Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / A privação de sono paradoxal (PSP) provoca diversas alterações neuroquímicas e comportamentais relacionadas a mudanças nas funções de sistemas de neurotransmissores. São descritas na literatura respostas aumentadas a estímulos álgicos em animais privados desta fase de sono. Os métodos de PSP frequentemente utilizados têm sido associados à geração de ansiedade nos animais, e a hiperalgesia observada poderia, portanto, ser conseqüência aos estímulos ansiogênicos gerados pelo método. Neste trabalho tivemos como objetivos avaliar se o método utilizado para a PSP é ansiogênico e investigar o efeito dos fármacos ansiolítico, diazepam e analgésico, ácido acetilsalicílico sobre a ansiedade e resposta a estímulos térmicos álgicos em animais PSP. Ratos machos Wistar com 90 dias de vida foram privados de sono paradoxal por 96 horas, sendo a resposta álgica avaliada pelo tempo de retirada da pata traseira em ratos expostos à placa quente (46C). A avaliação do nível de ansiedade dos animais foi feita através do teste do campo aberto, através da relação entre a permanência nos quadrantes centrais e nos quadrantes periféricos, e também pelo teste do labirinto em cruz elevado, sendo quantificado o número de vezes que o animal entrava nos braços abertos do labirinto e o tempo gasto pelo animal nos mesmos braços. Os animais PSP apresentaram aumento no índice de locomoção em relação aos animais controles (+314,8%, p<0,05), aumento no número de entradas (+257,1%) e no tempo gasto nos braços abertos do labirinto em cruz elevado (+319,2%, p<0,05), e redução na latência de retirada da pata traseira da placa quente (-64,2%, p<0,05). O fármaco diazepam, não influenciou nas respostas apresentadas pelos animais PSP no teste de campo aberto e no teste da placa quente, mas influenciou nas repostas apresentadas por estes animais no teste do labirinto em cruz elevado tanto no tempo (+308, p<0,05), quanto no número de entradas (+316,6%, p<0,05). O fármaco ácido acetilsalicílico promoveu uma diminuição do índice de locomoção nos animais PSP submetidos ao teste de campo aberto que também foram administrados com o diazepam (-99,5%, p<0,05). No teste da placa quente o ácido acetilsalicílico não apresentou nenhuma influência na percepção de dor nos animais. Os resultados obtidos neste trabalho indicam que o método de privação de sono paradoxal por período de 96 horas não induz ansiedade, e a redução farmacológica dos níveis de ansiedade não influencia na resposta álgica induzida pela privação de sono paradoxal. / Paradoxical sleep deprivation (PSD) causes several neurochemical and behavioral changes related to alterations in neurotransmitters systems. Increased responses to nociceptive stimuli have been reported in animals deprived of this phase of sleep. The commonly used methods of PSD have been linked to the generation of anxiety in animals, and hyperalgesia could, therefore, be due to anxiety stimuli generated by the method. The purpose of this study was to investigate anxiety induced by the PSD method and the effect of the anxiolytic drug diazepam and analgesic drug acetylsalicylic acid on anxiety and response to thermal nociceptive stimuli. Male Wistar rats of 90 days of life were deprived from sleep for 96 hours and submitted to the nociceptive test on the hot plate (46C). The assessment of anxiety level of animals was performed using the open field test, where they made the link between residence in central and peripheral squares, and also by test of the elevated plus maze, whose endpoint was to quantify the number of times that the animal entered in the open arms of the maze and measure the time spent by the animal in the same arms. PSD animals showed increased rate of locomotion compared to control animals (+314.8%, p <0.05), longer time spent in open arms of elevated plus maze (+319.2%, p <0.05), largest number of entries in the same arms of the maze (+257.1%) and reductions in latency to withdraw the hind paw of the hot plate (-64.2%, p <0.05). The drug diazepam, did not influence the responses made by PSD animals in the open field and hot plate test, but influenced the answers given by these animals in test of the elevated plus maze in both time (+308, p <0.05), or the number of entries (+316.6%, p <0.05). The drug acetylsalicylic acid caused a decline in the rate of locomotion in PSD animals subjected to the open field test that also was administered with diazepam (-99.5%, p <0.05). The results of this study indicated that the method of paradoxical sleep deprivation does not appear to be anxiogenic. The results obtained in this work showed that the PSD method does not induce anxiety and the pharmacological reduction in anxiety does not interfere in the increased algic response induced by paradoxical sleep deprivation.

