Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2013-06-25T23:30:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 307902.pdf: 3094683 bytes, checksum: ae31fe245aa9f23f3660d972b53c763a (MD5) / Objetivos: O trauma cranioencefalico (TCE) e uma das principais causas de mortalidade e morbidade. Ha raros estudos prospectivos que investigam a associacao de variaveis clinicas e laboratoriais da fase aguda do TCE e o prognostico cognitivo tardio dos pacientes vitimas de TCE. Este estudo tem como objetivo identificar variaveis clinicas, laboratoriais e biomarcadores de lesao tecidual associados ao prognostico cognitivo em pacientes vitimas de TCE. Metodos: Foram coletadas prospectivamente as variaveis da internacao hospitalar de 234 pacientes consecutivos com TCE grave (GCS admissao . 8). Dos 172 sobreviventes, uma amostra representada de 46 pacientes realizaram avaliacao cognitiva (composta de 15 testes neuropsicologicos) em media 3 (+ - 1,8) anos apos a hospitalizacao. Um sub-grupo de 22 pacientes que foram avaliados cognitivamente realizaram analise dos niveis plasmaticos de TBARS (indicativo de dano por estresse oxidativo a lipideos) e Carbonil (indicador de dano por estresse oxidativo a proteinas) em amostras de sangue coletadas na fase aguda de TCE (mediana de 10, 30 e 70 horas apos o impacto do TCE). Um grupo controle (n=23) pareado por sexo, idade e nivel socio-educacional foi avaliado cognitivamente para comparacao com os pacientes. Resultados: A media de idade dos pacientes foi 34 (+ - 13) anos sendo 85% do sexo masculino, com escolaridade media de 9 (+ - 4,7) anos. Os pacientes apresentaram um desempenho inferior em todos os testes neuropsicologicos. A analise por regressao linear evidenciou uma forte associacao independente (R coeficiente = 0,6 a 0,8) entre maior escolaridade e menor idade e o desempenho cognitivo em 14 dos 15 testes neuropsicologicos avaliados. O desempenho nos testes cognitivos nao esteve associado ao genero, escore de admissao na Escala de Coma de Glasgow (ECG), exame das pupilas, presenca de trauma em outros orgaos, e classificacao da escala de Marshall na tomografia computadorizada na admissao (TC). Niveis elevados de glicose e presenca de hemorragia sub-aracnoide na TC mostraram-se independentemente associados a um menor desempenho no teste de Retencao de Aprendizagem de Rey e de Memoria Logica respectivamente. Embora os niveis plasmaticos de TBARS e Carbonil tenham sido significativamente elevados na fase aguda do TCE, estes biomarcadores nao se mostraram associados ao desempenho cognitivo dos pacientes. Conclusoes: Baixa escolaridade e idade mais avancada sao preditores independentes de pior desempenho cognitivo tardio apos o TCE grave. O exame de TC e glicemia mostraram limitada capacidade de predicao do desempenho cognitivo enquanto que o exame das pupilas, ECG na admissao, presenca de trauma associado nao foram preditores do desempenho em nenhum dos testes neuropsicologicos avaliados. A medida dos niveis plasmaticos de TBARS e Carbonil tambem nao se mostrou associada com o desempenho cognitivo dos pacientes. A identificacao de variaveis clinicas e laboratoriais associadas ao prognostico cognitivo apos o TCE grave permanece um desafio para a area de neuropsicologia clinica.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2008. / Submitted by wesley oliveira leite (leite.wesley@yahoo.com.br) on 2009-09-22T20:15:43Z No. of bitstreams: 1 2008_TatianaFerreiraNunesOliveira.pdf: 2663741 bytes, checksum: dfb9baa040caf45fa4e035b0097db0c3 (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2010-07-15T19:08:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_TatianaFerreiraNunesOliveira.pdf: 2663741 bytes, checksum: dfb9baa040caf45fa4e035b0097db0c3 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-07-15T19:08:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_TatianaFerreiraNunesOliveira.pdf: 2663741 bytes, checksum: dfb9baa040caf45fa4e035b0097db0c3 (MD5) Previous issue date: 2008 / Introdução: A imaturidade cerebral associada a falta de mielinização em estágios precoces da gestação, a restrição do fluxo sanguíneo intra-uterino e conseqüentemente a hipóxia podem levar a diversos tipos de lesões cerebrais em Recém-nascidos (RN’s) prematuros. Exames de imagem como Ultrassonografia Transfontanelar (USTF) têm sido largamente utilizadas na tentativa de detectar precocemente as lesões cerebrais, entretanto um exame normal é frequentemente associado à uma criança com disfunções neuromotoras e exames alterados tem sido atribuídos a crianças com funções normais.Objetivos: Avaliar possíveis relações entre alterações do Exame Neurológico (EN) dos RN’s prematuros com os exames de USTF normais e alterados em RN's