Made available in DSpace on 2015-04-14T13:09:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 389286.pdf: 1859740 bytes, checksum: 5056bcedea79433eb88e0c64523c9659 (MD5) Previous issue date: 2007-03-26 / Angiostrongil?ase abdominal ? uma infec??o zoon?tica causada por Angiostrongylus costaricensis, um nemat?deo com uma localiza??o intra-vascular no mesent?rio. O diagn?stico ? realizado somente com exame patol?gico de fragmentos do tecido ressecado, durante o tratamento cir?rgico de curso cl?nico complicado (perfura??o intestinal e/ou obstru??o). M?todos de imunodiagn?stico mostram muitas dificuldades com rea??o cruzada de anticorpos e a diversidade de resposta humoral. Esfor?os t?m sido direcionados para uma contribui??o na identifica??o e purifica??o de ant?genos espec?ficos de parasitos no desenvolvimento de m?todos sorodiagn?sticos. No presente estudo, foi analisado o uso de uma prote?na recombinante de A. costaricensis, a prote?na de choque t?rmico (HSP 20), em ELISA como sorodiagn?stico. Um dos clones de cDNA, obtido e expresso como uma pequena prote?na de choque t?rmico HSP 20 com 147 amino?cidos, apresentou identidade com seq??ncias de pequenas prote?nas de choque t?rmico de outros nemat?deos. A seq??ncia correspondente foi sub-clonada no vetor de express?o pET-23a-d (+), utilizando a t?cnica de PCR para a constru??o da prote?na recombinante HSP 20. O alto n?vel de express?o de HSP 20 em Escherichia coli BL 21 (DE3), clonado no vetor de express?o, foi observado ap?s indu??o com 1 mM de IPTG a 37 ?C. A etapa da purifica??o do recombinante HSP 20 foi realizada com a resina de Ni-NTA. An?lise do Western blot utilizando soro de um paciente com diagn?stico confirmado para angiostrongil?ase abdominal, indicou que o produto de express?o purificado foi imunog?nico. A sensibilidade da HSP 20 foi de 33%. Entretanto, 100% de especificidade da prote?na recombinante sugere o uso de um painel de ant?genos, na tentativa de m?ltiplos testes de varredura, para um sorodiagn?stico melhor e preciso da angiostrongil?ase abdominal

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:33:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 442103.pdf: 1045106 bytes, checksum: c41cb173539d408ecd0b051fca78598e (MD5) Previous issue date: 2012-07-31 / Introduction: Heat shock proteins like mycobacterial HSP70 has a protective and anti-inflamatory activity in several animals models diseases, like arthritis and skin allograft. This protein can modulates both the innate and adaptative immune system. Objective: The aim of this study was evaluate the effect of HSP70 from M. tuberculosis on development of pulmonary allergic reponse in a mice model. Methods: Female BALBc mice with ovalbumin induced pulmonary disease received intraperitoneal inject or intranasal instillation of mycobacterium HSP70. Treg cell in lung tissue, inflammatory cells profiles and cytokines levels in broncalveolar lavage fluid was measured. Results: HSP70 show an inhibitory effect on pulmonary allergic response on mice. Eosinophils, IL-5 and IFN- levels was reduced in broncoalveolar lavage fluid in animals that received intranasal instillation of mycobacterial HSP70. Conclusion: Mycobacterial HSP70 can be efficiently used to treat airway allergic disorders. / Introdu??o: Algumas prote?nas de choque t?rmico, como a HSP 70 micobacteriana, apresentam propriedades anti-inflamat?rias e protetoras em modelos experimentais de doen?as como artrite e aloenxertos cut?neos. Essa prote?na pode modular tanto o sistema imune inato quanto o adaptativo. Objetivo: O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos da prote?na HSP70 de M. tuberculosis no desenvolvimento da resposta pulmonar al?rgica em um modelo experimental de asma al?rgica em camundongos. M?todos: camundongos BALB/c f?meas submetidos a um protocolo de indu??o de asma por ovalbumina foram expostos a prote?na HSP70 de M. tuberculosis atrav?s de diferentes vias de administra??o (intraperitoneal e intranasal). Foram analisados par?metros inflamat?rios (leuc?citos e citocinas IFN, IL-4, IL-5 e IL-10) no fluido do lavado broncoalveolar. Resultados: A administra??o de MtHSP70 intranasal reduziu significativamente o infiltrado inflamat?rio e os n?veis de IL-5 e IFN- no lavado broncoalveolar. Conclus?o: A prote?na HSP70 micobacteriana pode apresentar potencial aplica??o no tratamento da asma al?rgica.