Introdução: Os opioides são os analgésicos mais efetivos para tratamento da dor moderada a intensa. No entanto, evidências crescentes têm demonstrado que seu uso pode levar a mudanças na sensibilidade dolorosa. Nesse contexto, a hiperalgesia induzida pelo remifentanil (r-IH) envolve um desequilíbrio nos sistemas inibitórios e excitatórios. Postula-se que um dos mecanismos centrais seja a disfunção do sistema modulador descendente da dor. Então, neste estudo, testamos a hipótese de que a estimulação transcraniana de corrente contínua (ETCC), devido aos seus efeitos analgésicos, poderia prevenir a r-IH. Os desfechos primários incluíram a escala numérica de dor (END 0-10) durante o teste repetitivo ao frio (rCOLDT), e a alteração na END (0-10) durante o teste de modulação condicionada de dor (CPM-TASK). Os desfechos secundários foram os limiares de dor ao calor (HPT) e o tempo de reação durante o teste de dor à água gelada [zero graus oC, (IPT)]. Métodos: Ensaio clínico randomizado, fatorial, duplo cego, que incluiu 48 homens saudáveis, com idades entre 19 e 40 anos. Os sujeitos foram randomizados em quatro grupos (n=12): ativo (a) - ETCC / solução salina, Sham (s) - ETCC / solução salina, a-ETCC / remifentanil e s-ETCC / remifentanil. Foi aplicado o ETCC sobre o córtex motor primário, com uma sessão única de 20 min e 2 mA. Resultados: Durante o rCOLDT, houve um efeito significativo entre os grupos nos escores cumulativos da END (P = 0,01). O grupo s-ETCC / remifentanil apresentou maiores escores de dor durante rCOLDT, [media (SD) 5,49 (1,04)] e a-ETCC / remifentanil apresentaram escores relativamente menores [4,15 (1,62)]. Este achado mostra que o efeito da ETCC bloqueou a HI-R. Os grupos a-ETCC / solução salina e s-ETCC / salina apresentaram menor índice de dor durante rCOLDT, [3.11 (1.2)] e [3.15 (1.62)], respectivamente. A incidência de hiperalgesia definida como um aumento de 15% na END durante o rCOLDT foi de: 31% no grupo s-ETCC/remifentanil; 22% no grupo a-ETCC/remifentanil; 11% no grupo a-ETCC/salina; e 8.3% no grupo s-ETCC/salina. Os grupos com remifentanil apresentaram escore positivo na END (0-10) durante a tarefa CPM, ou seja, produziu um desengate do sistema modulador descendente de dor (DPMS). Além disso, s-ETCC / Remifentanil em comparação com a-ETCC/remifentanil apresentou menor HPT e maior tempo de reação durante o IPT. Conclusão: Esses achados sugerem que os efeitos da a-ETCC previne a disfunção da capacidade inibitória do sistema modulador descendente da dor induzido pelo remifentanil durante o rCOLDT. / Background: Opioids are the most effective analgesics to treat moderate to severe pain. However, growing evidence shows that opioids can elicit unexpected changes in pain sensitivity. In this sense, remifentanil-induced hyperalgesia (r-IH) involves an imbalance in the inhibitory and excitatory systems. It postulates that one of the central mechanisms is the dysfunction of the descending pain modulating system. We tested the hypothesis that transcranial Direct Current Stimulation (t-DCS), given its analgesics effects, could prevent r-IH. The primary outcomes included the Numerical Pain Score NPS (0-10) during the repetitive cold test (rCOLDT) and the change on the NPS (0-10) during the conditioned pain modulation (CPM)-task. The secondary outcomes were the heat pain threshold (HPT) and the reaction-time during the Ice-Water Pain Test (IPT). Methods: This double blinded, explanatory factorial randomized trial included 48 healthy males, ages ranging 19 to 40 years. They were randomized into four equal groups: active (a)-tDCS/saline, sham (s)-tDCS/saline, a-tDCS/remifentanil and s-tDCS/remifentanil. We applied tDCS over the primary motor-cortex, with a single session of 20 minutes and 2mA. Results: During the rCOLDT, there was a significant group effect on the cumulative NPS scores (P=0.01). The s-tDCS/remifentanil group presented larger pain scores during rCOLDT, [mean (SD) 5.49 (1.04)] and a-tDCS/remifentanil group had relative lower pain scores [4.15 (1.62)]; showing its blocking effect on r-IH. a-tDCS/saline and s-tDCS/saline groups showed lowest pain scores during rCOLDT, [3.11(1.2)] and [3.15(1.62)], respectively. The incidence of hyperalgesia defined as a 15% increase in NPS during rCOLDT was: 30.3% in the s-tDCS / remifentanil group; 22% in the a-tDCS / remifentanil group; 11% in the a- tDCS / saline group; 8.3% in the s-tDCS / saline group. Remifentanil groups showed positive scores in the NPS (0-10) during the CPM-task, that is, it produced a disengagement of the descending pain modulatory system (DPMS). Also, s- tDCS/Remifentanil compared to a-tDCS/Remifentanil showed lower HPT and larger reaction-time during the IPT. Conclusion: These findings suggest that the effects of a-tDCS prevents the dysfunction of the inhibitory capacity of the descending modulatory pain system induced by remifentanil during rCOLDT.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Schistosomalmyeloradiculopathy (SMR) is a severe formofpresentationof schistosomiasis, in whichthe spinal cord isaffectedby species ofSchistosoma. Thisstudy aimed todevelopan animal modelof SRMcaused byS.mansoni, and characterize the sensory and motorchanges causedby the depositionofeggsof S. mansoniin the spinal cordand correlate thesensory aspects, engines and histologicalanimalsinfunction of time.Heldmechanicalsensitivitytests, behavioral and subsequenteuthanasiain two series(infected and control)animalsdividedinto six groups offivemale Wistar ratseachin5, 10, 20 and 30dayspost-infection. The experimental groupswere anaesthetizedwith halothane andinjected witha suspension ofS. mansonieggs in thesubarachnoid space.Control animalsunderwent the sameprocedure, but with phosphate buffersolution administration(PBS). The spinal cordwas removed,subjected tohistologicalanalysis ofT10and L5. It was observedreduction in surfacemechanical sensitivity, thermal sensitivityand muscle strengthcaused by theeggsof S. mansoniin the spinal cord; Changesobservedin nervous tissueof 25% of the animals following infectionof S. mansoni. The modelproved to besuitable forevaluation offunctional changesin ratsand may beuseful forpathogenesisstudiesofMRE. / Mielorradiculopatiaesquistossomótica (MRE) é uma forma grave de apresentação da esquistossomose, em que a medula espinhal é acometida por espécies de Schistosoma. Este estudo teve como objetivo o desenvolvimento de modelo animal de MRE causada pelo S. mansoni, além de caracterizar as alterações sensoriais e motoras ocasionadas pelo depósito de ovos do S. mansoni na medula espinhal e correlacionar os aspectos sensoriais, motores e histológicos nos animais em função do tempo. Realizou-se testes de sensibilidade mecânica, comportamentais e posterior eutanásia em duas séries (infectada e controle) de animais divididas em seis grupos com 5 ratos Wistar machos cada nos 5º, 10º, 20º e 30º dias da pós-infecção. Os grupos experimentais foram anestesiados com halotano e injetou-se uma suspensão de ovos de S. mansoni no espaço subaracnóideo. Os animais controle foram submetidos ao mesmo procedimento, porém com administração de solução tampão-fosfato (PBS). A medula espinhal foi removida, submetida a análise histológica entre T10 e L5. Constatou-se redução na sensibilidade mecânica superficial, da sensibilidade térmica e da força muscular ocasionadas pelos ovos do S. mansoni na medula espinhal; Observou-se alterações no tecido nervoso de 25% dos animais após a infecção de S. mansoni. O modelo desenvolvido mostrou-se satisfatório para avaliação das alterações funcionais em ratos Wistar, podendo ser útil para estudos da etiopatogenia da MRE.

