Alguns estudos têm proposto que os acidente ofídicos em crianças estão associados a maior gravidade e ao maior risco de desenvolvimento de complicações comparados aos acidentes em adultos. Este estudo retrospectivo descreve as características de acidentes causados por serpentes do gênero Bothrops admitidos no Hospital Vital Brazil/Instituto Butantan/SP (HVB/IB) e compara a gravidade, e necessidade de soroterapia antiveneno e o risco para o desenvolvimento de complicações entre crianças (menores de 13 anos) e adultos. Trata-se de uma coorte histórica que utilizou dados de prontuários do arquivo do HVB/IB de dezembro de 1999 a junho de 2003. Foram incluídos no estudo pacientes que trouxeram a serpente ou apresentavam manifestações clínicas ou laboratoriais compatíveis com envenenamento botrópico. Não foi observada diferença estatisticamente significante na freqüência da gravidade dos envenenamentos, no número de ampolas administradas e na freqüência de complicações entre os dois grupos estudados. O estudo sugere que os acidentes ofídicos causados por serpentes do gênero Bothrops apresentam gravidade semelhante na avaliação admissional e evolução com a mesma proporção de complicações em crianças quando comparados aos acidentes em adultos / Some studies propose that the level of severity of the accidents caused by snakes in children can be associated with a stronger envenoming and a higher risk of later complication if compared to the same accidents in adults. This retrospective study aim to describe the caracteristics of snakebites acidents of the genus Bothrops, and compare their severities, necessity of antivenom, and the risk of developing later complications between children (less than 13 years) and adults, all the accidents where admitted at Hospital Vital Brazil/Instituto Butantan/SP, Brazil (HVB). This retrospective cohort study was carried out by using HVB\'s records of snakebite victims, from December 1999 to June 2003. Patients included were those who brought the snake and/or have the clinical or laboratorial presence of abnormalities compatible with Bothrops envenoming. No statistic differences were found between the two groups of this study concerning the severity of envenoming, number of antivenom vials and the frequency of complications. This study suggests that snakebite accidents are similar between adults and children. Age is not supposed to be a predictor of complication in such accidents

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-12-07Bitstream added on 2014-06-13T20:17:03Z : No. of bitstreams: 1 bastos_jpst_me_botfmvz.pdf: 410858 bytes, checksum: 65d4c4f6f1d9565cc9e57b146657bfd7 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos de diferentes doses do preparado de anticorpos policlonais (PAP) produzido contra diferentes cepas de bactérias ruminais sobre parâmetros de fermentação ruminal (pH, AGCC, nitrogênio amoniacal e lactato) em bovinos recebendo dieta de alto concentrado. Foram utilizadas oito fêmeas bovinas, canuladas no rúmen, alimentadas (ad libitum) duas vezes ao dia com dieta de alto concentrado. O delineamento experimental utilizado foi o quadrado latino 4 x 4, replicado duas vezes. Os quatro tratamentos foram estruturados de acordo com as diferentes doses do produto (T1: 0,0 g/animal/dia, “controle”; T2: 1,5 g/animal/dia; T3: 3,0 g/animal/dia e T4: 4,5 g/animal/dia) e em diferentes períodos experimentais. Cada período experimental foi constituído de 21 dias, sendo que as colheitas de líquido ruminal foram realizadas a cada duas horas nos tempos de 0 a 12 horas, após a alimentação, no último dia de cada período e posteriormente analisadas. Não foi observado efeito de interação entre tempo e tratamento (p > 0,05) para os dados de pH. Independentemente do tempo de amostragem, não foi observado efeito linear ou quadrático dos níveis de administração do PAP sobre o pH ruminal. Não foram observados efeitos significativos (p > 0,05) sobre a concentração de AGCC total, nitrogênio amoniacal ou proporções molares dos ácidos acético, propiônico e butírico e lactato. Também não foram observados efeitos nos parâmetros de degradabilidade in situ para as três diferentes fontes alimentares utilizadas e para os valores de digestibilidade in vivo. Com isso, pode-se concluir que as diferentes doses do PAP não foram suficientes para alterar o ambiente ruminal sendo necessária à realização de mais testes que refutem ou não essa resposta. / Due the prohibition of antibiotics in ruminants diets arouse the necessity to find new alternatives for ionophores utilization without hazard to human health. The objective of the present study was to evaluate the effects of different doses of polyclonal antibody preparation (PAP) on ruminal fermentation parameters (pH, short chain fatty acids, ammonia nitrogen and lactate) in cattle fed high concentrate diets. Eight rumen cannulated cows were used in a latin square 4x4, twice replicated. The treatments were T1: 0.0 g/animal/day, “control”; T2: 1.5 g/animal/day; T3: 3.0 g/animal/day; T4: 4.5 g/animal/day with four experimental periods with 21 days each. Sample collection was carried out at the last day of each period with two hours of interval between each collection. There was no interaction between time and treatment (p > 0.05) for pH data. Independently from time of sampling there was no linear or quadratic effect on total short chain fatty acids (tSCFA), ammonia nitrogen (NH3-N) or molar proportion of acetate, propionate and butirate. There were no significant differences to degradability and digestibility values in this trial. Thus, it can be concluded that different levels of PAP were not sufficient to alter rumen environment with the necessity of more studies to validate or not this observation.

