Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-10-11T18:05:38Z No. of bitstreams: 1 ailin_l_oliveira_ioc_bcm_0048_2011.pdf: 2784238 bytes, checksum: 109591f3b041c2482398b825d1bb7d51 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-10-11T18:05:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ailin_l_oliveira_ioc_bcm_0048_2011.pdf: 2784238 bytes, checksum: 109591f3b041c2482398b825d1bb7d51 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Pesquisa sobre o Timo. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / No curso das doenças infecciosas, os circuitos neuroendócrinos e imunes atuam em conjunto facilitando a resposta do hospedeiro. Alterações no eixo hipotálamo-hipófise- adrenal são frequentemente associadas a infecções, como as causadas pelo Trypanosoma cruzi, o agente etiológico da doença de Chagas. Durante a fase aguda da infecção por T. cruzi, a ação pró-apoptótica de glicocorticóides (GC), sistemicamente aumentados, sobre timócitos CD4+CD8+ (DP), resulta em atrofia tímica. Recentemente, nosso grupo demonstrou expressão alterada de prolactina (PRL), um outro hormônio relacionado ao estresse, durante a infecção por T. cruzi. Com base no conhecimento das ações imunomoduladoras de PRL, como a proteção de timócitos da apoptose induzida por GC, pretendemos no presente estudo investigar uma possível função da ativação cruzada entre os receptores intratímicos de PRL e GC (PRLR e GR, respectivamente) no desencadeamento da atrofia tímica induzida por T. cruzi. Observamos um circuito intratímico específico de modulação de ambos os hormônios durante a infecção experimental por T. cruzi em camundongos adultos jovens. Enquanto os níveis plasmáticos de PRL e GC apresentaram-se aumentados no início da fase aguda da infecção, quando o processo de atrofia tímica é instaurado, os níveis intratímicos desses hormônios diminuíram, restabelecendo-se posteriormente aos níveis fisiológicos do controle não-infectado. Paralelamente, variações da expressão intratímica de PRLR e GR, ocorreram em acordo com a modulação local de seus ligantes. No início do processo de atrofia tímica, quando muitas células DP estão entrando em apoptose, observamos aumento da expressão de GR e diminuição de PRLR. Em um segundo momento, durante a fase mais tardia da infecção experimental por T. cruzi, houve restabelecimento da expressão gênica de ambos os receptores nessas células. Nessa fase, quando o processo de morte celular encontra-se estabilizado e somente algumas células aparentemente mais resistentes à ação pró-apoptótica de GC sobreviveram, observamos aumento da proteína Bcl-xl, um importante fator anti apoptótico induzido por PRL. Em acordo com esses achados, utilizando-se um modelo de indução de apoptose in vitro, verificamos maior Suscetibilidade de timócitos à morte induzida por GC nos períodos iniciais da infecção, bem como aos efeitos protetores de PRL, o que não foi observado na fase mais tardia da infecção. Tomados em conjunto, nossos dados apontam para uma função cruzada (cross-talk) entre PRLR e GR intratímicos, e que seria responsável pela manutenção da homeostasia tímica. Nesse sentido, alterações desse circuito podem contribuir para o processo de atrofia tímica característico da fase aguda da infecção pelo T. cruzi. / During infectious diseases, neuroendocrine and immune networks act in concert, facilitating host response. Disorders in the hypothalamic-pituitary-adrenal axis are frequently observed associated to infections. It has been demonstrated that increased level of circulating glucocorticoids (GC) systemic levels during the acute phase of Trypanosoma cruzi infection, the etiological agent of Chaga ́s disease, results in thymus atrophy. Such steroid can trigger apoptosis on cortical thymocytes bearing the phenotype CD4+CD8+ (DP) via a specific glucocorticoid receptor (GR). Changes in thymocyte development may have an important consequence for the disease, i.e., further autoimmune reactions. Recently our group demonstrated altered expression of prolactin (PRL), another hormone related to stress, during T. cruzi infection. Based on studies showing expression of PRL receptors (PRLR) on lymphocytes, and its effects on growth, differentiation, and apoptosis in lymphoid cells, this hormone is supposed to functions as an immunomodulator. Furthermore, prolactin protects T cells from GC- induced apoptosis both in vivo and in vitro, which corroborates to this hypothesis. Based on these data, here we aim to investigate the possible role of intrathymic GR- PRLR cross-talk to the outcome of T. cruzi induced thymus atrophy. Our results demonstrate altered intrathymic PRL and corticosterone levels during the acute phase of T. cruzi infection. When the same hormones were evaluated on plasma, a different modulation was detected, suggesting an independence of intrathymic and systemic circuits that may be related to thymus atrophy. Furthermore, we detected the variation of PRLR and GR intrathymic expression, that ocurred in accordance to the modulation of their locally produced ligands. The analysis of DP cells that survived to the apoptosis process at the late phase of acute infection, demonstrated increased PRLR expression in parallel to the decrease of GR levels, This receptor expression profile courses with an increase of anti apoptotic proteins and the stabilization of the thymus atrophy process and seems an important factor for the survival of these cells. Using an in vitro model of thymocyte apoptosis induction, we observed that such alterations result in different GC-induced cell death susceptibility as well as an altered answer to prolactin anti -apoptotic effects. Taken together our results point to an relevant intrathymic PRLR-GR cross-talk involved in thymus homeostasis. In this way, changes of this circuit may contribute to the outcome of the thymus atrophy characteristic of the acute phase of T. cruzi infection.

