Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This work attempts to make a study of the chemical composition of the essential oil from leaves of seven Lippia gracilis genotypes. In addition, we investigated the effect of water stress on the chemical composition of the essential oil (EO) of the species. A total of 32 volatile compounds were identified with predominance of phenolic monoterpenes: carvacrol, thymol and p-cymene. The seven genotypes were divided into two chemotypes: thymol chemotype, represented by the 106 genotype, and carvacrol chemotype, formed by the 107, 108, 109, 110, 201 and 202 genotypes. Biotransformation reactions have also been carried out using Botryosphaeria sp and Aspergillus niger as biocatalyst. In addition to the major components of the L. gracilis essential oil (carvacrol and thymol), the monoterpenes (+)-pulegone, geraniol, (-)-citronellol, (+)-limonene, rac-camphor and the two enantiomers of the fenchone were evaluated as substrates for biotransformation reactions. Botryosphaeria sp. catalyzed the hydroxylation of the camphor and fenchone at different positions, the carbon 6-endo of the camphor and the carbon 6-exo of the fenchone was the major site of addition of the OH group. Aspergilus niger catalyzed the hydroxylation of fenchone enantiomers and the isomerization of geraniol, resulting in formation of 6-exo-hidroxifenchone and of rac-linalool, respectively. / No presente trabalho foi realizado o estudo da composição química do óleo essencial das folhas de sete genótipos de Lippia gracilis Schauer, além de verificar o efeito do estresse hídrico na composição química e no teor de óleo essencial (OE) produzido pela espécie vegetal. Foram identificados 32 compostos no OE de L. gracilis com predominância de monoterpenos. Os principais componentes identificados foram os monoterpenos fenólicos carvacrol, timol e p-cimeno. Os sete genótipos foram divididos em dois quimiotipos, o quimiotipo timol, representado pelo genótipo 106, e o quimiotipo carvacrol, formado pelos genótipos 107, 108, 109, 110, 201 e 202. Também foram realizadas reações de biotransformação de terpenos voláteis por duas espécies fúngicas: Botryosphaeria sp. e Aspergillus niger. Além dos principais componentes do óleo essencial de L. gracilis, carvacrol e timol, foram testados como substrato os monoterpenos (+)-pulegona, geraniol, (-)-citronelol, (+)-limoneno, rac-cânfora e o par de enantiômeros da fenchona. Botryosphaeria sp. catalisou a hidroxilação da cânfora e da fenchona em diferentes posições, o carbono 6-endo da cânfora e o carbono 6-exo da fenchona foram os principais sítio de hidroxilação. Aspergillus niger promoveu hidroxilação dos enantiômeros da fenchona e isomerização do geraniol, majoritariamente originando a 6-exo-hidroxifenchona e rac-linalol nas reações, respectivamente.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:08:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarcelinoGVpdf.pdf: 1501043 bytes, checksum: 4189a4e35d01ba02dd420f3bab764b2d (MD5) Previous issue date: 2009-08-28 / The biofilms microbial forms of association are responsible for generating, accelerating and / or induce the process of corrosion. The damage generated in the petroleum industry for this type of corrosion is significatives, representing major investment for your control. The aim of this study was to evaluate such tests antibiograms the effects of extracts of Jatropha curcas and essential oil of Lippia gracilis Schauer on microrganisms isolated from water samples and, thereafter, select the most effective natural product for further evaluation of biofilms formed in dynamic system. Extracts of J. curcas were not efficient on the complete inhibition of microbial growth in tests type antibiogram, and essential oil of L. gracilis Schauer most effective and determined for the other tests. A standard concentration of essential oil of 20 μL was chosen and established for the evaluation of the biofilms and the rate of corrosion. The biocide effect was determined by microbial counts of five types of microorganisms: aerobic bacteria, precipitating iron, total anaerobic, sulphate reducers (BRS) and fungi. The rate of corrosion was measured by loss of mass. Molecular identification and scanning electron microscopy (SEM) were performed. The data showed reduction to zero of the most probable number (MPN) of bacteria precipitating iron and BRS from 115 and 113 minutes of contact, respectively. There was also inhibited in fungi, reducing to zero the rate of colony-forming units (CFU) from 74 minutes of exposure. However, for aerobic and anaerobic bacteria there was no significant difference in the time of exposure to the essential oil, remaining constant. The rate of corrosion was also influenced by the presence of oil. The essential oil of L. gracilis was shown to be potentially effective / Os biofilmes s?o formas de associa??o microbiana respons?veis por gerar, acelerar e/ou induzir o processo de corros?o. Os danos gerados na ind?stria de petr?leo por esse tipo de corros?o s?o significativos, representando grandes investimentos para seu controle. O objetivo desse trabalho foi avaliar em testes tipo antibiograma os efeitos dos extratos de Jatropha curcas e do ?leo essencial de Lippia gracilis Schauer sobre