Orientador: Luiz Cláudio Nogueira Mendes / Coorientador: Juliana Regina Peiró / Banca: Valéria Marçal Félix de Lima / Banca: José Paes de Oliveira Filho / Resumo: Objetivando-se avaliar as concentrações séricas de Interleucina 6 (IL-6) e proteinograma de ovinos submetidos à endotoxemia experimental. Dez ovinos (4 anos) foram divididos em dois grupos, Grupo Controle (GC, n=4) inoculados com NaCl 0,9 %, IV e Grupo Tratado (GT, n= 6) inoculados com 400 ng/Kg de LPS de Escheria coli. O exame físico foi realizado, imediatamente antes da inoculação (M0), bem como a coleta de sangue para perfil hematológico e bioquímico, dosagem de IL-6 e proteinograma. As amostras foram coletadas em M0 e após 2, 4, 6, 12, 24, 36, 48 e 60 horas, de realizada a inoculação. A dosagem de IL-6 foi feita pelo método de ELISA e o proteinograma pelo método de eletroforese em poliacrilamida com dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE), para o perfil hematológico utilizou-se contador de células automático (BCVet- 2800), o perfil bioquímico foi realizado utilizando-se kits comerciais (Labtest®) e por fim, a concentração de glicose foi mensurada por meio de um monitor de glicemia (Breeze 2, Bayer®). Constatou-se um aumento na concentração de IL-6 60 horas pós-inoculação de LPS. O pico febril ocorreu quatro horas pós-indução endotoxêmica. Constatou- se leucopenia com neutropenia e redução na concentração da proteína total, albumina e glicoproteína ácida duas horas após a administração de LPS, acompanhados por uma elevação inicial na concentração de glicose, seguida de redução, seis horas pós-inoculação. Concluiu-se que a dosagem de Interleucina 6 e o proteinograma sérico são métodos de diagnósticos eficientes para detectar e monitorar a progressão e gravidade de processos inflamatórios provenientes de uma endotoxemia induzida experimentalmente em ovinos / Abstract: Aiming to evaluate serum concentrations of interleukin 6 (IL-6) and proteinogram of sheep undergoing experimental endotoxemia. Ten animals (4 years old) were divided into two groups, Control Group (CG, n= 4) inoculated with NaCl 0,9%, IV and Treated Group (TG, n= 6) inoculated with 400 ng/Kg of LPS from Escheria coli. The physical examination was performed immediately before inoculation (M0), as well as blood collection for hematological and biochemical profiles, dosage of IL-6 and proteinogram. Samples were collected at M0 and after 2, 4, 6, 12, 24, 36, 48 and 60 hours after of inoculation. The dosage of IL-6 was done by ELISA and the proteinogram by method of eletrophoresis in polyacrylamide sodium dodecyl sulphate (SDS-PAGE), for hematological profile was used automatic cell counter (BC-2800Vet), the biochemical profile was performed using commercial kits (Labtest®) and the glucose concentrations was measured using glucose monitor (Breeze2, Bayer®). It was found an increase in the dosage of IL-6 60 hours after LPS injection. The fever peak occurred four hours after induction of endotoxemia. There was leukopenia, with neutropenia and reduction in concentration of total protein, albumin and acid glycoprotein two hours after LPS administration, accompanied by an initial increase in glucose concentrations followed by a reduction six hours post-inoculation. It was conclude that the dosage of IL-6 and the proteinogram are effective diagnostic methods to detect and monitor the progression and severity of inflammatory processes from an experimentallay induced endotoxemia in sheep / Mestre

Orientador: Aureo Evangelista Santana / Banca: Márcia Ferreira da Rosa Sobreira / Banca: Maria Angélica Dias / Banca: Elzylene Lega Palazzo / Banca: Alessandra Kataoka / Resumo: O linfoma é o tumor de tecido hemolinfopoiético mais comum nos cães e um dos tumores malignos de maior ocorrência na referida espécie. Um importante complemento ao seu diagnóstico é a investigação imunofenotípica da subpopulação de linfócitos envolvida e caracterização do subestádio do tumor, estabelecida pela Organização Mundial de Saúde (OMS). Adicionalmente a avaliação das proteínas séricas em cães com neoplasias, poderia auxiliar o diagnóstico, prognóstico e monitoramento da doença. Inflamações, infecções, doenças imunológicas e neoplasias, podem estimular a resposta de fase aguda (RFA), que inclui alterações nas concentrações de determinadas proteínas, chamadas proteínas de fase aguda (PFA). A avaliação das PFA em cães com linfoma poderia auxiliar o diagnóstico, prognóstico