Objetivando-se estudar o efeito da suplementação mineral no desenvolvimento reprodutivo de bubalinos do desmame aos 24 meses de idade, utilizaram-se 110 búfalos, distribuídos em três experimentos (A, B e C), que foram criados em três propriedades (GA, GB e GC) no Estado do Pará. Os experimentos A e B foram realizados em áreas de terra firme com pastagens cultivadas (Brachiaria brizantha cv. Marandu) em manejos rotacionado e extensivo, respectivamente, com capacidade de suporte e perfil nutricional da forragem, semelhantes. O experimento C foi desenvolvido em áreas de várzea na Ilha de Marajó, com pastagens nativas constituídas, principalmente, por Panicum sp, Axonopus sp e Paspalum sp. Em todas as propriedades dividiram-se os animais em dois grupos (experimento A: GA1 e GA2, experimento B: GB1 e GB2, e experimento C: GC1 e GC2) que foram mantidos a pasto com diferentes suplementações minerais. Os animais foram pesados a cada 28 dias e receberam distintos suplementos minerais: grupos GA2 e GB2 mistura mineral, a ser testada, indicada para búfalos; grupos GA1 e GB1 - misturas minerais utilizadas rotineiramente na fazenda e recomendadas para bovinos; GC1 animais não suplementados e GC2 mistura mineral indicada para búfalos criados em áreas de várzea com águas salobras. As sobras da mistura mineral foram recolhidas semanalmente para se calcular o consumo real da mesma. A cada 56 dias as circunferências escrotais, comprimentos, larguras e espessuras dos testículos foram mensurados, como também foi avaliada a disponibilidade quali-quantitativa da forragem. Aos 22 meses de idade, 77 búfalos foram submetidos a colheitas de sêmen semanais, nos meses de maio e junho de 2005 (n = 616 amostras de sêmen), através de eletroejaculação para se analisar as características físico-morfológicas do sêmen. No plasma seminal foram, determinadas as concentrações de Ca, P, Mg, Cu, Co, Fe, Zn e Mn. Após 14 meses de estudos constatou-se que tanto os animais do grupo GA2 como os do GB2 obtiveram um maior ganho de peso médio diário (p<0,0001). O grupo GA1 consumiu uma maior (p<0,0001) quantidade de mistura mineral, enquanto que para os grupos GB1 e GB2 não houve diferença significativa. As medidas testiculares do grupo GA2 foram significativamente maiores, ao final do estudo, do que as do grupo GA1, demonstrando com isso um efeito da suplementação mineral sobre estas variáveis. Para o grupo GB2 a espessura, a largura e o volume testicular foram significativamente maiores. As demais medidas não sofreram variações significativas. No experimento C não houve variação entre o peso e o ganho de peso para ambos os grupos. Isso provavelmente esta relacionado ao baixo consumo de mistura mineral pelo grupo GC2. Essa pequena diferença do peso entre os grupos GC1 e GC2 foi acompanhada por uma diferença não significativa nas medidas testiculares dos grupos. Deduz-se que devido as altas correlações positivas entre a circunferência escrotal (CE), o peso corporal e demais medidas dos testículos, a CE possa ser utilizada para predizer o tamanho testicular. Conclui-se ainda que a suplementação mineral testada exerceu efeito positivo sobre o peso e o ganho de peso médio diário dos animais dos experimentos A e B. Evidenciou-se médias significativamente maiores para as características físicas do sêmen dos animais que receberam a suplementação mineral testada (GA2) com exceção da concentração espermática. Para as características morfológicas do ejaculado, observou-se que os animais do grupo GA1 apresentaram médias significativamente maiores para o número total de espermatozóides anormais. Não foram verificadas diferenças significativas nas características físicas e morfológicas do sêmen dos grupos GB1 e GB2, com exceção do volume do ejaculado e da motilidade progressiva que foram significativamente maiores para os animais do grupo GB2. Observaram-se correlações significativas, porém baixas, entre a CE a algumas características do ejaculado. Conclui-se, portanto que houve influência da suplementação mineral nas características físicas e morfológicas do sêmen dos animais do experimento A, com melhores resultados para o grupo GA2, que consumiram a suplementação mineral testada; constatou-se, ainda, uma tendência de uma melhor qualidade no sêmen dos animais do grupo GB2. Foi possível averiguar que não houve diferença significativa para os constituintes macro e microminerais do plasma seminal de búfalos jovens, criados em pastejo rotacionado, exceto para os níveis de manganês que foram significativamente maiores para os animais do grupo GA2. Obtiveram-se os seguintes valores para Ca (14,32 ± 6,40 mg/dl), P (3,86 ± 3,30 mg/dl), Mg (11,64 ± 7,02 mg/dl), Zn (4,23 ± 1,35 &mu;g/ml), Fe (8,23 ± 2,38 &mu;g/ml), Cu (0,17 ± 0,07 &mu;g/ml), Co (0,06 ± 0,04 &mu;g/ml) e Mn (0,08 ± &mu;0,06 g/ml) contidos no plasma seminal de búfalos criados em pastejo rotacionado. Os animais do grupo GB2 apresentaram maiores níveis de fósforo e cobalto do que os do grupo GB1, que por sua vez obtiveram maiores teores de manganês. Encontraram-se os seguintes valores Ca (12,16 ± 2,97 mg/dl), P (4,01 ± 4,46 mg/dl), Mg (11,37 ± 6,48 mg/dl), Zn (4,02 ± 1,39 &mu;g/ml), Fe (6,73 ± 1,80 &mu;g/ml), Cu (0,07 ± 0,03 &mu;g/ml), Co (0,14 ± 0,06 &mu;g/ml) e Mn (0,17 ± 0,11 &mu;g/ml) contidos no plasma seminal de búfalos criados em sistema extensivo. Muito embora alguns minerais tenham apresentado correlações significativas com algumas características do ejaculado, essas foram baixas. Portanto não se observou uma variação quali-quantitativa nas concentrações físicas e morfológicas do ejaculado de búfalos jovens criados em pastejo rotacionado e sistema