Orientadores: Claudia Herrera Tambeli, Maria Cecilia F. A. Veiga / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-06T06:07:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_LucianeLacerdaFrancoRocha_D.pdf: 2035730 bytes, checksum: 6401d3a12bda71532a90f1fa6da06785 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Considerando que a ATM recebe uma rica inervação simpática, o objetivo deste estudo foi investigar o papel das aminas simpatomiméticas na hiperalgesia da ATM induzida pela carragenina, além de validar a natureza inflamatória do modelo de hiperalgesia quimicamente induzida pela carragenina na ATM de ratos. Uma pequena dose de 5-hydroxytriptamina (5-HT; 75mg) que induz resposta comportamental nociceptiva mínima, foi aplicada na região da ATM de ratos 1h após a injeção de carragenina (C; 100mg) para detectar a sensibilização induzida pela carragenina na região da ATM, que foi avaliada pela soma das respostas nociceptivas comportamentais, como coçar a região orofacial e levantar a cabeça. O bloqueio da síntese de prostaglandinas pela indometacina sistêmica (2,5mg/kg) ou local (10µg) antes do início da inflamação pela carragenina diminuiu significativamente a hiperalgesia da ATM. A depleção das aminas simpatomiméticas pela guanetidina (30mg/kg por três dias consecutivos antes da injeção de carragenina na ATM) ou a co-aplicação de antagonistas dos adrenoceptores ß (propranolol nas doses de 0,25 e 2,25µg), assim como os antagonistas dos adrenoceptores ß2 (ICI 118,551 nas doses de 0,05 e 0,1 µg) com carragenina (C; 100 µg) reduziram significativamente a hiperalgesia na ATM. A co-aplicação de antagonistas dos adrenoceptores ß1 (atenolol nas doses de 6, 18, 54 ou 162µg) não afetou as respostas comportamentais induzidas pela carragenina (C; 100µg). Indometacina local, propranolol e ICI 118,551 não tiveram efeito quando injetados na ATM contra lateral, o que indica uma participação periférica das prostaglandinas e das aminas simpatomiméticas nesta hiperalgesia. Estes resultados sugerem que as aminas simpatomiméticas são liberadas no local da injúria onde as mesmas contribuem para a hiperalgesia inflamatória na ATM através dos adrenoceptores ß2, indicando que os mesmos são possíveis alvos para o desenvolvimento de novas drogas analgésicas no controle da dor da ATM / Abstract: The aim of this study was to further validate our carrageenan-induced temporomandibular joint (TMJ) inflammatory hyperalgesia model in rats by showing that administration of indomethacin before the initiation of inflammation would diminish the TMJ hyperalgesia. By using this model, it was investigated whether norepinephrine and local adrenoceptors contribute to the development of inflammatory TMJ hyperalgesia. Carrageenan-induced TMJ hyperalgesia was assessed by measuring the behavioral nociceptive responses, such as rubbing the orofacial region and flinching the head, induced by the injection of a low dose of 5-hydroxytryptamine into the TMJ sensitized one hour before by a TMJ injection of carrageenan. Blockade of prostaglandin synthesis by indomethacin prior to initiation of inflammation by carrageenan significantly attenuated the TMJ hyperalgesia. The guanethidine depletion of norepinephrine or the blockade of ß2 but not the blockade of the ß1 adrenoceptor by the selective adrenoceptor antagonists ICI 118.551 and atenolol, respectively, significantly reduced carrageenan-induced TMJ hyperalgesia. In this study, we further validate our carrageenan-induced TMJ hyperalgesia model to study the mechanisms involved in inflammatory TMJ hyperalgesia and to test the analgesic effect of different types of peripheral analgesics. By using this model, we show that norepinephrine is released at the site of injury where it contributes to the development of the inflammatory TMJ hyperalgesia. It is proposed that the contribution of norepinephrine to the development of the inflammatory TMJ hyperalgesia is mediated by the activation of ß2-adrenoceptors. Perspective: The findings that local sympathomimetic amines contribute to the inflammatory TMJ hyperalgesia by acting on ß2-adrenoceptors may be relevant to clinical TMJ inflammatory pain states less sensitive to non-steroidal anti-inflammatory drugs / Doutorado / Fisiologia Oral / Doutor em Odontologia

Acute pancreatitis (AP) is a pancreatic inflammatory disease that usually occurs associated with abdominal pain and presents high mortality in its severe form. There is no specific therapy to treat this disease, as well as the secondary lung injury, which makes of interest the search for new substances to treat AP. In this context, the use of medicinal plants can be a reasonable strategy to treat this inflammatory condition and the associated pain. We investigated therefore the effect of ethanol extract of the inner bark of Caesalpinia pyramidalis Tul. (Fabaceae) (EECp) on AP induced by common bile duct obstruction (CBDO). Firstly, chromatographic analysis of the EECp was performed by high performance liquid chromatography (HPLC) technique. Groups of male Wistar rats (200-250 g, n = 6-8 per group) were submitted to CBDO and euthanized 6 (protocol 1) or 24 h (protocol 2) thereafter. Animals were orally treated