O objetivo geral desta pesquisa foi avaliar a resposta imune (RI) humoral e celular de bezerros recém-nascidos mediante imunização passiva e ativa, usando como modelo o Vírus da Diarreia Viral Bovina (BVDV) e o Herpesvírus Bovino tipo-1 (BoHV-1). Esta pesquisa foi dividida em duas etapas e seus dados estão apresentados em dois capítulos. Capítulo 1- Acompanhou-se a imunização passiva de bezerros do nascimento até os seis meses de idade e a influência da vacinação materna no período pré-parto nessa resposta. Os animais foram distribuídos em dois grupos experimentais que receberam colostro de mães não imunizadas (G1, n=4) e (G2, n=6) de mães imunizadas no período pré-parto para o BVDV e BoHV-1. A colostragem foi feita pela administração de seis litros de colostro nas primeiras doze horas de vida, distribuídas em duas mamadas. Nesta etapa foi possível verificar: (1) a presença de títulos de ACs neutralizantes apenas no grupo de bezerros que receberam colostro de mães imunizadas, obtendo soroconversão após a mamada de colostro em 2/6 (33%) bezerros para o BVDV e 6/6 (100%) para o BoHV-1; (2) manutenção dos títulos de ACs protetores até os três meses de vida. Em relação a RI celular: (3) observou-se maior proporção de células T auxiliares CD4+ (P=0,05) no grupo de bezerros que receberam colostro de mães imunizadas no período pré-parto; (4) o leucograma dos bezerros demonstrou respostas inflamatórias em alguns momentos desta pesquisa, mais intensa nos animais que ingeriram colostro proveniente de mães nãoimunizadas. Capítulo 2- Acompanhou-se a imunização de bezerros para BVDV e BoHV-1 aos seis meses de idade. Dez bezerros foram distribuídos em dois grupos de bezerros não vacinados (VAC-, n=5) e vacinados para o BVDV e BoHV-1 (VAC+, n=5), as análises foram realizadas antes da imunização aos 180 dias (T0), após a 1°dose aos 210 dias (T1) e após a 2° dose aos 240 dias (T2). Os resultados obtidos para avaliação da RI humoral foram: (1) soroconversão de 2/5 (40%) animais no momento T1 e 3/5 (60%) no T2 para o BVDV; (2) soroconversão em 2/5 (40%) no T1 e 5/5 (100%) no T2 para o BoHV-1. Para a RI celular observou-se: (3) maior expressão de CD25+ pelas subpopulações de linfócitos T gama-delta WC1+ no VAC+, observando-se diferença estatística no momento T1 (P=0,0016). Com base nos resultados obtidos nas duas etapas experimentais desta pesquisa pode-se concluir que a vacinação materna é uma estratégia para melhorar a qualidade do colostro e as repostas imunes humoral e celular dos bezerros para BVDV e BoHV-1; a duração da imunidade materna considerando-se níveis protetores de Acs foi de três meses; os componentes do colostro influenciaram na resposta inflamatória dos bezerros à exposição natural aos patógenos; a vacinação dos bezerros aos seis meses de idade estimulou a resposta imune humoral para BoHV-1 e parcial para BVDV. / The aim of this research was to evaluate the humoral and cellular immune response (IR) of newborn calves by active and passive immunization, using by model the Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV) and Bovine Herpesvirus type-1 (BoHV-1). This research was divided in two stages and the datas are presented in two chapters. Chapter 1: Was followed the passive immunization of calves from birth until six months old and the maternal vaccination influence on pre-partum period on this response. The animals were divided in two experimental groups that received colostrum from unvaccinated mothers (G1, n = 4) and (G2, n=6) from immunized mothers in the pre-partum period to BVDV and BoHV-1. The calves received six liters of colostrums on the first twelve hours of life, divided in two feedings. At this stage was verified: (1) the presence of neutralizing titers antibodies (Abs) only in group of calves that received colostrum from immunized mothers, getting seroconversion after feeding in 2/6 (33%) of calves for BVDV and 6/6 (100%) for BoHV-1, (2) maintenance of Abs titers protectors up to three months of life. In relation to immune cellular response: (3) was observed higher proportion of helper T cells CD4+ (P = 0.05) in the group of calves that received colostrum from immunized mothers during pre-partum; (4) the leukogram of calves showed inflammatory responses in some moments of this research, more intense in animals that ingested colostrums from non-immunized mothers. Chapter 2: Was followed the immunization of calves for BVDV and BoHV-1 at six months old. Ten calves were divided in two groups of calves non-vaccinated (VAC-, n = 5) and vaccinated for BVDV and BoHV-1 (VAC +, n = 5). The analyzes were performed before immunization at 180 days (T0), after the 1st dose at 210 days (T1) and after the 2nd dose at 240 days (T2). The results for evaluation of immune humoral response were: (1) seroconversion 2/5 (40%) animals at the T1 moment and 3/5 (60%) of T2 for BVDV, (2) soroconversion on 2/5 (40 %) in the T1 to 5/5 (100%) at T2 for BoHV-1. For the immune cellular response was observed: (3) increased expression of CD25+ subpopulations of T lymphocytes by gamma-delta WC1+ in VAC+, observing statistical difference in T1 moment (P = 0.0016). Based on the results obtained in the two experimental stages of this research can be concluded that maternal vaccination is a strategy to improve the quality of colostrum and humoral and cellular immune response of calves to BVDV and BoHV-1, the duration of maternal immunity considering protective levels of Abs was three months. The components of colostrum influence the inflammatory response of calves to natural exposure to pathogens. The vaccination of calves at six months old stimulated the humoral immune response to BoHV-1 and partial for BVDV.