extensivo, em função da concentração de minerais no plasma seminal. / To objectify the study of the effect of mineral supplementation in the reproductive development of buffaloes of wean in the 24 months of age, were used 110 buffaloes, distributed in three experiments (A, B e C) created in three farms (GA, GB e GC) in the Para State. The experiments A e B were realized in areas of firm soil with cultivated pasture (Brachiaria brizantha cv. Marandu) in rotational and extensive management, respectively, with similar capacity of support and nutritional profile of the forage. The experiment C was developed in tilled plain areas in Marajo Island, with native pasture basically formed by Panicum sp, Axonopus sp e Paspalum sp. In all farms the animals were divided in two groups (A: GA1 e GA2 experiment, B: GB1 e GB2 experiment, and C: GC1 e GC2 experiment) which were maintained in the pasture with different mineral supplements. The animals were pondered in each 28 days and received different mineral supplements: GA2 and GB2 groups mineral blend, to be tested, indicated to buffaloes; GA1 and GB1 groups mineral blend used in a regular procedure in the farm and recommended to bovines; GC1 group not supplemented animals and GC2 group mineral blend indicated to buffaloes created in tilled plain areas with salutary waters. The remaining mineral blends were collected weekly to calculate the real use of the blends. In each 56 days the scrotal circumferences, lengths and widths of the testis were measured, and was evaluated the availablebility of the quality and the quantity of the forage, as well. In the 22 month of age, 77 buffaloes were submitted to weekly semen collects, in May and June of 2005 (n = 616 semen samples), trough electroejaculation to analyze the semen physic and morphologic characteristics. In the seminal plasma were determined the Ca, P, Mg, Cu, Co, Fe, Zn e Mn concentration. After 14 months of research both animal groups (GA2 and GB2 groups) got larger diary medium weight gain (p<0,0001). The GA1 group has consumed a larger (p<0,0001) quantity of mineral blend, although to the GB1 and GB2 groups there wasnt any significative difference. The testicular measurements of GA2 group were significatively larger, at the end of the research, as the GA1 group, proving that the effects of mineral supplement on these variants. To the GB2 group the thickness, the width and the testicular volume were significatively larger. The others measurements havent significant variations. In the C experiment there wasnt any variation between the weight and gain of weight to both groups. This is probably connected to low use of mineral blend by GC2 group. This insignificant difference of the weight between GC1 and GC2 group was followed by an insignificant difference in the testicular measurements of the groups. Due to high positive correlations between the scrotal circumference (SC), the weight of the body e others measurements, deduce that the SC can be used to predict the testicular size. It can be concluded, as well, that the tested mineral supplement carried out a positive effect on the weight and the gain of diary medium weight of the animals in the experiments A and B. The research proved significant bigger mean rates to the physical characteristics of the animals semen that received the tested mineral supplement (GA2) with exception of spermatic concentration. To the morphological characteristics of semen, it observed that the GA1 animal group showed significant mean rates larger to the total number of abnormal sperm. Significant differences werent noted in the physical and morphological characteristics of the semen of GB1 and GB2 groups, with exception of the volume of the semen and of the motility progressive which were significatively larger to the animals of GB2 group. Significant, but low correlations between the SC and some characteristics of the semen were observed. Consequently, it can be concluded, there were influence of the mineral supplement in the physical and morphological characteristics of the animals semen of A experiment, with better results to GA2 group , that consumed the tested mineral supplement; a tendency of a better quality of the animals semen of the GB2 group animals. Was possible to verify there werent important difference to the macro and micro mineral constituents of the seminal plasma of young buffaloes, created in rotational pasture system, except to the levels of manganese which were significatively larger to the GA2 group animals. The next values were obtained: to Ca (14,32 ± 6,40 mg/dl), P (3,86 ± 3,30 mg/dl), Mg (11,64 ± 7,02 mg/dl), Zn (4,23 ± 1,35 &mu;g/ml), Fe (8,23 ± 2,38 &mu;g/ml), Cu (0,17 ± 0,07 &mu;g/ml), Co (0,06 ± 0,04 &mu;g/ml) e Mn (0,08 ± 0,06 &mu;g/ml) contained in the seminal plasma of the buffaloes created in rotational pasture system. The GB2 group animals introduced larger levels phosphorus and cobalt than the GB1 group, which obtained larger values of manganese. The following values were also discovered: Ca (12,16 ± 2,97 mg/dl), P (4,01 ± 4,46 mg/dl), Mg (11,37 ± 6,48 mg/dl), Zn (4,02 ± 1,39 &mu;g/ml), Fe (6,73 ± 1,80 &mu;g/ml), Cu (0,07 ± 0,03 &mu;g/ml), Co (0,14 ± 0,06 &mu;g/ml) e Mn (0,17 ± 0,11 &mu;g/ml) contained in the seminal plasma of the buffaloes created in extensive system. In spite of some minerals have presented significant correlations with some characteristics of the semen, these ones were lows. Then a variation of the quality and the quantity of physical and morphological concentrations of the semen of young buffaloes created in rotational pasture system and extensive system werent observed.

