Memoria para optar el título de Bioquímico / Si bien la exposición al humo de cigarrillo puede comprometer la capacidad de reparación de los tejidos gingivales, el papel de los elementos que componen el humo de cigarrillo ha sido, a la fecha, poco caracterizado. El presente estudio fue desarrollado con el fin de analizar el papel de la nicotina y del condensado de humo de cigarrillo (CHC) sobre la viabilidad celular, migración e invasión celular, y diferenciación miofibroblástica en cultivos primarios de fibroblastos gingivales humanos (FGH). Los FGH fueron estimulados con concentraciones de nicotina equivalentes a la descrita en el plasma de fumadores crónicos. A su vez, se utilizaron concentraciones de CHC proporcionales al contenido de nicotina en un cigarrillo de investigación. La viabilidad de FGH expuestos a CHC y nicotina fue evaluada mediante el ensayo de MTS. La migración celular fue analizada a través de ensayos de cierre de heridas, migración en nido y sistemas de invasión bicameral. El nivel relativo del marcador de miofibroblastos, actina muscular alfa (α-SMA), fue evaluado mediante Western-blot. A bajas concentraciones de CHC (50 μg/mL), pero no de nicotina, los FGH experimentaron un incremento en la viabilidad celular. A mayores concentraciones de CHC (sobre 200 μg/mL) y de nicotina, sólo el CHC indujo muerte celular. Tanto la nicotina como el CHC indujeron un estímulo sobre la migración celular (50 μg/mL CHC; 3,2 μg/mL nicotina), seguido por una disminución en esta respuesta sólo frente al CHC (150 μg/mL). Tanto la nicotina como el CHC disminuyeron los niveles relativos de α-SMA. El CHC puede estimular la viabilidad y migración celular a bajas concentraciones e inhibir estas respuestas a mayores niveles de exposición. Tanto la nicotina como el CHC pueden inhibir la diferenciación de miofibroblastos. Por otro lado, la nicotina no afecta la migración celular, como ha sido propuesto en estudios previos. Los resultados de la presente tesis contribuyen a comprender los efectos del tabaquismo, y más específicamente de nicotina y de la fase particulada del humo de cigarrillo sobre la capacidad de reparación de células del tejido gingival humano

Submitted by PAULA LAZILHA FALEIROS null (paulal.faleiros@hotmail.com) on 2016-08-03T13:15:45Z No. of bitstreams: 1 TESE DE DOUTORADO - PAULA FINAL.pdf: 7373323 bytes, checksum: 4741d1f9d635d1e4879a2cd520afb7ae (MD5) / Rejected by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: O arquivo submetido está sem a ficha catalográfica. A versão submetida por você é considerada a versão final da dissertação/tese, portanto não poderá ocorrer qualquer alteração em seu conteúdo após a aprovação. Corrija esta informação e realize uma nova submissão contendo o arquivo correto. 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No. of bitstreams: 1 faleiros_pl_dr_araca_par.pdf: 1921873 bytes, checksum: 138048a39be83d82924179cc13951f8c (MD5) Previous issue date: 2016-07-05 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Objetivo: Avaliar do ponto de vista biomecânico, histomorfométrico, histoquímico e através de marcadores imunoistoquímicos a influência da terapia com laser em baixa intensidade (LLLT) na osseointegração de implantes instalados em tíbias de ratos modificados ou não sistemicamente pela nicotina. Materiais e métodos: Um total de 120 ratos (Wistar) foi distribuído em dois grandes grupos experimentais (n = 60) submetidos a duas aplicações diárias de solução salina (Veh) ou nicotina (Nic). Após 30 dias, implantes de titânio (2.2 mm x 4 mm) foram instalados na metáfise proximal de ambas as tíbias de todos os animais. Grupos experimentais de diferentes tratamentos locais do alvéolo cirúrgico previamente a instalação do implante (n = 30) foram criados no momento da cirurgia: Veh - nenhum tratamento; Veh/LLLT - irradiação do alvéolo cirúrgico com laser em baixa intensidade; Nic - nenhum tratamento; Nic/LLLT - irradiação do alvéolo cirúrgico com laser em baixa intensidade. O laser utilizado foi o Thera Lase (InGaAlP 660 nm, modo de aplicação contínuo, em contato com a área, 35 mW, 0,14 J, 4,9 J/cm2, por 4 segundos). Dez animais de cada grupo foram eutanasiados aos 15, 30 e 60 dias pós-operatórios. As tíbias direitas foram submetidas à análise de torque reverso e posteriormente processadas para confecção de cortes histológicos descalcificados, corados por hematoxilina e eosina, vermelho picrosirius ou submetidos a reações imunoistoquímicas com os anticorpos primários policlonais: HIF-1 α, VEGF, BMP-2, RUNX-2, OCN, ALP, RANKL, OPG e TRAP. A partir das tíbias esquerdas foram preparados cortes histológicos calcificados para análise das porcentagens de contato osso-implante (BIC) e área óssea (BA), dentro dos limites das roscas do implante. A análise foi realizada através da