Cannabis sativa (maconha) é a droga ilícita mais conhecida e utilizada em todo o mundo. Recentemente, o uso recreativo da droga por jovens aumentou muito, especialmente entre as gestantes. Estudos indicam que seu uso na gestação causa efeitos fetotóxicos adversos, no entanto, poucos estudos avaliam esses efeitos durante este período crítico sobre o desenvolvimento do sistema imunológico. Neste estudo, avaliamos o impacto da exposição gestacional à fumaça de maconha resultante da queima de cigarros sobre o desenvolvimento do baço e do timo de proles de camundongos BalbC. Utilizamos um modelo que se aproxima das reais condições de uso humano (inalação) sob os aspectos de dose e média exposição. Camundongos fêmeas gestantes (n = 20) foram expostas ao fumo da maconha ou ao ar filtrado (grupo controle) do 5,5° ao 17,5° dia gestacional (DG) por 5 minutos diariamente. Para isso, foi utilizado um aparelho para inalação da fumaça desenvolvido em nosso laboratório, onde os cigarros de maconha (200mg de Cannabis sativa) foram queimados e a fumaça conduzida para a câmara de exposição dos animais (exposição somente inalatória). Os baços e timos das proles foram coletados no 18,5° dia gestacional (DG), 20° e 60° dias pós-natais (DPN) para a realização das análises histológica e histoquímica. Avaliações morfológicas e quantitativas dos órgãos foram realizadas utilizando-se métodos estereológicos e por meio da semi quantificação de fibras do sistema colágeno. Os resultados indicam um aumento no peso corporal dos animais com 60 DPN cujas mães foram expostas ao fumo de Cannabis sativa durante a gravidez. Os machos com 60 DPN expostos apresentaram redução no volume total do timo, assim como em seus principais compartimentos, medula e córtex, onde também foi observado um aumento de fibras do sistema colágeno, quando comparados aos animais controles. Além disso, o baço desses animais também apresentou redução significativa em seu volume, porém não houve redução significativa no volume total da polpa vermelha. Machos e fêmeas com 60 DPN do grupo exposto apresentaram redução no volume total da polpa branca e aumento de fibras do sistema colágeno na região das trabéculas do parênquima do baço. Em suma, a exposição gestacional à maconha causa efeitos fetotóxicos que podem ser observados por alteração no baço e no timo da prole (sendo os efeitos distintos para machos e fêmeas) e estas alterações se tornam mais marcantes com o avanço da idade do animal, com potencial comprometimento da resposta imune nesses indivíduos. / Cannabis sativa (marijuana) is one of the most well-known and used illicit drugs worldwide. Recently, recreational use of that drug among young people has increased greatly, especially among pregnant women. Studies indicate that its use in pregnancy causes adverse fetotoxic effects, however there are few studies evaluating the effects of marijuana use during this critical period on the developing immune system. In this study, we evaluated the impact of gestational exposure to smoke marijuana resulting from burning cigarettes on the spleen and thymus development of BalbC mice offspring. We have used a model that approximates the real conditions of human use (inhalation) under the dose and medium exposure aspects. Pregnant mice (n=20), were exposed to marijuana smoke or filtered air (control group) from 5.5° to 17.5° gestational day (GD) for 5 minutes daily. Thus, we used a smoke inhalation apparatus developed in our laboratory where the marijuana cigarettes (200mg of Cannabis sativa) were burned and conducted to exposure chamber reaching the animals (nose-only exposure). Spleen and thymus of the offspring were collected on the 18.5° gestational day (GD), 20° and 60° postnatal day (PND) for the histological and histochemical analysis. Morphological and quantitative evaluations of these organs were performed using stereological methods and semi quantification of collagen fibers. The results indicate an increase in the mice body weight at PND 60 whose mothers were exposed to Cannabis sativa smoke during pregnancy. The PND 60 males from exposed group showed lower thymus total volume, as well as its main compartments such as medulla and cortex, where collagen fibers was also observed, when compared with males from the control group. Also, the spleen of these animals also presented a significant reduction, however no significant reduction was showed in the total volume of the red pulp. In addition, males and females from the exposed group at PND 60 presented reduction in total volume in the white pulp and increased of collagen fibers in the trabeculae region of the spleen. In summary, gestational exposure to marijuana causes fetotoxic effects that can be observed due to alteration in the spleen and thymus of the offspring (the effects being different for males and females), and these changes being marked with the advancement of the age, with potential impairment of the immune response in these individuals.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-05-12T12:41:18Z No. of bitstreams: 1 468413 - Texto Completo.pdf: 1889042 bytes, checksum: 6fc3c774d36afa42b5f3352e1661e027 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-12T12:41:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 468413 - Texto Completo.pdf: 1889042 bytes, checksum: 6fc3c774d36afa42b5f3352e1661e027 (MD5) Previous issue date: 2015-05-13 / This paper deals with an investigation of the inefficiency of Brazilian public ports, given the recurring and growing questioning this sector has suffered in recent years. So there was a bibliographical reference on the routines and peculiarities of Brazil?s port system, considering its History and the current context. Variables were enrolled according to their market relevance, then it was proposed the inclusion of unpublished variables in literature and it turned out to be extremely significant to measure the efficiency of national public ports. It was applied, as analysis methodologies, Data envelopment analysis (DEA) and the Stochastic Frontier Analysis (SFA), and in each one it was demonstrated its features and results. Thus, it was