prematuros.Método:Estudo duplo-cego, EN dos RN’s prematuro, USTF,avaliação do tônus e reflexos primitivos em RN's com USTF normais e alterados.Resultados: 34 RN's com idade Gestacional (IG) média de 31,35 semanas e peso médio de 1430g , 76% de RN's com USTF normais,47,05% dos RN's com EN alterado; RN's com EN alterado apresentaram Apgar do 1° minuto mais baixos do que RN's com EN normal; 87,5% dos RN's com peso inferior a 1000g apresentaram alterações do EN embora a USTF tenha sido normal em 62% dos RN's; 50% dos RN's com peso entre 1001g e 1500g apresentaram EN alterado embora a USTF estivesse alterada em37,5%dos casos; RN com peso superior a 2000g apresentaram USTF alterada em 25% dos casos e EN alterado em 66,6%dos casos. Conclusão: RN's prematuros podem apresentar EN alterados mesmo na presença de USTF normal, sendo necessário manter seguimento do desenvolvimento motor para prematuros, visando minimizar as possíveis alterações do desenvolvimento. __________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: The brain immaturity associated with lack of mielinization In the early stages of life, restrictions of the intra uterine blood flow can cause various types of brain injury in premature Newborns (NB´s). Examinations of Transfontanelar Ultrasound Image (TUSI) are usually used, to detect the early brain lesions. However a normal scan often associated a child with the serious disabilities and altered Scan has been assigned to children with normal motor and cognitive skills. Objectives: Evaluate relationship among normal ad altered TUSI with normal and abnormal Neurological Examination (NE).Results: 34 infants with media Gestacional Age (GA) 31.35 weeks and media weight of 1430g; 76% of RN's with normal TUSI, 47.05% of RN's with abnormal NE; RN's with abnormal NE has lower scores of 1 minute Apgar than normal EN NB's, 87.5% of the NB's weighing less than 1000g has changes altered NE although the TUSI was normal in 62% of Them, 50% of RN's weighing more than 1001g and low than 1500 had abnormal NE; but the TSI was normal in 37, 5% of the cases, infants weighing more than 2000g showed altered TUSI in 25% of cases and altered NE in 66.6% of cases. Conclusion: NE of Premature NB’s may have altered even in the presence of a normal TUSI, and need following the development for premature babies, aimed at minimizing the possible future disabilities in this children.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Comunicação e Expressão. Programa de Pós-graduação em Letras - Inglês e Literatura Correspondente. / Made available in DSpace on 2012-10-22T04:32:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 202721.pdf: 1160059 bytes, checksum: 95bad9c84a628494832e123ca3c7133d (MD5) / The purpose of this study is to analyze right hemisphere damaged individuals' performance in reading comprehension, investigating whether RHD individuals are impaired in differentiating literal from figurative language and in revising information, and also verifying their ability to attribute mental states to others.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T05:13:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 278384.pdf: 1717837 bytes, checksum: 647c07688a3ead88c4eeaa543f8840c9 (MD5) / o traumatismo crânio-encefálico (TCE) é caracterizado por elevadas taxas de incidência, mortalidade e morbidade. Prejuízos cognitivos e síndromes psiquiátricas se destacam entre as seqüelas do TCE. Evidencias indicam que os danos secundários têm um importante papel na evolução do TCE e na gênese das seqüelas. Objetivos: padronizar um modelo de TCE em camundongos e investigar seus efeitos na emocionalidade, cognição, histologia e estresse oxidativo. Materiais e métodos: um aparato de queda de peso foi desenvolvido para indução de TCE em camundongos utilizando projéteis de massa 10 g, 12,5 g e 15 g. Após avaliação neurológica em fase aguda, os animais se recuperaram por 10 dias e foram submetidos a uma bateria de testes comportamentais relacionados à emocionalidade e cognição. Parâmetros de estresse oxidativo foram mensurados em córtex cerebral e hipocampo nos períodos de 2 h, 24 h e 14 dias após o trauma. Uma análise histológica qualitativa também foi realizada. Resultados: projéteis de maior massa induziram maior gravidade de trauma. Os camundongos submetidos ao trauma com o projétil de 10 g apresentaram aumento no comportamento tipo-ansioso e depressivo. Os camundongos dos grupos 12,5 g e 15 g apresentaram prejuízos de memória. Esse último grupo também apresentou aumento na atividade locomotora. Na análise histológica, os camundongos do grupo 10 g não tiveram anormalidades aparentes e os camundongos dos grupos 12.5 g e 15 g mostraram dano tecidual