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 383317.pdf: 533302 bytes, checksum: d1c54ea34e0bdbcdd31f54bbce98b274 (MD5) Previous issue date: 2006-08-16 / Base te?rica - A doen?a obstrutiva severa de art?rias car?tidas (DOSAC) est? relacionada ? aterosclerose (ATC). Mecanismos de inflama??o e auto-imunidade podem influenciar o deflagramento da ATC. Neste contexto, incluem-se anticorpos antifosfol?pides (AAF), marcadores da s?ndrome antifosfolip?dica (SAF) e anticorpos contra prote?nas de choque t?rmico (anti-Hsp). A beta2-glicoprote?na I (beta2-gpI) e as Hsp de 60 e 65 kilodaltons (kDa) s?o mol?culas encontradas em ateromas. O relato ? o primeiro a incluir a pesquisa de IgA anticardiolipina (aCL), IgG/IgM/IgA antibeta2-gpI e anti-HSP em casu?sticas de DOSAC. Objetivo - Avaliar a associa??o, se alguma, entre ocorr?ncia de AAF/anti-Hsp e DOSAC. Pacientes e M?todos - Neste estudo de caso-controle, os casos consistiram de uma popula??o de pacientes com DOSAC (sintom?tica ou assintom?tica). A presen?a de DOSAC foi definida pela anamnese, exame f?sico, angiografia por resson?ncia nuclear magn?tica (ARM) e endarterectomia de car?tida. Os controles foram selecionados de enfermarias de ortopedia. Ambos os grupos foram avaliados quanto aos fatores de risco: idade, sexo, ra?a, hipertens?o arterial sist?mica (HAS), tabagismo, diabete mellitus (DM) e hipercolesterolemia. Anticorpos IgG/IgM/IgA aCL, IgG/IgM/IgA antibeta2-gpI, IgG anti-Hsp 60 kDa humana recombinante e IgG anti-Hsp 65 kDa de Mycobacterium bovis foram detectados atrav?s de ensaio enzim?tico. Para estimar o grau de associa??o dos anticorpos com DOSAC, raz?o de chances (odds ratios, OR) foram calculadas com seus respectivos IC 95%. Regress?o log?stica foi utilizada para ajuste de fatores de confus?o. Resultados - Entre os 57 casos e 93 controles estudados, a m?dia de idade foi de 66 + 8,7 anos nos casos e de 47,5 + 18,8 anos nos controles (P<0,001). A ra?a negra predominou no grupo controle. O sexo masculino foi mais freq?ente nos casos (61,4%), situa??o que se inverteu nos controles (49,5%). As presen?as de HAS (OR=21,0; IC95% 8,0 a 57,1; P<0,001) e de hipercolesterolemia (OR=25,5; IC95% 9,5 a 70,9; P<0,001) determinaram, entre os fatores de risco conhecidos, as mais fortes associa??es com DOSAC. Anticorpos IgA antibeta2-gpI foram detectados em 33,3% dos casos e em 9,7% dos controles (OR ajustado 4,7; IC95% 1,0 a 23,7; P=0,06). A freq??ncia dos outros anticorpos testados n?o diferiu significantemente em casos e controles. Conclus?o - N?o houve associa??o entre ocorr?ncia de aCL, IgG/IgM antibeta2- gpI, anti-Hsp e desfecho DOSAC. A presen?a de anticorpos IgA antibeta2-gpI se configurou como fator de risco independente para DOSAC (OR ajustado 4,7), embora com signific?ncia lim?trofe (P=0,06). A associa??o de IgA antibeta2-gpI com DOSAC pode representar um dos elos na rela??o auto-imunidade e aterosclerose carot?dea.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:36:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 396198.pdf: 1234420 bytes, checksum: 2569dfc6da636a910e7080bcc69999f5 (MD5) Previous issue date: 2007-08-29 / Base Te?rica:Os GIST s?o as neoplasias mesenquimais mais freq?entes do trato gastrointestinal.Os fatores de progn?stico relevantes dos GIST s?o: o tamanho do tumor, topografia e ?ndice mit?tico.Survivina ? uma prote?na inibidora da apoptose envolvida na regula??o do ciclo celular, normalmente expressa no n?cleo de c?lulas pluripotenciais e geralmente inexistente em tecido normais.Survivina possui alta expressividade em neoplasias epiteliais.A express?o de survivina em GIST ? desconhecida. M?todos: Amostras teciduais de 43 GIST foram analisadas atrav?s de estudo imunoistoqu?mico com m?todo TMA e utilizando anticorpo monoclonal para survivina com a t?cnica de avidina-biotina-peroxidase.O objetivo prim?rio foi determinar a preval?ncia da express?o de survivina nos GIST e definir sua associa??o com achados patol?gicos e evolu??o cl?nica.A express?o de survivina foi considerada positiva