O câncer bucal representa um problema de saúde pública mundial classificado como o sexto tipo de câncer mais comum. Apresenta índices de mortalidade em cinco anos preocupantes nas últimas décadas. Estima-se que aproximadamente 15% dos canceres bucais tenham causa desconhecida. Estudos publicados recentemente têm sugerido que a doença periodontal pode representar um risco aumentado para o desenvolvimento de câncer bucal. Entretanto, o impacto da doença periodontal sobre a patogênese do câncer bucal in vivo é quase inexistente na literatura. Esta tese avaliou, através de dois artigos, a relação entre a doença periodontal e o câncer bucal. O primeiro artigo da presente tese trata de uma revisão de estudos epidemiológicos sobre a associação da doença periodontal e câncer bucal, assim como estudos atuais a respeito de mecanismos biológicos. Os estudos epidemiológicos na sua maioria apontam a periodontite como um fator de risco independente para o câncer bucal após ajustes estatísticos para diferentes fatores confudindores, como o fumo. Os estudos biológicos tem na sua grande maioria a Porphyromonas gingivalis como agente etiológico para a doença periodontal e estaria envolvida em várias etapas de carcinogênese bucal como a proliferação, migração e invasão celular, assim como a metástase e resistência a agente quimioterapêuticos em estudos in vitro e in vivo a periodontite. O segundo artigo da presente tese teve como objetivo avaliar o efeito da periodontite induzida por meio de ligadura sobre a carcinogênese bucal através da exposição ao carcinógeno 4-Nitroquinolina 1-Óxido (4NQO) em ratos Wistar. Os resultados mostram o aumento da incidência de carcinoma espinocelular na língua de ratos quando na presença de periodontite previa. Além disso, houve um maior tamanho tumoral e uma menor diferenciação celular através da expressão de citoqueratina 10 nas línguas dos animais. Os resultados desta tese vêm ao encontro do que se encontra na literatura reforçando que a presença da doença periodontal é um importante modificador no desenvolvimento de câncer bucal. / Oral cancer is a worldwide public health problem rated as the sixth most common cancer. Its survival rates have remained worrisome in the last decades. It is estimated that approximately 15% of oral cancer have an unknown etiology. Recently published studies have suggested that periodontal disease may represent an increased risk for oral cancer development. However, the impact of periodontal disease on oral carcinogenesis in vivo is almost non-existent. The current thesis evaluated, through two articles, the relationship between periodontal disease and oral cancer. The first article was a review of epidemiological studies about the association of periodontal disease and oral cancer, as well as current studies about biologic mechanisms. Periodontal disease and oral cancer share many common established risk factors, but after adjusting for different confounding factors, periodontal disease seems to be an independent risk for oral cancer in most of epidemiologies studies. Studies focusing in biological mechanisms of the relationship between both diseases mainly focus in P.gingivalis. P. gingivalis seems to be involved with various steps of oral carcinogenesis as proliferation, migration invasion, aggressiveness and also metastasis and resistance to anti-cancer agents in vitro and in vivo studies. The second article of the current thesis aimed to evaluate the effect of induced-periodontitis by ligature on the experimental oral carcinogenesis induced by the chemical 4- nitroquinoline 1-oxide (4NQO) in Wistar rats. The results showed an increased incidence of squamous cell carcinoma in the rats’ tongues when in presence of previous periodontitis. The results of this thesis corroborate what we may find in the literature, reinforcing that the presence of periodontal disease act as an important modifier to oral cancer.

A descondensação da cromatina exerce um papel central nas diversas etapas do processo de carcinogênese abrindo o genoma para a ação de fatores de transcrição, exercendo papel na progressão e resistência tumoral. Bromodomínios e proteínas com terminal extra, como o BRD4, são leitores epigenéticos que regulam a expressão gênica e, portanto, também estão envolvidos na patogênese do câncer. O objetivo do presente estudo foi estudar o efeito da inibição do BRD4 no carcinoma espinocelular de cabeça e pescoço (CECP). Para esse propósito, foi utilizado JQ1, inibidor de BRD4, em concentração de 1uM, nas linhagens de carcinoma de cabeça e pescoço HN6, HN12 e HN13. Foi analisado os níveis de BRD4, H4 acetilada e SIRT1 fosforilado através de reações de imunofluorecência e p16ink4 por imunohistoquímica. Foi realizado western blot para checar os níveis de p53 e p53 acetilado. Ensaio de formação de colônias e câmera de invasão foram realizados para testar o efeito do inibidor na proliferação e invasão celular. Através da