formulated six models, and in each one was possible to see which public ports in the sample are the most efficient or inefficient and which variables are significant for their performance. This way, it could be concluded that all proposed formulations suggested a high level of inefficiency of national public ports in this period. / O presente trabalho versa sobre uma investiga??o da inefici?ncia dos portos p?blicos brasileiros, dados os recorrentes e crescentes questionamentos que este setor vem sofrendo nos ?ltimos anos. Para tanto, inicialmente realizou-se uma refer?ncia bibliogr?fica sobre as rotinas e peculiaridades do sistema portu?rio brasileiro, considerando a hist?ria e o contexto atual pelo qual o mesmo atravessa. Na sequ?ncia, foram arroladas vari?veis de acordo com sua relev?ncia para o desempenho deste mercado, sendo que se prop?s a inclus?o de fatores ainda n?o utilizados na literatura e que, mesmo assim, acabaram se mostrando extremamente significativas para a mensura??o da efici?ncia dos portos p?blicos nacionais. Como metodologias de an?lise, aplicou-se a An?lise Envolt?ria de Dados (DEA) e a An?lise de Fronteira Estoc?stica (SFA), demonstrando suas caracter?sticas e resultados. Desta forma, formularam-se seis modelos, onde se pode perceber quais dos portos p?blicos da amostragem s?o os mais eficientes ou ineficientes e quais vari?veis s?o significativas para o desempenho dos mesmos. Destarte, pode-se concluir que todas as formula??es propostas sugeriram um alto n?vel de inefici?ncia por parte dos portos p?blicos nacionais no per?odo analisado.

O timo é um órgão complexo estruturado por um estroma, o qual é formado principalmente por células epiteliais corticais (cTECs) e por células epiteliais medulares (mTECs) além de outros tipos celulares como células dendríticas (DC), macrófagos, linfócitos B e fibroblastos. Além disso, os precursores das células T originados da medula óssea chegam ao timo (timócitos) se maturando em linfócitos T, os quais migram para a periferia. O timo é, portanto, o local de eventos muito importantes durante a maturação do sistema imune, incluindo o controle de sua própria homeostase. No presente estudo, procuramos retratar as principais características do timo por meio da análise da expressão gênica em grande escala, isto é, descrevendo parte de seu transcriptoma. Fizemos uso da tecnologia dos cDNA microarrays em duas versões. Na primeira delas utilizamos cDNA microarrays construídos em lâminas de vidro e sondas fluorescentes marcadas com fluorocromos Cy3 ou Cy5 e, na segunda versão utilizamos cDNA microarrays em membranas de náilon e sondas radioativas marcadas com o isótopo 33P. Para a análise dos dados, utilizamos programas de bioinformática dedicados, tais como o SAM (Significance analysis of microarrays) e o Cluster e TreeView. Três conjuntos de resultados foram possíveis. No primeiro conjunto observamos a ocorrência da expressão gênica promíscua (PGE) de antígenos de tecidos/órgãos parenquimatosos (TSAs), demarcando sua emergência temporal durante a ontogenia do timo murino, a qual é influenciada pelo background genético das linhagens isogênicas estudadas. A ocorrência da PGE no timo é associada às bases genético-moleculares da indução de tolerância imunológica nas células T, contribuindo com a prevenção da auto-imunidade. O segundo conjunto de resultados consistiu na análise da expressão gênica do timo de camundongos nocautes (KO) envolvendo genes importantes para a maturação das células T, tais como TCR?, LAT, Rel-b, RAG-1 e CD3?, possibilitando a observação de seus efeitos na regulação da transcrição neste órgão. Finalmente, o terceiro conjunto consistiu na definição da dissecação molecular virtual do timo. Por meio de perfis de expressão gênica particulares exibidos por cada tipo principal que povoa o timo, foi possível dissecar este órgão usando a tecnologia dos cDNA microarrays. / The thymus is a complex organ structured by a stroma, which is formed mainly by cortical epithelial cells (cTECs) and medullary epithelial cells (mTECs) besides of other cell types such as dendritic cells (DC), macrophages, B lymphocytes and fibroblasts. Moreover, the T cell precursors arising from the bone marrow reach the thymus (thymocytes) maturing in T lymphocytes, which migrate to the periphery. Thus, the thymus is the place of very important events during the maturation of the immune system, including the control of their own homeostasis. In the present study, we search to picture the main characteristics of the thymus by means of the large scale gene expression analysis that is, describing part of their transcriptome. We made use of the cDNA microarray technology in two versions. In the first one we used cDNA microarrays constructed on glass slides and fluorescent probes labeled with the fluorochromes Cy3 or Cy5 and in the second version we used cDNA microarrays on nylon membranes and radioactive probes labeled with 33P isotope. To data analysis we used dedicated bioinformatics programs, such as SAM (significance analysis of microarrays) and Cluster-Tree View. Three sets of results were possible. In the first set we observed the occurrence of the promiscuous gene expression (PGE) of parenchymal tissue/organ specific antigens (TSAs), demarking their temporal emergence during the murine thymus ontogeny, which is influenced by the genetic background of the inbred strains studied. The occurrence of PGE in the thymus is associated to the molecular-genetics basis of the immune tolerance of T cells, contributing with the prevention of autoimmunity. The second set of results consisted in the analysis of gene expression of thymus from knockout mice (KO) involving genes important for T cell maturation, such as TCR?, LAT, Relb, RAG-1 and CD3?, allowing the observation of its effects on the transcription regulation in this organ. Finally, the third set consisted in the definition of the virtual molecular dissection of the thymus. By means of particular gene expression profiling featured by each main cell type populating the thymus, it was possible to dissect this organ using the cDNA microarray technology.