As serpentes do gênero Crotalus contribuem com 7,7% dos acidentes ofídicos anuais no Brasil e apresentam a letalidade mais elevada. O veneno crotálico apresenta como componente majoritário a crotoxina, formada pelas sub-unidades fosfolipase A2 (PLA2) e crotapotina, responsável pelos efeitos neurotóxicos e miotóxicos observados nas vítimas de acidente. Nós resolvemos investigar novas estratégias de imunização no sentido de direcionar a produção de anticorpos contra as frações de maior toxicidade do veneno. Utilizamos cavalos como animais soroprodutores, divididos em três grupos experimentais, Animais foram imunizados com veneno de C. d. terrificus, crotoxina, ou PLA2. Os plasmas obtidos foram analisados por testes padrões contra diferentes antígenos crotálicos e comparados com antivenenos produzidos pelo Instituto Butantan. Os resultados obtidos mostram o reconhecimento cruzado do veneno das diferentes Crotalus por todos os antivenenos utilizados, e uma maior especificidade dos plasmas produzidos contra crotoxina e PLA2 pelos componentes de maior toxicidade. / The serpents from Crotalus genus contribute with 7.7% of the annual ophidic accidents in Brazil, and have the highest lethality. The crotalic venom shows crotoxin, formed by the sub-units phospholipase A2 (PLA2) and crotapotin, as a major component and responsible for the neurotoxic and myotoxic effects shown by the snakebite victims. We decided to investigate new immunizations strategies focusing in orientating the immune response against the most toxic fractions of the venom. We used horses as serum producers, divided in three groups. Animals were immunized with either C. d. terrificus venom, crotoxin or PLA2. The plasmas obtained were analyzed by standart immunochemical tests against different crotalic antigens and compared with antivenoms produced by Instituto Butantan. The results show cross-recognition of all Crotalus venoms by the antivenoms, and a higher specificity from the plasmas produced against crotoxin and PLA2 for the most toxic components.

Atualmente, a coqueluche representa um crescente problema de saúde pública em países desenvolvidos. Embora ainda não existam evidências de um aumento do número de casos de coqueluche no nosso país, não se pode descartar a hipótese de uma futura re-emergência da doença, pois dados epidemiológicos de algumas regiões revelam um aumento da incidência, indicando que provavelmente ocorra uma baixa notificação de novos casos ao Ministério da Saúde. A maioria dos casos ainda ocorre em lactentes menores de seis meses de idade, ou seja, crianças ainda não completamente imunizadas. Diversos trabalhos demonstraram a aquisição de anticorpos IgG reativos com Bordetella pertussis pelo recém-nascido através da passagem transplacentária, mas a partir dos dois meses de vida, observa-se um declínio substancial do título destes anticorpos. Neste caso, outro modo de conferir proteção ao neonato é através da transmissão de anticorpos IgA específicos pelo aleitamento materno, que poderia suprir a falta de anticorpos IgG até que o esquema de vacinação esteja completo. Os objetivos deste trabalho foram analisar a transferência passiva de anticorpos IgG e IgA anti-B. pertussis para o recémnascido a termo e investigar a habilidade destes anticorpos em neutralizar a patogenicidade bacteriana em um modelo experimental in vivo utilizando camundongos desafiados por via intracerebral com B. pertussis viável. Foram coletadas 40 amostras pareadas de sangue materno, de cordão umbilical e de colostro. Foram demonstrados títulos equivalentes de anticorpos IgG anti-B. pertussis entre as amostras de soro materno e de cordão (medianas de 1:225 e 1:265, respectivamente) com taxa de transferência de 118%. Foram observados títulos variáveis de anticorpos IgA específicos nas amostras de colostro materno com mediana de 1:74. O Immunoblotting realizado com extrato bruto de B. pertussis e Pools de soro materno, de soro de cordão e de colostro com alto e baixo título de anticorpos específicos revelou um perfil de reconhecimento idêntico entre os Pools de soro materno e dos respectivos neonatos. Os Pools de colostro apresentaram, em seu perfil de reconhecimento, diferentes intensidades que variaram de acordo com os títulos de anticorpos IgA específicos. No desafio intracerebral com B. pertussis, embora todos os Pools de soro materno, de cordão e de colostro tenham apresentado capacidade significativa de neutralizar a patogenia bacteriana quando comparados ao controle positivo, os Pools com alto título de anticorpos revelaram maior capacidade neutralizante. Os Pools de soro e colostro absorvidos com B. pertussis e, portanto, sem anticorpos IgG e IgA específicos, protegeram 30% dos animais testados e anticorpos IgG purificados, apresentando alto título de anticorpos anti-B. pertussis (1:2.560), protegeram 65% dos camundongos. Nossos dados confirmaram a transferência de anticorpos reativos com B. pertussis para o neonato via placenta e aleitamento materno e sua eficácia na neutralização da patogênese bacteriana, o que pode proteger a criança contra infecções respiratórias causadas por Bordetella pertussis. / Pertussis is currently considered an important public health problem in developed countries. Although there is no evidence of an increase in the number of pertussis cases in our country, can not rule out the hypothesis of a future re-emergence of disease, as epidemiological data from some regions show an increase in incidence, indicating that probably there is a low report of new cases to the public health authorities. Most cases still occurs in infants under six months of age, i.e. children not fully immunized. Several works have demonstrated the acquisition of IgG