with EECp (100, 200 or 400 mg/kg, protocol 1, or 400 mg/kg, protocol 2) or vehicle (Tween 80, 0.2% in saline 0.9%) 1 h before and 12 h after induction of AP or false surgery (sham). Before (-1 h) and after 6, 12 or 24 h, the abdominal hyperalgesia was measured using the electronic von Frey. The locomotor activity of the animals was evaluated by the open field test. After euthanasia and tissue collection the following parameters were measured: (i) the activity of myeloperoxidase (MPO) in pancreas and lung, (ii) the concentration of malondialdehyde (MDA) in pancreas, lung, liver, and kidney, (iii) the pancreatic edema index, (iv) serum amylase, lipase, and nitrate/nitrite and (v) the total and differential leukocyte count in peripheral blood. The chromatographic analysis of EECp suggested that rutin is present in this extract. In both protocols 1 and 2 the CBDO significantly increased all inflammatory and biochemical parameters evaluated, when compared to sham group. The effects caused by EECp on CBDO-induced pancreatitis include the reduction of pancreatic inflammation, because of inhibition of neutrophil infiltration, and pancreatic edema, attenuation of systemic inflammation, by decreasing the leukocyte counts in peripheral blood, as well as reducing the pulmonary neutrophil infiltration, especially in the initial stages of pancreatitis. Also, the EECp decreased the pancreatic and lung lipid peroxidation and the serum nitrate/nitrite, which may contribute to the anti-inflammatory effects observed in these tissues and it partially reduced the amylase and lipase levels. Abdominal hyperalgesia induced by CBDO was completely inhibited by EECp (400 mg/kg), an effect that persists for at least 12 h. No alterations were observed in the locomotor activity of rats treated with EECp in the open field. The results showed that EECp decreases the inflammatory and nociceptive responses in CBDO-induced AP. These activities make this extract of interest to the development of studies or approaches for the treatment of this condition in humans. / A pancreatite aguda (PA) é uma doença inflamatória do pâncreas que geralmente se apresenta acompanhada de dor abdominal e possui elevada mortalidade nas suas formas mais graves. Não há terapia específica para tratar esta doença, ou as complicações pulmonares decorrentes dela, o que torna de interesse a busca de novas substâncias para a sua terapêutica. Neste âmbito, o uso de plantas medicinais pode ser uma estratégia viável para tratar esta condição inflamatória, bem como a dor a ela associada. Neste estudo investigou-se, portanto, o efeito do extrato etanólico da entrecasca de Caesalpinia pyramidalis Tul. (Fabaceae) (EECp) na PA induzida pela obstrução do ducto biliopancreático (ODBP). Inicialmente foi realizada a análise cromatográfica do extrato pela técnica de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Para efeito de estudo, os grupos de animais foram eutanasiados 6 (protocolo 1) ou 24 h (protocolo 2) após a indução da PA. Ratos machos Wistar (200-250 g, n=6-8 por grupo) foram pré-tratados pela via oral com EECp (100, 200 ou 400 mg/kg, protocolo 1 ou 400 mg/kg, protocolo 2) ou veículo (tween 80 0,2% em salina 0,9%) 1 h antes e 12 h após a indução da PA ou falsa cirurgia (sham). Antes (-1 h) e após 6, 12 ou 24 h, foram realizadas medidas da hiperalgesia abdominal com o von Frey eletrônico. A atividade locomotora dos animais foi avaliada pelo teste do campo aberto. Após eutanásia e coleta dos tecidos, determinou-se a atividade de mieloperoxidase (MPO) e a concentração de malondialdeído (MDA) em pâncreas e pulmão, o índice de edema pancreático, as concentrações séricas de amilase, lipase e nitrato/nitrito e a contagem total e diferencial de leucócitos no sangue. A análise cromatográfica do extrato sugeriu a presença do flavonóide rutina em sua composição. Em ambos os protocolos experimentais (6 ou 24 h), a ODBP aumentou significativamente todos os parâmetros inflamatórios e bioquímicos avaliados, quando comparados ao respectivo grupo sham. Os dados obtidos neste estudo permitem afirmar que os efeitos causados pelo EECp, na pancreatite induzida pela ODBP, incluem (i) a redução da inflamação pancreática, devido a inibição do infiltrado de neutrófilos e do edema pancreáticos; (ii) a atenuação da inflamação sistêmica, através do decréscimo da contagem de leucócitos no sangue periférico, bem como, da redução do infiltrado de neutrófilos pulmonar, em especial, nos estágios iniciais da pancreatite; (iii) a diminuição da peroxidação lipídica pancreática e pulmonar, o que pode contribuir para os efeitos anti-inflamatórios observados nestes tecidos; (iv) a diminuição dos níveis séricos de nitrato/nitrito; (v) a redução parcial dos níveis de amilase e lipase e (vi) a inibição da hiperalgesia abdominal, um efeito que persiste por no mínimo 12 h com a maior dose de EECp utilizada e é confirmado pela ausência de alteração da atividade locomotora dos animais no campo aberto. Os resultados demonstram que o EECp diminui a inflamação e a hiperalgesia durante a PA induzida por OBDP. Estas atividades são de interesse para o desenvolvimento de estudos ou abordagens futuras para o tratamento da PA em humanos.

