Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-05-11T16:47:52Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Matheus_Rosa.pdf: 1209028 bytes, checksum: 62654de726eff474d5030296a87f2216 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-05-12T12:18:57Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Matheus_Rosa.pdf: 1209028 bytes, checksum: 62654de726eff474d5030296a87f2216 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-12T12:18:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Matheus_Rosa.pdf: 1209028 bytes, checksum: 62654de726eff474d5030296a87f2216 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Neospora caninum, agente etiológico da neosporose, é um dos principais responsáveis por abortos em rebanhos bovinos, causando prejuízos econômicos para a agropecuária. Sendo assim, métodos de controle e diagnóstico devem ser aplicados para reduzir a disseminação do patógeno em propriedades rurais. A vacinação dos rebanhos seria uma alternativa importante, no entanto a falta de vacinas eficazes impede a aplicação deste método de controle. Diversos estudos vêm sendo realizados com o intuito de se obter vacinas mais eficazes. Vacinas recombinantes utilizando proteínas heterólogas são as mais estudas. As proteínas presentes nas roptrias (ROPs), devido a sua importância na infecção celular, formação do vacúolo parasitófago e suas características antigênicas e imunogênicas, são excelentes candidatas a antígeno vacinal. A utilização de lipoproteínas bacterianas tem recebido uma atenção especial como molécula adjuvante carreadora devido às suas propriedades imunomoduladoras. A lipoproteína Oprl de Pseudomonas aeruginosa possui a capacidade de modular a resposta imune para uma via Th1. Esta capacidade imunomoduladora quando associada a diferentes antígenos pode modular a resposta mista entre as vias Th1 e Th2. O presente estudo teve como objetivo clonar e expressar a região da NcROP2, descrita entre os aminoácidos 191 e 359, fusionada a OprI, resultando na quimera rROP2/OprI em Escherichia coli e caracterizá-la quanto a sua antigenicidade através da técnica de Western blot. A proteína recombinante produzida em Escherichia coli Rosetta (DE3) PlysS, apresentou um tamanho esperado de 50kDa. Sendo purificada e caracterizada por anticorpos monoclonais anti-histidina e sua antigenicidade reconhecida por soro de animais naturalmente infectados por N. caninum. O reconhecimento da quimera rROP2/OprI por anticorpos anti-N. caninum, revela a existência de determinantes antigênicos comuns entre a proteína recombinante e a forma nativa, sugerindo o seu uso para o desenvolvimento de uma vacina recombinante. / Neospora caninum, etiologic agent of neosporosis, is one of the main responsible for abortion in cattle herds, causing economic losses to Cattle-raising. Thus, control methods and diagnosis should be applied to reduce the spread of the pathogen among farms. Vaccination of cattle would be an important alternative; however the lack of effective vaccines prevents the application of this control method. Several studies have been conducted with the aim of develop more effective vaccines. Vaccines using recombinant heterologous proteins are the most studied. The proteins present in rhoptries (ROPs), due to its importance in cell infection, parasitófago vacuole formation and its antigenic and immunogenic characteristics, became excellent candidates for vaccine antigen. The use of bacterial lipoproteins has received particular attention as an adjuvant carrier molecule due to its immunomodulatory properties.The Pseudomonas aeruginosa Oprl lipoprotein has the ability to modulate the immune response into a Th1 pathway. This immunomodulatory capacity when associated with different antigens can modulate the mixed response between Th1 and Th2 pathways. This study aimed to clone and express the region of NcROP2 described between amino acids 191 and 359, fused OprI, producing the chimera rROP2/OprI in Escherichia coli and to characterize it its antigenicity by Western blot. Recombinant protein produced in E. coli Rosetta (DE3) pLysS, showed an expected size of ~50 kDa. The protein was purified and characterized by anti-histidine monoclonal antibodies and their antigenicity recognized by sera from animals naturally infected by N. caninum. The chimera rROP2/OprI was recognized by antibodies anti-N. caninum reviling common antigenic determinants of the recombinant protein and the its native form, suggesting its use for developing a recombinant vaccine.

Submitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-03-03T14:36:30Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ana Caroline de Souza Barnabé - 2012.pdf: 955092 bytes, checksum: 1c7e4c5347d5c7994c39252d1f1f2fef (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-03-04T12:04:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ana Caroline de Souza Barnabé - 2012.pdf: 955092 bytes, checksum: 1c7e4c5347d5c7994c39252d1f1f2fef (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-04T12:04:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ana Caroline de Souza Barnabé - 2012.pdf: 955092 bytes, checksum: 1c7e4c5347d5c7994c39252d1f1f2fef (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2012-02-24 / In this study, 300 1 day-old male Cobb chicks were used to evaluate, with the objective of evaluating the effects of phytogenic additives on performance, gut integrity and immune system of broilers inoculated with Salmonella enterica serovar Enteritidis (SE). The birds were divided into five treatments with six repetitions each. Treatment (Ttm) 1 - group inoculated orally with 0.1 mL of sterile buffered saline 0.85% (placebo), Ttm 2 - phytogenic received additives in the feed at a dosage of 0.10 kg/ton feed of the initial age until 35 days (Contr. FA); Ttm 3 - group inoculated orally with 0.5 mL of buffered saline 0.85%, containing approximately 5.0X105 CFU/0.5mL Salmonella enterica serovars Enteritidis (Contr. positive SE); Ttm 4 - group inoculated orally with 0,5 mL of buffered saline 0.85%, containing approximately 5.0X105 CFU/0.5mL of SE and received as antimicrobial growth promoter (AGP) bacitracin methylene disalicylate at a dosage of 55 ppm in the feed until 35 days of age (SE + AGP); Ttm 5 - group inoculated orally with 0.5 mL of buffered saline 0.85%, containing approximately 5.0X105 CFU/0.5 mL SE received phytogenic additives in the feed at a dosage of 0.10 kg/ton of feed of 1 to 35 days old (SE + FA). Performance was evaluated and six birds for treatment were weighed, sacrificed and the pH of the gastrointestinal tract was measured. Fragments were collected duodenum and jejunum to histomorphometric analysis, morphometric lymphocyte count. There was significant difference in the period 1-35 of the experiment the average weight and weight gain of groups without microbial challenge, and feed conversion in the group feed with phytogenic. We observed greater higher villus height to 14 days in the duodenum and greater villus:crypt to the group that received phytogenic The pH was influenced by the AGP in the colon and caecum. There was no significant effect of treatment on biometry of organs and Salmonella groups. There was lymphoid depletion in spleen, bursa and caecal tonsils was variable, with a predominance of mild and moderate depletion. It is concluded that the additives phytogenic control the effects of SE in broilers as expressed in the performance, especially in the feed conversion, and histomorphometric of the intestine, although it has not prevented the migration of the SE for the lymphoid organs, as well as not stimulate the proliferation of lymphoid cells in broilers. / No presente estudo, foram utilizados 300 pintos com um dia de idade, machos, linhagem Cobb, com o objetivo de avaliar os efeitos dos aditivos fitogênicos sobre desempenho, a integridade intestinal e o sistema imunológico de frangos de corte inoculados experimentalmente com Salmonella enterica sorovar Enteritidis (SE). As aves foram divididas em cinco tratamentos com seis repetições cada. Tratamento (Ttm) 1 - grupo inoculado por via oral, com 0,1 mL de solução salina tamponada e esterilizada a 0,85% (Placebo); Ttm 2 - recebeu os aditivos fitogênicos na ração na dosagem de 0,10 kg/ tonelada de ração da fase inicial aos 35 dias de idade (Contr. AF); Ttm 3 - grupo inoculado via oral, com 0,5 mL de solução salina tamponada a 0,85%, contendo aproximadamente 5,0 X 105 UFC/0,5 mL de Salmonella enterica sorovar Enteritidis (Contr. positivo SE); Ttm - 4 - grupo inoculado por via oral, com 0,5 mL de solução salina tamponada a 0,85%, contendo aproximadamente 5,0 X 105 UFC/0,5 mL de SE e que recebeu como antimicrobiano promotor de crescimento (APC) a bacitracina metil dissilicato na dosagem de 55 ppm na ração até os 35 dias de idade (SE + APC); Ttm 5 - grupo inoculado por via oral, com 0,5 mL de solução salina tamponada a 0,85%, contendo aproximadamente 5,0 X 105 UFC/0,5 mL de SE que recebeu os aditivos fitogênicos na ração na dosagem de 0,10 kg/ tonelada de ração do 1º aos 35 dias de idade (SE + AF). Foram realizadas análises de desempenho e seis aves por tratamento foram pesadas, sacrificadas e o pH do trato gastrintestinal foi aferido . Coletou-se fragmentos de duodeno e jejuno para análises histomorfométricas, morfometrias e contagem de linfócitos. Observou-se diferença significativa, durante o período de 1-35 final do experimento no peso médio e no ganho de peso dos grupos sem desafio microbiano, além de melhor conversão alimentar no grupo alimentado com aditivos fitogênicos. Observou-se maior altura dos vilos aos 14 dias no duodeno e maior relação vilo:cripta para o grupo que recebeu fitogênicos O pH foi influenciado pelo APC no cólon e ceco. Não houve efeito significativo dos tratamentos sobre a biometria dos órgãos e Salmonella nos grupos. Observou-se a depleção linfóide nos baços, bursas e tonsilas cecais foi variável, com predominância de depleção discreta e moderada. Conclui-se que os aditivos fitogênicos controlam os efeitos da SE em frangos de corte como expresso nos dados de desempenho, especialmente na conversão alimentar, e dados histomorfométricos do intestino, embora não tenha impedido a migração da SE para os órgãos linfóides, bem como não estimulam a proliferação de células linfóide nos frangos de corte.