microrganismos isolados de amostras de ?gua e, apartir de ent?o, selecionar o produto natural mais efetivo para posterior avalia??o sobre biofilmes formados em sistema din?mico. Os extratos de J. curcas n?o foram eficientes sobre a inibi??o completa do crescimento microbiano em testes tipo antibiogramas, sendo o ?leo essencial mais efetivo e determinado para os demais testes. Uma concentra??o padr?o do ?leo essencial de 20 μL foi escolhida e estabelecida para a avalia??o sobre os biofilmes e sobre a taxa de corros?o. O efeito biocida foi determinado pela contagem microbiana de cinco tipos de microrganismos: bact?rias aer?bicas, precipitadoras de ferro, anaer?bicas, redutoras de sulfato (BRS) e fungos. A taxa de corros?o foi calculada por perda de massa. Identifica??o molecular e micrografias eletr?nicas de varredura (MEV) foram realizadas. Os dados mostraram redu??o a zero do n?mero mais prov?vel (NMP) de bact?rias precipitadoras de ferro e BRS a partir de 115 e 113 minutos de contato, respectivamente. Tamb?m houve inibi??o sobre fungos, reduzindo para zero a taxa de unidades formadoras de col?nias (UFC) a partir de 74 minutos de exposi??o. Entretanto, para bact?rias aer?bicas e anaer?bicas n?o houve diferen?a significativa para o tempo de exposi??o com o ?leo essencial, permanecendo constante. A taxa de corros?o tamb?m foi influenciada pela presen?a do ?leo. O ?leo essencial de L. gracilis Schauer mostrou-se potencialmente efetivo

Medicinal plants are one of the most important sources of drugs used in the pharmaceutical industry. Among traditional medicinal plants of the Brazilian northeastern, Lippia gracilis Schauer (Verbenaceae) had been used for several medicinal purposes. Therefore, the present study aimed to determine the chemical composition of the leaf essential oil (EO) of L. gracilis, as such to evaluate it in vitro and in vivo anticancer potential. For that, the leaf essential oil (EO) of L. gracilis was prepared using hydrodistillation followed by GC MS analysis. The cytotoxic effects of EO and its components (thymol, p-cymene, γ-terpinene and myrcene) have been assessed in HepG2, K562 and B16-F10 tumor cells as such in non- tumoral (PBMC). The effects of EO on cell proliferation and apoptosis induction were investigated in HepG2 cells. Furthermore, mice bearing Sarcoma 180 tumor cells were used to confirm its in vivo effectiveness. The results showed that the EO composition was characterized by the presence of thymol as major constituent which exhibited promising cytotoxicity against the all tumor cells tested, whereas its investigated components presented low cytotoxic potential. Moreover, EO treatment caused G1 arrest in HepG2 cells accompanied by the induction of DNA fragmentation without affecting cell membrane integrity. Cell morphology consistent with apoptosis and a remarkable activation of caspase-3 were also observed, suggesting induction of caspase-dependent apoptotic cell death. In vivo antitumor study showed tumor growth inhibition rates of 38.5 41.9%. In conclusion, the EO, which has thymol as its major constituent, possesses significant in vitro and in vivo antitumor activity. These data suggest that leaf essential oil of L. gracilis is a potential medicinal resource, which may ultimately be used in cancer treatment. / As plantas medicinais são uma das mais importantes fontes de medicamentos para a indústria farmacêutica. Entre as plantas utilizadas na medicina popular no nordeste do Brasil, a Lippia gracilis Schauer (Verbenaceae) é uma das mais tradicionais e tem sido usada para diversos propósitos. Sendo assim, o presente trabalho teve por objetivo geral avaliar o potencial anticâncer do óleo essencial (OE) das folhas de L. gracilis em modelos experimentais in vitro e in vivo. O OE foi extraído por hidrodestilação e a análise química foi feita por CG/EM. Os efeitos citotóxicos do OE e dos seus componentes, timol, p-cimeno, γ-terpineno e mirceno, foram avaliados em células tumorais das linhagens HepG2, B16-F10 e K562, bem como em células não-tumorais (PBMCs). O efeito do OE na proliferação celular e na indução de apoptose foram investigados nas células HepG2. Além disso, camundongos transplantados com células do tumor Sarcoma 180 foram usados para confirmar sua eficácia in vivo. Os resultados mostraram que o OE apresentou o timol como composto químico majoritário e demonstrou promissora citotoxidade contra todas as células tumorais testadas. Por outro lado, os seus componentes investigados, apresentaram efeito citotóxico pouco potente. Além disso, o tratamento com o OE acarretou parada do ciclo celular das células HepG2 na fase G1, acompanhada por indução de fragmentação do DNA, sem afetar a integridade da membrana. Morfologia celular consistente com apoptose e uma notável ativação de caspase-3, também foram observadas, sugerindo indução de morte celular por apoptose dependente de caspase. O estudo da atividade antitumoral in vivo mostrou inibição do crescimento tumoral com taxas de 38,5% 41,9%. Assim, o OE apresentou o timol como principal constituinte e demonstrou significativa atividade antitumoral in vitro e in vivo. Os resultados obtidos sugerem que o OE das folhas de L. gracilis é um potencial recurso medicinal, que pode vir a ser empregado no tratamento do câncer.

Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-05-12T20:06:08Z No. of bitstreams: 1 TatianePenha.pdf: 1070731 bytes, checksum: 317d377ddfce7d741b49eecde3cf7ec4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-12T20:06:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TatianePenha.pdf: 1070731 bytes, checksum: 317d377ddfce7d741b49eecde3cf7ec4 (MD5) Previous issue date: 2016-10-31 / Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão (FAPEMA) / The tick Rhipicephalus microplus, found in tropical and subtropical regions, has caused great harm to the Brazilian livestock. The damage caused by this tick the Brazilian livestock exceeds three billion dollars. Verbenaceae Lippia genus, especially the species L. sidoides and L. gracilis, have been reported with potential activity in larvae and R. microplus females. Therefore, the aim of this study was to evaluate the acaricide activity of L. sidoides and L. gracilis essential oils and its major compounds thymol and carvacrol and characterize morphological changes in ovaries of R. microplus females from lethal concentrations 50 (LC50) and 75% (LC75) of the study population. After selection of the genotypes (LGRA-106, LGRA-201, LSDI-102 and LSDI-103), groups of 10 engorged females were subjected to the immersion test in essential oils at different concentrations and DMSO 3% was used for the control. After seven days, the ticks were dissected in phosphate buffer solution and the ovaries were fixed in 2.5% glutaraldehyde for a period of 24 hours. The tissues were dehydrated and embedded in plastic molds Leica resin for histological analysis. The results visualization and characterization of the ovary and the different stages of development of oocytes. In the control group, treated with 3% DMSO, changes in the tissues have not been verified. In groups treated with the L. gracillis oils and L. sidoides oils, vacuolization was observed in oocytes II, III, IV and V, cell membrane disintegration in oocytes II, III, IV and V, with complete morphological deformation of oocytes IV and V. The major compounds, thymol and carvacrol seem to be actively working on these changes. The results showed activity of the different genotypes of the essential oils and their major compounds in larvae and females of R. microplus and allowed to elucidate the mechanism of action of the same in the oogenesis of the females, leading to believe that the compounds tested are promising for the development of acaricide products. / O carrapato Rhipicephalus microplus, encontrado em regiões tropicais e subtropicais, ocasionam mais de três bilhões de dólares à pecuária brasileira. Óleos essenciais de Verbenáceas do gênero Lippia, especialmente Lippia sidoides e Lippia gracilis, têm sido descritos com potencial atividade carrapaticida e interferindo na reprodução de diferentes espécies de carrapatos. O objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade carrapaticida dos óleos essenciais de L. sidoides e L. gracilis e seus compostos majoritários timol e carvacrol, selecionando os genótipos que apresentam maiores atividades contra o carrapato bovino e caracterizar as alterações morfológicas dos ovários de fêmeas de R. microplus a partir das concentrações letais para 50 (CL50) e 75% (CL 75) da população estudada. Após a seleção dos genótipos (LGRA-106, LGRA-201, LSDI-102 e LSDI-103, grupos de 10 fêmeas ingurgitadas foram submetidas ao teste de imersão em óleos essenciais em diferentes concentrações e para o controle foi utilizado DMSO 3%. Após sete dias, as fêmeas foram dissecadas em solução tampão fosfato e os ovários foram fixados em glutaraldeído 2,5% por um período de 24 horas. Os tecidos foram desidratados e incluídos em moldes plásticos de resina Leica para análise histológica. Os resultados permitiram a visualização e caracterização do ovário e dos diferentes estágios de desenvolvimento dos ovócitos. No grupo controle (DMSO 3%), não foram verificadas alterações nos tecidos. Nos grupos tratados com os óleos de L. gracillis e L. sidoides foram observadas vacuolizações de ovócitos II, III, IV e V, desintegração de membrana plasmática em ovócitos II, III, IV e V, com completa deformidade morfológica de ovócitos IV e V. Os compostos majoritários, timol e carvacrol parecem estar atuando ativamente nessas alterações. Os resultados obtidos mostraram atividade dos diferentes genótipos dos óleos essenciais e seus compostos majoritários em larvas e fêmeas de R. microplus e permitiu elucidar o mecanismo de ação dos mesmos na oogêse das fêmeas, levando a crer que os compostos testados são promissores para o desenvolvimento de produtos carrapaticidas.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:26:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1159_1.pdf: 618867 bytes, checksum: 7cd487fc5f601809f1f857894332f68c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente estudo teve como objetivo principal a determinação da atividade bacteriostática do óleo essencial de Lippia gracilis Schauer, planta nativa do semi-árido nordestino, conhecida vulgarmente por alecrim da chapada e do carvacrol metabólito secundário presente no gênero Lippia. Para esta avaliação foi utilizado o método de micro diluição em meio liquido e dez cepas de Pseudomonas aeruginosa ou de Staphylococcus aureus, ambas com perfis de resistência a pelo menos dois agentes antimicrobianos. O óleo essencial de Lippia gracilis e o carvacrol foram diluídos de forma a obter concentrações que variaram de 1,56% a 0,012%v/v. Os inocula bacterianos foram padronizados em 104 UFC/poço. Uma completa inibição do crescimento de P. aeruginosa e S. aureus foi observada em concentrações equivalentes a 0,78%v/v do óleo essencial de L. gracillis. O carvacrol na concentração de 0,012% v/v inibiu 70% das cepas de S. aureus. Esta atividade quando comparada ao óleo essencial de Lippia gracilis não foi estatisticamente diferente. O óleo essencial de Lippia gracilis mostrou-se mais ativo frente a P. aeruginosa que o carvacrol e estes resultados foram diferentes estatisticamente (p<0,05). O óleo essencial de Lippia gracilis é eficaz sobre microrganismos resistentes de patogenicidade reconhecida e de grande interesse nas infecções nosocomiais