e monitoramento da doença. Este ensaio foi concebido para avaliar as proteínas séricas totais e suas frações, através da técnica de SDS-PAGE, correlacionando-as aos fatores prognósticos do linfoma canino, tais como imunofenotipagem dos linfócitos, resposta ao tratamento e estadiamento clínico da doença. Para tanto, foram avaliados 30 cães, machos ou fêmeas, sendo 10 hígidos e 20 acometidos por linfoma multicêntrico, atendidos junto ao Hospital Veterinário "Governador Laudo Natel" da FCAV/UNESP, Campus de Jaboticabal/SP. Os animais foram distribuídos em três grupos, sendo um grupo controle (GC) constituído de cães hígidos (n=10), um grupo de cães acometidos por linfoma B (GLB) (n=12) e um grupo de cães acometidos por linfoma T (GLT) (n=8). Os animais foram avaliados em três diferentes momentos: M0 (diagnóstico), M5 (5ª semana de quimioterapia) e MR (recidiva da doença). As proteínas séricas totais e suas frações não apresentaram correlação com a imunofenotipagem, nem com a resposta ao tratamento, nos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Lymphoma is the tumor of hematolymphopoietic tissue most common in dogs and one of the most frequent malignant tumors in that specie. An important adjunct in diagnosis is to investigate the subpopulation involved and the immunophenotypic characterization of the tumor subtype stated by the World Health Organization (WHO). In addition, the valuation of serum proteins in dogs with cancer, could aid in the diagnosis, prognosis and monitoring of disease. Inflammations, infections, autoimmune diseases and cancers, can stimulate acute phase response, including abnormal levels of certain proteins called acute phase proteins (APP). This trial was designed to evaluate the serum total protein and its fractions by SDS-PAGE technique, and relate if to prognostic factors in canine lymphoma, such as immunophenotyping of lymphocyte, clinical stage of disease and response to treatment. Therefore, we evaluated 30 dogs, males or females, being 10 healthy and 20 affected by multicentric lymphoma, treated with the Veterinary Hospital "Governor Laudo Natel", FCAV / UNESP, Jaboticabal / SP. The animals were divided into three groups, one control group (GC) formed by healthy dogs (n = 10), a group of dogs with B lymphoma (GLB) (n = 12) and a group of dogs with T lymphoma (GLT) (n = 8). The animals were evaluated at three different moments: M0 (at diagnosis), M5 (5th week of chemotherapy) and MR (disease recurrence). Serum total proteins and its fractions did not correlate with immunophenotype, or the response to treatment in dogs with lymphoma. Albumin correlated with staging and clinical substaging lymphoma. Some APP were more elevated in the GLB and others in the GLT, therefore these proteins showed significant... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Joaquim Mansano Garcia / Coorientador: Flávia Lombardi Lopes / Coorientador: Naiara Zoccal Saraiva / Banca: Joaquim Mansano Garcia / Banca: Gisele Zoccal Mingoti / Banca: Felipe Perecin / Resumo: O excessivo acúmulo lipídico que acontece ao longo da produção in vitro de embriões (PIVE) tem sido apontado como prejudicial à criopreservação. Como o soro fetal bovino (SFB) é um dos fatores que provoca maior impacto neste acúmulo, e pelo mesmo ser de composição indefinida, procura-se substituí-lo nos meios de cultivo. Entre os possíveis substitutos, está o composto semi-definido, livre de ácidos graxos, a albumina sérica bovina (BSA). O presente estudo teve como objetivo avaliar a influência da BSA e/ou SFB na MIV sobre o acúmulo lipídico nos oócitos e embriões bovinos, e para isso, cinco experimentos foram realizados. No primeiro experimento, demostrou-se que o meio contendo SFB possui dezoito vezes mais lipídeos que o meio contendo apenas BSA como fonte proteica. No segundo experimento, confirmou-se que, ao contrário da maturação in vivo, a maturação in vitro (MIV) provoca acúmulo lipídico, sendo este acúmulo mais acentuado no grupo suplementado exclusivamente com SFB, comparado ao grupo suplementado com BSA, sem observar-se diferença nos tamanhos das gotas oocitárias entre os grupos. Oócitos maturados na presença do SFB apresentaram melhores taxas de maturação nuclear e citoplasmática, porém, mostraram diferenças com relação à quantidade e migração de lipídeos e mitocôndrias em comparação àqueles obtidos após maturação in vivo. Nos experimentos III e IV, observou-se que, além de não