citometria de fluxo foi analisado o efeito da apoptose com a marcação de caspase-3 clivada, do ciclo celular através da reação por iodeto de propídio e ainda da população de células tronco tumorais pela análise de ALDH e CD44. Por fim, foi realizado modelo xenográfico subcutâneo para analisar o efeito do JQ1. Os resultados mostraram diminuição significativa da expressão de BRD4 e H4ac após tratamento com JQ1. As linhagens celulares mostraram redução na capacidade de invasão e de formação de colônias quando submetidas ao JQ1. Não foram encontradas diferenças em relação ao número de células caspase-3 clivada positivas. Por outro lado, foi encontrado um maior número de células na fase G1 do ciclo celular após o uso do inibidor estudado. As células tratadas com JQ1 mostraram menor expressão de p-SIRT1 o que levou a uma diminuição da acetilação do p53 e um aumento na expressão de p16ink4. Paralelamente, foi encontrado uma diminuição na população de células positivas para ALDH e CD44. Houve diminuição do crescimento do tumor no modelo xenográfico tratado com JQ1 quando comparado ao veículo. Nos tecidos derivados do ensaio in vivo, houve uma diminuição nos marcadores p16ink4, pSIRT1 além de acúmulo de H2AX. Conclui-se que o uso de JQ1 resulta na disrupção do crescimento do CECP associado a ativação de senescência, indução de dano de DNA além de reduzir a população de células tronco tumorais. Esses novos achados indicam que o BRD4 é um importante modificador epigenético nos CECP sendo um viável alvo terapêutico. / Chromatin descondensation plays a central step in the various stages of the carcinogenesis process opening the genome for transcription factors playing a role in tumor progress and resistance. Bromodomains and extra terminal family, as BRD4, are epigenetics readers that regulate gene expression thus they are also involved in cancer pathogenesis. The objective of this project was studied the effect of BRD4 in head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC). For this purpose, JQ1, a BRD4 inhibitor, was used in 1uM concentration, in HN6, HN12 and HN13 head and neck carcinoma cell lines. The levels of BRD4, acetylates h4 and phosphorylated SIRT1 were analyzed by immunofluorescence and p16ink4 labeling by immunohistochemistry. Western blot was performed to check the levels of p53 and acetylated p53. Colony assay and invasion chamber were performed to test the inhibitory effect on cell proliferation and invasion. The effect of apoptosis with the cleaved caspase-3 labeling, the cell cycle by propidium iodide and of the population of tumor stem cells by the analysis of ALDH and CD44 was analyzed through flow cytometry. Finally, a subcutaneous xerographic model was performed to analyze the effect of JQ1. A significant decrease in the expression of BRD4 and H4ac was found after application of JQ1. The cell lines results showed a reduction in the capacity of invasion and also formation of colonies when submitted to JQ1. No differences were found in relation to the number of cells caspase-3 cleaved positives. On the other hand, a large number of cells were found in G1 arrest of cell cycle after use of the BRD4 inhibitor studied. Cells treated with JQ1 showed lower expression of p-SIRT1 which led to a decrease in p53 acetylation and an increase in p16ink4 expression. In parallel, a decrease of ALDH and CD44 positive cells population was found. A decrease in tumor growth was discovered when treated by JQ1 if compared to the vehicle. In tissues samples derived from the in vivo assay, there was a decrease in p16ink4, pSIRT1 markers in addition to -H2Ax accumulation. In conclusion JQ1 causes HNSSC tumor growth disruption associated a senescence activation, DNA damage and a reduce number of cancer stem cells. These new findings indicate that BRD4 is an important genetic modifier in HNSSC and is a viable therapeutic target.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003Bitstream added on 2014-06-13T19:52:58Z : No. of bitstreams: 1 furuse_cf_me_araca.pdf: 869242 bytes, checksum: e1bb85f92467bae0cdae6660493bcf30 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O avanço técnico-científico da oncologia nas últimas décadas acarretou em aumento da sobrevida dos pacientes portadores de câncer. Com sobrevida maior, os oncologistas começaram a observar o aumento do número de pacientes que apresentavam outras neoplasias. O objetivo deste estudo foi analisar possíveis fatores demográficos, clínicos e terapêuticos em pacientes com primeiro tumor primário de boca e que desenvolveram um segundo tumor primário (stp). Foram analisados 848 prontuários de pacientes admitidos para tratamento no Departamento de Cirurgia de Cabeça e Pescoço do Hospital do Câncer Antônio Cândido Camargo, no período de janeiro de 1984 a dezembro de 1994. Destes, 126 (14,9%) desenvolveram um stp. A principal localização do stp foi trato aerodigestivo superior com 53 casos (58,7%), estando divididos