Made available in DSpace on 2015-05-22T18:39:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 207.pdf: 6020624 bytes, checksum: f6db5979961b8cf83ff182a31ae3f66f (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, é considerada um problema de saúde pública. A quimioterapia usada causa efeitos colaterias graves e sua utilização na fase crônica ainda é controversa. Neste sentido, a investigação de novas estratégias terapêuticas continua a ser uma prioridade. Os óleos essenciais (OEs) de plantas aparecem como fonte promissora de compostos bioativos. Neste trabalho investigamos as atividades tripanocida e citotóxica de OEs de Lippia sidoides (LS), Lippia origanoides (LO), Chenopodium ambrosioides (CA), Justicia pectoralis (JP), Ocimum gratissimum e Vitex agnus-castus (VAC). A caracterização química dos Oes, através da espectometria de massa, mostrou que o timol e carvacrol foram os principais componentes do LS e LO, enquanto que, o eugenol e 1,8-cineol foram os principais compostos de OG e VAC. Terpinoleno foi o principal constituinte de JP e CA. Todos os OEs foram ativos apresentando baixa toxicidade em macrófagos e alta seletividade para os parasitas. OEs de LS, LO, CA e OG foram os mais eficazes contra tripomastigota e inibiram eficientemente a sobrevivência de amastigotas no interior dos macrófagos. Nenhum destes OEs foi capaz de induzir alterações na produção de óxido nítrico. O tratamento com os OEs de LS, LO, OG e CA induziu alterações morfológicas compatíveis com a perda de viabilidade e morte celular. LS e LO causaram perda de viabilidade celular e da integridade da membrana, demonstrado pela redução da marcação com calceína e o aumento na proporção de células HE-positivas. Uma diminuição considerável na Rodamina 123 e aumento na intensidade de fluorescência do MitoSox foram indicativos de perda do potencial mitocondrial e geração de espécies reativas de oxigênio, o que em última instância conduzem à morte do parasita. Em conjunto nossos resultados apontam os OEs de LS, LO, CA e OG agentes promissores contra doença de Chagas

Orientador: Katia Denise Saraiva Bresciani / Banca: Renato Andreotti e Silva / Banca: Valéria Marçal Felix de Lima / Resumo: O objetivo deste estudo foi detectar reações cruzadas por Leishmania spp. e Trypanossoma cruzi pelo Ensaio Imunoenzimático Indireto (ELISA), pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Assim, foram colhidas 408 amostras sanguíneas de cães domiciliados no município de Araçatuba,SP, de ambos os sexos, de diversas raças e com idade a partir de seis meses. Em relação à Leishmania spp., pela RIFI, 14,95 % (61/408) foram reagentes. A positividade por meio do ELISA, foi de 20,10% (82/408) e pela PCR, 29,66% (121/408), com diferença significativa para o sexo e a idade destes animais (p<0,05). Para Trypanosoma spp., a ocorrência de anticorpos pelo ELISA foi de 10,54% (43/408) e pela PCR, 2,45% (10/408) cães foram positivos. Pela RIFI, 10,29% (42/408) dos animais foram considerados positivos e somente o sexo apresentou diferença significativa (p<0,05). Neste trabalho, constatou-se que 10,54%(43/408) dos animais foram soropositivos por ELISA para Trypanosoma spp., sendo que 79,07%(34/43) obtiveram resultados positivos no diagnóstico molecular para Leishmania spp. e dos 10,29% (42/408) positivos por RIFI, 95,24% (40/42) dos cães confirmaram a infecção por este parasita. Por meio dos resultados obtidos, pode-se inferir que foram evidenciadas reações cruzadas nos ensaios sorológicos para ambos os protozoários, nos animais analisados neste trabalho / Abstract: The aim of this study was to detect cross-infection by Leishmania spp. and Trypanosoma spp. by indirect immunosorbent assay (ELISA), by Indirect Immunofluorescence (IFA) and by the Polymerase Chain Reaction (PCR). Thus, blood samples were collected from 408 domestic dogs of both sexes, different races and ages from six months. For Leishmania spp. by IFA, 14.95% (61/408) were positive. Positive by ELISA, was 20.10% (82/408), and PCR 29.66% (121/408), with significant difference for sex and age of animals (p <0.05). For Trypanosoma spp., the occurrence of antibodies by ELISA, was 10.54% (43/408), and PCR, 2.45% (10/408) dogs were positive. By IFA, 10.29% (42/408) of the animals were considered positive and only sex was significant difference (p <0.05). In this work it was found that 10.54% (43/408) animals were seropositive by ELISA for Trypanosoma spp., 79.07% (34/43) had positive results in molecular diagnostic for Leishmania spp. and 10.29% (42/408) positive by IFA, 95.24% (40/42) dogs confirmed the infection by this parasite. Through the results obtained can be inferred that cross-infection were observed by both protozoa in animals of this paper / Mestre