Introduction: Musculoskeletal pain can be known consequence of repetitive strain, overuse and musculoskeletal disorders related to work. These injuries include a variety of disorders that cause pain in bones, joints, muscles, or surrounding structures, often promoting decreased range of motion and loss of function. The therapeutic management of musculoskeletal pain involves pharmacological treatment and physical therapy. However, the effects of joint mobilization (JM) between the grades of small and large amplitude in the peripheral joints in nociception and locomotor activity are still not well understood scientifically. Objective: To investigate the effects of joint mobilization in peripheral nociception, motor activity and axient in animal models of inflammatory musculoskeletal pain. Methods: Eighteen male Wistar rats (250 to 300 g) received carrageenan and kaolin (0.1 mL) injection solution into the left knee joint to induce inflammation. Joint mobilization grade I (n=6) and grade III (n=6) were held diferentiated by the grade of range. Control animals (n = 6) were kept within a glove during the same time of the animals that were submitted to therapy intervention. All tests were performed with the investigator blinded to the type of treatment performed. Treatment with JM occurred for three days interspersed from the third post-induction day. Were measured the secondary mechanical hyperalgesia (Von Frey digital), spontaneous displacement motor (Open field) and locomotor activity by mean speed, time activity and frequency of rearing (Monitor de Atividades- IR). These measurements are performed before and 24 hours after induction and before and after each treatment day. Data were expressed as mean ± SEM. Differences between groups were analyzed by ANOVA one-way followed by Tukey test and intra-group differences were analyzed by paired t test. Results: After induction of musculoskeletal joint inflammation, decreased paw withdrawal threshold in all groups (p <0.001). The groups JM I and JM III demonstrated significantly increased paw withdrawal threshold (p=0.05) 48 hours after the intervention days D5 and D7, showing no immediate analgesic effect MA. Significant reduction of the mean speed (p <0.001) in groups JM I and JM III on day D1, 24 hours after induction. A significant increase in speed (p=0.02) in the group JM III 48 hours after therapeutic intervention in the days D5 and D7. Immediately after application of therapy in group JM III, mean speed was reduced (p <0.03) on days and D3 and D7 (p <0.03) at day D5 after application JM I and JM III. A significant increase in rearing time (p <0.03) in the group JM III 48 hours after intervention on D7, showing no immediate effect of the JM grade III in the exploratory motor activity. The activity was significantly reduced in time (p <0.002) in the groups JM I and JM III compared to the time before the induction of musculoskeletal inflammation. The data showed increased activity time (p <0.01) 48 hours after the intervention JM III at days D5 and D7. In spontaneous movement, there was an increase in the number of quadrants (p <0.04) in the groups JM I and JM III 48 hours after intervention on days D5 and D7, suggesting there by reducing the levels of anxiety. There was no significant difference between the groups treated in any variable. Conclusion: It is concluded that the joint mobilization carried out in grades I and III had no immediate effect, but did not present adverse effects on reduction of hyperalgesia and levels of anxiet and improving motor activity in acute experimental model of inflammatory musculoskeletal pain / Introdução: A dor musculoesquelética pode ser consequência conhecida do esforço repetitivo, do uso excessivo e de distúrbios musculoesqueléticos relacionados ao trabalho. O manejo terapêutico da dor musculoesquelética envolve tratamento farmacológico e fisioterapia. Na prática clínica fisioterapêutica, a mobilização articular (MA) é frequentemente utilizada como recurso analgésico. No entanto, os efeitos da mobilização articular entre os graus de pequena e grande amplitude nas articulações periféricas, na nocicepção e na atividade locomotora ainda não são bem esclarecidos cientificamente. Objetivo: Investigar os efeitos da mobilização articular periférica na nocicepção, na atividade motora e nos níveis de ansiedade em modelo animal de dor musculoesquelética inflamatória. Método: Para tanto, 18 ratos Wistar machos (250 a 300 g) receberam injeção de solução de carragenina e caolina (0,1 mL) no joelho esquerdo para induzir inflamação articular. Foram realizadas mobilizações articulares de grau I (n=6) e grau III (n=6) diferenciados pelo grau de amplitude articular. Os animais controles (n=6) foram mantidos dentro de uma luva durante o mesmo tempo dos animais que foram submetidos à intervenção terapêutica. O protocolo de mobilização articular foi feito em três séries de três minutos com um intervalo de um minuto entre as séries, durante três dias intercalados. Foram mensurados a hiperalgesia mecânica secundária (Von Frey digital), deslocamento motor espontâneo (campo aberto) e atividade locomotora através da velocidade média, tempo de atividade e tempo de rearing (monitor de atividades-IR). Essas medidas foram realizadas antes e 24 horas após a indução e antes e depois de cada dia de tratamento. Os dados foram expressos como média ± EPM. Diferenças entre grupos foram analisadas pelo teste ANOVA monocaudal seguido de teste Tukey e as diferenças intragrupos foram analisadas pelo teste t pareado. Resultados: Após indução da inflamação musculoesquelética articular, houve redução do limiar de retirada da pata em todos os grupos (p<0,001). Os grupos MA I e MA III mostraram aumento significativo do limiar de retirada da pata (p=0,05) 48 horas após a intervenção nos dias D5 e D7, mostrando efeito analgésico não imediato da MA. Houve redução significativa da velocidade média (p<0,001) nos grupos MA I e MA III no dia D1, 24 horas após a indução. Observou-se aumento significativo da velocidade (p=0,02) no grupo MA III 48 horas após intervenção terapêutica nos dias D5 e D7. Imediatamente após a aplicação da terapia no grupo MA III, houve redução da velocidade média (p<0,03) nos dias D3 e D7 e (p<0,03) no dia D5 após a aplicação da MA I e MA III. Houve aumento significativo do tempo de rearing (p<0,03) no grupo MA III 48 horas após a intervenção no dia D7, evidenciando efeito não imediato da MA grau III na atividade motora exploratória. O tempo de atividade foi significativamente reduzido (p<0,002) nos grupos MA I e MA III em relação ao momento antes da indução da inflamação musculoesquelética. Os dados mostraram aumento do tempo de atividade (p<0,01) 48 horas após a intervenção no grupo MA III nos dias D5 e D7. No deslocamento espontâneo, houve aumento do número de quadrantes transpassados (p<0,04) nos grupos MA I e MA III 48 horas após a intervenção nos dias D5 e D7, sugerindo, assim, redução dos níveis de ansiedade. Não houve diferença significativa entre os grupos tratados em nenhuma das variáveis avaliadas. Conclusão: Conclui-se que a mobilização articular realizada nos graus I e III não teve um efeito imediato, porém não apresentou efeitos prejudiciais na redução da hiperalgesia e dos níveis de ansiedade e na melhora da atividade motora na fase aguda do modelo experimental de dor musculoesquelética inflamatória.