em: boca com 29 casos (23,0%), faringe com 15 (11,9%) e laringe com 9 (7,1%). As conclusões foram: dados demográficos não interferiram no desenvolvimento do stp, a variável sexo interferiu no prognóstico dos pacientes; pacientes com classificação TNM inicial apresentaram maior probabilidade de desenvolver stp; a categoria T interferiu na sobrevida dos pacientes do Grupo Controle e do Grupo STP, enquanto a categoria N interferiu somente na sobrevida dos pacientes do Grupo Controle; a actinoterapia não interferiu no aparecimento de stp; o tipo de tratamento realizado apresentou importância na sobrevida dos pacientes. / Over the last decades, technical-scientific advances of oncology have brought about an increased survival rate for cancer patients. As a result, oncologists have detected an increased number of patients presenting with other neoplasms. The aim of this study was to analyze possible demographic, clinical and therapeutic factors in patients with mouth fpt who developed a spt. Medical charts of 848 patients neoplasm admitted for treatment at the Head and Neck Surgery Department of the “Hospital do Câncer, Antônio Cândido Camargo”, Brazil, from January of 1984 to December, were analysed. Of these, 126 (14,9%) developed a spt. The main location of the spt was upper aerodigestive tract, with 53 cases (58,7%), being divided in: mouth with 29 cases (23,0%), pharynx with 15 (11,9%) and larynx with 9 (7,1%) cases. The conclusions were: demographic data didn’t interfere in the development of the stp, the variable sex interfered in the prognostic of patients; patient with classification TNM initial have larger probability of developing spt; the category T interfered in the patients’ prognostic in the groups Control and SPT, while the category N only interfered in the patients' prognostic in the Group Control; the radiotheray didn't interfere in the spt emergence; the type of accomplished treatment presented importance in the patients' survival, for being directly related to the clinical stadium.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-12-01Bitstream added on 2014-06-13T19:32:21Z : No. of bitstreams: 1 vieira_jb_me_araca.pdf: 907868 bytes, checksum: 4ec71e58f61fc6cb5e07dbb917a33df9 (MD5) / O prontuário odontológico teve no decorrer de vários anos uma rotina de preenchimentos que se adequados para o auxilio ao diagnóstico das enfermidades, muitas vezes são inadequados para os aspectos jurídicos que hoje tanto aumentou nos corredores forenses. Foram avaliados os prontuários dos pacientes com diagnóstico de câncer tratados na Faculdade de Odontologia de Araçatuba – UNESP, no período de janeiro de 1997 a dezembro de 2007 a partir do levantamento dos resultados dos exames histopatológicos no Departamento de Patologia e Propedêutica Clínica. Foram verificadas as presenças de laudos histopatológicos e exames radiográficos bem como os locais e tempo de guarda destes prontuários. O prontuário odontológico é o documento utilizado para o conhecimento, a qualquer tempo, do diagnóstico, tratamentos realizados, prognóstico e intercorrências. Quando estas informações são transferidas para o computador estamos diante do prontuário eletrônico. Esta conduta tem aumentado em instituições como hospitais, autarquias, secretarias do governo que procuram com esta medida ter um maior controle dos procedimentos oferecidos, com a redução de erros, transparência, economia, facilitando a otimização de espaços. Foi realizado o levantamento na legislação vigente no país com o objetivo de apresentar ao cirurgião dentista, centros de atendimento odontológico e faculdades de odontologia quais os cuidados com prontuário convencional e eletrônico dos pacientes atendidos. / The odontological promptuary had a fulfillments rotine for several years that they were adequate to aid the disease diagnosis, and they are inadequate, many times, for the juridical aspects that increased in forensic corridors. The pacients promptuaries with cancer diagnosis treated at Odontology Faculty in Araçatuba – UNESP were evaluated in period from January, 1997 to December 2007 as from the histopathological examinations results surveying at Pathological and Propaedeutic Clinic Department. Histopathological awards presences were verified and the radiographic examinations and places and guard time of theses promptuaries, too. The odontological promptuarys is a document used to the knowledge, in any time, of diagnosis, realized treatments, prognostics and intercurrences. When these in formations are transferred to the computer, we are in front of the electronic promptuary. This management has increased in instituitions like hospitals, autarchy, government secretaries that seek to have a greater procedures control with this measure, with errors reduction, transparency, economics, facilitating the spaces optimization. The actual legislations surveying in country was realized, with the aim to present to the surgeon dentist, odontological assistance centers and to the dentistry faculties which the cares with conventional and electronic promptuary of assisted pacients.