Dyckia distachya Hassler, bromélia endêmica da região Sul do Brasil, teve sua população acentuadamente reduzida devido às políticas públicas de aproveitamento hidrelétrico na região. Estudos que promovam maiores conhecimentos em relação à espécie são necessários no intuito de elaborar estratégias de conservação e reintrodução da mesma em seu ambiente natural. Nesse contexto, o presente trabalho objetivou ampliar o conhecimento acerca da espécie D. distachya visando fornecer subsídios por meio dos estudos dos aspectos reprodutivos e da micropropagação, gerando informações que possam contribuir para a conservação da espécie. Nesse sentido, foram realizados diferentes experimentos: caracterização das flores por meio de microscopia de luz e eletrônica; viabilidade polínica por germinação in vitro e avaliação histoquímica; receptividade do estigma; caracterização dos mecanismos reprodutivos; concentração e composição do néctar, dentre outras variáveis. Foram realizados ensaios de germinação de sementes em diferentes ambientes e temperaturas, juntamente com o estudo do desenvolvimento pós-seminal. Em adição a esses estudos, foram realizados ensaios de micropropagação, utilizando diferentes meios de cultura em diferentes estados físicos. Os resultados demonstram que as flores são hipóginas, hermafroditas, tubulares, pediceladas, com três sépalas e três pétalas imbricadas. O androceu é formado por seis estames, com as anteras acima do estigma. O gineceu é constituído de três carpelos unidos e ovário parcialmente sincárpico, súpero e trilocular com estigma conduplicado-espiral. Os óvulos são anátropos e apresentam apêndice chalazal. Os nectários são septais, infraloculares com superfície em labirinto na base do ovário. Os grãos de pólen são de tamanho médio, simetria bilateral, âmbito ovalado, monocolpado, exina semitectada, reticulada e heterobrocada. A maior porcentagem de germinação dos grãos de pólen foi observada em meio de cultura BKM. Foram observados todos os mecanismos reprodutivos, com formação de sementes viáveis, sendo superior na polinização cruzada e autopolinização artificial. O estigma mostrou-se receptivo durante todo o período de abertura floral. As sementes germinam em uma ampla faixa de temperatura, sendo que, as sementes alocadas em meio de cultura apresentaram as maiores porcentagens de germinação. A extrusão da raiz primária se deu no segundo dia após introdução das sementes in vitro. No 4° dia foi possível observar o surgimento do 1° eófilo. Aos 12 dias a planta jovem apresenta raiz primária curta e pilosa. Meios de cultura no estado líquido, sob agitação, ou estático, em combinação ou não com reguladores de crescimento vegetais são eficientes na multiplicação in vitro de D. distachya, apresentando elevadas taxas de produção de mudas em curto espaço de tempo. O meio de cultura semissólido apresentou menores taxas de multiplicação e massa fresca e seca em relação ao meios líquidos. A aclimatização foi eficiente em mudas provenientes de todas as condições in vitro utilizadas / Dyckia distachya Hassler, bromeliad endemic to Southern Brazil, had its population markedly reduced due to the regional public policy of hydroelectric power. Studies that promote greater knowledge about the species are needed for to development of strategies for conservation and species reintroduction in their natural environment. In this context, this work aimed to enhance the knowledge on reproductive aspects and micropropagation D. distachya, generating information that can contribute to the conservation of the species. Thus, different experiments were performed: characterization of flowers through light and electron microscopy; pollen viability by in vitro germination and histochemical analysis; stigma receptivity; observation on the reproductive mechanisms; nectar concentration and composition, among other variables. Seed germination was evaluated in different conditions and temperatures and post-seminal development was characterized. In addition, micropropagation experiments were performed using liquid and semi-solid supplemented with different growth regulator compositions. The results showed that the flowers are hypogynous, hermaphrodite, tubular, pedicellate, with three imbricate sepals and three petals. The androecium consists of six stamens with anthers that develop above the stigma. The pistil consists of three carpels, the ovary is superior, partially syncarpous and trilocular, with a conduplicate-spiral stigma. The ovules are anatropous and have a chalazal appendage. Septal infralocular nectaries are observed, with a labyrinth surface, at the base of the ovary. The pollen grains are of medium size, with a bilateral symmetry, ovate, monocolpate, semitectate, reticulate and with a heterobrocate exine. The highest percentage of pollen grain germination was observed in BKM culture medium. All reproductive mechanisms were observed and the higher numbers of viable seeds were observed after cross-pollination and manual self-pollination. The stigma was receptive during the entire period the flower was opened, with the highest receptivity at anthesis Seeds germinated in different temperatures and in vitro germination, showed the highest germination percentages. Post-seminal development initiated with the extrusion of the primary root at the second day after the introduction of the seeds in vitro. The emergency of the first eophyll was observed on the fourth day, and on the 12nd day the young plant shows a short primary root, with rood hairs. Liquid medium under agitation, or static and semi-solid medium supplemented with different combinations of plant growth regulators were efficient for the micropropagation of D. distachya, with high rates of production of seedlings in a short period of time. The use of the semi-solid medium showed lower multiplication rates when compared to liquid media. Acclimatization was very efficient in all treatments, independently from the in vitro culture conditions

