CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A cistite hemorrÃgica (CH) à um fenÃmeno inflamatÃrio frequentemente associado à quimioterapia com oxazafosforinas. Trata-se de uma resposta inflamatÃria inata à aÃÃo da AcroleÃna (ACR), metabÃlito hepÃtico comum à Ifosfamida (IFO) e à ciclofosfamida (CTX). O papel da resposta ao recrutamento de receptores toll-like (TLR) e do estÃmulo por TNF-α e IL-1β com envolvimentto de iNOS e COX-2 tem sido demonstrado neste fenÃmeno. Estudos recentes demonstram que a Pentraxina 3 (PTX3) assume papel de mediador inflamatÃrio em modelos de resposta inflamatÃria inata in vivo, sobretudo relacionada ao recrutamento de TLR. Desta forma, o presente estudo pretende investigar o possÃvel envolvimento de PTX3 na patogÃnese da CH induzida por ifosfamida em camundongos. Para isso, foi realizada quantificaÃÃo de RNAm por RT-PCR para PTX3 e IL-1β em camundongos C57/ BL6 tratados com ifosfamida e salina. Em seguida, o modelo experimental da CH induzida por ifosfamida foi reproduzido em grupos de camundongos com hiperexpressÃo e nocauteados para PTX3 em comparaÃÃo com os respectivos controles do tipo selvagem e com grupos controle tratados com salina para posterior obtenÃÃo dos pesos vesicais Ãmidos (PVU), realizaÃÃo de anÃlise histomorfomÃtrica, imunohistoquÃmica e quantificaÃÃo de RNAm por RT-PCR para PTX3, IL-1β, TNF-α e iNOS. Os animais transgÃnicos e seus controles foram sacrificados com tempos de 3h e 12h apÃs o tratamento, enquanto os nocauteados e seus controles foram sacrificados com 12 horas do tratamento. Finalmente, a CH em animais C57/ BL6 foi modulada com o prÃ-tratamento com Talidomida, Pentoxifilina, MESNA, Amifostina e Aminoguanidina para a posterior marcaÃÃo imunohistoquÃmica com PTX3, IL-1β, TNF-α e iNOS. Observou-se que o RNAm de PTX3 està cerca de 70 vezes mais expresso em animais com CH, contra uma razÃo de expressÃo de 10 para IL-1β. Animais trangÃnicos para PTX3 tÃm reduÃÃo inicial da resposta inflamatÃria com expressÃo inferior de PTX3 e TNF-α e expressÃo aumentada de iNOS e intensificaÃÃo da inflamaÃÃo ao tempo de 12 horas, com expressÃo superior dos mediadores. NÃo houve diferenÃas significativas de intensidade da CH em animais KO em relaÃÃo aos controles. A modulaÃÃo da CH por talidomida e MESNA produziu reduÃÃo importante sobre a expressÃo de PTX3, enquanto a inibiÃÃo da CH por amifostina nÃo teve reduÃÃo expressiva da pentraxina. Em conjunto, estes dados apontam para um envolvimento inequÃvoco de PTX3 na fisiopatologia da inflamaÃÃo inata em modelo de CH murino com Ãntima relaÃÃo coma expressÃo de TNF-α / The Hemorrhagic Cystitis (HC) is an inflammatory reaction usually associated with Cancer Chemotherapy with Oxazaphosphorines. It is an innate inflammatory response to vesical irritation by Acrolein, an hepatic metabolite of the treatment with Iphosphamide and Cyclophosphamide. The role of toll-like receptor (TLR) engagement and TNF-α and IL-1β expression and the involvement of iNOS and COX-2 in the pathogenesis has been well demonstrated in a murine model of HC. Recent data configure pentraxin 3 (PTX3) as an inflammatory mediator in several experimental models of innate immune response in vivo, with a straight relation with TLR engagement. Because of that, this study looks at the involvement of PTX3 in the pathogenesis of iphosphamideâinduced HC in mice. For this purpose, the mRNA to PTX3 and IL-1β t was quantified by RT-PCR in groups of C57BL6 mice treated with Iphosphamide or Saline. After that, groups of transgenic and Knock-Out mice to PTX3 and its respectives wild-type controls were treated with Iphosphamide or saline with intention to measure the Bladder Wet Weight (BWW), histomorphometric scores and Immunohistochemistry and RT-PCR to PTX3, IL-1β, TNF-α e iNOS analysis. The transgenic mice and its controls were killed in 3h and 12h after the treatment, while the PTX3 KO and its controls were killed after 12 hours. Finally, the experimental HC was modulated by pretreatment with Talidomide, Pentoxiphiline, MESNA, Amifostine and Aminoguanidine and the bladders submitted to immunohistochemistry assay (PTX3, TNF-α, IL-1β and iNOS). By RT-PCR quantification, mRNA for PTX3 was expressed 70 times more in mice treated with iphosphamide than in controls, while IL-1β RNAm had an expression rate of 10 times. PTX3 transgenic mice had initial reduction of the inflammatory response with less expression of PTX3 and TNF-α and greater expression of iNOS. In the other hand, after 12 hours, the PTX3 transgenic mice had more inflammatory signs with superior expression of all the mediators. There was no difference between the PTX3 KO mice and its controls in the HC intensity although differences between groups were seen in cytokines expression. Talidomide and MESNA produced substantial reduction on the PTX3 expression, the same was seen to TNF-α, while the amifostine marked inhibition of HC had low effect on PTX3 expression. These data as a whole, point to an unequivocal involvement of PTX3 in the pathogenesis of innate inflammatory response of HC in mice with close relation with TNF-α engagement

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Lectins are non-immune (glyco)proteins that can recognize and reversibly bind to carbohydrates or other substances derived from sugars. Lonchocarpus sericeus seeds (LSL) shows a molecular mass of 23555  15 Da and a a-metyl glucopyranoside and N-acetyl-glucosamine binding specificity. The aim of this work was to evaluate the antinoceptive and antiinflammatory activity of lectin from Lonchocarpus sericeus seeds (LSL). To do so, we used swiss mice (25-35g). In the antiinflammatory activity studying, LSL (10 or 100 mg/kg; i.v.; 15 minutes) inhibited the migration (neutrophil rolling and adhesion) to the peritoneal cavities of animals stimulated with carrageenan (Cg), and the effect seems to be related to the cytokines (TNF-a and IL-1b) and chemokines (MIP-1a [CCL3], KC [CXCL1]) level reduction induced by this lectin. The LSL inhibitory effect on the neutrophil migration seems to be also related to the nitric oxide (NO) systemic levels increasing. LSL was effective on the NO increasing on animalsâ serum. The pretreatment of mice using aminoguanidin (nitric oxide reduced synthase inhibitor) reversed the antiinflammatory effect of lectin on the neutrophil migration. Still referring to the anti-inflammatory activity, LSL was effective on inhibiting the neutrophil migration to the peritoneal cavities of animals immunized and stimulated with ovalbumin (OVA), but the lectin was unable to inhibit an in vitro neutrophil migration induced by MIP-2, showing an indirect action of LSL (cytokines and chemokines) on the migration inhibition. In the antinoceptive study, LSL (3 or 10 mg/kg; i.v.; 30 minutes) reduced abdominal contortion induced by acetic acid and only decreased the second phase of formalin test, showing an activity on the inflammatory pain. In the hot plate test LSL didnât show any effects. To evaluate the anti-inflammatory pain, we did a study based on the anthihypernociceptive activity. Thus, LSL (10 or 100 mg/kg; i.v.; 15 minutes) inhibited the mechanical hypernociception induced by carrageenan and ovalbumin (immunized animals) intraplantarly administration, but not induced by prostaglandin E2. (PGE2). This effect was correlated to the block of neutrophil influx, suggested by the reduction of myeloperoxidase (MPO) levels on animalâs paws pretreated with LSL (3 or 10 mg/kg; i.v.; 15 minutes) and stimulated with carregeenan. This antihyperalgesic effect seems to be highly dependent of the cytokines (TNF-a and IL-1b) and chemokines (MIP-1a [CCL3], KC [CXCL1]) level decreasing, since LSL (10 or 100 mg/kg; i.v.; 15 minutes) reduced these mediatorsâ levels on animalâs paws pretreated with Cg (intraplantar). Corresponding to the possible central activity, LSL (10 mg/kg; i.v.) did not alter the motor activity and not provoked depression on animals. LSL acute toxicity was evaluated by treating the rats with LSL (10 mg/kg; i.v.) during seven days analyzing several parameters of the animals: kidney functions (wet weight, urea dosage), liver functions (wet weight, kinetic evaluation of aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase), heart (wet weight) stomach (wet weight and visual evaluation of possible lesions), variation in body weight of treated animals and leukogram. The obtained results didnât show any alteration on the evaluated parameters suggesting that LSL doesnât show any toxicity on animals. In conclusion, the antinoceptive and antihyperalgesic activity of LSL are associated to the inhibition of the neutrophil migration; it is probably a reflection of an inhibition on cytokines and chemokines free flowing and for the increasing of NO free flow. Additionally, this lectin doesnât show acute toxicity and central effects / Lectinas sÃo (glico)proteÃnas de origem nÃo imune e que podem reconhecer e se ligar reversivelmente a carboidratos ou a outras substÃncias derivadas de aÃÃcares. A lectina de sementes de Lonchocarpus sericeus (LSL) apresenta massa molecular aparente de 23555  15 Da e especificidade de ligaÃÃo a N-acetil-glicosamina e α -metil-glicopiranosÃdeo. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antiinflamatÃria e antinociceptiva da Lectina de sementes de Lonchocarpus sericeus (LSL). Para tal, utilizamos camundongos Swiss albinos (25-35g). No estudo da atividade antiinflamatÃria, LSL (3 ou 10 mg/kg; e.v.; 15 minutos) inibiu a migraÃÃo (rolamento e adesÃo de neutrÃfilos) para a cavidade abdominal de animais estimulados com carragenina (Cg), e este efeito parece estar relacionado com a reduÃÃo dos nÃveis de citocinas (TNF-α and IL-1β) e quimiocinas (MIP-1α [CCL3], KC [CXCL1]) por esta lectina. O efeito inibitÃrio da LSL sobre a migraÃÃo de neutrÃfilos, parece tambÃm envolver o aumento nos nÃveis sistÃmicos de Ãxido nÃtrico (NO), pois LSL (10 mg/kg; e.v.) foi capaz de aumentar os nÃveis de NO no soro de animais, e o prÃ-tratamento de camundongos com aminoguanidina (inibidor da Ãxido nÃtrico sintase induzida) foi capaz de reverter o efeito aniinflamatÃrio desta lectina sobre a migraÃÃo de neutrÃfilos. Ainda em relaÃÃo à atividade antiinflamatÃria, LSL foi capaz de inibir a migraÃÃo de neutrÃfilos para a cavidade peritoneal de animais imunizados e estimulados com ovoalbumina (OVA), porÃm, esta mesma lectina foi ineficaz em inibir a migraÃÃo de neutrÃfilos in vitro estimulada por MIP-2, demonstrando entÃo um papel indireto da LSL (reduÃÃo de citocinas e quimiocinas) na inibiÃÃo da migraÃÃo. No estudo da atividade antinociceptiva, LSL (10 ou 100 mg/kg; e.v.; 15 minutos) reduziu as contorÃÃes abdominais induzidas por Ãcido acÃtico e diminuiu somente a segunda fase do teste da formalina, demostrando uma atividade sobre a dor inflamatÃria. No teste da placa quente, LSL nÃo apresentou efeito. Para avaliar a dor inflamatÃria realizaram-se estudos de atividade antihipernociceptiva. Assim, LSL (3 ou 10 mg/kg; e.v.; 15 minutos) inibiu a hipernocicepÃÃo mecÃnica induzida por administraÃÃo intraplantar de carragenina e ovalbumina (animais imunizados) mas nÃo a induzida por prostaglandina E2 (PGE2). Este efeito foi correlacionado ao bloqueio do influxo de neutrÃfilos, sugerido pela reduÃÃo dos nÃveis de mieloperoxidase (MPO) nas patas de animais prÃ-tratados com LSL (3 ou 10 mg/kg; e.v.; 15 minutos) e estimulados com carragenina. Este efeito antihiperalgÃsico parece tambÃm depender da reduÃÃo dos nÃveis de citocinas (TNF-α and IL-1β) e quimiocinas (MIP-1α [CCL3], KC [CXCL1]), uma vez que LSL (3 ou 10 mg/kg; e.v.; 15 minutos) reduziu os nÃveis destes mediadores no tecido da pata de animais estimulados com Cg (intraplantar). Em relaÃÃo a uma possÃvel atividade central, LSL (10 mg/kg; e.v.) nÃo alterou a atividade motora e nem provocou depressÃo nos animais. A toxicidade aguda foi avaliada pelo tratamento de camundongos com LSL (10 mg/kg; e.v.), durante sete dias consecutivos, atravÃs de vÃrios parÃmetros: funÃÃes do rim (peso Ãmido, dosagem de urÃia) e do fÃgado (peso Ãmido, avaliaÃÃo da cinÃtica da aspartato amino transaminase e alanina amino transaminase), coraÃÃo (peso Ãmido), estÃmago (peso Ãmido e avaliaÃÃo visual de possÃveis lesÃes), variaÃÃo de massa corporal dos animais tratados e leucograma. Os resultados obtidos nÃo mostraram qualquer alteraÃÃo dos parÃmetros avaliados, demonstrando que a LSL nÃo apresenta nenhuma toxicidade nos animais. Em conclusÃo, a atividade antiinflamatÃria e antinociceptiva da LSL està associada com a inibiÃÃo da migraÃÃo de neutrÃfilos, que provavelmete à reflexo da inibiÃÃo da liberaÃÃo de citocinas e quimiocinas e do aumento na liberaÃÃo de NO. Adicionalmente, esta lectina nÃo apresenta efeitos centrais nem toxicidade aguda

