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Caracterização bioquímica de peptidases e análise proteômica de intestino e gônadas de Anopheles aquasalis

Lopes, Geovane Dias January 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2015-11-04T13:39:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 geovane_lopes_ioc_mest_2014.pdf: 4146940 bytes, checksum: 332c9cbd56d1a1690235d637c48eaeef (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-10-29 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O objetivo geral do presente trabalho foi caracterizar e identificar peptidases ativas presentes nos intestinos de machos e fêmeas de Anopheles aquasalis bem como identificar as proteínas expressas no intestino e gônadas de fêmeas dessa espécie. Para a caracterização proteolítica foram usadas distintas abordagens bioquímicas que permitiram reunir um grupo importante de informações sobre a expressão de enzimas proteolíticas nesta espécie de mosquito. Usando o substrato fluorogênico Z-Phe-Arg-AMC em solução e a técnica de enzimografia por SDS-PAGE co-polimerizado com gelatina foi possível observar um perfil proteolítico composto por serina peptidases do tipo tripsina no intestino de machos e fêmeas de An. aquasalis. Estas enzimas apresentam maior atividade proteolítica na faixa de pH alcalino e ampla estabilidade térmica, sendo ativas entre 25 °C \2013 80 °C, com maior atividade entre 37 °C \2013 50 °C. Diferenças qualitativas e quantitativas na expressão das peptidases também foram detectadas. Foi observado que o perfil proteolítico difere entre macho e fêmea, sugerindo com isso que a expressão de algumas dessas enzimas é sexo-específica Para análise proteômica do intestino e gônadas de fêmeas alimentadas com açúcar usou-se uma abordagem \201Cbottom-up\201D acoplada à análise bioinformática de dados para identificação das proteínas expressas. A análise do intestino foi feita através de um procedimento de digestão em solução sem pré-fracionamento das proteínas, ao passo que a análise das gônadas foi feita usando um protocolo de digestão em gel após fracionamento das proteínas por SDS-PAGE. Usando estas estratégias, um total de 137 e 995 proteínas foram identificadas no intestino e gônadas, respectivamente. As proteínas foram identificadas usando os programas ProLuCID e/ou PEAKS, e uma base de dados \201Ccustomizada\201D incluindo todas as sequencias de Culicídeos depositadas na base de dados UniProt (81,000 sequencias, em outubro de 2013). As identificações foram posteriormente analisadas com relação ao enriquecimento de termos de ontologia gênica e foram classificadas de acordo com seu processo biológico e função molecular, usando o módulo GeneOntology da plataforma PatternLab. A caracterização proteômica revelou para o intestino (i) a presença de várias serina peptidases do tipo tripsina, corroborando a expressão e atividade das enzimas observadas na enzimografia; (ii) a expressão de vários genes codificantes para quimiotripsina, embora a sua atividade não tenha sido detectada pela enzimografia; e para as gônadas (iii) proteínas associadas à vitelogênese; e (iv) a expressão massiva de proteínas implicadas na preparação do tecido para reprodução Finalmente, até o presente, esta é a primeira caracterização abrangente da atividade proteolítica de machos e fêmeas de An. aquasalis bem como a primeira caracterização proteômica do intestino e gônadas de fêmeas desta espécie alimentadas com açúcar. Os resultados obtidos neste trabalho além de fornecerem informações sobre a localização tecidual de proteínas no mosquito e abrirem diversas vias de estudo da biologia e fisiologia deste vetor, contribuem também para a anotação funcional do genoma desta espécie, visto tratar-se de uma espécie com genoma ainda não concluído / The aim of this study was to characterize and identify active peptidases from the midgut of males and females of Anopheles aquasalis and to identify protein expressed in the midgut and gonads of females of this species. The different bioche mical approaches used for the proteolytic characterization allowed gather ing a group of important information about the expression of proteolytic enzymes in this mosquito species. Using the fluorogenic substrate Z - Phe - Arg - AMC for in - solution enzymatic assays and by zymographic analyses (SDS - PAGE co - polymerized with gelatin) it was possible to observe a proteolytic profile composed of trypsin - like serine peptidases in the midgut of male and female A n . aquasalis . These pepti dases exhibit high proteolytic activity at a w ide range of alkaline pH and thermal stability, being active between 25° C - 80 ° C, with more activity between 37° C - 50° C. Qualitative and quantitative differences in the expression of peptidases were also detected. It was observed that proteolytic profile differs between males and females, thereby suggesting that the expression of some of these enzymes is sex - specific. For proteomic analysis of the midgut and gonads of females fed on sugar it was used a "bo ttom - up" proteomic approach coupled with bioinformatic s data analysis to identify tissue - specific expressed protein s . The midgut analysis was taken through an in - solution digestion procedure without pre - fractionation of the proteins, while the analysis of gonads was made using an in - gel digestion protocol after fractionation of proteins by SDS - PAGE. Using these strategies, a total of 137 and 995 proteins were identified in the midgut and gonads, respectively. Proteins were identified using the ProLuCID and/ or PEAKS software , and a customized database including all Culicidae protein sequences deposited at the UniProt database (81,000 sequences, in October 2013). Protein identifications were further analyzed for the enrichment of gene ontology terms and were c lassified according to their biological process and molecular function using the GeneOntology module of the PatternLab platform. The proteomic characterization of midgut revealed (i) the presence of various t rypsin - like serine peptidases , confirming the ex pression and activity of these enzymes observed by zymography, (ii) the expression of several chymotrypsin coding genes, although its activity was not detected by zymography . Proteomics of gonads from female fed with sugar revealed (iii) the expression of proteins associated with vitellogenesis and (iv) the massive expression of proteins involved in tissue preparation for reproduction process. F inally, to the present , t his is the first characterization of the proteolytic activity of males and females midgut s of An. aquasalis well as the first proteomic characterization of the midgut and gonads of A n . aquasalis females fed with sugar. The results obtained in this work in addition to providing information about the cellular localization of proteins in the mosq uito , open several avenues of study of the biology and physiology of this vector, and also contribute to the functional annotation of the genome of this species with genome not yet completed
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Os sítios adicionais de trans-splicing na 5' UTR dos genes trans-sialidase de Trypanosoma cruzi e avaliação de seus efeitos sobre a tradução