quando mais de 10% das c?lulas tumorais observadas em cinco campos de grande aumento apresentavam imunoreatividade. Resultados: Survivina foi expressa em 31 (72%) das 43 amostras.A predomin?ncia da express?o ocorreu no citoplasma enquanto que nenhuma reatividade nuclear foi encontrada. N?o houve associa??o entre a express?o de survivina e achados cl?nico-patol?gicos.Houve uma tend?ncia em favor da express?o de survivina e diminui??o para tempo para progress?o. Conclus?es:A preval?ncia de survivina em GIST ? semelhante ao anteriormente demonstrado em neoplasias epiteliais e mesenquimais.Os resultados do presente estudo sugerem que a inibi??o da apoptose mediada por survivina pode se tornar um fator de progn?stico em GIST.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-06-28T19:56:24Z No. of bitstreams: 1 DIS_ANA_HELENA_BRETANHA_LOPES_TORT_COMPLETO.pdf: 1228563 bytes, checksum: 1ae15f2eb2fe5ed55580c78c418cb7be (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-28T19:56:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_ANA_HELENA_BRETANHA_LOPES_TORT_COMPLETO.pdf: 1228563 bytes, checksum: 1ae15f2eb2fe5ed55580c78c418cb7be (MD5) Previous issue date: 2016-02-15 / Gliomas are primary tumors of the central nervous system that are associated with a high mortality rate; they course with an average survival rate of 2 years after the diagnosis. Less than 5 % of glioma patients survive more than five years after diagnosis, even those treated with state of the art protocols, which include surgery, radiotherapy and chemotherapy. Tumors result from impairments of intracellular signaling pathways, including the p38/MAPK pathway, which, are responsible to control of cell proliferation and tumorigenesis, among other cellular responses. The goal of the present work was to investigate the effects of ML3403, an inhibitor of p38/MAPK, on the viability and proliferation of glioma cells, and to assess its effect when combined with bevacizumab (BVZ). BVZ already used in the clinical setting as anadjuvant for treating gliomas. It is a monoclonal antibody against VEGF-A receptor and thus reduces the signaling involved in tumor angiogenesis. U138 and U251 glioma cells were treated with ML3403 (0.1 to 200 ?M) and BVZ (1 to 200 ?g/mL) and later assessedfor cell viability, by MTT method and proliferation by cell counting. The results demonstrate that treatment with ML3403 reduces glioma cell viability and proliferation. Co-treatment with BVZ does not present any significant effect. The use of p38/MAPK inhibitors may constitute an interesting treatment against glioma progression. / Por serem tumores prim?rios localizados no sistema nervoso central, os gliomas apresentam altas taxas de mortalidade com sobrevida m?dia de dois anos. Menos de 5% dos pacientes com gliomas sobrevivem mais de cinco anos ap?s o diagn?stico, mesmo com os tratamentos mais avan?ados, os quais envolvem cirurgia, radia??o e quimioterapia. Os tumores resultam de diferentes defeitos em vias de sinaliza??o intracelulares, incluindo a via p38/MAPK. Entre as respostas celulares mediadas pela fam?lia de p38/MAPK, destaca-se a regula??o da produ??o do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF). O objetivo deste trabalho foi investigar os efeitos de ML3403, um inibidor da p38/MAPK, sobre a viabilidade das c?lulas de glioma, e avaliar o seu efeito combinado com bevacizumab (BVZ). O BVZ, j? utilizado na cl?nica como adjuvante no tratamento de gliomas, ? um anticorpo monoclonal contra o receptor de VEGF-Ae reduz a sinaliza??o envolvida no processo de angiog?nese tumoral. As c?lulas de gliomas U138MG e U251MG foram tratadas com ML3403 (0,1 a 200?M) e BVZ (1 a 200 ?g/mL)e avaliadas para viabilidade celular, atrav?s do m?todo do MTT e prolifera??o celular, atrav?s da contagem do n?mero de c?lulas. Os resultados obtidos demonstraram redu??o da viabilidade e prolifera??o celular ap?s o tratamento com ML3403. O co-tratamento com BVZ n?o apresentou efeito aditivo. A utiliza??o de inibidores da via de sinaliza??o p38/MAPK pode ser considerada como um tratamento promissor na diminui??o do crescimento de gliomas.