Com a expansão da avicultura, ocorreu um aumento no número de aves alojadas, concentrando as produções e, consequentemente, facilitando a disseminação de doenças. Entre as doenças transmitidas pelo consumo dos produtos avícolas, a salmonelose tem especial importância. Nos últimos anos tem ocorrido um aumento na prevalência do sorovar Salmonella Enteritidis em todo o mundo, sendo o mais isolado. A patogenia da Salmonella e a forma como ela interage com seu hospedeiro são fenômenos multifatoriais e complexos. Entre os principais fatores de virulência da Salmonella estão os genes de virulência. O objetivo deste trabalho foi a pesquisa de genes associados à virulência em cepas de S. Enteritidis oriundas de diferentes origens avícolas. Realizou-se a pesquisa de nove genes de virulência (lpfA, agfA, sefA, invA, hilA, avrA, sopE, sivH, spvC) em 84 amostras de S. Enteritidis. Os genes invA, hilA, sivH, sefA e avrA estiveram presentes em 100% das amostras (84/84); lpfA e sopE em 99% (83/84); agfA em 96% (81/84); e o gene spvC em 92% (77/84). Foi possível caracterizar as amostras em quatro diferentes perfis genéticos, sendo P1 positivo para todos os genes, P2 negativo apenas para spvC, P3 negativo apenas para agfA e P4 negativo para lpfA, spvC e sopE, sendo o grupo P1 o mais prevalente. Apesar de todas as cepas pertencerem a um mesmo sorovar, observou-se uma variação na presença dos genes de virulência. Os perfis estabelecidos e as frequências obtidas podem servir para a escolha de cepas a serem utilizadas para realização da PFGE e em futuros estudos in vivo. / The poultry industry has been characterized by an increase in the number of housed animals in recent years, concentrating the production and facilitating the spread of many diseases. Among all illness transmitted by food, including meat and eggs, salmonellosis is of particular importance. Currently, there has been an increase in prevalence of islament of Salmonella Enteritidis all around the world. The pathogenesis of Salmonella and how it interacts with the host are a complex and multifactorial phenomenon. Among virulence factors of Salmonella, the virulence genes are the most important. The aim of this survey was to search for genes associated with virulence in strains of S. Enteritidis isolated from different origins, all from poultry. We conducted a search of nine virulence genes (lpfA, agfA, sefA, invA, hilA, avrA, sopE, sivH, spvC) in 84 samples of S. Enteritidis. The genes invA, hilA, sivH, sefA e avrA were present in 100% of samples (84/84); lpfA and sopE in 99% (83/84); agfA in 96% (81/84); and spvC in 92% (77/84) of them. It was possible to characterize the samples in four different genetic profiles, P1 being positive for all genes, P2 negative only for spvC, P3 negative only for agfA and P4 negative for lpfA, sopE and spvC. The P1 was the most prevalent. Despite all the strains belong to the same serovar, it is possible to observe a variation in the presence of virulence genes. These established profiles and gene frequencies obtained are useful to select strains to be used in PFGE and in future in vivo studies.

Superfícies fixas contaminadas de hospitais de clínicas veterinárias podem servir como fonte de contaminação por microrganismos potencialmente patogênicos comuns entre animais e seres humanos, promovendo riscos de infecções nosocomiais tanto para os pacientes quanto para os profissionais, estudantes e trabalhadores em saúde veterinária. Com a finalidade de controle dessa microbiota transmissível, procedimentos sanitários de desinfecção e descontaminação são prescritos para serem adotados no ambiente. O presente estudo teve como objetivos isolar e identificar a microbiota presente em superfícies fixas de áreas críticas do setor de pequenos animais de um hospital veterinário de ensino, e verificar a ação de inativação de grupos químicos desinfetantes sobre estes microrganismos. Com swabs rolados sobre a superfície de mesas inox de contato com os pacientes, nos setores de atendimento clínico ambulatorial, de internados, de fluidoterapia, de cirurgia e de pré-operatório, foram isolados Staphylococcus spp. coagulase (+) e (-), Sphingomonas paucimobilis, Streptococcus sp. (não grupo D), Enterobacter sp., Acinetobacter iwoffii, Bacillus cereus, Pseudomonas sp., Micrococcus sp., Enterococcus sp., Cocobacilo não fermentador, Bacillus sp., Citrobacter sp. e Candida guilliermondii. Foi avaliada a capacidade de inativação dos desinfetantes ácido peracético, iodóforo, hipoclorito de sódio, quaternário de amônio, fenol sintético, clorhexidina e álcool. O método utilizado foi o de diluição, pela técnica de suspensão microbiana composta por três pools de bactérias (um por dia de coleta ) e uma cultura de levedura, em três concentrações dos desinfetantes nos tempos de contato 1, 5 e 10 minutos. Os pools eram suspensos na solução desinfetante, e identificados os sobreviventes. Observou-se que o ácido peracético, nas concentrações 25 e 50 mg/L em 10 minutos de contato não inativou Staphylococcus spp. e Candida guilliermondii, e em 100 mg/L precisou mais de 5 minutos para inativá-los. O iodóforo, em 25 mg/L precisou de mais de 1 minuto para inativar Staphylococcus spp., e 10 minutos não foram suficientes para inativar Bacillus sp. Mesmo em 100 mg/L, necessitou mais de 1 minuto para inativar Staphylococcus spp. O hipoclorito, na concentração 250 mg/L, em 1 minuto de contato não inativou Bacillus sp. e precisou de 10 minutos para inativar Candida guilliermondii. Frente a essa levedura, mesmo em 1.000 mg/L o hipoclorito de sódio precisou de tempo maior a 1 minuto para inativa-la. Os demais desinfetantes (quaternário de amônio, fenol sintético, clorhexidina e álcool), nas menores concentrações e tempos de contato, inativaram todos os microrganismos. Concluiu-se que nas superfícies de todos os ambientes hospitalares, puderam ser isolados microrganismos. Os testes in vitro evidenciaram que todos os grupos químicos avaliados podem ser usados para inativar os isolados, mas que os fatores testados: gênero e espécie microbiana, concentrações e tempos de contato, interferiram na capacidade desinfetante. / Noncritical environmental surfaces of veterinary hospitals might be contamination sources of potentially pathogenic microorganisms shared