Lippia genus has a great pharmacological and therapeutic potential and encompasses approximately 200 species of herbs, bushes and small trees with a consistent chemical composition and pharmacological, therapeutics and culinary activities. This research aimed to evaluate the chemical and pharmacological aspects of Lippia gracilis Schauer (Verbenaceae), well-known as alecrim do campo , which grew at the germplasm bank of the Federal University of Sergipe, Brazil. This study was divided in two parts: in the first one we tried to evaluate the nonpolar compounds from the essential oil (EO) of L. gracilis plants under hydric stress and without hydric stress. The identification of the EO was made by using GC/MS and its anti-inflammatory and antinociceptive activities were studied in animal models. As results, thymol, p-cineme, methyl thymol, and carvacrol were found in the EO analysis, independent of the hydric stress L. gracilis leaves were submitted. Although the different hydric stresses the plants pass through, the chemical composition of the EO was too similar, so it was chosen to study the one obtained from the plants submitted to hydric stress in the animal models. In the animal models, we fed 1 hour before the beginning of the experiments with the EO (50, 100, and 200 mg/kg, p.o.), vehicle (tween 80 at 0.2% in saline, 10 mL/kg, p.o.) and acetylsalicylic acid (ASA, 300 mg/kg, p.o.) or dexamethasone (Dexa, 2 mg/kg, s.c.). To evaluate the anti-inflammatory activity, we used paw oedema model (Wistar rats, 120- 180 g) and leukocyte migration into the peritoneal cavity (Swiss mice, 20-30 g). To evaluate the antinociceptive activity, we used acetic acid-induced abdominal writhes model in Swiss mice. In all in vivo experiments we used groups of 6 animals. In the paw oedema assay, could be verified a reduction in inflammation (p<0.01) at the 200 mg/kg dose in Wistar rats in all measurement time (1, 2, 3 and 4 hours after carrageenaninduced paw oedema). The positive control (AAS 300 mg/kg) was also able to reduce the inflammation (p<0.05). In the leucocyte migration model, all EO doses used (50, 100, and 200 mg/kg) were able to reduces leucocytes migration, caused by carrageneen (p<0.01). Dexa was also able to reduce the migration (p<0.001). In the acetic acidinduced abdominal writhes model, all the doses reduced the nociception caused by acetic-acid, whereas the 200 mg/kg dose showed similar effects to ASS (p<0.001). In the second part of this study, the main polar compounds of L. gracilis were evaluated using antioxidant in vitro assays, namely ABTS (2,2 -azino-bis (3-ethylbenzothiazoline6- sulphonic acid), FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) and DPPH (2,2-di(4- tertoctylphenyl)- 1-picrylhydrazyl), with trolox as reference antioxidant. The chemical composition of aqueous and ethanolic extracts was also evaluated by HPLC (High Performance Liquid Chromatography) and LCMS (Liquid Chromatography Mass spectrometry). Three major compounds with high antioxidant activity could be identified: luteolin-C-6-glucoside, luteolin-C-8-glucoside and carvacrol. The antioxidant activity of the ethanolic extract was higher than the water extract (about 40%), independent of the solvent used. These three compounds were also tested isolate, besides their comparison with well-known antioxidants as quercetin and luteolin. The antioxidant activity clearly depends on the assay used and the compound structure. Carvacrol showed higher activity in ABTS assay than C-6 and C-8-glucosides, but lower in DPPH and FRAP assays. In all assays, luteolin-C-6 showed higher antioxidant activity than luteolin-C-8-glucoside. L. gracilis is a good source of compounds with potential antioxidant, anti-inflammatory and antinociceptive activities. This is the first time that luteolin C-6 and C-8-glucosides were described in the L. gracilis. / O gênero Lippia apresenta grande potencial farmacológico e terapêutico e possui aproximadamente 200 espécies de ervas, arbustos e pequenas árvores, apresentando um perfil consistente de composição química e atividades farmacológicas, terapêuticas e culinárias. O objetivo deste trabalho foi estudar aspectos químicos e farmacológicos da Lippia gracilis Schauer (Verbenaceae), conhecida popularmente por alecrim do campo , proveniente do banco de germoplasma da Universidade Federal de Sergipe. Assim, este estudo foi dividido em duas partes: na primeira buscou-se estudar aspectos relacionados aos constituintes apolares da L. gracilis, presentes no óleo essencial (OE) obtido das folhas de plantas submetidas ao estresse hídrico (sazonal) e sem estresse. A composição dos constituintes do OE foi estudada com a utilização da cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa (CG/EM) e suas atividades anti-inflamatória e antinociceptiva estudadas em modelos in vivo. Como resultados, verificamos que quatro compostos foram encontrados em maior concentração nos OE (independentemente das plantas terem sido submetidas ou não ao estresse hídrico): timol, p-cinemo, metil timol e carvacrol. Como a composição química dos OEs foi muito similar, escolheu-se trabalhar com o OE das plantas submetidas ao estresse hídrico nos ensaios in vivo. Para tanto, os animais (n=6/grupo) foram inicialmente prétratados com o OE (50, 100 e 200 mg/kg, v.o.), veículo (tween 80 a 