Orientador: Simone Baldini Lucheis / Coorientador: Virgínia Bodelão Richini Pereira / Resumo: Os animais silvestres, tanto os de vida livre como os de cativeiro, podem ser reservatórios e portadores de diversos protozoários, como os integrantes do gênero Trypanosoma. Trypanosoma cruzi é um dos mais conhecidos tripanosomas, agente etiológico da doença de Chagas. Manifesta-se clinicamente com um caráter multifacetado, afetando humanos e várias espécies de animais domésticos e silvestres, como os primatas não humanos, que podem constituir-se em reservatórios do parasito. Em relação aos primatas neotropicais, ocorrem diferentes infecções por tripanosomas que também acometem humanos. No presente estudo, foram coletadas amostras de sangue de 39 primatas não humanos procedentes do Parque Zoológico Municipal de Bauru para pesquisa sorológica anti-T. cruzi e molecular de T. cruzi utilizando-se primers da região de kDNA de T. cruzi (TCZ1 e TCZ2) e da região codificadora da proteína de choque térmico (hsp70). Todos os animais foram negativos ao teste sorológico anti-T. cruzi e molecular para T. cruzi com os primers da região de kDNA. Porém, com a utilização de primers para hsp70, 11 dos 39 (28,2%) animais foram positivos. Os resultados do sequenciamento apresentaram similaridade para protozoários do gênero Trypanosoma. Apesar das dificuldades em se chegar à espécie circulante de tripanosoma entre os primatas, conclui-se que vetores triatomíneos e/ou moscas hematófagas podem estar circulando no ambiente dos animais e que ações de vigilância e busca dos mesmos são altamente recome... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Wild animals, both free-living and the captive ones, can be reservoirs and carriers of various protozoa, such as members of the genus Trypanosoma. Trypanosoma cruzi, the etiologic agent of Chagas disease, is one of the most known trypanosomes. Chagas disease is manifested clinically with a multifaceted character, affecting humans and several species of wild and domestic animals, such as non-human primates, which can be reservoirs of this parasite. Regarding the Neo-tropical primates, different infections occur by trypanosomes that also can affect humans. In this study, 39 blood samples were collected from nonhuman primates from Zoo Park Municipal of Bauru, São Paulo, Brazil, by serological and molecular analysis for T. cruzi infection using specific primers for kDNA region (TCZ1 and TCZ2) and the region encoding the heat shock protein (hsp70). All animals were negative to the serological test for anti-T. cruzi and molecular for T. cruzi with primers for kDNA region. However, with the use of primers for hsp70, 11 of 39 (28.2%) animals were positive. The sequencing results showed similarity to the genus Trypanosoma. Despite the difficulties in stablish the species of trypanosome among these primates, it is concluded that triatomine vectors and/or bloodsucking flies may be present in the animal environment; so, the entomologic vigilance for these insects are highly recommended. / Mestre

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-04-08T22:35:39Z No. of bitstreams: 1 CleberDeMesquitaAndrade_TESE.pdf: 1956935 bytes, checksum: b2ca1cf3e0006c3f5cc5877261077f97 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-04-11T20:25:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CleberDeMesquitaAndrade_TESE.pdf: 1956935 bytes, checksum: b2ca1cf3e0006c3f5cc5877261077f97 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-11T20:25:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CleberDeMesquitaAndrade_TESE.pdf: 1956935 bytes, checksum: b2ca1cf3e0006c3f5cc5877261077f97 (MD5) Previous issue date: 2015-03-12 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / O perfil cl?nico com classifica??o das formas cl?nicas e a gravidade da doen?a de Chagas foram avaliados em indiv?duos sororreativos para o Trypanosoma cruzi procedentes da mesorregi?o Oeste Potiguar. Neste estudo transversal foram inclu?dos 186 indiv?duos adultos, entre 23 a 78 anos de idade. Todos os indiv?duos foram submetidos ? avalia??o cl?nica, aplicado um question?rio cl?nicoepidemiol?gico e realizados eletrocardiograma de repouso, ecocardiograma transtor?cico, radiografia simples de t?rax e contrastadas de es?fago e c?lon. O Holter foi realizado em 98 pacientes e aplicado escores de risco de acidente vascular encef?lico isqu?mico e morte. A forma cl?nica indeterminada foi detectada em 51,6% (96/186) dos pacientes, a card?aca em 32,2% (60/186), a digestiva em 8,1% (15/186) e a cardiodigestiva em 8,1% (15/186). Dos pacientes com a forma cl?nica digestiva, 7,0% (13/186) apresentaram diferentes grupos de megaes?fago (I a IV) e 12,9% (24/186) apresentaram megac?lon de grau 1 a 3. Destes, 29,2% (7/24) com ambos os ?rg?os afetados. As altera??es eletrocardiogr?ficas foram observadas em 48,9% (91/186) dos pacientes e a arritmia ventricular complexa presente em 41,8% (41/98). Desses pacientes, 