Orientador: Antonio José Maria Cataneo / Coorientador: Daniele Cristina Cataneo / Coorientador: Paulo Eduardo de Oliveira Carvalho / Banca: Vânia dos Santos Nunes / Banca: Olavo Ribeiro Rodrigues / Resumo: Introdução: A miastenia gravis é uma doença que afeta a junção neuromuscular e leva a fraqueza da musculatura esquelética. O tratamento atual pode ser clínico ou cirúrgico através da ressecção completa do timo. Objetivo: Comparar, através de uma revisão sistemática da literatura, os resultados do tratamento cirúrgico e clínico da miastenia gravis. Métodos: Foi realizada uma busca nos principais bancos de dados a fim de encontrar ensaios clínicos randomizados que comparassem as duas modalidades terapêuticas. Como não existem estudos dessa categoria, foram selecionados aqueles com menor nível de evidência e que continham as duas intervenções, com pelo menos 10 pacientes em cada braço do estudo. A análise estatística foi feita com software StatsDirect, versão 3.0.121. Resultados: A busca encontrou 592 artigos na base Medline, 1925 artigos na base Embase e 204 artigos na base Lilacs. Após a exclusão dos estudos duplicados, 51 artigos foram analisados integralmente e nove foram selecionados para esta revisão. O número total de pacientes avaliados foi de 3.211. A mortalidade nos grupos cirúrgico e clínico foram respectivamente de 7 e 19%, com diferença estatística significante. A taxa de remissão nos grupos foi de 17% para o grupo cirúrgico e de 13% para o clínico, sem significância estatística. Para o desfecho melhora, o grupo cirúrgico apresentou uma taxa de 23% e o clínico de 29%, também sem diferença estatística. Conclusões: Apesar da baixa evidência disponível, a timectomia pode ser considerada uma opção terapêutica na miastenia gravis, com menores índices de mortalidade e taxas de remissão e controle semelhantes ao tratamento clínico / Abstract: Introduction: Myasthenia gravis is a disease that affects the neuromuscular junction and leads to weakness of the skeletal muscles. Current treatment is guided by the clinical and surgical conduction through the complete resection of the thymus. Objective: Compare, through a systematic review, the results of surgical and medical treatment of myasthenia gravis. Methods: A search was conducted in major databases to find randomized controlled trials that compared the two treatment modalities. As there are no studies that category, were selected studies with a lower level of evidence and that contained both interventions and at least 10 patients in each arm of the study. Statistical analysis was performed with StatsDirect version 3.0.121 software. Results: The search found 592 articles in Medline, 1925 articles in the Embase and 204 articles in the Lilacs. After exclusion of duplicate studies, 51 articles were fully analyzed and nine were selected for this review. The total number of patients was 3,211. The mortality in the surgical and medical groups were respectively 7 and 19%, with significant differences. The remission rate in both groups was 17% for the surgical group and 13% for clinical, without statistical significance. To improve the outcome, the surgical group had a rate of 23% and 29% of the clinical, also no statistical difference. Conclusion: Despite the low available evidence, thymectomy may be considered a therapeutic option in myasthenia gravis, with lower rates of mortality and rates of remission and control similar to clinical treatment Keywords: myasthenia gravis, thymectomy, clinical treatment / Mestre

The traffic of T cells, that occur when bone marrow-derived T cell precursors penetrate the thymus, with a phenotype of immature cells, and its subsequent output, as mature cells, depends of the thymic blood vessels that consists mainly of thymic endothelial cells. The expression of ligands and receptors of ECM in thymic endothelial cells, as well as its role in the processes of migration and emigration of the T cells from the thymus remains unclear. Our goal was to evaluated the expression of some of ECM ligands and their respective receptors in the strain of thymic endothelial cells tEnd.1. In addition, we aimed to study the role of the components of the ECM in the tEnd.1 cells and thymocytes interaction. First, it was detected by confocal immunofluorescence the presence of ECM proteins fibronectin and laminin, which were also observed through flow cytometry. The presence of their respective receptors, VLA5 and VLA6, were highlighted by immunoperioxidase and flow cytometry. Assays of adhesion showed that the use of antibodies anti-VLA5 and anti-VLA6 seems to block at least partially, the adhesion of thymocytes to endothelial cells. In addition, the transendothelial migration assay showed less migration in absolute cell number of the thymocytes pre-treated with antibodies anti-receptors of ECM, although this migration was not statistically significant. Finally, when the phenotype of the transmigrated thymocytes was observed, there was not difference in