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A palatoplastia à o procedimento cirÃrgico que visa o fechamento da comunicaÃÃo das cavidades nasal e oral, resultante do nÃo fechamento dos processos palatinos embrionÃrios, na Ãpoca de formaÃÃo da face. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da L-alanil-glutamina sobre o estresse oxidativo, o controle glicÃmico e a resposta inflamatÃria em pacientes portadores de fissuras lÃbio-palatais, submetidos à palatoplastia. O estudo foi prospectivo, simples cego, randomizado e controlado por placebo, sendo constituÃdo por 30 (trinta) crianÃas do sexo masculino, na faixa etÃria entre 02 e 10 anos de idade, distribuÃdos em 02 grupos: Grupo A - Controle, n = 15, em que foi administrado a cada crianÃa 100ml de soro fisiolÃgico a 0,9% e Grupo B â L-alanil-glutamina, n = 15, em que foi administrada a cada crianÃa uma soluÃÃo de 100ml com L-alanil-glutamina à 20%, 0,5g/kg/dose (DipeptivenÂ) e Soro FisiolÃgico a 0,9%. O Projeto de Pesquisa foi submetido ao Comità de Ãtica em Pesquisa do Hospital Infantil Albert Sabin sendo aprovado sob o registro N 51/06 de 29 de maio de 2006. Foi colhido sangue venoso perifÃrico, em 05 tempos diferentes: T1- 03 horas antes do procedimento cirÃrgico; T2- apÃs a administraÃÃo da soluÃÃo (antes do procedimento cirÃrgico); T3- apÃs o procedimento cirÃrgico; T4- 06 horas de pÃs-operatÃrio e T5- 12 horas de pÃs-operatÃrio. Foram determinadas as concentraÃÃes de: glutationa, SubstÃncias Reativas do Ãcido TiobarbitÃrico(TBARS), glicose, insulina, proteÃna C reativa (PCR), interleucina-6 (IL-6) e interleucina-10 (IL-10). ComparaÃÃes entre os grupos Controle e L-alanil-glutamina foram feitas mediante o uso do teste t para variÃveis nÃo emparelhadas (dados paramÃtricos) ou do teste U de Mann-Whitney (dados nÃo paramÃtricos), sendo considerado como estatisticamente significante um valor P < 0,05. Para os parÃmetros avaliados de peso e idade, nÃo foram constatadas diferenÃas estatisticamente significantes entre os grupos. Em todos os tempos estudados, entre os grupos, nÃo foram verificadas diferenÃas estatisticamente significantes para glicose, insulina, TBARS, glutationa, IL-6 e IL-10. Houve um aumento, no T4 [(Grupo A - 20,472 [11,637-27,780] versus T1 0,0 [0,0-2,226] p<0,05; T2 0,0 [0,0-2,140] p<0.01 e T3 0,625 [0,0-2,153] p<0.01) (Grupo B â 19,317 [11,670-24,048] versus T1 1,888 [0,559-5,295] p<0,05; T2 0,0 [0,0-1,316] p<0,001 e T3 0,0 [0,0-2,757] p<0,05)] e no T5 [(Grupo A â 22,129 [9,721-33,225] versus T1 0,0 [0,0-2,226]p<0,01; T2 0,0 [0,0-2,140] p<0,001; T3 0,625 [0,0-2,153]p<0,001) (Grupo B â 22,177 [11,157-33,407] versus T1 1,888 [0,559-5,295]p<0,01; T2 0,0 [0,0-1,316]p<0,001; T3 0,0 [0,0-2,757]p<0,01)], da IL-6 em relaÃÃo aos tempos T1, T2 e T3, em ambos os Grupos. A infusÃo de L-alanil-glutamina, no grupo B, induziu queda significante nas concentraÃÃes de PCR quando comparadas Ãs do grupo Controle, no T5 (3,6 [3,160-5,05] versus 8,4 [4,1-11,9]) (p=0,0037). Como conclusÃo, reduÃÃo significante na dosagem da PCR, 12 horas apÃs o procedimento cirÃrgico, em crianÃas recipientes de L-alanil-glutamina, reflete menor resposta inflamatÃria. / The palatoplasty is the surgical procedure aimed at closing the communication of the nasal and oral cavities, not resulting from the processes palatins embryonic closing at the time of formation of the face. The objective of this study was to evaluate the effect of L-alanyl-glutamine on the oxidative stress, the glycemic control and inflammatory response in cleft palate and lip patients, submitted to palatoplasty. The study was prospective, single blind, randomized, placebo-controlled, and is comprised of 30 (thirty) male children in the age group between 02 and 10 years of age, divided into 02 groups: Group A-Control, n = 15 , which were administered to each child 100ml of saline solution to 0.9% and Group B- L-alanyl-glutamine, n = 15, which were administered to each child a solution of 100ml with L-alanyl-glutamine to 20 %, 0.5 g / kg / dose (Dipeptiven Â) and saline solution to 0.9%. The Research Project was submitted to the Committee of Ethics in Research of Hospital Infantil Albert Sabin being approved under the registry No 51/06 of May 29, 2006. It was picked peripheral venous blood, at 05 times different: T1- 03 hours prior to the surgical procedure; T2- after administration of the solution (before the surgical procedure), T3- after the surgical procedure, T4- 06 hours post-operative and T5- 12 hours post-operative. The concentrations were determined of: glutathione, Tiobarbituric Acid of Reactivates substances (TBARS), glucose, insulin, C-reactive protein (CRP), interleukin-6 (IL-6) and interleukin-10 (IL-10) . Comparisons between groups Control and L-alanyl-glutamine were made using the t test for not paired variables ( parametric data) or the U test of Mann-Whitney ( not parametric data), and is regarded as statistically significant P value < 0.05. For the parameters evaluated in weight and age, no statistically significant differences were found between groups. In all the times studied, there were no statistically significant differences in glucose, insulin, TBARS, glutathione, IL-6 and IL-10, there was an increase in T4 [(Grupo A - 20,472 [11,637-27,780] versus T1 0,0 [0,0-2,226] p<0,05; T2 0,0 [0,0-2,140] p<0.01 e T3 0,625 [0,0-2,153] p<0.01) (Grupo B â 19,317 [11,670-24,048] versus T1 1,888 [0,559-5,295] p<0,05; T2 0,0 [0,0-1,316] p<0,001 e T3 0,0 [0,0-2,757] p<0,05)] and T5[(Grupo A â 22,129 [9,721-33,225] versus T1 0,0 [0,0-2,226]p<0,01; T2 0,0 [0,0-2,140] p<0,001; T3 0,625 [0,0-2,153]p<0,001) (Grupo B â 22,177 [11,157-33,407] versus T1 1,888 [0,559-5,295]p<0,01; T2 0,0 [0,0-1,316]p<0,001; T3 0,0 [0,0-2,757]p<0,01), of the IL-6, regarding times T1, T2 and T3, for the two groups. In assessing the CRP, children of the L-alanyi-glutamine group, compared to patients in the group Control showed a significant reduction, in T5 (3,6 [3,160-5,05] versus 8,4 [4,1-11,9]) (p=0.0037). In conclusion, significant reduction in the dosage of CRP, 12 hours after the surgical procedure in children who received L-alanyl - glutamine, reflects lower inflammatory response.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / No presente trabalho, uma fraÃÃo polissacarÃdica sulfatada obtida da alga marinha Acanthophora muscoides (AmII) foi avaliada atravÃs de modelos de nocicepÃÃo e inflamaÃÃo. A toxicidade sistÃmica dos polissacarÃdeos sulfatados totais tambÃm foi analisada. A atividade antinociceptiva foi avaliada atravÃs dos ensaios de contorÃÃes abdominais induzidas por Ãcido acÃtico, teste da formalina e da placa quente. Camundongos Swiss machos foram tratados com AmII (1, 3 ou 9 mg/kg; i.v.) 30 min antes de receber injeÃÃo de Ãcido acÃtico 0,8% ou formalina 1% ou antes da exposiÃÃo a um estÃmulo tÃrmico. AmII reduziu significativamente o nÃmero de contorÃÃes abdominais induzidas por Ãcido acÃtico e o tempo lambedura da pata na segunda fase do teste da formalina. No teste da placa quente, AmII nÃo prolongou o tempo de reaÃÃo dos animais. A atividade antiinflamatÃria foi avaliada atravÃs do ensaio de migraÃÃo de cÃlulas atravÃs da cavidade peritoneal induzida por carragenana (700 &#956;g/ cavidade) e dos ensaios de edema de pata induzidos por carragenana (500 &#956;g/pata) ou por dextrano (400 &#956;g/pata). Ratos Wistar foram tratados com AmII (1, 3 ou 9 mg/kg; s.c.) 60 min antes do estÃmulo inflamatÃrio. AmII reduziu significativamente a migraÃÃo de