Paula, Tainah Silva Galdino de January 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2015-11-04T13:39:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 tainah_paula_ioc_dout_2013.pdf: 4720016 bytes, checksum: abb2c1119571eec6ea090739b5bbc8a7 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-10-29 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A regulação gênica em tripanossomatídeos é policistrônica e ocorre de maneira pós-transcricional. Nas extremidades 5' e 3' dos RNA mensageiros existem segmentos que podem conter elementos regulatórios chamados UTR (Untranslated Regions), os quais são regiões transcritas, porém não-traduzidas. Para verificar se UTR de tamanhos diferentes possuem impacto na transcrição e, por conseguinte, na tradução de proteínas, selecionou-se genes da família de trans-sialidases, devido à importância destas no processo de invasão celular. A metodologia envolveu a extração de RNA total de T. cruzi CL-Brener, seguido da síntese de cDNA, PCR, clonagem dos produtos amplificados e seqüenciamento por Sanger e pelo uso do 454 Junior (Next Generation Sequencing \2013 NSG). Como as trans-sialidases correspondem a uma família gênica de cópias múltiplas, usou-se a estratégia de sequenciamento de alto-desempenho na tentativa de cobrir o maior número possível de genes desta família. Para isso foram obtidos cDNAs de trans-sialidases de CL-Brener nas formas epimastigota e tripomastigota com o iniciador 5\2019UTRTCNA, os quais apresentaram UTR com tamanhos variados entre 65 \2013 187 pb, além da obtenção de cDNAs para esta família de proteínas, em epimastigotas CL-Brener, com o iniciador 5\2019TcTS, apresentando UTR variando de 171 a 221 pb, com similaridade de sequências entre elas. Com o intuito de avaliar a correspondência entre a transcrição dos RNAs de trans-sialidases e a sua tradução, houve a necessidade de identificação das proteínas. Desenvolvemos uma metodologia de lise celular e produção de extrato proteico (denominado TcS12) a partir de células de T. cruzi no estágio epimastigota. As cepas selecionadas para esse estudo foram CL-Brener (TcVI), Dm28c (TcI), Y (TcII) e 4167 (TcIV) O processo de lise celular foi otimizado para 107 parasitos/mL ressuspensos em 200 \03BCL de tampão de lise hipotônica (por 30 minutos a 40C), associado ao sonicador de banho (por 30 minutos a 40C). A eficiência da metodologia foi validada pela citometria de fluxo mostrando que aproximadamente 72% das células foram marcadas com iodeto de propídeo (PI). A qualidade dos extratos proteicos foi analisada por LCMS/MS usando-se a estratégia MSE label free para quantificação relativa de proteínas. Foram identificadas 1153 proteínas totais, cuja expressão proteica das cepas 4167, Dm28c e Y, quando comparada à CL-Brener (cepa referência), apresentou 32, 51 e 73 proteínas up-expressed, enquanto que 80, 92 e 60 proteínas mostraram-se down\2013expressed, respectivamente. Entre as trans-sialidases identificadas, a única cópia encontrada no extrato TcS12 (número de acesso no UniProt - Q4DGV8) apresentou seu RNAm correspondente no banco de dados de cDNA de CL-Brener, com UTR de 214 pb, estando, portanto, na faixa de tamanhos das outras UTR de trans-sialidases obtidas neste estudo. Esse resultado sugere que outros fatores, não necessariamente o tamanho per se das UTR, podem influenciar no fenômeno de tradução nesses tripanossomatídeos. Em relação aos extratos proteicos de epimastigotas gerados a partir das outras cepas, a quantidade de trans-sialidases identificadas foram de 1 (cepa 4167), 2 (cepa Dm28c) e 117 (cepa Y) cópias, indicando assim a tradução satisfatória de pelo menos uma das muitas cópias desta família gênica / Gene regulation in trypanosomatids is polycistronic and occurs in a post - transcriptional way. There are also regulatory elements named UTRs (Untranslated Regions) that are transcribed regions, but not translated. To verify the impact of UTRs presenting different sizes in the transcription machinery and protein translation, genes f rom trans - sialidas e family were selected due to its importance in the cell invasion process. The methodological strategies involved the extraction of total RNA from T. cruzi CL - Brener strain , followed by cDNA synthesis, PCR, cloning and sequencing of amplified products by Sanger and by using the 454 Junior (Next Generation Sequencing – N G S ). Considering that trans - sialidase is a multi - copy gene family, this high - throughput sequencing strategy was employed in an attempt to cover the largest number of trans - sialidase genes. Trans - sialidase cDNAs from CL - Brener epimastigote and tripomastigote were obtained with 5`UTRTCNA primer show ing UT R sizes between 65 - 187 bp. The cDNA from this protein fam ily were also obtained with the 5’TcTS primer from CL - Brener epimastigote s , generating UTRs with 171 - 221 bp . Both 5’UTR presented sequence similarit ies between them. In order to evaluate the correspondence between trans - sialidase gene transcription and t ranslation, it was necessary to accomplish the identification of proteins. Therefore, we developed a methodology for cell disruption, which resulted in a protein extract ( referred as TcS12 ) from epimastigote T. cruzi cells. The strains selected for this st udy were CL - Brener (TcVI), Dm28c (TcI), Y (TcII) and 4167 (TcIV). The process for lysing the cells was optimized to 10 7 parasites/mL resuspended in 200 μL hypotonic lysis buffer (30 minutes at 4 o C) , followed by water bath sonication (30 minut e s a t 4 o C) . The process effic acy was confirmed by FACS , showing that near 72% of the cells were successfully stained with propidium iodide solution (PI). The quality of the protein extracts was analyzed by LCMS/MS using the strategy MS E label free for relative quant ification of proteins. A totality of 1153 proteins were identified and the comparison of the expression profiles between the strains 4167, Dm28c and Y , using the CL - Brener as reference, showed 32, 51 and 73 proteins up - expressed, and 80, 92 and 60 proteins were shown to be down - expressed, respectively. We observed that 117 trans - sialidase s were identified in Y strain, whilst in 4167, Dm28c and CL - Brener were found 1, 2 and 1 trans - sialidases, respectively. Moreover only one copy of trans - sialidase found in the TcS12 extract (UniProt accession number - Q4DGV8), also met its corresponding mRNA in the CL - Brener cDNA database, presenting an UTR of 214 bp, in the size range of the others trans - sialidase UTRs obtained herein. This result suggests th at other facto r s, but not exclusively the UTR sizes per se , could be related to the translation phenomenon in these trypanosomes
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Análise fisiológica, bioquímica e proteômica de respostas ao estresse salino em plantas de feijão de corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.]. / Physiologic, biochemistry and proteomic analysis of responses to salt stress in plants of cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.].

