Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Acute diarrhea is one of the most common infectious diseases and still one of the leading causes of morbidity and mortality in the pediatric world, a global public health problem. Several efforts have been made over the years to reduce infant mortality, despite the commitment of diarrhea still occupy a significant space of malnutrition in children under 5 years. A wide spectrum of enteric pathogens can cause acute childhood diarrhea, among which we can mention Rotavirus, Norovirus and Cryptosporidium spp. Rotavirus is one of the most important. Currently two live attenuated live Rotavirus vaccines have been licensed and are available globally: a human monovalent strain (RV1) (Rotarix®, GlaxoSmithKline Biologicals) and a pentavalent bovine-human rearrangement (RV5) (Rotateq®). Brazil was one of the first countries to integrate the vaccine into its national immunization program (2006), and it was possible to observe significant improvements in reducing infant mortality and hospitalizations for diarrheal diseases in children from Rotavirus. However, diarrhea continues to be a serious health problem, and can be avoidable and treatable. Several etiological agents may be related to these intestinal infections and deserve to be investigated. The objective of this study was to verify the presence of the three etiological agents Cryptosporidium spp., Rotavirus and Norovirus, associated with diarrhea in children aged 0 to 11 years old, attended at Sergipe Emergency Hospital (HUSE). The samples were tested by Elisa for Cryptosporidium spp and Rotavirus for fecal antigen detection and reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) for Norovirus detection. A total of 92 diarrheic stool specimens were analyzed, of which 62% were positive for one of the pathogens studied, 49% positive for Norovirus, 10% for Rotavirus, 4% for Crysptoporidium spp and 37% of diarrheal samples were not positive for any enteropathogen studied. Norovirus was the main cause of childhood diarrhea in the period studied, with predominance (98%) of the GII genotype. The most affected age group were children younger than 24 months. Infections have shown similar symptoms. Complementary studies are needed to discover other etiological agents involved in gastroenteritis in the State of Sergipe, since a significant number of children with diarrhea did not present positivity to any of the pathogens studied. / A diarreia aguda é uma das doenças infecciosas mais comuns e ainda uma das principais causas de morbidade e mortalidade no mundo pediátrico, um problema global de saúde pública. Diversos esforços vêm sendo realizados no decorrer dos anos para redução da mortalidade infantil, apesar do empenho as diarreias ainda ocupam um significativo espaço da desnutrição em menores de 5 anos. Um amplo espectro de patógenos entéricos pode provocar a diarreia infantil aguda, dentre esses podemos citar os Rotavírus, Norovírus e Cryptosporidium spp, sendo o Rotavírus um dos mais importantes. Atualmente duas vacinas orais contra o Rotavírus, de vírus vivos atenuados foram licenciadas e estão disponíveis globalmente: uma cepa monovalente humana (RV1) (Rotarix®, GlaxoSmithKline Biologicals) e um rearranjo bovino-humano pentavalente (RV5) (Rotateq®). O Brasil foi um dos primeiros países a integrar a vacina em seu programa nacional de imunizações (2006), e foi possível observar melhorias significativas na redução da mortalidade infantil e nas hospitalizações por doenças diarreicas em crianças decorrentes de Rotavírus. No entanto, as diarreias continuam sendo um grave problema de saúde, podendo ser evitável e tratável. Diversos agentes etiológicos podem estar relacionados a essas infecções intestinais e merecem ser investigados. O objetivo desse estudo foi verificar a presença dos três agentes etiológicos Cryptosporidium spp., Rotavírus e Norovírus, associados aos quadros de diarreia aguda em crianças de 0 a 11 anos atendidas no Hospital de Urgência de Sergipe (HUSE). As amostras foram testadas por Elisa para Cryptosporidium spp e Rotavírus, para detecção de antígenos nas fezes, e reação de cadeia em polimerase após transcrição reversa (RT-PCR) para detecção de Norovírus. Foram analisadas 92 amostras de fezes diarreicas das quais 62% apresentaram positividade para um dos patógenos estudados, 49% positivos para Norovírus, 10% para Rotavírus, 4% para Crysptoporidium spp e 37% das amostras diarreicas não apresentaram positividade para nenhum enteropatógeno estudado. Norovírus foi o principal causador da diarreia infantil no período estudado, com predominância (98%) do genótipo GII. A faixa etária mais acometida foi de crianças menores de 24 meses. As infecções demonstraram sintomas semelhantes. Estudos complementares são necessários para descobrir outros agentes etiológicos envolvidos em gastroenterites do Estado de Sergipe, visto que uma quantidade significativa de crianças com diarreia não apresentou positividade para nenhum patógeno estudado. / São Cristóvão, SE

Fundação de Apoio a Pesquisa e à Inovação Tecnológica do Estado de Sergipe - FAPITEC/SE / Leprosy is an infectious disease, caused by the bacillus Mycobacterium leprae, chronic, with high capacity of contagion and low capacity of people's illness. In Brazil, it is considered as a public health problem. Aracaju and several of its districts have high detection rates. Aracaju presented in 2011 a detection rate of 21.7 cases for 100 thousand inhabitants, classified as of very high endemicity. The objective of the study was to evaluate the epidemiological and spatial characteristics of leprosy through the database of the Notifiable Diseases Information System, in the Aracaju, Sergipe, Brazil neighborhoods from 2011 to 2015. This is an ecological, Retrospective study based on a secondary database of leprosy patients enrolled in the Aracaju Notification of Injury Information System from 2011 to 2015. It was used the Joinpoint Regression Program Version 4.1.1.5, Monte Carlo permutation test and increment Annual Percentage for calculations of temporal trends, besides the TerraView 4.2 program for the development of thematic maps on leprosy indicators. Besides of this, it was used spatial autocorrelation statistics such as Kernel estimation, Global Moran (I) and Local (LISA) Indexes applied to characterize spatial distribution patterns. Through [the Annual Percentage Increment was observed a gradual reduction] of less 10.2 (p <0.05) cases of the disease in the years studied. Brown color, incomplete elementary school education level, female gender and multibacillary operational classification were the most representative in general cases, and the odds ratio of the man belonged to this classification was 2.74 times higher (OR = 2 , 74, 95% CI = 1.94-3.86). The tuberculoid clinical form was more predominant among the cases and the indeterminate had a reduction of less than 19.6 (p <0.05) of the Annual Percentage Increase. The Moran global index was positive and significant (0.41, p <0.01), the cluster with the highest risk for illness and the highest density of the mean incidence of cases for Kernel estimation was located in the central and northern portion of the County. The understanding of the panorama of the geographic distribution and the profile of leprosy patients in Aracaju was relevant because it allowed a greater and better knowledge about the leprosy situation in the city. / A hanseníase é uma doença infectocontagiosa, causada pelo bacilo Mycobacterium leprae, crônica, com alta capacidade de contágio e baixa capacidade do adoecimento das pessoas. No Brasil, é considerada como um problema de saúde pública. Aracaju e vários de seus distritos possuem elevadas taxas de detecção. Aracaju apresentou em 2011 um índice de detecção de 21,7 casos para 100 mil habitantes, classificado como de muito alta endemicidade. O objetivo do estudo foi avaliar as características epidemiológicas e espaciais da hanseníase através do banco de dados do Sistema de Informação de Agravos de Notificações, nos bairros de Aracaju, Sergipe, Brasil nos anos de 2011 a 2015. Trata-se de um estudo ecológico, retrospectivo com base em banco de dados secundários de portadores de hanseníase cadastrados no Sistema de Informação de Agravos de Notificação de Aracaju nos anos de 2011 a 2015. Foi utilizado o Programa de Regressão Joinpoint Versão 4.1.1.5, teste de permutação de Monte Carlo e Incremento Percentual Anual para cálculos de tendências temporais, e o programa TerraView 4.2 para a elaboração de mapas temáticos sobre indicadores de hanseníase. Além de estatísticas de auto correlação espacial como estimativa de Kernel, Índex de Moran Global (I) e Local (LISA) aplicadas para caracterização dos padrões de distribuição espacial. Através [do Incremento Percentual Anual foi constatada uma redução gradual ] de menos 10,2 (p< 0,05) casos da doença nos anos estudados. A cor parda, nível de instrução escolar de ensino fundamental incompleto, sexo feminino e a classificação operacional multibacilar foram os mais representativos nos casos gerais, sendo que a razão de chances do homem pertencer a essa classificação foi 2,74 vezes maior (OR= 2,74; IC95%= 1,94-3,86). A forma clínica tuberculoide foi mais predominante entre os casos e a indeterminada teve uma redução de menos de 19,6 (p< 0,05) do Incremento Percentual Anual. O índice global de Moran foi positivo e significativo (0,41; p< 0,01), o cluster de maior risco para o adoecimento e a maior densidade da incidência média de casos para estimativa de Kernel se localizou na porção centro e norte do município. A compreensão do panorama da distribuição geográfica e do perfil dos portadores da hanseníase em Aracaju foi relevante por poder permitir um maior e melhor conhecimento sobre a situação de hanseníase no município. / São Cristóvão, SE

Fundação de Apoio a Pesquisa e à Inovação Tecnológica do Estado de Sergipe - FAPITEC/SE / Staphylococcus aureus has been considered a major public health problem worldwide due mainly to the ability to develop resistance to antibiotics. The prevalence of methicillin resistant strains of S. aureus (MRSA) in both hospital and community settings has been increasing, with cases of infections and deaths reported in healthy children and adults. Bacteriocins have been identified as promising alternatives for the control of this pathogen. However, besides the therapeutic use of these peptides still not approved, some studies indicate the possibility of selection of resistant strains. Therefore, prior to the therapeutic use of bacteriocins, studies must be carried out to understand the effect that bacteriocin may have on the selection of resistant strains to avoid the current problem with lineages resistant to traditional antibiotics. In view of the above, the objective of this study was to verify the antimicrobial activity of nisin against strains of MRSA and MSSA isolated from the oropharynx of health professionals and verify the selection of strains resistant to bacteriocin. For the genotypic characterization of the MRSA and MSSA strains, the nucA, LuckPV, mecA and mecC genes were tested. The MSSA lines were positive for amplification of the nucA gene only, confirming the identification of genus and species of these strains. For MRSA strains, the only gene that was not detected was mecC, confirming the methicillin resistance phenotype and that these strains are of human origin and of community environments. The results obtained by the agar diffusion test demonstrated that 80% of the MSSA strains (n = 30) were inhibited by nisin and only one MRSA line (n = 6) showed no sensitivity to bacteriocin. The MIC of MSSA strains ranged from 97.7 to 1250 IU / mL and from MRSA strains of 937.50 to 5000 IU / mL. The DBM for MSSA strains varied from 97.7 IU / mL to values greater than 50,000 IU / mL, and for MRSA, this variation was between 5000 IU / mL at values greater than 10,000 IU / mL depending on the lineage. For most lineages DBM was higher than MIC, showing that the effect of bacteriocin depends on bacteriocin concentration: low concentrations exert bacteriostatic effect and high concentrations bactericidal effect. The addition of increasing concentrations of the bacteriocin to the BHI medium generally resulted in the increase in the lag phase and decrease in the specific growth rate and maximal DO reached by the MSSA and MRSA cultures. MSSA and MRSA strains were transferred for approximately 30 generations in the presence of bacteriocin and a decrease in sensitivity was observed with a consequent increase in nisin MIC for all strains tested. The bacteriocin resistance phenotype has been shown to be a stable trait for these strains and may be associated with a genetic factor. It has also been observed that the use of nisin may trigger cross-resistance to some antibiotics. The results obtained demonstrated that nisin is efficient in controlling the growth of MSSA and MRSA. However, the fact that these lines demonstrate resistance to bacteriocin after transfer in the presence of the same indicates the need to develop strategies to avoid in the future the current problem of resistance to antibiotics. The best way to use bacteriocins therapeutically is to suggest that it is in combination with traditional antibiotics. / Staphylococcus aureus têm sido considerado um dos maiores problemas de saúde pública a nível mundial devido, principalmente, a habilidade de desenvolver resistência a antibióticos. A prevalência de linhagens de S. aureus resistentes a meticilina (MRSA) tanto em ambiente hospitalar quanto em ambientes comunitários têm aumentado, sendo descritos casos de infecções e relatos de mortes em crianças e adultos saudáveis. Bacteriocinas tem sido apontadas como alternativas promissoras para o controle deste patógeno. Entretanto, além do uso terapêutico destes peptídeos ainda não ser aprovado, alguns estudos indicam a possibilidade de seleção de linhagens resistentes. Portanto, antes do uso terapêutico de bacteriocinas, estudos precisam ser realizados para o entendimento do efeito que a bacteriocina possa ter na seleção de linhagens resistentes para evitar o problema da atualidade com linhagens resistentes aos antibióticos tradicionais. Diante do exposto, o objetivo deste trabalho foi verificar a atividade antimicrobiana da nisina contra cepas de MRSA e MSSA isoladas da orofaringe de profissionais da área de saúde e verificar a seleção de linhagens resistentes à bacteriocina. Para a caracterização genotípica das linhagens MRSA e MSSA, foram testados os genes nucA, LuckPV, mecA e mecC. As linhagens MSSA foram positivas para amplificação apenas do gene nucA, confirmando a identificação de gênero e espécie destas linhagens. Para as linhagens MRSA, o único gene que não foi detectado foi o meC, confirmando o fenótipo de resistência a meticilina e que estas linhagens são de origem humana e de ambientes comunitários. Os resultados obtidos pelo teste de difusão em ágar demonstraram que 80% das linhagens MSSA (n=30) foram inibidas pela nisina e apenas uma linhagem MRSA (n=6) não apresentou sensibilidade à bacteriocina. A CIM das linhagens de MSSA variou de 97,7 a 1250UI/mL e das linhagens MRSA de 937,50 a 5000 UI/mL. A DBM para as linhagens de MSSA variou de 97,7 UI/mL a valores superiores a 50000 UI/mL, e para MRSA esta variação ficou entre 5000 UI/mL a valores maiores que 10000 UI/mL dependendo da linhagem. Para a maioria das linhagens a DBM foi maior que a CIM, mostrando que o efeito da bacteriocina depende da concentração da mesma: baixas concentrações exercem efeito bacteriostático e altas concentrações efeito bactericida. A adição de concentrações crescentes da bacteriocina ao meio BHI resultaram, de maneira geral, no aumento da fase lag e diminuição da velocidade específica de crescimento e DO máxima atingida pelas culturas MSSA e MRSA. Linhagens de MSSA e MRSA foram transferidas por aproximadamente 30 gerações na presença da bacteriocina e foi observada diminuição na sensibilidade com consequente aumento da CIM da nisina para todas as linhagens testadas. O fenótipo de resistência à bacteriocina demonstrou ser uma característica estável para estas linhagens, podendo estar associado a um fator genético. Foi observado também que a utilização da nisina pode desencadear resistência cruzada a alguns antibióticos. Os resultados obtidos demonstraram que a nisina é eficiente em controlar o crescimento de MSSA e MRSA. Entretanto, o fato destas linhagens demonstrarem resistência a bacteriocina após transferência na presença da mesma indica a necessidade de desenvolver estratégias para evitar no futuro o problema atual de resistência a antibióticos. A melhor maneira de usar bacteriocinas terapeuticamente sugere-se que seja em combinação com antibióticos tradicionais. / São Cristóvão, SE

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Visceral leishmaniasis (VL) is a serious infectious disease that if left untreated can lead to death. Chemotherapy is the main form of treatment and antimony are the drugs of first choice. Treatment efficacy is a consequence of the immunological profile of the patient, the pharmacokinetic properties of the drug and the inherent differences in each strain. The resistance of parasites to the antimonial and resistance to treatment is emerging worldwide. Few studies using clinical isolates of patients refractory to treatment seeking to understand the machinery of resistance. Thus, the present study aimed to characterize phenotypic components of clinical isolates of Leishmania (L.) infantum obtained from patients with LV refractory to treatment with Glucantime®. changes were evaluated ultrastructural front of the trivalent antimony (SbIII) and Action transport pumps related to drug efflux. In total, four strains were used: Two isolates treatment refractory patients and two isolates from patients responsive to treatment with antimony. The susceptibility of these strains was evaluated in vitro exposure to increasing concentrations of promastigotes SbIII and determination of median inhibitory concentration (IC50). In comparison, the IC50s of separate refractory patients are significantly greater than the IC50 of patients responsive isolated, showing an in vitro drug resistance profile. From these results, the concentration of 615 μM of SbIII was chosen to perform the experiments. This concentration proved to be toxic, but fully compatible with survival in all isolates. Then the isolates were subjected to transmission electron microscopy (TEM) after being exposed to 615 μM of SbIII for 48 hours. The two isolates from patients responsive to treatment demonstrated significant ultrastructural changes, with the presence of vacuolization, disorganization and cytoplasmic compression with increased eletrodensidade, and the strong presence of cells with intense loss eletrodense the cytoplasm, indicating incompatibility with life. While the two isolates from treatment refractory patients had preserved ultrastructure, with the presence of morphologically altered, compressed and electrodense cells, indicating the stress response. Finally, to assess the presence of transmembrane transport mechanisms related to drug efflux, the isolates were subjected to two protocols: using the fluorescent probe Rhodamine 123 with the channel blocker, verapamil hydrochloride, and the exposure to SbIII plus verapamil hydrochloride The results showed that MDR-1 type pumps are not related to the different in vitro resistance profiles to antimony in isolates from antimony-refractory patients. Together, the results of this study show that clinical refractory patients isolates have phenotypic characteristics that make her different behavior of isolates from patients responsive when exposed to antimony in vitro. / A leishmaniose visceral (LV) é uma doença infecciosa grave que se não tratada pode levar a morte. A quimioterapia é a principal forma de tratamento e os antimoniais são as drogas de primeira escolha. A eficácia do tratamento é uma consequência do perfil imunológico do paciente, das propriedades farmacocinéticas da droga e das diferenças intrínsecas de cada cepa. A resistência dos parasitos aos antimoniais e a refratariedade ao tratamento é mundialmente emergente. Poucos estudos utilizam isolados clínicos de pacientes refratários ao tratamento buscando compreender as maquinarias de resistência. Dessa forma o presente estudo teve como objetivo caracterizar componentes fenotípicos de isolados clínicos de Leishmania (L.) infantum obtidos de pacientes com LV refratários ao tratamento com Glucantime®. Foram avaliadas alterações ultraestruturais frente ao antimonial trivalente (SbIII) e ação de bombas de transporte relacionadas ao efluxo de droga. No total, foram utilizados quatro isolados: dois isolados de pacientes refratários ao tratamento e dois isolados de pacientes responsivos ao tratamento com antimonial. A susceptibilidade desses isolados foi avaliada in vitro com a exposição de promastigotas a concentrações crescentes de SbIII e determinação da concentração inibitória média (IC50). Quando comparadas, as IC50s dos isolados de pacientes refratários são significativamente maiores que as IC50s dos isolados de pacientes responsivos, mostrando um perfil de resistência a droga in vitro. A partir desses resultados, a concentração de 615 μM de SbIII foi escolhida para a execução dos experimentos. Essa concentração demonstrou ser tóxica, mas compatível com a sobrevivência em todos os isolados. Em seguida, os isolados foram submetidos a microscopia eletrônica de transmissão (MET) após serem expostos a 615 μM de SbIII por 48h. Os dois isolados de pacientes responsivos ao tratamento demonstraram alterações ultraestruturais significativas, com a presença de vacuolização, desorganização e compactação citoplasmática, com aumento da eletrodensidade, e a presença marcante de células com intensa perda de conteúdo eletrodenso do citoplasma, indicando incompatibilidade com a vida. Enquanto os dois isolados obtidos de pacientes refratários ao tratamento apresentaram algumas células morfologicamente alteradas, compactadas e eletrodensas, indicando resposta ao estresse. Por fim, para avaliar a presença de mecanismos de transporte transmembrana relacionados ao efluxo de droga, os isolados foram submetidos a dois protocolos: o uso da sonda fluorescente Rodamina 123 junto ao bloqueador de canais, cloridrato de verapamil, além do uso direto do verapamil na reversão da resistência durante a exposição ao SbIII in vitro. Os resultados obtidos demonstraram que bombas do tipo MDR-1 não estão relacionados aos diferentes perfis de resistência in vitro ao antimonial nos isolados de pacientes refratários. Juntos, os resultados encontrados no presente trabalho demonstram que isolados clínicos de pacientes refratários possuem características fenotípicas que tornam seu comportamento diferenciado dos isolados de pacientes responsivos quando expostos ao antimonial in vitro. / São Cristóvão, SE

Objectives: To evaluate the efficacy of commercially used insect repellents against Aedes aegypti stings. Material and Methods: Was used method standard the World Health Organization to evaluate the sensitivity of the mosquito by estimating the total protection time (TPT) of the repellent. The test consists of application of the product and introduction of the volunteer arm into cages containing 50 female mosquitoes, aged between five and seven days. The initial product was 10% technical grade N, N diethylbenzamine (DEET) and four formulations with different concentrations of DEET, OFF Family (7,125%), Baruel (9,5%), Expert Total : 1612043 and 16144314, Super Repelex Aerosol (11%), product based on IR3535 (Repeden Spray 12%, Jonsons Baby Lotion 12.5%), and the ICARIDINE base (Exposis Extreme Tetra 25%), by the median of each product in 6 volunteers, being three men and three women. Results: The OFF Family brand (DEET 7,125%), Baruel (DEET 9,5) and analytical DEET (10%) demonstrated a median of 30 minutes, even presenting different concentrations; Super Repelex Aerosol (DEET 11%) among the products containing DEET was the one that presented a higher median, with a TPT of 90 minutes; Expert Total (DEET 15%) (1st batch) and Expert Total (DEET 15%) (2nd batch) are shown with medians equal with a time of 60 minutes; Repeden Spray (IR3535 12%) and Johnsons baby (IR3535 12.5%) presented a median TPT of 60 and 30 minutes respectively, differing only in the degree of concentration of the active principle; Exposis Extreme (25% Icaridina) presented a median of 120 minutes, showing a superiority in relation to the other products. Conclusion: The products had a complete protection time lower than the one specified in their labels, and may leave the population that use them as a control measure against several unprotected diseases, requiring a greater number of reapplications of the products. / Objetivos: Avaliar a eficácia de repelentes utilizados comercialmente contra picadas de Aedes aegypti. Material e Métodos: Foi utilizado o método padrão da Organização Mundial da Saúde para avaliar a sensibilidade do mosquito através da estimativa de tempo de proteção completa (TPC) do repelente. O teste consiste na aplicação do produto e introdução do braço de voluntário em gaiolas contendo 50 mosquitos fêmeas, com idade entre cinco a sete dias. Foi avaliado inicialmente produto a base de N,N dietilbenzamina (DEET) grau técnico a 10% e quatro formulações com diferentes concentrações de DEET, OFF Family (7,125%), Baruel (9,5%), Expert Total (15%) lotes: 1612043 e 16144314, Super Repelex Aerossol (11%), produto a base de IR3535 (Repeden Spray 12%, Loção Jonsons Baby 12,5%,) e a base de ICARIDINA (Exposis Extreme Tetra 25%), e estimado o TPC pela mediana de cada produto em 6 voluntários, sendo três homens e três mulheres. Resultados: A marca OFF Family (DEET 7,125%), Baruel (DEET 9,5) e DEET analítico (10%) demostraram uma mediana de 30 minutos, mesmo apresentando diferentes concentrações; Super Repelex Aerossol (DEET a 11%), dentre os produtos contendo DEET, foi o que apresentou uma maior mediana, com TPC de 90 minutos; Expert total (DEET 15%) (1º lote) e o Expert Total (DEET 15%) (2º lote) mostram-se com medianas iguais com um tempo de 60 minutos; Repeden Spray (IR3535 12%) e Johnsons baby (IR3535 12,5%) apresentaram uma mediana com TPC de 60 e 30 minutos respectivamente, diferindo apenas no grau da concentração do princípio ativo; Exposis Extreme (Icaridina a 25%) apresentou uma mediana de 120 minutos, mostrando uma superioridade em relação aos outros produtos. Conclusão: Os produtos apresentaram tempo de proteção completa inferior a especificada em seus rótulos, podendo deixar a população que os utilizam como medida de controle contra diversas doenças desprotegida, sendo necessário maior número de reaplicações dos produtos para atingir a o período de proteção desejado. / São Cristóvão, SE

A distribuição familial da resposta ao extrato antigênico da Leishmania foi analisada sobre o prisma da epidemiologia genética. O exame utilizado para medir a resposta do organismo ao antígeno estudado foi a intradermorreação de Montenegro (IDRM). O presente trabalho utilizou uma amostra de 313 indivíduos do município de Monte Negro, RO, com o objetivo de detectar a evidência de um componente genético importante na determinação da expressão da característica em estudo. As análises estatísticas foram realizadas por meio do programa SPSS e as análises de segregação foram feitas utilizando o programa de computador POINTER. Os resultados indicaram que as variáveis idade e sexo estão correlacionadas com a resposta ao extrato antigênico da Leishmania. Cálculos de correlação sugeriram a existência de agregação familial significante com forte componente genético. Esta agregação familial foi confirmada pela análise de segregação complexa, que sugeriu que o modelo mais adequado para explicar a transmissão do fenótipo, na população estudada, foi o monogênico recessivo. / The familal distribuition of the response to an antigenic extract of Leishmania was analyzed by applying genetic epidemiologic methods. The test used to measure the response of the organism to a Leishmania antigen went to Montenegro skin test. The present study tested a sample of 313 individuals from the Monte Negro, RO, with the objective to ascertain the relative importance of genetic components in the determination of the expression of the characteristic studied. Statistical analyses of sample were made through of SPSS program and complex segregation analysis was made using the computer program POINTER. The results showed that age and gender affect significantly the response to antigenic extract of Leishmania. Correlations suggested the existence of a significant familial aggregation with a strong genetic component. This familial aggregation was confirmed by complex segregation analysis, which suggested that the best model to explain the phenotype transmission in the Monte Negro population was the recessive monogenic one.

Nesta dissertação, foi caracterizada a via de biossíntese de tiamina (Vitamina B1) nas três formas intraeritrocitárias de P. falciparum. Foram realizadas marcações metabólicas, utilizando diferentes precursores radioativos envolvidos na biossíntese de tiamina, já descritos para outros organismos. A utilização do precursor [1-14C] acetato de sódio demonstrou que a via de biossíntese de tiamina encontra-se ativa em todos os estágios intraeritrocitários de P. falciparum. Investigamos os precursores que poderiam estar envolvidos na biossíntese do intermediário tiazol, e nossos dados sugerem que a cistéina é a doadora do enxofre presente na molécula de tiamina; que o aminoácido tirosina pode ser o precursor da biossíntese de tiamina, e nicotinamida não é utilizada como precursor em P. falciparum. Também se avaliou o efeito da fosmidomicina e 3ClDHP e foi demonstrado que ambos propiciaram uma inibição no crescimento dos parasitas. Estes dados sugerem que a via de biossíntese de tiamina, pode ser explorada como alvo para drogas antimaláricas, devido ausência em humanos. / In the present work we have demonstrated the biosynthesis of thiamin (vitamin B1) in the intraerytrocytic stages of P. falciparum. We have demonstrated active biosynthesis of thiamine in the three parasite stages metabolically labeled with [1-14C] sodium acetate. We also investigated which precursors could be involved in the biosynthesis of the thiazole intermediate, by metabolic labelling with different precursors. Our data suggest that the sulphur present in the thiamine molecule is formed from cysteine white that tyrosine can be the precursor of thiamine biosynthesis. Nicotinamide is not utilized as a precursor in P.falciparum. We also investigated the effect of fosmidomycin (an inhibitor of the DOXP reductoisomerase in the MEP pathway) and 3CIDHP (an analogue of bacimethrin) in vitro cultures and both showed an inhibitory effect on parasite growth. These data suggest that the biosynthesis of thiamine can be an attractive target for the development of antimalarial drugs since this pathway is absent in humans.

Orientador: Antonio Carlos Paes / Banca: Hélio Langoni / Banca: Kátia Denise Saraiva Bresciane / Resumo: A neosporose é uma doença parasitária causada pelo protozoário Neospora caninum sendo causadora de problemas reprodutivos e distúrbios neurológicos nos animais. Os canídeos selvagens e domésticos são hospedeiros definitivos, e os ovinos, entre os hospedeiros intermediários, se constituem uma das espécies susceptíveis. A presença de cães nas propriedades rurais é um fator de risco para a infecção nos ovinos, indicando associação entre a infecção em ambas as espécies. Este trabalho teve por objetivo verificar a soro-ocorrência de anticorpos anti-N. caninum em ovinos e cães naturalmente infectados. Foram colhidas amostras de sangue de 1497 ovelhas e 42 cães que compartilhavam o mesmo ambiente, provenientes de 16 propriedades rurais localizadas na microrregião de Araraquara. Para a pesquisa de anticorpos anti- N. caninum utilizou-se a técnica de reação de imunofluorescência indireta (RIFI ≥ 25). Para o estudo epidemiológico foi aplicado um questionário aos proprietários ou responsáveis pelos animais, contendo informações ligadas a neosporose, tanto para ovinos quanto para os cães. Dos 1497 soros ovinos testados obteve-se uma ocorrência de 8,0% (LI 95%= 6,7%; LS 95%= 9,2%) e dos 42 cães 4,8% (LI 95%= 0%; LS 95%= 7,2%). Foram observadas diferenças estatísticas significativas na associação entre o resultado da sorologia dos ovinos para N. caninum e as variáveis: abastecimento de água (P=0,0004; OR=2,15), presença de outros canídeos selvagens ou domésticos (P=0,0013; OR=2,38) e presença ou ausência de problemas reprodutivos (P=0,0031; OR=1,75). A ingestão de água de represa, a presença de canídeos selvagens ou de propriedades vizinhas e presença de problemas reprodutivos apresentaram associação positiva com a ocorrência de neosporose em ovinos / Abstract: The neosporosis is a parasitic disease caused by protozoan Neospora caninum that is considered a cause of reproductive problems and neurological disorders in animals. Domestic and wild canids are definitive hosts, and sheep, among the intermediate hosts, constitute one of the susceptible species may occur reproductive problems. The presence of dogs in the farms is a risk factor for infection in sheep, indicating an association between infection in both species. This study aimed to verify the serum-occurrence of antibodies in sheep and dogs naturally infected by N. caninum. We collected 1497 blood samples from sheep and 42 samples from dogs that lived with the sheep from 16 farms located in the microregion of Araraquara. For the detection of N. caninum antibodies was performed the technique of reaction of indirection immunofluorescence (IFAT ≥ 25). Epidemiological study was applied as a questionnaire for sheep and dogs with information related to neosporosis. Of 1497 sheep sera tested, the occurrence obtained was 8.0% (LL 95% = 6.7%; UL 95% = 9.2%) and of 42 dogs, 4.8% (LL 95% = 0%; UL 95% = 7.2%). Were statistically significant differences in the association between seropositivity for N. caninum in sheep and the variables: water supply (P=0.0004; OR=2.15), presence of other wild or domestic canids (P=0.0013; OR=2.38) and presence or absence of reproductive problems (P=0.0031; OR=1.75). Ingestion of water from dams, the presence of wild dogs or wild canids of neighboring properties and the presence of reproductive problems were positively associated with the occurrence of neosporosis in sheep / Mestre

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-10-16T16:55:39Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoRazaoSinal.pdf: 12982053 bytes, checksum: 4d887a2c67f744e27eae380be94f9c33 (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-10-19T16:59:13Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoRazaoSinal.pdf: 12982053 bytes, checksum: 4d887a2c67f744e27eae380be94f9c33 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-19T16:59:13Z (GMT). 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Neste ambiente de programação foi realizada a análise dos componentes principais (PCA), que é usada para reduzir a dimensionalidade dos dados conservando sua variação e minimizando a influência do ruído; e a avaliação da razão sinal ruído (SNR) das respostas multifocais (mfERG) usando a distribuição cumulativa SNR realizadas em dois intervalos de tempo, um compreendendo apenas o sinal e outro apenas o ruído, para classificação das respostas em válidas, diminuídas ou ausentes. No grupo dos sujeitos saudáveis, não houve sobreposição de curvas na distribuição cumulativa da SNR do sinal e do ruído, que ocuparam diferentes valores em todos os sujeitos. Com o critério de 1% para falsos positivos e falsos negativos foi possível definir as bordas da SNR do sinal, das respostas diminuídas e do ruído. Este mesmo protocolo foi aplicado a três (3) pacientes com perda visual decorrente da toxoplasmose ocular. Nestes casos, houve sobreposição das curvas da distribuição cumulativa da SNR do sinal e ruído. O limite de confiança da distancia entre os limites da SNR do sinal e do ruído obtidos do grupo de sujeitos saudáveis, foi usado para separar respostas válidas, respostas diminuídas e ausência de resposta. Os resultados da avaliação da SNR foram usadas para mostrar os registros do mfERG em gráficos topográficos que discriminam as respostas válidas (sinal), respostas diminuídas e ausência de resposta (ruído). O uso desta ferramenta nos permitiu identificar danos na topografia retiniana, com também a localização da cabeça do nervo óptico, e mais facilmente discriminado, artefatos como o pico central errôneo que podem ser rejeitados, além de áreas retinianas com diminuição funcional no caso dos pacientes. Conclui-se então que a combinação da PCA para reconstruir registros mfERG com a avaliação da SNR são ferramentas úteis para analisar a topografia