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2017-01-10T16:57:36Z No. of bitstreams: 3 Tese - Adriana Marques Faria - 2016 - Parte 01.pdf: 5478875 bytes, checksum: ae9c08d62c1ad44305030954fe0b0a5e (MD5) Tese - Adriana Marques Faria - 2016 - Parte 02.pdf: 16834328 bytes, checksum: 2faf307ee33c6a223a00b491091a66f2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-01-11T09:54:12Z (GMT) No. of bitstreams: 3 Tese - Adriana Marques Faria - 2016 - Parte 01.pdf: 5478875 bytes, checksum: ae9c08d62c1ad44305030954fe0b0a5e (MD5) Tese - Adriana Marques Faria - 2016 - Parte 02.pdf: 16834328 bytes, checksum: 2faf307ee33c6a223a00b491091a66f2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-11T09:54:12Z (GMT). No. of bitstreams: 3 Tese - Adriana Marques Faria - 2016 - Parte 01.pdf: 5478875 bytes, checksum: ae9c08d62c1ad44305030954fe0b0a5e (MD5) Tese - Adriana Marques Faria - 2016 - Parte 02.pdf: 16834328 bytes, checksum: 2faf307ee33c6a223a00b491091a66f2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-12-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The closeness beteween wild and domestic animals with humans may result in common diseases involving these three groups, including zoonotic and antropozoonotic diseases. The study of bacteria and disease that affects animals is an important way to approach epidemiologic control and sanitary vigilance, as we do not understand the roll of wild animals in transmitting diseases among wild, exotic and domestic animals. The main objective of the present study was to search the presence of Escherichia coli and Salmonella sp. from rectal swabs of non-domesticated Suiformes in Commercial herds in Goiás State. It was collected rectal swabs of 100 Sus scrofa scrofa, 60 T. pecari and 30 P. tajacu, from different ages. The samples were used in order to obtain the isolation, antimicrobial profile, hemolisin test for E. coli and virulence and resistance gene presences in both bacteria. The serotyping was performed with polyvalent anti-O serum and the virulence and resistance gene deteccion by PCR technique. The results shown high rates of antimicrobial resistance and virulence and resistance genes in analyzed groups of E. coli. The isolation of Salmonella sp. occurred in one sample of S. scrofa, with high rates of antimicrobial resistance also, but no resistance and virulence genes were detected in this isolate. We must pay attention to the possibility of horizontal gene transference of virulence factors and resistance trough contaminated water and food, that may transform commensal bacteria in possible pathogenic agents. It is conclude: that Salmonella sp. is not commonly isolated from T. pecari and P. tajacu, showing low frequency of isolation in S. scrofa in these conditions; and E. coli with multidrug resistance patterns is isolated from S. scrofa, T. pecari and P. tajacu in commercial herds from Goiás State. / A proximidade de animais silvestres com animais domésticos e seres humanos pode resultar no aparecimento de doenças comuns a estes três grupos, incluindo doenças zoonóticas. O estudo de bactérias e doenças que acometem animais silvestres é importante para atuar na forma de controle epidemiológico e vigilância sanitária, visto que não se compreende o papel destes animais na transmissão de doenças entre outros animais silvestres, exóticos e domésticos. O presente estudo foi desenvolvido com o objetivo de pesquisara presença das bactérias Escherichia coli e Salmonella sp. em suabes retais provenientes de Suiformes não domesticados em criações comerciais no Estado de Goiás. Foram colhidos suabes retais de 100 Sus scrofa scrofa, 60 de Tayassu pecari e 30 de Pecari tajacu, de diferentes faixas etárias. À partir do material colhido fez-se o isolamento, perfil antimicrobiano, teste de hemólise para E. coli e detecção de genes de virulência e de resistência das bactérias. Para a detecção dos agentes, foi realizado exame bacteriológico convencional e ensaios de suscetibilidade a antimicrobianos. Foi realizadas a tipificação sorológica por teste sorológico com soro polivalente anti-O para a bactéria Salmonella e detecção de genes virulência e de resistência pela técnica de PCR nos isolados. Os resultados obtidos demonstraram altas taxas de resistência aos antimicrobianos e presença de genes de virulência em amostras de E. coli em todos os grupos testados. O isolamento de Salmonella sp. foi possível em uma amostra de S. scrofa, que apresentou também altas taxas de resistência à antimicrobianos, mas não houve detecção de genes de virulência ou de resistência neste isolado. Conclui-se que: nesta condição de criação Salmonella sp. não é isolada comumente de T. pecari e P. tajacu, sendo isolada em baixa frequência de S. scrofa; e que E. coli é isolada de S. scrofa, T. pecari e P. tajacu em rebanhos comerciais do Estado de Goiás, com múltiplos padrões de resistência antimicrobiana.