the migration pattern among them. This investigation shows that the thymic endothelial cells are able to express fibronectin and laminin proteins, as well as, their respective receptors VLA5 and VLA6, and suggests that these molecules could participate in the processes of intrathymic lymphocytes migration. / Os precursores das células T sofrem diferenciação e seleção intratímica através das interações com os componentes do microambiente tímico. Este é constituído em sua grande maioria por células epiteliais tímicas (TEC), macrófagos, células dendríticas, fibroblastos e os produtos de secreção dessas células, tais como hormônios, interleucinas e moléculas de matriz extracelular (ECM). O tráfego de células T, que a princípio penetram no timo provenientes da medula óssea, com fenótipo de células imaturas e, a sua posterior saída, como células maduras, depende terminantemente dos vasos sanguíneos que irrigam o órgão. Tais vasos são constituídos principalmente de células endoteliais tímicas. Tendo em vista que a expressão de ligantes e receptores de ECM em células endoteliais tímicas, assim como sua função nos processos de migração e emigração de células T do timo permanece pouco estudada, neste trabalho foi avaliada a expressão de alguns ligantes de ECM e seus respectivos receptores em uma linhagem de células endoteliais tímicas, tEnd.1. Além disso, estudou-se também o papel destes componentes de ECM na interação entre as células tEnd.1 e os timócitos. A princípio, foi detectado por imunofluorescência confocal a presença das proteínas de ECM fibronectina e laminina, que foram também observadas através de citofluorimetria, enquanto a presença de seus respectivos receptores, VLA5 e VLA6, foram evidenciados por imunoperoxidase e citofluorimetria. Ensaios de adesão sugeriram que o uso de anticorpos anti-receptores de ECM, anti-VLA5 e anti-VLA6, inibem pelo menos parcialmente, a adesão de timócitos às células endoteliais tEnd.1. Por fim, ensaios de migração transendotelial demonstraram claramente uma menor migração em números absolutos dos timócitos pré-tratados com anticorpos anti-receptores de ECM, embora essa diminuição não tenha sido estatisticamente significativa. Tomando em conjunto, os dados neste trabalho demonstraram que as células endoteliais tímicas da linhagem tEnd.1 são capazes de expressar tanto ligantes de ECM, como seus respectivos receptores, sugerindo ainda, a participação destas moléculas nos processos de migração de linfócitos intratímicos.

Made available in DSpace on 2016-05-11T13:01:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 monica_barragan_ioc_dout_2016.pdf: 13009899 bytes, checksum: abc5f4810f4467645ebd92d9f74a39e2 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A desnutrição proteica é considerada um fator de risco primário para o desenvolvimento da leishmaniose visceral (LV), contudo, as bases imunológicas desta associação são majoritariamente desconhecidas. Este trabalho pretendeu determinar os efeitos da desnutrição proteica no timo e baço de camundongos BALB/c infectados com L. infantum. Os animais foram submetidos à dieta controle (CP, 14% em proteína) ou baixa em proteína (LP, 4% em proteína). Após sete dias de dieta, cada grupo foi dividido em dois e cada um foi infectado com L. infantum (CPi, e LPi). As dietas foram mantidas após a infecção e os animais foram eutanasiados 14 dias pós-infecção. Os animais LPi mostraram uma desnutrição moderada e uma diminuição significativa no peso do timo e baço, acompanhado de níveis séricos reduzidos de IGF1 e Leptina e de IGF1 hepático obedecendo aos padrões esperados em um quadro de desnutrição proteica. Além disso, animais LPi apresentaram uma carga parasitaria significativamente maior que animais CPi. A desnutrição e infecção induziram danos na arquitetura tímica, gerando alterações na distribuição de laminina e fibronectina, e redução na secreção de varias citocinas e quimiocinas no fluido intersticial tímico tais como: IL-12, CCL5, CXCL12, IGF1, CXCL9 e CXCL10, sugerindo que a entrada de progenitores ao timo e sua maturação intratímica e migração pode estar comprometida nestes animais A análise proteômica deste fluido permitiu gerar um perfil de proteínas secretadas tímicas e revelou a importância de proteínas exossomais na fisiologia do timo, assim como a participação de vias metabólicas como a fosforilação oxidativa e \03B2-oxidação de ácidos graxos na proliferação e diferenciação dos timócitos LPi. O baço, por sua vez, apresentou desorganização tecidual e diminuição no número de folículos, assim como uma redução significativa de moléculas pró-inflamatórias e de moléculas envolvidas na quimiotaxia no fluido intersticial esplênico de animais LPi (IL-1a, IL-1b, IL-2, IL-12, IGF1, CCL5, CXCL12, CXCL9 e CXCL10). Esta diminuição se correlaciona positivamente com a carga parasitaria esplênica incrementada, e pode ser uma causa da mesma. A análise proteômica do fluido intersticial esplênico revelou um aumento na abundância de proteínas