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Repeated injections of acidic saline into the gastrocnemius muscle in rats produce a bilateral long-lasting hiperalgesia similar to fibromyalgia syndrome in humans. After the induction, it´s possible to test the efficacy of analgesic strategies such as electroacupuncture and acupuncture. This study aimed to identify the effects of acupuncture and electroacupuncture in the hyperalgesia produced by repeated intramuscular injections of acidic saline. Twenty four male Wistar rats were divided into four groups (n = 6, in each group): control, acupuncture, electroacupuncture (EA) 15 Hz and (EA) 100 Hz. Left gastrocnemius muscle from all animals was injected with 100 μL of pH 4.0 sterile saline twice five days apart. Electroacupuncture, acupuncture or control was daily administered (20 min) for 5 consecutive days under isoflurane anesthesia (2% 5%). Needles were placed in the Zuzanli (St36) and Sanyinjiao (SP6). We assessed the secondary mechanical hyperalgesia, thermal hyperalgesia and motor performance before the two injections, and before and after the treatment each day. The results indicate that there was a significant reduction of both mechanical withdrawal threshold and paw withdrawal latency 24 hours following the second injection. Therefore, both mechanical and thermal hyperalgesia were significantly reversed by EA 15 Hz, EA 100 Hz and acupuncture. It can be suggested that as high and low frequency eletroacupuncture as acupuncture is effective in hiperalgesia reducing in this model of chronic muscle pain. / Repetidas injeções de salina ácida no músculo gastrocnêmio de ratos produzem uma hiperalgesia bilateral de longa duração semelhante a fibromialgia em humanos. Após esta indução, é possível analisar a eficácia de modalidades analgésicas como a acupuntura e eletroacupuntura. O objetivo deste estudo foi identificar o efeito da eletroacupuntura e acupuntura na hiperalgesia bilateral produzida por dupla injeção intramuscular de salina ácida. Foram utilizados 24 ratos Wistar machos, divididos em quatro grupos: controle, acupuntura, eletroacupuntura (EA) de 15 Hz e EA de 100 Hz. No músculo gastrocnêmio esquerdo de todos os animais, foi injetado um volume de 100 μL de solução salina estéril pH 4,0 em duas ocasiões, com intervalo de 5 dias entre elas. O tratamento com EA foi feito diariamente por 5 dias consecutivos, com duração de 20 minutos. Os animais foram anestesiados com isoflurano (2% -5%) para possibilitar a intervenção. As agulhas foram colocadas nos pontos Zuzanli (St36) e Sanyinjiao (SP6). Foram avaliados a hiperalgesia mecânica secundária, hiperalgesia térmica e desempenho motor antes das duas injeções, e antes e após o tratamento. Os resultados indicam que ocorreu uma redução significativa do limiar mecânico e da latência térmica 24 horas após a segunda injeção. Além disso, houve reversão significativa da hiperalgesia mecânica e térmica após administração de EA 15 Hz, EA 100 Hz e acupuntura. Estes dados sugerem que tanto a EA em alta ou baixa freqüência quanto a acupuntura são eficazes na redução da hiperalgesia neste modelo de dor muscular crônica.

Orientadores: Adriana Pelegrini da Silva, Claudia Herrera Tambeli / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-11T16:29:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kawashita_PriscilaTiemi_M.pdf: 3277680 bytes, checksum: f367ead0821a5d31b017895210be0074 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A modulação da dor pelo sistema nervoso central (SNC) consiste na inibição ou facilitação da excitabilidade do corno dorsal da coluna espinhal. O núcleo Accumbens (Nacc) e a Substância Cinzenta Periaquedutal (PAG) são duas importantes estruturas envolvidas na modulação da dor pelo SNC. A proposta deste estudo foi investigar o papel destas estruturas na modulação da hiperalgesia inflamatória aguda e persistente, induzida pela administração de Prostaglandina E2 (PGE2) na pata de ratos. A administração local subcutânea de PGE2 induz um quadro de hiperalgesia que cede completamente em 24 horas. Entretanto, duas semanas de injeções intraplantares de PGE2 induzem uma hiperalgesia que persiste por 30 dias após cessar o tratamento. Os resultados deste estudo demonstraram que a microinjeção no NAcc de lidocaína ou de cloreto de cobalto (CoCl2 ), um bloqueador de canal de Cálcio, reduziu significativamente a hiperalgesia persistente, mas não modificou a hiperalgesia mecânica aguda induzida pela PGE2 , medida tanto pelo teste de Randall-Selitto quanto pelo teste de Von Frey. Em contraste, a lidocaína ou o CoCl2 injetados na PAG não modificaram a hiperalgesia persistente, mas aumentaram a hiperalgesia aguda induzida pela PGE2 . Também demonstramos que a administração de L-Glutamato no NAcc restaurou a hiperalgesia persistente inibida pela administração local de Dipirona na pata. Estes resultados sugerem que o NAcc, mas não a PAG, está envolvido na manutenção da hiperalgesia persistente induzida pela PGE2 e pode também participar na recorrência da dor crônica de origem inflamatória / Abstract: The pain modulation by Central Nervous System (CNS) consists in inhibition or facilitation of the spinal dorsal horn excitability. The nucleus accumbens (NAcc) and periaqueductal gray matter (PAG) are two important structures involved in the pain modulation by CNS. The purpose of the present study was to investigate the role of NAcc and PAG on the modulation of the acute and persistent inflammatory hyperalgesia induced by prostaglandin E2 (PGE2) in rat. The local subcutaneous administration of PGE2 induces hiperalgesia that is completely resolved in 24 h. However, 2 weeks of daily intraplantar treatment with PGE2 induces hyperalgesia that persists for more than 30 days after the treatment cessation. The findings of this study demonstrated that the local injection of lidocaine or CoCl2, a calcium channel blocker in the NAcc significantly reduced the persistent, but did not modify acute PGE2-induced mechanical hyperalgesia, measured by either Randall-Sellito or Von Frey tests. In contrast, lidocaine or CoCl2, injected in the PAG did not modify the persistent hyperalgesia, but increased the acute hyperalgesia induced by PGE2. We also demonstrated that the administration of L-glutamate in NAcc restored the persistent hyperalgesia inhibited by the local administration of dipyrone in the hind paw. These results suggest that NAcc, but not PAG is involved in the maintenance of the PGE2-induced persistent hyperalgesia and may also be implicated in the recurrence of chronic pain of inflammatory origin / Mestrado / Fisiologia Oral / Mestre em Odontologia

Odontalgia Atípica (OA) é uma condição dolorosa orofacial crônica de intensidade moderada a severa, que ocorre nas estruturas dentoalveolares e na mucosa oral. É considerada de difícil diagnóstico por estar associada com a ausência de alterações clínicas e radiográficas perceptíveis. Seus aspectos patofisiológicos sensoriais e de manutenção e perpetuação da dor ainda são mal compreendidos. Os objetivos deste estudo foram: (1) avaliar as alterações somatossensoriais em pacientes com OA através dos testes sensoriais quantitativos (QST); (2) ampliar o conhecimento disponível sobre os mecanismos de modulação da dor através do teste de controle de modulação da dor (CPM); e (3) avaliar as condições psicológicas como ansiedade e depressão, qualidade do sono e qualidade de vida através de questionários auto-aplicáveis. Um total de 50 indivíduos foram incluídos, sendo 25 sujeitos do grupo sintomático com OA (19 mulheres, 58,25 +- 12,17 anos de idade) e 25 sujeitos saudáveis do grupo controle (19 mulheres, 58,92 +- 7,39 anos)(p>0.05). Os QSTs englobaram os testes de Limiar de Detecção Mecânica (MDT), Limiar de Sensibilidade Dolorosa Mecânica (PDT), Teste Mecânico de Alodinia com cotonete (DMA1) e escova dental (DMA2), Testes de Detecção Dolorosa do tipo quente (HPD) e gelado (CPD) e o Teste de Somação Temporal (WUR). O controle de modulação da dor foi feito através do teste CPM e as avaliações psicológicas através do Inventário de Ansiedade e Depressão de Beck, o Índice de Qualidade do Sono de Pittsburg e o Questionário de Qualidade de Vida SF-36. Os QSTs foram repetidos após a aplicação de uma pomada anestésica de Benzocaína 2%. A análise estatística foi feita através dos testes t pareado, teste t e o teste não paramétrico de Mann-Whitney, considerando-se um nível de significância de 5%. Os resultados indicaram que sujeitos com OA apresentam ganho sensorial por meio de estímulos térmicos do tipo quente (HPD) e gelado (CPD) e estímulos mecânicos dinâmicos (DMA1, DMA2 e WUR), e perda sensorial à estímulos mecânicos (MDT, PDT). Ainda, o teste CPM reduziu a intensidade da dor significativamente somente para o grupo controle. A aplicação tópica de anestesia indicou uma redução significativa na intensidade da dor nos indivíduos afetados. Além disso, sujeitos com OA apresentaram sintomas de maior depressão e ansiedade, qualidade do sono ruim e baixa qualidade de vida comparados à pacientes saudáveis. Este estudo enfatizou que alterações somatossensoriais significativas são encontradas em sujeitos com OA, onde envolve uma participação de processos periféricos de sensitização e condução da dor, associado à fenômenos de alodínia e hiperalgesia, o que sugere alterações em nível de sensitização central. O sistema modulátorio de dor mostra-se deficiente e as condições psicológicas estão afetadas em sujeitos com OA. / Atypical Odontalgia (AO) is a chronic orofacial painful condition, which occurs in dentoalveolar structures and oral mucosa. AO is difficult to diagnose because it is associated with the absence of any clinical and radiographic alterations. Repetitive dental procedures are made, with the aim to relief pain. Sensory pathophysiological aspects and pain maintenance and perpetuation are still poorly understood. The aim of this study were: (1) evaluate somatosensory abnormalities in AO patients through quantitative sensory testing (QST), (2) evaluate mechanisms of pain modulation through the controlled pain modulation test (CPM), and (3) assess the psychological features such as anxiety, depression, sleep quality and quality of life through selfreported questionnaires. A total of 50 subjects were included, consisting of 25 subjects with symptomatic AO (19 women, 58.25 +- 12.17 years old) and 25 subjects in the control group (19 women, 58.92 +- 7.39 years old)(p>0.05). QST encompassed Mechanical Detection Threshold (MDT), Pain Detection Threshold (PDT), Dynamical Mechanical Allodynia with a cotton swab (DMA1) and with a toothbrush (DMA2), Cold Pain Detection (CPD), Heat Pain Detection (HPD) and Wind-up Ratio (WUR). Pain modulation was performed by CPM and psychological evaluations through Anxiety Inventory and Beck Depression Index, the Pittsburgh Sleep Quality and Quality of Life Questionnaire SF-36. QSTs were repeated after the administration of an anesthetic cream (2% Benzocaine). Statistical analysis was performed using the \"t\" test, paired t test and nonparametric Mann-Whitney test considering a significance level of 5%. Results indicated that AO subjects showed sensory gain through heat (HPD) and cold (CPD) stimuli and dynamic mechanical stimuli (DMA1, DMA2 and WUR), and sensory loss to mechanical stimuli (MDT, PDT). Moreover, CPM reduced pain intensity significantly only in the control group. A topical anesthesia showed a significant reduction in pain intensity in affected subjects. Furthermore, subjects with AO had symptoms of depression and anxiety, poor sleep quality and poor quality of life compared to healthy individuals. This study emphasized that somatosensory abnormalities are found in subjects with AO, which involves participation of peripheral sensitization associated with allodynia and hyperalgesia, suggesting central sensitization abnormalities. Pain modulation system proves deficient and psychological conditions are affected in subjects with AO.