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_karina_lemos_goularte.pdf: 361604 bytes, checksum: c1cf54e456adc029afb9c9829a7d4c67 (MD5) Previous issue date: 2009-03-11 / The expansion of artificial insemination (AI) programs with frozen ram semen has been limited by the need of intrauterine semen deposition and by the inconsistency of the association between the conventional methods used to evaluate semen quality and in vivo fertility. An alternative to improve the efficiency of AI programs would be the profiling of the protein content of the seminal plasma to search for fertility markers. The objective of the present study was to study the protein profile of ram seminal plasma and to evaluate its association with parameters of frozen semen quality. Ejaculates were split in two samples. The first sample was frozen in two extenders: T1 (Tris + egg yolk + glycerol); and T2 (Tris + egg yolk + threalose). The second sample was submitted to unidimensional electrophoresis to identify proteins in the seminal plasma. The presence of the identified proteins was associated with parameters of semen quality: sperm motility and membrane integrity, both prefreezing and post-thawing, and post-thawing acrosome integrity. Post-thawing sperm motility did not differ (P > 0.05) for T1 (18.6 ± 2.3) and T2 (23.4 ± 2.7). Post-thawing sperm membrane integrity was similar (P > 0.05) for T1 (12.6 ± 1.4) and T2 (15.3 ± 1.7). There was also no difference (P > 0.05) between T1 and T2 with regard to postthawing acrosome integrity (23.0 ± 1.5 e 21.3 ± 1.8, respectively). An intra-ram analysis identified 17 proteins associated with the evaluated parameters: 10 of them presented similar associations for distinct rams. In the inter-ram analysis, an 11 kDa band was associated with lower pre-freezing sperm membrane integrity, a 24 kDa band was related to reduced post-thawing sperm motility and membrane integrity, and a 45 kDa band was associated with lower pre-freezing sperm membrane integrity (P < 0.05). Thus, those three protein factors would be potential markers for ram infertility with frozen semen because their absence was associated with improved semen quality, regardless of individual ram effects. / A expansão de programas de inseminação artificial (IA) em ovinos com sêmen congelado tem sido limitada pela necessidade de deposição intrauterina do sêmen e pela associação inconsistente entre as técnicas convencionais de avaliação da qualidade do sêmen e a fertilidade in vivo. Uma das alternativas para incrementar a eficiência de programas de IA seria o mapeamento do conteúdo protéico do plasma seminal, em busca de marcadores para fertilidade. O objetivo do presente trabalho foi estudar o perfil protéico do plasma seminal de machos ovinos e avaliar a sua associação com a qualidade de amostras de sêmen congelado. Os ejaculados dos machos ovinos foram divididos em duas alíquotas. A primeira foi utilizada para criopreservação, em dois diluentes: D1 (tris+gema de ovo+glicerol); e D2 (tris+gema de ovo+trealose). A segunda alíquota foi usada para a busca de proteínas do plasma seminal através da eletroforese unidimensional. A presença ou ausência das proteínas foi associada com parâmetros de qualidade seminal: motilidade e integridade da membrana espermática, ambas pré-congelamento e pósdescongelamento, e integridade de acrossoma pós-descongelamento. A motilidade espermática pós-descongelamento não diferiu (P > 0,05) entre D1 (18,6 ± 2,3) e D2 (23,4 ± 2,7). A integridade da membrana espermática pós-descongelamento foi semelhante (P > 0,05) para D1 (12,6 ± 1,4) e D2 (15,3 ± 1,7). Também não houve diferença (P > 0,05) entre D1 e D2 quanto à integridade do acrossoma pósdescongelamento (23,0 ± 1,5 e 21,3 ± 1,8, respectivamente). A análise intra-machos identificou 17 bandas proteicas associadas com os parâmetros avaliados, sendo que 10 destas associaram-se da mesma maneira, em diferentes machos. Na análise inter-machos, a banda com 11 kDa foi associada com menor integridade da membrana espermática pré-congelamento, a banda com 24 kDa foi associada com a redução na motilidade e na integridade da membrana pós-descongelamento e a banda com 45 kDa foi associada com menor integridade da membrana précongelamento (P < 0,05). Portanto, essas três bandas protéicas seriam potenciais marcadores para infertilidade com sêmen congelado, pois sua ausência foi associada com incremento na qualidade seminal, independentemente do efeito dos machos doadores de sêmen.

Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao - Andreia.pdf: 542231 bytes, checksum: 91854897395aaf5eb914b176b823aa05 (MD5) Previous issue date: 2007-12-19 / In the 90s, researchers started studying the seminal proteic plasma profile and its relationship with fertility, whose objective was to study the function of each protein within the sperma frame in domestic species. In animal reproduction, another relevant factor for a good reproductive performance is feeding, being the probiotic the goal of unnumbered researchs reporting the use of them for weight gain, and food conversion. The present work had the objective of evaluating the winter and summer effects on the seminal plasma proteins, using SDS - PAG electroforesis and investigating the probiotic influence on weight, scrotum girth and spermiogram in Tabapuã bred bulls on range breeding. The 6 Kda proteic bands (81,81% in winter and 90,90% in summer) 9 Kda (90,90% in winter and 72,72% in summer) and 125 kda (81,81% in winter and 90,90% in summer) showed, in both seasons, the largest percentages among all the identified bands, the same happening with the 26 Kda band (100%) in summer. It was concluded that the seasons of the year can influence the presence or absence of seminal plasma proteins, however this has no relationship with the spermatic quality. The probiotic has not caused deleterious effect