microscopia de luz polarizada para análise histoquímica e da microscopia óptica de campo claro para a análise histológica, histométrica e imunoistoquímicas. As imunomarcações foram submetidas à análise qualitativa para os anticorpos HIF-1 α, VEGF, BMP-2, OCN, ALP, RANKL e OPG e análise quantitativa para os anticorpos RUNX-2 e TRAP. Os dados quantitativos foram analisados estatisticamente (p≤0,05). Resultados: A nicotina atrasou a produção de elementos da matriz óssea, diminuiu o padrão de imunomarcação de HIF-1α, VEGF, BMP-2, OCN, ALP e OPG, aumentou o padrão de imunomarcação de RANKL e aumentou a quantidade de células imunorreativas a RUNX-2 e TRAP, diminuindo a BA, embora não tenha sido capaz de influenciar o torque de remoção e o BIC. O laser aumentou o padrão de imunomarcação de HIF-1α, VEGF, BMP-2, OCN e ALP, aumentou a quantidade de células imunorreativas a RUNX-2 e TRAP, aumentou a BA, mas também não foi capaz de influenciar o torque de remoção e o BIC. Adicionalmente, o laser influenciou positivamente a BA e o torque de remoção dos implantes, aumentou a angiogênese e a diferenciação osteoblástica, promovendo a formação óssea, biomineralização e maturação óssea peri-implantar nos animais modificados sistemicamente pela nicotina. Conclusão: A LLLT é capaz de promover o processo de reparo ósseo peri-implantar em condições normais e compensar os efeitos negativos da nicotina na osseointegração. / Objective: To evaluate, from biomechanical, histomorphometric, histochemical stand point and through of immunohistochemical markers, the influence of low level laser therapy (LLLT) on the osseointegration of implants placed in the tibias of nicotine systemically modified (or not) rats. Materials and methods: A total of 120 rats (Wistar) was assigned into two major experimental groups (n = 60) underwent two-daily-applications of saline (Veh) or nicotine (Nic). After thirty days, titanium implants (2.2 mm x 4 mm) were placed in the proximal metaphysis of both tibiae from all animals. Experimental groups of different surgical alveolus local treatments prior to implant placement (n = 30) were created at the moment of the surgery: Veh - no local treatment; Veh/LLLT - irradiation of surgical alveoli with low level laser; Nic - no local treatment; Nic/LLLT - irradiation of surgical alveoli with low level laser. The laser used was Thera Lase® (InGaAIP 660 nm, in continuous mode, in contact with the area, 35 mW, 0.14 J, 4.9 J/cm2 , for 4 seconds). Ten animals from each group were euthanized at 15, 30 and 60 days postoperative. The right tibiae were submitted to reverse-torque analysis and, then processing in order to prepare decalcified histological sections, stained either by hematoxylin and eosin or picrosirius red or subjected to immunohistochemical reactions with the primary polyclonal antibodies: HIF-1 α, VEGF, BMP-2, RUNX-2, OCN, ALP, RANKL, OPG and TRAP. From left tibias were prepared undecalcified histological sections to evaluate the percentages of bone-to-implant contact (BIC) and bone area (BA) within the limits of the implant threads. The histochemical analysis was performed by a polarized light microscopy and the histological, histometric and immunohistochemical analysis were performed by a bright field optical microscopy. The HIF- 1α, VEGF, BMP-2, OCN, ALP, RANKL and OPG immunostaining were submitted to qualitative analysis and the RUNX-2 and TRAP immunostaining were submitted to quantitative analysis. Quantitative data were analyzed statistically (p≤0.05). Results: The nicotine delayed the production of bone matrix components, decreased the imunolabeling pattern of HIF-1α, VEGF, BMP-2, OCN, ALP and OPG, increased the imunolabeling pattern of RANKL, increased the amount of RUNX-2 and TRAP-immunoreactive cells, reduced the BA, but did not influence the BIC and the force required to break the osseointegration. The laser increased the imunolabeling pattern of HIF-1α, VEGF, BMP-2, OCN and ALP, increased the amount of RUNX-2 and TRAP-immunoreactive cells, increased the BA, but also was not be able to influence the BIC and the force required to break the osseointegration. In addition, the laser positively influenced the BA and the implant removal torque, increased the angiogenesis and osteoblast differentiation, promoted bone formation, biomineralization and peri-implant bone maturation in the nicotine systemically modified rats. Conclusions: LLLT is able to promote the peri-implant bone repair process in normal conditions and is able to compensate the negative effects of nicotine on osseointegration. / FAPESP: 2013/11863-0