neutrÃfilos atravÃs da cavidade peritoneal. No ensaio do edema de pata induzido por carragenana, AmII nÃo reduziu a formaÃÃo do edema e a migraÃÃo neutrofÃlica, analisada atravÃs da determinaÃÃo dos nÃveis teciduais de mieloperoxidase. Entretanto, AmII inibiu o edema de pata induzido por dextrano no primeiro intervalo analisado. Adicionalmente, quando AmII (500 &#956;g) foi injetada (s.c.) na pata, para verificar um possÃvel efeito edematogÃnico, nÃo foi observado edema. No ensaio de toxicidade subcrÃnica, camundongos foram tratados diariamente durante 14 dias com os polissacarÃdeos sulfatados totais de A. muscoides (20 mg/kg; i.p.). Sinais consistentes de dano sistÃmico nÃo foram observados, conforme revelado pela avaliaÃÃo do peso corporal e dos ÃrgÃos fÃgado, rim, coraÃÃo, baÃo, timo, e linfonodo e das anÃlises bioquÃmicas, hematolÃgicas e histopatolÃgicas. Como conclusÃo, a fraÃÃo AmII possui propriedades antinociceptiva e antiinflamatÃria e representa um potecial agente terapÃutico, justificando estudos futuros. / Herein, a sulfated polysaccharidic fraction obtained from the marine alga Acanthophora muscoides (AmII) was evaluated using models of nociception and inflammation. The systemic toxicity of the total sulfated polysaccharides was also assessed. The antinociceptive properties were assayed using the writhing test induced by acetic acid, the formalin and the hot plate test. Swiss mice were treated with AmII (1, 3 or 9 mg/kg; i.v.) 30 min prior to either receiving an injection of 0.8% acetic acid or 1% formalin or prior to a thermal stimulus. AmII reduced the number of acetic acid-induced writhes and licking time in the second phase of the formalin test, but it did not alter the response latency in the hot plate test. The anti-inflammatory properties were assayed using the carrageenan-induced neutrophil migration into the peritoneal cavity and carrageenan- or dextran-induced paw edema models. Wistar rats were treated with AmII (1, 3 or 9 mg/kg; s.c.) 60 min prior to inflammatory stimuli. AmII reduced significantly the neutrophil migration into the peritoneal cavity. In the carrageenan-induced paw edema, AmII did not reduce the edema formation or the neutrophil migration, as assessed by the determination of myeloperoxidase levels in the paw tissue. However, AmII reduced dextran-induced paw edema during the first interval analysed. Furthermore, when AmII (500 &#956;g) was injected (s.c.) into the paw, to verify a possible edematogenic effect, no edema was observed. Additionally, when mice were treated with the total sulfated polysaccharides from A. muscoides (20 mg/kg; i.p.) for 14 days, no consistent signs of systemic damage were observed, as revealed by body weight, liver, kidney, heart, spleen, thymus and lymph node wet weight and by biochemical, hematological and histopathological analyses. In conclusion, AmII has antinociceptive and anti-inflammatory properties and represents a potencial therapeutic agent warranting future studies.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / MovimentaÃÃo dentÃria induzida (MDI) à um processo inflamatÃrio, que combina respostas patolÃgicas e fisiolÃgicas a forÃas aplicadas aos dentes. Um dos principais mediadores responsÃveis pela MDI à a Prostaglandina que tambÃm relaciona-se à eventos Ãlgicos. Paracetamol (PAR) e Dipirona SÃdica (DIP) sÃo fÃrmacos analgÃsicos que nÃo interferem significantemente em mediadores inflamatÃrios perifÃricos. Sabendo que o PAR nÃo interfere no processo de remodelaÃÃo Ãssea durante a MDI, parece-nos razoÃvel avaliar o efeito da DIP no processo de remodelaÃÃo Ãssea. Assim o objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da DIP na remodelaÃÃo Ãssea utilizando o modelo de MDI em ratos Wistar machos distribuÃdos em grupos: Salina (SAL=2 ml/kg), Paracetamol (PAR 200 mg/kg) e Dipirona sÃdica dividido em 3 subgrupos (DIP 25; 75 ou 225 mg/kg), administrados por via oral, diariamente 30 min antes da instalaÃÃo do dispositivo ortodÃntico entre o 1 molar superior esquerdo e os incisivos durante 4 dias, quando, entÃo, foram sacrificados e os seguintes parÃmetros avaliados: 1) AnÃlises microscÃpicas do periodonto atravÃs de: a) estudos histolÃgico semi-quantitativo, morfomÃtrico e marcaÃÃo imunohistoquÃmica para TRAP; b) anÃlises da atividade da mieloperoxidase (MPO) gengival; 2) Dosagem sÃrica de Fosfatase Alcalina Ãssea (FAO); e 3) AvaliaÃÃo sistÃmica atravÃs de: a) leucograma; b) dosagens sÃricas de TGO e TGP e c) variaÃÃo de massa corpÃrea. Os animais submetidos a 4 dias de MDI apresentaram Ãreas hialinas extensas, espessura de ligamento periodontal diminuÃda e tecido Ãsseo frontal irregular [Mediana: 3 (2-3)], quando comparado ao grupo Normal [0 (0-0)] (p<0,05). O tratamento com PAR [3 (0-3)] foi histologicamente semelhante a SAL. DIP nÃo reverteu os achados histolÃgicos [DIP 25=3 (0-3); DIP 75=3 (3-3); DIP 225=3 (2-3)] quando comparados aos controles SAL e PAR. O grupo SAL apresentou percentual de Ãreas hialÃnicas de 12,5Â0,9%, diferente do grupo Normal (0%) (p<0,05), porÃm semelhante aos grupos tratados com PAR (12,2Â1,2%) e DIP (25=10,7Â0,7%; 75=11,0Â0,8%; 225=10,8Â1,0%). Todos os grupos experimentais apresentaram imunomarcaÃÃo positiva para TRAP. DIP nÃo impediu o aumento da atividade de MPO quando comparado ao grupo Normal (p<0,05), contudo causou reduÃÃo significante de MPO DIP (25=48,9%; 75=43,1%; 225=43,5%) quando comparada à SAL ou PAR (p<0,05). Todos os grupos apresentaram reduÃÃo significante dos nÃveis de FAO, SAL=54,3%; PAR=62,4%; DIP (25=59,7%; 75=76,1%; 225=71,2%). O estudo hematolÃgico mostrou leucocitose no 4Âd nos animais dos grupos SAL (23,8Â2,1) e PAR (22,3Â2,1), marcado por neutrofilia ([7,5Â1,2] e [5,7Â0,9]). DIP reverteu a leucocitose DIP (25=16,1Â2,2; 75=16,7Â1,4; 225=15,4Â2,4) reduzindo o nÃmero de neutrÃfilos (p<0,05) DIP (25=2,4Â0,6; 75=3,1Â0,6; 225=2,8Â0,2). NÃo houve diferenÃa significante de TGO ou TGP entre os grupos. DIP nÃo reverteu a perda inicial de massa corpÃrea vista nos grupo SAL e PAR, no entanto houve tendÃncia ao acompanhamento da curva de peso dos animais normais a partir do 3Âd Dessa forma os resultados deste estudo mostraram que a DIP nÃo afetou a resposta inflamatÃria e a reabsorÃÃo Ãssea em ratos submetidos à MDI. AlÃm disso, o tratamento com DIP nÃo causou neutropenia, nem alteraÃÃes em TGO e TGP, e nÃo afetou significativamente a massa corporal, quando comparada a animais dos grupos SAL e PAR. Portanto, sugere-se que a DIP pode ser uma importante ferramenta farmacolÃgica para o controle da dor apÃs ativaÃÃo ortodÃntica sem afetar a movimentaÃÃo dentÃria, ou causar riscos sistÃmicos. / The orthodontic tooth movement (OTM) is an inflammatory process,that combines pathologic and physiologic answers to forces applied to teeth. One of the main mediators responsible by OTM is prostaglandin, which is also related to pain events. Paracetamol (PAR) and Sodium Dypirone (DYP) are analgesic drugs that do not interfere significantly in peripheral inflammatory mediators. Knowning that PAR does not interfere on bone remodeling process during OTM, it seems reasonable to evaluate the DYP effect on bone remodeling process. So, the aim of this study was to evaluate the DYP effect on bone remodeling process using OTM model in male Wistar rats, distributed in groups: Saline (SAL=2 ml/kg), Paracetamol (PAR 200 mg/kg) and Sodium Dypirone, which was divided in 3 subgroup (DIP 25; 75 or 225 mg/kg), given by oral gavage, daily 30 min before installation of orthodontic device between 1st left superior molar and incisive during 4 days, when, then, they were sacrificed and the following parameters were evaluated. 