relacionadas com estresse oxidativo sugerindo um desequilibro no estado oxidante/anti-oxidante em animais LPi. Observou-se também uma diminuição na abundância de proteínas envolvidas na via das pentoses fosfato e na síntese de purinas indicando potenciais defeitos na proliferação de esplenócitos. A identificação de proteínas envolvidas na resposta pró-inflamatória e quimiotaxia, cuja abundância estava diminuída, reforça os resultados moleculares relatados no grupo LPi. Em síntese, identificaram-se novos elementos na patogênese da LV, tanto no timo quanto no baço, que contribuem ao entendimento do aumento da susceptibilidade a desenvolver LV quando há uma condição desnutrição pré-existente / Protein malnutrition is considered a primary risk factor for the development of visceral leishmaniasis (VL); however, the immunological bases of this association are mainly unknown. This thesis aims to determine the effects of protein malnutrition in the thymus and spleen of BALB/c mice infected with L. infantum. The animals were fed with control (CP, 14% protein) or low-protein (LP, 4% protein) diet. After seven days of diet, each group was divided in two and one of them was infected with L. infantum (CPi, and LPi). The diets were maintained after infection and animals were euthanized after 14 post-infection. LPi animals showed a moderate malnutrition and a significant decrease in thymus and spleen weight. This was accompanied by a reduced serum levels of IGF1 and Leptin, and hepatic IGF1, showing the expected patterns of protein malnutrition. In addition, malnutrition induced a significant increase in the splenic parasite load of infected animals. Malnutrition and infection induced damage to the thymic architecture, causing changes in the distribution of laminin and fibronectin, and a reduction in the secretion of various cytokines and chemokines such as IL-12, CCL5, CXCL12, IGF1, CXCL9 and CXCL10 into the thymic interstitial fluid, suggesting that the entrance of progenitors into the thymus and intrathymic maturation and migration can be compromised in these animals. Quantitative proteomic analysis of this fluid allowed the identification thymic secreted proteins and revealed the importance of exosomal proteins in the thymus physiology. Proteomics also revealed that metabolic pathways such as oxidative phosphorylation and β-oxidation of fatty acids are potentially involved in the proliferation and differentiation of LPi thymocytes. Malnutrition also induced a drastic disorganization of splenic architecture including a severe reduction in the number of follicles, as well as a significant decrease of pro-inflammatory and chemotactic molecules in the splenic interstitial fluid of LPi animals (IL-1a, IL-1b, IL-2, IL-12, IGF1, CCL5, CXCL12, CXCL10 and CXCL9), which is related to the increased splenic parasitic load. Proteomic analysis of splenic interstitial fluid revealed increased abundance of proteins related to oxidative stress suggesting an imbalance in the oxidant/anti-oxidant state in LPi animals. On other hand, proteins with decreased abundance were mainly involved in the pentose phosphate pathway and purine synthesis suggesting potential defects on splenocytes proliferation. Also, a decreased abundance of proteins associated with proinflammatory response and chemotaxis was observed in the splenic interstitial fluid, supporting the molecular data obtained in the LPi group. In summary, we identified new elements in the pathogenesis of VL both in the thymus as the spleen that contribute to the understanding of the increased susceptibility to develop VL when a malnutrition condition pre-exists. / 2100-03-04

Doctor en Ciencias con Mención en Biología Molecular, Celular y Neurociencias / El lupus eritematoso sistémico (LES) es una enfermedad autoinmune caracterizada por la producción de autoanticuerpos que forman complejos inmunes, los cuales son los responsables de la inflamación y daño tisular. En el LES, los linfocitos B son mediadores claves en el desarrollo de la enfermedad, dado que se diferencian a células plasmáticas secretoras de anticuerpos. Sin embargo, se ha demostrado que los linfocitos T también cumplen un papel importante en esta enfermedad ya que proveen a los linfocitos B de señales para activarse y diferenciarse a células plasmáticas secretoras de anticuerpos. El timo es un órgano linfoide primario dedicado a la generación y maduración de linfocitos T. Antecedentes recientes de la literatura han demostrado que el timo de personas adultas no sólo cumpliría una función en el desarrollo de los linfocitos T, sino que además el timo alojaría linfocitos B e incluso actuaría como nicho de células plasmáticas productoras de anticuerpos anti antígenos virales. Más aún, estudios previos de nuestro laboratorio en el modelo murino de LES NZBWF1, han demostrado que el timo de ratones enfermos de lupus presenta importantes alteraciones en las poblaciones celulares, como cambios en las proporciones de linfocitos T e interesantemente un aumento en la población de linfocitos B en comparación a animales sanos. El conjunto de estos antecedentes nos llevó a estudiar la contribución de los linfocitos T y B presentes en el timo de ratones lúpicos NZBWF1 en el desarrollo de la respuesta humoral autoinmune. 