antibodies reactive with Bordetella pertussis by the newborn through placental transfer, but by age of two months it was observed a substantial decay of titers these antibodies. In this case, another way to confer protection the neonate is through the transmission of IgA antibodies via breast-feeding, which could supply the lack of IgG antibodies until the vaccination schedule will be completed. The aims of this work were to analyze the passive transfer of IgG and IgA anti-B. pertussis antibodies to term newborns and to investigate the ability of these antibodies to neutralize the bacterial pathogenicity in an experimental model in vivo using mice intracerebrally challenged with viable B. pertussis. It was collected 40 paired samples of maternal blood, cord umbilical blood and colostrum. Equivalent titers of anti-pertussis IgG antibodies were demonstrated between maternal and cord serum samples (medians of 1:225 and 1:265, respectively) with transfer rate of 118%. It was observed variable specific IgA titers in maternal colostra with a median of 1:74. Immunoblotting performed with B. pertussis crude extract and Pools of maternal serum, cord serum and colostrum with high and low specific antibody titers revealed an identical recognition profile between paired maternal and newborn serum Pools. Colostrum Pools presented, in their recognition profile, different intensities that varied according to specific IgA antibody titers. In the intracerebral challenge with B. pertussis, although all maternal and cord serum and colostrum Pools presented a significant bacterial neutralizing ability when compared with positive control group, Pools with high antibody titers revealed higher neutralizing capacity. Serum and colostrum Pools absorbed with B. pertussis and, thus, without specific IgG and IgA antibodies, protected 30% of the animals tested and purified IgG antibodies, presenting a high anti-pertussis antibody titer (1:2,560), protected 65% of the mice. Our data confirmed the transfer of antibodies reactive with B. pertussis to the neonate via placenta and breast-feeding and their effectiveness in bacterial pathogenesis neutralization, which could protect infants against respiratory infections caused by Bordetella pertussis.

Avaliou-se o efeito de diferentes fontes de colostro, caprino e bovino in natura, e bovino liofilizado em 25 cabritas distribuídas aleatoriamente em cinco tratamentos: CCA - colostro caprino adequado (45 a 55 mg/mL de IgG); CCB - colostro caprino baixo (15 a 25 mg/mL de IgG); CBA - colostro bovino adequado (45 a 55 mg/mL de IgG); CBB - colostro bovino baixo (15 a 25 mg/mL de IgG) e CBL - colostro bovino liofilizado (45 a 55 mg/mL de IgG). Os animais receberam 5% do peso vivo de colostro às 0,12 e 24 horas após o nascimento e, em seguida, leite de vaca duas vezes ao dia e concentrado ad libitum até 60 dias de idade. Amostras de sangue foram coletadas nos dias 0, ½, 1, 2 , 5, 10,15, 20, 25, 30, 35, 40, 50 e 60 de idade. O sangue foi analisado quanto ao valor de hematócrito e a concentração de proteína total (PT). As frações protéicas separadas por eletroforese e a condição de diarréia foi avaliada através de cor, consistência, presença de sangue/muco. As variáveis sanguíneas foram analisadas como medidas repetidas no tempo. Com relação ao valor de hematócrito efeito de período foi observado, o valor no primeiro dia de idade, 28,76±1,76, foi maior que nos 10, 30, 35 e 60 dias de idade, com valores médios de 23,88±0,98, 24,18±0,70, 23,73±0,74 e 24,53±0,79%, respectivamente. Interação entre tratamento e período foi verificado para PT sérica, os tratamentos CCB, CBA, CBB e CBL apresentaram aumento gradativo nas concentrações séricas até os 60 dias de idade, enquanto CCA apresentou valores nos dias 10,15, 40, 50 e 60 dias de idade maiores que o valor ao nascimento. Os valores de albumina sérica foram afetados pelo tratamento e período, sendo o valor em CBL, 2,39±0,12 g/dL, significamente inferior ao dos tratamentos CCA, CCB, CBA e CBB, com 3,20±0,12, 2,94±0,12, 3,25±0,12, 3,08±0,12 g/dL, respectivamente. Um aumento gradativo nas concentrações desta variável foi observado até os 60 dias de idade. Ao 0 e ½ dia de idade os valores de globulina sérica foram menores que os observados na última data experimental, 60 dias de idade. A relação albumina/globulinas sérica foi afetada pelo efeito de tratamento e período, com os valores em CBL significativamente superiores do que em CCA, CCB, CBA e CBB. A relação foi maior ao nascimento diminuindo nas datas subseqüentes, ½ e 1 dia de idade. A variável gamaglobulina apresentou efeito de tratamento e período, com valores em CBL significativamente superiores do que em CCB e CBB, não diferindo dos encontrados em CCA e CBA. Os valores ao 0 e ½ dia de idade foram menores que aos 60 dias de idade. Observando a condição de diarréia nos tratamentos verificou-se que os animais CCB e CBB apresentaram maior frequência de diarréia que os animais dos demais tratamentos, indicando uma relação inversa entre anticorpos no colostro e condição de diarréia. Os resultados indicam que o colostro bovino liofilizado pode ser utilizado para caprinos recém-nascidos como fonte alternativa para a aquisição de proteção inicial. / It was to evaluated the effect of different sources of colostrum, goat and bovine in natura, and lyophilized bovine in 25 newborn female goat kids were randomly allocated to five treatments: GCA - goat colostrum adequate (45 to 55 mg/mL of IgG), GCL - goat colostrum low (15 to 25 mg/mL of IgG), BCA - bovine colostrum adequate (45 to 55 mg/mL of IgG), LBC - bovine colostrum low (15 to 25 mg / mL of IgG) and of treatment CBL, lyophilized bovine colostrum (45 to 55 mg / mL of IgG). The animals