in the bulls' spermograms, and also has not exhibited a pro-action for weight gain and increasing of scrotal perimeter. / Na década de 90, iniciou-se o estudo do perfil protéico do plasma seminal e sua relação com a fertilidade, cujo objetivo era estudar a função de cada proteína no quadro espermático, nas espécies domésticas. Na reprodução animal, outro fator relevante, para um bom desempenho reprodutivo, é a alimentação, sendo os probióticos alvo de várias pesquisas relatando o uso do mesmo para o ganho de peso e conversão alimentar. O presente estudo teve o objetivo de avaliar o efeito do inverno e verão, sobre as proteínas do plasma seminal, por meio da eletroforese SDS-PAGE e investigar a influência do probiótico no peso, perímetro escrotal e espermiograma de touros da raça Tabapuã criados extensivamente. As bandas protéicas de 6 Kda (81,81% no inverno e 90,90% no verão), 9 KDa (90,90 no inverno e 72,72% no verão) e 125 Kda (81,81% no inverno e 90,90% no verão), apresentaram, nas duas estações, as maiores percentagens dentre todas as bandas identificadas, o mesmo ocorrendo com a banda de 26 KDa (100%) no verão. Conclui-se que: as estações do ano podem influenciar na presença ou ausência de proteínas do plasma seminal, entretanto isso não tem relação direta com a qualidade espermática. O probiótico não ocasionou efeito deletério no espermograma dos touros, no entanto, não demonstrou ação promotora para o ganho de peso e aumento do perímetro escrotal.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao - Andreia.pdf: 542231 bytes, checksum: 91854897395aaf5eb914b176b823aa05 (MD5) Previous issue date: 2007-12-19 / In the 90s, researchers started studying the seminal proteic plasma profile and its relationship with fertility, whose objective was to study the function of each protein within the sperma frame in domestic species. In animal reproduction, another relevant factor for a good reproductive performance is feeding, being the probiotic the goal of unnumbered researchs reporting the use of them for weight gain, and food conversion. The present work had the objective of evaluating the winter and summer effects on the seminal plasma proteins, using SDS - PAG electroforesis and investigating the probiotic influence on weight, scrotum girth and spermiogram in Tabapuã bred bulls on range breeding. The 6 Kda proteic bands (81,81% in winter and 90,90% in summer) 9 Kda (90,90% in winter and 72,72% in summer) and 125 kda (81,81% in winter and 90,90% in summer) showed, in both seasons, the largest percentages among all the identified bands, the same happening with the 26 Kda band (100%) in summer. It was concluded that the seasons of the year can influence the presence or absence of seminal plasma proteins, however this has no relationship with the spermatic quality. The probiotic has not caused deleterious effect in the bulls' spermograms, and also has not exhibited a pro-action for weight gain and increasing of scrotal perimeter. / Na década de 90, iniciou-se o estudo do perfil protéico do plasma seminal e sua relação com a fertilidade, cujo objetivo era estudar a função de cada proteína no quadro espermático, nas espécies domésticas. Na reprodução animal, outro fator relevante, para um bom desempenho reprodutivo, é a alimentação, sendo os probióticos alvo de várias pesquisas relatando o uso do mesmo para o ganho de peso e conversão alimentar. O presente estudo teve o objetivo de avaliar o efeito do inverno e verão, sobre as proteínas do plasma seminal, por meio da eletroforese SDS-PAGE e investigar a influência do probiótico no peso, perímetro escrotal e espermiograma de touros da raça Tabapuã criados extensivamente. As bandas protéicas de 6 Kda (81,81% no inverno e 90,90% no verão), 9 KDa (90,90 no inverno e 72,72% no verão) e 125 Kda (81,81% no inverno e 90,90% no verão), apresentaram, nas duas estações, as maiores percentagens dentre todas as bandas identificadas, o mesmo ocorrendo com a banda de 26 KDa (100%) no verão. Conclui-se que: as estações do ano podem influenciar na presença ou ausência de proteínas do plasma seminal, entretanto isso não tem relação direta com a qualidade espermática. O probiótico não ocasionou efeito deletério no espermograma dos touros, no entanto, não demonstrou ação promotora para o ganho de peso e aumento do perímetro escrotal.

Orientador: Wilma De Grava Kempinas / Resumo: A infertilidade afeta aproximadamente 15% dos casais em idade reprodutiva, sendo o homem responsável por cerca da metade dos casos. A diminuição da fertilidade masculina é devido a uma variedade de condições que incluem malformações congênitas, distúrbios genéticos e endócrinos, doenças infecciosas e inflamatórias, disfunção sexual e estilo de vida. A proteína espermática SP22 (sperm protein, 22kDa) tem demonstrado ser um biomarcador de fertilidade masculina, visto que, em ratos, está bem estabelecido que sua concentração, em extratos de espermatozoides da cauda epididimária, se correlaciona com a fertilidade desses gametas. No entanto, para incorporar essa proteína como um biomarcador em estudos epidemiológicos e clínicos são necessários dados quantitativos em humanos. Assim, o presente estudo teve por objetivos padronizar a técnica de quantificação e imunolocalização da proteína espermática SP22, investigar possíveis correlações entre parâmetros seminais convencionais e funcionais, de homens férteis e inférteis, com a concentração dessa proteína e avaliar o seu potencial preditivo como um biomarcador, não invasivo, de fertilidade. Para tanto foram realizados dois estudos observacionais: um do tipo caso-controle e outro do tipo seccional. O estudo caso-controle foi desenvolvido em amostras seminais de 44 voluntários da cidade de Botucatu e região, com idade entre 20 a 50 anos, que foram agrupados de acordo com a fertilidade: férteis (um ou mais filhos) e inférteis. Já o estu... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Infertility affects approximately 15% of couples in reproductive age and 50% of the cases are directly related to man. The decrease in male fertility is due to several conditions including congenital malformations, genetic and endocrine disorders, infectious and inflammatory diseases, sexual dysfunction and lifestyle. Sperm protein SP22 (22kDa) has been shown to be a male fertility biomarker since, in rats, it is well established that its concentration, in sperm extractions from the epididymal tail, correlates with the fertility of these gametes. However, to incorporate this protein as a fertility biomarker in epidemiological and clinical studies, quantitative data are required in humans. Thus, the present study aimed to standardize the SP22 quantification and immunolocalization technique, investigate possible correlations among conventional and functional seminal parameters of fertile and infertile men with the concentration of this protein and to evaluate its predictive potential as a non-invasive fertility biomarker. Therefore, two observational studies were performed: one case-control type and the other sectional type. The case-control study was carried out on 44 volunteers’s seminal samples from Botucatu city and region, aged between 20 and 50 years, who were placed according to fertility: fertile (one or more children) and infertile. The sectional study was carried out on 12 patients’s attendend by the Human Reproduction Center of the Botucatu Medical School – UNESP, al... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-05-15T16:46:34Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Stela_Gheller.pdf: 569023 bytes, checksum: a5e2134d6233755fa80a8cad9319a551 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-05-16T16:45:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Stela_Gheller.pdf: 569023 bytes, checksum: a5e2134d6233755fa80a8cad9319a551 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-16T16:45:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Stela_Gheller.pdf: 569023 bytes, checksum: a5e2134d6233755fa80a8cad9319a551 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-02-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Na refrigeração a sobrevivência da célula espermática é dependente da sua orientação espacial no meio diluidor não devendo essas se aglutinarem e nem sedimentarem. Em diluentes mais sólidos como os suplementados com gelatina, essa disposição pode ser beneficiada, além de ocorrer uma redução na demanda metabólica celular devido a redução da motilidade quando refrigerado. Em decorrência disto, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da adição de gelatina ao diluente para sêmen ovino acondicionado a 50, através de parâmetros de qualidade seminal realizados por teste in vitro durante um período de até 72hs.. Foram utilizados 8 carneiros, realizando-se 4 coletas de sêmen para cada macho, totalizando 32 ejaculados. Dois diluentes foram utilizados neste estudo, E1 (leite integral 10%, 0,2 g de D-gligose, 50 mg de estreptomicina e 100 ml de água mili Q), e a E2 (E1 acrescido de 1,5% de gelatina). Foram avaliados os parâmetros de motilidade, morfologia espermática, integridade de membrana, DNA e acrossoma durante os períodos de 0, 24, 48 e 72h de armazenado a 5ºC. Durante as primeiras 48 horas de armazenamento, não houve diferença estatística na motilidade entre E1 e E2, no entanto, a E2 nas 72 horas (51,9%) foi mais eficaz (P <0,05) na manutenção dos parâmetros de motilidade do que o E1 (31,1%). A integridade do acrossoma foi semelhante em ambos os extensores a 0, 24 e 48 horas, mas às 72h a E2 foi maior (P <0,05) da qualidade neste parâmetro (E1= 42,9 e E2 = 66,9). As variáveis, integridade de membrana, DNA, e morfologia espermática, não apresentaram diferença entre os tratamentos (P>0,05). Com os resultados encontrados pode-se concluir que a adição de gelatina na concentração de 1,5% ao diluente melhorou a motilidade e integridade do acrossoma em sêmen ovino armazenado por até 72hs, a 5ºC aumentando assim o período de armazenamento das doses em 24 horas, sem perda de qualidade do espermática em testes realizado in vitro. / Under refrigeration, the spermatic cell survivability depends upon its spatial orientation in the extender medium and the agglutination or sedimentation of these cells should not occur. In more solid extenders like the one supplemented with gelatin, the spatial disposition can be improved, and also the metabolic demand is lower by the reduced motility provoked by more solid medium. The main aim of this work was evaluate the qualitative effect provoked by addition of gelatina to the ram semen extender stored at 5ºC. There were used 8 rams being accomplished 4 semen collections for each, totalizing 32 ejaculates. Two extenders were used in this study, E1 (whole milk 10%, 0.2g D-Glugose, 50 mg streptomycin and 100 ml of mili Q water), and the E2 (E1 plus 1.5% of gelatin). There were evaluated motility, cell morphology, DNA, membrane and acrosome integrity, during the period of 0h, 24hs, 48hs, and 72 hours of storage under refrigeration at 5°C. During the first 48hs of storage the spermatic motility remained the same in the E1 and E2, however, at 72hs the E2 (51,9%) was more efficient in the maintenance of the motility parameters (P<0.05) than the E1 (31,1%). The acrosome integrity was similar in both extenders at 0h, 24hs and 48h of storages, but at 72hs the E2 showed the best result (P<0.05) in this parameter (E1=42,9% and E2=66,9%). The viability, morphology and membrane and DNA integrity had not shown statistical difference comparing the treatments (P>0.05). With the results there is possible to conclude that the addition of gelatin to the extender increased the motility and acrosome integrity in ram semen stored at 5ºC, increasing through this the possibility of extending the storage time under refrigeration of the semen doses to more than 24hs.