Orientador: Prof. Dr. Cassius Carvalho Torres-Pereira / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia. Defesa: Curitiba, 2016 / Inclui referências : f. 69-79 / Área de concentração / Resumo: A anemia de Fanconi (AF) é uma síndrome genética rara caracterizada por instabilidade cromossômica e dificuldade de reparo do DNA. Pacientes com AF desenvolvem o carcinoma de células escamosas (CCE) na boca mais cedo e com maior frequência que a população em geral, especialmente após o transplante de células tronco hematopoéticas (TCTH). Embora tenha aumentado a evidência de um papel etiológico da microbiota local e o processo de carcinogênese; não existem informações sobre a microbiota bucal de pacientes com AF. O objetivo desse estudo foi explorar a microbiota salivar de 61 pacientes com AF e comparar os resultados com a condição de saúde bucal e fatores de riscos associados ao desenvolvimento do CCE. Depois de responder a um questionário e ser submetido a um exame clínico intrabucal, todos os pacientes passaram por um etapa de coleta de saliva e as amostras foram analisadas utilizando o sequenciamento do gene 16S rRNA (Região Hipervariável :V3-V4 Miseq, Illumina). O perfil microbiano associado aos parâmetros clínicos e dados retirados de prontuário médico foram analisados utilizando modelos lineares. A mediana de idade da amostra estudada foi de 22 anos e a maioria deles haviam sido submetidos ao TCTH (n=53). Os filos bacterianos mais abundantes foram Firmicutes (média da abundância relativa ± desvio padrão(DP)) (42,1% ± 10,1%) e Bacteroidetes (25,4% ± 11,4%). O histórico de doença do enxerto contra o hospedeiro (DECH) bucal (n=27) estava associada com maiores proporções de Firmicutes (43,8% x 38,5%, p = 0,05) quando comparados com os que não apresentaram DECH. Altos níveis de sangramento gengival foram associados com os genêros Prevotella (22,25% x 20%), Streptococcus (19,83% x 17,61%), Porphyromonas (3,63% x 1,42%, p = 0,03), Treponema (1,02% x 0,28%, p = 0,009), Parvimonas (0,28% x 0,07%, p = 0,02) e Dialister (0,27% x 0,10%, p = 0,04). Por fim, pacientes transplantados à mais de 11 anos mostraram níveis mais elevados de Streptococcus (18,4%), Haemophilus (12,7%) e Neisseria (6,8%). Em conclusão, pacientes com AF que apresentavam piores condições de higiene bucal abrigavam maiores proporções de gêneros de bactérias compatíveis com doença periodontal. Foram observadas diferenças microbianas específicas, na presença de longo tempo de transplante, histórico de GVHD e mucosite, bem como, na presença de lesões com potencial de malignidade. Palavras-chave: Anemia de Fanconi. Câncer bucal. Microbiota. Saliva. Bactéria. Sequenciamento de Nucleotídeos de Alto Rendimento. / Abstract: Fanconi anemia (FA) is a rare genetic disease characterized by chromosomal instability and impaired DNA damage repair. FA patients develop oral squamous cell carcinoma (OSCC) earlier and more frequently than the general population, especially after hematopoeitic stem cell transplantation (HSCT). Although evidence of an etiological role of the local microbiome and carcinogenesis has grown, no information exists regarding the oral microbiome of FA patients. The aim of this study was to explore the salivary microbiome of 61 FA patients regarding their oral health status and OSCC risk factors. After answering a questionnaire and receiving oral clinical examination, saliva samples were collected and analyzed using 16rRNA sequencing (V3-V4 hypervariable region, MiSeq, Illumina). The microbial profiles associated with medical and clinical parameters were analyzed using general linear models. Patients were young (mean age = 22 yrs old) and most of them had received HSCT (n=53). The most abundant phyla were Firmicutes (mean relative abundance ± SD) (42.1%±10.1%) and Bacteroidetes (25.4%±11.4%). A history of graft-versus-host disease (GVHD) (n=27) was associated with higher proportions of Firmicutes (43.8% x 38.5%, p=0.05). High levels of gingival bleeding were associated with the genera Prevotella (22.25% x 20%), Streptococcus (19.83% x 17.61%), Porphyromonas (3.63% x 1.42%, p=0.03), Treponema (1.02% x 0.28%, p=0.009), Parvimonas (0.28% x 0.07%, p=0.02) and Dialister (0.27% x 0.10%, p=0.04). Finally, participants transplanted longer than 11 years showed highest levels of Streptococcus (18.4%), Haemophilus (12.7%) and Neisseria (6.8%). In conclusion, FA patients with poor oral hygiene harbored higher proportions of genera of bacteria compatible with gingival disease. Specific microbial differences were observed in the presence of a history of long time since HSCT, history of oral GVHD and mucositis as well when potential malignant oral lesion was present. Keywords: Fanconi anemia. Oral cancer. Microbiome. Saliva. Bacteria. Massively-Parallel Sequencing.