received 5% of body weight of colostrum at 0, 12, 24 hr after birth and then, bovine milk twice a day and concentrate ad libitum until 60 days of life. Blood samples were collected in 0, ½, 1, 2 , 5, 10,15, 20, 25, 30, 35, 40, 50 e 60 days of age. Blood was analyzed for hematocrit value and total protein (TP). Protein fractions were separated by electrophoresis and the condition of diarrhea was evaluated by color, consistency, blood/mucus presence. Blood variables analyzed as repeated measures on time.Related to hematocrit values effect of period was observed, the value at one day of age, 28.76±1.76, was higher than at 10, 30, 35 and 60 days of age, with average at 23.88±0.98, 24.18±0.70, 23.73±0.74 and 24.53 ± 0.79%, respectively. Interaction between treatment and period was observed for serum TP, treatments GCL, BCA, BCL, and LBC showed a gradual increase in serum concentrations up to 60 days of age, while GCA showed values on days 10, 15, 40, 50 and 60 days of age, greater than the value at birth. The values of serum albumin were affected by treatment and period, being the value in LBC, 2.39±0.12 g/dL, significantly lower than the GCA treatment, GCL, BCA and BCL, with 3.20±0.12 , 2.94±0.12, 3.25±0.12 and 3.08± 0.12 g/dL, respectively. A gradual increase in the concentrations of this variable was observed until 60 days of age. To 0 and ½ day of age values of serum globulin were significantly lower than the observed at last experimental date, 60 days of age. Serum albumin/globulin relation was affected by the treatment and period with the values in CBL significantly higher than observed in GCA, GCL, BCA and BCL. The relation was higher at birth decreasing in the following dates, ½ and 1 day of age. The variable gamma globulin was affected by treatment and period, with values in LBC significantly higher than in GCL and BCL, not differing from the found in GCA and BCA. The values at 0 and ½ day of age were lower than 60 days of age. Observing the diarrhea condition, in the treatments, it was verified that the GCL and BCL animal had showed higher diarrhea incidence than the animals from the other treatments, indicating an inverse relationship between antibodies in the colostrum and condition of diarrhea. The results indicate that lyophilized bovine colostrum can be used to newborns goat kids as an alternative source for the acquisition of initial protection.

Atualmente, a coqueluche representa um crescente problema de saúde pública em países desenvolvidos. Embora ainda não existam evidências de um aumento do número de casos de coqueluche no nosso país, não se pode descartar a hipótese de uma futura re-emergência da doença, pois dados epidemiológicos de algumas regiões revelam um aumento da incidência, indicando que provavelmente ocorra uma baixa notificação de novos casos ao Ministério da Saúde. A maioria dos casos ainda ocorre em lactentes menores de seis meses de idade, ou seja, crianças ainda não completamente imunizadas. Diversos trabalhos demonstraram a aquisição de anticorpos IgG reativos com Bordetella pertussis pelo recém-nascido através da passagem transplacentária, mas a partir dos dois meses de vida, observa-se um declínio substancial do título destes anticorpos. Neste caso, outro modo de conferir proteção ao neonato é através da transmissão de anticorpos IgA específicos pelo aleitamento materno, que poderia suprir a falta de anticorpos IgG até que o esquema de vacinação esteja completo. Os objetivos deste trabalho foram analisar a transferência passiva de anticorpos IgG e IgA anti-B. pertussis para o recémnascido a termo e investigar a habilidade destes anticorpos em neutralizar a patogenicidade bacteriana em um modelo experimental in vivo utilizando camundongos desafiados por via intracerebral com B. pertussis viável. Foram coletadas 40 amostras pareadas de sangue materno, de cordão umbilical e de colostro. Foram demonstrados títulos equivalentes de anticorpos IgG anti-B. pertussis entre as amostras de soro materno e de cordão (medianas de 1:225 e 1:265, respectivamente) com taxa de transferência de 118%. Foram observados títulos variáveis de anticorpos IgA específicos nas amostras de colostro materno com mediana de 1:74. O Immunoblotting realizado com extrato bruto de B. pertussis e Pools de soro materno, de soro de cordão e de colostro com alto e baixo título de anticorpos específicos revelou um perfil de reconhecimento idêntico entre os Pools de soro materno e dos respectivos neonatos. Os Pools de colostro apresentaram, em seu perfil de reconhecimento, diferentes intensidades que variaram de acordo com os títulos de anticorpos IgA específicos. No desafio intracerebral com B. pertussis, embora todos os Pools de soro materno, de cordão e de colostro tenham apresentado capacidade significativa de neutralizar a patogenia bacteriana quando comparados ao controle positivo, os Pools com alto título de anticorpos revelaram maior capacidade neutralizante. Os Pools de soro e colostro absorvidos com B. pertussis e, portanto, sem anticorpos IgG e IgA específicos, protegeram 30% dos animais testados e anticorpos IgG purificados, apresentando alto título de anticorpos anti-B. pertussis (1:2.560), protegeram 65% dos camundongos. Nossos dados confirmaram a transferência de anticorpos reativos com B. pertussis para o neonato via placenta e aleitamento materno e sua eficácia na neutralização da patogênese bacteriana, o que pode proteger a criança contra infecções respiratórias causadas por Bordetella pertussis. / Pertussis is currently considered an important public health problem in developed countries. Although there is no evidence of an increase in the number of pertussis cases in our country, can not rule out the hypothesis