Abreu, Carlos Eduardo Braga de January 2012 (has links)
ABREU, C. E. B. Análise fisiológica, bioquímica e proteômica de respostas ao estresse salino em plantas de feijão de corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.]. 2012. 151 f. Tese (Doutorado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-11-04T22:57:25Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_cebabreu.pdf: 2996708 bytes, checksum: e87314913b5259395d2f145cb5cb481e (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-01-20T14:27:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_cebabreu.pdf: 2996708 bytes, checksum: e87314913b5259395d2f145cb5cb481e (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-20T14:27:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_cebabreu.pdf: 2996708 bytes, checksum: e87314913b5259395d2f145cb5cb481e (MD5) Previous issue date: 2012 / In the present work, an integrated physiological, biochemical and proteomic analysis on cowpea (an economically important species) was carried out in order to understand the responses of plants to salinity. Two experiments were conducted in a greenhouse under hydroponic conditions, using two cultivars of cowpea (Vigna unguiculata) with differential tolerance to salt stress: Pitiuba (tolerant) and TVu 2331 (sensitive). In the first experiment, we evaluated the physiological (growth, gas exchange, relative water content, chlorophyll content, chlorophyll fluorescence) and biochemical (ions and organic solutes accumulations) changes induced by increasing levels of salinity (50, 75 and 100 mM NaCl), as well as the influences of stress two-dimensional (2D) protein patterns in leaves tissues. The results showed the existence of contrasting responses between the cultivars studied, especially with respect to inhibition of shoot growth and the accumulation of compatible solutes, which were higher in TVu. However, salinity did not alter the fluorescence parameters in both genotypes. The global analysis of 2D protein patterns showed that increasing levels of NaCl differentially alter the expression pattern of proteins in leaves, with larger changes in dose 100 mM NaCl. Nevertheless, in the second experiment, the moderate dose of salt with 75 mM NaCl was chosen as the reference dose for the study of changes in the proteome during salt stress and recovery. Salinity altered the expression of 22 protein spots in Pitiuba. Of these spots, the identities of 10 (6 up-regulated and 4 down-regulated) were determined by liquid chromatography electro-spray ionization tandem mass spectrometry (LC-ESI-MS/MS). In TVU changes were observed in 27 spots being the identity determined for 9 (5 up-regulated and 4 down-regulated). Besides these, 5 spots that kept their rates expressions in salinity conditions in Pitiúba were also identified. The majority of the identified proteins is related to the process of photosynthesis, performing enzymatic functions or participating in the molecular constitution of photosystems. Proteins with protective role against stress such as chaperones and enzymes of oxidative stress (SOD) were identified, as well as calreticulin, which are probably involved in signal transduction network. In addition, during recovery treatments homeostasis mechanisms of plants to new conditions restored the levels of certain proteins, suggesting their participation in the process of acclimation to salt stress. Overall, results provide some additional information that can lead to a better understanding of the molecular basis of salt tolerance or sensitivity in cowpea plants. / No presente trabalho foi realizado um estudo integrado de fisiologia, bioquímica e proteômica comparativa em feijão de corda, uma cultura de grande valor econômico, com o objetivo de entender respostas de aclimatação das plantas à salinidade. Para tanto, dois experimentos foram conduzidos em casa de vegetação, sob condições hidropônicas, utilizando dois cultivares de feijão de corda (Vigna unguiculata) com tolerância diferencial ao estresse salino: Pitiúba (tolerante) e TVu 2331 (sensível). No primeiro experimento foram avaliadas as mudanças fisiológicas (crescimento, trocas gasosas, teor relativo de água, teor de clorofila, fluorescência da clorofila) e bioquímicas (acúmulo de íons e solutos orgânicos em folhas e raízes e padrão de expressão protéico foliar) induzidas por concentrações crescentes de salinidade (NaCl a 50, 75 e 100 mM). Os resultados demonstraram a existência de respostas contrastantes entre os cultivares estudados, especialmente com relação à inibição do crescimento da parte aérea e ao acúmulo de solutos compatíveis, os quais foram maiores no TVu. Contudo, a salinidade não alterou os parâmetros de fluorescência da clorofila em ambos os cultivares. Concentrações crescentes de NaCl alteraram de forma diferencial o padrão de expressão de proteínas nas folhas, com maiores alterações na dose 100 mM de NaCl. Apesar disso, no segundo experimento, a concentração moderada de sal com NaCl a 75 mM foi escolhida como referência para o estudo das mudanças no proteoma durante o estresse salino e após um período pós-estresse (recuperação). A salinidade modificou a expressão de 22 “spots” protéicos no Pitiúba, dos quais 10 (6 que aumentaram e 4 que diminuíram) tiveram suas identidades determinadas por espectrometria de massas acoplada a cromatografia líquida (LC-ESI-MS/MS). No TVu foram observadas mudanças em 27 “spots”, sendo determinada a identidade de 9 (5 que aumentaram e 4 que diminuíram). Além destes, 5 “spots” que mantiveram suas taxas de expressões em condições de salinidade no Pitiúba também foram identificados. A maioria das proteínas identificadas está relacionada com o processo de fotossíntese, realizando funções enzimáticas ou participando da constituição molecular dos fotossistemas. Proteínas com papel protetor contra o estresse, como chaperonas e enzimas do estresse oxidativo (SOD) foram identificadas, assim como a calreticulina, que provavelmente está envolvida em processos de transdução de sinal. Em adição, foi possível observar que durante a recuperação das plantas os mecanismos de homeostase às novas condições restabeleceram os níveis de algumas proteínas, o que sugere a participação delas no processo de aclimatação ao estresse salino. No geral, os resultados fornecem informações adicionais que podem levar a uma melhor compreensão das bases moleculares da tolerância ou sensibilidade de plantas de feijão de corda à salinidade.
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Identificação Química em Nível Molecular de Amostras de Maconha por ESI-FT-ICR MS

Nascimento, Iendel Rubio do 14 March 2014 (has links)
Submitted by Maykon Nascimento (maykon.albani@hotmail.com) on 2014-12-19T17:57:04Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Identificação Química em Nível Molecular de Amostras de de Maconha por ESI-FT-ICR MS.pdf: 5116408 bytes, checksum: bd1abd84e579ae77841f93ccc152cb2f (MD5) / Approved for entry into archive by Elizabete Silva (elizabete.silva@ufes.br) on 2014-12-19T18:13:41Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Identificação Química em Nível Molecular de Amostras de de Maconha por ESI-FT-ICR MS.pdf: 5116408 bytes, checksum: bd1abd84e579ae77841f93ccc152cb2f (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-19T18:13:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertacao Identificação Química em Nível Molecular de Amostras de de Maconha por ESI-FT-ICR MS.pdf: 5116408 bytes, checksum: bd1abd84e579ae77841f93ccc152cb2f (MD5) Previous issue date: 2014 / mais consumida no país, e proscrita pela Lei n° 11.343 de 23 de agosto de 2006 (chamada de “nova lei de droga”), onde todos os isômeros, sais, éteres e ésteres do ∆9-Tetrahidrocannabinol (THC), princípio ativo, foram proscritos. O método utilizado pela Polícia Civil do Estado do Espírito Santo para a identificação de cannabinóides é o teste colorimétrico, por meio de solução básica de Salt Fast Blue B, o qual apresenta resultados falsos negativos e falsos positivos. A técnica de espectrometria de massas de altíssima resolução e exatidão de massas (ESI(-)FTICR MS), permite detectar os principais cannabinóides na forma de molécula desprotonada, íon [M-H]-. Alguns íons que podem ser identificados são: [CBN - H]- de m/z 309 (CBN = cannabinol); [THC - H]- de m/z 313 (THC = tetrahidrocannabinol) e [CBD - H]- de m/z 313; [CBC - H]- de m/z 327 (CBC = cannabicromeno); [CBEA - H]- de m/z 345 (CBEA = ácido cannabielsóico); [CBNA - H]- de m/z 353 (CBNA = ácido cannabinólico); [THCA - H]- de m/z 357 (THCA = ácido tetrahidrocannabinólico); [8α, 11-Bis-hydroxy-∆9-THC-A - H]- de m/z 389); [∆9-THCA +C2H2O - H]- de m/z 357; e dímeros com m/z de 637, 653, 673, 681, 685 e 717. Foram encontrados adulterantes identificados como [M + N + H]+ : 491; [2M + N + H]+ : 819 e [3M + N + H]+ : 1147, onde M = OTHC (328Da C21H28O3) e N = Nicotina (162Da C10H14N2), além de lidocaína e cocaína. Ainda foram identificados alguns noncannabinóides como Cannflavino A e B e ácidos graxos como palmítico, oleico, linolênico e gama-linolênico nos extratos de sementes de Cannabis. Este estudo tem o objetivo de identificar o perfil químico de amostras de maconha, apreendidas pela Polícia Civil do Estado do Espírito Santo, por ESI(±)-FT-ICR MS. / The Cannabis sativa L. is well known in Brazil as "maconha". This is the most consumed drug in this country, proscribed by the Law number 11.343 of 23rd August 2006(called "new drug law) , where all isomers, salts, ethers and esters of ∆9Tetrahidrocannabinol (THC), active principle, were proscribed. The method used by the Civil Police of Espírito Santo state to identify the cannabinoids is the test called "colorimetric. It is used by a basic solution of Salt Fast Blue B, which presents results false negatives and false positive. The technic of mass spectrometry of high solution and mass accuracies, ESI(-)FT-ICR MS, allows to detect the main cannabinoids in the form of molecules deprotonated , ions [M-H]. Some ions that can be identified are: [CBN-H]- of m/z 309 (CBN = cannabinol); [THC - H]- of m/z 313 (THC = tetrahidrocannabinol) and [CBD - H]- of m/z 313; [CBC –H]- of 327 (CBC = cannabicromeno); [CBEA - H]- of m/z 345 (CBEA = acid cannabielsóico); [CBNA - H] of m/z 353 (CBEA = acid cannabinólico); [THCA-H] de m/z 357 (THCA = acid tetrahidrocannabinólico); [8α,11-Bis-hydroxy-∆9-THC-A - H]- de m/z 389); [∆9-THCA +C2H2O - H]- of m/z 357; and dimers with m/z 637, 653, 673, 681, 685 and 717. Identified as contaminants found: [M + H]+: 491; [2M + N + H]+: 819; [3M + N + H]+: 1147, where M = OTHC (328Da C21H28O3) and N is nicotine (C10H14N2 162Da) beyond lidocaine and cocaine. Still some noncannabinóides were identified as: Cannflavino A and B and fatty acids such as palmitic, oleic, linoleic and gammalinolenic acid in the extracts of cannabis seeds. This study has the purpose to identify the chemical profile from samples of cannabis seized by the Civil Police from Espirito Santo state, by ESI(±)-FT-ICR MS.
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Transporte atmosférico de umidade para a bacia do Paraná : análise da climatologia, sazonalidade e variabilidade interanual via trajetórias de massas de ar

Moura, Leonardo Zandonadi 08 December 2015 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Tecnologia, Departamento de Engenharia Civil e Ambiental, 2015. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2016-03-01T13:47:02Z No. of bitstreams: 1 2015_LeonardoZandonadiMoura.pdf: 11972172 bytes, checksum: 6c257195d29f41ab841d61d0e2f9594e (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2016-03-23T12:34:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_LeonardoZandonadiMoura.pdf: 11972172 bytes, checksum: 6c257195d29f41ab841d61d0e2f9594e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-23T12:34:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_LeonardoZandonadiMoura.pdf: 11972172 bytes, checksum: 6c257195d29f41ab841d61d0e2f9594e (MD5) / A compreensão da fase atmosférica do ciclo hidrológico é necessária para aumentar a capacidade de prever secas e cheias em bacias hidrográficas, e os impactos de mudanças do clima nos recursos hídricos. O objeto deste estudo é o transporte atmosférico de umidade para a bacia do Rio Paraná até Itaipu: suas regiões de fonte e sumidouro; sazonalidade; variabilidade interanual; relação com o ENSO; correlação com as vazões em Itaipu e; comportamento em secas e cheias. Aplicou-se o modelo lagrangeano de dispersão HYSPLIT, com dados da reanálise NCEP/NCAR, para rastrear as trajetórias de massas de ar (traçadores numéricos de vapor d’água) no período de 1970 a 2010 (41 anos). O Atlântico Sul tropical é a principal fonte de umidade para a bacia do Paraná, enviando na estação chuvosa uma média de 175 [mm /mês]. Partes dessa região possuem correlação de Spearman entre 0,5 e 0,6 com as vazões em Itaipu. A contribuição do Atlântico Norte também se destaca no verão, em fevereiro (média 38,5 [mm /mês]), com correlações de até 0,44 com as vazões em Itaipu. Contribuições maiores do Atlântico Sul subtropical na primavera coincidem com menores vazões. Foram encontradas maiores correlações entre as vazões em Itaipu e a contribuição do Atlântico Norte e Sul subtropical, e mais relações significativas entre essas variáveis na análise de compósitos. Isso indica que, apesar de não serem as maiores fontes de umidade, o transporte a partir dessas regiões é importante para a previsão das vazões. As fontes continentais são mais relevantes durante a estação seca (maio a outubro). A contribuição média da fonte amazônica triplica da estação chuvosa para a seca, chegando a 44,6 [mm /mês], e a da região do Chaco/Pantanal/Cerrado duplica, passando a 99,3[mm /mês]. Elas apresentam correlações com as vazões em Itaipu na segunda metade da estação seca, durante a qual a bacia deixa de ser um sumidouro no balanço hídrico mensal, para tornar-se uma fonte de umidade para a atmosfera, destacando o papel da reciclagem. Em três das quatro secas sazonais analisadas, ocorreram anomalias negativas de quatro meses a um ano da contribuição do Atlântico Sul tropical. Já a de 2007-2009 ocorreu mediante redução da contribuição da Amazônia por um ano, e do Chaco/Pantanal por seis meses. Aumentos das perdas de umidade na estação chuvosa, a nordeste da bacia, e redução da precipitação sobre ela possivelmente são ligadas ao posicionamento da ZCAS e também se relacionam com secas. Nos anos de cheias, observa-se um maior transporte de umidade a partir do Atlântico Sul tropical. / The comprehension of the atmospheric phase of the hydrological cycle is necessary to enhance the capacity to predict droughts and floods in watersheds, as well as the impacts of climate change in water resources. This is a study on the atmospheric transport of moisture to the Paraná watershed, down to Itaipu dam: its sources and sinks, seasonality, interannual variability, relationship with ENSO; correlation to the flowrates at Itaipu and; behavior in droughts and floods. The HYSPLIT lagrangian dispersion model was applied, with data from NCEP/NCAR reanalysis, to track the air masses trajectories (numeric water vapor tracers) for the period from 1970 to 2010 (41 years). The tropical South Atlantic is the main moisture source for the Paraná watershed, sending an average of 175 [mm/month] in the rainy season. Parts of that region have Spearman correlations with the flowrate in Itaipu between 0.5 and 0.6. The North Atlantic contribution is also relevant in the summer on February (average 38.5 [mm/month]), presenting correlations of up to 0.44 with Itaipu flows. Larger contributions from the subtropical South Atlantic in the spring happen concurrently with less river flow. Larger correlations were found between the flowrates at Itaipu and the contributions from the North and subtropical South Atlantic regions, as well as more significant relations between these variables in a composite analysis. This indicates that the transport from these regions is important for the prediction of flows. The continental sources are more relevant during the dry season, from May to October. The average contribution from the Amazon triples from the rainy season to the dry season, going up to 44.6 [mm/month], and the Chaco/Pantanal/Cerrado doubles, passing to 99.3 [mm/month]. They show correlation to Itaipu flowrates on the second half of the dry season, during which the basin ceases to be a sink in the monthly water balance to become a source of moisture to the atmosphere, highlighting the role of recycling. In three of the four seasonal droughts analyzed, negative anomalies lasting four months up to one year occur with the tropical south Atlantic contributions. Yet the one in 2007-2009 occurred under reductions in the Amazon contribution for one year, and from the Chaco/Pantanal for six months. Increases on the wet season moisture losses northeast of the basin are possibly connected to the position of the SACZ, and related to droughts. On floods, a larger transport from the tropical south Atlantic also seems to be the main explaining factor.