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:18:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Caroline Rodrigues Pereira Martins.pdf: 1134388 bytes, checksum: fa8d41a81a1364e1de4a2a59b34737ed (MD5) Previous issue date: 2009-10-29 / The use of bovine pericardium as a biological membrane is widespread in surgical repair because of the low cost, good applicability and it is easily obtained. Glycerin 98% is the chemical agent most used as a biological tissue preservative in veterinary medicine, but studies show it is ineffective in eliminating viruses. Glutaraldehyde is a biological tissue preservative widely used in 0.5% and 0.625% concentrations. However, the persistence of rabies virus in samples of mice pericardium preserved in 0.625% glutaraldehyde was proven, and probably higher concentrations are required for virucidal action. Given its toxic capacity, this study aims to evaluate macro-and microscopically kidney, liver and spleen of 65 mice, 60 of whom underwent implantation of bovine pericardium preserved in glycerin 98% and 0.625%, 1% and 1.5% glutaraldehyde, and 5 non-implanted mice served as controls. The animals implanted, the same used in other research to evaluate local reaction on the abdominal wall implants, were euthanized after 7, 14 and 30 days after implantation of the pericardium, and the spleens, livers and kidneys were assessed as to their macro and microscopic features. Fragments of these organs were collected, fixed in buffered formalin 10%, processed by usual histopathologic methods and stained with hematoxylin and eosin. There was no macro or microscopic changes that could be related to the toxicity of these substances / O emprego de peric?rdio bovino, como membrana biol?gica, ? bastante difundido em t?cnicas de reparos cir?rgicos devido ? facilidade de aquisi??o, baixo custo e boa aplicabilidade. A glicerina 98% ? o agente qu?mico mais utilizado como conservante de tecidos biol?gicos em medicina veterin?ria, por?m estudos comprovam sua inefic?cia na elimina??o viral. O glutaralde?do ? um conservante de tecidos biol?gicos e suas concentra??es mais difundidas s?o de 0,5% e 0,625%. Entretanto, a persist?ncia do v?rus r?bico em amostras de peric?rdio de camundongos conservadas em glutaralde?do 0,625% foi comprovada, sendo, provavelmente, necess?rias concentra??es mais altas para a??o virucida. Sabendo-se da sua capacidade t?xica, este estudo teve como objetivo, avaliar macro e microscopicamente rins, f?gado e ba?o de 65 camundongos, dos quais 60 foram submetidos a implante de peric?rdio bovino conservado em glicerina 98% e glutaralde?do a 0,625%, 1% e 1,5% e 5 camundongos n?o implantados que serviram como controles. Os animais implantados, os mesmos utilizados em outra pesquisa para avalia??o das caracter?sticas reacionais locais nas paredes abdominais aos implantes, foram eutanasiados ap?s 7, 14 e 30 dias ap?s a implanta??o do peric?rdio; e os ba?os, f?gados e rins foram avaliados quanto ?s caracter?sticas macro e microsc?picas. Fragmentos desses ?rg?os foram coletados, fixados em formol a 10% tamponados, processados pelos m?todos usuais para histopatologia e corados pela hematoxilina e eosina. N?o foram evidenciadas altera??es macro ou microsc?picas que pudessem estar relacionadas ? toxicidade destas subst?ncias.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:18:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Viviane de Souza Cardoso.pdf: 1798596 bytes, checksum: 2862a717209bf03e8568e17d21be6ba4 (MD5) Previous issue date: 2003-02-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The headquartered fractures in the appendixes of the small animals represent great portion of the service in surgical clinics. The purpose of this work was evaluate the bone regeneration with the use of allografts or bovine fetus xenografts, conserved in solution of cefalotina sodic neutral to 0,5%. Twenty adult mongrel dogs were used. We done ostectomia of a fragment of the tibia of the receptor dogs with dimensions same to 10mm x 4mm where then in its place, it was put the allograft or xenograft, in agreement with the group to which belonged the animal. Clinically, support of the limb was observed in the subsequent day to the surgery and general state of the animal. The radiographic evaluation was accomplished before the surgical procedure and in the postoperative immediate, on the 15, 30, 45 and 60 days of evolution. In 15 days beginning of formation of bone callus was observed in the allograft group, already in the xenograft group this was observed to the 30 days in almost all the animals. There were no evidence infection, of deformity or any other alteration in the operated timb, and we concluded that the allograft is incorporated faster than the xenograft, however not being discarded the use possibility of this use. / As fraturas sediadas nos ap?ndices locomotores dos pequenos animais representam grande parcela do atendimento em cl?nicas cir?rgicas. O objetivo deste trabalho foi avaliar a regenera??o ?ssea com a utiliza??o de aloimplantes e de xenoimplantes de feto bovino em c?o, conservados em solu??o de cefalotina s?dica tamponada a 0,5%. Foram utilizados 20 c?es h?gidos, adultos, sem ra?a definida e de m?dio porte. Realizou-se ostectomia de um fragmento da t?bia dos c?es receptores de dimens?es iguais a 10mm x 4mm onde ent?o em seu lugar foi colocado o implante al?geno ou xen?geno, de acordo com o grupo ao qual pertencia o animal. Clinicamente, observou-se apoio do ap?ndice operado no dia posterior ao procedimento e estado geral do animal. A avalia??o radiogr?fica foi realizada antes do procedimento cir?rgico e no p?s-operat?rio imediato, aos 15, 30, 45 e 60 dias de evolu??o. Aos 15 dias observou-se in?cio de forma??o de calo ?sseo no grupo aloimplante, j? no grupo xenoimplante este foi observado aos 30 dias em quase todos os animais. N?o houve evid?ncia de infec??o, deformidade ou qualquer outra altera??o nos ap?ndices operados, e comparando-se os m?todos concluise que o aloimplante ? incorporado com maior velocidade que o xenoimplante, por?m n?o sendo descartada a possibilidade de utiliza??o deste.