10,2% (19/186) apresentaram cardiomegalia, o aneurisma apical foi diagnosticado em 10,8% (20/186) e, as altera??es da contratilidade mioc?rdica segmentar do ventr?culo esquerdo em 33,9% (63/186). Em 7,5% (14/186) dos pacientes foi detectada insufici?ncia card?aca com classes funcionais que variam de I a IV. A classifica??o da insufici?ncia card?aca por est?dios demonstrou que 36,4% (24/66), 30,3% (20/66), 15,2% (10/66), 13,6% (9/66) e 4,5% (3/66) dos pacientes apresentaram est?gios A, B1, B2, C e D, respectivamente. O escore de estratifica??o de risco de acidente vascular encef?lico isqu?mico identificou 80,6% (150/186) dos pacientes em baixo risco, 15,6% (29/186) em moderado e 3,8% (7/186) em alto risco. O escore de risco de morte foi aplicado em 84 pacientes e 69,0% (58/84) mostraram baixo risco, 25,0% (21/84) intermedi?rio e 6,0% (5/84) alto risco. Os resultados demonstraram a exist?ncia das principais formas cl?nicas da doen?a de Chagas em diferentes est?gios de evolu??o, inclusive o registro da forma digestiva isolada; observou-se que um quarto dos pacientes com a forma indeterminada deveria ser considerado cardiopatas subcl?nicos ou pelo menos, pacientes de maior potencial evolutivo para outras formas cl?nicas ou fase pr?- cl?nica, e confirmou-se a exist?ncia de correla??o positiva entre o escore de risco de morte e seus principais determinantes, insufici?ncia card?aca, morte s?bita e acidente vascular encef?lico isqu?mico, oferecendo mais um elemento para a tomada de condutas frente ao chag?sico cardiopata.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-07-08T21:45:26Z No. of bitstreams: 1 AndressaNoronhaBarbosaDaSilva_DISSERT.pdf: 1896861 bytes, checksum: 99c48f0bacf1b085ddc38eb30d2cd4b5 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-07-13T20:36:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 AndressaNoronhaBarbosaDaSilva_DISSERT.pdf: 1896861 bytes, checksum: 99c48f0bacf1b085ddc38eb30d2cd4b5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T20:36:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AndressaNoronhaBarbosaDaSilva_DISSERT.pdf: 1896861 bytes, checksum: 99c48f0bacf1b085ddc38eb30d2cd4b5 (MD5) Previous issue date: 2013-03-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / A distribui??o da fauna triatom?nica e a infec??o natural pelo Trypanosoma cruzi foi avaliada visando compreender a din?mica de transmiss?o deste parasito na zona rural do estado do Rio Grande do Norte e, a pesquisa do Trypanosoma rangeli tamb?m foi investigada. As capturas de triatom?neos nos ambientes, silvestre, peridomiciliar e domiciliar de diferentes munic?pios das mesorregi?es central e oeste desse estado. Os insetos foram identificados e examinados pelo m?todo direto, xenocultura e PCR para a identifica??o do T. cruzi. Para a detec??o do T. rangeli foi realizado o exame direto da hemolinfa e a PCR multiplex de 151 esp?cimes infectados pelo T. cruzi. Dos 824 insetos capturados, as esp?cies foram distribu?das em T. brasiliensis (66,4%), T. pseudomaculata (18,2%), Panstrongylus lutzi (12,7%) e Rhodnius nasutus (2,7%), e o T. brasiliensis foi encontrado na maioria dos munic?pios avaliados. As esp?cies foram capturadas nos est?gios de ninfa e adulto, exceto P. lutzi, exclusivamente no est?gio adulto. No ambiente silvestre foram capturadas as esp?cies T. brasiliensis (57%), P. lutzi (28%) e T. pseudomaculata (15%). No ambiente peridomiciliar foram identificadas T. brasiliensis (74%), T. pseudomaculata (21%) e R. nasutus (5,0%), enquanto no intradomic?lio somente o T. brasiliensis. O ?ndice de infec??o dos triatom?neos pelo T. cruzi foi 30,4%, o P. lutzi mostrou o ?ndice mais elevado (78,0%), seguida do T. brasiliensis (24,4%), T. pseudomaculata (22,6%) e R. nasutus (4,5%). Os ?ndices de triatom?neos infectados nos ambientes silvestre, peridomiciliar e domiciliar foram 41,8%, 20,1% e 50,0%, respectivamente. O T. rangeli foi detectado apenas pela PCR multiplex em 2,6% (4/151) dos insetos examinados, desses 4,4% (3/67) foram de T. brasiliensis e 1,5% (1/63) de P. lutzi. Os dados mostraram que a positividade do P. lutzi aliada a sua capacidade de invadir o domic?lio atra?do pela luz, sugere uma prov?vel participa??o deste inseto no interc?mbio entre os ciclos epidemiol?gicos de transmiss?o do T. cruzi. A esp?cie T. brasiliensis foi a ?nica presente em todos os ambientes, o que refor?a sua import?ncia em rela??o ? capacidade de adapta??o ao ambiente dom?stico, potencial como vetor e manuten??o dos ciclos de transmiss?o silvestre e dom?stico no semi?rido indicando a necessidade de a??es cont?nuas na vigil?ncia epidemiol?gica. A ocorr?ncia do T. rangeli em T. brasiliensis e P. lutzi foi registrada pela primeira vez na zona rural deste estado, ampliando a ?rea de ocorr?ncia deste protozo?rio no nordeste do Brasil. / The triatomine fauna distribution and the natural