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Identificação de constituintes químicos de Baccharis organensis baker e avaliação das atividades biológicas dos extratos e frações das partes aéreas de Baccharis aracatubaensis Malag. e Baccharis organensis baker (Asteraceae)

Zuccolotto, Tatiana January 2017 (has links)
Orientadora : Profª. Drª. Francinete Ramos Campos / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 27/04/2017 / Inclui referências / Resumo: Baccharis L. (Asteraceae) contém aproximadamente 400 espécies, sendo que 178 estão catalogadas no Brasil, principalmente nas regiões Sul, Sudeste e Centro-Oeste. Esse gênero tem sido descrito na literatura por apresentar várias propriedades biológicas, tais como atividade antioxidante, anti-inflamatória, citotóxica, leishmanicida, tripanocida, anti-hipertensiva, hipoglicemiante, diurética, digestiva e antimicrobiana. Tendo em vista o potencial terapêutico do gênero, o presente trabalho teve como objetivos caracterizar os constituintes químicos e avaliar as atividades antioxidante e antimicrobiana de B. aracatubaensis Malag. e B. organensis Baker. Os indivíduos masculinos e femininos, de ambas as espécies, foram coletados no município de Piraquara-PR, durante o período de floração. A partir do material botânico coletado foram separadas as inflorescências de B. aracatubaensis e B. organensis para extração do óleo essencial. Este foi obtido através de hidrodestilação em aparelho de Clevenger modificado e os constituintes químicos foram identificados por CG-EM. Foi possível identificar um total de 25 compostos para B. aracatubaensis e 32 para B. organensis. Os componentes majoritários (masc./fem.) de B. aracatubaensis foram ?-muuroleno (21,4/23,9%), biciclogermacreno (21,4/21,7%), ?-cariofileno (10,9/12,7%), ?-cadineno (6,6/8,2%) e limoneno (5,5% apenas para o indivíduo masculino). Já em B. organensis foram identificados como majoritários (masc./fem.), viridiflorol (23,0/11,9%), biciclogermacreno (15,2/15,1%), ?-muuroleno (6,8/10,4%), epiglobulol (7,4/6,4%). Os compostos ?-cadinol e curcufenol (7,5% e 5,9%, respectivamente) foram majoritários somente para os indivíduos masculinos de B. organensis. Os extratos brutos foram obtidos a partir da extração hidroalcoólica das folhas de B. aracatubaensis e B. organensis, sendo indivíduos masculinos (Ba-M e Bo-M) e femininos (Ba-F e Bo-F), respectivamente. A análise de espectros de RMN de 1H dos extratos masculinos e femininos, de ambas as espécies, apresentaram perfil químico muito semelhante. Assim os extratos Ba-F e Bo-F foram fracionados por procedimentos cromatográficos e as frações de Bo-F analisadas por técnicas de RMN de 1H e espectrometria de massas, resultando na identificação de 19 substâncias: 3-(3,4,5-trimetoxifenil)-prop-2-en-1-al, ácido trans-ferúlico, 1-etoxietil-3,5-dimetoxi-4-hidroxifenol, siringaldeído, cafeato de etila, cirsimaritina, hispidulina, apigenina, ácido trans-isoferúlico, ferulato de etila, ácido siríngico, ácido cafeico, álcool siríngico, 8-metoxi apigenina, cafeato de 4'-O-?-D-glucopiranosil-3',5'-dimetoxibenzila, kaempferol, ácido 3,5-dicafeoilquínico, escopoletina e ácido tricafeoilquínico. Também foram realizadas avaliação in vitro das atividades antioxidante (DPPH e ORACFL) e antimicrobiana (técnica de microdiluição) dos óleos essenciais, extratos e frações de ambas as espécies. Todas as amostras apresentaram atividade antioxidante promissora. No ensaio antimicrobiano os extratos e frações apresentaram atividade que variou de moderada a fraca, entretanto, os óleos essenciais não apresentaram atividade antimicrobiana frente aos micro-organismos testados. Palavras-chave: Baccharis, atividade biológica, RMN, CG-EM, espectrometria de massas. / Abstract: Baccharis L. (Asteraceae) contains approximately 400 species, of that 178 are cataloged in Brazil, mainly in the Sul, Sudeste, and Centro-Oeste regions. This genus has been described in the literature due the several biological properties, such as antioxidant, anti-inflammatory, cytotoxic, leishmanicidal, trypanocidal, antihypertensive, hypoglycemic, diuretic, digestive, and antimicrobial. Considering the therapeutic potential of the genus, the present work had as objectives to characterize the chemical constituents and to evaluate the antioxidant and antimicrobial activities of the B. aracatubaensis Malag. and B. organensis Baker. The male and female individuals of both species were collected in the municipality of Piraquara-PR, during the flowering period. The inflorescences of B. aracatubaensis and B. organensis were extracted to obtain the essential oils. The was obtained by hydrodistillation in a modified Clevenger apparatus and the chemical constituents were identified by GC-MS. It was possible to identify a total of 25 compounds for B. aracatubaensis and 32 for B. organensis. The major components (male / female) of B. aracatubaensis were ?-muurolene (21.4 / 23.9%), bicyclogermacrene (21.4 / 21.7%), ?-caryophyllene (10.9 / 12), ?-cadinene (6.6 / 8.2%) and limonene (5.5% for male subjects only). In the B. organensis, the majorities (male / female), viridiflorol (23.0 / 11.9%), bicyclogermacrene (15.2 / 15.1%), ?-muurolene (6,8 / 10.4%), epiglobulol (7.4 / 6.4%). The compounds ?-cadinol and curcufenol (7.5% and 5.9%, respectively) were predominant only for male individuals of B. organensis. The crude extracts were obtained from the hydroalcoholic extraction of the leaves of B. aracatubaensis and B. organensis, being male (Ba-M and Bo-M) and female (Ba-F and Bo-F) respectively.The analysis of 1H NMR spectra of male and female extracts of both species presented a very similar chemical profile. Thus, the Ba-F and Bo-F extracts were fractionated by chromatographic procedures and the Bo-F fractions analyzed by 1H NMR and mass spectrometry techniques, resulting in the identification of 19 substances: 3-(3, 4, 5-trimethoxyphenyl)propenal acetate, trans-ferulic acid, 1-ethoxyethyl-3,5-dimethoxy-4-hydroxyphenol, syringaldehyde, ethyl caffeate, cirsimaritine, apigenin, trans-isoferulic acid, ethyl ferulate, syringic acid, caffeic acid, siringeal alcohol, 4'- glucopyranosyl-3 ', 5'-dimethoxybenzyl caffeate, kaempferol, 3,5-dicaffeoyl quinic acid, scopoletin and trycaffeoyl quinic acid. Were also evaluated the antioxidant (DPPH and ORACFL) and antimicrobial (microdilution technique) in vitro activities of essential oils, extracts and fractions of both species. All the samples presented promising antioxidant activity. In the antimicrobial assay the extracts and fractions presented activity that varied from moderate to weak, however, the essential oils did not present antimicrobial activity against the tested microorganisms. Keywords: Baccharis, biologic activity, NMR, GC-MS, mass spectrometry.