by animal species and humans beings, representing risks of nosocomial infections, either to the patients or to the medical and technical staff and students. Aiming to control this transmissible microbiota, sanitary procedures of decontamination and disinfection are prescribed to be adopted in these environments. The present study aimed to isolate and identify the microbiota occurring in environmental surfaces of critical areas of the small animals sector in a veterinary teaching hospital, and evaluate the inactivation action of disinfectants of different chemical groups against these microorganisms. Staphylococcus spp. coagulase (+) and (-), Sphingomonas paucimobilis, Streptococcus sp. (not group D), Enterobacter sp., Acinetobacter iwoffii, Bacillus cereus, Pseudomonas sp., Micrococcus sp., Enterococcus sp., Cocobacilo non-fermenting, Bacillus sp., Citrobacter sp. and Candida guilliermondii were isolated by means of swabs rolled on the surfaces of stainless steel tables contacting with the patients in the following areas: ambulatory clinical, hospitalization, fluid therapy, surgery and pre-operatory. The efficacy of peracetic acid, iodofor, sodium hypochlorite, a quaternary ammonium product, synthetic phenol, chlorhexidine and alcohol was evaluated. The method used was dilution by the suspension technique composed by three bacterial pools (one for each sampling day) and a yeast culture, in three disinfectant concentrations, and in 1, 5 and 10 minutes of contact. The pools were suspended in the disinfectant solutions and the survivors identified. Peracetic acid, in 25 and 50 mg/L concentration, in 10 min of contact did not inactivate Staphylococcus spp. and Candida guilliermondii, and in a concentration of 100mg/L needed more than 5 minutes to inactivate them. The iodofor, in 25 mg/L, took more than 1 minute to inactivate Staphylococcus spp., and 10 minutes were insufficient to inactivate Bacillus sp.; even in a concentration of 100 mg/L it required more than 1 minute to inactivate Staphylococcus spp. The hypochlorite, in a concentration of 250 mg/L, in 1 minute of contact did not inactivate Bacillus sp. and required 10 minutes to inactivate Candida guilliermondii. Against this yeast, even a 1000 mg/L solution of sodium hypochlorite, required more than 1 minute to inactivate it. The other disinfectants (a quaternary ammonium product, synthetic phenol, chlorhexidine and alcohol) in the lowest concentrations and smaller contact times inactivate all the microorganisms identified. It was concluded that microorganisms might be isolated in surfaces of all environments of the hospital. The in vitro tests showed that all chemical groups evaluated could be used to inactivate the isolates, but the tested variables: genus and species of microorganisms, concentrations and contact times, interfered in the disinfectant efficacy.

Na indústria da carne, a eficaz desinfecção das superfícies de contato com o alimento é uma importante barreira sanitária para evitar que os microrganismos deteriorantes e potencialmente patogênicos degradem o alimento ou ponham em risco a saúde dos consumidores. Com objetivo de monitorar a atividade antimicrobiana, pelo teste de suspensão, os desinfetantes quaternário de amônio, ácido peracético, clorhexidina, iodofor e hipoclorito de sódio foram confrontados com Escherichia coli, Staphylococcus aureus e dois pools de bactérias, todos organismos sobreviventes à higienização de um matadouro-frigorífico de bovinos com alta capacidade de abate. Os desinfetantes foram diluídos em graus geométricos com fator 0,5 formando cinco concentrações. Usaram-se os tempos de contato 5, 10, 15 e 20 minutos, e para simular deficiência de limpeza, à solução desinfetante foi adicionada 1% de matéria orgânica na forma de soro bovino estéril. Para análise estatística foi realizada a análise da variância com distribuição binomial para variável resposta. Com o delineamento da investigação e os organismos indicadores usados, as menores concentrações/tempo de contato para inativação de todas as bactérias foram: quaternário de amônio 25 ppm/20min. e 50 ppm/5min., ácido peracético 6,25 ppm/10min. e 25 ppm/5min., clorhexidina 200 ppm/5min. e 12,5 ppm/15min., iodofor 50 ppm/5min. e hipoclorito de sódio 200 ppm/5min. Todos os desinfetantes avaliados podem ser usados para inativar as bactérias sobreviventes no matadouro-frigorífico. Por outro lado, a simulação indica que a manipulação in loco dos fatores concentração, tempo de contato e matéria orgânica, entre outros, podem permitir a sobrevivência dos microrganismos no ambiente. / In the meat-processing industry, the efficient disinfection of meat contact surfaces is an important sanitary barrier to avoid deteriorating and potentially pathogenic microorganisms degrading the meat or pose a health hazard to consumers. Aiming to monitor antimicrobial activity through suspension test, the disinfectants ammonium quaternary, peracetic acid, chlorhexidine, iodophor and sodium hipochlorite were confronted with Escherichia coli, Staphylococcus aureus and two bacterial pools, all surviving organisms to hygienization in a bovine slaughterhouse with high slaughtering capability. The disinfectants were diluted in geometric degrees with factor 0,5, compounding five concentrations. Contact times were 5, 10, 15 and 20 minutes and, in order to simulate cleanliness deficiency to the disinfecting solution, 1% of organic matter in the form of sterile bovine serum was added. For statistical analysis, a variance analysis was effectuated with binomial distribution to variable response. Through this investigative line and the aforementioned indicator organisms, the lesser concentration per contact time to inactivate all bacterial culture were: ammonium quaternary 25 ppm/20min and 50 ppm/5min.; peracetic acid 6,25 ppm/10min and 25 ppm/5min.; chlorhexidine 200 ppm/5min and 12,5 ppm/15min.; iodophor 50 ppm/5 min and sodium hipochlorite 200 ppm/5 contact minutes. All evaluated disinfectants can be utilized to inactivate surviving bacterial cultures in the slaughterhouse. On the other hand, the simulation indicates that the in loco manipulation of factors concentration, contact time and organic matter, besides others, can allow the microorganisms survival in the medium.