infection by Trypanosoma cruzi was evaluated aiming the comprehension of the transmission dynamics of this parasite in the countryside of the State of Rio Grande do Norte. Additionally, the research for Trypanosoma rangeli was also investigated. The captures of triatomines were performed at sylvatic, peridomicile and domicile environments at different municipalities of the central and western mesoregions of this state. The insects were identified and examined by direct method, xenoculture and PCR to detect T. cruzi. The detection of T. rangeli was performed by direct examination of the hemolymph and multiplex PCR of 151 positive specimens for T. cruzi. Of 824 captured insects, the species were distributed in Triatoma brasiliensis (66.4%), Triatoma pseudomaculata (18.2%), Panstrongylus lutzi (12.7%) and Rhodnius nasutus (2.7%), and T. brasiliensis was found in most of the evaluated municipalities. The species were captured at nymph and adult stages, except P. lutzi, exclusively in adult stage. In the sylvatic environment were captured T. brasiliensis (57%), P. lutzi (28%) and T. pseudomaculata (15%) species. At the peridomicile environment were identified T. brasiliensis (74%), T. pseudomaculata (21%) and R. nasutus (5.0%), while in the intradomicile was found only T. brasiliensis. The infection rate of triatomines by T. cruzi was 30.4%, P. lutzi showed highest rate (78%), followed by T. brasiliensis (24.4%), T. pseudomaculata (22.6%) and R. nasutus (4.5%). Infected triatomines indexes at silvatic, peridomicile and domicile environments were of 41.8%, 20.1% and 50.0%, respectively. T. rangeli was only detected by multiplex PCR in 2.6% (4/151) of examined insects, of these 4.4% (3/67) were T. brasiliensis and 1.5% (1/63) P. lutzi species. The data showed that the positivity of P. lutzi allied to its ability to invade domicile attracted by light, suggests a likely participation of this insect between epidemiological transmission cycles of T. cruzi. T. brasiliensis was the only specie present in all environments, what reinforces its importance related to the capacity for adapting to the domestic environment, potential as a vector, and maintenance of sylvatic and domestic transmissions cycles in the semiarid, indicating the necessity of continuous epidemiological surveillance. The presence of T. rangeli in T. brasiliensis and P. lutzi was first recorded in rural zone of this State, broadening the area of occurrence of this protozoan in northeastern Brazil.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-01-13T11:27:01Z No. of bitstreams: 1 IsraellyVianaDeSena_DISSERT.pdf: 988106 bytes, checksum: fd7fe778e190889d6f1a07cababa96be (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-01-23T11:12:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 IsraellyVianaDeSena_DISSERT.pdf: 988106 bytes, checksum: fd7fe778e190889d6f1a07cababa96be (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-23T11:12:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 IsraellyVianaDeSena_DISSERT.pdf: 988106 bytes, checksum: fd7fe778e190889d6f1a07cababa96be (MD5) Previous issue date: 2015-06-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Neste estudo foi avaliado o papel das esp?cies reativas de oxig?nio na infec??o experimental pelo T. cruzi. Inicialmente, realizamos cultura de macr?fagos na presen?a de formas tripomastigotas do parasito e demonstramos que o T. cruzi induz a produ??o de ROS in vitro. Posteriormente, camundongos albinos Swiss foram infectados com 1 ? 104 formas tripomastigotas sangu?neas da cepa Y e tratados com os inibidores de ROS (N-acetilciste?na), e da ?xido n?trico sintase induz?vel/iNOS (aminoguanidina) ou ambos, e determinado a parasitemia, mortalidade, produ??o de IgG e de citocinas no soro (IL-17, IFN-?, TNF-?) por meio de ELISA; e a express?o de RNAm de citocinas no mioc?rdio dos camundongos por RT-PCR em tempo Real. Animais infectados com a cepa Y que tiveram a inibi??o simult?nea de ROS e NO apresentaram mortalidade inicial precoce (in?cio da mortalidade no 6? D.A.I), foi observado 100% de mortalidade em todos os grupos de animais. Camundongos que tiveram a inibi??o de ROS e NO, apresentaram maior produ??o de IFN-? e TNF-? no soro e tamb?m maior express?o de RNAm destas citocinas no tecido card?aco, quando comparado ao grupo controle. O excesso na produ??o de IFN-? e TNF-? pode conduzir a efeitos delet?rios ao hospedeiro. Quanto ? produ??o de IL-17 e IgG total, n?o houve diferen?a entre os grupos de animais que tiveram ROS ou NO bloqueado. A express?o da iNOS foi menor no grupo de animais tratados com os inibidores de ROS e NO, quando comparado ao controle n?o tratado. Os resultados indicam que as esp?cies reativas de oxig?nio participam da regula??o imunol?gica durante a infec??o experimental pelo T. cruzi, evitando mortalidade precoce ao hospedeiro.