of a future re-emergence of disease, as epidemiological data from some regions show an increase in incidence, indicating that probably there is a low report of new cases to the public health authorities. Most cases still occurs in infants under six months of age, i.e. children not fully immunized. Several works have demonstrated the acquisition of IgG antibodies reactive with Bordetella pertussis by the newborn through placental transfer, but by age of two months it was observed a substantial decay of titers these antibodies. In this case, another way to confer protection the neonate is through the transmission of IgA antibodies via breast-feeding, which could supply the lack of IgG antibodies until the vaccination schedule will be completed. The aims of this work were to analyze the passive transfer of IgG and IgA anti-B. pertussis antibodies to term newborns and to investigate the ability of these antibodies to neutralize the bacterial pathogenicity in an experimental model in vivo using mice intracerebrally challenged with viable B. pertussis. It was collected 40 paired samples of maternal blood, cord umbilical blood and colostrum. Equivalent titers of anti-pertussis IgG antibodies were demonstrated between maternal and cord serum samples (medians of 1:225 and 1:265, respectively) with transfer rate of 118%. It was observed variable specific IgA titers in maternal colostra with a median of 1:74. Immunoblotting performed with B. pertussis crude extract and Pools of maternal serum, cord serum and colostrum with high and low specific antibody titers revealed an identical recognition profile between paired maternal and newborn serum Pools. Colostrum Pools presented, in their recognition profile, different intensities that varied according to specific IgA antibody titers. In the intracerebral challenge with B. pertussis, although all maternal and cord serum and colostrum Pools presented a significant bacterial neutralizing ability when compared with positive control group, Pools with high antibody titers revealed higher neutralizing capacity. Serum and colostrum Pools absorbed with B. pertussis and, thus, without specific IgG and IgA antibodies, protected 30% of the animals tested and purified IgG antibodies, presenting a high anti-pertussis antibody titer (1:2,560), protected 65% of the mice. Our data confirmed the transfer of antibodies reactive with B. pertussis to the neonate via placenta and breast-feeding and their effectiveness in bacterial pathogenesis neutralization, which could protect infants against respiratory infections caused by Bordetella pertussis.

Submitted by IVANA REGINA GONÇALVES null (nanaenf82@hotmail.com) on 2016-12-13T18:58:31Z No. of bitstreams: 1 Tese Ivana Goncalves.pdf: 2035441 bytes, checksum: e2a1f49f031767147cf4e472de95ceea (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-12-15T14:52:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 goncalves_ir_dr_bot.pdf: 2035441 bytes, checksum: e2a1f49f031767147cf4e472de95ceea (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-15T14:52:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 goncalves_ir_dr_bot.pdf: 2035441 bytes, checksum: e2a1f49f031767147cf4e472de95ceea (MD5) Previous issue date: 2016-11-18 / O programa de uso da imunoglobulina palivizumabe teve início em 2007 no Estado de São Paulo e em 2013 estendeu-se nacionalmente, sendo destinado a crianças com maior risco para a infecção pelo Virus Sincicial Respiratório (VSR). Desde seu início, o programa permanece sem avaliação sistemática. O objetivo dessa pesquisa foi avaliar o programa de uso da imunoglobulina palivizumabe no Estado de São Paulo. Foram avaliados os 16 locais de aplicação: cinco Centros de Referência para Imunobiológicos Especiais (CRIE) e 11 postos de aplicação existentes no Estado de São Paulo, seguindo o referencial de avaliação proposto por Donabedian. Dados de estrutura e processo foram obtidos por entrevista com os responsáveis pela aplicação da imunoglobulina; para avaliação de resultado foram entrevistadas as mães das crianças do programa, visando identificar a associação entre falha na tomada do palivizumabe e a necessidade de hospitalização em Unidade de Terapia Intensiva por doença ou sintomatologia respiratória no período de sazonalidade do VSR. Participaram desta pesquisa 693 crianças/responsáveis (85,1% da população elegível), que ingressaram no programa entre março e agosto de 2014, sendo a coleta de dados realizada entre março e setembro do mesmo ano. Para análise de resultado foi utilizado o odds ratio pontual e intervalar com intervalo de confiança de 95%, considerando-se associações estatisticamente significativas se p < 0,05. Para avaliação de estrutura foram consideradas 30 variáveis relacionadas a condições preconizadas pelas políticas públicas de saúde e para o processo elencaram-se 10 variáveis relativas aos cuidados com a aplicação e conservação da imunoglobulina e sala de aplicação, sendo em ambos os casos o serviço classificado de acordo com o percentual de desconformidade em: adequado (até 10%), parcialmente adequado (de 10 a 20%) e inadequado (superior a 20%). Apenas dois locais de aplicação (P7 e P9), tiveram estrutura e processo considerados adequados. Apesar de terem estrutura classificada como adequada, nove locais tiveram processo parcialmente adequado (C2, C3, C4, P3 e P10) ou inadequado (C1, P2, P5 e P8). As principais falhas de estrutura foram relativas à climatização, disponibilidade de medicamentos e materiais para uso em caso de choque anafilático, sala exclusiva para aplicação de imunobiológicos e protocolo de uso da palivizumabe disponível e, no caso do processo, a não aplicação da imunoglobulina em crianças hospitalizadas, falta