Submitted by JÚLIO HEBER SILVA (julioheber@yahoo.com.br) on 2017-08-22T17:14:03Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Darling Mélany de Carvalho Madrid - 2017.pdf: 9281142 bytes, checksum: 7c28bb567493636c0dd23e77fa2de0ff (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-09-15T12:12:53Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Darling Mélany de Carvalho Madrid - 2017.pdf: 9281142 bytes, checksum: 7c28bb567493636c0dd23e77fa2de0ff (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-15T12:12:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Darling Mélany de Carvalho Madrid - 2017.pdf: 9281142 bytes, checksum: 7c28bb567493636c0dd23e77fa2de0ff (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-07-31 / Trypanosoma vivax (Ziemann, 1905) is a protozoon responsible for causing trypanosomiasis in bovines, a disease currently increasing in Brazil and, in the state of Goiás, it was first identified in 2015. As it causes abortion, lethality and greatly diminishes milk production, trypanosomiasis may cause significant losses to farmers, especially those working with milk production. However, there is not much information about this protozoon in Brazil. As it is necessary to gather more knowledge about isolates in the country to evaluate the disease real prevalence, impact in economy and, more importantly, develop control programs, this work proposed evaluate the morphometry of this parasite in scanning electron microscopy and the efficacy of different disinfectants in its elimination. Scanning electron microscopy is a highresolution technique used to analyze the external structures of the parasite, which shows morphometric differences between Latin America and Brazilian isolates. In this work, it was shown that there is no size difference among isolates found in Brazil and Goiás. The results of disinfectants efficacy evaluation to eliminate this agent have shown that many disinfectants commonly found in the market may be used. This information may be applied directly in farms to help control infection focus and contribute in reducing the disease impact in Brazilian milk production. / Trypanosoma vivax (Ziemann, 1905) é o protozoário responsável por causar a tripanossomíase em bovinos, doença que atualmente expressa caráter epidêmico no Brasil e, no estado de Goiás, foi identificada pela primeira vez em 2015. Por ocasionar aborto, letalidade e grande queda de produção de leite, a tripanossomíase pode gerar grandes prejuízos ao produtor, principalmente os que trabalham com bovinocultura de leite. Apesar disto, ainda não há muitas informações disponíveis sobre este protozoário no Brasil. Considerando a necessidade de conhecer mais as características dos isolados presentes no país a fim de avaliar sua prevalência real, impacto na economia e, principalmente, desenvolvimento de programas de controle, este trabalho se propôs avaliar a morfometria do parasito em microscopia eletrônica de varredura e a eficácia de diferentes desinfetantes na sua eliminação. A microscopia eletrônica de varredura é uma técnica de alta resolução empregada para analisar a estrutura externa do parasito, que apresenta diferenças morfométricas entre os isolados na América Latina e no Brasil. Neste trabalho, ficou evidenciado que não há diferença de tamanho entre os isolados encontrados no Brasil e em Goiás. Os resultados da avaliação da eficácia dos desinfetantes em eliminar o agente demonstram que diversos desinfetantes comumente encontrados no mercado podem ser empregados. Estas informações podem ser aplicadas diretamente em propriedades para auxiliar no controle de surtos e contribuir na redução dos impactos causados nos rebanhos bovinos de leite brasileiros.

Submitted by JÚLIO HEBER SILVA (julioheber@yahoo.com.br) on 2017-03-15T19:00:03Z No. of bitstreams: 2 Tese - Denizard André de Abreu Delfino - 2016.pdf: 1856323 bytes, checksum: cf3dc822049bf13dcac10982b702dfc6 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-03-20T12:43:06Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Denizard André de Abreu Delfino - 2016.pdf: 1856323 bytes, checksum: cf3dc822049bf13dcac10982b702dfc6 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-20T12:43:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Denizard André de Abreu Delfino - 2016.pdf: 1856323 bytes, checksum: cf3dc822049bf13dcac10982b702dfc6 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-10-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The survey was conducted in order to investigate the presence of Salmonella sp. in swabs of cloaca and duck eggs coming from 38 informal breeding sites and 38 markets, and to detect anti-Salmonella Gallinarum and Pullorum antibodies in blood serum of these birds, in the State of Goiás and the Federal Distrito. To determine the productive and sanitary profile of the farms where ducks are raised, we applied 38 questionnaires consisting of 12 closed questions. Through the information obtained by the responses to the questionnaires during the visits, we observed that the farms of the studied regions did not present adequate productive and sanitary management. We collected 324 whole blood samples were used in the test Serological Rapid Agglutination plate (SAR) to detect anti-Salmonella pullorum antibodies. In this test 117/324 (36.1%) blood sera were seropositive. We harvested 324 cloacal swabs from ducks and 912 eggs from 38 farms and 38 markets. The samples were subdivided according to the structure in pools, producing 228 eggshell samples, 228 albumen samples and 228 yolk samples, totaling 684 samples. Cloacal swabs and eggs were analyzed by conventional bacteriology for Salmonella sp. We obtained 38 isolates, 36 from eggs in 36/684 (5.3%), and the serovars were Salmonella Heidelberg, Schwarzengrund, antigenic form O: 9.12, and Salmonella typhimurium, and two isolates from cloaca swabs 02/324 (0.62%). The identified serovars were Salmonella Typhimurium and Hadar. The 36 isolates from eggs and two from cloacal swabs were submitted