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Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2008 / Inclui bibliografias / O tabaco é considerado o principal fator de risco para o desenvolvimento de doenças cardiovasculares e pulmonares. Não há relatos na literatura que associem a eventual ação da nicotina no movimento dentário induzido. O objetivo deste estudo foi investigar / Abstract: Tobacco is considered the main risk factor for developing cardiovascular and lung disease. There are no reports in the literature demonstrating the effect of nicotine on orthodontic movement. The aim of this study was to investigate the effect o

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-09-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A nicotina e altamente consumida, por ser um componente do cigarro. Em gestantes, atravessa a membrana placentaria e esta presente no leite materno. A nicotina induz apoptose em celulas de diferentes orgaos, interfere nas funcoes endocrinas e pode causar atrofia testicular, disfuncoes de erecao e das gonadas, bem como infertilidade masculina. Ela tambem suprime a secrecao de testosterona em ratos tratados na fase adulta. Como a testosterona e produzida por celulas de Leydig a partir do colesterol e este mecanismo envolve a participacao de macrofagos testiculares (importantes para o desenvolvimento pos-natal da celula de Leydig), gerou-se a hipotese de que a nicotina poderia provocar toxicidade testicular via alteracoes morfofuncionais em celulas de Leydig, com possivel envolvimento dos macrofagos. Desta forma, o objetivo desta pesquisa foi investigar se a nicotina administrada a ratas prenhes e lactantes, em dose equivalente a um maco diario de cigarros, consumida por gestantes fumantes, provoca na prole: a) alteracoes dos niveis plasmaticos e intratesticulares de colesterol e dos hormonios sexuais; b) alteracao morfologica e das densidades numericas de celulas de Leydig e macrofagos testiculares; Para tanto, 22 ratas foram tratadas com nicotina durante a gravidez e a lactacao. A nicotina foi administrada atraves de uma minibomba osmotica, calibrada de forma a liberar 2 mg/kg/dia de nicotina (equivalente ao consumo de 20 cigarros/dia). A minibomba foi implantada subcutaneamente, no dorso da rata, no primeiro dia de prenhez e substituida no 1 ‹ dia apos o nascimento (periodo de lactacao), garantindo a exposicao ate o desmame (22dpp). Minibombas sem nicotina foram implantados em outras 22 ratas prenhes e lactantes (grupo controle gSham h) com o objetivo de verificar a inocuidade deste procedimento. Mais 22 ratas prenhes e lactantes nao receberam qualquer tratamento ou manipulacao (grupo controle absoluto). Os filhotes machos provenientes de cada rata foram distribuidos em 4 subgrupos de acordo com a idade de eutanasia (1, 30, 60 e 90dpp). Apos a analise biometrica (peso e volume), os testiculos foram processados para analise histopatologica (historresina e parafina; metodo do PAS+H) e para analises imuno-histoquimicas (inclusoes em parafina) para marcacao de celulas de Leydig adultas (anticorpo anti-enzima esteroidogenica 11ƒÀ-HSD II) e de macrofagos residentes (anticorpo anti-ED2). As densidades numericas das celulas de Leydig e dos macrofagos foram computadas atraves do sistema de analise de Imagem Leica Q-Win. Foram realizadas dosagens plasmáticas de colesterol e testosterona (em todas as idades) e estradiol (30, 60 e 90 dias), além das dosagens intratesticulares de colesterol e testosterona (60 e 90 dias). Para comprovação da presença de nicotina no leite e de sua transferência para os filhotes, a nicotina e seu metabólito, a cotinina, além de seus subprodutos, foram detectados no leite materno, na urina e no plasma dos filhotes em fase de amamentação, por cromatografia. Os resultados da cromatografia confirmaram a passagem destas substâncias para a circulação sanguínea dos neonatos. Animais do subgrupo tratado apresentaram, ao nascimento, redução de peso corpóreo (p<0,05) e do colesterol plasmático (p<0,05), além de uma sugestiva redução da quantidade de gotículas de lipídeo no citoplasma das células de Leydig fetais. Aos 30 dias de idade, os testículos da prole exposta à nicotina apresentaram redução do peso (p<0,05) e do volume testicular (p<0,05) em relação ao controle absoluto. Aos 60 e 90 dias, os animais dos subgrupos tratados apresentaram peso corpóreo levemente maior (p<0,05) que o subgrupo controle absoluto e, aos 90 dias, tanto a dosagem de colesterol (p<0,05) quanto a dosagem de testosterona plasmática foram maiores no subgrupo tratado (p<0,05) em relação a ambos os controles. Embora não tenham ocorrido diferenças nas densidades numéricas de células de Leydig e macrófagos, a análise histopatológica mostrou, aos 60 e 90 dias, uma incidência maior de células de Leydig em degeneração, além de intensa descamação e desorganização do epitélio seminífero. Aos 90 dias, acompanhando o aumento de colesterol e testosterona, observou-se também uma sugestiva hipertrofia das células