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:41:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AntonioMUA_DISSERT.pdf: 1696201 bytes, checksum: e2516f76e3d7b85984f386475f859b2b (MD5) Previous issue date: 2010-03-16 / Given the large existing biodiversity in the Brazilian coast, where many species are still little known, even under the nutritional aspect, and considering that bivalve molluscs are constituted by a natural resource of well accepted by the population, chose the bivalve Anadara notabilis, it was not found in the literature any nutritional or toxicological information about it and because its size is much larger than other species of mollusks commonly found in this region. Were studied moisture, ash, protein, macro and micro minerals, and metal ions of toxicological significance. All analytical determinations followed the standards of the Institute Adolfo Lutz. The protein determination was performed by the Kjeldahl method. All metal ions were determined by optical emission spectroscopy with inductively coupled plasma (ICP-OES) method described by USEPA 6010C. The results showed that Anadara notabilis can be introduced into food for human beings, in view of its mineral wealth. Noteworthy among the macronutrients phosphorus and magnesium showed that their values in mg / kg 918.7 and 586.7. With regard to micronutrients stand out with this iron 586.7 mg / kg and zinc with 12.31 mg / kg. Was not found high content of metal contaminants to this mollusc, which would prevent their use, only this chromium 0.7 mg / kg above the value established by Brazilian legislation. The results will certainly be very useful in future studies of nutrition and to build a table of chemical composition of Brazilian foods / Tendo em vista a grande biodiversidade existente no litoral brasileiro, onde muitas esp?cies ainda s?o pouco conhecidas, inclusive sob o aspecto nutricional, e considerando que os moluscos bivalves se constituem em um recurso natural de boa aceita??o pela popula??o mundial, escolheu-se o molusco bivalve Anadara notabilis, por n?o ter sido encontrado na literatura nenhuma informa??o nutricional ou toxicol?gica sobre ele e devido seu tamanho ser bem maior que outras esp?cies de moluscos mais popularmente encontrados nessa regi?o. Foram determinados neste trabalho teores de umidade, cinzas, prote?nas, macro e microminerais, al?m de ?ons met?licos de import?ncia toxicol?gica. Todas as determina??es seguiram as Normas Anal?ticas do Instituto Adolfo Lutz. A determina??o de prote?na foi realizada pelo m?todo de Kjeldahl. Todos os ?ons met?licos foram determinados por espectroscopia de emiss?o ?tica com plasma indutivamente acoplado (ICP-OES) descrito pela metodologia USEPA 6010C. Os resultados mostraram que a Anadara notabilis pode ser introduzida na alimenta??o dos seres humanos, tendo em vista sua riqueza mineral. Merecem destaque entre os macronutrientes o magn?sio e o f?sforo que apresentaram os respectivos valores em mg/kg 918,7 e 586,7. Com rela??o aos micronutrientes destacam-se o ferro presente com 586,7 mg/kg e o Zinco com 12,31 mg/kg. N?o foi encontrado ?ndice elevado de metais contaminantes para este molusco, o que impediria seu consumo, apenas o cromo esta 0,7 mg/kg acima do valor estabelecido pela legisla??o brasileira. Os resultados obtidos certamente ser?o muito ?teis em futuras pesquisas nutricionais e para constru??o de uma tabela brasileira de composi??o qu?mica de alimentos

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:42:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JanainaMS_DISSERT.pdf: 2554910 bytes, checksum: d85599b054d2087107ea358b21e64be5 (MD5) Previous issue date: 2011-06-28 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The process of salting and drying in the sun is used to preserve meat since the beginning of civilization. There is evidence that this preservation technique has arisen in Egypt, between 4,000 and 5,000 years ago. In our country, according to literature, was the first industrial product that gave the appearance of beef jerky, beef being produced, where about 70% to 75% of the muscle is composed of water, where it will be around 45% as a final product, according to the law in his article RIISPOA No. 432 provides that the jerky should