0,2% em salina, 10 mL/kg, v.o.) e ácido acetilssalicílico (AAS, 300 mg/kg, v.o.) ou dexametasona (Dexa, 2 mg/kg, s.c.), dependendo do modelo experimental, 1 h antes do início dos experimentos. A atividade anti-inflamatória foi avaliada utilizando-se os modelos de edema de pata (ratos Wistar, 120-180 g) e peritonite (camundongos Swiss, 20-30 g) induzidos por carragenina. O tratamento dos animais com o OE na dose de 200 mg/kg reduziu de forma significativa (p<0,01) o edema induzido pela carragenina (1%, 100 μL/pata) em todos os tempos mensurados (1, 2, 3 e 4 h após a indução do edema). De forma similar, o AAS reduziu (p<0,05) a formação do edema em todos os tempos. No modelo de peritonite, todas as doses do OE (50, 100 e 200 mg/kg, p<0,01), bem como a dexametasona (p<0,001), foram capazes de reduzir a migração de leucócitos induzida por carragenina (1%, 250 μL, i.p.). Para avaliação da atividade antinociceptiva utilizouse o modelo de contorções abdominais induzidas por ácido acético (0,6%, 100 μL/10g, i.p.) em camundongos (Swiss, 20-30g). Observou-se que todas as doses do OE foram capazes de reduzir (p<0,05) a nocicepção induzida pelo ácido acético, sendo que com a dose de 200 mg/kg do OE observaram-se efeitos semelhantes ao AAS (p<0,001). Na segunda parte do presente estudo, os constituintes polares foram estudados in vitro, utilizando-se os ensaios de avaliação da atividade antioxidante do ABTS (2,2 -azino-bis (3-etil-benzolina-6-sulfonado), FRAP (poder antioxidante de redução do ferro) e DPPH (2,2-di(4-tertoctilfenil)-1-picrilhidrazil), com o composto de referência sendo o trolox, um análogo da vitamina E. A composição química dos extratos aquoso e alcoólico obtidos das folhas da L. gracilis, foi avaliada por cromatografia líquida de alto desempenho acoplada a espectrometria de massa (HPLC/EM). Através dos perfis químicos dos extratos obtidos por HPLC/EM, foi possível identificar três compostos majoritários com intensa atividade antioxidante: luteolina-C-6-glucosídeo, luteolina-C- 8-glucosídeo e carvacrol. Em ensaios in vitro, verificou-se uma maior atividade antioxidante (40%) do extrato alcoólico quando comparado ao aquoso, independente do solvente utilizado para a dissolução. Os três compostos majoritários foram testados isoladamente, além de terem sido comparados com compostos antioxidantes de ação conhecida, como quercetina e luteolina. As atividades detectadas dependeram claramente do ensaio utilizado e da estrutura do composto. O carvacrol apresentou maior atividade no ABTS, quando comparado com as luteolinas, porém atividade inferior no DPPH e no FRAP. Em todos os ensaios, a luteolina-C-6-glucosideo apresentou valores maiores que a luteolina-C-8-glucosideo. A L. gracilis representa uma fonte potencial de antioxidantes, além de possuir atividades anti-inflamatória e antinociceptiva. Este é o primeiro relato de detecção das luteolinas C-6 e C-8 glucosídeo na espécie Lippia gracilis.

Free-living amoebae (AVL), belonging to the genus Acanthamoeba are widely distributed in nature, being found in various types of soil and water, in the air, in air conditioning and sewage, and other environments. These amoebae are able to cause severe disease in human beings, highlighting the granulomatous amoebic encephalitis and keratitis. The amoebic keratitis is an infectious disease that affects the cornea and it can lead to blindness, with symptoms such as blurred vision, intense pain, photophobia and increased eye pressure. Users of contact lenses are more amenable to this type of infection because they may present microtraumatisms in the cornea, which makes the environment favorable action of these amoebae. There is no effective treatment for this disease and most used drugs suffers resistance from the parasite and others such as corticosteroids, they may give an initial improvement, but then the worsening of the disease. The solutions for cleaning contact lenses are also not efficient in eliminating this parasite, since the ISO 14729 and FDA (Food and Drug Administration, USA), which regulate the microbiological requirements and test methods for the production of hygiene products for contact lenses do not require that such solutions are tested against Acanthamoeba, which makes users more amenable to this type of lenses infection. In view of this, the objective of this study was to develop a microemulsion with the essential oil of L. gracilis and check its amoebicide potential front of trophozoites of Acanthamoeba castellanii. The formulations were prepared by using the phase diagram, using Tween 80 and propylene glycol as surfactant and co-surfactant of the system. The physico-chemical characterization of the formulations was performed by analysis of polarized light microscopy, rheology, light low angle scattering (SAXS), electrical conductivity, particle size and polydispersity. Amoebicide front activity assays for trophozoite A. castellanii formulation in question and all its separate excipients were performed. The obtained samples had transparent and thermodynamically stable to droplet size and characteristic polydispersity index microemulsion. The formulations presented are isotropic in polarized light microscopy and, through SAXS curves, it was observed that the formulations showed characteristics bicontinuous microemulsion. These formulations showed low electrical conductivity which can be associated with high amount of nonionic surfactant. The rheological properties of the system have shown that they possess newtonian behavior characteristic of microemulsion and that the viscosity increases when the amount of oil decreases and hence the droplet size. In bioassays, the surfactants showed no significant activity against the trophozoites and the essential oil of L. gracilis showed an