de Leydig e maior incidência de anáfases e metáfase meióticas, além de núcleos de célula de Sertoli soltos no lúmen. Como os níveis de estradiol se mostraram sutilmente reduzidos nas três idades analisadas (30, 60 e 90 dias), é possível que a ação da nicotina sobre o testículo possa ter provocado também alterações das células de Sertoli. Concluiu-se que a nicotina afeta o metabolismo de colesterol e testosterona, causa alterações morfofuncionais nas células de Leydig e alterações da espermatogênese e provoca redução do número de neonatos oriundos de ratas tratadas durante toda a prenhez, induzindo nestes a ocorrência de baixo peso corpóreo e de baixo índice de colesterol plasmático. Contudo, alterações quantitativas das populações de células de Leydig e de macrófagos testiculares das proles não foram observadas nas diferentes fases do desenvolvimento sexual. / Nicotine is largely consumed by worldwide people since it is a component of cigarettes. It reaches the maternal milk and is able to cross the placental membrane. Nicotine induces apoptosis in different cell types and interferes with endocrine functions. Reproductive side effects of this drug, such as testicular atrophy, erectile dysfunction and male infertility were also described. Nicotine suppresses testosterone secretion in adult male rats. Testosterone is produced from cholesterol and is synthesized by Leydig cells, with participation of the testicular resident macrophages, which are important for post-natal Leydig cell development. These data raised the hypothesis that the testicular damage induced by nicotine could be mediated by alterations or even apoptosis of Leydig cells. Because macrophages are also involved in testosterone synthesis and Leydig cell development, it is reasonable to consider the role of these cells in the nicotine-induced testicular damage. Given the complex testicular paracrine regulation, it is probable that such alterations induce germ cell damage in the post-natal phase. Thus, the aim of this study was to investigate whether the administration of nicotine to pregnant and lactating rats, in a dose equivalent to the consumption of one packet of cigarettes per day, provokes: a) alterations of cholesterol and sexual hormone levels in the plasma and in the testis; b) morphological and numerical alterations of Leydig cells and testicular macrophages. For this, 22 rats were treated with nicotine during pregnancy and lactation. Nicotine was administrated using an osmotic minipump calibrated in way to release 2mg/Kg/day of nicotine (equivalent to the consumption of 20 cigarettes/day). The minipump was implanted subcutaneously at the first day of pregnancy and replaced just after birth (lactation period). The second minipump was removed at the weaning day (22dpp). Minipumps without nicotine were implanted in other 22 pregnant and lactating rats (Sham group) with the aim to check the innocuousness of this procedure. More 22 pregnant and lactating rats did not receive any treatment or manipulation (Control group). The male pups of each offspring were distributed in 4 subgroups according to the age of euthanasia (1, 30, 60 and 90dpp). The testes were submitted to biometric analysis (weight and volume) after what they were processed for histopathological study (historesin and paraffin sections/PAS+H) and immuno-detection of adult Leydig cell (anti-11â-HSD type 2) and resident macrophages (anti-ED2). The numerical densities of Leydig cells and ED2+ macrophages were obtained using the Leica Q-Win image analysis system. Plasma levels of cholesterol and testosterone (all ages) and estrogen (30, 60 and 90 dpp) as well as intratesticular cholesterol and testosterone (60 and 90 dpp) were investigated. Plasma, urine and milk cotinine and nicotine levels were obtained at 22ddp by chromatography. The results showed that nicotine provoked decrease of body weight (p<0.05) and cholesterol plasma level (p<0.05) at (1dpp), besides the suggesting reduced lipids in the fetal Leydig cells cytoplasm. Decrease of testicular weight and volume occurred at 30dpp (p.0.05) but not at 60dpp and 90dpp. At 60 and 90dpp, the nicotine-treated rats showed increase of body weight and at 90dpp the nicotine-treated rats show increased in plasma cholesterol and testosterone levels (p<0.05). Although no alterations of the numerical densities of macrophages and Leydig cells were observed, the histopathological analysis showed that, at 60 and 90dpp, there was an increase of the frequency of degenerating Leydig cells and a pronounced disorganization and sloughing of the seminiferous epithelium. At 90dpp a suggestive hypertrophy of Leydig cells was also observed, what parallels the increase of cholesterol and testosterone levels. At this age a suggestive increase of the frequency of meiotic