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 235255 bytes, checksum: e59ffc4b4d93eb2387e5b1f9aaefaf2a (MD5) Previous issue date: 2003-12-16 / With the goal of evaluating the efficacity of bromocriptine and dexametazone, 30 mongrel bitches, with more than 35 days of pregnancy confirmed by ultrasonography, clinicaly healthy, with weights varying between 10 and 30 kgs, were divided in three groups: Group 1 - Underwent treatment with bromocriptine for 6 days with a dosage of 0,03 mg/kg every 12 hours; Group 2 Underwent treatment with dexametasone for 10 days with a dosage of 0,2 mg/kg every 12 hours; Group 3 control. The results demonstrated that both the animals treated with bromocriptine as well as those treated with dexametasone had their pregnancies interrupted in 90% of the cases. In the conditions in which the present experiment was made, no serious endometrial alterations, with endangerment of uterine phisiology, were observed. It was verified that the abortion happens later in the group treated with dexametasone, where the phoetus expulsion may occur up to the 10th day after the treatment. / Objetivando avaliar o efeito abortivo de bromocriptina e da dexametasona, 30 cadelas sem raça definida, com mais de 35 dias de gestação, confirmada por ultrasonografia, clinicamente sadias, com peso variando entre 10 e 30 kg foram separadas em três grupos, a saber: Grupo 1 - Submetidas ao tratamento com bromocriptina durante 6 dias na dose de 0,01 mg/kg a cada 12 horas; Grupo 2 - Tratadas com dexametasona durante 10 dias na dose de 0,02 mg/kg a cada 12 horas; Grupo 3- Controle. Os resultados demonstraram que tanto os animais tratados com bromocriptina, como aqueles tratados com dexametasona tiveram suas gestações interrompidas em 90% dos casos. Na condição em que foi realizado o presente experimento, não foram observadas alterações endometriais graves, que pudessem comprometer a fisiologia uterina. Verificou-se que o abortamento é mais tardio no grupo tratado com dexametasona com a expulsão do feto pode ocorrer até o 10o dia após o início do tratamento.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3315832 bytes, checksum: 7804372ccab471d7e6ac34ca69be57c9 (MD5) Previous issue date: 2007-03-20 / Osteoporosis is a common human disease affecting both men and women, and it can classified as (1) primary, related to sexual hormones deficiency or senility, or (2) secondary, for what the most common example is the chronic therapies with glucocorticoids. Whatever is its cause, the osteoporosis outcomes are bone loss and increased fracture risk. Although osteoporosis is considered a systemic condition, bone loss seen in osteoporosis is not homogeneous throughout the skeleton. RANKL is a cytokine able to activate the osteoclasts function and its expression is inducible in osteoblasts and T cells by a range of stimuli. Function of RANKL has been considered a possible therapeutic target for the treatment of osteoporosis. To evaluate the trabecular bone loss related to the RANKL expression, immunochemistry and histomorphometric assays were used in femur and vertebra of castrated and/or glucocorticoid-treated male and female rats, at the day 56 after induction. RANKL expression was evident only in the castrated group, both male and female, but not in the group of castrated rats that also received glucocorticoid therapy. But histomorphometric data showed that bone loss was similar in both groups. That could happen because glucocorticoid can inhibit osteoblast metabolism. Histomorphometry also reveals that trabecular bone mass in male is similar to female, and bone loss is not homogenous between distal and proximal femur and vertebra body. At the day 56 after induction, bone loss, in femur and vertebra, both male and female, was compatible to osteoporosis. / A osteoporose é uma doença comum em humanos, acometendo tanto mulheres quanto homens. A doença pode ter origem primária, relacionada à deficiência de hormônios sexuais ou a senilidade, ou secundária, cujo exemplo mais comum é o uso crônico de glicocorticóides. Independente da causa, a conseqüência da osteoporose é a diminuição da massa óssea, aumentando o risco de fraturas. Apesar de ser considerada uma doença sistêmica, a redução de massa óssea na osteoporose não é uniforme no esqueleto. RANKL é uma citocina capaz de ativar a função osteoclástica e sua expressão é indutível em osteoblastos e linfócitos T. A função desta citocina tem sido considerada um possível alvo terapêutico no tratamento da osteoporose. Para avaliar a relação da perda óssea trabecular e a expressão de RANKL, foram realizados testes imunoistoquímicos e histomorfométricos em fêmur e vértebras de ratos castrados e/ou tratados com glicocorticóides, 56 dias após a indução. A expressão imunoistoquímica de RANKL pôde ser verificada nos animais castrados, tanto machos quanto fêmeas, mas não no grupo castrado que também recebeu glicocorticóide. Entretanto, a diminuição da massa óssea em ambos os grupos foi similar na avaliação histomorfométrica. Isso pode ocorrer por causa do efeito inibitório que os glicocorticóides têm sobre o metabolismo. As análises histomorfométricas revelaram ainda, que a massa óssea trabecular avaliada por este método é similar em machos e fêmeas, e que a perda óssea não é uniforme entre o colo femoral, o côndilo femoral e o corpo vertebral. Aos 56 dias de indução, o quadro de perda óssea instalado tanto em machos quanto em fêmeas, para todos os fragmentos ósseos analisados, é compatível com o quadro de osteoporose.