levar a uma esperada diminuição da quantidade de lipídeos nos blastocistos produzidos, a BSA na MIV levou a menores taxas de desenvolvimento embrionário. Sobre o tamanho das gotas embrionárias, constatou-se que a MIV suplementada com SFB provoca maior porcentagem de gotas entre 2 a 6 μm de diâmetro comparada a MIV suplementada por ambas as substancias. Além do mais, percebeu-se um aumento do tamanho das gotas ao longo da PIVE independente da suplementação ... / Abstract: The excessive lipid accumulation that occurs during in vitro production of embryos (IVPE) has been described as harmful to cryopreservation. Because fetal bovine serum (FBS) is one of the factors that cause the greatest impact in this accumulation, and because it is an undefined medium supplement, current research is aimed at replacing this supplement in culture media. Among the possible substitutes, there is a semi defined compound, fatty acid free bovine serum albumin (BSA). The present study aimed to evaluate the influence of BSA and/or FBS during IVM on lipid accumulation in oocytes and embryos, and for that, five experiments were performed. The first experiment demonstrated that the medium containing FBS has eighteen times more lipids than the medium containing only BSA as a protein source. In the second experiment, it was confirmed that, unlike in vivo maturation, in vitro maturation (IVM) causes a lipid accumulation, which is more pronounced in the group supplemented only with FBS, compared with BSA group, without showing difference in oocytes droplets sizes between groups. Oocytes matured in the presence of FBS showed better rates of nuclear and cytoplasmic maturation, however, they also showed differences relative to the amount and migration of lipids and mitochondrias in comparison to those obtained after in vivo maturation. In the experiments III and IV, it was observed that the expected decrease in the amount of lipids produced in blastocysts, supplemented solely with BSA, did not take place, and the use of BSA alone in IVM led to lower rates of embryo development. Furthermore, for embryos lipid droplets sizes, a higher percentage of droplets between 2-6μm was observed in IVM supplemented with FBS compared to supplemented with both substances.The last experiment determined the expression of genes involved in lipid synthesis, DGAT2 and PLIN2. Increased expression of PLIN2 and ... / Mestre

Orientador: Maria Aparecida Mauro / Coorientador: Adriana Barbosa Santos / Coorientador: Diana María Granda Restrepo / Banca: Vânia Regina Nicoletti Telis / Banca: Gustavo César Dacanal / Resumo: A secagem em leito de espuma e a intermitência térmica têm sido desenvolvidas com o intuito de obter produtos alimentícios de boa qualidade e melhorar a eficiência energética do processamento. O objetivo deste trabalho foi investigar parâmetros de processo de secagem em leito de espuma, com e sem intermitência térmica, e avaliar seus efeitos sobre propriedades físicas e nutricionais de pó de manga. Foram estudados os efeitos da temperatura (60 - 80) °C, da concentração de Emustab (2% p/p), da Albumina (10% p/p) e da sua mistura, e da intermitência térmica sobre a cinética de secagem, da espuma de manga a manutenção da cor, o teor e a retenção de carotenoides e a solubilidade do produto desidratado, mediante um planejamento fatorial 23. A intermitência térmica foi aplicada através da redução de 20 °C de temperatura por determinado período, durante a secagem, com posterior retorno à temperatura inicial de secagem. As espumas produzidas apresentaram elevados coeficientes efetivos de difusão de água, o que permitiu atingir baixas umidades e atividades de água em tempos curtos de processo. A intermitência térmica apresentou valores de difusividade ligeiramente maiores, quando determinados como coeficientes médios sobre todo o processo de secagem. Os parâmetros de cor L* e b* da manga em pó foram afetados pelo tipo e pela concentração dos agentes espumantes, sendo que as espumas produzidas com Emustab apresentaram os pós mais claros. Os parâmetros a* e °Hue foram afetados pela temperatura, concentração de Emustab e de Albumina, sendo que o Emustab foi o fator mais significativo sobre a cor vermelha (a*) e o valor de Hue, promovendo a diminuição do primeiro e o aumento do segundo, o que proporcionou uma tonalidade amarelo-alaranjada própria da manga. Expressivas porcentagens de retenção de carotenoides foram obtidas com