anaphase and metaphase figures and Sertoli cell nuclei in the tubular lumen were also observed. Since a subtle reduction of the estradiol levels was observed at the three ages studied (30, 60 and 90dpp), it is possible to suggest that the action of nicotine in the testis caused Sertoli cell alterations. Finally, it was concluded that nicotine provokes a reduction of the offspring number, body weight and cholesterol plasma level when administered to females during the whole pregnancy period. It was also concluded that nicotine administration in rats during the whole pregnancy period and during lactation affects the metabolism of cholesterol and testosterone and leads to morphofunctional alterations of Leydig cells and of spermatogenesis in the adult offspring. On the other hand, this treatment does not cause quantitative alterations of Leydig cell and macrophage populations. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Uma questão particularmente relevante é o fato de exposições precoces a drogas de abuso durante o desenvolvimento potencialmente aumentarem a susceptibilidade a estas drogas posteriormente durante o desenvolvimento. No presente estudo utilizando estudos comportamentais e eletrofisiológicos, investigamos efeitos tardios da exposição de camundongos à fumaça de cigarro, à nicotina e ao etanol durante o período que corresponde à gestação em humanos. Para tal, esta tese foi dividida em 2 estudos. No Estudo 1, submetemos camundongos durante o período que corresponde à gestação de humanos à fumaça de cigarro e/ou etanol visando investigar se a estas drogas de abuso, separadamente ou quando combinadas, programam maior susceptibilidade aos efeitos da nicotina durante a adolescência (PN30) ou idade adulta (PN90). Para avaliar a susceptibilidade, utilizamos 3 testes: campo aberto (CA), preferencia pela nicotina (PPN) e preferencia condicionada por lugar (CPP). No Estudo 2, os animais foram expostos a nicotina durante o período gestacional e, no período que corresponde à infância (PN9 a PN20), fatias de cérebro contendo o núcleo tegumental laterodorsal (LDT) foram expostas a etanol. Este núcleo foi escolhido uma vez que estudos recentes indicam sua participação em mecanismos de toxicodependência. Foram realizados registros eletrofisiológicos de uma única célula. No Estudo 1, identificamos maior sensibilidade para os efeitos da reexposição à nicotina na adolescência quando comparada com a idade adulta . Em animais testados no CA durante a adolescência, a nicotina foi capaz de causar aumento da atividade locomotora nos animais controle, previamente expostos à fumaça de cigarro e ao etanol. Contudo, em animais expostos à fumaça combinada com etanol, não houve aumento da locomoção. Na idade adulta, a nicotina causou um aumento da atividade locomotora no CA somente nos animais expostos à fumaça de cigarro. Quanto ao CPP, a exposição prévia à fumaça de cigarro e ao etanol causaram aumento da resposta condicionada à nicotina em fêmeas adolescentes. Nos animais previamente expostos à combinação entre fumaça de cigarro e etanol, a resposta condicionada à nicotina não atingiu significância estatística. Não houve alterações na idade adulta. A exposição a fumaça de cigarro e/ou etanol não afetou a PPN. No Estudo 2, os dados eletrofisiológicos mostraram que a exposição pré-natal à nicotina foi capaz de alterar as correntes de despolarização basais e o potencial de repouso de células do LDT A nicotina também foi capaz de alterar as respostas deste núcleo ao etanol reduzindo as correntes de despolarização e aumentando, embora que não de forma significativa, as correntes inibitórias. De acordo com estes dados, injurias causadas pela exposição à fumaça do cigarro, à nicotina isoladamente, e ao etanol durante o desenvolvimento são capazes de perdurar por um logo tempo na vida do individuo, alterando as respostas a comportamentais e celulares a uma exposição tardia à nicotina e ao etanol. / Particularly relevant is the fact that early exposure to drugs of abuse during development potentially increases drug susceptibility later during development. In the present study we used mice models to investigate postnatal behavioral and electrophysiological effects of exposure to cigarette smoke, nicotine and ethanol during the period that corresponds to pregnancy in humans. To this end, this thesis was divided into two studies. In Study 1, we submitted mice to cigarette smoke and / or ethanol in order during the period that corresponds to human pregnancy to investigate whether these drugs of abuse, alone or when combined, programs increased susceptibility to the effects of nicotine during adolescence (PN30) or adulthood (PN90). To evaluate susceptibility, we use three tests: open field (OF), preference for nicotine (PFN) and conditioned place