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Efeitos da substituição de gordura vegetal hidrogenada nas propriedades estruturais de bolos / Effects of replacing hydrogenated vegetable fat on the structural properties of cakes

Raquel Vallerio Rios 17 September 2014 (has links)
Muitas famílias não têm tempo de preparar bolos caseiros e acabam optando pela praticidade de comprar produtos prontos. A atitude dos consumidores, em relação aos problemas de saúde que podem advir do consumo de alimentos com alto teor de gorduras, é de consumir alimentos formulados de maneira que apresentem menores teores, mas com as mesmas características sensoriais dos produtos originais. O objetivo deste estudo foi determinar o efeito da substituição de gordura vegetal hidrogenada por outros lipídeos (gordura de palma, óleo de soja, óleo de castanha do Brasil, óleo de coco) e por extrato de aveia em formulações de bolos. Foram elaboradas nove formulações contendo farinha de trigo, açúcar, ovo em pó, gordura, água, leite em pó integral, emulsificante, fermento químico e sal, substituindo-se a gordura vegetal hidrogenada pelos diferentes tipos de lipídeos e extrato de aveia. Formulações: (controle) gordura vegetal hidrogenada (GVH) - 100%; (1): gordura de palma - 100%; (2): óleo de soja - 100%; (3): óleo de castanha do Brasil - 100%; (4): óleo de coco - 100%; (5): extrato de aveia - 100%; (6): GVH - 50% + óleo de castanha do Brasil - 50%; (7): GVH - 50% + óleo de coco - 50%; (8): GVH - 50% + extrato de aveia - 50%. Através das análises de textura com probes back extrusion e de compressão (TPA-análise do perfil de textura) pode-se avaliar, respectivamente, o comportamento das massas de bolos e o shelf-life dos produtos finais durante seis dias de armazenamento. Foram feitas avaliações de volume específico, densidade, porosidade, composição centesimal e atividade de água - aw. A análise sensorial com 60 provadores foi realizada utilizando-se as formulações controle, óleo de coco, óleo de castanha do Brasil e extrato de aveia de acordo com a escala hedônica (9 pontos) e intenção de compra. A análise de textura (back extrusion) apontou diferentes comportamentos reológicos, embora todas as formulações caracterizaram-se como fluido dilatante (n>1). O resultado do shelf-life mostrou que o bolo produzido com extrato de aveia obteve melhores características de qualidade. O bolo produzido com GVH apresentou maior volume (2,65 mL/g), menor densidade (0,39 g/mL)e maior incorporação de ar (16,45 mm2). A análise de cor apontou que o bolo elaborado com GVH + óleo de coco apresentou-se mais amarelado (35,94) e o bolo com GVH + extrato de aveia com maior brilho (75,27). A composição centesimal mostrou as variações obtidas de acordo com a substituição de gordura por extrato de aveia e o menor valor calórico (257,62 kcal) para este produto. O resultado de aw mostrou maior valor para a formulação com extrato de aveia (0,94), sendo esperado devido ao maior conteúdo de água da formulação. A análise sensorial, através da avaliação de painel não treinado, indicou que o bolo elaborado com óleo de coco obteve a maior aceitação e, consequentemente, a maior intenção de compra, entretanto, apresentou pouca diferença em relação ao bolo controle. Em geral, os resultados mostraram ótimo padrão de qualidade dos bolos elaborados com a substituição da gordura vegetal hidrogenada, podendo-se assim, obter produtos com outras opções de ingredientes e com agregação de valor nutricional. / Many families do not have time to prepare homemade cakes and usually opt for the convenience of buying ready products. Consumer\'s attitudes regarding health issues, that may arise from the consumption of foods high in fat, is to consume foods that have formulated so low in fat, but with the same sensory characteristics of the original products. The purpose of this study was to determine the effect of replacing hydrogenated vegetable fat for other lipids (fat palm, soybean oil, Brazil nut oil, coconut oil) and oat extract in cake formulations. Nine formulations containing flour, sugar, egg powder, fat, water, whole milk powder, emulsifier, baking powder, and salt were elaborated by replacing the hydrogenated vegetable fat for different types of lipids and oat extract. Formulations: (control) hydrogenated vegetable fat (GVH) - 100%; (1): palm fat - 100%; (2) soybean oil - 100%; (3): Brazil nut oil - 100%; (4) coconut oil - 100%; (5): oat extract - 100%; (6): GVH - 50% + nut oil from Brazil - 50%; (7) GVH - 50% Coconut oil + - 50%; (8): GVH - 50% + oat extract - 50%. The behavior of cakes batters and shelf life of the final product during six days of storage were assessed through the texture analysis with probes back extrusion and compression (TPA-texture profile analysis), respectively. The evaluation of specific volume, density, porosity, chemical composition and water activity - aw was made. Sensory analysis was performed with 60 tasters using the control formulations, coconut oil, Brazil nut oil l and oat extract according to the hedonic scale (9 points) and purchase intent. Texture analysis (back extrusion) showed different rheological behaviors, although all formulations were characterized as a dilatant fluid (n> 1). The result of the shelf-life showed that the cake made with oat extract produced better quality characteristics. The cake produced with GVH showed higher volume (2,65 mL/g), lower density (0,39 g/mL) and greater incorporation of air (16,45 mm2). The color analysis showed that the cake made with coconut oil + GVH presented more yellowness (35,94) and cake with GVH + oat extract presented higher brightness (75,27). The chemical composition showed variations obtained in accordance with the substitution of fat for oat extract and lower caloric value (257,62 kcal) for this product. The result showed higher aw value (0,94) for the formulation with oat extract, it is expected due to the higher water content of the formulation. The sensory analysis, through evaluating untrained panel, indicated that the cake prepared with coconut oil had the highest acceptance and, consequently, the higher purchase intention, although it presented little difference from the control cake. In general, the results showed great standard of quality cakes prepared by replacing the hydrogenated vegetable fat, leading to products with other options of ingredients and with added nutritional value.