Orientador: Marlus Chorilli / Banca: Maria Vitória Lopes Badra Bentley / Banca: Renata Fonseca Vianna Lopez / Banca: Carlota de Oliveira Rangel Yagui / Banca: Raquel Mantuanelli Scarel Caminaga / Resumo: O câncer bucal é uma doença altamente incidente na população mundial, podendo provocar invalidez, deformidades faciais e morte. O tratamento de escolha é a quimioterapia e radioterapia, que causam vários efeitos adversos como xerostomia, mucosite, perda de cabelo, náusea, dores e vômitos. A administração de moléculas bioativas, como o peptídeo antitumoral CTT1, demonstrou ser um tratamento inovador e eficaz para o câncer bucal. No entanto, peptídeos apresentam baixa biodisponibilidade oral, o que diminui o desempenho clínico do tratamento. Portanto, a sua administração pela via bucal incorporado em sistemas nanoestruturados mucoadesivos precursores de cristais líquidos (SPCL) constituídos por álcool cetílico etoxilado 20 e propoxilado 5, ácido oleico e fase aquosa contendo água (FA), dispersão polimérica de quitosana (FQ), dispersão polimérica de polietilenoimina (FP) ou dispersão de quitosana associada a polietilenoimina (FPQ) surge como uma valiosa estratégia, visto que a mucosa bucal apresenta alta permeabilidade e alta irrigação sanguínea, o que pode aumentar a absorção do CTT1. Ademais, o SPCL possibilita a incorporação concomitante do CTT1 com o fotossensibilizante azul de metileno (AM), permitindo a associação da terapia fotodinâmica (TFD) à terapia peptídica antitumoral, o que pode potencializar o tratamento do câncer bucal. O objetivo do trabalho foi avaliar o potencial de SPCL mucoadesivos para administração bucal do peptídeo CTT1 associados à TFD no tratamento do c... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Oral cancer is a highly incident disease in the world population, and can cause disability, facial deformities and death. The treatment of choice is chemotherapy and radiotherapy, which cause various adverse effects like xerostomia, mucositis, hair loss, nausea, aches and vomiting. The administration of bioactive molecules, such as the antitumor peptide CTT1, has proven to be an innovative and effective treatment for oral cancer. However, peptides have low oral bioavailability, which decreases the clinical performance of the treatment. Therefore, its administration by the oral route incorporated in liquid crystal precursor (SPCL) mucoadhesive nanostructured systems consisting of ethoxylated ethoxylated 20 and propoxylated cetyl alcohol 5, oleic acid and aqueous phase containing water (FA), polymer dispersion of chitosan (CF), dispersion (FP) or polyethyleneimine-associated chitosan dispersion (FPQ) arises as a valuable strategy, since the buccal mucosa has high permeability and high blood supply, which may increase the uptake of CTT1. In addition, SPCL allows the simultaneous incorporation of CTT1 with the methylene blue photosensitizer (MA), allowing the association of photodynamic therapy (PDT) with antitumor peptide therapy, which may potentiate oral cancer treatment. The objective of this study was to evaluate the potential of mucoadhesive SPCL for buccal administration of the CTT1 peptide, as well as to evaluate the use of PDT using AM as a photosensitizer in oral cancer therapy. SPCL were characterized by polarized light microscopy (MLP), low-angle X-ray scattering (SAXS), in vitro mucoadhesion rheology and texture profile tests, which showed that all formulations acted as SPCL because (FPQ-P) and AM (FPQ-AM) were added to the liquid crystals after the addition of artificial saliva, and FPQ formed a more mucoadhesive and structured liquid crystal... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-06-01Bitstream added on 2014-06-13T19:30:16Z : No. of bitstreams: 1 mazon_rc_me_arafcf.pdf: 520188 bytes, checksum: 4af452f70d4ec4f1806399a4a3c1661c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O mdm2 parece controlar o tráfego da proteína p53 do núcleo-citoplasma enquanto a proteína p27 é um inibidor de CDK que controla a fase G1 para S do ciclo celular. Em contraste, a catepsina B parece induzir um sinal de apoptose independente de caspase na presença do HPV. Entretanto, a influência da infecção pelo HPV na carcinogênese oral e o envolvimento na desregulação das proteínas do ciclo celular não são claras. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a associação entre a expressão de proteínas do ciclo celular, p27, mdm2 e catepsina B e câncer oral na presença do HPV. Cinqüenta e cinco biópsias orais representando lesões benignas (LB), lesões potencialmente malignas (LPM) e lesões malignas (LM). A detecção e tipagem do HPV (6/11,16,18, 31 e 33) foi realizada pela reação da polimerase em cadeia (PCR). A expressão quantitativa de p27, mdm2 e catepsina B foi analisada pela reação imunohistoquímica. Vinte e uma (38%) de 55 lesões orais foram positivas para HPV. O DNA do HPV 6/11 foi encontrado em 6 (33%), HPV 16 em 1(5%) e o HPV 18 em 14 (72%). Não foi encontrado HPV 31 e 33. De 55 biópsias, foi encontrada alta expressão de todas as proteínas: o p27 foi encontrado em 37 (67,2%) lesões, mdm2 em 17 (30,9%) e a catepsina B em 37 (67,2%). Entre lesões orais de HPV positivo, uma superexpressão de p27, mdm2 e catepsina B foi encontrada, respectivamente, em 6 (33%) de 18 lesões benignas, 4 (22%) de 18 lesões potencialmente malignas e 11 (57,9%) de 19 lesões malignas. Adicionalmente, o HPV16/18 (11/58%) foi detectado em lesões malignas com alta expressão de todas as proteínas. Nós concluímos que os tipos de HPVs de alto risco devem estar associados com carcinoma oral, bem como, com a superexpressão de p27, mdm2 e catepsina B. Estes resultados sugerem que os tipos de HPVs de alto risco podem desregular o controle do ciclo celular, contribuindo para a carcinogênese oral. / Mdm2 seems to control p53 nucleus-cytoplasm traffic while p27 is a CDK inhibitor which control G1 to S phase of the cell-cycle. In contrast, cathepsin B is reported in HPVinduced apoptotic signalling caspase-independent. However, the influence of HPV infection in oral carcinogenesis and its involvement to this cell-cycle proteins dysfunction remain still unclear. The purpose of this study was to clarify the association between the expression of cell-cycle proteins, p27, mdm2 and cathepsin B and oral cancer HPV-related. Fifty-five oral biopsies presenting benign oral lesions (BL), potentially malignant lesions (PML) and malignant oral lesions (ML). HPV detection and typing (6/11, 16, 18, 31 and 33) was performed using polymerase chain reaction. p27, mdm2 and cathepsin B quantitative expression were performed by immunohistochemistry. Twenty one (38%) of the 55 oral lesions were positive for HPV, of which HPV6/11 DNA was found in 6 (33%), HPV 16 in 1(5%) e o HPV 18 in 14 (72%). No HPV positivity was found to HPV31 and 33. Of the 55 biopsies, a high expression of all proteins was found: to p27 in 37 (67,2%), mdm2 was observed in 17 (30,9%) slides, and cathepsin B in 37 (67,2%). Among HPV-positive oral lesions, an overexpression for mdm2, p27 and cathepsin B was found, respectively, in 6 (33%) out of 18 BL, 4 (22%) out of 18 PML and 11 (57,9%) out of 19 ML. In addition, HPV16/18 (11/58%) was detected in OSSC with high expression of all proteins. We conclude that high-risk HPV types might be associated with oral carcinoma, as well as, with the overexpression of mdm2, p27 and cathepsin B. These results suggest that high-risk HPV types might deregulate cell-cycle control, contribuiting to oral carcinogenesis.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:06:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000399864-Texto+Completo-0.pdf: 2357842 bytes, checksum: 33aacb0348512c8221c086f9eb4b8def (MD5) Previous issue date: 2008 / Presence of cervical metastases is the most important prognostic factor in squamous cell carcinoma of the oral cavity (OSCC). Recently, other clinical and molecular factors have been sought in order to improve prognostic capabilities in this disease. The aim the present study is to evaluate the impact of tissue factor (TF) expression and microvessel density (MVD) as predictors of cervical metastases in these neoplasms. Immunohistochemistry techniques were used to assess the expression of TF and to quantify MVD (through expression of CD34) in 53 patients with OSCC who were treated surgically by the author. These findings, as well as other clinical and pathological variables, were correlated with the presence or absence of cervical metastases. TF was expressed in all but three cases; it was highly expressed (more than 50% of tumor cells showing intense expression) in 13 patients (24. 5%), but TF expression was not correlated with the presence of cervical metastases. MVD ranged from four to 47. 8 vessels per high power field (200X) in selected hot spots, with an average of 18. 47 vessels. Increased MVD (more than 20 vessels) was present in 21 patients (39. 6%), but also did not correlate with the presence of positive cervical nodes. Clinical stage, neuronal infiltration and intravascular embolization were the most important predictors of cervical metastases. This study focuses, for the first time, the expression of TF as a prognostic factor in OSCC. Its expression was not a significant predictor of cervical metastases in OSCC. Likewise, MVD was not correlated with cervical metastases. Further studies are needed to determine new molecular markers capable of improving prognostic accuracy of conventional clinical and pathologic prognostic factors in OSCC. / A presença de metástase cervical é o fator prognóstico mais relevante no carcinoma epidermóide de boca. Fatores clínicos e histológicos estão associados com o desenvolvimento da metástase cervical, porém a pesquisa de fatores moleculares está sendo amplamente realizada nos últimos anos. O objetivo deste estudo é avaliar a associação da expressão do