espumas produzidas a partir de Albumina e da... / Abstract: Foam mat drying and thermal intermittence were developed with the objective of obtaining good quality food products and of improving the energy efficiency of the process. The objective of this study was to investigate the foam mat drying process parameters, with and without thermal intermittence, and evaluate their effects on the physical and nutritional properties of mango powder. The effects of temperature (60 and 80 ºC), Emustab concentration (2% w/w), Albumin concentration (10% w/w), an Emustab-Albumin mixture and thermal intermittence on the drying kinetics, of the manga pulp foam color maintenance, carotenoid content and retention, and the solubility of the dried product, were studied using a 23 factorial experimental design. Thermal intermittence was applied by reducing the temperature by 20 ºC for a determined period during drying, and subsequently returning to the initial drying temperature. The foams produced presented high effective water diffusion coefficients, allowing for low moisture contents and low water activities to be obtained in short processing times. Thermal intermittence resulted in slightly higher diffusivity values, when determined as the mean coefficients for the whole drying process. The color parameters L* and b* of the mango powder were affected by the type and concentration of the foaming agents, the foams produced using Emustab resulting in lighter colored, yellower powders. The parameters a* and ºHue (h*) were affected by the temperature and by the Emustab and albumin concentrations, Emustab being the most significant factor with respect to the red color (a*) and the value for h*, promoting a decrease in the first and increase in the second, providing a yellowy-orangey hue typical of mango. Expressive carotenoid retention was obtained from the foams produced using albumin and the albumin-Emustab mixture at 80 ºC, with values of 88.9 and 78.5 %, respectively. Thermal... / Mestre

Orientador: Marinônio Lopes Cornélio / Coorientador: Marcelo Andrés Fossey / Banca: Raghuvir Krishnaswamy Arni / Banca: Jorge Chahine / Banca: Amando Siuiti Ito / Banca: Luiz Claudio Di Stasi / Resumo: Os flavonóides fazem parte de uma ampla classe de compostos polifenólicos os quais ocorrem naturalmente nas plantas e podem ser encontrados nas sementes, caules, folhas, flores e/ou frutos. Estudos recentes indicam que esses compostos polifenólicos podem apresentar uma variedade significativa de atividades biológicas benéficas para a saúde humana, como por exemplo: antioxidante, anti-inflamatória, antibacteriana, antiviral e anticancerígena. A Albumina do Soro Humano (HSA) é a principal proteína extracelular presente no plasma sanguíneo. A função central dessa proteína é transportar e distribuir ligantes endógenos e exógenos para diferentes alvos moleculares no corpo humano. Por tais aspectos, torna-se importante o desenvolvimento de estudos que caracterizam a interação dos flavonóides com a proteína transportadora HSA. Este trabalho investiga a interação dos flavonóides Isovitexina (ISO) e 2-Fenilcromona (2PHE) com a HSA, utilizando técnicas experimentais de espectroscopia de fluorescência, absorbância UV-Vis, dicroísmo circular (CD) e infravermelho com transformada de Fourier (FT-IR); juntamente com ferramentas computacionais de cálculo ab initio, dinâmica molecular e modelagem molecular. A integração dessas abordagens experimentais e computacionais possibilita caracterizar a formação dos complexos HSA-flavonóides, determinando aspectos físico-químicos como: constantes de afinidade, parâmetros termodinâmicos, número de sítios de ligação, perfil de cooperatividade e resíduos de aminoácidos responsáveis pelas interações proteína-flavonóides (hidrofóbicas e eletrostáticas) / Abstract: Flavonoids belong to a large class of polyphenolic compounds which occur naturally in plants and can be found seeds, stems, leaves, flowers and/or fruits. Recent studies indicate that these polyphenolic compounds can present a significant variety of beneficial biological activities on human health, such as: antioxidant, anti-inflammatory, antibacterial, antiviral, and anticancer. Human Serum Ambumin (HSA) is the main extracellular protein presents in blood plasma. The core function of this protein is to carry and distribute endogenous and exogenous ligands to different molecular targets in the human body. For these aspects, it