extensivo. Alterações indicativas de estresse oxidativo foram observadas nos animais do grupo 12,5 g nos períodos de 24 h e 14 dias. Conclusões: o modelo foi capaz de gerar em camundongos alterações comportamentais e bioquímicas comparáveis às observadas em pacientes com TCE. O modelo demonstrou potencial para uso em futuros estudos abordando os mecanismos e o tratamento do TCE e suas seqüelas. / Traumatic brain injury (TBI) is characterized by high rates of incidence, mortality and morbidity. Cognitive deficits and psychiatric syndromes stand out among TBI sequelae. Evidences indicate that secondary injury plays an important role in the evolution of TBI and in the genesis of its sequelae. Objectives: to standardize a model of TBI in mice and investigate its effects on emotionality, cognition, histology and oxidative stress. Materials and methods: a weight-drop device was developed to induce TBI in mice using projectiles of 10 g, 12.5 g and 15 g. After acute neurological evaluation, mice recovered for 10 days and then were subjected to a behavioral test battery related to emotionality and cognition. Parameters of oxidative stress were measured in the prefrontal cortex and hippocampus at 2 h, 24 h and 14 days after trauma. A histological analysis was also performed. Results: projectiles of greater mass induced greater severity of trauma. Mice subjected to trauma with the 10 g projectile showed increased anxiety- and depression-like behavior. Mice of 12.5 g and 15 g groups showed robust memory deficits. The latter group also presented increased locomotor activity. In the qualitative histological analysis, mice of 10 g group did not show obvious abnormalities and mice of 12.5 g and 15 g groups showed extensive tissue damage. Changes indicating oxidative stress were found in mice of 12.5 g group at 24 h and 14 days after trauma. Conclusions: the model was able to generate in mice behavioral and biochemical changes comparable to those seen patients with TBI. The model demonstrated potential for use in future studies approaching mechanisms and treatment of TBI and its sequelae.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-31 / Objetivo: Verificar a inter-relação entre a memória operacional e a apraxia verbal e explorar quais os componentes desta memória estariam envolvidos na programação motora da fala. Métodos: Foram avaliados 22 sujeitos apráxicos e 22 controles. Foram aplicados um teste de compreensão e um protocolo para avaliar e classificar o grau da apraxia de fala. Para investigar a memória operacional dos indivíduos, foram aplicados o teste de span de dígitos na ordem direta e inversa, um teste de repetição de palavras curtas e longas, sendo que ambos investigam o funcionamento da alça fonoarticulatória e o Rey Auditory Verbal Learning Test, que investiga, além da alça fonoarticulatória, o buffer episódico. Resultados: Através da análise estatística realizada, algumas diferenças significantes foram encontradas. O desempenho dos apráxicos nos testes de memória, tanto no span de dígitos direto e inverso, quanto na repetição de palavras curtas e longas e no Rey Auditory Verbal Learning Test foi estatisticamente significante mais baixo que o desempenho dos controles. Também foi evidenciado que a performance entre os apráxicos em todos os testes de memória foi semelhante, independentemente do grau da apraxia. Conclusão: A partir dos resultados citados anteriormente, o estudo concluiu que os indivíduos com apraxia de fala apresentam um déficit na memória operacional e que este déficit está mais relacionado ao processo articulatório da alça fonoarticulatória. Além deste achado, pôde-se observar que o grau de comprometimento do déficit de memória operacional apresentado pelos apráxicos é independente do grau de apraxia de fala destes indivíduos. / To verify the interference of working memory in the apraxia of speech and explore which components of this memory would be involved in the motor planning of speech. Methods: There were assessed 22 apraxic subjects and 22 control subjects. There were administered a comprehension test and a protocol used to assess and classify the degree of apraxia of speech. To investigate working memory in the subjects, digit span forward and backward test, and a short-lenght and long-lenght word repetition test, both able to assess the phonoarticulatory loop, and the Rey Auditory Verbal Learning Test, which investigates both the phonoarticulatory loop and the episodic buffer, were administered. Results: The statistical analysis of the study showed some significant differences. The apraxic subjects performances in the memory tests, in the forward and backward digit span test, as well as in the short-lenght and long-length word repetition test, and in the Rey Auditory Verbal Learning Test was statistically significantly lower than the performance of the control group. It was also emphasized that the performance among the apraxic subjects in all of the memory tests was similar, independently on the degree of the apraxia. Conclusion: From the results mentioned earlier, the study concluded that subjects with apraxia of speech present a working memory deficit and that this deficit is more related to the articulatory process of the phonoarticulatory loop. Furthermore, a degree of compromise in the working memory deficit shown by the apraxic subjects is independent from the degree of apraxia of speech in these individuals. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Objetivo: Verificar e comparar o comportamento auditivo de resolução temporal em indivíduos com perda auditiva neurossensorial simétrica, assimétrica, indivíduos com lesão cerebral e indivíduos normais. Métodos: 38 indivíduos divididos em 4 grupos: 11 indivíduos com perda auditiva neurossensorial simétrica (GPS); 4 indivíduos com perda neurossensorial assimétrica (GPAS); 8 indivíduos com lesão em lobo temporal (GL); 15 indivíduos Grupo comparação (GC). Estes indivíduos foram submetidos à avaliação auditiva, para definição das características audiológicas dos grupos, e avaliação da habilidade auditiva de resolução temporal através dos testes RGDT e GIN. Os resultados encontrados nesta avaliação foram analisados estatisticamente e as respostas obtidas entre os grupos foram comparadas. Resultados: O nível de audição de cada uma das orelhas nos grupos GPS, GL, e GC são simétricos. Os grupos comparação (GC) e lesão (GL) são iguais com relação aos resultados audiométricos. Observou-se diferença estatisticamente significante entre os grupos comparação,GC, e estudos: perda auditiva simétrica (GPS) e lesão (GL) para os testes RGDT e GIN. Entre os grupos perda auditiva simétrica e grupo lesão houve tendência a significância estatística. Os dados obtidos nos testes RGDT e GIN dos indivíduos do grupo com perda auditiva neurossensorial assimétrica (GPAS) foi utilizado apenas na comparação final com o grupo com perda auditiva simétrica, devido ao reduzido tamanho da amostra deste grupo. Na comparação dos resultados entre os grupos GPS e GPAS não foram encontradas diferenças estatisticamente significantes. Conclusão: A habilidade de resolução temporal foi semelhante entre o grupo de indivíduos com perda auditiva simétrica (GPS) e o grupo com lesão (GL). Ambos os grupos mostraram desempenho pior do que o grupo comparação (GC). O grupo de indivíduos com perda auditiva assimétrica (GPAS) apresentou resultados semelhantes quanto à habilidade auditiva de resolução temporal, em ambos os testes, quando comparados aos indivíduos com perda auditiva simétrica (GPS). A tarefa de resolução temporal com ruído (teste GIN) foi mais fácil do que a tarefa de resolução temporal com tom puro (teste RGDT) mais evidenciado nos grupos com perda auditiva e lesão cerebral, pois estes indivíduos apresentaram limiares melhores no teste GIN do que no teste RGDT. / Purpose: To determine and compare the behavior of auditory temporal resolution in sujbects with symmetrical sensorineural hearing loss, individuals with brain injury and normal individuals. Methods: 38 subjects divided into four groups: 11 individuals with symmetrical sensorineural hearing loss (GPS), 4 individuals with asymmetric sensorineural hearing loss (GPAs), 8 subjects with lesions in the temporal lobe (GL), 15 subjects comparison group (CG). These patients underwent hearing assessment, to define the auditory characteristics of the groups, and evaluation of auditory temporal resolution skills through tests and RGDT GIN. The results of this evaluation were statistically analyzed and the responses obtained were compared between groups. Results: The hearing level of each of the groups ears GPS, GL and GC are symmetrical. The comparson group (GC) and brain injury (GL), are equal with respect to audiometric results. We observed a statistically significant difference between groups comparison, GC, and studies (symmetrical hearing loss, GPS, and lesion, GL) for tests and RGDT GIN. Among the groups symmetrical hearing loss and injury group showed a tendency to statistical significance. The data obtained in tests and RGDT GIN group of individuals with asymmetric sensorineural hearing loss (GPAs) was used only in comparison with the final group with symmetrical hearing loss due to small sample size in this group. Comparing the results between the groups and GPS GPAs were not statistically significant differences. Conclusion: The ability of temporal resolution was better in the group of individuals with symmetrical hearing loss than in the brain injury group. Both groups showed worse performance than in the comparison group, CG. The group of individuals with asymmetric hearing loss showed similar results regarding the ability of auditory temporal resolution in both trials when compared to individuals with symmetrical hearing loss. The task of temporal resolution in noise test (GIN) was easier than the task of temporal resolution with pure tone (RGDT) more evident in the groups with hearing loss and brain injury. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2013-06-25T20:55:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 309597.pdf: 1943516 bytes, checksum: 883de2ef185e2b57b793608f01cd4703 (MD5) / A doença de parkinson (DP) é caracterizada por um processo neurodegenerativo lento e progressivo que acomete principalmente os neurônios dopaminérgicos da substancia negra parte compacta (SNpc). A causa primária da DP ainda não é conhecida, embora um crescente número de fatores genéticos e ambientais tenham sido propostos nos últimos anos, incluindo o trauma cranioencefálico (TCE). No presente estudo, nós investigamos se o TCE poderia representar um fator de predisposição às alterações comportamentais e bioquímicas relacionadas com a DP em camundongos submetidos ao modelo experimental da 6-hidroxidopamina (6-OHDA), uma neurotoxina incapaz de atravessar a barreira hematoencefálica (BHE). Os camundongos foram submetidos a um TCE moderado por meio de um aparato de queda livre de peso (12,5 g), sendo a gravidade do TCE confirmada através do escore neurológico de severidade (ENS). Cinco horas após a indução do TCE, alguns camundongos foram sacrificados para a análise da permeabilidade da BHE, enquanto outros receberam a administração intraperitoneal (i.p.) de salina ou 6-OHDA (100 mg/kg). Durante um período de 4 semanas, esses animais foram submetidos a uma bateria de testes comportamentais, incluindo o campo aberto, o rotarod, a catalepsia induzida por haloperidol, e os comportamentos de rotação e escalada induzidos por apomorfina. Finalizados os testes comportamentais, os animais foram sacrificados para a medida da expressão da enzima tirosina hidroxilase (TH) no estriado através da técnica de imunodetecção de proteínas. O TCE moderado aumentou a permeabilidade da BHE, sendo que na quarta semana após a indução do TCE foi observado um prejuízo significativo no desempenho dos animais do grupo TCE + 6-OHDA nos testes do campo aberto, rotarod e ENS. De maneira importante, estes prejuízos foram revertidos pela administração aguda de L-Dopa (25 mg/kg, i.p.). Não foram observadas diferenças significativas entre os grupos nos testes da catalepsia induzida por haloperidol e na rotação induzida por apomorfina. Entretanto, foi observada uma redução no comportamento de escalada induzida por apomorfina, assim como uma diminuição na expressão de TH no estriado no grupo TCE + 6-OHDA. Em conjunto, os resultados do presente trabalho indicam que a indução de um TCE moderado aumentou a permeabilidade da BHE, levando a uma maior susceptibilidade às alterações motoras e neuroquímicas induzidas pela 6-OHDA em camundongos. Portanto, os achados deste estudo corroboram com dados epidemiológicos que indicam que o TCE pode representar um fator relevante de predisposição à DP, e sugerem que uma maior atenção deva ser dada para o risco em longo prazo para o desenvolvimento da DP após o TCE. / Parkinson's disease (PD) is characterized by a slow and progressive neurodegenerative process, particularly of the dopaminergic neurons of the substantia nigra pars compacta (SNpc). The primary cause of DP remains unknown, although an increasing number of genetic and environmental factors have been proposed, including the traumatic brain injury (TBI). In the present study, we have investigated whether TBI may represent a predisposing factor to PD-related alterations in mice submitted to the experimental model of 6-hydroxydopamine (6-OHDA), a neurotoxin unable to cross the blood-brain barrier (BBB). Mice were submitted to a moderate TBI by free weight-drop device (12.5 g) which was confirmed 1 h later through a neurological severity score (NSS) evaluation. Then, 5 h after TBI induction some mice were sacrificed for the analyses of BBB permeability, while others were injected intraperitoneally (i.p.) with saline or 6-OHDA (100 mg/kg). During a period of 4 weeks these animals were submitted to a battery of behavioral tests including the open field, rotarod, haloperidol-induced catalepsy and apomorphine-induced rotation and climbing behavior for the evaluation of motor performance and then they were sacrificed for the analysis of striatal tyrosine hydroxylase (TH) expression through western blot. The current moderate TBI increased BBB permeability of adult mice. On the 4th week after TBI induction, significant motor and neurological impairments in the open field, rota-rod and NSS tests were observed in the animals from the TBI plus 6-OHDA group, which were reversed by the acute L-Dopa administration (25 mg/kg, i.p.). No changes were observed in the haloperidol-induced catalepsy and the apomorphine-induced rotation tests. Remarkably, pronounced reductions in the apomorphine-induced climbing behavior and striatal TH expression were observed selectively in the TBI plus 6-OHDA group. Altogether, the current findings indicate that a previous moderate TBI event can disrupt the BBB, increasing the susceptibility to motor, neurological and neurochemical alterations induced by dopaminergic neurotoxins such 6-OHDA in mice. Therefore, our results corroborate previous epidemiological studies indicating that TBI may represent a relevant predisposing factor for PD, and suggest that a greater attention should be given to the long-term risk of PD following TBI.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Saúde Animal, 2011. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-06-13T18:51:41Z No. of bitstreams: 1 2011_LinusQueirozPereira.pdf: 2001961 bytes, checksum: 8c777bf26af4a287663fdc2c8e5aa829 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2016-07-03T21:36:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_LinusQueirozPereira.pdf: 2001961 bytes, checksum: 8c777bf26af4a287663fdc2c8e5aa829 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-03T21:36:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_LinusQueirozPereira.pdf: 2001961 bytes, checksum: 8c777bf26af4a287663fdc2c8e5aa829 (MD5) / O óxido nítrico (NO) é formado pelas enzimas NO sintases e desempenha papel na patogênese da neurodegeneração. NO sintase neuronais são expressas em áreas cerebrais lesionadas e sua inibição reduz efeitos de agentes neurotóxicos. O atual estudo desenvolveu siRNAs (small interfering RNAs) direcionados a duas sequências do RNAm de nNOS, presentes nos exons 2 e 28. Primeiramente, foi utilizado o algoritmo Biopredsi para identificar alvos de RNAi. Foi realizada síntese química dos siRNA duplos com 21 nucleotídeos - exon2_hnNOS e exon28hnNOS (Qiagen). Células de neuroblastomas SH-SY5Y receberam 150 pmol ou 300 pmol de cada siRNA estruturado em lipossomas (Lipofectamine 2000®, Invitrogen). Utilizou-se o controle negativo scramble All-Stars® (Qiagen). Os meios de cultivo celular utilizados foram Optimen® e DMEM® (Gibco), pelas primeiras 6h e para as 24h de incubação restantes, respectivamente. O conteúdo de RNAm de nNOS foi quantificado por PCR em tempo real via SYBR Green®; os efeitos de silenciamento foram apresentados pela expressão relativa (2-ΔΔCT). O nível de RNAm foi reduzido para até 60% do controle; os efeitos de silenciamento variaram de acordo com os alvos e doses. Os efeitos dos siRNA sobre a apoptose por neomicina foram determinados pelo ensaio de MTT. As células foram lesionadas por neomicina e tratadas com um dos siRNAs (exon2_hnNOS, exon28hnNOS ou scramble) por dois tempos distintos: imediatamente após ou 24h após a lesão. Ambas estruturas de siRNA mostraram efeitos antiapoptóticos, que alcançaram o máximo de 28,7%. Os efeitos variaram de acordo com o siRNA e o tempo de tratamento. Exon2_hnNOS produziu o maior efeito quando o tratamento foi realizado logo após lesão; exon28_hnNOS foi mais efetivo 24h após a lesão. Os resultados do atual estudo mostram a utilidade de siRNAs no entendimento da patogenia de doenças neurológicas e abrem novos caminhos para a terapia gênica de doenças neurodegenerativas. / Nitric oxide (NO) is formed by the NO synthase enzymes and play pivotal roles in the pathogenesis of neurodegenerative diseases. Neuronal NO synthase enzyme (nNOS) is expressed in brain areas submitted to injury, and its pharmacological blocking can decrease the effects of neurotoxic agents. In our study, we developed and tested two siRNAs targeted to two different nNOS mRNA sequences, located in the exons 2 and 28. Firstly, we used the Biopredsi algorithm to identify the RNAi targets. The synthetic siRNA duplexes with 21 nucleotides (exon2_hnNOS and exon28_hnNOS) were synthetized by Qiagen. Neuroblastoma cells SH-SY5Y received 150 pmol or 300 pmol of each siRNA mixed with Lipofectamine 2000® (Invitrogen). The negative control was the commercial scramble All-Stars® (Qiagen). The cell culture media used in this study were Optimen® and DMEM® (Gibco), for the first 6h and for the remaining 24h of incubation, respectively. The mRNA content was quantified by reverse transcription real-time PCR with SYBR