2 Nuestros resultados indican que animales enfermos presentan una involución tímica exacerbada en comparación a animales que no se han enfermado, junto con una pérdida de la estructura normal del timo determinada por las zonas de corteza y médula. Asociado a este fenómeno, observamos alteraciones en las subpoblaciones de timocitos, que son las células en diferenciación que originarán finalmente a los linfocitos T. En ratones enfermos, observamos que los timocitos CD4+ en vías de diferenciación disminuyen y aumentan los linfocitos T CD4+ de memoria y linfocitos T foliculares. Por otro lado, existe un aumento en la frecuencia de linfocitos B en el timo previo al desarrollo de la enfermedad, pero el aumento más significativo de linfocitos B en el timo ocurre una vez que se desarrolla el LES. De manera interesante, los linfocitos B cambian su distribución en el timo de ratones enfermos, formando estructuras similares a un centro germinal. Mas aún, en el timo de ratones enfermos existe un mayor número de linfocitos B que expresan Ki-67 comparado a ratones sanos, indicando que estos linfocitos se encuentran proliferando. Además demostramos que en el timo de animales enfermos hay un aumento de células que secretan anticuerpos de tipo IgG e IgM, entre las cuales una proporción de ellas producía autoanticuerpos IgG contra ADN, un autoantígeno del LES. Dado que los linfocitos T foliculares presentes en el timo del ratón lúpico activan in vitro a los linfocitos B, nuestros resultados sugieren que en el timo de los ratones enfermos existen linfocitos B que se están diferenciando en células plasmáticas productoras de autoanticuerpos. Finalmente, demostramos in vitro que los linfocitos B del timo de ratones lúpicos favorecen la diferenciación de timocitos a linfocitos T foliculares. 3 En conclusión, la acumulación de linfocitos B en el timo de ratones lúpicos participaría en la expansión de linfocitos T foliculares en este órgano, los que a su vez podrían favorecer la diferenciación de linfocitos B a células plasmáticas autorreactivas. Nuestros resultados sugieren que el timo constituye un nicho que promueve la mantención de la respuesta humoral autoinmune en el modelo murino NZBWF1 de lupus. / Systemic lupus erythematosus (SLE) is an autoimmune disease characterized by the production of antibodies that form immune complexes, which induce inflammation and tissue damage. In SLE, B cells are key mediators of the disease development, since they differentiate into antibody-secreting cells. However, it has been demonstrated that T cells also play an important role in this disease, by delivering signals that activate and differentiate B cells into antibody-secreting plasma cells. The thymus is a primary lymphoid organ dedicated to T cell generation and maturation. Recent reports in the literature have shown that the thymus of adult individuals, not only maintains its role in T cell development, but also harbors B cells and even acts as a niche of plasma cells that produce antibodies against viral antigens. Moreover, previous work in our laboratory using the SLE murine model NZBWF1, found that the thymus of lupus-diseased mice have important alterations in its cellular composition, such as changes in T cells proportions and a remarkable increase in B cells compared to healthy mice. This converging evidence led us to study the contribution of T and B cells present in the thymus of diseased NZBWF1 mice during the development of the autoimmune humoral response. Our results indicate that diseased mice show an exacerbated thymic involution compared to animals that have not yet developed the diseased, together with a loss of normal thymic structure composed of cortex and medulla. Associated to this phenomenon, we observed alterations in the thymocyte subpopulations, which are cells 5 undergoing differentiation that give rise to T cells. In diseased mice, we observed that immature CD4+ thymocytes decrease while memory CD4+ T cells and follicular T cells are increased. On the other hand, there is a higher frequency of B cells in the thymus prior to the onset of the disease, but the most significant increase occurs once mice have developed SLE. Interestingly, B cells change their distribution in the thymus of diseased mice, forming germinal center-like structures. Moreover, in the thymus of diseased mice thymus there is a higher number of B cells expressing Ki-67 compared to healthy mice, indicating that B cells are proliferating. Also, we demonstrated that in the thymus of diseased mice there is an increase of cells that secrete IgG and IgM antibodies among which a fraction produced IgG autoantibodies against DNA, an autoantigen of SLE. Follicular T cells present