fator tecidual e da densidade microvascular como fatores de risco para a presença de metástase cervical nestas neoplasias. A expressão do fator tecidual e a densidade microvascular foram aferidas pela técnica de imunoistoquímica e suas associações com a presença de metástase cervical foram estudadas em 53 pacientes com diagnóstico de carcinoma epidermóide de boca tratados cirurgicamente pelo autor. Características clínicas e histológicas também foram pesquisadas e associadas com a presença de metástase cervical. Somente três casos não expressaram o fator tecidual. A alta expressão do fator tecidual, mais de 50% das células tumorais intensamente coradas, foi encontrada em 13 pacientes (24,5%). A densidade microvascular por paciente variou entre 4 e 47,8 vasos, com uma média de 18,47 vasos. A alta densidade microvascular (mais de 20 vasos por paciente) ocorreu em 21 pacientes (39,6%). O estadiamento clínico, a infiltração neuronal e as embolizações vasculares foram os fatores preditivos de metástase de maior relevância. Este estudo descreve pela primeira vez a expressão do fator tecidual como fator prognóstico de metástase e de óbito no carcinoma epidermóide de boca. Os resultados indicam que a expressão do fator tecidual e a densidade microvascular não estão associados com a presença de metástase cervical. Estudos adicionais são necessários para determinar novos marcadores moleculares capazes de melhorar a acurácia do prognóstico, comparados aos fatores clínicos e histológicos de prognóstico do carcinoma epidermóide de boca já estabelecidos.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:32:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarianneVC_Dissert.pdf: 1419234 bytes, checksum: 19a586a86828d12941eac044033e933c (MD5) Previous issue date: 2010-02-19 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Introdu??o: A displasia epitelial oral (DEO) ? uma les?o potencialmente maligna, cujo diagn?stico e grada??o se baseia na histologia das altera??es arquiteturais e citol?gicas, preconizados pela OMS, que divide a les?o em leve, moderada e severa, o qual ? subjetivo. Maior concord?ncia ? observada no uso do sistema bin?rio (baixo/alto risco), o qual est? relacionado ao risco de transforma??o maligna. As galectinas constituem uma fam?lia de lectinas e est?o envolvidas na tumorig?nese, sendo a -1, -3 e -7 as mais investigadas, devido a express?o alterada em c?nceres orais. Materiais e m?todos: Foi analisada a express?o imuno-histoqu?mica dessas prote?nas em 50 esp?cimes de DEO (21 baixo/ 29 alto risco) e 5 de mucosa oral normal e relacionamos com a presen?a/aus?ncia de marca??o, padr?o de distribui??o, intensidade, localiza??o epitelial (estratifica??o) (1/3 inferior, m?dio e superior), e localiza??o celular (compartimento) (n?cleo, citoplasma e membrana) . Resultados: Dos 29 casos de alto e dos 21 de baixo risco, 21 (72,4%) e 12 (57,1%) foram positivos para a galectina -1, respectivamente. Dessa forma, de 50 casos, 33 foram positivos. O n?cleo e citoplasma foram positivos em 91,7% nas de baixo risco e em 90,5% nas de alto. Todos os casos de mucosa normal foram negativos. Com rela??o a galectina -3, dos 21 casos das DEOs de baixo risco, 12 (57,1%) apresentaram express?o e dos 29 casos das DEOs de alto risco, 15 (51,7%) foram positivos, havendo imunoexpress?o em um total de 27 casos. O padr?o difuso, assim como a fraca intensidade foram os mais freq?entes para os 2 graus. O n?cleo e o citoplasma foram a localiza??o mais comum tanto nas les?es de baixo (58,3%), quanto nas de alto risco (66,7%). Quatro casos de mucosa normal foram positivos, com marca??o membranar e intensidade fraca. Dos 21 casos das DEOs de baixo risco, 17 (81%) apresentaram express?o imuno-histoqu?mica para a galectina -7 e das 29 DEOs de alto risco, 27 (93,1%) foram positivos. Ent?o, a express?o imuno-histoqu?mica da galectina -7 foi observada em 44 casos, a maioria com intensidade de moderada a forte. O n?cleo e o citoplasma foram a localiza??o mais freq?ente, nas de baixo (70,6%) e alto risco (66,7%). Quatro esp?cimes de mucosa normal marcaram membrana em ter?o m?dio e superior, com intensidade moderada a forte. Conclus?es: Altera??es na express?o das galectinas -3 e -7 e principalmente da -1 sugerem seu envolvimento na fisiopatologia das displasias, participando do processo de transforma??o de fen?tipo normal para o displ?sico. / Introdu??o: A displasia epitelial oral (DEO) ? uma les?o potencialmente maligna, cujo diagn?stico e grada??o se baseia na histologia das altera??es arquiteturais e citol?gicas, preconizados pela OMS, que divide a les?o em leve, moderada e severa, o qual ? subjetivo. Maior concord?ncia ? observada no uso do sistema bin?rio (baixo/alto risco), o qual est? relacionado ao risco de transforma??o maligna. As galectinas constituem uma fam?lia de lectinas e est?o envolvidas na tumorig?nese, sendo a -1, -3 e -7 as mais investigadas, devido a express?o alterada em