IC50 of 9,52μg / ml. When the test was conducted with the microemulsion containing the same oil, this IC 50 fell to 2.55 μg / ml and using a formulation with smaller droplet tamnho this value fell to 0.65μg/ml, thus proving the efficacy of nanossistema. / Amebas de vida livre (AVL), pertencentes ao gênero Acanthamoeba, estão amplamente distribuídas na natureza, sendo encontradas em diversos tipos de solo e água, no ar, em ar-condicionado e esgotos, entre outros ambientes. Essas amebas são capazes de ocasionar graves doenças nos seres humanos, destacando a encefalite granulomatosa e a ceratite amebiana. A ceratite amebiana é uma doença infecciosa que acomete a córnea e que pode levar a cegueira, apresentando sintomas como visão borrada, dor intensa, fotofobia e aumento da pressão ocular. Os usuários de lentes de contato são os mais propícios a este tipo de infecção, pois podem apresentar microtraumatismos na córnea, o que torna o ambiente favorável a ação dessas amebas. Ainda não existe um tratamento eficaz para esta doença e a maioria dos medicamentos utilizados sofre resistência por parte do parasito e outros, como os corticosteróides, podem apresentar uma melhora inicial, mas em seguida o agravamento da doença. As soluções para limpeza das lentes de contato também não são tão eficientes em eliminar este parasita, uma vez que a ISO 14729 e a FDA (Food and Drug Administration, Estados Unidos), que regulamentam os requisitos microbiológicos e os métodos de ensaio para a produção de produtos de higiene para lentes de contato, não obrigam que essas soluções sejam testadas contra Acanthamoeba, o que torna os usuários de lentes mais propícios a este tipo de infecção. Diante disto, o objetivo deste trabalho foi desenvolver e caracterizar sistemas microemulsonados, contendo o óleo essencial de Lippia gracilis como fase oleosa e analisar sua potencial ação amebicida frente a trofozoítos de Acanthamoeba castellanii. As formulações foram preparadas através do uso do diagrama de fase, utilizando o Tween 80 e o propilenoglicol como tensoativo e cotensoativo, respectivamente, do sistema. A caracterização físico-química das formulações foi realizada por meio de análises de microscopia de luz polarizada, reologia, espalhamento de luz a baixo ângulo (SAXS), condutividade elétrica, tamanho de partícula e índice de polidispersão. Foram realizados ensaios de atividade amebicida frente à trofozoítos de A. castellanii da formulação em questão e de todos os seus excipientes separados. As amostras obtidas apresentaram-se transparentes e termodinamicamente estáveis com tamanho de gotícula e índice de polidispersão característicos de microemulsão. As formulações apresentaram-se isotrópicas na microscopia de luz polarizada e, através das curvas de SAXS, foi possível observar que as formulações apresentaram características de microemulsão bicontínua. Estas formulações mostraram baixa condutividade elétrica a qual pode estar associada a alta quantidade de tensoativo não iônico. As propriedades reológicas do sistema demonstraram que estes possuem comportamento newtoniano característico de microemulsão e que a viscosidade aumenta quando diminui a quantidade de óleo e, consequentemente, o tamanho da gotícula. Nos ensaios biológicos, os tensoativos não apresentaram atividade significativa frente aos trofozoítos e o óleo essencial de L. gracilis apresentou uma IC50 de 9,52μg/ml. Quando o teste foi realizado com a microemulsão contendo o mesmo óleo, essa IC50 caiu para 2,55 μg/ml e, ao utilizar uma formulação com tamanho de gotícula menor, esse valor caiu para 0,65 μg/ml, comprovando, assim, a eficácia do nanossistema. / São Cristóvão, SE

In terms of morbidity and mortality, dengue is considered the important human viral disease transmitted by mosquitoes, caused by virus of the family Flaviridae, one of the main problems in public health in the world, due to the great potential for the development of several forma and lethal disease. Another problem about dengue control is the population of Aedes aegypti resistant to toxicity of chemical insecticides, such as temephos. This work involved the formulation and characterization of inclusion complex of essential of Lippia gracilis (LGEO), with potent larvicidal effect against Aedes Aegypti Linnaeus larvae in β-cyclodextrin (β-CD), aiming to improve oil solubility in aqueous serving as a strategy for obtaining new products larvicides. Inclusion complexes were obtained by kneading and coevaporation. The complexes obtained by paste and co-evaporation was assessed the influence of the co-solvent used to preparation the complexes by paste with water (PMW), kneading with ethanol / water (PME) co-evaporation with water (COW) and co-evaporation of ethanol / water (COE) methods. The chemical LGEO constituents were identified by gas chromatography coupled to mass spectrometer (GC / MS) where the complex (PMW) was superior in the inclusion of carvacrol with a content of 15.25% compared with the another techniques preparation. The complexes were characterized by thermogravimetry (TG / DTG), the moisture content by Karl-Fischer, differential scanning calorimetry (DSC), X-ray diffraction (X-RD), spectroscopy in the infrared with Fourier transform ( FTIR) and ultra violet (UV-vis), scanning electron microscopy (SEM) and solubility tests. According to the results obtained by GC / MS the major constituent of OELG was carvacrol (46.7%). In TG / DTG and DSC revealed the complex displacement in the range of thermal degradation of the oil to higher temperature ranges indicating a gain of thermal stability. In the analyzes of (X-RD) of the complexes showed the loss of crystalline order compared to pure β-CD. The scanning electron microscopy (SEM) showed changes in particle shapes and morphology