Green® and the silencing effects on nNOS expressed by the relative expression (2-ΔΔCT). The nNOS mRNA content was reduced to 60% to the control level; the silencing effects varied according to the targets and doses used. To determine the effects of siRNA on the apoptotic phenotype, we used the MTT assay. Cells were lesioned by neomycin and treated with each of the siRNAs (exon2_hnNOS, exon28_hnNOS, or scramble) at two time-points: immediately after – or 24h after lesion. Both siRNA structures showed anti-apoptotic effects that reached 28.7%. The effects varied according to the siRNA used and the treatment time-point. Exon2_hnNOS produced the highest effect when the treatment began immediately after lesion; exon28_hnNOS was more effective 24h after lesion. Our results encourage the use of siRNAs to study the role of nNOS in the pathogenesis of brain diseases and highlighted a new therapeutic aproach for neurodegenerative diseases.

Orientadora: Roberta Gonçalves da Silva / Co-orientador: Paula Cristina Cola / Banca: Célia Maria Giacheti / Banca: Rodrigo Bazan / Resumo: O sistema nervoso central representa bilateralmente o controle neuromotor da deglutição, sendo que o córtex cerebral aciona a fase oral e faríngea da deglutição. Embora os achados da deglutição orofaríngea e a localização da lesão no Acidente Vascular Encefálico (AVE) já tenham sido estudados, ainda são necessárias investigações que envolvam a lateralidade da lesão cortical e as alterações na biomecânica da deglutição. Esta pesquisa teve por objetivo analisar a relação entre o início da resposta faríngea (IRF) e a lateralidade da lesão cerebral no indivíduo após Acidente Vascular Encefálico com disfagia orofaríngea em distintas consistências de alimento e idade. Para esta pesquisa foram analisados 90 exames de videofluoroscopia de deglutição, sendo que 73 foram selecionados, contemplando todos os critérios de inclusão e exclusão da pesquisa. Estes 73 exames de videofluoroscopia de deglutição eram de indivíduos pós-AVE hemisférico unilateral e isquêmico com diagnóstico neurológico confirmado por exames médicos clínicos e de neuroimagem. Os indivíduos foram divididos em dois grupos, de acordo com o lado da lesão cortical, sendo que o grupo 1 (G1) foi composto de 39 indivíduos com lesão cortical esquerda e o grupo 2 (G2) de 34 indivíduos com lesão cortical direita. Os exames de G1 e G2 foram analisados na consistência de alimento pastosa fina e líquida. Para verificar o IRF os exames foram analisados por meio de software específico computadorizado e por dois juízes treinados no procedimento. Para a análise do nível de concordância do IRF entre os julgadores foi realizado o teste Índice de Correlação Intraclasses (ICC). Após o ICC, o tempo do IRF utilizado neste estudo foi a média estatística realizada entre a análise dos julgadores. Posteriormente, foi utilizado o teste Mann-Whitney para comparar os grupos G1 e G2 com o IRF. Os resultados... / Abstract: The central nervous system represent bilaterally of the neuromotor control of swallowing, and the cerebral cortex triggers the oral and pharyngeal phases. Although the findings of oropharyngeal swallowing and location of the lesion in stroke have been studied, it is still necessary investigations involving the lateralization of cortical damage and changes in swallowing. The aimed of this research was to verify the relationship between pharyngeal swallow response (PSR) with the lateralization of brain injury in individual after stroke with oropharyngeal dysphagia in different food consistencies and age. For this study were analyzed 90 videofluoroscopic swallow studies, and 73 were selected, covering all the criteria for inclusion and exclusion of research. These 73 videofluoroscopic swallow studies were of individuals post unilateral hemispheric ischemic stroke with neurological diagnosis confirmed by clinical medical or neuroimaging examinations. They were divided into two groups, according to the lateralization of the cortical lesion, and the group 1 (G1) was composed of 39 individuals with left cortical lesion and group 2 (G2) of 34 patients with right cortical injury. The examinations of G1 and G2 were analyzed in the puree and thin liquid consistencies. To check the PSR, the exams were analyzed using computerized specific software and two judges trained in the procedure. For the analysis of the PSR was carried out agreement between the judges in the intraclass correlation test (ICT). After the ICT, the time of the PSR used in this study was the average statistical analysis performed between the judges. Subsequently, was used the Mann-Whitney test to compare the groups G1 and G2 with the PSR. The results showed no statistical difference in the comparison between the G1 and G2 for the value of PSR in both consistencies and age group studied. Therefore, we concluded that there was no ... / Mestre