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 01 - capa_abstract.pdf: 58716 bytes, checksum: 8427f1a81ed09f080394210a61912045 (MD5) Previous issue date: 2009-02-20 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The Neospora caninum is a protozoan apicomplexan with implication in abortions in many countries. They are included in the economical losses, the abortament, the proportion of discarded cows and the replacement of new animals in the flock, the fall in the milk production, as well as in the fat production in the milk. It is known that the kits existent diagnoses in the healthy market of high cost and they are not produced at the national market, it is needed, to offer diagnosis alternatives reliable, and fast, with national technology. The proposal of the present work was the production of monoclonal antibodies (mAb) of high likeness against the Neospora caninum (sample Nc-1), for the use in immunodiagnostic tests as immunofluorescence, immunohistochemistry, ELISA and dot-ELISA. For the production of mAb the sonicated protozoan was used, originating from the culture in cells VERO and it was purified by filtration, it was used the tachyzoites for the immunization of the mice BALB/c, using as saponin adjuvant , what allowed the obtaining of polyclonal antibodies. The fusing of the esplenic cells of the immunized mice and the myelomas SP2/0 resulted in the obtaining of 72,4% of hybridomas secretors of antibodies anti-Nc-1. After the cloning for limiting dilution was obtained 78,2% of the clones secretors of antibodies anti-Nc- 1. After the recloning for limiting dilution, they were obtained 4 clones secretors of mAb of the class IgG. Obtained mAb IgG2a were capable to reveal the proteins of mass molecular 25 kDa and 70 kDa for "western blotting" to inhibit the multiplication of the taquyzoites in cells VERO. The monoclonal antibodies produced can be used in the development of more sensitive tests, in the epidemic studies of the neosporosis or they can be used in the identification of relevant proteins for the development of vaccines. / O Neospora caninum é um protozoário apicomplexa com implicação em abortamentos em muitos países. Estão inclusas nas perdas econômicas, os abortamentos, a proporção de vacas descartadas e a reposição de novos animais no rebanho, a queda na produção leiteira, bem como na produção de gordura no leite. Sabe-se que os kits diagnósticos existentes no mercado são de alto custo e não são produzidos no mercado nacional, necessita-se, oferecer alternativas de diagnóstico confiáveis, e rápidas, com tecnologia nacional. A proposta do presente trabalho foi a produção de anticorpos monoclonais (AcM) de alta afinidade contra o Neospora caninum (amostra Nc-1), para a utilização em testes de imunodiagnóstico como imunofluorescência, imunoistoquímica, ELISA e dot-ELISA. Para a produção dos AcM usou-se o protozoário sonicado, proveniente da cultura em células VERO e foi purificado por filtração, utilizaram-se os taquizoítos para a imunização dos camundongos BALB/c, usando como adjuvante a saponina, o que permitiu a obtenção de anticorpos policlonais. A fusão das células esplênicas, provenientes dos camundongos imunizados, com as células de mieloma SP2/0 resultou na obtenção de 72,4% de hibridomas secretores de anticorpos anti-Nc-1. Após a clonagem por diluição limitante obteve-se 78,2% dos clones secretores de anticorpos anti-Nc-1. Após a reclonagem por diluição limitante, foram obtidos 4 clones secretores de AcM da classe IgG. Os AcM IgG2a obtidos foram capazes de revelar as proteínas de massa molecular 25 kDa e 70 kDa por western blotting e inibirem a multiplicação dos taquizoítos em células VERO. Os anticorpos monoclonais produzidos poderão ser usados no desenvolvimento de testes mais sensíveis para estudos epidemiológicos da neosporose ou poderão ser utilizados na identificação de proteínas relevantes para o desenvolvimento de vacinas.