de supervisão do médico durante a aplicação, falha na temperatura de conservação do produto e não aplicação no mês anterior à sazonalidade. De acordo com os resultados, pode-se verificar que o risco de hospitalização em Unidade de Terapia Intensiva por doença/sintomatologia respiratória foi diretamente proporcional ao número de falhas (p=0,007; OR=1,29, IC=1,07-1,56). Conclui-se que a avaliação da estrutura do programa de uso da imunoglobulina palivizumabe no Estado de São Paulo é, em geral, mais favorável que o processo. Os resultados evidenciaram aumento médio da chance de internação por doença/sintomatologia respiratória de 29% a cada falha no recebimento das doses. / The palivizumab immunoglobulin health program was introduced in 2007 in São Paulo State and it was initiated nationally in 2013, aiming at being administered to highly risk children for respiratory syncytial virus infections. Since its beginning, such a program has remained with no systematic evaluation. The objetive of the present research was evaluate the palivizumab immunoglobulin health program in São Paulo State. For doing so, 16 places of palivizumab application in São Paulo State were considered: five of which are reference centers for special immunobiologicals and other 11 places of application. The theoretical framework adopted for the evaluation was the one proposed by Donabedian. Structural and processual data on the program was obtained by interviewing each worker responsible for the immunoglobulin in each application place. As for the evaluation of the program outcomes, the childrens mothers/responsible were also interviewed with the aim of identifying the association between palivizumab dose failure and respiratory-related hospitalizations in the seasonality period of respiratory syncytial virus. A total of 693 children/responsibles (85.1% of the eligible individuals) composed the research, all of which made part of the program in the period March-August of 2014, being the data collection performed between March and September of the same year. The data was analysed by the punctual and intervalar odds ratio, with a confidence interval of 95% and a statistical significance fixed at 5%. To the evaluation of program structure, 30 variables preconized by the public health policies were considerated; regarding the program process, 10 variables related to the immunoglobulin care of application and conservation and room of application were considered. Structure and process were both classificated as its nonconformity rate in: adequate (less than 10%), partially adequate (from 10% to 20%) and inadequate (greater than 20%). Only in two of the application places (P7 and P9) structure and process were found to be inadequate. Despite having an adequate structure, in nine places the process was found to be either partially adequate (C2, C3, C4, P3 and P10) or inadequate (C1, P2, P5 and P8). The main structural failures were the ones related to: climate control, availability of materials and medicines used in anaphylactic shock, exclusive room for immunobiological application and palivizumab usage protocol availability and, regarding the process, the absence of application in hospitalized children, absence of medical care during the immunoglobulin administration, inappropriate temperature for immunoglobulin conservation and absence of application prior to the respiratory syncytial virus seasonality. According to the results, the hospitalization risk in intensive care unit due to respiratory disease and related-symptoms was directly proportional to the number of dose failures (p=0.007; OR=1.29, IC=1.07-1.56). As a conclusion for the evalution, the structure of the São Paulo State palivizumab immunoglobulin health program is in general more favorable than the process. As for the results, they an average increasing of 29% in respiratory-related hospitalizations in intensive unit to each dose failure in palivizumab adminstration.

Avaliou-se o efeito de diferentes fontes de colostro, caprino e bovino in natura, e bovino liofilizado em 25 cabritas distribuídas aleatoriamente em cinco tratamentos: CCA - colostro caprino adequado (45 a 55 mg/mL de IgG); CCB - colostro caprino baixo (15 a 25 mg/mL de IgG); CBA - colostro bovino adequado (45 a 55 mg/mL de IgG); CBB - colostro bovino baixo (15 a 25 mg/mL de IgG) e CBL - colostro bovino liofilizado (45 a 55 mg/mL de IgG). Os animais receberam 5% do peso vivo de colostro às 0,12 e 24 horas após o nascimento e, em seguida, leite de vaca duas vezes ao dia e concentrado ad libitum até 60 dias de idade. Amostras de sangue foram coletadas nos dias 0, ½, 1, 2 , 5, 10,15, 20, 25, 30, 35, 40, 50 e 60 de idade. O sangue foi analisado quanto ao valor de hematócrito e a concentração de proteína total (PT). As frações protéicas separadas por eletroforese e a condição de diarréia foi avaliada através de cor, consistência, presença de sangue/muco. As variáveis sanguíneas foram analisadas como medidas repetidas no tempo. Com relação ao valor de hematócrito efeito de período foi observado, o valor no primeiro dia de idade, 28,76±1,76, foi maior que nos 10, 30, 35 e 60 dias de idade, com valores médios de 23,88±0,98, 24,18±0,70, 23,73±0,74 e 24,53±0,79%, respectivamente. Interação entre tratamento e período foi verificado para PT sérica, os tratamentos CCB, CBA, CBB e CBL apresentaram aumento gradativo nas concentrações séricas até os 60 dias de idade, enquanto CCA apresentou valores nos dias 10,15, 40, 50 e 60 dias de idade maiores que o valor ao nascimento. Os valores de albumina sérica foram afetados pelo tratamento e período, sendo o valor em CBL, 2,39±0,12 g/dL, significamente inferior ao dos tratamentos CCA, CCB, CBA e CBB, com 3,20±0,12, 