of the complex when compared with pure β-CD. The larvicidal assay against Aedes aegypti larvae were carried out with the Rockefeller strain in the third stage (L3), and mortality was observed after 24 hs. The phase solubility diagram at different temperatures, the values of the stability complex of the constant (PMW), was demonstrates be stable and water soluble the interaction complex OELG / β-CD. Aedes aegypti larvae were susceptible to the composition of OELG, carvacrol and complex (PMW) using the method of Probit analysis. The larvicidal activity of the complex (PMW) LC50 was 33 ppm, close to that of pure oil LC50 39 ppm and may be a suitable alternative to biolarvicida dengue control programs. / Em termos de morbidade e mortalidade, a dengue é considerada atualmente a mais importante doença viral humana transmitida por mosquitos, causada por vírus da família Flaviridae, transmitida, no Brasil, através do mosquito Aedes aegypti Linnaeus, sendo um dos principais problemas de saúde pública no mundo, devido ao grande potencial para o desenvolvimento de formas graves e letais da doença. Outro problema enfrentado no controle da dengue é à existência de populações de Aedes aegypti resistentes a toxicidade de inseticidas químicos, como o temefós. Este trabalho envolveu a obtenção e caracterização do complexo de inclusão entre óleo essencial de Lippia gracilis (OELG), com atividade larvicida contra as larvas de Aedes aegypti em β-ciclodextrina (β-CD), objetivando melhorar a solubilidade do óleo em meio aquoso servindo de estratégia para obtenção de novos produtos larvicidas. Para os complexos obtidos por malaxagem e co-evaporação foi avaliada a influência do uso de um co-solvente na preparação dos complexos, pelos métodos malaxagem com água (MAH), malaxagem com etanol/água (MAE), co-evaporação com água (COH) e co-evaporação etanol/água (COE). A determinação do teor do OELG foi obtido por cromatografia gasosa acoplada a espectrômetro de massa (CG/EM), onde o complexo (MAH) mostrou-se superior na inclusão do carvacrol, com teor de 15,25 %, em relação as outras técnicas de preparação. Os complexos foram caracterizados por termogravimetria (TG/DTG), determinação do teor de umidade por Karl-Fischer, calorimetria exploratória diferencial (DSC), difratometria de raios-X (DRX), espectroscopia de absorção na região do infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) e na região do ultra violeta (UV-vis), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e ensaios de solubilidade. Os ensaios larvicidas contra as larvas de Aedes aegypti foram realizados com as larvas da linhagem Rockefeller no terceiro estádio (L3), sendo verificado a mortalidade após 24 horas. De acordo com os resultados obtido por CG/EM o principal constituinte do OELG, foi o carvacrol (46,7%). Nas curvas TG/DTG e DSC dos complexos revelaram deslocamento no intervalo de degradação térmica do óleo para faixas de temperaturas mais elevadas indicando um ganho de estabilidade térmica. Nas análises de (DR-X) dos complexos demonstraram redução do grau de cristalinidade, quando comparado a β-CD pura. Através da microscopia eletrônica de varredura (MEV) pode-se observar mudanças na morfologia do complexo, quando comparado com a β-CD pura. No estudo do diagrama de fases em diferentes temperaturas, os valores da constante de associação do complexo (MAH), demonstrou serem interações estáveis e que o complexo OELG/β-CD e solúvel em água. As larvas de Aedes Aegypti foram suscetíveis à composição do OELG, carvacrol e do complexo (MAH), utilizando o método de análise Probit. A atividade larvicida do complexo (MAH) foi de CL50 33 ppm, próxima ao do óleo puro de CL50 39 ppm, podendo ser uma alternativa biolarvicida adequada aos programas de controle da dengue.

The lung carcinomas stand out as a major public health problem, therefore, are among the leading causes of cancer death worldwide. They are classified into two major histological groups: small cell lung carcinome (SCLC) and non small cell lung carcinoma non (NSCLC). In the search for novel therapies, many natural products derived from plants and other organisms has been studied for use as a source for the development of chemotherapeutic agents used in the treatment of various cancers, including carcinomas of the lung. In this context, the essential oils is part of medicinal plants produced by such as the genus Lippia that have many therapeutic properties, among them, antimicrobial, anti-inflammatory and antiproliferative. This study proposes to investigate the cytotoxic activity of essential oils of different species and genotypes of the genus Lippia plants. the Active Germplasm Bank of the Federal University of Sergipe (UFS) located at the Experimental Farm "Rural Campus of the UFS," which have varied chemical composition. For this A549 cells (lung carcinoma) were treated with increasing concentrations (20-160 / mL) essential oils Lippia gracilis (genotypes 106 and 110) of Lippia alba (genotypes 13:57) and Lippia sidoides (genotypes 102 and 104) during the 24 hour interval. Cytotoxicity of these essential oils was determined by the MTT colorimetric method. The absorbance values obtained in the treatments were normalized to the untreated cells and used to calculate IC50 values by regression analysis. IC50 values of 75.42 and 158.6 ug / ml were obtained for the LG-106 and LG-110 genotypes, respectively. For LS-102 and LS-104 genotypes IC50 were respectively 97.93 and 150.70 mg / mL and LA-13 and LA-57 genotypes these values were 86.14 and 70.34 mg / mL . Microscopic analysis of cells stained by hematoxylin-eosin showed morphological changes, including condensation of cytoplasm, chromatin condensation and nuclear fragmentation induced by all genotypes. These results suggest