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 610406 bytes, checksum: ebad9c00b1406351285da383f10f132c (MD5) Previous issue date: 2004-05-14 / Osteoporosis is a disease characterized by low bone mass and deterioration of the microarchitecture of the skeleton, leading to an accentuated bone fragility and a consequent increase in the risk of fractures. Nowadays osteoporosis is being considered one of the largest and more preoccupying health problems in the world, which strikes men and women. An animal model with mice (Rattus norvegicus) is being used because it allows the access to information on the quality and bone structure that otherwise would not be obtained in patients of clinical selection, being therefore fundamental agents to accomplish an effective and safe measurement of the bone quality. The proposal of this model is to cause osteoporosis through castration, glucocorticoid administration, or the association of both, in males and females, and to evaluate that moment the disease starts. For the accomplishment of the experiment 192 adult mice were used (96 males and 96 females). They were divided in eight groups with 24 animals in each: group I - male control; group II - castrated males; group III - males with glucocorticoid therapy; group IV - castrated males with glucocorticoid therapy; group V - female control; group VI - castrated females; group VII - females with glucocorticoid therapy; group VIII - castrated females with glicocorticóide therapy. The collections took place to the 14, 28, 42 and 56 days after beginning of the administrating glucocorticoid in all the groups. It was performed plasmatic analysis of calcium, phosphorus and total proteins; quantitative analysis of calcium, phosphorus and magnesium of the humerus; flexing biomechanic test in shinbone and compression biomechanic test in lumbar vertebra (L5). Comparing the obtained results, all the experimental groups presented normal plasmatic concentrations of calcium:phosphorus (1:1 to 2:1) and bone concentrations of calcium:phosphorus (2:1) inferior to the normal rate, except for the control groups. In regarding to the biomechanic tests with males, the group IV showed smaller resistance to bone fracture, following by the group III and the group II when compared to the control group. In the groups of females it was verified that the group VI had a minimum bone loss, indicated mainly by the unbalance of the concentration of calcium:phosphorus in the bone and by the reduction of the rigidity observed in the biomechanic tests. On the other hand, the groups VII and VIII, presented inadequate bone concentration of calcium:phosphorus and bone fragility, which was observed in the flexing and compression tests, considering that the group VII presented minor rigidity average and the group VIII smaller resistance to fracture vertebra L5 and in shinbone compared to the control group. / A osteoporose é uma doença caracterizada por baixa massa óssea e deterioração da microarquitetura do esqueleto, levando a uma acentuada fragilidade óssea e a um conseqüente aumento do risco de fraturas. Atualmente considera-se a osteoporose como um dos maiores e mais preocupantes problemas de saúde do mundo, que atinge homens e mulheres. O modelo animal com ratos (Rattus norvegicus) está sendo utilizado porque permite o acesso a informações sobre a qualidade e estrutura ósseas que não seriam obtidas em pacientes de triagem clínica, sendo portanto agentes fundamentais para se realizar uma mensuração eficaz e segura da qualidade óssea. A proposta deste modelo é estabelecer a osteoporose seja por meio da castração, ou da administração de glicocorticóide, ou ainda, pela associação da castração com a administração de glicocorticóide, tanto em machos como em fêmeas, e avaliar a partir de que momento isto ocorre. Para realização do experimento foram utilizados 192 ratos adultos (96 machos e 96 fêmeas). Os animais foram divididos em oito grupos com 24 ratos em cada: grupo I machos controle; grupo II machos castrados; grupo III machos com terapia de glicocorticóide; grupo IV machos castrados com terapia de glicocorticóide; grupo V fêmeas controle; grupo VI fêmeas castradas; grupo VII fêmeas com terapia de glicocorticóide; grupo VIII fêmeas castradas com terapia de glicocorticóide. As coletas foram realizadas em todos os grupos aos 14, 28, 42 e 56 dias após o início da administração do glicocorticóide. Foram realizadas análise plasmática de cálcio, fósforo e proteínas totais; análise quantitativa de cálcio, fósforo e magnésio do úmero; teste biomecânico de flexão em tíbia e teste biomecânico de compressão em vértebra lombar (L5). Associando-se os resultados obtidos, todos os grupos experimentais apresentaram concentrações plasmáticas normais de cálcio:fósforo (1:1 a 2:1) e concentrações ósseas de cálcio:fósforo (2:1) inferiores ao normal, com exceção dos grupos controle. Com relação aos testes biomecânicos nos machos, o grupo IV se apresentou com menor resistência a fratura óssea, seguido do grupo III e do grupo II quando comparados ao grupo controle. Sendo que nos grupos de fêmeas se constatou que o grupo VI teve uma perda óssea mínima, indicada principalmente pelo desequilíbrio da concentração óssea de cálcio:fósforo e pela redução da rigidez observada nos testes biomecânicos. Já os grupos VII e VIII, apresentaram tanto concentração óssea inadequada de cálcio:fósforo como fragilidade óssea, que foi observada nos testes de flexão e compressão, considerando que o grupo VII apresentou menor média de rigidez e o grupo VIII menor resistência a fratura tanto em vértebra L5 como em tíbia com relação ao grupo controle.