2,94±0,12, 3,25±0,12, 3,08±0,12 g/dL, respectivamente. Um aumento gradativo nas concentrações desta variável foi observado até os 60 dias de idade. Ao 0 e ½ dia de idade os valores de globulina sérica foram menores que os observados na última data experimental, 60 dias de idade. A relação albumina/globulinas sérica foi afetada pelo efeito de tratamento e período, com os valores em CBL significativamente superiores do que em CCA, CCB, CBA e CBB. A relação foi maior ao nascimento diminuindo nas datas subseqüentes, ½ e 1 dia de idade. A variável gamaglobulina apresentou efeito de tratamento e período, com valores em CBL significativamente superiores do que em CCB e CBB, não diferindo dos encontrados em CCA e CBA. Os valores ao 0 e ½ dia de idade foram menores que aos 60 dias de idade. Observando a condição de diarréia nos tratamentos verificou-se que os animais CCB e CBB apresentaram maior frequência de diarréia que os animais dos demais tratamentos, indicando uma relação inversa entre anticorpos no colostro e condição de diarréia. Os resultados indicam que o colostro bovino liofilizado pode ser utilizado para caprinos recém-nascidos como fonte alternativa para a aquisição de proteção inicial. / It was to evaluated the effect of different sources of colostrum, goat and bovine in natura, and lyophilized bovine in 25 newborn female goat kids were randomly allocated to five treatments: GCA - goat colostrum adequate (45 to 55 mg/mL of IgG), GCL - goat colostrum low (15 to 25 mg/mL of IgG), BCA - bovine colostrum adequate (45 to 55 mg/mL of IgG), LBC - bovine colostrum low (15 to 25 mg / mL of IgG) and of treatment CBL, lyophilized bovine colostrum (45 to 55 mg / mL of IgG). The animals received 5% of body weight of colostrum at 0, 12, 24 hr after birth and then, bovine milk twice a day and concentrate ad libitum until 60 days of life. Blood samples were collected in 0, ½, 1, 2 , 5, 10,15, 20, 25, 30, 35, 40, 50 e 60 days of age. Blood was analyzed for hematocrit value and total protein (TP). Protein fractions were separated by electrophoresis and the condition of diarrhea was evaluated by color, consistency, blood/mucus presence. Blood variables analyzed as repeated measures on time.Related to hematocrit values effect of period was observed, the value at one day of age, 28.76±1.76, was higher than at 10, 30, 35 and 60 days of age, with average at 23.88±0.98, 24.18±0.70, 23.73±0.74 and 24.53 ± 0.79%, respectively. Interaction between treatment and period was observed for serum TP, treatments GCL, BCA, BCL, and LBC showed a gradual increase in serum concentrations up to 60 days of age, while GCA showed values on days 10, 15, 40, 50 and 60 days of age, greater than the value at birth. The values of serum albumin were affected by treatment and period, being the value in LBC, 2.39±0.12 g/dL, significantly lower than the GCA treatment, GCL, BCA and BCL, with 3.20±0.12 , 2.94±0.12, 3.25±0.12 and 3.08± 0.12 g/dL, respectively. A gradual increase in the concentrations of this variable was observed until 60 days of age. To 0 and ½ day of age values of serum globulin were significantly lower than the observed at last experimental date, 60 days of age. Serum albumin/globulin relation was affected by the treatment and period with the values in CBL significantly higher than observed in GCA, GCL, BCA and BCL. The relation was higher at birth decreasing in the following dates, ½ and 1 day of age. The variable gamma globulin was affected by treatment and period, with values in LBC significantly higher than in GCL and BCL, not differing from the found in GCA and BCA. The values at 0 and ½ day of age were lower than 60 days of age. Observing the diarrhea condition, in the treatments, it was verified that the GCL and BCL animal had showed higher diarrhea incidence than the animals from the other treatments, indicating an inverse relationship between antibodies in the colostrum and condition of diarrhea. The results indicate that lyophilized bovine colostrum can be used to newborns goat kids as an alternative source for the acquisition of initial protection.

Orientador: Cristina Maria Garcia de Lima Parada Parada / Resumo: O programa de uso da imunoglobulina palivizumabe teve início em 2007 no Estado de São Paulo e em 2013 estendeu-se nacionalmente, sendo destinado a crianças com maior risco para a infecção pelo Virus Sincicial Respiratório (VSR). Desde seu início, o programa permanece sem avaliação sistemática. O objetivo dessa pesquisa foi avaliar o programa de uso da imunoglobulina palivizumabe no Estado de São Paulo. Foram avaliados os 16 locais de aplicação: cinco Centros de Referência para Imunobiológicos Especiais (CRIE) e 11 postos de aplicação existentes no Estado de São Paulo, seguindo o referencial de avaliação proposto por Donabedian. Dados de estrutura e processo foram obtidos por entrevista com os responsáveis pela aplicação da imunoglobulina; para avaliação de resultado foram entrevistadas as mães das crianças do programa, visando identificar a associação entre falha na tomada do palivizumabe e a necessidade de hospitalização em Unidade de Terapia Intensiva por doença ou sintomatologia respiratória no período de sazonalidade do VSR. Participaram desta pesquisa 693 crianças/responsáveis (85,1% da população elegível), que ingressaram no programa entre março e agosto de 2014, sendo a coleta de dados realizada entre março e setembro do mesmo ano. Para análise de resultado foi utilizado o odds ratio pontual e intervalar com intervalo de confiança de 95%, considerando-se associações estatisticamente significativas se p < 0,05. Para avaliação de estrutura foram consideradas 30 variáveis... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor