Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-09-09T13:55:37Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávia Regina Santos da Paixão - 2016.pdf: 2930650 bytes, checksum: 6e200c8af02d2dc239dc8ba36d5d8806 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-09-09T15:25:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávia Regina Santos da Paixão - 2016.pdf: 2930650 bytes, checksum: 6e200c8af02d2dc239dc8ba36d5d8806 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-09T15:25:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávia Regina Santos da Paixão - 2016.pdf: 2930650 bytes, checksum: 6e200c8af02d2dc239dc8ba36d5d8806 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-04-08 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Rhipicephalus microplus engorged females lay their eggs in shaded and humid areas on the soil; these areas seems favorable for entomopathogenic fungi development, where they could be applied for tick control. This study produced pellets based on microesclerotia (ME) of Metarhizium spp. (CG 47, CG 632, IP 46, IP 119, ARSEF 1883 and ARSEF 2575) and assessed their virulence toward R. microplus engorged females under laboratory conditions. Microsclerotia produced in specific liquid medium were processed for pelletization. Conidial production and viability of conidia from each formulated Metarhizium spp. was evaluated by distributing 0,003 g pellets 2% water-agar medium, and incubating them at 27 °C or 32 °C for 15 days. The results showed that the conidial production among isolates was similar at 27 °C or 32 °C, and the viability of the conidia was superior than 90% for conidia produced. Two bioassays were conducted for screening the virulence of isolates against R. microplus: the first one tested 0,007 g of pellets of each Metarhizium spp. isolate; the second one tested different concentrations of IP 119 pellets (0,002, to 0,006 g). Pellets were sprinkled on the surface of 5 g sterile oxisol in Petri dishes, moistened with 2 ml sterile-distilled water. Ten replicates were prepared for each fungal isolate. The plates with pellets were incubated for 15 days at 27 °C and RH > 90% to induce conidial production; plates from control groups did not receive pellets. A female was placed in each plate and monitored daily for 15 days for fungal conidiogenesis on ticks. At day 15, the egg mass was removed from each plate and transferred to a glass vial and incubated at 27 ± 1ºC to quantify the number of hatching larvae hatched. In both bioassays the fungal treatment reduced the oviposition period of females, as well as the number of hatching larvae. A bioassay was conducted with IP 47 and IP 119 at two different temperatures: 27 °C or 32 °C. CG 47 pellets incubated at 27 °C incited conidiogenesis on R. microplus females by day 5, whereas IP 119 iniciated conidiogenesis by day 9. Trials conducted at 32 C revealed conidiogenesis on R. microplus females between day 5 and 6 for both fungi. The number of larvae from females exposed to pellets of CG 47 and IP 119 was reduced.. Tests with pellets of ME produced with the different inert materials showed that pellets with vermiculite presented higher conidial production compared with the pellets prepared with cellulose. Therefore, these results together indicate that the pelletized formulation of ME of Metarhizium spp. was effective in controlling R. microplus under laboratory conditions by reducing the number of offspring. This formulation is a potential mycoacaricide, since the temperature and humidity conditions required for production of infective conidia are conducive to those required by this tick to lay eggsand hatching larva in the environment. / Fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus microplus procuram áreas sombreadas e úmidas no solo para realizar oviposição. Estes locais apresentam um microclima favorável para viabilizar o controle deste artrópode com fungos entomopatogênicos. O objetivo deste estudo foi produzir péletes à base de microescleródios (ME) de Metarhizium spp. (CG 47, CG 632, IP 46, IP 119, ARSEF 1883 e ARSEF 2575) e avaliar sua virulência sobre fêmeas ingurgitadas de R. microplus em condições de laboratório. Os péletes foram obtidos a partir de microescleródios produzidos em meio líquido específico e processados para peletização. A produção de conídios e a viabilidade de cada formulado de Metarhizium spp. foram observadas distribuindo-se 0, 03g de péletes em meio ágar-água 2%, e incubando-os a 27 ºC ou 32 ºC por 15 dias, resultados mostram que a produção de conídios pelo péletes dos isolados foi similar para a temperatura de 27 ºC, sendo a viabilidade dos conídios esporulados superior a 90% em e 32 ºC. Dois bioensaios para triagem da virulência dos isolados contra R. microplus foram conduzidos: o primeiro com 0,007 g de péletes de cada um dos isolados de Metarhizium spp. estudados; e o segundo com quantidades diferentes de péletes (0.002 a0,006 g) do isolado IP 119. Péletes foram distribuídos sobre a superfície de 5 g de latossolo vermelho estéril, em Placas de Petri, umedecido com 2 mL de água destilada estéril. Foram preparadas dez réplicas para cada isolado fúngico. As placas foram incubadas por 15 dias a 27°C e UR> 90% para induzir a produção de conídios a partir dos grânulos. Placas do grupo controle não foram acrescidas de péletes. Após este período, foi adicionada uma fêmea em cada placa e avaliou- se diretamente o início da conidiogênese sobre os carrapatos por 15 dias, e após este período a massa de ovos foi retirada das placas e acondicionada individualmente em tubos de vidro para posterior quantificação das larvas eclodidas. Em ambos os bioensaios, os tratamentos fungicos reduziram o período de oviposição das fêmeas, assim comoo número de larvas eclodidas. Resultado semelhante observado paradiferentes concentrações de péletes do isolado IP 119. Bioensaio similar à metodologia descrita foi conduzido somente com IP 119 e CG 47 em duas temperatura:s 27 ºC ou 32 ºC. Os resultados mostraram que a 27 ºC péletes formulados com ME de CG 47 iniciaram a conidiogênese em fêmeas de R. microplus em tempo médio de 5 dias, e IP 119 em 9 dias. Já os ensaios conduzidos a 32 ºC mostraram que a conidiogênese sobre as fêmeas de R. microplus iniciaram entre o 5° e 6° dia. Para ambos isolados o número médio de larvas eclodidas reduziram.(X 2 = 43.53; df = 2; P <0.001). Péletes de ME com inerte vermiculita apresentaram maior produção de conídios do que o formulado contendo celulose (P = 0,01). Os resultados do presente estudo indicam que a formulação peletizada de ME de Metarhizium spp. foi eficaz no controle de R. microplus em condições de laboratório por reduzir o número de progênies. Esta formulação merece atenção para desenvolver potencial carrapaticida biológico, visto que as condições de temperatura e umidade requeridas para produção de conídios infectivos são similares às requeridas por este carrapato para produção de ovos e eclosão das larvas no ambiente.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-09-27T19:13:57Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Guaraciara de Andrade Picanço - 2016.pdf: 2488180 bytes, checksum: d4bf0f4c94bf841c42ea4763fd1fcf0e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-09-28T12:22:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Guaraciara de Andrade Picanço - 2016.pdf: 2488180 bytes, checksum: d4bf0f4c94bf841c42ea4763fd1fcf0e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-28T12:22:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Guaraciara de Andrade Picanço - 2016.pdf: 2488180 bytes, checksum: d4bf0f4c94bf841c42ea4763fd1fcf0e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-08-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The high prevalence of intestinal and tissue parasites combined with the breakthrough of parasites resistat to albendazole, encouraged the search for new drugs. Studies on the biochemical response of Taenia crassiceps metacestode to drugs has been shown to be important for the detection of modes of action of drugs within the parasite metabolic pathways. In order to develop new anti-parasitic drugs, the benzimidazole derivative 6-Chloro-5- (2,3-dichlorophenoxy) -2- (trifluoromethyl) -1H-benzimidazole (RCB15) was synthesized. The objective of this study was to determine the in vitro effect of a benzimidazole derivative, RCB15, in the energetic and respiratory metabolism of T. crassiceps cysticerci. For this, 30 larval stage cysticerci were plated in culture plates containing supplemented RPMI and albendazole sulfoxide (ABZSO) (6,5 μM, 13 μM, 26 μM, 52 μM or 104 μM) or RCB15 (6,5 μM, 13 μM, 26 μM, 52 μM or 104 μM) diluted in dimethyl sulfoxide (DMSO). After 24 hours of cultivation, the cysticerci were separated from the culture medium and frozen in liquid nitrogen. Analysis on high-performance liquid chromatography to assess the energetic and respiratory metabolism were performed. There was a decrease in glucose concentrations detected in vesicular fluid in all groups treated with RCB15 and the groups treated with the highest dosages of ABZSO. The non detection of lactate in the culture medium of the groups treated with RCB15 indicates that this acid was used as a precursor of gluconeogenesis. The group treated with RCB15 52 uM performed the aerobic energetic pathways due to the non detection of lactate neither in the vesicular fluid nor in the culture medium. With respect to the tricarboxylic acid (TCA) cycle, low concentrations of α-ketoglutarate or non-detection of this organic acid, indicates that the parasite has preferably used the fumarate reductase pathway. Probably the detected α-ketoglutarate was from the protein catabolism. The alternative routes of energy production, were observed in the groups treated with RCB15 26 uM and 104 uM and ABZSO 13 uM. In those groups acetate was used to produce β-hydroxybutyrate which was completely excreted in other treatments and in the control group acetate was excreted due to excess of acetyl-CoA which was not used in the TCA cycle. It is possible to conclude that the TCB15 treatment influenced glycolysis, diminished the energetic sources as it induced the parasite to use other sources to produce energy such as gluconecogenesis and fatty acid oxidation. Cysticerci that were treated with RCB15 and ABZSO preferred the fumarate reductase pathway. The drugs used in this study did not influence the proteins catabolism. The RCB15 treatment presented greater influence in the glucose uptake and consequently in glycolytic pathway when compared to the ABZSO treatment. / A alta prevalência de parasitoses intestinais e teciduais aliada ao surgimento de casos de resistência parasitária ao albendazol, incentivou a busca por novos fármacos. Os estudos da resposta bioquímica de Taenia crassiceps exposto a fármacos tem se mostrado importante para a detecção dos mecanismos de ação dos fármacos sobre as vias metabólicas do parasito. A fim de desenvolver-se novos fármacos anti-parasitários, sintetizou-se o derivado benzimidazólico 6-Cloro-5-(2,3-diclorofenoxi)-2-(trifluorometil)-1H-benzimidazol (RCB15). O objetivo deste trabalho foi determinar o efeito in vitro do derivado benzimidazólico, RCB15, no metabolismo energético e respiratório de cisticercos de T. crassiceps. Para tanto, 30 cisticercos em estádio larval foram semeados em placas de cultura contendo meio RPMI suplementado e acrescido de sulfóxido de albendazol (ABZSO) (6,5 μM, 13 μM, 26 μM, 52 μM ou 104 μM) ou RCB15 (6,5 μM, 13 μM, 26 μM, 52 μM ou 104 μM) diluídos em Dimetilsulfóxido (DMSO). Após 24 horas de cultivo, os cisticercos foram separados do meio de cultura e ambos congelados em nitrogênio líquido. Foram realizadas análises em Cromatografia Líquida de Alta Eficiência para avaliação do metabolismo energético e respiratório dos cisticercos, e por espectrofotometria para dosar glicose, ureia, creatinina e proteínas totais. Observou-se uma diminuição nas concentrações de glicose detectada no fluído vesicular em todos os grupos tratados com RCB15 e nos grupos tratados com as dosagens mais altas de ABZSO. A não detecção de lactato no meio de cultura dos grupos tratados com RCB15 indica que este ácido foi utilizado como precursor da glicose na via da gliconeogênese, o grupo tratado com RCB15 52 μM fez aerobiose, isto é comprovado pelo fato de não haver lactato nem no fluido vesicular nem no meio de cultura. Com relação ao ciclo do ácido cítrico, as baixas concentrações de α-cetoglutarato ou a não detecção deste ácido, indicam que o parasito deu preferência pela via da fumarato-redutase, assim o α-cetoglutarato detectado foi oriundo do catabolismo de proteínas. Quanto as vias alternativas de produção de energia, observou-se que nos grupos tratados com RCB15 26 μM e 104 μM e com ABZSO 13 μM o acetato foi utilizado para produzir β-hidroxibutirato que foi totalmente excretado, nos demais tratamentos e no grupo controle o acetato foi excretado devido ao excesso de acetil-CoA que não foi utilizado no ciclo do ácido cítrico. Conclui-se que o tratamento com RCB15 influenciou a glicólise, diminuiu as fontes energéticas induzindo o parasito a utilizar outras vias para a produção de energia, tais como, a gliconeogênese e a oxidação de ácidos graxos. Os cisticercos que receberam o tratamento com RCB15 e ABZSO preferiram utilizar a via da fumarato redutase. Os compostos utilizados neste estudo não influenciaram no catabolismo de proteínas. O tratamento com RCB15 teve maior impacto na captação de glicose e consequente maior influência na via glicolítica em comparação ao ABZSO.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2017-05-18T17:57:20Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antonella Del Buono Guimarães - 2014.pdf: 3436476 bytes, checksum: 37a24402f8fa03abb2ca15c689cd1d2d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-05-19T10:35:38Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antonella Del Buono Guimarães - 2014.pdf: 3436476 bytes, checksum: 37a24402f8fa03abb2ca15c689cd1d2d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-19T10:35:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Antonella Del Buono Guimarães - 2014.pdf: 3436476 bytes, checksum: 37a24402f8fa03abb2ca15c689cd1d2d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2014-11-03 / Dengue has impact on public health of the intertropical regions of the world and its main vector Aedes aegypti. The measures most commonly used to control this vector, so far, are the synthetic insecticides, which applied on a large scale for a long period, did show resistance. Thus, chemical compounds from plants can be substitutes for synthetic insecticides, with the advantages of resistance retardation, due to the complexity of its components, easy degradation, lower toxicity to man and to be a safer alternative to the environment . Assays crude ethanol extract (cee) of Persea americana stem bark were performed in polystyrene cups, solutions containing 100 ppm of P. americana cee, previously dissolved in dimethylsulfoxide (DMSO) and water public Goiânia system. In each glass were placed 5 larvae of 3rd stage (L3) of the mosquito Aedes aegypti. The study was made of morfohistológic modifications from observations made with 4, 8, 12, 16, 20, 24 and 48 h treatment with the cee. In each period, the larvae were collected, fixed, dehydrated, infiltrated and embedded in historesin. of 3μm thick cuts were made in microtome semiautomatic, stained with hematoxylin / eosin (HE), analyzed and photomicrographed under a light microscope. For scanning electron microscopy (MEV) the treated and control larvae were fixed, dehydrated, dried in a critical point apparatus, metallized and analyzed in electron microscope. The morfohistológic changes were observed from 24 hours after treatment of larvae L3 with P. americana stem bark cee. The analysis of histological sections of the midgut of Ae. aegypti in light microscopy showed the presence of vacuoles in the cytoplasm of epithelial cells, large amount of secretion and folding of membrane peritrophic larvae treated for 48 hours. There was extrusion whole food content together with peritrophic matrix, thus suggesting the P.americana. toxic action on the gut of the larvae. These changes did not occur in the control group. There was no evidence of external changes by MEV. / A dengue apresenta impacto na saúde pública das regiões intertropicais do mundo e tem como principal vetor o Aedes aegypti. As medidas mais usadas no controle desse vetor, até o momento, são os inseticidas sintéticos, que aplicados em larga escala durante longo período, fez aparecer resistência. Diante disso, compostos químicos provenientes de plantas podem ser substitutos dos inseticidas sintéticos, com as vantagens do retardamento da resistência, devido à complexidade de seus constituintes, da fácil degradação, da menor toxicidade ao homem e por ser uma alternativa mais segura para o meio ambiente. Ensaios com extrato bruto etanólico (ebe) da casca do caule de Persea americana foram realizados em copos de poliestireno, contendo soluções a 100 ppm do ebe de P. americana, previamente dissolvido em dimetilsulfóxido (DMSO) e água do sistema público de Goiânia. Em cada copo foram colocadas 5 larvas de 3° estádio (L3) do mosquito Aedes aegypti. O estudo das modificações morfohistológicas foi feito a partir de observações realizadas com 4, 8, 12, 16, 20, 24 e 48 h de tratamento com o ebe. Em cada período, as larvas foram coletadas, fixadas, desidratadas, infiltradas e incluídas em historesina. Foram realizados cortes de 3μm de espessura em micrótomo semiautomático, corados pela hematoxilina/eosina (HE), analisados e fotomicrografados em microscópio de luz. Para microscopia eletrônica de varredura (MEV) as larvas tratadas e controle foram fixadas, desidratadas, secas em aparelho de ponto crítico, metalizadas e analisadas em microscópio eletrônico. As modificações morfohistológicas foram observadas a partir de 24h após o tratamento das larvas L3 com ebe de casca de caule de P. americana. As análises dos cortes histológicos do mesêntero de larvas de Ae. aegypti, em microscopia de luz, mostraram a presença de vacúolos no citoplasma das células epiteliais, grande quantidade de secreção e dobramentos da membrana peritrófica nas larvas tratadas por 48h. Houve extrusão de todo conteúdo alimentar juntamente com a matriz peritrófica, sugerindo assim a ação tóxica de P. americana sobre o tubo digestivo das larvas. Essas modificações não ocorreram no grupo controle. Não houve evidência de alterações externas pelo MEV.

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2017-07-03T12:10:07Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ana Carla Peixoto Guissoni - 2011.pdf: 1922127 bytes, checksum: 8ffe25b15ad2e7a9e502e8d12a607d26 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-07-10T11:35:51Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ana Carla Peixoto Guissoni - 2011.pdf: 1922127 bytes, checksum: 8ffe25b15ad2e7a9e502e8d12a607d26 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-10T11:35:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ana Carla Peixoto Guissoni - 2011.pdf: 1922127 bytes, checksum: 8ffe25b15ad2e7a9e502e8d12a607d26 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2011-02-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Feeding mosquitoes and disease vectors have been considered a major threat to global public health. The mosquito Aedes aegypti (Diptera, Culicidae) is the main vector of the four serotypes of dengue and urban yellow fever. Dengues is a viral human disease that is gradually becoming endemic in Central America and several South American countries. Nowadays, there is no specific antiviral drug for treatment and no vaccine available for prevention. The only available measure to interrupt transmission is vector control, which is done when potential breeding are eliminated with larvicides application in water recipients, and, in case of adult vectors, with insecticides dispersion though the air. However, the increasing resistance of populations of Ae. aegypti to current insecticides has made effective control hard to achieve. Besides, other serious problems have arisen because of their continued use, such as environmental and human toxicity, which, consequently, have encouraged the development of alternative mosquito control methods, less aggressive to humans and other living beings. Thus, compounds derived from plants have been considered good choice to be used as effective tools in controlling the vector, also as environmentally safe agents. After collecting and heating Anacardium occidentale L. fruits 40 ° C, the liquid obtained was tested to confirm its larvicidal activity. Then, it was fractionated by silica gel column. The fractionation resulted in eight fractions, which were coded as AO1 to AO8. In this paper, the Cashew Nut Shell Liquid (CNSL) and its fractions were evaluated for their biological activity in third instars’ larvae of Ae. aegypti. The residual effect of CNSL and its toxicity in laboratory animals (Rattus novergicos) were evaluated. Considering the CNSL, LC50 and LC90 of 6.55 and 10.98 ppm, respectively, were found in the laboratory. The active fractions, AO2 and AO3, presented LC50 and LC90 of 3.18 and of 7.80 ppm, and 3.57 and 10.47 ppm, respectively. The CNSL had residual effects until the 6th day and was shown to be nontoxic after oral subacute treatment in rats. / Mosquitos hematófagos, vetores de doenças, representam uma grande ameaça à saúde pública global. O mosquito Aedes aegypti (Diptera, Culicidae) é o principal vetor dos quatro sorotipos do vírus da dengue e da febre amarela urbana. A dengue é uma doença humana viral que está, gradualmente,tornando-se endêmica na América Central e em vários países sul-americanos. No momento não existem medicamentos antivirais específicos para seu tratamento e nenhuma vacina está disponível para prevenção. A única medida disponível para interromper a transmissão é o controle do vetor. Este é feito através da eliminação dos criadouros potenciais, aplicação de larvicidas em coleções de água e, para os adultos, aplicações espaciais de inseticidas. No entanto, a crescente resistência das populações de Ae. aegypti aos atuais inseticidas tem dificultado um eficiente controle. Além disso, outros problemas graves surgiram por seu uso contínuo, tais como a toxicidade ambiental e humana. Isto, consequentemente, aumentou a demanda pelo desenvolvimento de métodos alternativos para o controle do mosquito, que sejam menos agresivos para os humanos e outros seres vivos. Assim, os compostos derivados de plantas têm surgido como bons candidatos, não só como ferramentas eficazes no controle do vetor, mas também como agentes ambientalmente seguros. Após a coleta e aquecimento dos frutos de Anacardium occidentale L. a 40° C, obteve-se um líquido, conhecido como Líquido da Castanha do Caju (LCC), que depois de testado quanto à sua atividade larvicida em laboratório, foi fracionado em coluna de sílica gel. O fracionamento deu origem a oito frações, as quais foram codificadas como AO1 a AO8. Neste trabalho, o LCC, e suas frações foram avaliados quanto a sua atividade biológica em larvas de 3° estádio de Ae. aegypti Foi avaliado também o efeito residual do LCC e sua toxicidade em animais de laboratório (Rattus novergicos). Para o LCC foram encontradas CL50 e CL90 de 6,55 e 10,98 ppm, respectivamente. Já as frações ativas, AO2 e AO3, apresentaram CL50 e CL90 de 3,18 e 7,80 ppm, e 3,57 e 10,47ppm, respectivamente. O LCC apresentou efeito residual até o 6º dia e mostrou ser atóxico após tratamento subagudo via oral em ratos.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2017-07-03T21:14:49Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Vanessa Fernandes Carvalho - 2017.pdf: 1530180 bytes, checksum: c6d17beae996f702776fe8cf31bc7025 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-07-10T13:58:27Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Vanessa Fernandes Carvalho - 2017.pdf: 1530180 bytes, checksum: c6d17beae996f702776fe8cf31bc7025 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-10T13:58:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Vanessa Fernandes Carvalho - 2017.pdf: 1530180 bytes, checksum: c6d17beae996f702776fe8cf31bc7025 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-05-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The strongyloidiasis is a neglected disease with prevalence underestimated, is caused mainly by the Strongyloides stercoralis species, is usually asymptomatic but potentially fatal in immunocompromised individuals. It is an infection difficult to diagnose due to low and irregular elimination of larvae, and with a high impact on public health. Among the drugs available for the treatment of strongyloidiasis are albendazole and ivermectin, but due to the side effects and the development of resistance has sought new therapeutic alternatives for the control of the genus Strongyloides sp are being studied. In this context, the objective of this study was to evaluate the anthelmintic potential of the ethanolic extract, ethyl acetate fraction, aqueous fraction, and essential oil rich in alpha bisabolol of S. guianensis as well as of the alpha bisabolol isolated in the control of S. venezuelensis. We carried out the Eggs Hatching Tests (EHT) and Larval Motility Tests (LMT) initially with ethanolic extract, essential oil and alpha bisabolol isolated at concentrations of 0.2 to 1.0 mg/mL, and finally fractionated ethyl acetate and aqueous fractions of ethanolic extract at concentrations of 0.05 to 0.8 mg/mL were tested. We used as positive controls, albendazole in EHT and ivermectin in LMT and as negative controls, filtered water and DMSO 1%. Fresh feces of gerbils were used to perform the EHT and stool culture in vermiculite for LMT. Was incubated with 50μL of tested compounds with eggs or larvae containing approximately 50 specimens in eppendorf tubesfor TEO and TML. The tests were performed in duplicate with the reply, and after incubation at 28 °C for 48 hours was performed counting the specimens in the EHT, and LMT, counts were performed at intervals of 24, 48 and 72 hours. The counts in the two tests were perfomed under optical microscopy. All the substances tested showed positive ovicidal activity equivalent to the positive control, and caused changes in the morphology of eggs. Only ethyl acetate and aqueous fractions showed a concentration-dependent effect in egg assays. In the TML, there was no time dependent relationship, only the ethanolic extract and the aqueous fraction of S. guianensis presented efficiency equivalent to the positive control. With the exception of alpha bisabolol alone, the other compounds had a concentration-dependent effect on TML. The higher concentration of the ethanolic extract caused changes in the cuticle of the analyzed larvae. The phytochemical tests of the ethanolic extract showed the presence of phenolic compounds, tannins and flavonoids. It is suggested from the results that there is synergism between the chemical constituents of the different compounds analyzed in the TEO and TML, and the presence of tannins and flavonoids in the ethanolic extract and its fractions influenced the observed ovicidal and larvicidal activity. It is concluded that S. guianensis showed in vitro antiparasitic potential mainly of the ethanolic extract and its fractions in the different forms of S. venezuelensis. / A estrongiloidíase é uma doença negligenciada com prevalência subestimada ocasionada principalmente pela espécie Strongyloides stercoralis, geralmente é assintomática, mas potencialmente fatal em indivíduos imunocomprometidos. Trata-se de uma infecção de difícil diagnóstico devido a eliminação de larvas discreta e irregular, e com alto impacto em saúde pública. Dentre os medicamentos disponíveis para o tratamento da estrongiloidíase, estão o albendazol e ivermectina, mas devido aos efeitos colaterais e o desenvolvimento da resistência, tem-se buscado novas alternativas terapêuticas para o controle do gênero Strongyloides sp. Neste contexto, o objetivo do estudo foi avaliar o potencial anti-helmíntico do extrato etanólico, fração acetato de etila, fração aquosa e óleo essencial rico em alfa bisabolol de Siparuna guianensis bem como do alfa bisabolol isolado no controle de S. venezuelensis. Realizou-se Testes de Eclosão de Ovos (TEO) e Testes de Motilidade Larval (TML) inicialmente com o extrato etanólico, óleo essencial e alfa bisabolol isolado nas concentrações de 0,2 à 1,0 mg/mL e, por fim, foram testadas as frações acetato de etila e aquosa fracionadas do extrato etanólico nas concentrações de 0,05 à 0,8 mg/mL. Foram utilizados como controles positivos o albendazol no TEO e a ivermectina no TML e, como controles, água filtrada e DMSO 1%. Foram utilizadas fezes frescas de gerbilos para realização do TEO e cultura de fezes em vermiculita para o TML. Foi incubado 50 μL dos compostos testados com ovos ou larvas contendo aproximadamente 50 espécimes em tubos eppendorfs para o TEO e TML. Os testes foram feitos em duplicata com réplica, e após incubação à 28°C por 48 horas realizou-se a contagem dos espécimes no TEO, e no TML, as contagens foram realizadas em intervalos de 24, 48 e 72 horas. As contagens nos dois testes foram realizadas em microscopia óptica. Todas as substâncias testadas apresentaram atividade ovicida equivalente ao controle positivo e, provocaram alterações na morfologia dos ovos. Apenas as frações acetato de etila e aquosa apresentaram efeito concentração dependente nos ensaios com ovos. No TML, não houve relação tempo dependente, apenas o extrato etanólico e a fração aquosa de S. guianensis apresentou eficiência equivalente ao controle positivo. Com exceção do alfa bisabolol isolado, os demais compostos apresentaram efeito concentração dependente no TML. A maior concentração do extrato etanólico provocou alterações na cutícula das larvas analisadas. Os testes fitoquímicos do extrato etanólico mostraram a presença de compostos fenólicos, taninos e flavonoides. Infere-se a partir dos resultados que existe sinergismo entre os constituintes químicos dos diferentes compostos analisados no TEO e TML e, que a presença de taninos e flavonoides no extrato etanólico e em suas frações influenciou na atividade ovicida e larvicida observada. Conclui-se que S. guianensis apresentou in vitro potencialidade antiparasitária principalmente do extrato etanólico e suas frações nas diferentes formas de S. venezuelensis.

Avaliou-se o impacto da fragmentação florestal na diversidade de carrapatos de vida-livre e a presença de patógenos nestes carrapatos em remanescentes florestais do Pontal do Paranapanema, estado de São Paulo, Brasil. Estes fragmentos florestais abrigam uma rica e importante biodiversidade, com espécies endêmicas e ameaçadas como o mico-leão-preto (Leontopithecus chrysopygus), a anta (Tapirus terrestris), a onça pintada (Panthera onca), o macuco (Tinamus solitarius) e várias outras espécies de aves, mamíferos, répteis, anfíbios e peixes. Aproximadamente 90% das espécies de carrapatos parasitam exclusivamente hospedeiros selvagens. O restante pode ter animais domésticos e humanos como hospedeiros. Embora a maioria das pesquisas tenha sido dirigida a espécies de importância econômica, os carrapatos que parasitam animais selvagens possuem relevante papel na manutenção dos níveis de patógenos em populações de vida livre. Algumas destas espécies, por exemplo, demonstraram que podem parasitar hospedeiros não selvagens e promover o surgimento de zoonoses. Em habitats fragmentados, a diversidade de espécies vertebradas é menor se comparado a habitats com pouca alteração antrópica. Portanto, a fragmentação do habitat diminui a diversidade de espécies de carrapatos também. Para estudar a relação entre a fragmentação florestal e a ecologia das populações de carrapatos foram coletados carrapatos em 8 fragmentos florestais pelo método de arrasto de flanela e inspeção visual da vegetação. Os índices de comparação utilizados foram de similaridade de Jaccard, de diversidade de Shannon e complexidade do fragmento florestal de Patton. Utilizou-se o modelo de regressão linear para compara os índices de Shannon e Patton. Um total de 2149 ninfas de Amblyomma spp foi coletado e foram identificadas as espécies de 629 carrapatos. As espécies coletadas foram Amblyomma cajennense (94,28%), A. coelebs (1,59%), A. naponense (2,86%), A. ovale (0,64%), A. nodosum (0,32%), A. brasiliense (0,16%) e Haemaphysalis juxtakochi (0,16%). Nenhum indivíduo testado foi positivo pelo teste da hemolinfa. Os resultados mostraram uma tendência de correlação entre a fragmentação floresta, e a diversidade de espécies de carrapatos. / This study evaluated the impact of forest fragmentation on diversity of freeliving ticks and prevalence of tick pathogens in remaining forest fragments in the Pontal do Paranapanema, São Paulo state, Brazil. These forest fragments shelter rich and important biodiversity, with endemic and threatened species such as the black lion tamarin (Leontopithecus chrysopygus), the tapir (Tapirus terrestris), jaguar (Panthera onca), the solitary tinamou (Tinamus solitarius) and various other species of birds, mammals, reptiles, amphibians and fish. Approximately 90% of tick species parasitize exclusively wild hosts. The remainder can also have domestic animals and humans as hosts. Although most research has been directed to species of economic importance, ticks that parasitize wild animals are also relevant due to their role in maintaining enzootic pathogen levels in wild populations. Some of these species, for example, have been shown to cross-over onto non-wild hosts and promote emergent zoonoses. In fragmented habitats, the diversity of vertebrate species is normally lower than comparable habitats with minimal anthropic alteration. Thus, habitat fragmentation decreases the diversity of tick species too. To study the relationship between forest fragmentation and population ecology of ticks, ticks were collected in 8 forest fragments using dragging and visual inspection of vegetation. The index used were Jaccard´s similarity, diversity f Shannon and Patton. The linear regression model was used to compare Shannon and Patton indexes. A total of 2149 nymphs of Amblyomma spp. And 629 identified ticks was collected. The species of ticks collected was Amblyomma cajennense (94,28%), A. coelebs (1,59%), A. naponense (2,86%), A. ovale (0,64%), A. nodosum (0,32%), A. brasiliense (0,16%) e Haemaphysalis juxtakochi (0,16%). All ticks were negative by hemolimph test. The results showed a tendency of correlation between forest fragmentation and diversity of tick species.

Submitted by Wagner Junior (wagner.junior@unioeste.br) on 2018-07-13T13:02:06Z No. of bitstreams: 2 Arthur_Luiz_de_Campos_Ferreira_2018.pdf: 1661664 bytes, checksum: f502ff8c11371cc8b8ac88b197880532 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-13T13:02:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Arthur_Luiz_de_Campos_Ferreira_2018.pdf: 1661664 bytes, checksum: f502ff8c11371cc8b8ac88b197880532 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-02-27 / Foz do Iguassu, located on the triple frontier, has characteristics that results from series of transformations which occurred mainly in the 70's and 90's. These transformations affected distinct aspects of the local reality, such as job creation and unbridled population growth. Due to this, many women were inserted in the labour market, leaving their children in the Municipal Centers for Children's Education (CMEIs). Many children spend a large time of their time in these institutions, which plays an important role in developing children’s intellectual, physical, social and psychological. Unfortunately, however, these children attending CMEIs are more susceptible to infections, due to direct interpersonal contact provided by these collective environments. The intestinal parasitoses are considered a serious public health problem in Brazil, occurring predominantly in areas with hygienic-sanitary precarious conditions and human clusters. Intestinal parasites have close relationship with socio-demographic and environmental factors. Capable of causing diarrhea, anemia and malnutrition, compromising physical and intellectual development, especially in children. Thus, this study objective is to verify the frequency of intestinal parasitosis in children of two Municipal Centers for Children's Education from Foz do Iguassu, State of Parana, in areas socioeconomically developed, and evaluate socioeconomic aspects, sanitary aspects and hygienist aspects of the children studied and their guardians. The present study is a field research which addresses a quantitative approach. The population of this study was consisted of all pre-school children, aged 3 to 5 years, enrolled in CMEIs A and B, and their parents and/or guardians where it was worked with convenience sampling. A parasitological examination of feces was collected and later processed in the Environmental Laboratory located in Itaipu Hydroelectric Power Plant, using Hoffmann Spontaneous Sedimentation Method and techniques of centrifugation-flotation by saturated solution of zinc sulfate (Faust). Furthermore, a questionnaire with 19 closed questions regarding socioeconomic and hygienic-sanitary conditions was applied to children’s parents and/or guardians. The data were analyzed by the BioEstat 5.3® program and, considering the level of significance in 5%. A total of 96 fecal samples were analyzed between September and November 2016. The prevalence of intestinal parasites was 17.7%, the most frequent being Endolimax nana (12.5%) and Giardia duodenalis (6.2%), in addition to a case of biparasitism (1.1%), and without a presence of helminths. The most affected groups of children were male (64.7%) and aged 5 years (41.2%). The socioeconomic profile showed that the schooling level of the parents who the children were parasitized was that 35.3% had completed high school (p> 0.05), and 35.3% had incomplete high school education (p> 0.05); 35.3% with family income of 2 to 3 minimum salary (p> 0.05); 100.0% (p <0.05) of the families received tap water, 58.8% (p <0.05) treated with chlorine, and 76.4% (p <0.05) their human waste through the sewage system; about children's hygiene habits, 94.1% (p <0.05) washed their hands before eating and after using the toilet, and 11.7% washed their hands only with water; regarding health care of these children, 70.6% (p> 0.05) had already had parasitological feces examination, only 11.7% (p <0.05) of the parasitized children had abdominal pain, nausea or frequent vomit, 5.8% (p <0.05) had weight loss, 70.6% (p <0.05) had formed feces and in 88.2% (p <0.05) of the cases already had used anti-parasitic. These variants may have influenced the low frequency of parasitism. However, the highlighted number for the low frequency of parasitoses related to the characteristics of personal hygiene and food habits, where that 70.6% (p <0.05) washed their hands after changing diapers and washed with only water the raw consumed food, and 17.6% (p <0.05) reported having a home garden. The study showed a low prevalence of intestinal parasites in children due to the favorable conditions of sanitation found in the houses. Even though the presence of a non-pathogenic parasite such as Endolimax nana is prevalent, its notification is important, because it has the same transmission mechanism of pathogenic parasites. Considering that the use of anti-parasites without medical prescription, the population orientation, mainly in relation to the risk of self-medication and sanitary education, is necessary. / Foz do Iguaçu, ubicada en región de Tríplice Frontera, posee características resultantes de una serie de transformaciones que ocurrieron principalmente en las décadas del 70 al 90. Transformaciones que afectaron diferentes aspectos de la realidad local, como la generación de empleos y el crecimiento poblacional desenfrenado. Debido a esto, muchas mujeres fueron insertadas en el mercado de trabajo, dejando a sus niños en los Centros Municipales de Educación Infantil (CMEIs). Muchos niños pasan buena parte de su tiempo en esas instituciones, que tienen un papel relevante en el desarrollo intelectual, físico, social y psicológico de los niños. Pero, desafortunadamente, estos niños que van a los CMEIs son más susceptibles a las infecciones, debido al gran contacto interpersonal propiciado por esos ambientes colectivos. Las parasitosis intestinales son consideradas un grave problema de salud pública en Brasil, prevaleciendo en áreas con condiciones higiénico-sanitarias precarias y aglomerados humanos. Los parásitos intestinales poseen una estrecha relación con factores sociodemográficos y ambientales. Son capaces de ocasionar diarrea, anemia y desnutrición, comprometiendo el desarrollo físico e intelectual, principalmente en niños. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue verificar la frecuencia de parasitosis intestinales en los niños de dos Centros Municipales de Educación Infantil del Municipio de Foz do Iguaçu / PR en áreas socioeconomicamente desarrolladas, y evaluar los aspectos socioeconómicos, sanitarios e higiénicos de los niños estudiados y de sus responsables. Se trata de una investigación de campo, de enfoque cuantitativo. La población del estudio fue constituida de todos los niños con edad preescolar de 3 a 5 años, matriculados en los CMEIs A y B, y de sus padres y / o responsables, donde se trabajó con muestreo de conveniencia. Se realizó la colecta de examen parasitológico de heces y posteriormente procesadas en el Laboratorio Ambiental de la Usina Hidroeléctrica de Itaipu, utilizando los métodos de sedimentación espontánea de Hoffmann y por el método de Centrifugación y Fluctuación en el Sulfato de Zinc (Faust). Además, un cuestionario con 19 preguntas cerradas referentes a las condiciones socioeconómicas e higiénico-sanitarias fue aplicado a los padres y / o responsables de los niños. Los datos fueron analizados por el programa BioEstat 5.3®. y se consideró el nivel de significancia en 5%. Se analizaron 96 muestras fecales en el período de septiembre a noviembre de 2016. La prevalencia de parásitos intestinales fue de 17,7%, siendo los más frecuentes Endolimax nana (12.5%) y Giardia duodenalis (6.2%), sumados a éstos un caso de biparasitismo (1.1%), y sin presencia de helmintos. Los grupos de niños más acometidos fueron del sexo masculino (64.7%) y en el grupo de edad de 5 años (41.2%). El perfil socioeconómico reveló que el grado de escolaridad de los padres de los niños parasitados fue que 35.3% poseía una educación secundaria completa (p> 0,05), y 35.3% de las madres secundaria incompleta (p> 0.05); 35.3% con renta familiar de 2 a 3 salarios mínimos (p> 0.05); en la estructura residencial, el 100.0% (p <0,05) de las familias recibían agua potable, 58.8% (p <0.05) tratada con cloro, y el 76.4% (p <0.05) eliminaban sus desechos por medio de la red de alcantarilla; de los hábitos de higiene de los niños, 94.1% (p <0.05) lavaban las manos antes de comer y después del uso del inodoro, y el 11.7% lavaban las manos solamente con agua; Cuanto a la atención a la salud de estos niños, 70.6% (p> 0.05) ya habían realizado un examen parasitológico de heces, sólo 11.7% (p <0.05) de los niños parasitados tenían dolor abdominal, náuseas o vómito con frecuencia. En la mayoría de los casos, 5.8% (p <0.05) tenían pérdida de peso, 70.6% (p <0.05) tenían las heces formadas y en 88.2% (p <0.05) ya habían hecho uso de antiparasitario. Estas variables pueden haber influenciado para la baja frecuencia de parasitismo. Sin embargo, el número evidenciado para la baja frecuencia de parasitosis se relacionó con las características de los hábitos de higiene personal y alimentar de los responsables, donde 70.6% (p <0.05) se lavaban las manos después del cambio de pañales y lavaban solamente con agua los alimentos consumidos crudos, y 17.6% (p<0.05) señalaron tener huerta en casa. El estudio evidenció una baja prevalencia de parásitos intestinales en los niños debido a las condiciones favorables de saneamiento encontrada en las viviendas. Aunque la presencia de un parásito no patogénico como el Endolimax nana sea prevalente, su notificación es importante, ya que posee el mismo mecanismo de transmisión de parásitos patógenos. En vista del uso de antiparasitarios sin prescripción médica, la orientación a la población, principalmente en relación al riesgo de la automedicación y educación sanitaria, se hace necesaria. / Foz do Iguaçu, localizada em região de Tríplice Fronteira, possui características resultantes de uma série de transformações que ocorreram principalmente nas décadas de 70 a 90. Transformações essas que afetaram diferentes aspectos da realidade local, como a geração de empregos e o crescimento populacional desenfreado. Devido a isso, muitas mulheres foram inseridas no mercado de trabalho, deixando suas crianças nos Centros Municipais de Educação Infantil (CMEIs). Muitas crianças passam boa parte do seu tempo nessas instituições, que têm papel relevante no desenvolvimento intelectual, físico, social e psicológico das crianças. Porém, infelizmente, essas crianças que frequentam os CMEIs estão mais suscetíveis às infecções, devido ao grande contato interpessoal propiciado por esses ambientes coletivos. As parasitoses intestinais são consideradas um grave problema de saúde pública no Brasil, prevalecendo em áreas com condições higiênico-sanitárias precárias e aglomerados humanos. Os parasitos intestinais possuem uma estreita relação com fatores sociodemográficos e ambientais. São capazes de ocasionar diarreia, anemia e desnutrição, comprometendo o desenvolvimento físico e intelectual, principalmente em crianças. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi verificar a frequência de parasitoses intestinais nas crianças de dois Centros Municipais de Educação Infantil do Município de Foz do Iguaçu/PR em áreas socioeconomicamente desenvolvidas, e avaliar os aspectos sócioeconômicos, sanitários e higiênicos das crianças estudadas e de seus responsáveis. Trata-se de uma pesquisa de campo, de abordagem quantitativa. A população do estudo foi constituída de todas as crianças com idade pré-escolar de 3 a 5 anos, matriculadas nos CMEIs A e B, e de seus pais e/ou responsáveis onde se trabalhou com amostragem de conveniência. Foi realizada a coleta de exame parasitológico de fezes e posteriormente processadas no Laboratório Ambiental da Usina Hidrelétrica de Itaipu, utilizando os métodos de sedimentação espontânea de Hoffmann e pelo método de Centrifugação e Flutuação no Sulfato de Zinco (Faust). Além disso, um questionário com 19 perguntas fechadas referentes às condições sócioeconômicas e higiênico-sanitárias foi aplicado aos pais e/ou responsáveis das crianças. Os dados foram analisados pelo programa BioEstat 5.3® e, considerado o nível de significância em 5%. Foram analisadas 96 amostras fecais no período de setembro a novembro de 2016. A prevalência de parasitos intestinais foi de 17,7%, sendo os mais frequentes Endolimax nana (12,5%) e Giardia duodenalis (6,2%), somado a estes um caso de biparasitismo (1,1%), e sem presença de helmintos. Os grupos de crianças mais acometidas foram o sexo masculino (64,7%) e na faixa etária de 5 anos (41,2%). O perfil sócioeconômico revelou que o grau de escolaridade dos pais das crianças parasitadas foi que 35,3% possuiam ensino médio completo (p>0,05), e 35,3% das mães ensino médio incompleto (p>0,05); 35,3% com renda familiar de 2 a 3 salários mínimos (p>0,05); sobre a estrutura residencial, 100,0% (p<0,05) das famílias recebiam água encanada, 58,8% (p<0,05) tratada com cloro, e 76,4% (p<0,05) eliminavam seus dejetos por meio da rede de esgoto; dos hábitos de higiene das crianças, 94,1% (p<,0,05) lavavam as mãos antes de comer e após o uso do vaso sanitário, e 11,7% lavavam as mãos somente com água; quanto a atenção à saúde dessas crianças, 70,6% (p>0,05) já haviam realizado exame parasitológico de fezes, somente 11,7% (p<0,05) das crianças parasitadas tinham dor abdominal, náuseas ou vômito com frequência, 5,8% (p<0,05) tinham perda de peso, 70,6% (p<0,05) tinham as fezes formadas e em 88,2% (p<0,05) já haviam feito uso de antiparasitário. Estas variáveis podem ter influenciado para a baixa frequência de parasitismo. No entanto, o número evidenciado para a baixa frequência de parasitoses foi relacionada às características dos hábitos de higiene pessoal e alimentar dos responsáveis, onde 70,6% (p<0,05) lavavam as mãos após a troca de fralda e lavavam somente com água os alimentos consumidos crus, e 17,6% (p<0,05) assinalaram ter horta em casa. O estudo evidenciou uma baixa prevalência de parasitos intestinais nas crianças devido as condições favoráveis de saneamento encontrada nas moradias. Mesmo que a presença de um parasito não patogênico como o Endolimax nana seja prevalente, sua notificação é importante, já que possui o mesmo mecanismo de transmissão de parasitos patogênicos. Tendo em vista o uso de antiparasitários sem prescrição médica, a orientação da população principalmente em relação ao risco da automedicação e educação sanitária, se faz necessária.

Membros do gênero Rhinebothroides são parasitas exclusivos de potamotrigonídeos, elasmobrânquios de água doce endêmicos da região Neotropical. Atualmente, seis espécies são reconhecidas para este gênero dentre as oito espécies nominais disponíveis. A taxonomia de Rhinebothroides é convoluta, pois a maioria de suas espécies são diagnosticadas por caracteres morfométricos e merísticos definidos por estudos que desconsideram a variabilidade intraespecífica destas linhagens. A ampla distribuição de algumas espécies, bem como seus padrões generalistas de especificidade padrão este discrepante em relação à tetrafilídeos marinhos sugere a existência de complexos de espécies que requerem melhor refinamento taxonômico. Este estudo visa refinar a taxonomia de um destes complexos Rhinebothroides freitasi, no qual estão inseridas outras 3 especies nominais (R. campbelli, R. circularisi, R. venezuelensis) cujas circunscrições são ambíguas. Neste estudo, partiuse da premissa de que a conjunção de dados moleculares e morfológicos pode elucidar a taxonomia deste complexo. Com este objetivo, dados moleculares para os genes 28S, ITS1 e COI foram compilados para 57 haplótipos de Rhinebothroides representando todas as espécies válidas para o gênero e a ampla distribuição biogeográfica no gênero nas bacias hidrográficas brasileiras. A otimização direta das sequências nucleotídicas destes haplótipos concatenadas com outros 26 terminais que incluem linhagens de tetrafilídeos marinhos e de água doce, resultou em cinco clados de Rhinebothroides que possuem morfologia congruente com a série tipo de cinco espécies nominais. Desta forma, este estudo reconhece cinco espécies de Rhinebothroides como válidas: R. glandularis, R. freitasi, R. moralarai, R. scorzai e R. venezuelensis. Dentre as espécies do complexo R. freitasi, os dados morfológicos compilados para ~ 400 indivíduos permitiu delimitar os níveis de variabilidade morfológica de R. freitasi e R. venezuelensis. A representatividade biogeográfica e de hospedeiros contemplada neste estudo revela que, ao contrário das linhagens de tetrafilídeos marinhos, membros de Rhinebothroides possuem baixa especificidade aos seus hospedeiros. / Members of Rhinebothroides are parasites of the Neotropical freshwater stingrays of the family Potamotrygonidae. To date, six species are recognized for the genus within which there are eight nominal species available. The taxonomy of Rhinebothroides is confusing, since most of its species are currently diagnosed by morphometric and meristic characters that have been defined by studies that disregarded the intraspecific variability of its lineages. The widespread distribution of some species, as well as their relaxed host specificity pattern which differs from what has been documented for marine tetraphyllideans suggests the existence of species complexes that require taxonomic refinement. This study aims at refining the taxonomy of one of these complexes Rhinebothroides freitasi, in which are included other three nominal species (R. campbelli, R. circularisi, R. venezuelensis) circumscribed ambiguously. In this study, it has been assumed that the combination of molecular and morphological data can shed some light on the taxonomic status of this complex. Within this framework, molecular data were compiled for 28S, ITS1, and COI for 57 haplotypes of Rhinebothroides representing all currently valid species within the genus and their biogeographical distribution along the major Brazilian river basins. The direct optimization of nucleotide sequences from these haplotypes, simultaneously analised with 26 terminals which included marine and freshwater lineages of tetraphyllideans, generated a phylogenetic hypothesis that recognized five major clades within Rhinebothroides. Each of these clades are morphologically congruent with the type series of five nominal species. Therefore, this study recognizes five valid species within Rhinebothroides: R. glandularis, R. freitasi, R. moralarai, R. scorzai, and R. venezuelensis. Within the R. freitasi complex, the compiled morphological data for ~ 400 specimens provided a robust assessment of intraspecific variability for R. freitasi and R. venezuelensis. The biogeographic and host extensive sampling available for this study reveals that members of Rhinebothroides show low host specificity, as opposed to the marine tetraphyllidean lineages.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-06-22T17:12:01Z No. of bitstreams: 1 2015 - Zeneida Teixeira Pinto.pdf: 2580042 bytes, checksum: 0224e4e1200e83ae2a5e09bfaf7ca97d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-22T17:12:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015 - Zeneida Teixeira Pinto.pdf: 2580042 bytes, checksum: 0224e4e1200e83ae2a5e09bfaf7ca97d (MD5) Previous issue date: 2015-02-10 / CAPES / The muscoid flies have important public health because it acts as a mechanical vector of pathogens (bacteria, viruses, helminth eggs) and cause secondary myiasis in humans and animals. Chemical insecticides have been of great importance in the control of synanthropic flies, but have great persistence and a broad spectrum of action, causing a prolonged impact on the environment. An alternative way to this type of control are secondary metabolites of plants, which are considered the active principle of natural insecticides. This study was divided into two chapters that approached the the theme of natural control. The first chapter is related to the essential oil chemical composition of Cymbopogon citratus collected d in Brazil and Cuba, and evaluation of oil and its major component citral against the post-embryonic development of Musca domestica, Chrysomya putoria, C. megacephala and Lucilia cuprina. The chemical analysis of the essential oils allowed the identification of 13 and 12 chemical components, respectively, and in both the major components were the isomers Neral (35.21% ? Cuba) (36.37% - Brazil) and Geranial (53.2% - Brazil) (51.14% - Cuba) and, Myrcene (6.52%), in a smaller proportion, was only found in Cuban oil. The results show that there were no differences between the activity of Cuban oil and Brazilian. The post-embryonic period of L. cuprina, M. domestica and C. megacephala elongated with the treatment with both oils, but it shortened the larval and neolarva to adult periods for C. putoria. All groups presented morphological alterations. The results of the the test showed that C. megacephala was the most sensitive species killing 73% in larval stage and 77% in newly-hatched larvae to adult and less sensitive was C. putoria with 40% mortality in the larval stage and 57% in newly-hatched larvae to adult. Citral shortened post-embryonic development period (larval, pupal and newly hatched larvae to adult) of M. domestica, L. cuprina and C. megacephala but C. putoria was delayed. In the second chapter, the aim was to analyze the chemical composition and insecticidal effect of the essential oils extracted from leaves of Pinus caribaea Morelet collected in Brazil and Cuba and the terpene Caryophyllene, on the post- embryonic development of the species Musca domestica, Chrysomya megacephala, C. putoria e Lucilia cuprina. Twelve components were identified in the essential oil of P. cariabea collected in Brazil, and ? Phellandrene and Germacren D and (E) Caryophyllene were the major components, with relative areas of 39.57, 26.57 and 16.85% respectively. In comparison, 20 components were identified from the essential oil of the same species originated from Cuba with the major components, Germacrene D (48.25%), o ?