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 555213 bytes, checksum: c3880af5fd491ee5833d7c27313493f8 (MD5) Previous issue date: 2004-12-10 / Every year, thousands of new cases of cancer appear all around the world in human beings. In Brazil around 460.000 are notified every year. In the veterinary medicine an increase of the cases of neoplasics has been noted, mainly among the pets, due to elevation of the expectative of life in dogs and cats. These aspects show the necessity to study and to implant new protocols for treatment of these tumors. The discovery of the transplantation of the tumors favoured the study of the behaviour of several cancers. The Ehrlich ascites tumor (EAT), was the model used in mice BALB/c inoculated with this tumor in the interescapular subcutaneus region, growing in the solid form, to evaluate the behaviour chemotherapyc of the dexamethasone (DEX) and doxorubicin (DOX) used into the lesion. DEX was used in 0,1mg/cm³ and 0,2mg/cm³ of tumoral mass to each 48 h in three applications. DOX was used in two doses of 25mg/m² with intervals of 15 days between the two applications. These chemotherapycs were also studies "in vitro" in the cell culture of TAE, being DEX in the concentrations of 1 and 2 µM and DOX in the 0,5mg/ml and 1,0mg/ml of complete RPMI-1640 medium. To verify the percentage of inhibition of the cell growth for the drugs, the times established for the counting of the cells were 1, 2, 3and 24 hours after the drugs administration. The macroscopic reduction of the tumoral mass was evaluated immediately through the measurement with analogical pachemetric before each treatment and after the last chemotherapic section. To histologycal evaluation of TAE after treatments slides were stained with hematoxilin-eosin. The following parameters were observed: density of the cellular population, occurrence of mitosis, apoptotics bodies, and intensity of the inflammatory cells. The detection of the apoptotics bodies was done by the immunofluorescence assay with acridin orange, where the presence of the innumerous apoptotics bodies can be observed in the two treatments. The results of the morphometry of the tumor show a sharp effect of DEX in the reduction of the tumoral mass. In the treatment for DOX did not have macroscopic reduction; however inhibition of growth in the treated group in relation to the control group was noticed. The treatment of the cell culture of TAE showed that DEX has more precocious effect evidencing that these cells possess receptors for glucocorticoid. The cells treated with DOX answered to the treatment after 24 h, confirming the necessity of longer treatment cycles for this tumor. The histologycal analysis after the treatments confirmed the characteristics of this tumor. However, it was not possible to determine if the necrosis occurrence is a natural characteristic of the tumor or if the necrosis increase was an action of the chemotherapycs. / Todos os anos surgem milhares de novos casos de câncer em seres humanos em todo o mundo. No Brasil, em torno de 460.000 são notificados a cada ano. Na medicina veterinária tem-se observado um aumento dos casos de neoplasias, principalmente entre os animais de estimação, devido à elevação da expectativa de vida de cães e gatos, o que tem levado à necessidade de estudar e implantar novos esquemas de tratamento dessas neoplasias. A descoberta da transplantabilidade dos tumores favoreceu o estudo do comportamento de vários tipos de câncer. O tumor ascítico de Ehrlich (TAE) inoculado na região interescapular de camundongos BALB/c foi o modelo experimental utilizado para se avaliar o comportamento quimioterápico da dexametasona (DEX) injetada intralesional nas doses de 0,1mg/cm³ e 0,2mg/cm³ de massa tumoral a cada 48 h num total de três aplicações, e a doxorrubicina (DOX) na dose de 25mg/m² com intervalos de 15 dias em duas aplicações. Estes quimioterápicos também foram estudados in vitro na cultura de células do TAE. A DEX foi utilizada nas concentrações de 1,0 e 2,0 µM, e a DOX nas doses de 0,5mg/ml e 1,0mg/ml de meio RPMI-1640 completo, para verificar a porcentagem de inibição do crescimento pelas drogas. A redução macroscópica da massa tumoral foi avaliada através da medição com paquímetro analógico imediatamente antes de cada tratamento e após a última seção quimioterápica. Para a avaliação histológica do TAE após tratamentos, foram utilizadas sessões coradas com hematoxilina-eosina. Os seguintes parâmetros foram observados: densidade da população celular, ocorrência de mitose, corpos apoptóticos e intensidade do infiltrado inflamatório. A detecção de corpos apoptóticos foi por imunofluorescência corados pelo laranja de acridina, onde se observaram inúmeros corpos apoptóticos nos dois tratamentos. Os resultados da morfometria tumoral evidenciaram um efeito pronunciado da DEX, na redução da massa tumoral. O tratamento pela DOX não apresentou redução macroscópica; porém, notou-se uma inibição de crescimento no grupo tratado em relação ao controle. O tratamento da cultura de células do TAE mostrou que a DEX tem efeito mais precoce evidenciando a presença de receptores para glicocorticóides; entretanto, as células tratadas com DOX responderam ao tratamento a partir de 24 h, confirmando a necessidade de ciclos de tratamento mais longos para este tumor. A análise histológica após os tratamentos confirmou as características deste tumor como: presença de necrose, pequena quantidade de células inflamatórias, estroma escasso. No entanto não foi possível determinar se a presença de necrose é característica natural do tumor ou se ocorreu aumento pela ação dos quimioterápicos.