preference (CPP). In Study 2, the animals were exposed to nicotine during pregnancy and, in the period corresponding to childhood (PN9 to PN20), brain slices containing the laterodorsal tegmental nucleus (LDT) were exposed to ethanol. This nucleus was chosen based on recent studies that indicate that it participates in mechanisms of addiction. Whole cell patch clamp recordings were performed. In Study 1, a higher sensitivity to the effects of nicotine exposure was identified during adolescence when compared to adulthood. In animals tested in the OF during adolescence, nicotine was able to cause an increase in locomotor activity in controls, in mice previously exposed to cigarette smoke, and in those exposed to ethanol. However, nicotine failed to increase locomotion in mice previously exposed to smoke combined with ethanol. In adulthood, nicotine caused an increase in OF locomotor activity only in animals exposed to cigarette smoke. In the CPP, previous exposure to cigarette smoke, and to ethanol caused an increase of the conditioned response to nicotine in adolescent females. In animals previously exposed to the combined cigarette smoke and ethanol, the conditioned response to nicotine did not reach statistical significance. There were no changes in adult mice. Exposure to cigarette smoke and / or ethanol did not affect the PFN. In Study 2, electrophysiological data have shown that prenatal exposure to nicotine alters the pattern of basal and depolarization of the resting potential of cells LDT. Nicotine was also able to change the answers this core ethanol reducing and increasing depolarization currents, although not significantly inhibitory currents. According to these data, injuries caused by exposure to cigarette smoke, nicotine alone, and ethanol during development persist during postnatal development, changing the behavioral and cellular responses to a late exposure to nicotine and ethanol.

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Este trabalho visa avançar o conhecimento sobre a interferência da nicotina no protocolo de treino forçado em gerbilos isquêmicos. Utilizamos 110 Gerbilos, distribuídos em 11 grupos. Grupo controle com animais ingênuos (C), falso operado (S) e isquêmicos (I). Grupos nicotina (CN, SN, SNE, IN e INE) e salina (CS, SS, IS) com ou sem treinamento. Os animais receberam uma injeção de 2mg/kg de nicotina ou salina durante 9 dias. Utilizamos uma esteira motorizada (treino contínuo, 5 dias, 5m/min por 15 minutos), um monitor de atividades e o Rota Rod. Os resultados foram analisados por uma ANOVA e pós teste de Holm-Sidak, p<0,05. Observamos aumento de apresentação de todos comportamentos no monitor de atividades, o CN maior do que os C, S, SS, SNE e INE, o SN maior do que o SNE, o I maior do que os C, S, SS, SNE, IS, INE e ainda, o IN maior do que os C, S, SS, SNE, IS e INE (cruzamento, F10,93 = 2,97), (distância, F10,93 = 2,79), (velocidade, F10,93 = 2,79) e (atividade, F10,93 = 2,81). No Rota Rod o CN apresentou maior tempo de permanência com relação aos outros grupos exceto SNE, já o SNE, em relação aos CS, S, SN, I, IN e o I menor tempo de permanência do que o C e INE (F10,93 = 3,35). Nos grupos I e IS observamos menor densidade de neurônios no hipocampo (F6,42 = 31,02), córtex motor M1 (F6,42 = 4,01) e estriado (F6,42 = 23,33). A nicotina não interferiu com a melhora do comportamento dos animais isquêmicos. / This work aims to advance the knowledge about the interference of nicotine in the forced training protocol in ischemic gerbils. We use 110 gerbils, distributed in 11 groups. Control (C), false operated (S) and ischemic (I). Nicotine groups (CN, SN, SNE, IN INE) and sham (CS, SS, SI) with or without training. The animals received an injection of 2mg/kg of nicotine or saline for 9 days. We use a treadmill (continuous training 5 days, 5m / min for 15 minutes), an activity monitor and the Rota Rod (RR). The results were analyzed by an ANOVA and post Holm-Sidak test, p <0.05. We observed increased in all behaviors in the activity monitor, increase of CN than C, S, SS and NSS INE, SN increase compared to NES, the I increase than C, S, SS, ENS, S, NSI and also the IN showed an increase compared to C, S, SS, SNE, SI and NSI (crossing, F10,93 = 2,97), (distance, F10,93 = 2,79), (speed, F10,93 = 2,79) and (activity, F10,93 = 2,81). In RR, CN showed an increase of time spent with the other groups except SNE, and an increase in the SNE, compared to the CS, S, SN, I, IN and I showed an decrease of time compared to C and INE (F10,93 = 3,35). In groups I and and IS we observed an decrease of neurons density in the hippocampus (F6,42 = 31,02), motor cortex M1 (F6,42 = 4,01) and striatum (F6,42 = 23,33). Nicotine did not interfere with the improvement of motor behavior in ischemic animals.