1) microscopic analyses of periodontium through: a) semi-quantitative histological study, morphometric study and immunohistochemical staining to TRAP; b) analyses of mieloperoxidase (MPO) activity in gingiva; 2) Serum dosage of Bone-specific Alkaline Phosphatase (BALP); and 3) Systemic evaluation through: a) leukogram; b) serum dosage of TGO and TGP and c) body mass weight variation. The animals submitted to 4 days of OTM presented large hyalin areas, reduced periodontal ligament thickness and irregular frontal bone tissue [Median: 3 (2-3)], when compared to Normal group (p<0.05). The treatment with PAR [3 (0-3)] was histologically similar to SAL. DYP did not reverse the histological findings [DYP 25=3 (0-3); DYP 75=3 (3-3); DYP 225=3 (2-3)] when compared to controls SAL and PAR. The SAL group presented percentual of hyalin area by 12.5Â0.9%, different from Normal group (0%) (p<0.05), but it was similar to groups treated with PAR (12.2Â1.2%) and DYP (25=10.7Â0.7%; 75=11.0Â0.8%; 225=10.8Â1.0%). All experimental groups presented positive immunostaining to TRAP. DYP did not prevent the raise of MPO activity when compared to Normal group (p<0.05), however it caused significant reduction of MPO, DYP (25=48.9%; 75=43.1%; 225=43.5%) when compared to SAL or PAR (p<0.05). All groups presented significant reduction of BALP serum levels, SAL=54.3%; PAR=62.4%; DYP (25=59.7%; 75=76.1%; 225=71.2%). The hematological study showed leukocytosis on 4th day on animals of SAL group (23.8Â2.1) and PAR (22.3Â2.1), marked by neutrophilia ([7.5Â1.2] and [5.7Â0.9]). DYP reversed leukocytosis DYP (25=16.1Â2.2; 75=16.7Â1.4; 225=15.4Â2.4) reducing the number of neutrophils (p<0.05) DYP (25=2.4Â0.6; 75=3.1Â0.6; 225=2.8Â0.2). There was no significant difference on TGO or TGP serum levels between the groups. DYP did not reversed the initial loss of body weight seen on groups SAL and PAR, however there was a tendency on following the weight curve of normal animals from the 3rd day on. In this way, the results of this study revealed that DYP did not affect the inflammatory response and bone resorption in rats submitted to OTM. Besides, the treatment with DYP did not caused either neutropenia, or alterations in TGO and TGP, and it did not affect significantly the body mass weight, when compared to animals from SAL and PAR groups. Therefore, it is suggested that DYP can be an important pharmacological tool to pain control after orthodontic activation without interfere on tooth movement, or induce systemic risks.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Periodontitis, a relevant cause of teeth loss in adults, is a chronic inflammatory disease characterized by alveolar bone resorption and collagen fibers and cementum destruction. S-nitrosogluthathione (GSNO) is considered to be an NO donor and to act as a reservoir of NO in vivo. The objective of this study was to investigate the effect of GSNO in experimental periodontal disease (EPD). EPD was induced by a nylon thread ligature surgically placed around the cervix of the second left maxillary molars of female Wistar rats. Animals were treated with 50&#956;L GSNO (0,5, 2 or 10 mmol L-1), PVP or saline subgingivally 30 minutes before periodontits induction and daily until sacrifice on 11th day. The parameters analysed were alveolar bone loss (ABL), bone alkaline phosphatase, myeloperoxidase (MPO), cytokines levels (IL-1&#946; and TNF-&#945;), malondialdeyhyde (MDA), reduced glutathione (GSH) content, nitrite/nitrate levels, and immunohistochemistry for metalloproteinase (MMP-1/8), inducible nitric oxide syntase (iNOS) and nuclear factor-&#954;B (NF&#954;B). In order to confirm the anti-inflammatory and antioxidant effect of GSNO was used the peritonitis and paw edema models. Peritonitis was induced by injection of 1 mL carrageenan (500 &#956;L/cavity) or saline ip in naÃve rats or in rats that received saline, PVP or GSNO (0,5, 2 or 10 mmol L-1, ip) 1 hour prior to the carrageenan. After 4 hours, the animals were sacrificed for collection of the fluid peritoneal. Paw edema was induced by subplantar injection of carrageenan (500 &#61549;g/paw). Saline, PVP or GSNO (0,5, 2 or 10 mmol L-1, ip) were administered 1 hour before the inflammatory stimuli into the left hind paw. The animals were sacrificed 4 hours after the ip injection of carrageenan. The parameters analysed were volume of paw edema, migration of leukocytes for cavity peritoneal, MPO, cytokines (IL-1&#946; and TNF-&#945;), GSH and MDA. The GSNO in the concentrations of 0,5 and 2 mmol L-1 reduced ABL, MPO, inflammatory cytokines (IL-1&#946; and TNF â&#945;), nitrite/nitrate, and it increased GSH. GSNO 0,5 and 2 mmol L-1 also decreased the demarcation to MMP-1/-8, NOSi and NF -&#954;B. However, just GSNO 2 mmol L-1 reduced MDA. Results similar were found in the peritonitis and in the paw edema, added to the fact that GSNO 0,5 and 2 mmol L-1 decreased the volume of the paw edema and the migration of leukocytes and neutrophils to the cavity peritoneal. These results show that GSNO has a protective effect on the experimental periodontal disease, peritonitis and paw edema by reducing inflammation and oxidative stress. / A periodontite, importante causa de perda dentÃria em adultos, à uma doenÃa inflamatÃria crÃnica caracterizada pela reabsorÃÃo do osso alveolar e das fibras colÃgenas, bem como destruiÃÃo do cemento. O S-nitrosoglutationa (GSNO) à considerado um doador de NO e atua como reservatÃrio de NO in vivo. O objetivo do presente estudo foi investigar o efeito do GSNO na doenÃa periodontal experimental (DPE). A DPE foi induzida passando-se um fio de nÃilon 3.0 em torno do segundo molar superior esquerdo de ratos Wistar fÃmeas. Os animais foram tratados com 50 &#956;l GSNO (0,5, 2 e 10 mmol L-1), PVP (polivinil pirrolidona, diluente do GSNO) ou salina subgengivalmente 30 minutos antes da