that the cytotoxic activity presented by the essential oils of Lippia on A549 lineage cells involves induction of programmed cell death. Therefore, it is concluded that these oils represent a promising source compounds for the development of new anti-tumor therapies. / Os carcinomas de pulmão destacam-se como um grave problema de saúde pública, pois, encontram-se entre as principais causas de morte por câncer no mundo. São classificados em dois principais grupos histológicos: carcinoma de pulmão de células pequenas (CPCP) e carcinoma de pulmão de células não pequenas (CPCNP). Na busca por terapias inovadoras, diversos produtos naturais derivados de plantas e outros organismos têm sido estudados para utilização como fonte para o desenvolvimento de quimioterápicos empregados no tratamento de diversos tipos de câncer, inclusive dos carcinomas de pulmão. Nesse contexto, insere-se os óleos essenciais produzidos por plantas medicinais como as do gênero Lippia que apresentam diversas propriedades terapêuticas, dentre elas, atividade antimicrobiana, antinflamatória e antiproliferativa. O presente trabalho propõe a investigação da atividade citotóxica dos óleos essenciais de diferentes espécies e genótipos de plantas do gênero Lippia. do Banco Ativo de Germoplasma da Universidade Federal de Sergipe (UFS), localizado na Fazenda Experimental “Campus Rural da UFS”, que apresentam variada composição química. Para isso as células A549 (Carcinoma de pulmão), foram tratadas com concentrações crescentes (20 a 160 μg/mL) de óleos essenciais de Lippia gracilis (genótipos 106 e 110), de Lippia alba (genótipos 13 e 57) e Lippia sidoides (genótipos 102 e 104) durante o intervalo de 24 horas. A citotoxicidade destes óleos essenciais foi determinada pelo método colorimétrico do MTT. Os valores das absorbâncias obtidas nos tratamentos foram normalizados com os das células não tratadas e utilizados para calcular os valores de IC por análise de regressão. Valores de IC50 de 75,42 e 158,6 μg/mL foram obtidos para os genótipos LG-106 e LG-110, respectivamente. Para os genótipos LS-102 e LS-104 as IC50 foram, respectivamente, 97,93 e 150,70 μg/mL e para os genótipos LA-13 e LA-57 estes valores foram 86,14 e 70,34 μg/mL. A análise microscópica das células coradas por hematoxilina-eosina revelou alterações morfológicas incluindo condensação do citoplasma, condensação da cromatina e a fragmentação nuclear induzidas por todos os genótipos avaliados. Estes resultados sugerem que atividade citotóxica apresentada pelos óleos essenciais de Lippia sobre células da linhagem A549 envolve a indução de morte celular programada. Com isso, conclui-se que tais óleos representam uma fonte promissora de compostos para o desenvolvimento de novas terapias antitumorais. / São Cristóvão, SE

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / To evaluate the effects of the environmental on the content of secondary metabolites in the genotypes of Lippia gracilis Schauer, a high-performance liquid chromatographic-photodiode array detection (HPLC-DAD) method was developed to obtain the chemical profiles (fingerprints) of infusions from leaves of seven genotypes of L. gracilis originated from two locations (Sergipe and Bahia state) and collected in different seasons: summer (with and without irrigation) and winter. In order to compare the fingerprints chromatograms, it was applied chemometric tools for exploratory analysis (PCA). The results of these analyses showed that 108 and 202 genotypes collected in summer and grown without irrigation are significantly different from other genotypes under the same conditions. Moreover, knowing that this species is drought-resistant and can withstand high temperatures, we can propose that the 107, 108 and 110 genotypes are more resistant to drought conditions because there were no differences between samples collected in summer and grown with or without irrigation. All samples was submitted to antioxidant activity by DPPH method (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl). The samples of 201 genotype collected in summer with and without irrigation, 201vc and 201vs (30 μg/mL; 60 min), respectively, exhibited more than 90% DPPH scavenging activities, displaying similar response to the positive control, gallic acid (92.06%, 30 mg/mL, 60 min). / Para avaliar os efeitos do meio ambiente no conteúdo de metabólitos secundários em genótipos de Lippia gracilis Schauer, um método por cromatografia líquida de alta eficiência com detector por arranjo de diodos (CLAE-DAD) foi desenvolvido para obter os perfis cromatográficos (fingerprint) de chás das folhas secas de sete genótipos desta espécie provenientes de duas localizações (Sergipe e Bahia) e coletadas em diferentes estações do ano: verão (com e sem irrigação) e inverno. Para comparar os cromatogramas fingerprints foi aplicado ferramentas quimiométricas de análise exploratória (ACP). Os resultados destas análises mostraram que os genótipos 108 e 202 coletados no verão e cultivados sem irrigação são significativamente diferentes dos demais genótipos da mesma coleta. Além disso, sabendo que esta espécie possui grande resistência à seca e a altas temperaturas, pode-se propor que os genótipos 107, 108 e 110 apresentaram maior resistência ao stress hídrico, pois não foi observada diferenciação entre as amostras coletadas no verão cultivadas com e sem irrigação. Os chás das amostras de L. gracilis foram também submetidos ao teste de atividade antioxidante pelo método DPPH (2,2 difenil-1-picril hidrazil). As amostras do genótipo 201, verão com irrigação e verão sem irrigação [(201 vc e 201 vs); 30 μg/mL; 60 min)] consumiram mais de 90% do radical DPPH, apresentando uma resposta similar ao controle positivo ácido gálico (92,06%, 30 μg/mL, 60 min).