to susceptibility test to 15 antimicrobials, from which we obtained the following distribution of resistance: 29/38 (76.3%) to sulfonomide, 14/38 (36, 9%) to enroflaxacin, 10/38 (26.3%) to amoxicillin, 7/38 (18.4%) to ampicillin, 7/38 (18.4%) to gentamicin, 6/38 (15.8%) to cotrimoxazole, 6/38 (15.8%) to cephalothin, 6/38 (15.8%) to trimethoprim, 03/38 (7.9%) to ceftiofur, 05/38 (13.1 %) to neomycin, 5/38 (13.1%) to tetracycline, 5/38 (13.1%) to fosfomycin, 3/38 (7.9%) to chloramphenicol, 2/38 (5.3%) to ciprofloxacin, and 0/38 (0%) to florfenicol. The percentage distribution of the isolated serovars was: 32/38 (84.2%) Salmonella Schwarzengrund, 3/38 (7.9%) Salmonella Typhimurium, 1/38 (2.6%) the antigen form: 9.12, 1/38 (2.6%) Salmonella Heidelberg, and 1/38 (2.6%) Salmonella Hadar. The 36 isolates of Salmonella were also submitted to proof of real-time polymerase chain reaction (real-time PCR) on which the following genes were detected: 33/35 (94.3%) for rfbJ, 07/35 (20%) for Int1 gene, and 06/35 (17,1%) for Sul1 gene. Therefore, we verified circulation of Salmonella in ducks and their eggs in informal rearing farms in the state of Goiás and in the Federal District, we also confirmed the antimicrobial resistance and detected resistance genes. This information is important for determining risk for both poultry and public health. / A pesquisa foi feita com o objetivo de investigar a presença de Salmonella sp. em suabes de cloaca e nos ovos de patas oriundos de 38 criações informais e de 38 feiras livres, além de detectar anticorpos anti-Samonella Gallinarum e Pullorum em soro sanguíneo destas aves, no Estado de Goiás e no Distrito Federal. Para determinação do perfil produtivo e sanitário destas propriedades que criavam patos foram aplicados 38 questionários compostos por 12 perguntas fechadas. Mediante as informações obtidas pelas respostas dos questionários aplicados durante as visitas, foi observado que as propriedades das regiões estudadas não apresentavam manejo produtivo e sanitário adequados. Foram colhidas 324 amostras de sangue total que foram utilizadas na prova Sorológica de Aglutinação Rápida em Placa (SAR), para detecção de anticorpos anti-Salmonella Pullorum e Gallinarum. Nesta prova 117/324 (36,1%) dos soros sanguíneos foram sororreagentes. Foram colhidas 324 suabes cloacais de patos e 912 ovos em 38 propriedades e 38 feiras, que foram subdivididos de acordo com a estrutura em pool, dando origem a 228 amostras de casca, 228 de albúmen e 228 de gemas, totalizando 684 amostras. Os suabes cloacais e ovos foram analisados por bacteriologia convencional para pesquisa de Salmonella sp. Foram obtidos 38 isolados, sendo 36 em ovos 36/684 (5,3%), onde os sorovares foram Salmonella Heidelberg, Schwarzengrund, forma antigênica O:9,12 e Salmonella Typhimurium e dois isolados de suabes de cloaca 02/324 (0,62%), sendo identificados os sorovares Salmonella Typhimurium e Hadar. A distribuição percentual dos sorovares isolados foi: 32/38 (84,2%) Salmonella Schwarzengrund, 3/38 (7,9%) Salmonella Typhimurium, 1/38 (2,6%) a forma antigênica O:9,12, 1/38 (2,6%) Salmonella Heidelberg e 1/38 (2,6%) Salmonella Hadar. Os 36 isolados de ovos e os dois de suabes cloacais foram submetidos aos testes de suscetibilidade a 15 antimicrobianos, nos quais se obteve a seguinte distribuição de resistência: 29/38 (76,3%,) às sulfonamidas, 14/38 (36,9%) à enroflaxacina, 10/38 (26,3%) à amoxicilina, 7/38 (18,4%) à ampicilina, 7/38 (18,4%) à gentamicina, 6/38 (15,8%) ao cotrimoxazol, 6/38 (15,8%) à cefalotina, 6/38 (15,8%) ao trimetoprim, 03/38 (7,9%) ao ceftiofur, 05/38 (13,1%) a neomicina, 5/38 (13,1%) à tetraciclina, 5/38 (13,1%) à fosfomicina, 3/38 (7,9%) ao cloranfenicol, 2/38 (5,3%) à ciprofloxacina e 0/38 (0%) ao florfenicol. Os 36 isolados de Salmonella foram ainda submetidos a prova de PCR em tempo real, onde foram detectados os seguintes genes: rfbJ 33/35 (94,3%), o gene Int1 foi de 07/35 (20%) e o gene Sul1 foi de 06/35 (17,1%). Portanto, foi detectada a circulação de Salmonella em patos e seus ovos nas criações informais e feiras no Estado de Goiás e no Distrito Federal, assim como a confirmação de resistência aos antimicrobianos e detecção de genes de resistência. Estas informações são importantes para determinação de risco, tanto para sanidade avícola quanto para saúde pública.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2017-03-23T20:39:38Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Denize Silva Brazil - 2017.pdf: 5061634 bytes, checksum: 34802ff0a8ca3775ced77fb220378cf1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-03-24T11:03:03Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Denize Silva Brazil - 2017.pdf: 5061634 bytes, checksum: 34802ff0a8ca3775ced77fb220378cf1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-24T11:03:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Denize Silva Brazil - 2017.pdf: 5061634 bytes, checksum: 34802ff0a8ca3775ced77fb220378cf1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / Leptospirosis is an important zoonosis and it causes economic losses due to abortion, mastitis, infertility, and drop in milk production in affected herds. The disease may be disseminated through urine, water, contaminated soils, venereal and transplacental routes, and there is a risk of transmission by in vitro embryo manipulation. Thus, with the advancement of reproductive biotechnology, the concern with the sanity of animals or herds in the face of any disease also transmitted by semen or embryos has increased. As an alternative for the inactivation of infectious agents, the technique of photodynamic inactivation (PDI) has became prominent as it does not cause natural microbial resistance. The method consists in the combination of a photosensitizer (PS), light, and molecular oxygen, resulting in the formation of reactive oxygen species (ROS) that at high levels induce cell death. In this study, in order to inactivate in vitro Leptospira interrogans, six PSs were tested at a concentration