induÃÃo da periodontite e diariamente atà o dia do sacrifÃcio no 11 dia. Foram analisados os seguintes parÃmetros: Ãndice de perda Ãssea (IPO), fosfatase alcalina Ãssea (FAO), mieloperoxidase (MPO), dosagem de citocinas (IL-1&#946; e TNF-&#945;), malondialdeÃdo (MDA), glutationa reduzida (GSH), conteÃdo de nitrito/nitrato (NOx) e imunohistoquÃmica para metaloproteinase-1/-8 (MMP-1/-8), Ãxido nÃtrico sintase induzida (NOSi) e fator de transcriÃÃo nuclear-&#954;B (NF-&#954;B). A fim de confirmar o efeito antiinflamatÃrio e antioxidante do GSNO foram utilizados os modelos de peritonite e edema de pata. A peritonite foi induzida atravÃs da injeÃÃo de 1mL de carragenina ou salina (500 &#956;L) na cavidade peritoneal 1 hora apÃs a administraÃÃo intraperitoneal (i.p.) de salina, PVP ou GSNO (0,5, 2 ou 10 mmol L-1). ApÃs 4 horas, os animais foram sacrificados para coleta do fluido peritoneal. Para o edema de pata, salina, PVP ou GSNO (0,5, 2 ou 10 mmol L-1, i.p.) foram administrados uma hora antes da injeÃÃo de 0,1 mL de carragenina (500&#956;g/pata) ou salina por via subplantar (sp) na pata traseira esquerda de cada rata. O sacrifÃcio dos animais ocorreu 4 horas apÃs a injeÃÃo do estÃmulo inflamatÃrio. Os seguintes parÃmetros foram analisados: volume do edema da pata, migraÃÃo de leucÃcitos para cavidade peritoneal, MPO, IL-1&#946;, TNF-&#945;, GSH e MDA. O GSNO nas concentraÃÃes de 0,5 e 2 mmol L-1 reduziu o IPO, MPO, citocinas prÃ-inflamatÃrias IL-1&#946; and TNF-&#945;, nitrito/nitrato, e aumentou GSH. O GSNO nas concentraÃÃes de 0,5 e 2 mmol L-1 tambÃm diminuÃram a imunomarcaÃÃo para MMP-1/-8, NOSi e NF-&#954;B. Contudo, apenas GSNO 2 mmol L-1 diminuiu MDA. Resultados semelhantes foram encontrados na peritonite e no edema de pata, acrescido de que o GSNO 0,5 e 2 mmol L-1 diminuiu tanto o volume do edema de pata como a migraÃÃo de leucÃcitos e neutrÃfilos para a cavidade peritoneal. Esses resultados mostram que o GSNO possui efeito protetor na doenÃa periodontal experimental, no edema de pata e na peritonite atravÃs da reduÃÃo da inflamaÃÃo e do estresse oxidativo.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Anacardium occidentale L. (Anacardiaceae), conhecido popularmente como caju, à um tÃpico pseudofruto tropical cujo suco à popularmente consumido no paÃs pelas excelentes propriedades sensoriais e nutricionais, entretanto, os produtos sÃo destinados ao mercado interno com extensas perdas de pedÃnculos in natura. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o potencial antioxidante, anti-inflamatÃrio e cicatrizante do caju in vitro e in vivo. Para tanto foi utilizado o suco do pseudofruto in natura, obtidos de clones de cajueiro CCP 76 nos estÃdios de maturaÃÃo 2 (verde) e 6 (maduro). Foram determinados no suco os teores de polifenÃis totais, Ãcido ascÃrbico, antocianinas totais, flavonÃides amarelos, carotenÃides, compostos fenÃlicos alÃm da atividade antioxidante total. Para a avaliaÃÃo das atividades anti-inflamatÃria e cicatrizante in vivo foram utilizados camundongos, mantidos sob condiÃÃes adequadas de luz, temperatura e recebendo Ãgua e raÃÃo à vontade. O protocolo experimental foi aprovado pelo Comità de Ãtica em ExperimentaÃÃo Animal da UFC (no de aprovaÃÃo 85/09). Para avaliar o efeito do tratamento oral durante 30 dias consecutivos com os sucos de caju verde e maduro, utilizou-se a metodologia do edema de orelha induzido por xileno. Para avaliar o efeito dos sucos de caju verde e maduro na cicatrizaÃÃo, lesÃes foram induzidas no dorso do camundongo 15 dias apÃs o tratamento de suplementaÃÃo com os sucos. As lesÃes cutÃneas foram submetidas a avaliaÃÃes clÃnicas atravÃs de anÃlises morfomÃtricas e macroscÃpicas durante 21 dias. Os resultados foram expressos como mÃdia e erro padrÃo da mÃdia. Para avaliar as diferenÃas significativas entre as mÃdias dos diferentes grupos, aplicou-se o teste de Mann-Whitney e ANOVA e as diferenÃas foram consideradas significativas quando p < 0,05. O perfil fitoquÃmico dos sucos de pseudofrutos de caju verde e de maduro foi distinto, no qual o suco de caju maduro apresentou teores de antioxidantes nÃo enzimÃticos e capacidade antioxidante total superior ao suco de caju verde. Os resultados dos ensaios anti-inflamatÃrio e cicatrizante mostraram que o suco de caju verde reduziu eficientemente a inflamaÃÃo e acelerou a cicatrizaÃÃo de feridas durante a fase intermediÃria desse processo quando comparado ao suco de caju maduro. O suco de caju maduro parece agir na fase mais tardia da cicatrizaÃÃo. Estudos complementares devem ser realizados para maior compreensÃo das atividades biolÃgicas dos sucos de caju verde e maduro atravÃs da identificaÃÃo de compostos quÃmicos responsÃveis pela aÃÃo funcional dos mesmos. / Anacardium occidentale L. (Anacardiaceae), known as cashew, is a typical tropical pseudo whose juice is highly consumed in Brazil for its excellent sensory and nutritional properties. The aim of this study was to evaluate the antioxidant, anti-inflammatory and wound healing activities of cashew apple in vitro and in vivo. The juice from fresh fruit were obtained from cashew clones CCP 76 in the maturation stage 2 (unripe) and 6 (ripe). Were determined in the juice total polyphenols, vitamin C, anthocyanins, flavanols, carotenoids, phenolic compounds and the total antioxidant activity. For the evaluation of anti-inflammatory activity and healing in vivo was performed in mice, kept under appropriate conditions of light, temperature and given water and food ad libitum. The experimental protocol was approved by the Ethics Committee for Animal Experiments of the UFC (n 85/09). To evaluate the effect of oral treatment for 30 consecutive days with the juice of cashew apple ripe and unripe, we used the methodology of the ear edema induced by xylene. Regarding the effect of treatment with the juice of cashew in the healing lesions were induced on the backs of mice 15 days after initiation of treatment. The skin lesions by morphometric and macroscopic analysis were subjected to clinical evaluation for 21 days. Results were expressed as mean and standard deviation. To evaluate the significant differences between the means of different groups, we applied the Mann-Whitney test and ANOVA and differences were considered significant when p <0.05. The ripe cashew apple juice (RCAJ) phytochemistry profile was better with levels of non-enzymatic antioxidants and total antioxidant capacity than the unripe cashew apple juice (UNCAJ). The anti-inflammatory and healing results showed that the UNCAJ reduced inflammation and accelerated wound healing process when compared to RCAJ. The present study demonstrated that the UNCAJ present high biological activity in inflammatory and wound healing models than the RCAJ.

FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / As algas marinhas sÃo fontes naturais de polissacarÃdeos sulfatados detentores de diversas atividades biolÃgicas (anticoagulante, antitrombÃtica, antinociceptiva, antiinflamatÃria etc) e que exibem mÃnimos efeitos tÃxicos, sendo considerados de grande interesse para as indÃstrias farmacÃuticas e alimentÃcias. O presente trabalho teve como finalidade avaliar os efeitos dos polissacarÃdeos sulfatados totais (PST) da alga marinha vermelha Gracilaria cornea (Gc) em modelos clÃssicos de experimentaÃÃo animal nos ensaios de nocicepÃÃo e inflamaÃÃo aguda. Foram utilizados camundongos Swiss machos (18-25g) e ratos Wistar machos (120-260g). O rendimento de PST-Gc obtidos da extraÃÃo por digestÃo enzimÃtica (6 h; 60ÂC) foi 16,75  0,98%. Os PST-Gc mostraram-se capazes de reduzir (p<0,05) o nÃmero de contorÃÃes abdominais induzidas por Ãcido acÃtico (0,8%) em 66,2; 65,3 e 96,3% para as doses 3, 9 e 27 mg kg-1 (i.v.), respectivamente). No teste de formalina, os PST-Gc inibiram (p<0,05) o tempo de lambedura em ambas as fases do teste (56,1 e 93,2%-primeira fase; 88,2 e 98,0%-segunda fase para as doses 9 e 27 mg kg-1 (i.v.), respectivamente), enquanto a dose de 3 mg kg-1 mostrou efeito apenas na segunda fase do ensaio. No teste da placa quente, o efeito antinociceptivo dos PST-Gc foi observado apenas no tratamento com a dose de 27 mg kg-1 (i.v.). Estes resultados sugerem que os efeitos analgÃsicos das diferentes doses dos PST-Gc ocorram por mecanismo de aÃÃo central e perifÃrica. O modelo de peritonite demonstrou que os PST-Gc reduziu a migraÃÃo de leucÃcitos totais em 52,7%) e de neutrÃfilos em 59% na dose de 3 mg kg-1 (s.c.). Por outro lado, as doses (3 e 9 mg kg-1; s.c.) inibiram o edema de pata induzido por carragenana, especialmente na terceira hora, sendo os efeitos confirmados pela atividade de MPO no tecido da pata (p<0,05), alÃm da reduÃÃo (p<0,05) do edema de pata induzido por dextrana no intervalo de 30min e na primeira hora em todas as doses testadas. Finalmente, ensaio de toxicidade subcrÃnica foi realizado em grupos de 6 camundongos (machos), os quais receberam: Salina (0,15 M; i.p.) e PST-Gc (9mg kg-1; i.p.), durante 14 dias consecutivos. Os resultados mostraram que as administraÃÃes dos PST-Gc nÃo traduziram diferenÃas em termos de massa corpÃrea (p>0,05). Adicionalmente, os PST nÃo proporcionaram alteraÃÃes no peso dos ÃrgÃos (coraÃÃo, fÃgado, rim, baÃo e timo) em relaÃÃo à massa corpÃrea dos animais, exceÃÃo ao baÃo (p<0,05), sugerindo uma propriedade de funÃÃo imunomoduladora. Nenhuma alteraÃÃo hepÃtica pelas dosagens bioquÃmicas (TGO e TGP) ou renal tambÃm foi observada (p>0,05), ou sobre os parÃmetros hematolÃgicos (hemÃcias, hemoglobina, hematÃcrito, VCM, HGM, CHCM, leucÃcitos, linfÃcitos, monÃcitos, neutrÃfilos e plaquetas) considerados, exceÃÃo da hemoglobina (p<0,05). Portanto, a alga marinha vermelha Gracilaria cornea apresenta polissacarÃdeos sulfatados seguros e detentores de atividades antinociceptiva e antiinflamatÃria. / Marine algae are natural sources of sulfated polysaccharides possessing several biological activities (anticoagulant, antithrombotic, antinociceptive, anti-inflammatory etc.) and that exhibit minimal toxicity and are considered of great interest to the pharmaceutical and food industries. This study aimed to evaluate the effects of sulfated polysaccharides total (SPT) from the red seaweed Gracilaria cornea (Gc) in classical models of animal experimentation. Swiss mice male (18-25g) and male Wistar rats (120-260g) in nociception and acute inflammation assays were used. The SPT-Gc yield extraction obtained by enzymatic digestion (6 h, 60  C) was 16.75  0.98%. The SPT-GC was able to reduce (p<0.05) the number of writhing induced by 0.8% acetic acid (66.2, 65.3 and 96.3% for 3, 9 and 27 mg kg-1 (i.v.), respectively). In formalin test, the SPT-Gc inhibited (p<0.05) licking time in both phases of testing (56.1 and 93.2% first-phase, 88.2 and 98.0% second- phase for 9 and 27 mg kg-1 (i.v.), respectively), whereas the dose 3 mg kg-1 had only effect in the second phase of the trial. In the hot plate test, the antinociceptive effect of SPT-Gc were seen only in treatment with 27 mg kg-1 (i.v.). These tests in mice suggest that the analgesic effects occur through mechanism of action of central and peripheral. The model of peritonitis demonstrated that SPT-Gc exert effects on the migration of total leukocytes (52.7%) and neutrophils (59%) at a dose of 3 mg kg-1 (s.c.). On the other hand, the doses (3 and 9 mg kg-1, s.c.) appear able to inhibit the paw edema induced by carrageenan, particularly at the third hour, with the effects confirmed by MPO activity in paw tissue (p<0.05) and the occasional reduction (p<0.05) of paw edema of mice induced by dextran in the first hour at all doses tested. Finally, subchronic toxicity test was conducted in groups of 6 mice (males), which received: Saline (0.15 M, i.p.) and SPT-Gc (9 mg kg-1, i.p.) for 14 consecutive days. The results showed that the administrations of SPT-Gc did not show to differences in body mass (p>0.05). Additionally, the SPT did not produce changes in organ weights (heart, liver, kidney, spleen and thymus) in relation to body mass of animals, except the spleen (p<0.05), suggesting an immunomodulatory property. No change for liver biochemical tests (AST and ALT) or renal function was also observed (p>0.05), or on the hematological parameters (erythrocytes, hemoglobin, hematocrit, MCV, HGM, MCHC, leucocytes, lymphocytes, monocytes, neutrophils and platelets) considered, except hemoglobin (p<0.05). Therefore, the red seaweed Gracilaria cornea sulfated polysaccharides present security and antinociceptive and antiinflammatory activities

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / As algas marinhas sÃo fontes de compostos bioativos, os quais vÃm despertando interesse em aplicaÃÃes farmacolÃgicas. Dentre esses, destacam-se as lectinas, que sÃo (glico)proteÃnas que se ligam a mono ou oligossacarÃdeos especÃficos. O objetivo desse trabalho foi isolar a lectina da alga marinha vermelha Solieria filiformis (LSf), investigar as suas propriedades na nocicepÃÃo e na inflamaÃÃo aguda e seus possÃveis sinais de toxicidade em animais. Inicialmente, a LSf foi purificada por extraÃÃo com tampÃo Tris-HCl 25mM, pH 7,5, precipitaÃÃo com sulfato de amÃnio (70%) e cromatografias em colunas de DEAE-celulose e Sephadex G-100. Na avaliaÃÃo das atividades biolÃgicas, grupos de animais (n=6) foram submetidos ao prÃ-tratamento com a LSf (1, 3 ou 9 mg/kg; i.v.), 30 min antes do estÃmulo nociceptivo ou inflamatÃrio. A atividade antinociceptiva foi avaliada em camundongos Swiss machos atravÃs dos ensaios de contorÃÃes abdominais induzidas por Ãcido acÃtico 0,8%, teste da formalina a 2% e da placa quente. Morfina e indometacina (5 mg/kg; s.c.) foram utilizadas como controles. A atividade anti-inflamatÃria em ratos Wistar machos foi avaliada atravÃs dos ensaios de peritonite induzida por carragenana - Cg (700 Âg/cav) e de edema de pata induzidos por Cg (700 Âg/pata); dextrano (500 Âg/pata); ou pela prÃpria LSf (9 mg/kg). Dexametasona (1 mg/kg; s.c.) foi utilizada como controle. A aÃÃo edematogÃnica da LSf (1, 3 ou 9 mg/kg) foi avaliada atravÃs da sua aplicaÃÃo na pata de ratos e da modulaÃÃo farmacolÃgica do edema formado. O estudo da toxicidade da LSf (9 mg/kg;i.v.) foi realizado atravÃs da sua aplicaÃÃo em camundogos (7 dias) e da anÃlise dos parÃmetros fÃsicos, bioquÃmicos e histolÃgicos. A LSf reduziu significativamente o nÃmero de contorÃÃes abdominais e o tempo de lambedura da pata na segunda fase do teste da formalina, porÃm nÃo prolongou o tempo de reaÃÃo na placa quente. A LSf tambÃm inibiu a migraÃÃo celular na peritonite induzida por Cg e os edemas de pata induzidos por Cg, dextrano e LSf. Ademais, LSf apresentou atividade edematogÃnica, que foi inibida por indometacina e dexametasona. Adicionalmente, a administraÃÃo da LSf por 7 dias nÃo apresentou sinais de