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Olanzapina: uma avaliação da bioequivalência de comprimidos 10mg e estudo pré-clínico com desenvolvimento de sondas de microdiálise cerebral

BEDOR, Noely Camila Tavares Cavalcanti 29 February 2016 (has links)
Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-08-22T12:25:47Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Bedor_Noely_Tese.pdf: 3627031 bytes, checksum: bffd788a8d2405e29a360eb20d7a089c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-22T12:25:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Bedor_Noely_Tese.pdf: 3627031 bytes, checksum: bffd788a8d2405e29a360eb20d7a089c (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / FACEPE / CAPEs / A olanzapina é um antipsicótico atípico cujo efeito colateral ganho de peso pode ser a causa de não adesão ao tratamento. Não se sabe qual o mecanismo fisiológico que explicaria essa relação, daí a necessidade de pesquisas na área da farmacocinética (PK) e da farmacodinâmica (PD). Assim, o objetivo da tese buscou entender melhor a farmacocinética da OLZ através de estudos em humanos e animal, visando otimização na posologia, empregando correlações de PK/PD. Foi realizado um estudo de bioequivalência utilizando comprimidos teste e referência 10 mg. Em seguida, para evidenciar possíveis variações em alguns parâmetros de PK e buscar dados de PD, realizou-se um estudo de PK plasmática e microdiálise cerebral (MD) em animais. Paralelamente, foram preparadas sondas de MD em laboratório e realizada uma comparação com as sondas comercias, através de diálise e retrodiálise in vitro. Para o estudo com MD, foi realizada a cirurgia estereotáxica para implantação da sonda e punção da artéria e veia femoral, para administração da dose e coleta de amostras plasmáticas. O estudo de bioequivalência foi do tipo aberto, aleatório, cruzado 2 x 2, com 28 voluntários sadios. O método de quantificação da OLZ, em plasma humano por CL-EM/EM, mostrou-se simples, rápido e sensível com o tempo de corrida de 2 min. Os parâmetros farmacocinéticos em humanos Cmáx, Tmáx, ASC0-t e ASC0-∞ obtidos para a formulação teste e referência foram de 11,47±3,65; 12,50±3,73 ng·mL-1; 4,50±1,85; 4,30±2,37 h; 240,97±78,46 e 283,12±94,84 ng·(mL·h)-1, respectivamente, sendo os medicamentos bioequivalentes. As amostras de plasma de animais foram analisadas por CL-EM/EM e de acordo com disposição cinética, o modelo bicompartimental foi o que melhor se ajustou aos dados experimentais. Os parâmetros farmacocinéticos obtidos através de Excel, Winnolin e Pksolver foram considerados próximos. O local de inserção da sonda foi confirmado através de histologia. Os resultados da recuperação por diálise e retrodiálise para as sondas comercial e de laboratório foram 19,27±10,11; 19,42%±6,54; 23,06±2,36; 24,59±3,14, respectivamente. Portanto, as mesmas podem ser intercambiáveis. Por fim, essa tese colaborou com a formação de recursos humanos para inserir no grupo de pesquisa uma técnica pouco utilizada no Brasil, microdiálise cerebral, além de publicação de artigo em periódico internacional. / The olanzapine is an atypical antipsychotic, which confers effects as weight gain, which may be the cause of non-compliance. It is not known what the physiological mechanism that is related to weight gain, hence it is necessary improve the research in pharmacokinetics (PK) and pharmacodynamics (PD). The aim of the thesis sought to better understand the pharmacokinetics of OLZ through studies in humans and animals, aimed at optimizing the dosage regimen using PK / PD correlation. It conducted a bioequivalence study using test and reference tablets 10 mg. Then, to understand possible variations in some parameters PK and PD data fetch, it was performed a plasma PK study and brain microdialysis (MD) in animals. At the same time, MD probes were prepared at the laboratory and compared with commercial probe by dialysis and retrodialysis in vitro. For the MD study, stereotaxic surgery was performed to implant the MD probe and puncture of the femoral artery and vein was performed to dosing and collecting of plasma samples. The bioequivalence study was open, randomized, crossover 2x2 with 28 healthy participants. The method of quantification of OLZ in human plasma by LC-MS/MS developed and validated is simple, fast and sensitive with analysis time (2 min). The human pharmacokinetic parameters Cmax, Tmax, AUC0-t e AUC0-∞ obtained for the test and reference formulation were de 11.47±3.65, 12.50 ± 3.73 ng·mL-1, 4.50 ± 1.85, 4.30 ± 2.37 h, 240.97±78.46 e 283.12 ± 94.84 ng·(mL·h)-1, considering the formulations bioequivalent. Plasma samples of animals were analyzed by LC-MS / MS and according to kinetic disposition, the two-compartment model was the best fit to the experimental data. Pharmacokinetic parameters obtained from Excel, Winnolin and Pksolver were considered approximate. The insertion of the probe into the striatum of the brain of animals was confirmed by histological sections. The results for recovery by dialysis and retrodialysis for commercial and laboratory probes were 19.27% ± 10.11; 19.42% ± 6.54; 23.06% ± 2.36; 24.59% ± 3.14. Therefore, they can be interchangeable. Finally, this thesis collaborated with the training of human resources to insert in the research group, a technique not widely used in Brazil, besides publishing scientific paper in an international journal.