retiniana de sujeitos saudáveis e acometido por doenças, como por exemplo, a toxoplasmose com complicações oculares. / The purpose of this work was to develop a quantitative analysis that allows, in healthful and patient with visual loss, to separate registers with signal correlated with the visual stimulation, of the registers that contain noise. System VERIS Science v6.0.5d was used to extract kernel first-class of the registers, and posterior exportation of the data for analysis in the MATLAB. In this environment of programming was carried the analysis of the main components (PCA), that is used to reduce the dimensionalidad of the data conserving its variation and minimizing the influence of the noise; the signal-to-noise analysis (SNR) of the multifocal responses (mfERG) using cumulative distribution SNR carried through in two intervals of time, one understanding only the signal and another one only the noise, for classification of the valid, diminished or absent responses. We have found that in a group healthy subjects, the noise and signal SNR cumulative distributions have not overlapped and occupy distinct ranges of SNR values in all subjects. By using a 1% criterion for false positives and false negatives, it was possible to define the borders of noise, low response, and signal SNR ranges. We have also applied this protocol to a three subject with visual loss due to ocular toxoplasmosis scares. In this case, there was a degree of overlapping between the noise and signal SNR distributions. It was still possible to separate the noise, low response, and signal SNR range by using the confidence limits for the distance between noise and signal boundaries obtained from the group of healthy subjects. The results of SNR evaluation were then used to display the mfERG waveforms in topographical plots that discriminate between reliable responses (signal), low responses, and no responses (noise). Using this approach, features of retinal topography, such as the optic nerve head, are more easily discriminate, whilst artifacts such as an erroneous central peak, are more easily rejected. The combinations of PCA to reconstruct mfERG waveforms with SNR evaluation are useful tools to analyze retinal topography both in healthy and impaired conditions.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-10-16T17:25:12Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoInvitroEfeitos.pdf: 1226021 bytes, checksum: 04d04874e9e2a9c1dc6bb2c6529fdff8 (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-10-24T12:47:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoInvitroEfeitos.pdf: 1226021 bytes, checksum: 04d04874e9e2a9c1dc6bb2c6529fdff8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-24T12:47:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoInvitroEfeitos.pdf: 1226021 bytes, checksum: 04d04874e9e2a9c1dc6bb2c6529fdff8 (MD5) Previous issue date: 2011 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A amebíase caracteriza-se como uma doença crônica, não inflamatória, afebril que envolve a parede do intestino grosso podendo invadir a mucosa intestinal e se disseminar para outros órgãos, principalmente o fígado. A infecção por Entamoeba histolytica é tratada pelo metronidazol, mas este apresenta efeitos colaterais, por isso buscam-se medicamentos mais eficazes e que não tragam nenhum efeito adverso ao paciente. Além disso, o teste de novos fármacos pode revelar importantes particularidades do parasito, tais como a descoberta de vias metabólicas ou mesmo possíveis diferenças em sua estrutura. No presente trabalho foi testado o efeito amebicida do metronidazol, da dinitroanilina orizalina, uma droga inibidora de microtúbulos, da aquilfosfocolina miltefosina, que inibe a síntese de fosfolipídios de membrana, e da droga hibrida TC95, que apresenta os grupos funcionais dinitroanilina e alquilfosfocolina. Realizou-se cultura com trofozoítos do protozoário, onde as drogas e o controle com os diluentes foram adicionados após 7 horas de cultivo. Foi feita a contagem dos trofozoítos viáveis após período de 12 horas da adição das drogas e do controle em intervalos de 12 a 60 horas. Após análise das curvas de crescimento, detectou-se que o TC95 foi a droga mais efetiva dos três tratamentos, a miltefosina obteve pouca inibição e a orizalina não foi efetiva. Isso se deve a maior suscetibilidade do parasito a danos de membrana, com pouca efetividade da inibição dos microtúbulos. / Amebiasis is characterized as a chronic, noninflammatory, afebrile which involves the colon wall and can invade the intestinal mucosa and spread to other organs, especially the liver. Entamoeba histolytica infection is treated with metronidazole, but this one presents side effects, so researches have been done to find more effective drugs with no adverse effects to the patient. In addition, testing new drugs may reveal important features of the parasite, such as the discovery of metabolic pathways or possible differences in their structure. In the present study, it was tested the amoebicidal effect of metronidazole, dinitroaniline oryzalin, a microtubule inhibitor, miltefosine, an alkylphosphocholine, that inhibits the membrane phospholipids syntesis, and TC95, a hybrid drug that presents the functional groups dinitroaniline and alkylphosphocholine. It was performed a culture with protozoan trophozoites, where the drugs and the control with diluents were added after 7 hours of culture. It was made a count of the viable trophozoites 12 hours after the addition of the drugs and the control at intervals of 12 to 60 hours. After analyzing the growth curves, it was found that the TC95 was the most effective drug of the three treatments, miltefosine had little inhibition and oryzalin was not effective. This is due to greater susceptibility of the parasite to membrane damage, with little effectiveness on microtubules inhibition.