c?nceres orais. Materiais e m?todos: Foi analisada a express?o imuno-histoqu?mica dessas prote?nas em 50 esp?cimes de DEO (21 baixo/ 29 alto risco) e 5 de mucosa oral normal e relacionamos com a presen?a/aus?ncia de marca??o, padr?o de distribui??o, intensidade, localiza??o epitelial (estratifica??o) (1/3 inferior, m?dio e superior), e localiza??o celular (compartimento) (n?cleo, citoplasma e membrana) . Resultados: Dos 29 casos de alto e dos 21 de baixo risco, 21 (72,4%) e 12 (57,1%) foram positivos para a galectina -1, respectivamente. Dessa forma, de 50 casos, 33 foram positivos. O n?cleo e citoplasma foram positivos em 91,7% nas de baixo risco e em 90,5% nas de alto. Todos os casos de mucosa normal foram negativos. Com rela??o a galectina -3, dos 21 casos das DEOs de baixo risco, 12 (57,1%) apresentaram express?o e dos 29 casos das DEOs de alto risco, 15 (51,7%) foram positivos, havendo imunoexpress?o em um total de 27 casos. O padr?o difuso, assim como a fraca intensidade foram os mais freq?entes para os 2 graus. O n?cleo e o citoplasma foram a localiza??o mais comum tanto nas les?es de baixo (58,3%), quanto nas de alto risco (66,7%). Quatro casos de mucosa normal foram positivos, com marca??o membranar e intensidade fraca. Dos 21 casos das DEOs de baixo risco, 17 (81%) apresentaram express?o imuno-histoqu?mica para a galectina -7 e das 29 DEOs de alto risco, 27 (93,1%) foram positivos. Ent?o, a express?o imuno-histoqu?mica da galectina -7 foi observada em 44 casos, a maioria com intensidade de moderada a forte. O n?cleo e o citoplasma foram a localiza??o mais freq?ente, nas de baixo (70,6%) e alto risco (66,7%). Quatro esp?cimes de mucosa normal marcaram membrana em ter?o m?dio e superior, com intensidade moderada a forte. Conclus?es: Altera??es na express?o das galectinas -3 e -7 e principalmente da -1 sugerem seu envolvimento na fisiopatologia das displasias, participando do processo de transforma??o de fen?tipo normal para o displ?sico.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:32:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FrancielliCCM.pdf: 358431 bytes, checksum: f0af96a48afbbb69eab67d73fbca381b (MD5) Previous issue date: 2004-02-17 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The utilization of the immunohistochemical/histochemical double staining technique comes permitting the analysis of two molecular parameters at the same time in an even tissue. Starting from this, the objective of this study was to investigate the existence of differences between the number of NORS/NUCLEUS between p53 positive and p53 negative cells, as well as the existence of correlation between the medium of the NORs of the p53 positive and negative cells and the histological scores of maligninancy in 16 cases of oral squamous cell carcinoma. It was first classified in agreement with the histological grade system of maligninancy proposed by Bryne (1998) and the double staining technique immunohistochemistry/histochemistry was utilized for the achievement to quantify of the NORs in p53 positive and negative cells. It had not significant differences between the medium number of NORs of the p53 positive cells and of the p53 negative cells, and they were not correlated with the histological scores of malignancy. We conclude that the related phenotype to the p53 immunohistochemical expression did not influence the average of NORS/NUCLEUS and this medium, in both positive and negative cells, is not correlated with the degree of histological aggressivity of the oral squamous cell carcinoma / A utiliza??o da t?cnica de dupla marca??o imuno-histoqu?mica /histoqu?mica vem permitindo a an?lise de dois par?metros moleculares ao mesmo tempo em um mesmo tecido. Partindo deste princ?pio, o objetivo deste estudo foi pesquisar em carcinoma epiderm?ide oral o n?mero m?dio de NORs/n?cleo entre c?lulas p53 positivas e p53 negativas por interm?dio da dupla marca??o imuno-histoqu?mica/histoqu?mica, bem como a correla??o do n?mero m?dio de NORs/n?cleo das c?lulas p53 positivas e negativas com os escores histol?gicos de malignidade. Foram estudados 16 casos de carcinoma epiderm?ide, que foram classificados de acordo com o sistema de grada??o histol?gica de malignidade proposto por Bryne (1998). A t?cnica de dupla marca??o imuno-histoqu?mica/histoqu?mica foi utilizada para a realiza??o da contagem das NORs em c?lulas p53 positivas e negativas. N?o houve diferen?a estatisticamente significante entre o n?mero m?dio de NORs/n?cleo das c?lulas p53 positivas e negativas. Tamb?m n?o houve correla??o entre o n?mero m?dio de NORs/n?cleo das c?lulas p53 positivas e negativas e os escores histol?gicos de malignidade. Conclu?mos, ent?o, que o fen?tipo relacionado ? express?o imuno-histoqu?mica do p53 n?o influi na m?dia de NORs/n?cleo e esta m?dia, tantos das c?lulas positivas quanto das negativas, n?o se correlaciona com o grau de agressividade histol?gica do carcinoma epiderm?ide oral