contain no more than this amount of moisture in the muscular portion, or more than 15% of total ash with tolerance of up to 5% variation . Besides this parameter, proteins, lipids, ash, and minerals were analyzed in samples before and after the manufacturing process to know the content of these nutrients. Since these are considered important in product quality, thus the concentration in these samples, respectively, in the flesh Front (CD and CHD) before and after the manufacturing process for humidity were respectively 75.28% and 47.38% , the protein was 14.17 and 22.20 g / 100 g sample, 6.360 and 4.251 of lipids g/100g of the sample, and the ashes 0.974 9.144 g/100g sample, minerals like calcium and 4.074 30 , 06 ppm, s?dio0, 055 and 5.401 g / L, sodium chloride, 0.139 and 13.74 g / L, potassium 237.5 and 166.8 ppm, 1.721 and 3.295 ppm iron, 0.143 and 0.135 ppm phosphorus, zinc and 4.690 6.905 ppm; magn?sio14, 63 e13, 75 ppm manganese .017 e0, 007ppm, copper 0.057 and 0.039 ppm in the case of needle-type meat (CPA and CHPA), 68.04% and 44.17%, protein 13 , 72, and 24.42 g/100g of sample, 1.137 in the ash and 12.68 g / 100g of sample, and the minerals calcium 17.11 and 12.89 ppm; s?dio0, 123 and 4.871 g / L, sodium chloride 0.312 and 12.39 g / L, potassium 305.3 and 182.1 ppm; ferro1, 817 and 1.513 ppm, 0.273 and 0.139 ppm phosphorus, zinc 6.305 and 4.783 ppm, 27.95 and 15.85 ppm magnesium, manganese and 0.025 0.011 ppm, 0.057 and 0.143 ppm copper and chromium 0.014 and 0.068 ppm / O processo de salga e secagem ao sol ? utilizado para preservar carnes desde in?cio da civiliza??o. H? ind?cios de que essa t?cnica de conserva??o tenha surgido no Egito, entre 4.000 e 5.000 anos atr?s. No nosso pa?s, foi o primeiro produto industrializado que proporcionou o surgimento do charque, sendo produzido de carne bovina, com cerca de 70% a 75% do m?sculo constitu?da de ?gua, sendo que no charque restar? em torno de 45 % com toler?ncia at? 5% como produto final, exig?ncia da RIISPOA (Regulamento da Inspe??o Industrial e Sanit?ria de Produtos de Origem Animal). Al?m desse par?metro as prote?nas, os lip?deos, as cinzas, e os minerais foram analisados nas amostras antes e ap?s o processo de fabrica??o. Esses s?o considerados par?metros importantes na avalia??o da qualidade do produto, ent?o antes do processo t?m a carne do tipo dianteira (CD) e do tipo ponta de agulha (CPA) e ap?s a fabrica??o obt?m o charque do tipo dianteira (CHD) e do tipo ponta de agulha (CHPA), foram respectivamente para umidade de 75,28%e 47,38%; o de prote?nas foi de 14,17 e 22,20 g/ 100g de amostra; lip?deos de 6,360e4,251 g/100g de amostra; as cinzas 0,974 e9,144 g/100g de amostra, os minerais como c?lcio de 4,074 e 30,06ppm, s?dio0,055 e 5,401g/L; cloreto de s?dio 0,139 e 13,74g/L; pot?ssio 237,5 e166,8ppm; ferro 1,721 e 3,295ppm; f?sforo 0,143 e 0,135ppm; zinco 4,690 e6,905ppm; magn?sio14,63 e13,75 ppm ; mangan?s 0,017 e0,007ppm; cobre 0,057 e 0,039 ppm; no caso da carne tipo ponta de agulha (CPA e CHPA) , 68,04% e 44,17%; em prote?nas 13,72 e 24,42 g/100g de amostra, nas cinzas 1,137 e 12,68 g/ 100g de amostra, e nos minerais c?lcio 17,11 e12,89ppm; s?dio0,123 e 4,871g/L; cloreto de s?dio 0,312 e12,39g/L; pot?ssio 305,3 e 182,1 ppm; ferro1,817 e 1,513ppm; f?sforo 0,273 e0,139ppm; zinco 6,305 e 4,783ppm; magn?sio 27,95 e 15,85 ppm; mangan?s 0,025 e 0,011 ppm; cobre 0,057 e 0,143 ppm e cromo 0,014 e 0,068 ppm

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2016-10-04T19:57:29Z No. of bitstreams: 1 2006 - Elisangela Sousa de Araujo.pdf: 1061759 bytes, checksum: 865d0167431190cf5627ccdf21cf91fb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-04T19:57:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006 - Elisangela Sousa de Araujo.pdf: 1061759 bytes, checksum: 865d0167431190cf5627ccdf21cf91fb (MD5) Previous issue date: 2006-02-23 / FAPERJ / CAPES / Brazil is the country with the greatest plant genetic diversity in the world with the potential still underestimated what makes it necessary to characterize local genetic material. Genetic resources are studie in several stages and identify traits of agronomic value in hardy varieties is one of the roles of gene