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:31:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PatriciaCS_DISSERT.pdf: 1847560 bytes, checksum: 7da5854056af7ddc3546a8a90de2324f (MD5) Previous issue date: 2013-08-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of this work, cryopreserve semen from six-banded armadillos, assessing in advance the effects of centrifugation and dilution of their seminal parameters over thermoresistance test (TRT) in order to define the best diluent to be used in semen cryopreservation of this species. Semen samples (n = 12) derived from 04 adult males collected by electroejaculation were divided into four aliquots, two immediately diluted in Tris or powdered coconut water (ACP-119®), and the other centrifuged (800g/10 min) prior to dilution. The samples were incubated at 34°C for 3h and the seminal parameters evaluated at intervals of 1 h. In general, was observed greater efficiency of Tris regard to the preservation of seminal parameters along the TRT, especially up to 120 min of evaluation, but after this period the two extenders were equivalents. Still, the centrifugation caused deleterious effect on semen quality of six-banded armadillos, this method is not suitable for this species. For the cryopreservation of the semen of six banded armadillos, was then diluted in Tris-base, plus 20% egg yolk and 3% glycerol. Following the steps of dilution, the samples semen cooling and thawing was performed classical analysis simultaneously to fluorescence analysis, employing the combination of fluorophores to assess the plasma membrane integrity (Propidium iodide - PI and Hoechst - H-342), and also mitochondrial activity (CMXRos - Mito Tracker red®). Most of the changes observed in all stages of cryopreservation of semen of six-banded armadillos was secondary, but the proportions of these defects increased significantly from step cooling, and higher in step thawing, due to the impacts of heat shock and osmotic stress be more significant in this phase. The results of fluorescence analysis indicated a percentage of cells with intact plasma membrane more higher (8.4%) than that of motile cells (6.1%) on thawed semen. This may be due to the action of egg yolk, to provide greater structural integrity to some cells. In images taken by transmission electron microscopy were identified in sperm cryopreserved rupture and vesiculation of the plasma membrane, mitochondrial abnormalities, as well nuclear and acrosomal changes characterized by changes in chromatin and sperm capacitation, respectively. This study is the first report on the use of cryopreservation on semen xenarthras, and given the importance of biotech to preserve the genetic material of armadillos, the results obtained here are fundamental to promote the improvement of semen cryopreservation in six-banded armadillos, aiming its applications in other species of armadillos endangered or vulnerable to extinction / Objetivou-se com este trabalho, criopreservar o sêmen de tatus-peba, avaliando previamente os efeitos da centrifugação e da diluição sobre seus os parâmetros seminais ao longo do teste de termorresistência (TTR), a fim de definir o melhor diluente a ser utilizado no processo de criopreservação seminal desta espécie. Amostras de sêmen (n=12) oriundas de 04 machos adultos coletados por eletroejaculação foram divididas em quatro alíquotas, sendo duas imediatamente diluídas em Tris ou água de coco em pó (ACP-119®), e as demais centrifugadas (800g/10 min) previamente à diluição. As amostras foram incubadas a 34°C por 3h, e os parâmetros seminais avaliados em intervalos de 1h. Em termos gerais, observou-se uma melhor eficiência do Tris quanto à preservação dos parâmetros seminais ao longo do TTR, principalmente até os 120 min de avaliação, mas após este período, os dois diluentes se equipararam. Ainda, verificou-se efeito deletério da centrifugação sobre a qualidade do sêmen de tatus-peba, não sendo esse método indicado para esta espécie. Para a criopreservação, o sêmen de tatus-peba foi então diluído em solução a base de Tris,acrescidade 20% de gema e 3% de glicerol.Após as etapas de diluição, refrigeração e descongelação, foi realizada a análise clássica das amostras simultânea à análise por fluorescência, empregando a associação de fluoróforos para avaliar a integridade da membrana plasmática (Iodeto de Propídio - PI e Hoechst - H-342), e também a atividade mitocondrial (CMXRos - Mito Tracker red®).A maioria das alterações observadas em todos os estágios da criopreservação do sêmen de tatus-peba foi secundária, mas as proporções desses defeitos aumentaram significativamente a partir da etapa de refrigeração, sendo maior após a descongelação, devido aos impactos do choque térmico e do estresse osmótico serem mais expressivos nessa fase. Os resultados da análise de fluorescência indicaram um percentual de células com a membrana plasmática intacta maior (8,4%) do que o de células móveis (6,1%), em sêmen descongelado.Isto pode ser devido à ação da gema de ovo em permitir maior integridade estrutural a algumas células. Em imagens captadas por eletromicroscopia de transmissão foram identificados, em espermatozoides criopreservados, ruptura e vesiculação da membrana plasmática, anormalidades mitocondriais, como também modificações nucleares e acrossomal caracterizadas por alterações da cromatina e capacitação espermática, respectivamente. Este estudo é o primeiro relato sobre a utilização da criopreservação em sêmen de xenartras, e dada a importância desta biotécnica para a preservação do material genético de tatus, os resultados aqui obtidos são fundamentais para promover o aperfeiçoamento da criopreservação seminal em tatus-peba, visando sua aplicação em outras espécies de tatus ameaçadas ou vulneráveis à extinção

SILVA, Michelle Moura. Proteínas do plasma seminal de touros Bos Indicus e associações com parâmetros seminais. 2011. 71 f. : Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências Agrárias, Departamento de Zootecnia, Fortaleza-CE, 2011 / Submitted by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-08-09T13:06:10Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_mmsilva.pdf: 1145339 bytes, checksum: d51993cff038075c4bea680c81c0cb00 (MD5) / Approved for entry into archive by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-08-09T13:06:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_mmsilva.pdf: 1145339 bytes, checksum: d51993cff038075c4bea680c81c0cb00 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-09T13:06:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_mmsilva.pdf: 1145339 bytes, checksum: d51993cff038075c4bea680c81c0cb00 (MD5) Previous issue date: 2011 / This research aimed to describe the two-dimensional electrophoresis map of bull seminal plasma of adult Bos indicus, Brahman, and the determination of statistical associations between proteins of seminal plasma and semen parameters of these bulls. Semen samples from 56 bulls were collected and seminal plasma was obtained by centrifugation and subjected to two-dimensional electrophoresis. The gels were stained with colloidal Coomassie, scanned and analyzed using PDQuest application. The bulls were divided into groups of high and low sperm motility and high and low percentage of morphologically normal sperm cells. The most abundant proteins in seminal plasma of bulls Bos indicus and detected in all 56 gels showed similarity to espermadesinas and BSPs. The expression of spots with pI values ​​kDa protein equivalent to aSFP, BSPs, clusterin, albumin and osteopontin were significantly different between groups of animals with contrasting parameters of sperm motility and morphology. The associations found between such protein spots and semen parameters suggest the possibility of their use as molecular markers of potential fertility of animals. / A realização desta pesquisa teve por objetivos a descrição do mapa eletroforético bidimensional do plasma seminal de touros adultos Bos indicus, raça Brahman, bem como a determinação das associações estatísticas entre proteínas do plasma seminal e parâmetros seminais destes touros. Amostras de sêmen de 56 touros foram coletadas e o plasma seminal foi obtido através de centrifugação e submetido à eletroforese bidimensional. Os géis foram corados com Coomassie coloidal, digitalizados e analisados por meio do aplicativo PDQuest. Os touros foram divididos em grupos de alta e baixa motilidade espermática e alto e baixo percentual de células espermáticas morfologicamente normais. As proteínas mais abundantes no plasma seminal dos touros Bos indicus e detectadas em todos os 56 géis apresentaram semelhança com espermadesinas e BSPs. A expressão de spots com valores de kDa e pI equivalentes aos das proteínas aSFP, BSPs, clusterina , albumina e osteopontina foram estatisticamente diferentes entre os grupos de animais com parâmetros contrastantes de motilidade e morfologia espermáticas. As associações encontradas entre tais spots protéicos e os parâmetros seminais sugerem a possibilidade do uso destes como marcadores moleculares da fertilidade potencial dos animais.