Tese de doutorado, apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, da Universidade do Extremo Sul Catarinense - UNESC, como parte dos requisitos para a obtenção do título de Doutor em Ciências da Saúde. / A obesidade per se induz marcantes alterações metabólicas e moleculares que são maléficas ao organismo e podem resultar em graves problemas de saúde, acarretando alta prevalência de morbidade e mortalidade, causando elevados custos financeiros ao sistema de saúde pública. Além do estilo de vida sedentário, é crescente o número de indivíduos obesos e fumantes no Brasil e no mundo. O estresse oxidativo induzido pela fumaça de cigarro é uma situação vivenciada pelo ser humano e ainda é potencializado em indivíduos obesos. Por outro lado, a fumaça de cigarro parece modular importantes enzimas da cascata lipolítica. Hábitos alimentares inadequados e o uso do tabaco aumentam a produção de espécies reativas, mas não está claro como esses processos podem modular o controle do peso, em especial a massa gorda. Assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar as alterações metabólicas, moleculares e de adiposidade induzidos pela exposição à fumaça de cigarro. Os experimentos foram divididos em quatro etapas. Na primeira etapa, camundongos Swiss magros foram expostos à 4 cigarros comerciais com filtro (alcatrão 10mg; nicotina 0,8mg; monóxido de carbono 10mg) por sessão, 3 sessões/dia, todos os dias da semana por 7D, 15D, 30D, 45D e 60D dias (n=10) e grupo controle - CNT (sem exposição). A partir dos resultados da etapa 1, optou-se pelo uso do grupo 45 dias nas etapas seguintes. Assim, numa segunda etapa, os grupos de camundongos foram dividios em 4 grupos: CNT- controle não exposto; CNT+NAC - controle não exposto suplementado com NAC; 45FC - exposto à fumaça de cigarro por 45 dias; 45NAC - exposto à fumaça de cigarro suplementado com NAC por 45 dias. A dose de NAC foi de 60mg/kg/dia. A terceira etapa consistiu da cessação à fumaça de cigarro. Os camundongos foram divididos em 6 grupos: CNT - controle não exposto; FC45 - exposto à fumaça de cigarro por 45 dias e na cessação por 7D, 15D, 30D e 45 dias . Na quarta etapa, camundongos Swiss obesos foram expostos à fumaça de cigarro, suplementados com NAC e submetidos a cessação, distribuídos nos seguintes grupos: DP – alimentados com dieta padrão por 45 dias; DH – alimentados com dieta hiperlipídica por 45 dias; FC – alimentados com dieta hiperlipídica e expostos à fumaça de cigarro por 45 dias; NAC - alimentados com dieta hiperlipídica, expostos à fumaça de cigarro e suplementados com NAC por 45 dias; CESS - alimentados com dieta hiperlipídica, expostos à fumaça de cigarro por 45 dias e em cessação à fumaça de cigarro por 45 dias. Durante os períodos de exposição, foram aferidos a ingestão alimentar e peso corporal. Decorridos os tempos de exposição, para cada etapa, os animais sofreram eutanásia, o tecido adiposo (periepididimal, mesentérico, peri renal e retro peritoneal) foi removido e pesado para se obter o índice de adiposidade, área adipocitária, conteúdo das espécies reativas por DCFH, bem como o conteúdo das proteínas pPKA, CGI-58, pHSLSer660. Em animais magros a fumaça de cigarro reduziu a ingestão alimentar e o peso corporal, não alterou o índice de adiposidade e área adipocitária, porém elevou os níveis das espécies reativas; os níveis proteicos das moléculas analisadas por western blot também foram aumentados. A suplementação com NAC em camundongos magros expostos à fumaça acarretou redução na ingestão alimentar, no peso corporal, sem alterar o índice de adiposidade e a área adipocitária; reduziu os níveis das espécies reativas e a atividade das lipases. A cessação à fumaça de cigarro em animais magros causou aumento da ingestão alimentar, do peso corporal, do índice de adiposidade, da área adipocitária, redução no conteúdo das espécies reativas