of 10 μM and at the irradiation times of 30 and or 60 min. The TMPP and ZnTMPP porphyrins were efficient, the first one in the 30 min irradiation, the second one in both irradiation times. Methylene Blue (MB) demonstrated satisfactory inactivation when irradiated for 60 min. Hematoporphyrin and phthalocyanines did not demonstrate efficiency in the inactivation of leptospires in the experimental parameters used. When evaluating the action of ZnTMPP and MB on oocyte viability, both demonstrated to be innocuous to cumulus-oocyte (CCOs) complexes matured in the 30 min, which makes them potential candidates for the disinfection of biological materials or by-products of animal origin in place of antibiotics, known to cause bacterial resistance. / A leptospirose é uma importante zoonose e traz consideráveis perdas econômicas em decorrência de abortamentos, mastites, infertilidade e queda da produção de leite em rebanhos acometidos. A doença pode ser disseminada pela urina, água, solos contaminados, via venérea, transplacentária e há risco de transmissão pela manipulação de embriões in vitro. Dessa forma, com o avanço das biotécnicas reprodutivas, a preocupação com a sanidade de animais ou rebanhos frente a qualquer enfermidade também transmitida por sêmen ou embriões tem aumentado. Como alternativa para a inativação de agentes infecciosos, a técnica de inativação fotodinâmica (PDI) vem ganhando destaque por não causar resistência microbiana natural. O método consiste na combinação de um fotossensibilizador (PS), luz e oxigênio molecular, resultando na formação de espécies reativas de oxigênio (ROS) que em altos níveis induzem a morte celular. Neste trabalho, com o objetivo de inativar a Leptospira interrogans in vitro, seis PSs foram testados na concentração de 10 μM e em tempos de irradiações de 30 e ou 60 min. As Porfirinas TMPP e ZnTMPP mostraram-se eficientes, a primeira na irradiação de 30 min, a segunda em ambos os tempos de irradiação testados. O Azul de Metileno (MB) demonstrou uma inativação satisfatória quando irradiado por 60 min. Hematoporfirina e Ftalocianinas testadas não demostraram eficiência na inativação das leptospiras nos parâmetros experimentais analisados. Ao avaliar a ação da ZnTMPP e do MB sobre a viabilidade dos oócitos, ambos demonstraram ser inócuos aos complexos cumulusovócitos (CCO’s) maturados no tempo de 30 min, o que os torna potenciais candidatos à utilização para a desinfecção de materiais biológicos ou subprodutos de origem animal em substituição aos antibióticos, conhecidamente causadores de resistência bacteriana.

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2017-05-11T10:57:03Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Luanna Kim Pires Guimarães - 2017.pdf: 4135277 bytes, checksum: 65b2100ad3a63c9bdc9024c8d7204741 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-05-11T12:09:08Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Luanna Kim Pires Guimarães - 2017.pdf: 4135277 bytes, checksum: 65b2100ad3a63c9bdc9024c8d7204741 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-11T12:09:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Luanna Kim Pires Guimarães - 2017.pdf: 4135277 bytes, checksum: 65b2100ad3a63c9bdc9024c8d7204741 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-03-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The seroprevalence in bovine was determined the risk factors associated with infection by Leptospira spp. In herds of the Kalunga Historical Site and Cultural Patrimony located in the municipalities of Cavalcante, Monte Alegre de Goiás and Teresina de Goiás, State of Goiás, in the area of Cerrado native and few areas with pastures formed. Blood samples were collected from 4,860 cattle of different races, genre and age groups, from 136 herds predominantly cut, under extensive management. An epidemiological questionnaire was used to identify the risk factors associated with the infection. The determination of anti-Leptospira antibodies was performed by the microscopic serum agglutination technique. The prevalence of positive cattle was 44.69%, with Serjoe serogroups (Wolffii and Hardjoprajtino serovars), Tarassovi serovar Tarassovi and Grippothyphosa serovar Grippotyphosa being the most frequent. Leptospira spp. was identified as a risk factor for infection. (OR 1.68 - 2.26), gender (OR 0.47), age (OR 2.91 - 2.96), presence of dog in the property (OR 1.32), contact with wild animals [Crabeating raccoon (OR 1.17), rodents (OR 1.11) and collared peccary (OR 1.09)], feeding (OR 1.3 - 2.56), mean annual temperature (OR 1.36), standard deviation of the seasonal (annual) temperature of the property (OR 1.76), altitude (OR 1.06) and rainy season harvest (OR 1.11) and as a protection factor the presence of cat in the property (OR 1.11). Continuing education in health and hygienic-sanitary measures should be implemented to minimize the effects of the risk factors identified in this study and reduce the prevalence of Leptospira spp. in these herds. / Foi determinada a soroprevalência em bovinos e os fatores de risco associados à infecção por Leptospira spp. em rebanhos do Sítio Histórico e Patrimônio Cultural Kalunga, localizado nos municípios de Cavalcante, Monte Alegre de Goiás e Teresina de Goiás, estado de Goiás, em área de Cerrado nativo e poucas áreas com pastagens formadas. Foram colhidas amostras sanguíneas de 4.860 bovinos de diferentes raças, faixas etárias e sexo, oriundos de 136 rebanhos predominantemente de corte, sob manejo extensivo. Foi aplicado questionário epidemiológico para identificar os fatores de risco associados à infecção. A determinação de anticorpos anti-Leptospira foi realizada pela técnica de soroaglutinação microscópica. A prevalência de bovinos positivos foi de 44,69%, sendo os sorogrupos Serjoe (sorovares Wolffii e Hardjoprajtino), Tarassovi sorovar Tarassovi e Grippothyphosa sorovar Grippotyphosa os mais frequentes. Foram identificados como fatores de risco para infecção por Leptospira spp. as variáveis região (OR 1,68 – 2,26), sexo (OR 0,47), idade (OR 2,91 – 2,96), presença de cão na propriedade (OR 1,32), contato com animais silvestres [mão pelada (OR 1,17), roedores (OR 1,11) e cateto (OR 1,09)], alimentação (OR 1,3 – 2,56), temperatura média anual (OR 1,36), desvio padrão da temperatura sazonal (anual) da propriedade (OR 1,76), altitude (OR 1,06) e colheita em período chuvoso (OR 1,11) e como fator de proteção a presença de gato na propriedade (OR 1,11). A educação continuada em saúde e medidas higiênico-sanitárias devem ser implementadas para minimizar os efeitos dos fatores de risco identificados neste estudo e reduzir a prevalência da infecção por Leptospira spp. nestes rebanhos.

Submitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-03-05T13:24:15Z No. of bitstreams: 2 Tese - Eliete Souza Santana - 2011.pdf: 2587838 bytes, checksum: d103db38e37de5827898dc565d152e78 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-03-05T16:23:32Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Eliete Souza Santana - 2011.pdf: 2587838 bytes, checksum: d103db38e37de5827898dc565d152e78 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T16:23:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Eliete Souza Santana - 2011.pdf: 2587838 bytes, checksum: d103db38e37de5827898dc565d152e78 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2011-09-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Three experiments were performed aiming to elucidate aspects concerning the pathogenesis, clinical, pathological and immunological changes in turkeys inoculated with Salmonella Enteritidis, as well as the control and performace variables, with the use of lactulose. Experiment 1 consisted of three treatments and a control group. A second group inoculated with 6.0x102 CFU/mL and a third one inoculated with 7.0x105 CFU/mL of Salmonella Enteritidis. Within 1, 3, 6, 12, 18 and 24, and three, four, 38 and 49 days post-inoculation, two birds per treatment were sacrificed and vitelline sacs, spleen, bursa of Fabricius and ceca were coleted for Salmonella research, lymphocytes levels, and immunohistochemistry. The pathogen was isolated in organs studied in both tests and the lymphocytes levels decreased. Was observed that the dose influences the penetration, dissemination, and persistence of the pathogen elimination in turkeys. In Experiment 2, 160 turkeys were distributed into four treatments within 6.0x102CFU/mL, 7.0x105 CFU/mL, 8.0x109 CFU/mL of Salmonella Enteritidis and a control group. With 1, 3, 6, 12, 18 and 24 and three, four, 38 and 49 days were sampled blood, liver, spleen and bursa of Fabricius of two birds per treatment for electrophoretic, bacteriological and histopathological analysis, and also lymphocyte levels. There were differences in total serum protein data, as well as in bacterial isolation and tissue changes from 6 hours to 4 days before. The decrease of lymphocytes levels were registered from 3 hours post-inoculation. High mortality levels were observed in all groups in the first week, of which the main clinical and histopathological changes, as well the mortality levels were more evident in the group that received the highest dose. Was observed that serum proteins values, liver histopathological lesions, and decrease of lymphocytes levels occurs primarily in the first days post-infection. Experiment 3 consisted of 280 turkeys distributed in four treatments: placebo, control of lactulose; inoculated with 7.0x105 UFC/mL of Salmonella Enteritidis and inoculated with 7.0x105 UFC/mL of Salmonella Enteritidis and treated with lactulose. At seven, 21, 42 and 60 days were performed analisis of accomplishment. One bird of each quota was sacrificed and collected duodenum and jejunum from each for histomorphometric analysis, and ceca and inglúvios for enumerations of Enterobacteriaceae, Lactobacillus, Salmonella, pH measurements and biometric examination of intestines. Still, were collected liver, spleen, bursa of Fabricius and the gastrointestinal tract for bacteriological, histopathological, lymphocyte levels, and biometric examination. Were observed a lower weight gain in the group that received only the pathogen and increased only in patients that receiving lactulose. Were observed a higher correlation villous: crypt in the duodenum and jejunum of lactulose and placebo groups at seven and 21 days. Higher levels of UFC of Lactobacillus and Enterobacteriaceae were observed in the groups that receivied lactulose. Salmonella Enteritidis infections determine histopatological changes, decrease of lymphocyte levels and mortality. Lactulose increases beneficial bacteria, reduces the colonization of Salmonella, Promotes intestinal development and improved the animal performance, minimizes lymphocyte and tissue changes, reducing mortality and carrier state. / Foram desenvolvidos três experimentos com os objetivos de elucidar aspectos que envolvem a patogênese, clínica, alterações anatomopatológicas e imunológicas, bem como o controle com uso da lactulose e nas variáveis de desempenho de perus inoculados experimentalmente com Salmonella Enteritidis. Experimento 1 foi constituido de três tratamentos, sendo um grupo controle, um grupo inoculado com 6,0x102 UFC/mL e o terceiro inoculado com 7,0x105 UFC/mL de Salmonella Enteritidis. Com 1, 3, 6, 12, 18 e 24h e com três, quatro, 38 e 49 dias pós-inoculação, duas aves por tratamento foram sacrificadas e coletados sacos vitelínicos, baços, bursas de Fabricius e cecos, para pesquisa da Salmonella, contagem de linfócitos e imunoistoquímica. O patógeno foi identificado nos órgãos estudados em ambos os testes utilizados e o número de linfócitos foi reduzido. Em perus observou-se que a dose influencia a penetração, disseminação, eliminação e persistência do patógeno nos perus. No experimento 2 foram utilizados 160 perus, distribuidos em quatro tratamentos que receberam 6,0x102UFC/mL, 7,0x105 UFC/mL, 8,0x109 UFC/mL de Salmonella Enteritidis e um grupo controle. Com 1, 3, 6, 12, 18 e 24h e aos três, quatro, 