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Estudo experimental do gradiente de pressão em tubulações anulares concentricas e excentricas com e sem rotação

Faria, Rogerio Costa 18 December 1995 (has links)
Orientador: Eugenio Spano Rosa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecanica / Made available in DSpace on 2018-07-20T22:47:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Faria_RogerioCosta_M.pdf: 18741558 bytes, checksum: 173d4e2bf4c0cf2e96f533ba9f079baa (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Na busca contínua da redução dos custos de produção do petróleo, um método de elevação artificial que vem se destacando é o sistema de produção através de bombas de cavidades progressivas conhecido, simplesmente, por BCP. Este método que, inicialmente, era destinado à produção de poços rasos (500 m) e de baixas vazões (5m3/d), hoje, com o desenvolvimento de novos materiais, já é utilizado em poços com vazões de até 300 m3/d e profundidades que chegam a 2000 m. Com a utilização de vazões cada vez maiores, as perdas hidrodinâmicas ao longo do anular tubo/haste passaram a representar uma quantia significativa da energia total a ser fornecida ao fluido e, consequentemente, sua determinação assumiu um papel importante no dimensionamento do sistema BCP, exigindo-se, desta forma, uma maior atenção. Visando conhecer melhor o escoamento ao longo da coluna de produção, construiu-se, em laboratório, um modelo na escala de 1:1,88 de um poço equipado com tubo de produção de 2 7/8", haste de 7/8" e luva de 1 5/8", onde o escoamento foi considerado monofásico. A partir deste modelo foram simuladas as faixas de vazão de 0a 300 m3/d, rotação de 100 a 400 rpm e viscosidade de 100 a 4000 cP, que abrangem quase a totalidade das condições de campo dos poços brasileiros equipados com BCP. Foram investigados os efeitos das restrições ao fluxo causadas pela mudança de geometria nas extremidades das hastes e pela presença das luvas (utilizadas nas interligações das hastes). Além das restrições estudou-se a influência da rotação no diferencial de pressão ao longo do anular tubo/haste, para os arranjos concêntricos e excêntricos, tanto para haste sem luva como para haste com luva. Os resultados obtidos, experimentalmente, confirmam, para o caso concêntrico, a não interferência da rotação no gradiente de pressão e para o arranjo excêntrico, nas faixas de vazão, viscosidade e rotação investigadas, observa-se um ligeiro aumento no diferencial de pressão com a rotação. O diferencial de pressão no anular tubo/luva foi determinado utilizando-se as mesmas equações empregadas no cálculo do diferencial de pressão no anular tubo/haste. Para considerar-se a mudança de geometria das extremidades das bastes, sugere-se um majoramento de 50 % nos valores obtidos para as luvas / Abstract: In the continuous search to reduce the petroleum production cost, a distinguished artificial lift method is the Progressive Cavity Pumping system, or simply BCP. lnicially, it was only used to produce shallow wells (1600 ft or 500m) and low flow rates (30 bbl/d or 5m3/d), but with the development of new materiaIs, the BCP has been applied to wells which produce as much as 2000 bbl/d (300 m3/d) and can be installed in depth up to 6500 fi (2000 m). With higher flow rates, the hidrodynamics losses through out the tubing/rod string annulus turned out to represent a reasonable percentage of the total energy applied to produce fluid from the bottom to the surface of the wells. Thus its determination has taken an important role in the system design, demanding more attention. To get a better knowledge of the tlow through the tubing/rod string annulus, it was built aI: 1,88 scale model of a well equipped with 2 7/8" tubing, 7/8" rod and 1 5/8" coupling, for monofase flow. With this model, it was simulated the flow rates from 0 to 300 m3/d, pump speed from 100 to 400 rpm and viscosity ftom 100 to 4000 cP, values that tipically covers almost the totality of the Brazilian oil wells equipped with BCP. It was investigated the effects of the flow restrictions caused by the complex geometry of the rods' edge and the higher diameter of the couplings. Besides the restrictions, it was studied the influence of the rotation of the rod string in the pressure gradient through out the tubing/rod string annulus for the concentric and eccentric configurations. The experimental results confirmed that in the concentric position, the rotation of the rod string does not interfere in the pressure loss. It was noted in the eccentric case that the rotation of the rod is responsible for a small increase in the pressure loss. The pressure loss caused by the tlow through the tubing/coupling annulus was determinated by the same equations that were used to the tubinglrod annulus. In order to consider the complex geometry of the extremity of the rods, it is suggested to increase the value for the pressure loss along the couplings by 50% / Mestrado / Mestre em Engenharia de Petróleo
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Controle, aquisição e tratamento de dados para espectrometria de massas sequencial em aparelho pentaquadrupolar : espectros multidimensionais MSn(n=1,2,3)e monitoramento de ions em função do tempo e potencial de ionização

Juliano, Valmir Fascio 22 July 2018 (has links)
Orientadores: Concetta Kascheres, Claudimir Lucio de Lago / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-22T13:41:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Juliano_ValmirFascio_D.pdf: 7238111 bytes, checksum: 024bc2b93237864cf7b0bce33abf418b (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Um espectrômetro de massas pentaquadrupolar foi interfaceado a um microcomputador 486DX 50 MHz através de um cartão de interface AT-MIO-16X da National Instruments e de um outro desenvolvido em nosso laboratório. Foi desenvolvido um conjunto de programas para controlar o instrumento e adquirir dados de experimentos MS, MS e MS multidimensionais em espectrometria de massas sequencial. Também foi desenvolvido um programa para o monitoramento de íons em função do tempo e do potencial de ionização. O monitoramento em função do tempo permite trabalhar com a técnica de espectrometria de massas por introdução via membrana (MIMS), bem como com outros processos que gerem produtos gasosos. O potencial de ionização é controlado através de um conversor D/A, permitindo adquirir espectros enquanto é feita sua varredura. Esta técnica está sendo avaliada para emprego como ferramenta auxiliar na interpretação de espectros, assim como na eliminação de contaminações. Todo o software foi desenvolvido em Turbo Pascal 1.5 para Windows utilizando a técnica de programação orientada a objetos e programação motivada por eventos a fim de permitir um completo controle e expansão do sistema. Com o objetivo de eliminar e impedir a interferência de sinais espúrios, foi feito um estudo do efeito de um filtro digital robusto por mediana móvel sobre um sinal analítico, comparando-o com o método de filtragem por média móvel, o qual tem sido bastante utilizado nestes processos de filtragem. Posteriormente, implementou-se o método nos programas de aquisição de dados do equipamento, obtendo-se resultados bastante satisfatórios. Um circuito oscilador foi acoplado ao controlador do potencial elétrico da lente de focalização de saída do primeiro quadrupolo de reação a fim de aumentar o tempo de residência dos íons em seu interior e, consequentemente, aumentar o rendimento das reações íon-molécula. Aumentos da ordem de 30 a 260% foram observados no experimentos testados. / Abstract: A pentaquadrupole mass spectrometer was interfaced to a 486DX 50-MHz microcomputer by an AT-MIO-16X interface card (National Instruments) and by another home made card. A set of programs was developed to control the instrument and to acquire data from multidimensional MS, MS and MS experiments in sequential mass spectrometry. A program to monitorize ions as a function of the time and ionization potential was also developed. The time monitoring allows one to work with membrane inlet mass spectrometry as well as with other processes that yield gas products. The ionization potential is controlled by a DAC that allows one to acquire spectra while varying it. This technique is being evaluated as a tool for interpretation of spectra and elimination of contamination in spectra. All programs were developed in Turbo Pascal 1.5 for Windows using object oriented programming and event-driven programming to allow complete control of the system as well as its upgrading. The effect of a robust digital filter, based on the moving mediam method, was studied. This method was compared to the moving average procedure, commonly used in analytical signal filtering. Later, this method was implemented in all data acquisition programs and good results were obtained. An oscillator circuit was connected to the potential controller of the focussing lens at the exit of the first reaction quadrupole to increase the residence time of the ions inside it and therefore increase the yield of the ion-molecule reactions. For the reactions studied the yields were increased in the range of 30 to 260%. / Doutorado

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