is important to develop studies that characterize the interaction of the flavonoids with the carrier protein HSA. This work investigates the interaction of the flavonoids Isovitexin (ISO) and 2-Phenylchromone (2PHE) with the HSA, using experimental techniques of fluorescence, UV-Vis absorbance, circular dichroism (CD), and Fourier transform infrared (FT-IR) spectroscopy; along with computational tools of ab initio calculation, molecular dynamics, and molecular modeling. The integration of these experimental and computational approaches allows to characterize the formation of the HSA-flavonoids complexes, determining physicochemical aspects, sucha as: affinity constants, thermodynamic parameters, number of binding sites, cooperativity profile and aminoacid residues responsable for the protein-flavonoids interactions (hydrophobic and electrostatic) / Doutor

Orientador: Fátima Pereira de Souza / Coorientador: Marcelo Andrés Fossey / Banca: Alexandre Suman de Araujo / Banca: Luis Octávio Regasini / Banca: Hamilton Cabral / Banca: Flavio Augusto Vicente Seixas / Resumo: A Doença Inflamatória Intestinal (DII) é um conjunto de desordens inflamatórias, crônica e, até o momento, sem cura do trato gastrointestinal. Engloba principalmente a doença de Cohn e a retocolite ulcerativa, que podem gerar manifestações extra intestinais. Pacientes com DII apresentam níveis elevados de fator de necrose tumoral-α (TNF-α), um importante mediador inflamatório com papel chave na patogênese dessa doença. A etiologia complexa e incerta da DII é um fator limitante para a descoberta e desenvolvimento de novos tratamentos farmacológicos, já que os atuais medicamentos além de possuírem alto custo e inúmeros efeitos colaterais, uma parcela significativa de pacientes não respondem a nenhuma terapia farmacológica. A cumarina, assim como seus derivados, revelaram potente atividade anti-inflamatória intestinal em modelos experimentais de DII, sugerindo ser um candidato para o tratamento desta doença. O objetivo desse trabalho foi investigar através das técnicas espectroscópicas de STD-RMN, fluorescência e de docking molecular se existe e quais são os mecanismos envolvidos nas interações da cumarina e seus derivados com a proteína TNF-α, além de verificar também, a interação desses ligantes com a albumina sérica humana (HSA). A investigação da interação entre os ligantes e a HSA mostrou que a 4-metilesculetina, cumarina e esculetina interagiram com a HSA através de um processo estático, enquanto que a interação da HSA com a esculina ocorreu por um processo dinâmico... / Abstract: Inflammatory bowel disease (IBD) is an inflammatory, chronic and until now, incurable disease of the gastrointestinal tract. IBD consists of two main forms, Crohn's disease and ulcerative colitis, which can generate extra intestinal manifestations. Patients with inflammatory bowel disease have elevated levels of tumor necrosis factor-α (TNF-α), an important inflammatory mediator involved in the pathogenesis of this disease. The complex and unclear etiology of IBD is a limiting factor for the discovery and development of new treatments; whereas the standard treatments used to treat IBD have high-cost, numerous side effects and a significant number of patients do not respond to none pharmacological therapy. Coumarin and their derivatives have shown potent intestinal anti-inflammatory in IBD experimental models, suggesting coumarins and their derivative might be candidates in the treatment of IBD. The aim of this work was to investigate through the spectroscopic techniques of STD-NMR, fluorescence and molecular docking if it exits and which are the mechanisms involved in the interactions of coumarin and its derivatives with TNF-α protein, in addition to also verifying, the interaction with human serum albumin (HSA). Investigation of interactions between ligands and HSA showed 4-methylesculetin, coumarin and esculetin interacted with HSA through a static quenching mechanism, esculin/HSA interaction occurred by a dynamic quenching mechanism. Hydrophobic interactions and hydrogen ... / Doutor