38 e 49 dias foram coletados sangue, fígado, baço e bursa de Fabricius de duas aves por tratamento para análises eletroforéticas, bacteriológicas e histopatológicas e contagem de linfócitos, respectivamente. Houve diferença nos dados de proteínas séricas totais, assim como no isolamento bacteriano e nas alterações teciduais a partir de 6h até quatro dias. As depleções de linfócitos foram registradas a partir de 3h pós-inoculação. A mortalidade observada foi alta em todos os grupos na primeira semana, sendo que as principais alterações clínicas, histopatológicas e mortalidade foram mais evidentes no grupo que recebeu a maior dose. Verificou-se que os valores de proteínas séricas, lesões histopatológicas no fígado, bem como depleção de linfócitos ocorre principalmente nos primeiros dias pós-infecção. O Experimento 3 constituiu-se de 280 perus distribuídos em quatro tratamentos: placebo; controle da lactulose; inoculados com 7,0x105 UFC/mL e inoculados com 7,0x105 UFC/mL de Salmonella Enteritidis e tratados com a lactulose. Aos sete, 21, 42 e 60 dias foram realizadas análises de desempenho e uma ave de cada parcela foi sacrificada para coleta de duodenos e jejunos para análises histomorfométricas, inglúvios e cecos para enumerações de Enterobacteriaceae, Lactobacillus e Salmonella, aferições de pH e biometria de intestinos delgados e grossos. Ainda, foram coletados o fígado, baço, bursa de Fabricius e trato gastrintestinal, para análises bacteriológicas, histopatológicas, contagem de linfócitos, e exames biométricos. Observou-se, menor ganho de peso no grupo que recebeu somente o patógeno e maior no que recebeu somente a lactulose. Verificaram-se maiores relações vilos: criptas nos duodenos e jejunos dos grupos placebo e da lactulose aos sete e aos 21 dias. Maiores quantidades de unidades formadoras de colônias de Enterobacteriaceae e Lactobacillus foram observadas nos grupos que receberam a lactulose. Salmonella Enteritidis determina alterações histopatológicas e depleções linfocitárias e mortalidade. A lactulose aumenta bactérias benéficas, reduz a colonização de Salmonella, promove maior desenvolvimento intestinal e melhor desempenho, minimiza alterações teciduais e linfocitárias, reduzindo a mortalidade e o estado de portador.

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2016-09-13T13:06:21Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_ana_recuero.pdf: 1673512 bytes, checksum: dd12763ac0bcd688aaa90dfe0ae42705 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2016-09-13T14:10:53Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_ana_recuero.pdf: 1673512 bytes, checksum: dd12763ac0bcd688aaa90dfe0ae42705 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-13T14:10:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_ana_recuero.pdf: 1673512 bytes, checksum: dd12763ac0bcd688aaa90dfe0ae42705 (MD5) Previous issue date: 2014-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / O objetivo deste trabalho foi descrever reações sorológicas falso-positivas (FPSR) em um estudo com 989 bovinos sorologicamente negativos, provenientes de propriedades com e sem história de aborto por brucella spp, bem como avaliar as ligações entre alguns fatores individuais ou de rebanho e a ocorrência destes FPSR. Usou-se o teste do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) em todos os animais e os bovinos reagentes ao AAT na primeira coleta de sangue, se confirmados pelos testes 2 Mercaptoetanol (2ME) e Fluorescência da Luz Polarizada (FPA) foram encaminhados ao abate sanitário. Os não reagentes no dia zero foram inoculados com Levamisole (782) e dois grupos controles (207) com solução fisiológica (100) e com Ivermectina (107). Os dois grupos controles foram negativos em todos os testes. O grupo Levamisole apresentou uma incidência global (IT) de 1,41% de FPSR. O risco relativo (RR) de FPSR na primavera foi 23,42 vezes mais provável do que nas outras estações. A Fração Etiológica do Risco (FER) mostrou que 95,73% das FPSR ocorreram pela exposição ao levamisole mais o efeito primavera. A incidência de animais FPSR com Condição Corporal ruim (CCr) foi 10,34% e nos com CC boa (CCb) foi 1.06%. O RR de FPSR com CCr foi 9,74 vezes mais provável do que nos CCb. A FER mostrou que 89,73% dos FPSR ocorreram pela exposição ao levamisole mais a CCr. A utilização do Levamisole como imunoestimulante e anti-helmíntico permanece recomendada, entretanto, deve ser observado um período de carência de no mínimo 15 dias entre aplicação do medicamento e realização do diagnóstico para brucelose bovina. / The aim of this study was to describe false-positive serological reactions (FPSR) in a study of 989 serologically negative cattle from farms with and without a history of abortion Brucella spp, as well as evaluating the links between some individual or herd factors and the occurrence these FPSR. We use the test Buffered Acidified Antigen (AAT) in all animals and reagents in the AAT first blood sample, if confirmed by tests 2 Mercaptoethanol (2ME) and Fluorescence Polarization Assay (FPA) were referred to stamping. Non reagents were inoculated on day zero with Levamisole (782) and two control groups (207) with saline (100) and Ivermectin (107). The two control groups were negative in all tests. The levamisole group had an overall incidence (IT) of 1.41 % of FPSR. The Relative Risk (RR) of FPSR spring was 23.42 times more likely than in other seasons. Fraction Etiologically Risk (FER) showed that 95.73 % of FPSR occurred by exposure to levamisole plus the spring effect. The incidence of animals with FPSR with Body Condition (CCr) poor was 10.34 % and with good CC (CCb) was 6.1 %. The RR of FPSR with CCr was 9.74 times more likely than in CCb. The FER showed that 89.73 % of FPSR occurred by exposure to levamisole more CCr. The use of levamisole as an immunostimulant and anthelmintic remains recommended, however, a grace period of at least 15 days must be observed between application of the product and make the diagnosis for bovine brucellosis.