in the lupic mouse thymus were shown to induce B cells activation in vitro, suggesting that the thymus of diseased mice contains B cells that are differentiating in antibody-producing plasma cells. Finally, in vitro we demonstrated that thymic B cells from lupic mice favour the differentiation of follicular T cells from thymocytes. In conclusion, the accumulation of B cells in the thymus of lupic mice could participate in the expansion of follicular helper T cells in this organ, which may in turn promote the activation and differentiation of B cells into autoreactive plasma cells. Our results present novel findings which suggesting that the thymus constitutes a niche that promotes the maintenance of the autoimmune humoral response in the lupus murine model NZBWF1. / financiamiento de mi beca CONICYT 21130598 y de los proyectos FONDECYT 1140431, FONDECYT 1180385, PFB-16 y AFB 170004. / Septiembre 2019

Made available in DSpace on 2015-12-10T14:24:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-23. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:30:08Z : No. of bitstreams: 1 000848649.pdf: 1399689 bytes, checksum: ae8884abe366a7d62cbc2bc66d58a529 (MD5) / Introdução: A miastenia gravis é uma doença que afeta a junção neuromuscular e leva a fraqueza da musculatura esquelética. O tratamento atual pode ser clínico ou cirúrgico através da ressecção completa do timo. Objetivo: Comparar, através de uma revisão sistemática da literatura, os resultados do tratamento cirúrgico e clínico da miastenia gravis. Métodos: Foi realizada uma busca nos principais bancos de dados a fim de encontrar ensaios clínicos randomizados que comparassem as duas modalidades terapêuticas. Como não existem estudos dessa categoria, foram selecionados aqueles com menor nível de evidência e que continham as duas intervenções, com pelo menos 10 pacientes em cada braço do estudo. A análise estatística foi feita com software StatsDirect, versão 3.0.121. Resultados: A busca encontrou 592 artigos na base Medline, 1925 artigos na base Embase e 204 artigos na base Lilacs. Após a exclusão dos estudos duplicados, 51 artigos foram analisados integralmente e nove foram selecionados para esta revisão. O número total de pacientes avaliados foi de 3.211. A mortalidade nos grupos cirúrgico e clínico foram respectivamente de 7 e 19%, com diferença estatística significante. A taxa de remissão nos grupos foi de 17% para o grupo cirúrgico e de 13% para o clínico, sem significância estatística. Para o desfecho melhora, o grupo cirúrgico apresentou uma taxa de 23% e o clínico de 29%, também sem diferença estatística. Conclusões: Apesar da baixa evidência disponível, a timectomia pode ser considerada uma opção terapêutica na miastenia gravis, com menores índices de mortalidade e taxas de remissão e controle semelhantes ao tratamento clínico / Introduction: Myasthenia gravis is a disease that affects the neuromuscular junction and leads to weakness of the skeletal muscles. Current treatment is guided by the clinical and surgical conduction through the complete resection of the thymus. Objective: Compare, through a systematic review, the results of surgical and medical treatment of myasthenia gravis. Methods: A search was conducted in major databases to find randomized controlled trials that compared the two treatment modalities. As there are no studies that category, were selected studies with a lower level of evidence and that contained both interventions and at least 10 patients in each arm of the study. Statistical analysis was performed with StatsDirect version 3.0.121 software. Results: The search found 592 articles in Medline, 1925 articles in the Embase and 204 articles in the Lilacs. After exclusion of duplicate studies, 51 articles were fully analyzed and nine were selected for this review. The total number of patients was 3,211. The mortality in the surgical and medical groups were respectively 7 and 19%, with significant differences. The remission rate in both groups was 17% for the surgical group and 13% for clinical, without statistical significance. To improve the outcome, the surgical group had a rate of 23% and 29% of the clinical, also no statistical difference. Conclusion: Despite the low available evidence, thymectomy may be considered a therapeutic option in myasthenia gravis, with lower rates of mortality and rates of remission and control similar to clinical treatment Keywords: myasthenia gravis, thymectomy, clinical treatment