Orientador: Cláudia Herrera Tambeli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-25T14:36:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Teixeira_JulianaMaia_D.pdf: 23889164 bytes, checksum: c8f281ea2cb5d4c68fb62ac535731385 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A osteoartrite (OA) é uma doença degenerativa e progressiva, caracterizada pela degradação da cartilagem que reveste as extremidades ósseas e inflamação da membrana sinovial, causando incapacidade física, inchaço articular e dor. Embora o alívio da dor severa seja o principal objetivo no tratamento agudo, pouco se sabe sobre os mecanismos envolvidos no desenvolvimento da dor na OA. Estudos demonstram a participação do ATP (adenosina 5¿-trifosfato) em processos de hiperalgesia através da ativação dos receptores purinérgicos P2X3, P2X2/3 e P2X7. Portanto, os objetivos deste estudo foram: (1) investigar a participação dos receptores P2X3, P2X2/3 e P2X7 na hiperalgesia articular em modelo de artrite na articulação do joelho de ratos machos e fêmeas em estro e se há diferenças sexuais no efeito induzido pelos antagonistas de receptores P2X3, P2X2/3 e P2X7. (2) testar a hipótese de que a inflamação articular induzida pela carragenina aumenta a expressão do receptor P2X3 nos condrócitos da cartilagem articular da articulação do joelho de ratos. (3) verificar se o mecanismo pelo qual a ativação dos receptores P2X3, P2X2/3 e P2X7 contribui para a hiperalgesia articular depende da liberação prévia de citocinas pró-inflamatórias e da migração de neutrófilos. (4) investigar se a ativação dos receptores P2X3, P2X2/3 e P2X7 induz hiperalgesia na articulação do joelho de ratos dependente da liberação de mediadores inflamatórios. (5) testar a hipótese de que a ativação dos receptores P2X3, P2X2/3 e P2X7 contribui para a hiperalgesia articular induzida pelos mediadores inflamatórios: bradicinina, citocinas pró-inflamatórias, PGE2 e dopamina. Para os objetivos 1, 4 e 5, a hiperalgesia articular foi quantificada através do teste de Incapacitação Articular. Para o objetivo 2, foi utilizado o ensaio de imunofluorescência. Para os objetivos 3 e 4 foram utilizados os ensaios imuno-enzimáticos ELISA e MPO. Os resultados demonstram que a ativação dos receptores P2X3, P2X2/3 e P2X7 pelo ATP endógeno é essencial para o desenvolvimento da hiperalgesia articular induzida pela carragenina na articulação do joelho de ratos machos e fêmeas em estro, que são mais sensíveis do que os machos aos efeitos anti-hiperalgésicos e anti-inflamatórios induzidos pelo antagonista de receptor P2X7. Durante a inflamação articular induzida pela carragenina ocorre um aumento na expressão dos receptores P2X3 nos condrócitos da cartilagem articular. O papel dos receptores P2X3, P2X2/3 e P2X7 na hiperalgesia articular é mediado pela sensibilização indireta dos nociceptores aferentes primários, dependente da liberação prévia de citocinas pró-inflamatórias e da migração de neutrófilos. Além disso, a ativação dos receptores P2X3, P2X2/3 e P2X7 induz hiperalgesia articular dependente da liberação de bradicinina, aminas simpatomiméticas, prostaglandinas e citocinas pró-inflamatórias. Finalmente, a hiperalgesia articular induzida pelos mediadores inflamatórios bradicinina, PGE2 e dopamina depende da ativação de receptores P2X3 e P2X2/3, enquanto que a ativação de receptor P2X7 contribui para a hiperalgesia articular induzida pela bradicinina e dopamina. Concluindo, os resultados apresentados sugerem que os receptores P2X3, P2X2/3 e P2X7 são alvos farmacológicos interessantes para o tratamento das doenças inflamatórias articulares como a osteoartrite. Particularmente em relação ao receptor P2X7, antagonistas seletivos podem ser usados para reduzir a dor e inflamação no joelho, especialmente em mulheres / Abstract: Osteoarthritis (OA) is a degenerative and progressive disease, characterized by cartilage breakdown which covers the bone ends and by synovial membrane inflammation, causing disability, joint swelling and pain. The relief of severe pain is the main goal of the acute treatment, but little is known about the mechanisms involved in the development of pain in OA. It has been demonstrated the role of ATP (adenosine 5'-triphosphate) in processes of hyperalgesia through activation of purinergic receptors P2X3, P2X2/3 and P2X7. Therefore, the aims of this study were: (1) to investigate the role of P2X3, P2X2/3 and P2X7 receptors in articular hyperalgesia in the knee joint arthritis model in males and estrus females rats and, if so, whether there are sex differences in the effect induced by the selective P2X3, P2X2/3 and P2X7 receptors antagonists. (2) to test the hypothesis that the carrageenan-induced articular inflammation increases the expression of P2X3 receptor in chondrocytes of articular cartilage of the knee joint. (3) to verify whether the mechanism by which the P2X3, P2X2/3 and P2X7 receptors activation contributes to articular hyperalgesia depends on previous pro-inflammatory cytokines release and neutrophil migration. (4) to investigate whether the P2X3, P2X2/3 and P2X7 receptors activation induces articular hyperalgesia in the rat¿s knee joint which depends on release of inflammatory mediators. (5) to verify whether the activation of P2X3, P2X2/3 and P2X7 receptors contributes to the articular hyperalgesia induced by the inflammatory mediators bradykinin, pro-inflammatory cytokines, PGE2 and dopamine. For the aims 1, 4 and 5, the articular hyperalgesia was quantified by the rat knee joint Incapacitation Test. The immuno?uorescence method was used for the aim 2. For aims 3 and 4, the ELISA and MPO immunoenzymatic assays were used. The results demonstrate that P2X3, P2X2/3 and P2X7 receptors activation by endogenous ATP is essential for the development of carrageenan-induced articular hyperalgesia in the knee joint of male and estrus female rats, which are more sensitive than males to anti-hyperalgesic and anti-inflammatory effects induced by the P2X7 receptor antagonist. During carrageenan-induced joint inflammation occurs an increased of P2X3 receptors expression in chondrocytes of the articular cartilage. The essential role played by P2X3, P2X2/3 and P2X7 receptors in the development of articular hyperalgesia is mediated by an indirect sensitization of the primary afferent nociceptors dependent on the previous pro-inflammatory cytokines release and neutrophil migration. Moreover, the P2X3, P2X2/3 and P2X7 receptors activation induces articular hyperalgesia which depends on bradykinin, sympathomimetic amines, prostaglandins and pro-inflammatory cytokines release. Finally, the articular hyperalgesia induced by inflammatory mediators bradykinin, PGE2 and dopamine depends on the P2X3 and P2X2/3 receptors activation, while the P2X7 receptor activation contributes to the bradykinin- and dopamine-induced articular hyperalgesia. In conclusion, our results suggest that P2X3, P2X2/3 and P2X7 receptors are interesting pharmacological targets for the treatment of inflammatory joint diseases such as osteoarthritis. In particular, selective P2X7 receptor antagonists can be used to reduce inflammation and pain in the knee joint, especially in women / Doutorado / Fisiologia / Doutora em Biologia Funcional e Molecular