The interaction between two proteins into salt aqueous solutions is investigated throughout this thesis. Experiments, modeling and molecular simulations were carried out to get a better understanding of the phenomenon. Bovine serum albumin was used as a model protein. An analytical expression for the structure factor for globular proteins in aqueous solution is presented in this work. This expression was obtained considering an intermolecular potential given by the sum of a hard core, a van der Waals attractive and a screened Coulomb contribution. Experimental data of Small Angle X-Ray Scattering for bovine serum albumin in aqueous solutions containing sodium salts at different protein concentrations and pH values are also presented. The expression developed for the structure factor describes accurately these experimental data provided a dependence of the attractive parameter on protein concentration is established. An expression for the osmotic pressure was derived from the structure factor. With attractive parameters adjusted from X-ray scattering data, the osmotic pressure of bovine serum albumin aqueous solutions could be predicted with very good agreement with experimental data. A derivation of the thermodynamic potentials, such as the chemical potential, using the new osmotic equation of state is presented. Applying the phase equilibrium criterion, the fluid-fluid phase equilibrium for bovine serum albumin in salt aqueous solution was calculated. Although such separation was not experimentally observed at the isoelectric point, it was indeed experimentally observed for a pH value below the isoelectric point. The predictions seem to be valuable to discuss how ion specificity affects the phase diagram of proteins. To apply molecular dynamic techniques to simulate how proteins interact to each other in salt aqueous solutions, two new coarse-grained force fields are proposed. The first one, meant for sodium sulfate aqueous solution, avoids the unphysical association observed for non-polarizable atomistic force fields; and allows the prediction of thermodynamic and dynamic properties. The second one, meant for bovine serum albumin in aqueous solution, is used as a new strategy to evaluate the scattering form factor of proteins as a low resolution technique for protein structure prediction. / Nesta tese apresenta-se uma investigação sobre a interação entre duas proteínas em soluções aquosas salinas. Experimentos, modelagem e simulações moleculares foram realizadas para conseguir um melhor entendimento do fenômeno. Albumina de soro bovina foi usada como proteína modelo. Uma expressão para o fator de estrutura de proteínas globulares em solução aquosa é apresentada neste trabalho. Esta expressão foi obtida considerando-se um potencial intermolecular dado pela soma de um núcleo duro, uma contribuição atrativa tipo vander Waals e uma contribuição de potencial coulômbico blindado. Dados experimentais de espalhamento de raios-X a baixos ângulos para a albumina de soro bovino em soluções aquosas contendo sais de sódio com diferentes concentrações de proteína e valores de pH também são apresentados. A expressão desenvolvida para o fator de estrutura descreve com precisão estes dados experimentais, desde que uma dependência entre o parâmetro atrativo com a concentração de proteína seja estabelecida. Uma expressão para a pressão osmótica foi derivada do fator de estrutura. Com parâmetros atrativos ajustados aos dados de espalhamento de raios-X, a pressão osmótica da albumina de soro bovino em solução aquosa pôde ser predita com grande correlação com os dados experimentais. Uma derivação dos potenciais termodinâmicos usando a nova equação osmótica de estado é apresentada. Aplicando o critério de equilíbrio de fases, foi possível calcular o equilíbrio fluido-fluido para a albumina de soro bovino em solução aquosa. Embora tal separação não tenha sido observada experimentalmente em um pH igual ao ponto isoelétrico, ela foi de fato observada experimentalmente para um valor de pH menor do que o ponto isoelétrico. As predições parecem ser valiosas para discutir como a especificidade iônica afeta o diagrama de fases de proteínas. De modo a avaliar como proteínas interagem umas com as outras usando técnicas de dinâmica molecular, dois novos campos de força coarse-grained são propostos. O primeiro, para o sulfato de sódio em solução aquosa, evita a associação não-física que é observada para campos de força atomísticos não-polarizáveis. Este modelo é capaz de prever propriedades dinâmicas e termodinâmicas. O segundo, para a albumina de soro bovino em solução aquosa, é usado como uma nova estratégia para avaliar o fator de forma de espalhamento de proteínas como uma ferramenta de baixa resolução na predição de estruturas proteicas.