Orientador: Sandra Cecilia Botelho Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-14T06:46:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Batista_AngelicaMartins.pdf: 3184647 bytes, checksum: 9b7df47b1b5cfb900d52c35d15c6f4ab (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A doença de Chagas, cujo agente etiológico é o protozoário Trypanosoma cruzi, completa 100 anos de descoberta. Apesar da implementação de programas visando ao controle da transmissão vetorial, a infecção chagásica segue como um importante problema de saúde pública na América Latina. A globalização da doença de Chagas, consequente à migração de pessoas infectadas para países onde a doença não é endêmica, traz à tona a necessidade de instituição de medidas de controle e vigilância em algumas áreas da Europa e da América do Norte. A patologia caracteriza-se por uma fase aguda geralmente assintomática com elevada parasitemia e uma fase crônica, em que os parasitos dificilmente são detectados no sangue periférico por métodos parasitológicos convencionais. O curso clínico da infecção por T. cruzi é variável, sendo que boa parte dos infectados permanece na formaindeterminada da doença enquanto outros desenvolvem a forma cardíaca, digestiva ou nervosa. A prevalência do comprometimento do trato digestivo na doença de Chagas varia conforme a área endêmica, podendo alcançar até 14% no Brasil central. A forma digestiva caracteriza-se por lesão dos plexos nervosos intramurais e disfunção motora principalmente do esôfago e do cólon, levando à dilatação progressiva desses órgãos. Em nosso país, a doença de Chagas é o único fator etiológico comprovado para o megaesôfago. Devido à parasitemia baixa e intermitente, o diagnóstico na fase crônica baseia-se na detecção de anticorpos específicos anti-T.cruzi por metodologias sorológicas convencionais. Apesar de serem considerados métodos sensíveis e que apresentam boa especificidade, há relatos de resultados falso-positivos devido à reação cruzada com outros tripanosomatídeos que circulam na mesma área geográfica de T. cruzi. Por outro lado, existem relatos de imunodiagnóstico inconclusivo ou negativo em pacientes com antecedentes epidemiológicos e manifestações clínicas sugestivas de infecção chagásica. Nestes casos, métodos diagnósticos não convencionais devem ser empregados com o intuito de esclarecer a etiologia da doença. Neste estudo, determinou-se a soroprevalência para doença de Chagas em uma população com esofagopatia. Dos 518 pacientes com resultados de exames sorológicos convencionais, 409 (79%) apresentaram-se positivos, 31 (6%) inconclusivos e 78 (15%) negativos. A presença de DNA de T. cruzi foi avaliada pela N-PCR (nested-PCR) em amostras de sangue de pacientes portadores de megas digestivos com sorologia inconclusiva ou negativa para doença de Chagas. De 41 amostras analisadas, a N-PCR foi positiva em 31 (75,6%) dos casos. Como todos os pacientes incluídos no estudo apresentavam manifestações clínicas compatíveis com doença de Chagas e a maioria deles nasceu em áreas endêmicas, enfatizamos a importância da busca por métodos diagnósticos mais eficazes. Nossos resultados indicam que a N-PCR é uma ferramenta adequada para detecção de DNA de T. cruzi em pacientes soronegativos e pode ser utilizada para determinar a etiologia do megaesôfago. / Abstract: After 100 years of research and despite control programs launched in endemic areas, Chagas disease, caused by Trypanosoma cruzi, still remains an important public health problem in Latin America. Immigration of infected persons from endemic to nonendemic areas leads to Chagas disease spread and it increases the need for establishment of control programs and surveillance in North America and some European countries. Acute phase of Chagas disease is usually free of symptoms and a high parasitemia is observed. Following the acute phase, the chronic stage is characterized by low and intermittent parasitemia. Presentation of chronic chagasic infection is pleomorphic ranging from absence of symptoms to severe cardiac involvement. Symptomatic chronic phase is usually characterized by cardiac or digestive commitment and its current diagnosis relies on the measurement of T. cruzi-specific antibodies produced in response to the infection. Motility disorders and enlargement of digestive organs (commonly esophagus and colon) are consequences of neuronal destruction caused by the persistence of T. cruzi. Since idiopathic megaesophagus is a rare condition in Brazil, Chagas disease is considered the main etiology of megaesophagus. Despite its high sensitivity, conventional serology may present false-positive results due to cross-reactivity to