SILVA, Taciane Alves da. Aspectos reprodutivos e produtivos de carneiros da raça Morada Nova submetidos a níveis crescentes de suplementação concentrada. 2015. 74 f. : Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências, Departamento de Zootecnia, Programa de Pós-Graduação em Zootecnia. Fortaleza-CE, 2015. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-08-09T15:42:56Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_tasilva.pdf: 1372727 bytes, checksum: c5aed07999861a6537d53a0a85389f2e (MD5) / Approved for entry into archive by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-08-09T15:45:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_tasilva.pdf: 1372727 bytes, checksum: c5aed07999861a6537d53a0a85389f2e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-09T15:45:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_tasilva.pdf: 1372727 bytes, checksum: c5aed07999861a6537d53a0a85389f2e (MD5) Previous issue date: 2015 / The study was conducted in order to evaluate the effects of different levels of concentrated supplementation on body weight, seminal parameters, testicular biometry measurements, protein profile of seminal plasma and protein profile of the Longissimus dorsi muscle of the breed of sheep Morada Nova. 22 seven months old sheep were used. The treatments consisted in different levels of concentrated (0%, 0.6%, 1.2% and 1.8% of the animals’ body weight based on dry matter). The animals were kept under a rotational grazing system, on Aruana grass (Panicum maximum). The semen samples were collected through electroejaculation at the end of the experiment, when the animals reached the age of 10 months. After slaughtering, the testicles and the muscle Longissimus dorsi were collected. The testicles were measured and the seminal and muscle proteins were analyzed through two-dimensional electrophoresis in polyacrylamide gel. The proteic maps were analyzed using the PDQuest application, version 8.0; Bio Rad, USA. There were significant differences over body weight and over the expression of the proteic spots of the muscle (P <0.05), but there was no significant difference for the seminal parameters, testicular biometry and the expression of seminal plasma proteins. The spots differentially expressed (P <0.05) were digested with trypsin and subjected to identification through mass spectrometry (ESI-Q-TOF). It is concluded, therefore, that the levels of concentrated provided to the animals change the body weight and influence the expression of the Longissimus dorsi muscle proteins, but do not modify the testicular biometry, the seminal parameters and the expression of seminal plasma proteins. / O estudo foi conduzido com o objetivo de avaliar os efeitos de diferentes níveis de suplementação concentrada sobre o peso corporal, parâmetros seminais, medidas de biometria testicular, perfil proteico do plasma seminal e perfil proteico do músculo Longissimus dorsi de carneiros da raça Morada Nova. Foram utilizados 22 carneiros com sete meses de idade. Os tratamentos consistiam em diferentes níveis de concentrado (0%, 0,6%, 1,2% e 1,8% do peso corporal do animal com base na matéria seca). Os animais foram mantidos em sistema de pastejo rotacionado em pasto de capim Aruana (Panicum maximum). As amostras de sêmen foram coletadas por eletroejaculação ao final do experimento, quando os animais obtiveram 10 meses de idade. Após o abate, os testículos e o músculo Longissimus dorsi foram coletados. Os testículos foram mensurados e as proteínas seminais e musculares foram analisadas por meio de eletroforese bidimensional em gel de poliacrilamida. Os mapas proteicos foram analisados por meio do aplicativo PDQuest, version 8.0; Bio Rad, USA. Houve diferença significativa no peso corporal e na expressão dos spots proteicos do músculo Longissimus dorsi (P < 0,05), porém não houve diferença significativa para os parâmetros seminais, biometria testicular e para a expressão de proteínas do plasma seminal. Os spots diferencialmente expressos (P < 0,05) foram digeridos com tripsina e submetidos à identificação por espectrometria de massa (ESI-Q-TOF). Conclui-se, portanto, que os níveis de concentrado fornecido aos animais alteram o peso corporal e a expressão de proteínas do músculo Longissimus dorsi, porém não influenciam as medidas de biometria testicular, os parâmetros seminais e a expressão de proteínas do plasma seminal.