banks (BAG's). In rice, because it is a very important crop for the diet of the brazilian population, selecting genotypes with high yield, nutritional value and adapted to the most diverse environmental conditions is a continuous search for improvement programs. In this sense, the present study aimed to adapt methodologies for protein extraction reserve and DNA of rice seeds to be used in routine laboratory for characterization of germplasm banks. After optimization of methodologies, seeds of twenty local varieties of rice grown in the state of Maranh?o different times (Experiment I: Aug-2002 to Mar-2003 and Experiment II: Nov-2002 to Jun-2003) were analyzed for study of diversity genetic (DNA and protein) and seasonality effect on its accumulation of reserves and gross protein. The analysis of variance or protein content and protein fractions was highly significant (P <0.01) between genotypes and experiments. The mean protein fractions albumin+globulin and glutelin were higher in experiment I, whose average temperatures were 330C while the average gross protein (CP) was higher than in Experiment II in which the average temperature was 410C.Varieties analyzed, the Pingo d? ?gua (220019) and Jatob? (220012) showed the highest values for PB (11.32 and 11.13%) and glutelin (83.73 and 92.86 mg flour). The molecular characterization by RAPD was based on 37 polymorphic band sand phylogenetic analysis revealed a genetic diversity at 50% training with four groups and three separate varieties. Groups based on the varieties named Lageado and Zebu branco seems to have been the shape of the grains and reason C/L. / O Brasil ? o pa?s com a maior diversidade gen?tica vegetal do mundo com potencial ainda subestimado o que torna fundamental a caracteriza??o do material gen?tico local. Os recursos gen?ticos s?o estudados em v?rias etapas e identificar caracter?sticas de valor agron?mico em variedades r?sticas ? um dos pap?is dos bancos de germoplasma (BAG?s). Em arroz, por se tratar de uma cultura muito relevante para a dieta da popula??o brasileira, selecionar gen?tipos com alta produtividade, valor nutricional e adaptados ?s mais diversificadas condi??es ambientais ? uma busca cont?nua em programas de melhoramento. Nesse sentido, o presente trabalho teve por objetivos adaptar metodologias para extra??o de prote?na de reserva e de DNA de sementes de arroz a fim de serem empregadas na rotina de laborat?rio para caracteriza??o de bancos de germoplasma. Ap?s otimiza??o das metodologias, sementes de vinte variedades locais de arroz do Estado do Maranh?o cultivadas em ?pocas distintas (Experimento I: Ago-2002 a Mar-2003 e Experimento II: Nov-2002 Jun-2003) foram analisadas para fins de estudo de diversidade gen?tica (DNA e prote?na) e efeito da sazonalidade em seu ac?mulo de prote?na bruta e reserva. A an?lise de vari?ncia para teor de prote?na e fra??es proteicas foi altamente significativa (P<0,01) entre os gen?tipos, e os experimentos. As m?dias das fra??es proteicas albumina+globulina e glutelina foram superiores no experimento I, cujas temperaturas m?dias foram de 330C enquanto que a m?dia da prote?na bruta (PB) foi superior no Experimento II em que a m?dia de temperatura foi de 410C. Das variedades analisadas, a Pingo d??gua (220019) e Jatob? (220012) foram as que apresentaram os maiores valores para PB (11,32 e 11,13%) e glutelina (83,73 e 92,86 mg.g farinha). A caracteriza??o molecular pela RAPD foi baseada em 37 bandas polim?rficas e a an?lise filogen?tica revelou uma diversidade gen?tica em 50% com forma??o de quatro grupos e tr?s variedades isoladas. Os grupos formados pelas variedades de nome Lageado e Zebu branco parecem ter sido pela forma dos gr?os e raz?o C/L.