other trypanosomes. On the other hand, false-negative results have been described in patients from endemic areas with suggestive signs of chagasic infection. In order to clarify this controversial situation, alternative methods such as PCR (polymerase chain reaction) have been employed for diagnostic purposes. In this study, prevalence of Chagas disease in a population with esophageal disorders was assessed by conventional serology. From 518 patients, 409 (79%) presented positive results, 31 (6%) and 78 (15%) presented inconclusive and negative results, respectively. For the following step, we recruited 41 patients with megaesophagus and negative or inconclusive serology for Chagas disease. T. cruzi DNA was detected by NPCR (nested-PCR) in 31/41 (75.6%) cases. As all patients included in our study presented suggestive clinical signs of digestive form of Chagas disease and most of them were born in endemic areas, we highlight the importance of diagnosis improvement and its implication in blood banks screening. Our data suggest that N-PCR is an effective tool for detection of T. cruzi DNA in patients with inconclusive or negative serology and, eventually, it may be useful to clarify megaesophagus etiology. / Universidade Estadual de Campi / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2017-09-26T18:09:59Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Vera Lúcia Lima de Almeida - 2017.pdf: 4171276 bytes, checksum: 87f3a46f53c09bbba2b757e69ce2c7d8 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Rejected by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com), reason: A citação apresenta problemas : Almeida, V. L. L. Papel de citocinas e da leptina na imunopatologia da fase aguda na infecção experimental pelo trypanosoma cruzi em camundongos nocautes para IL-4 e IFN-γ. 2017. 66 f. Dissertação (Mestrado em Medicina Tropical e Saúde Publica) - Universidade Federal de Goiás,Goiânia,2017. CORRETO: ALMEIDA, V. L. L. Papel de citocinas e da leptina na imunopatologia da fase aguda na infecção experimental pelo trypanosoma cruzi em camundongos nocautes para IL-4 e IFN-γ. 2017. 66 f. Dissertação (Mestrado em Medicina Tropical e Saúde Publica) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2017. on 2017-09-27T11:28:48Z (GMT) / Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2017-09-27T17:46:52Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Vera Lúcia Lima de Almeida - 2017.pdf: 4171276 bytes, checksum: 87f3a46f53c09bbba2b757e69ce2c7d8 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-10-02T13:43:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Vera Lúcia Lima de Almeida - 2017.pdf: 4171276 bytes, checksum: 87f3a46f53c09bbba2b757e69ce2c7d8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-02T13:43:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Vera Lúcia Lima de Almeida - 2017.pdf: 4171276 bytes, checksum: 87f3a46f53c09bbba2b757e69ce2c7d8 (MD5) Previous issue date: 2017-04-07 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Chagas disease is a parasitic disease caused by the Protozoan Trypanosoma cruzi. Approximately 30% of infected individuals develop cardiac manifestations. Among the factors involved in this evolution highlights the role of inflammation. Evidence points to an important relationship of adipokines with the cellular immune response and inflammation. The present study is objective is to evaluate the role of cytokines and leptin on immunopathology of acute phase of experimental infection by T. cruzi. For this we used C57Bl/6 WT mice, C57Bl/6 WT KO IFN-γ, Balb-c WT and Balb-c KO IL-4 100 infected with of Colombian strain forms of T. cruzi and non-infected controls was analyzed in the hearts the presence of T. cruzi, fibrosis, inflammatory infiltrate, production of cytokines in situ and serum levels of leptin, TNF-α and IL-10. Noted greater tissue parasitism in C57Bl/6 animals KO IFN-γ, but no difference in the intensity of the inflammatory infiltrate and percentage of fibrosis. Regarding cytokines C57Bl/6 mice IFN-γ KO infected showed increased TNF-α in situ, as well as the Balbc KO IL-4. Despite greater expression in situ, systemically animals Balb-c KO IL-4 have shown to be good producers of TNF-α and IL-10 as well as the C57Bl/6 KO IFNγ. However, these last have shown to be good producers of serum leptin, as well as the Balb-c. Thus, our results indicate that in the absence of IFN-γ mice infected can' not control the tissue parasitism. However, feature increased in situ of TNF-α and serum leptin as a compensatory mechanism of the Th1 response deficiency. / A doença de Chagas é uma doença parasitária causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi. Aproximadamente 