1 in response at inoculation with the pathogen P.citrophthora. Chromatography of extracts from stem and bark tissues showed a compound with Rf 0.36 in Benzene:Ether (80:20) which was visible under the UV light ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Doutor em Ciências

Orientador : Edward J. Baum / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-19T03:26:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fadanelli_Eliana_M.pdf: 3285824 bytes, checksum: 8fa60bd3b7f44d47fb6039250973acfa (MD5) Previous issue date: 1981 / Mestrado

A levedura Brettanomyces/Dekkera pode causar alterações importantes em vinhos tintos, com a formação de etil-fenóis, compostos de aromas desagradáveis. Este estudo teve como objetivo determinar a presença dessa levedura e de etil-fenóis em vinhos tintos comerciais e durante a vinificação em escala industrial, além de observar sua possível inibição pelo ácido sórbico. Brettanomyces/Dekkera foi quantificada em meio seletivo, e etil-fenóis, por cromatografia gasosa. SO2 livre e total, álcool, extrato seco total, açúcares residuais, acidez total e volátil e pH também foram determinados. O crescimento durante a vinificação foi acompanhado usando diferentes meios seletivos. Dekkera bruxellensis (NRRL Y – 12961) e leveduras isoladas de vinhos brasileiros foram cultivadas em meio sintético e vinho, contendo ácido sórbico entre 0 e 250 mg/L. Das 126 amostras de vinhos comerciais, 26,98% apresentaram Brettanomyces/Dekkera, e 46,03%, etil-fenóis acima do limiar de 426 μg/L, com SO2 e álcool mostrando-se como fatores limitantes. A passagem dos vinhos por barricas e as variedades de uva não influenciaram os níveis de contaminação e de etil-fenóis. Durante a vinificação, Brettanomyces/Dekkera foi detectada a partir do mosto. A baixa população não foi suficiente para formar etil-fenóis durante cinco meses após o esmagamento. Os meios não foram completamente seletivos, especialmente para uvas e mostos. O ácido sórbico inibiu a cepa de Dekkera bruxellensis (NRRL Y – 12961), especialmente para concentrações acima de 150 mg/L, sendo variável o grau de inibição para os isolados. / The yeast Brettanomyces/Dekkera can cause significant spoilage in red wines, with the production of ethylphenols, compounds of unpleasant odors. This study aimed at determining the presence of this yeast and ethylphenols in commercial red wines during vinification in industrial scale and to observe its possible inhibition by sorbic acid. Brettanomyces/Dekkera was quantified on selective medium, while ethyphenols were quantified by gas chromatography. Free and total SO2, alcohol, total dry extract, residual sugar, total and volatile acidity, and pH were also determined. The growth during winemaking was followed using different selective media. Dekkera bruxellensis (NRRL Y – 12961) and Brazilian wines yeasts were grown in synthetic medium and in wine, containing sorbic acid between 0 and 250 mg/L. Brettanomyces/Dekkera was present in 26.98% of the 126 samples of commercial wines. The ethylphenols were above of the 426 μg/L threshold in 46.03% of the samples. SO2 and alcohol were limiting factors. The stage in barrels and the varieties did not affect the levels of contamination and ethylphenols. During winemaking, Brettanomyces/Dekkera was detected from the must. The low population was not enough to produce ethylphenols in five months after crushing. The media were not completely selective, especially for grapes and musts. Sorbic acid inhibited the strains of Dekkera bruxellensis (NRRL Y – 12961), especially at concentrations above 150 mg/L, with variable degree of inhibition for the isolates.