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-08-31T19:17:42Z No. of bitstreams: 1 2016 - Francine Fran?a Monken.pdf: 2589456 bytes, checksum: 06c9e0d64d97d48b268dfd24bee047a6 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-31T19:17:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016 - Francine Fran?a Monken.pdf: 2589456 bytes, checksum: 06c9e0d64d97d48b268dfd24bee047a6 (MD5) Previous issue date: 2016-09-30 / CAPES / This study aimed determinate the chemical composition of raw secretions expelled by two species of Aparasphenodon genus from compounds isolation, purification and structural identification. For this, individuals of A. brunoi (n=5) e A. arapapa (n=3) were collected in Ilha da Marambaia, municipality of Mangaratiba (RJ), and in municipality of Ilh?us (BA), respectively. The secretions were obtained by smooth electric stimulus and were translucent and little viscous, with approximated yield of 4 mg of sample/individual. For each species, was realized chromatography of thin layer, the revelator reagent ninhydrin indicated presence of amine groups after violet color appearing. Samples than were submitted with the same retention time (0.88 and 1.44 min) in both analysis, indicating presence of similar compounds in both species. In same way, samples purification realized by semi preparative liquid chromatography of high efficiency presented the same fractions number for both species. The structural determination was made by LC-MS/MS only for A. brunoi and reveled high collagen incidence and other uncharacterized proteins. Biological assays were realized in concentrations of 1?g.mL-1 and 10?g.mL-1 for both species. The assay of cellular viability did not present survival reduction of yeast, such as dosing of lipid peroxidation that did not show reaction with malonaldehyde in all tested cases. In other hand, the assay of mitochondrial damage reveled toxicity in concentration of 10 ?g.mL-1, reducing for discreet form the cellular viability in both samples. We conclude that both species have proteins as the main compound and, in a cellular level, are not harmful in 1 ?g.mL-1, but can promote damage in 10 ?g.mL-1. Besides that, as reveled profiles to both extracts, both chemical and biological assays were very close, the existence of a pattern in chemical composition of cutaneous secretions in amphibians of the same genus can be reinforced, even that species be in distinct environmental conditions. / O presente estudo buscou determinar a composi??o qu?mica das secre??es brutas expelidas por duas esp?cies de Aparasphenodon, a partir do isolamento, purifica??o e identifica??o estrutural destes compostos. Para tal, indiv?duos de A.brunoi (n=5) e A.arapapa (n=3) foram coletados na Ilha da Marambaia, Mangaratiba (RJ) e no munic?pio de Ilh?us (BA), respectivamente. As secre??es foram obtidas por est?mulo el?trico suave e mostraram-se translucidas e pouco viscosas, com rendimento aproximado de 4 mg de amostra/indiv?duo. Para cada esp?cie, foi realizada cromatografia em camada delgada; o reagente revelador ninidrina indicou presen?a de grupos am?nicos ap?s aparecimento da cor violeta. As amostras foram ent?o submetidas ? cromatografia liquida de alta efici?ncia anal?tica, sendo detectados dois picos majorit?rios com mesmo tempo de reten??o (0,88 e 1,44 min) em ambas as an?lises, indicando assim a presen?a de compostos semelhantes nas duas esp?cies. Da mesma forma, a purifica??o das amostras realizada por cromatografia liquida de alta efici?ncia semi-preparativa apresentou o mesmo n?mero de fra??es para ambas as esp?cies. A determina??o estrutural foi determinada por LC-MS/MS apenas para A. brunoi e revelou alta incid?ncia de col?geno e outras prote?nas n?o caracterizadas. Os ensaios biol?gicos foram realizados nas concentra??es de 1 ?g.mL-1 e 10 ?g.mL-1 para ambas as esp?cies. O ensaio de viabilidade celular n?o apresentou redu??o da sobreviv?ncia das leveduras, assim como a dosagem de peroxida??o lip?dica n?o mostrou rea??o com malonalde?do, em todos os casos testados. Por outro lado, o ensaio de dano mitocondrial revelou toxicidade na concentra??o de 10 ?g.mL-1, reduzindo de forma discreta a viabilidade celular, em ambas as amostras. Conclu?mos ent?o que as duas esp?cies possuem prote?nas como seu principal componente e, a n?vel celular, n?o s?o nocivas em 1 ?g.mL-1, mas podem promover danos quando em 10 ?g.mL-1. Al?m disso, como os perfis revelados para ambos os extratos, tanto nos ensaios qu?micos como nos biol?gicos, foram muito pr?ximos, a exist?ncia de um padr?o na composi??o qu?mica das secre??es cut?neas em anf?bios de um mesmo g?nero pode ser refor?ada, ainda que as esp?cies se encontrem em condi??es ambientais distintas.