-Phellandrene (12.10%) and Caryophyllene Oxide (12.41%). Caryophyllene was more toxic to M. domestica with an 87% of mortality for the newly hatched larvae to adult, the less affected species were L. cuprina and C. megacephala with 83% of mortality and for C. putoria the mortality was 63%. The post-embryonic development period was shortened in the species M. domestica, L. cuprina and C. megacephala and prolonged in C. putoria. The pupal weight was reduced in most species except in C. putoria that it had increased; there was no change in the sex ratio in the species in the study. / Os d?pteros muscoides apresentam import?ncia em sa?de p?blica, pois atua como vetor mec?nico de pat?genos (bact?rias, v?rus, ovos de helmintos), al?m de causar mi?ases secund?rias no homem e nos animais. Os inseticidas qu?micos t?m sido de grande import?ncia no controle de d?pteros sinantr?picos, mas apresentam grande persist?ncia e um amplo espectro de a??o, causando um impacto prolongado ao ambiente. Uma forma alternativa a este tipo de controle s?o os metab?litos secund?rios de plantas, que s?o considerados o princ?pio ativo dos inseticidas naturais. O presente estudo foi dividido em dois cap?tulos que abordam o tema do controle natural. O primeiro cap?tulo foi relativo a analise da composi??o qu?mica do ?leo essencial de Cymbopogon citratus coletado no Brasil e Cuba, e da avalia??o do ?leo e do seu componente majorit?rio citral sob o desenvolvimento p?s-embrion?rio de Musca domestica, Chrysomya putoria, C. megacephala e Lucilia cuprina. A an?lise da composi?ao qu?mica dos ?leos essenciais (Brasil/Cuba), por Cromatografia Gasosa acoplada ao espectr?metro de massa (GC-EM), permitiu a identifica?ao de 13 e 12 componentes principais, respectivamente; nove deles comuns aos dois. Em ambos os ?leos, os principais componentes foram os is?meros geranial e neral, que, juntos, formam o composto citral. Esse corresponde a um total de 97,92%/Brasil e 97,69%/Cuba dos compostos identificados. O monoterpeno mirceno, observado na amostra cubana, apresentou grande abund?ncia relativa (6,52%). Os d?pteros foram submetidos a diferentes concentra??es do ?leo de C. citratus (5, 10, 25, 75 e 100%) (Brasil/Cuba). As subst?ncias foram aplicadas topicamente nas neolarvas (1?L/larva). N?o houve grandes diferen?as entre a atividade do ?leo cubano e brasileiro. As esp?cies L. cuprina, M. domestica, C. megacephala tiveram o seu per?odo p?s-embrion?rio aumentado pelos dois ?leos (Brasil/Cuba), por?m em C. putoria ela apresentou um encurtamento no per?odo larval e no per?odo de neolarva a adulto. Todos os grupos tratados apresentaram deformidades. Os resultados do teste com o monoterpeno Citral mostraram que C. megacephala foi a esp?cie mais sens?vel matando 73% no per?odo larval e 77% no per?odo de neolarva a adulto e a esp?cie menos sens?vel foi C. putoria que apresentou 40% de mortalidade no per?odo larval e 57% no per?odo de neolarva a adulto. O Citral encurtou o per?odo p?s-embrion?rio das esp?cies M. domestica, L. cuprina e C. megacephala, por?m na esp?cie C. putoria ele atrasou. No segundo cap?tulo objetivou analisar a composi??o qu?mica do ?leo essencial de Pinus caribaea coletado no Brasil e Cuba, e avaliar a sua a??o e a do seu componente cariofileno sob o desenvolvimento p?s-embrion?rio analise da composi??o qu?mica do ?leo essencial de Cymbopogon citratus coletado no Brasil e Cuba, e da avalia??o do ?leo e do seu componente majorit?rio citral sob o desenvolvimento p?s-embrion?rio de Musca domestica, Chrysomya putoria, C. megacephala e Lucilia cuprina. Para o ?leo essencial obtido das folhas de P. caribaea coletadas no Brasil foram identificadas 12 subst?ncias qu?micas, sendo o ?-Felandreno (39,57%), Germacreno D (26,57%) e (E) Cariofileno (16,85%) os majorit?rios. A an?lise do ?leo das folhas de P. cariabea provenientes de Cuba resultou na identifica??o de 20 subst?ncias, sendo o Germacreno D (48,25%), ?xido de Cariofileno (12,41%) e ? Felandreno (12,10%) Germacreno D (48,25%) os constituintes majorit?rios. O Cariofileno mostrou ser mais t?xico para M. domestica com uma mortalidade de 87% na fase de neolarva a adulto e as esp?cies menos afetadas foram L. cuprina e C. megacephala com 83% de mortalidade e para C. putoria a mortalidade observada foi de 63%. O per?odo p?s- embrion?rio foi encurtado nas esp?cies M. domestica, L. cuprina e C. megacephala e aumentado em C. putoria. O peso pupal foi reduzido na maioria das esp?cies com exce??o de C. putoria que teve ele aumentado e n?o houve altera??o na propor??o sexual nas esp?cies estudadas.

Orientador: Rodrigo Ramos Catharino / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-25T23:10:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_MonicaSiqueira_D.pdf: 2752694 bytes, checksum: 8012f1d5668a55e8fba463c5f394c113 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Com a grande incidência de resistência ao único fármaco utilizado no tratamento de esquistossomose, Praziquantel (PZQ), e relatos de diferentes níveis de virulência do parasita, o controle da doença tem se tornado cada vez mais difícil. Além disso, o método de diagnóstico convencional demanda tempo e grande preparo amostral. Num cenário clínico, quanto mais rápido o diagnóstico, maiores as chances de sucesso no tratamento da doença. Tendo em vista esse escopo, apresentamos uma nova plataforma "ômica" - a Parasitômica, que propõe o uso de metodologias simplificadas e de grande eficácia em termos de preparo de amostra e facilidade na aquisição de dados voltados a área de parasitologia, englobando diagnóstico, tratamento e elucidação de vias e mecanismos de ação. Amostras de diferentes cepas de Schistosoma mansoni, bem como diferentes estágios e tratamento com PZQ, foram analisadas através da técnica de espectrometria de massas por imagem (MALDI-MSI) e por alta resolução (ESI-HR-FTMS), pela integração de dados tanto analíticos quanto estatísticos. É possível a caracterização e diferenciação química de cada sexo e cepa do S. mansoni, bem como a visualização das alterações na composição molecular de vermes submetidos ao tratamento com PZQ. Tais resultados poderão ser úteis como potenciais alvos de novos fármacos. Nossos resultados também demonstram uma possível forma de futuro diagnóstico da esquistossomose pela análise da urina utilizando a parasitômica / Abstract: With the large incidence of resistance to the only drug used to schistosomiasis treatment, Praziquantel (PZQ), and reports of different levels of parasite virulence, disease control has become increasingly difficult. Furthermore, the conventional diagnosis method is time consuming and requires extensive sample preparation. In a clinical setting, the sooner the diagnosis is, the greater are the chances of successful disease treatment. Within this scope, we present a new "omic" platform ¿ Parasitomics, which proposes the use of simple and effective methods in terms of sample preparation and readiness of data acquisition focused on parasitology, including diagnosis, treatment and elucidation of pathways and mechanisms of action. Samples with different strains of Schistosoma mansoni, as well as different stages of life cycle and treatment with PZQ, were analyzed by mass spectrometry imaging (MALDI-MSI) and by high-resolution technology (ESI-HR-FTMS), through the integration of analytical and statistical data. Results have enabled the characterization and chemical differentiation of each sex and strain of S. mansoni, as well as the visualization of molecular composition changes in worms¿ body submitted to PZQ treatment. These results could be helpful on unraveling potential targets for new drugs. Our results also demonstrated a possible form of future schistosomiasis diagnosis by urine analysis using the parasitomics platform / Doutorado / Fisiopatologia Médica / Doutora em Ciências