e redução da ação da lipase. Em camundongos obesos, a exposição à fumaça de cigarro e a suplementação com NAC induziu redução na ingestão alimentar e redução no peso corporal. O índice de adiposidade aumentou na cessação; a área adipocitária não foi alterada; o conteúdo das espécies reativas reduziu na suplementação com NAC. Ocorreu aumento na atividade das moléculas envolvidas na lipólise nos camundongos obesos expostos à fumaça de cigarro e reversão quando suplementados com NAC e na cessação. Os resultados tomados em conjunto sugerem que em camundongos magros e obesos a fumaça de cigarro altera adiposidade, que parece ser modulada, pelo menos em parte, pelas espécies reativas, uma vez que a suplementação com NAC reverte os achados. Dessa forma, os dados sugerem que a fumaça de cigarro tem ação metabólica periférica. Acredita-se que os resultados do presente estudo poderão servir como base para apontar novos alvos terapêuticos que poderão ser extrapolados para a saúde pública, principalmente sobre o controle da massa adiposa/obesidade.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T20:36:52Z : No. of bitstreams: 1 macarimi_vc_me_arac.pdf: 1591344 bytes, checksum: 640582b6674f10b5d63c9c0017a7dbbc (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A proposta do presente estudo foi avaliar, histologicamente a influência da terapia do laser em baixa intensidade (LLLT)) sobre o processo de reparo em feridas cutâneas provocadas no dorso de ratos tratados com nicotina. Foram utilizados 115 ratos neste estudo. Cinqüenta e nove ratos receberam injeção subcutânea de solução salina (0,2 ml), enquanto o restante dos animais receberam injeção subcutânea de nicotina (3mg/Kg de peso do animal), duas vezes ao dia durante todo o período experimental. Decorridos 30 dias das aplicações, foi criada uma ferida cirúrgica sobre o dorso de cada animal por meio de um punch ( 8 mm de diâmetro). Os animais que receberam solução salina foram divididos em 2 grupos: Grupo I(Controle)(n=29) - As feridas permaneceram sem nenhum tratamento enquanto as do Grupo II (n=30) foram submetidas a tratamento com LLLT (AlGaAs)660 nm, 40 mW, 3.0 J, 0,56 w/cm2). Os animais que receberam injeção subcutânea de nicotina também foram divididos em 2 grupos. Grupo III (n=29) onde as feridas não receberam nenhum tratamento; e Grupo IV (n=27), no qual os animais receberam tratamento com LLLT (660 nm, 40 mW, 3,0 J, 0,56 W/cm2). Cada... / The purpose of this study was to histologically analyze the influence of low level laser therapy (LLLT) on the healing process of surgically created coetaneous wounds in rats treated with nicotine. One hundred and fifteen rats were used in this study. Fifty nine rats received subcutaneous injection of saline (0,2 ml) while the remaining animals received subcutaneous injection of nicotine (3 mg/kg of body weight) twice a day during all experimental period. After 30 days of either saline or nicotine injection, coetaneous wounds were surgically created on the back of the animals with a punch (8 mm in diameter). The animals that received saline injections were divided into 2 groups: Group I (control) (n= 29) – The wound was left untreated; and Group II (n= 30) – The wound was treated with LLLT (GaAlAs 660 nm, 40 mW, 3.0 J, 0.56 W/cm2). The animals that received nicotine injections were also divided into 2 groups: Group III (n= 29) - The wound was left untreated; and Group IV (n= 27) – The wound was treated with LLLT (GaAlAs 660 nm, 40 mW, 3.0 J, 0.56 W/cm2). Each group was subdivided into sub-groups for euthanasia at either 3, 7 or 14 days post-operative. Block sections were routinely processed for histological analysis using H&E stain. Group III showed delayed epithelial migration and connective tissue organization when compared to Group I. The wounds of Group II presented an...(Complete abstract, click electronic access below)