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AlexandreCS_DISSERT.pdf: 2097840 bytes, checksum: 2cb282516c6ef3d0a5391ba33939b8a4 (MD5) Previous issue date: 2012-12-10 / Obesity is increasing, reaching epidemic levels in many regions of the world. Studies have shown that consumption of peanuts influences on weight control and this influence may be due to the action of trypsin inhibitors sacietog?nica that condition increased plasma colescistocinina (CCK). Moreover, the peanut has other health benefits, and these assignments are guaranteed to increase their production and consumption of several of its products, including the pa?oca peanut. The aim of this study was to identify the presence of a trypsin inhibitor in pa?oca peanut and evaluate its effect on food intake, weight gain and histomorphological changes in swiss mice (n = 8) and Wistar rats (n = 6). Experimental diets were prepared based on the AIN-93G and supplemented with tack or peanut trypsin inhibitor partially purified pa?oca peanut (AHTI). After each treatment, the animals were anesthetized and euthanized, their bloods were collected by cardiac puncture for the determination of CCK and other biochemical parameters (glucose, triglycerides, total cholesterol, high density lipoprotein, low density lipoprotein, glutamic-pyruvic transaminase, glutamic oxaloacetic transaminase and albumin) and their pancreas removed for histologic and morphometric analysis. The supplementation with pa?oca peanut and the AHTI showed a decrease of body weight gain and food intake in both mice and rats, due to the satiety, since the animals showed no evidence of impairment of nutritional status conditioned by consumption the AHTI. There were also observed biochemical or morphological important when compared with controls. However, AHTI led to increased secretion of CCK, a peptide sacietog?nico. Thus, these results indicate that AHTI present in pa?oca peanut, is able to enhance the secretion of plasma CCK and thereby reduce the weight gain associated with lower food intake of experimenta animals / A obesidade ? crescente, atingindo n?veis epid?micos, em muitas regi?es do mundo. Estudos t?m mostrado que o consumo de amendoins influencia no controle de peso e essa influ?ncia pode ser devido ? a??o sacietog?nica de inibidores de tripsina que condicionam o aumento plasm?tico de colecistocinina (CCK). Al?m disso, o amendoim apresenta outros benef?cios ? sa?de e essas atribui??es t?m garantido o aumento da sua produ??o e o consumo de v?rios de seus produtos, entre eles, a pa?oca de amendoim. O objetivo deste estudo foi identificar a presen?a de um inibidor de tripsina na pa?oca de amendoim e avaliar o seu efeito sobre o consumo alimentar, o ganho de peso e altera??es histomorfol?gicas em camundongos swiss (n=8) e ratos wistar (n=6). Dietas experimentais foram preparadas com base na AIN-93G e suplementadas com a pa?oca de amendoim ou com o inibidor de tripsina parcialmente purificado da pa?oca de amendoim (AHTI). Ao final de cada tratamento, os animais foram anestesiados, eutanasiados e tiveram seus sangues colhidos, por pun??o card?aca, para a dosagem de CCK e de outros par?metros bioqu?micos (glicose, triglicer?deos, colesterol total, lipoprote?nas de altadensidade, lipoprote?na de baixa-densidade, transaminase glut?mica pir?vica, transaminase glut?mica oxalac?tica e albumina) e seus p?ncreas extra?dos para an?lise histol?gica e morfom?trica. As suplementa??es com a pa?oca de amendoim e com o AHTI mostraram uma diminui??o do ganho de peso corporal e do consumo alimentar tanto em camundongos quanto em ratos, devido ? saciedade, uma vez que os animais n?o apresentaram ind?cios de comprometimento do estado nutricional condicionada pelo consumo do AHTI. N?o foram, tamb?m, observadas altera??es bioqu?micas, nem histomorfol?gicas importantes quando comparadas com os controles. No entanto, o AHTI levou ao aumento da secre??o de CCK, um pept?dio sacietog?nico. Assim, estes resultados sugerem que o AHTI, presente na pa?oca de amendoim, seria capaz de aumentar a secre??o plasm?tica de CCK e reduzir o ganho de peso associado com menor consumo alimentar de animais experimentais