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:06:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000433664-Texto+Completo-0.pdf: 556146 bytes, checksum: f1547b214dce555fdf116d5fa8243c45 (MD5) Previous issue date: 2011 / Objective: To evaluate the fetal thymus size by ultrasound 24h- 48 h after the use of Betamethasone for lung maturation in pregnancies between 24 and 34 weeks. Methods: a prospective study of 25 pregnant women whom received Betamethasone intramuscular therapy to enhance fetal lung maturation before 34 weeks of pregnancy. Thymus perimeter and diameter were recorded during ultrasound examination before and 24h, 48 h after corticosteroid therapy. Results: Both the diameter and the perimeter of the fetal thymus were smaller 24h and 48h after the use of Betamethasone. The means of the thymus diameters were 25,5 ± 3,7; 21, 7 ± 3,6 and 20,2 ± 5,5 mm and of thymus perimeters were 89,8 ± 9,5; 78,6 ± 8,6 and 76,6 ± 15,0 mm for 0, 24h and 48 h, respectively (P < 0. 001).Conclusions: Betamethasone for lung maturation is possibly associated with the decrease of the thymus diameter and perimeter in 24 - 48 h. This may increase falsely the number of fetus with the thymus size below 5 th percentile if the thymus evaluation is done after the use of the corticoesteroides. / Objetivo: Avaliar as medidas do timo fetal através da ultrassonografia 24 e 48 horas após o uso de Betametasona para maturação pulmonar em gestações entre 24 e 34 semanas.Métodos: estudo prospectivo com 25 gestantes que receberam Betametasona intramuscular para maturação pulmonar fetal antes de 34 semanas de gestação. As medidas do perímetro e do diâmetro do timo foram realizadas antes, 24 e 48 horas após o uso do corticoide. Resultados: o diâmetro e o perímetro do timo diminuíram após 24 e 48 horas da administração de Betametasona. As médias do diâmetro foram 25,5 ± 3,7; 21, 7 ± 3,6 e 20,2 ± 5,5 mm e do perímetro foram 89,8 ± 9,5; 78,6 ± 8,6 e 76,6 ± 15,0 mm para 0, 24h e 48 h, respectivamente (P < 0. 001).Conclusão: O uso de Betametasona para maturação pulmonar fetal pode estar associada com a diminuição do diâmetro e do perímetro do timo fetal. Este fato pode aumentar falsamente o número de fetos com timos considerados abaixo do percentil 5, caso a medida seja realizada após o uso de corticoide.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-02-20T23:56:40Z No. of bitstreams: 1 FlaviaEmanuellyLimaRibeiroMarinho_DISSERT.pdf: 981357 bytes, checksum: eb24f51cd3c62e71bd5dbce48fa0b52d (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-03-03T00:33:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 FlaviaEmanuellyLimaRibeiroMarinho_DISSERT.pdf: 981357 bytes, checksum: eb24f51cd3c62e71bd5dbce48fa0b52d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-03T00:33:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FlaviaEmanuellyLimaRibeiroMarinho_DISSERT.pdf: 981357 bytes, checksum: eb24f51cd3c62e71bd5dbce48fa0b52d (MD5) Previous issue date: 2016-09-02 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / O trabalho tem como tema a constru??o de um territ?rio brasileiro no Atl?ntico sul. Objetiva analisar o processo de constru??o do territ?rio nacional, partindo da an?lise da constitui??o das fronteiras mar?timas do Estado brasileiro. Entender como esse Estado Nacional operacionalizou o esquadrinhamento de um novo territ?rio, na d?cada de 1970, com a extens?o do Mar Territorial brasileiro para 200 milhas n?uticas, ? o nosso principal problema. Nessa perspectiva, tratamos das modifica??es administrativas do Estado brasileiro e a forma??o de uma tecnoestrutura estatal, que acabou dotando a organiza??o governamental brasileira de uma nova l?gica t?cnica e administrativa para dar sustenta??o aos novos limites mar?timos. Pudemos observar que a interven??o do Estado brasileiro em pesquisas voltadas para o mar e na propaganda sobre os novos limites foram um dos pilares de sustenta??o do projeto de constru??o do territ?rio brasileiro no Atl?ntico Sul. Ao lan?ar m?o de um projeto de constru??o de um territ?rio mar?timo, identificamos a fragilidade do governo brasileiro em sustentar o mar territorial de 200 milhas, frente ? imposi??o de acordos de pesca feitos por pa?ses que n?o reconheciam os novos limites mar?timos do Brasil. / The theme of the present work is the construction of a Brazilian territory in the South Atlantic. When we observe the national territory building process, based on the analysis of the constitution of the maritime borders of the Brazilian state, our central problem concerns to the understanding of how this National State operationalized the full exploration of a new territory, in the 1970s, with the extension of the Brazilian Territorial Sea to 200 nautical miles. In this perspective, we handle the administrative changes of the Brazilian state and the formation of a state technostructure, which ended up giving the Brazilian government organization of a new technical and administrative logic to sustain the new maritime boundaries. We observed that the intervention of the Brazilian government in research for the sea and propaganda about the new limits were one of the pillars of support of the Brazil construction project in the South Atlantic. To make use of a construction of a maritime territory project, identified the weakness of the Brazilian government to support the territorial sea of 200 miles, against the imposition of fisheries agreements made by countries that did not recognize the new maritime boundaries of Brazil.