danos sistÃmicos, exceto pela reduÃÃo no nÃvel de fosfatase alcalina e esplenomegalia. Concluindo, a LSf possui propriedades antinociceptiva, anti-inflamatÃria (i.v.) e edematogÃnica (i.pl.), podendo representar um potencial agente terapÃutico e uma possÃvel ferramenta para o estudo da inflamaÃÃo. / The seaweeds are a source of bioactive compounds, which gained importance in pharmacological applications. Among these, there are the lectins, which are (glyco)proteins that bind to specific mono or oligosaccharides. The aim of this study was to isolate the lectin from the red seaweed Solieria filifmoris (LSf), investigate its properties in acute nociception and inflammation, and their possible signs of toxicity in animals. Initially, the LSf was purified by extraction with Tris-HCl buffer 25 mM (pH 7,5), precipitation with ammonium sulfate (70%) and chromatographies in DEAE-cellulose and Sephadex G-100 columns. In the evaluation of the biological activities, animals groups (n=6) were submitted to pretreatment with LSf (1, 3 or 9 mg/kg; i.v.), 30 min before of the nociceptive or inflammatory stimulus. The antinociceptive activity was evaluated in male mice Swiss using the abdominal writhing test induced by acetic acid 0,8%, the formalin test to 2% and the hot plate test. Morphine and indomethacin (5 mg/kg; s.c.) were used as controls. The anti-inflamatory activity in male rats Wistar was assayed through of the peritonitis induced by carrageenan - Cg (700 Âg/cav) and of the paw edemas Cg- (700 Âg/paw), dextran- (500 Âg/paw) or LSf-induced (9 mg/kg) models. Dexamethasone (1 mg/kg; s.c.) was used as control. The LSf edematogenic action (1, 3 or 9 mg/kg) was evaluated by the application of this lectin in the rat paws and by the pharmacological modulation of the edema formed. The toxicity study of LSf (9 mg/kg; i.v.) was carried out through of its application in mice (7 days) and of the analysis of the physical, biochemical and histological parameters. LSf significantly reduced the number of abdominal writhing and the paw licking time in the second phase of formalin test, but didnât prolong the reaction time in hot plate test. The LSf also inhibited the cell migration in peritonitis induced by Cg and the paw edemas induced by Cg, dextran and LSf. Moreover, LSf showed edematogenic activity, which was inhibited by indomethacin and dexamethasone. Additionally, the LSf administration for 7 days presented no signs of systemic damages, except for the reduced level of alkaline phosphatase and splenomegaly. Concluding, the LSf has antinociceptive, anti-inflammatory (i.v.) and edematogenic (i.pl.) properties and could represent a potential therapeutic agent and a possible tool for the inflammation study.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Himatanthus drasticus (Apocynaceae) à uma espÃcie tradicionalmente utilizada na medicina popular da regiÃo nordeste deste paÃs. Sua distribuiÃÃo ocorre das Guianas ao sudeste do Brasil. O lÃtex desta planta à obtido apÃs uma injÃria no caule e amplamente comercializado em mercados pÃblicos. As pessoas ingerem o lÃtex, conhecido como Leite de Janaguba (LJ), para o tratamento e/ou prevenÃÃo de diferentes doenÃas inflamatÃrias, gastrite, Ãlcera, cÃncer, entre outras. Apesar das diversas informaÃÃes oriundas da medicina popular, nÃo existem relatos cientÃficos suficientes confirmando tais propriedades farmacolÃgicas. Neste trabalho, LJ foi investigado com o propÃsito de validar sua tÃo popularmente relatada atividade anti-inflamatÃria. A fraÃÃo proteica deste lÃtex (HdLP) tambÃm foi investigada quanto à presenÃa de atividades anti-inflamatÃria, antinociceptiva, alÃm de seus efeitos toxicolÃgicos. LJ inibiu a resposta inflamatÃria induzida por carragenina em ratos (98%, p < 0.05), assim como o fez a fraÃÃo HdLP, independente da rota de administraÃÃo. HdLP reduziu a infiltraÃÃo de neutrÃfilos na cavidade peritoneal (96%, p < 0.05). Paralelamente a isto, ocorreu o aumento da sÃntese de Ãxido nÃtrico no plasma e a reduÃÃo de citocinas prÃ-inflamatÃrias (IL-1 e TNF-&#945;) no fluido peritonal. Esta fraÃÃo tambÃm preveniu a vacuolizaÃÃo e hiperplasia das cÃlulas de Kupfer, causadas pelo efeito da carragenina no fÃgado. Atividade anti-inflamatÃria està provavelmente associada com a fraÃÃo proteica de LJ. HdLP exibiu um efeito anti-inflamatÃrio mesmo apÃs aquecimento (100 &#61616;C, 30 minutos) ou proteÃlise. AlÃm desta atividade, um efeito prÃ-inflamatÃrio foi observado apÃs o tratamento com HdLP. Esta tambÃm suprimiu contraÃÃes abdominais induzidas por Ãcido acÃtico e reduziu a lambedura de pata induzida por formalina, ambos de maneira dose-dependente. A avaliaÃÃo da toxicidade aguda demonstrou a ausÃncia de efeitos tÃxicos apÃs tratamento com LJ e HdLP (v.o.) mesmo utilizando doses 5000 vezes maiores que as recomendadas. Uma dosagem qualitativa de fitoquÃmicos em HdLP mostrou a ausÃncia de lupeol e presenÃa de saponinas, taninos e esterÃides livres. Entretanto, as propriedades farmacolÃgicas provavelmente nÃo estÃo relacionadas com estas molÃculas. Desta forma, concluÃmos que o lÃtex de H. drasticus exibe duas das atividades farmacolÃgicas relatadas por seus usuÃrios e a fraÃÃo proteica deste lÃtex à um importante contribuinte para tais propriedades medicinais. A resistÃncia ao aquecimento e à proteÃlise pode explicar a efetividade de HdLP quando administrada oralmente. A ausÃncia de efeitos tÃxicos por via oral torna esta planta uma potencial candidata a fitoterÃpico. / Himatanthus drasticus (Apocynaceae) is traditionally used in folk medicine in Northeastern Brazil. The plant is wildly distribuited from Guianas until Southeast Brazil. Latex obtained by cutting its stem bark is mixed with water and extensively sold in public markets. People use Janaguba milk (âLeite de Janagubaâ- LJ) to treat or prevent different inflammatory disorders such as gastritis, ulcers as well as cancer, among other uses. Despite, there is not enough scientific data confirming these pharmacological properties. In this work, Janaguba milk was preliminarily investigated in an attempt to validate its anti- inflammatory activity. Its major protein fraction (HdLP) was assessed for the presence of anti- inflammatory, anti-nociceptive and toxicological effects. LJ inhibited the inflammatory response induced by carrageenan in rats (98%, p < 0.05), whereas HdLP did it independent of the route of administration. HdLP significantly reduced the infiltration of neutrophils into the peritoneal cavity (96%, p < 0.05) concomitant with increased nitric oxide synthesis in plasma and decrease of pro-inflammatory cytokines IL- 1 and TNF-&#945; in peritoneal fluid. This fraction also prevented vacuolization and Kupfer cell hyperplasia caused by carrageenan in liver. Further, the anti-inflammatory properties were shown to be associated with the protein fraction of LJ. HdLP exhibited anti-inflammation, even after heat-treatment (100 &#61616;C, 30 min) or proteolysis. Moreover, a pro-inflammatory effect was observed after HdLP treatment. It also suppressed abdominal constrictions in acetic acid-treated mice and reduced paw licking induced by formalin, both in a dose-dependent manner. An acute toxicological evaluation demonstrated no toxic effects after 14 days from LJ and HdLP administration by oral route even when high doses were tested. A qualitative phytochemical analysis showed the absence of lupeol and presence of saponinas, tannins and free steroids in HdLP. However, pharmacological properties are probably not related to them. It is therefore concluded that the latex of Himatanthus drasticus exhibits both the anti-inflammatory and anti-nociceptive activities claimed by its users. The protein fraction of the latex is an important contributor to the pharmacological properties of LJ. Resistance to heat and proteolytic treatment can explain the effectiveness of HdLP even when administered orally. The absence of toxic effects by oral route confirms the potential use of this plant as a phytotherapic agent.