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2014-01-28T17:55:36Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Dissertacao_MastiteBovinaRebanhos.pdf: 573848 bytes, checksum: b413b24293523fe5703bf9a397087d4d (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2014-02-03T18:05:51Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Dissertacao_MastiteBovinaRebanhos.pdf: 573848 bytes, checksum: b413b24293523fe5703bf9a397087d4d (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-03T18:05:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Dissertacao_MastiteBovinaRebanhos.pdf: 573848 bytes, checksum: b413b24293523fe5703bf9a397087d4d (MD5) Previous issue date: 2008 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A mastite em sua forma subclinica é a responsável pelas maiores perdas de produção leiteira representando elevados prejuízos econômicos. Com o objetivo de estudar a etiologia da mastite subclinica bovina no município de Parauapebas-Pa, foram submetidas ao California Mastitis test. - CMT 174 (8,4%) vacas em sua maioria mestiças, aparentemente saudáveis de 15 propriedades leiteiras localizadas no referido município, situado na Mesorregião Sudeste do estado do Pará. Observou-se que 84 (48,33%) animais apresentaram resultados de +,++,+++ ao CMT. O leite de cada teto que reagiram ao CMT num total de 178 amostras foi analisado bacteriologicamente visando o isolamento e a identificação dos microorganismos, foram analisadas as características macroscópicas, microscópicas e bioquímicas das culturas isoladas. Do total de amostras foram isoladas 208 cepas de agentes microbianos em culturas puras ou em associações sendo todos provenientes de leite mamitico, das quais 141(67,79%) cepas eram cocos Gram positivos- S.aureus (29%) e S.epidermidis (19,14%) e 67 (32,21%) eram enterobactérias. Entre as enterobacterias destacaram-se Pseudomonas sp.com 12 (17,91%) cepas esisoladas, Citrobacter sp. com 12( 17,95%) cepas e Shigella sp. com 10(14,92%), Outras 15 cepas de enterobacterias que não foram identificadas. O isolamento dos agentes apresentou variação significativa, pois se consideraram as observações quanto ao manejo de ordenha dos animais estudados, as condições higiênicas sanitárias da obtenção do leite através da aplicação de um questionário visando a observação das seguintes variáveis: sistema de criação, manejo adotado na propriedade, higiene e nível de exposição, infecciosidade dos agentes isolados o que reafirma a complexidade da infecção na área de estudo e seu aspecto multifatorial, necessitando o investimento por parte dos órgãos fiscalizadores de melhores praticas de higiene e obtenção na atividade de exploração de leite. / The mastite in its subclinica form is the responsible one for the biggest losses of milk production representing raised economic damages. With the objective to study the etiology of the bovine subclinica mastite in the city of Parauapebas-Pará, they had been submitted to California Mastitis test. - CMT 174 (8.4%) cows in its majority crossbred, pparently healthful of 15 located milk properties in the related city, situated in the Southeastern Mesorregião of the state of Pará. ++ were observed that 84 (48.33%) animal ones had presented resulted of +, +++ to the CMT. The milk of each ceiling that had reacted to the CMT in a total of 178 samples was analyzed bacteriologically aiming at the isolation and the identification of the microorganisms, had been analyzed the macrocospic, microscopical characteristics and biochemists of the isolated cultures. Of the total of samples 208 had been isolated cepas of microbianos agents in pure cultures or in associations being all proceeding ones from mamitico milk, of which 141 (67.79%) cepas was positive coconuts Gram S.aureus (29%) and S.epidermidis (19.14%) and 67 (32.21%) were enterobactérias. Among the enterobacterias they had been distinguished Pseudomonas sp.com 12 (17.91%) cepas esisoladas, Citrobacter sp. with 12 (17.95%) cepas and Shigella sp. with 10 (14.92%), Others 15 cepas of enterobacterias that had not been identified. The isolation of the agents presented significant variation, therefore the comments had been considered how much to the handling of it milks of the studied animals, the sanitary hygienical conditions of the attainment of milk through the application of a questionnaire aiming at the comment of the following 0 variable: creation system, handling adopted in the property, hygiene and level of exposition, infecciosidade of the isolated agents what it reaffirms the complexity of the infection in the area of study and its multifactorial aspect, needing the investment on the part the agencies fiscalizadores of better you practise of hygiene and attainment in the activity of milk exploration.