Estudamos a relação entre local e tipo da lesão cerebral com a gravidade da disfagia, e a relação entre o grau de comprometimento motor com a gravidade da disfagia em crianças com paralisia cerebral. Foi um estudo retrospectivo de exames de videofluoroscopia da deglutição e ressonância magnética cerebral de crianças com diagnóstico de paralisia cerebral e disfagia, atendidas do Hospital das Clinicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (HCFMRP), Universidade de São PauloBrasil, de 2008 a 2016. Foi realizada analise descritiva dos dados e utilizado o teste exato de Fisher para verificar a relação entre as variáveis estudadas. Foram incluídos na pesquisa exames de 20 crianças com idades ao exame de ressonância magnética entre 2 anos e 1 mês de vida a 10 anos e 2 meses, e ao exame de videofluoroscopia da deglutição entre 9 meses a 16 anos e 2 meses. Quanto ao gênero, seis crianças eram do sexo feminino, e 14 do sexo masculino. Com relação à classificação da função motora grossa, duas crianças eram do nível III, cinco do nível IV e 13 do nível V. Quanto a gravidade da disfagia, sete crianças apresentaram disfagia leve/moderada, três com disfagia moderada e 10 crianças com disfagia moderada/grave. As principais alterações evidenciadas na ressonância magnética, quanto à localização da lesão, foram em corpo caloso (60%), ventrículos cerebrais (60%), substancia branca (55%), tronco encefálico (35%) e cerebelo (15%). Os tipos de lesões cerebrais mais freqüentes foram encefalopatia hipóxico-isquêmica (35%), leucomalacia periventricular (25%) e encefalomalacia multicistica (15%). Não houve relação entre o local da lesão cerebral e gravidade da disfagia, entretanto houve relação entre o tipo de lesão cerebral e a gravidade do distúrbio de deglutição (p=0,02). Além disso, houve relação entre a gravidade da disfagia e o grau de comprometimento da função motora grossa. Deste modo, a gravidade da disfagia foi relacionada com encefalomalacia multicística e com o comprometimento da função motora grossa, e nossos resultados mostram a importância da avaliação de deglutição tão logo, nestes pacientes, seja realizado o diagnóstico médico. Além disso, ressaltamos a importância da avaliação da deglutição em todos graus de lesão, devido à presença de disfagia leve a intensa. / We studied the relationship between site and type of brain injury with the severity of dysphagia, and the relationship between the degree of motor impairment and the severity of dysphagia in children with cerebral palsy. It was a retrospective study of videofluoroscopy examinations of swallowing and magnetic resonance imaging of children diagnosed with cerebral palsy and dysphagia, attended at Hospital das Clinicas of the Ribeirão Preto Medical School (HCFMRP), University of São Paulo-Brazil, from 2008 to 2016. A descriptive analysis of the data was performed and Fisher\'s exact test was used to verify the relationship between the variables studied. Included in the study were examinations of 20 children aged between 2 years and 1 month of life to 10 years and 2 months, and videofluoroscopy of swallowing between 9 months and 16 years and 2 months. Six children were female, and 14 were male. Regarding the classification of gross motor function, two children were of level III, five of level IV and 13 of level V. Regarding the severity of dysphagia, seven children presented mild/moderate dysphagia, three with moderate dysphagia and 10 children with moderate/severe dysphagia. The most freqeunt lesions seen in magnetic ressonance imaging (MRI) were in the corpus callosum (60%), cerebral ventricles (60%), white matter (55%), brainstem (35%) and cerebellum (15%). The most frequent types of brain lesions were hypoxicischemic encephalopathy (35%), periventricular leukomalacia (25%) and multicystic encephalomalacia (15%). There was no relationship between the site of the brain lesion and the severity of dysphagia, however, there was a relationship between the type of brain injury and the severity of the swallowing disorder (p = 0.02). In addition, there was a relationship between the severity of dysphagia and the degree of impairment of gross motor function. Thus, the severity of dysphagia was related to multicystic encephalomalacia and the involvement of gross motor function, and our results show the importance of swallowing assessment as soon as the medical diagnosis is made in these patients. In addition, we emphasize the importance of evaluating swallowing in all degrees of injury, due to the presence of mild to severe dysphagia