30% dos indivíduos infectados desenvolvem a manifestação cardíaca. Dentre os fatores envolvidos nesta evolução destaca-se o papel da inflamação. Evidências apontam uma importante relação das adipocitocinas com a resposta imune celular e inflamação. O presente estudo objetivou avaliar o papel de citocinas e da leptina na imunopatologia da fase aguda da infecção experimental pelo T. cruzi. Para isso foram utilizados camundongos C57Bl/6 WT, C57Bl/6 KO IFN-γ, Balb-c WT e Balb-c KO IL-4 infectados com 100 formas tripomastigotas de cepa Colombiana de T. cruzi e controles não infectados. Foi analisado nos corações a presença ninhos de T. cruzi, infiltrado inflamatório, fibrose, produção de citocinas in situ e níveis séricos de leptina, TNF-α e IL-10. Foi observado maior parasitismo tissular nos animais C57Bl/6 KO IFN-γ, mas sem diferença na intensidade do infiltrado inflamatório e percentual de fibrose. Em relação as citocinas os camundongos C57Bl/6 KO IFN-γ infectados apresentaram aumento de TNF-α in situ, assim como os Balb-c KO IL-4. Apesar de maior expressão in situ, sistemicamente os animais Balb-c KO IL-4 não mostram ser bons produtores de TNF-α e IL-10 assim como os C57Bl/6 KO IFN-γ, entretanto esses últimos mostraram ser bons produtores de leptina sérica, assim como os Balb-c. Dessa forma, nossos resultados apontam que na ausência de IFN-γ os camundongos infectados não conseguem controlar o parasitismo tissular. Entretanto apresentam aumento in situ de TNF-α e leptina sérica como mecanismo compensatório da deficiência de resposta Th1, representado pela ausência de IFN-γ.

Le trypanosome sud américain, Trypanosoma cruzi, transmis par un insecte hématophage de type triatome est le protozoaire connus pour causer la maladie de Chagas chez l’Homme. Le cycle de vie de ce parasite alterne à la fois sur le type d’hôte, insecte ou hôte vertébré, et sur la forme :trypomastigote pour la forme quiescente et amastigote et épimastigote pour les formes prolifératives. Concernant la forme, seuls les parasites épimastigotes évoluent et prolifèrent dans le tube digestif des triatomes et possèdent un système endocytaire actif nécessaire à leur besoin énergétique. Toutefois, cette endocytose est restreinte à deux sites membranaires, la poche flagellaire et le cytostome, à partir desquels se créent des cargos endocytaires. Ces cargos endocytaires fusionnent ensuite avec un réseau vésiculaire endosomal qui délivre son contenu dans des réservosomes, compartiments similaires aux lysosomes.Chez le trypanosome africain (Trypanosoma brucei brucei), l’endocytose ne se réalise qu’au niveau de la poche flagellaire. Certaines protéines appartenant à cette voie endocytaire sont modifiées par de longues chaines de résidus poly-N-acétyllactosamine (pNAL) de manière post-traductionnelle. Initialement, il a été proposé que ces résidus puissent agir en tant que signal de tri dans le processus d’endocytose chez ces parasites.En nous basant sur les travaux qui ont été réalisés chez le trypanosome africain, nous nous sommes proposés d’approfondir les connaissances sur la voie endocytaire du trypanosome sud américain (Trypanosoma cruzi) qui est beaucoup moins étudié. Pour ce faire, à l’aide de deux lectines, la tomatolectine et la lectine de Griffonia simplicifolia qui présentent respectivement une affinité pour les résidus pNAL et les résidus N-acétylglucosamine (GlcNAc) en fin de chaine, nous avons pu enrichir et caractériser par LC-MS², 173 glycoprotéines putatives dont plus de 13% sont localisées dans la voie endocytaire. Parmi les protéines identifiées, en plus des nombreuses hydrolases lysosomiales, nous avons pu identifier une lectine de type C localisée dans la partie antérieure des parasites, au niveau des principaux sites endocytaires. Cette dernière possédant de nombreux résidus en commun avec les récepteurs de type scavengers, elle pourrait donc jouer un rôle important dans la fixation et l’endocytose de certains nutriments.Nos travaux ont ainsi permis d’établir que similairement aux trypanosomes africains, Trypanosoma cruzi possèdent des glycoprotéines modifiées par des N-glycanes contenant des pNAL. Nos travaux ont également permis d’établir que ces résidus s’associent préférentiellement aux glycoprotéines de la voie endocytaire (au niveau du cytostome et du réservosome) de la forme épimastigote. L’ensemble des résultats obtenus durant cette thèse tendent à montrer que les résidus pNAL des glycoprotéines présentes dans la voie endocytaire ont été conservées entre les deux parasites étudiés (Trypanosoma cruzi et Trypanosoma brucei brucei). / Doctorat en Sciences / info:eu-repo/semantics/nonPublished