Introdução: A reanimação fluídica da criança queimada é um desafio devido à intolerância à insuficiente ou excessiva oferta de líquidos. Há dúvidas em relação à utilização de solução coloide na ressuscitação volêmica e também quanto ao melhor momento a ser administrada. O momento ideal para a administração de albumina permanece em foco de debate, se deveria ser utilizada como estratégia de resgate, quando o volume de cristaloide infundido se torna excessivo, ou rotineiramente, como intervenção primária em pacientes com queimaduras extensas. Objetivos: Avaliar e comparar quanto a evolução clínica de crianças com lesões térmicas que receberam abordagem de infusão precoce (entre 8 e 12 horas do acidente) de solução coloide natural versus crianças que receberam abordagem de infusão tardia (após 24 horas do acidente) da mesma solução para reanimação na fase aguda. Metodologia: Ensaio Clínico Randomizado Controlado, realizado no Centro de Tratamento de Queimados do Hospital Universitário de Londrina. Foram estudadas 46 crianças (1 a 12 anos), apresentando entre 15% e 45% de Superfície Corporal Queimada, admitidas até a 12a hora após o acidente. Intervenção: Para a ressuscitação hídrica dos pacientes, foi utilizada solução cristaloide baseada na Fórmula de Parkland modificada, ajustada de acordo com o débito urinário. O Grupo Intervenção (23 pacientes) foi randomizado para receber solução de albumina entre 8 e 12 horas do acidente, e o Grupo Controle (23 pacientes) recebeu a mesma solução após 24 horas do acidente. Resultados: Houve possibilidade de redução de infusão de solução cristaloide durante o período de ressuscitação dos pacientes. O grupo Intervenção recebeu um volume de solução cristaloide com uma mediana de -31,99% (P=0,025) no 1º dia, -19,37% (P=0,002) no 2º dia e -45,3% (P=0,002) no 3º dia de ressuscitação. Não foram observadas diferenças significantes entre os grupos em relação à diurese. A incidência acumulada de fluid creep na população estudada foi de 30,43% (n=14). O RR para o desenvolvimento do fluid creep no Grupo Intervenção foi de 0,0769 (IC 95% 0,0109 a 0,5407). A mediana do tempo de internação dos pacientes do Grupo Controle foi de 18 (15-21) dias e a do Grupo Intervenção foi de 14 (10-17) dias, P=0,004. Conclusões: A infusão precoce de solução de albumina em crianças com queimaduras entre 15% e 45% de superfície corporal reduziu a necessidade de infusão de solução cristaloide no período de ressuscitação. Foram identificados significativamente menos casos de fluid creep e observado menor tempo de internação entre pacientes que receberam albumina precocemente / Introduction: The fluidic resuscitation of burned children is a challenge due to intolerance to insufficient or excessive supply of liquids. There are questions regarding the use of colloids in fluid resuscitation solution as well as the timing of the administration. The ideal time for the administration of albumin, in other words whether it should be used as a rescue strategy when the volume of crystalloid infused becomes excessive, or routinely, as primary intervention for patients with extensive burns, remains in the focus of discussion. Objectives: Evaluate the clinical outcomes of children with burn injuries who have received early infusion treatment (between 8 and 12 hours after the accident) with natural colloids solution compared to the children who have received late infusion treatment (24 hours after the accident) with the same solution, in order to resuscitate them in the acute phase. Methods: Randomized Controlled Trial carried out at the Burn Treatment Center, State University of Londrina. Forty-six children (1 to 12 year olds) who had between 15% and 45% total body surface area and were admitted up to 12 hours after the accident were studied. Intervention: For the fluid resuscitation of patients, a crystalloid solution based on modified Parkland Formula was adjusted according to urine output. The Intervention Group (n= 23) were randomized to receive albumin solution between 8 and 12 hours after the accident and the Control Group (n= 23) received the same solution later than 24 hours after the burn injury. Results: During the resuscitation of patients, it was possible to reduce the infusion of crystalloid solution. The Intervention Group required a volume of crystalloid solution with a median of -31.99% (P = 0.025) on day 1, - 19.37% (P = 0.002) on day 2 and -45.3% (P = 0.002) on day 3 of resuscitation. No significant differences were observed in the groups in relation to diuresis. The cumulative incidence of fluid creep in the population studied was 30.43% (n=14). The RR for the development of fluid creep in the Intervention Group was 0.0769 (IC 95% 0.0109 to 0.5407). The patients in the Control Group spent an average time of 18 (15-21) days in hospital, while the patients in the Intervention Group spent 14 (10-17) days, P=0,004. Conclusions: The early infusion of albumin solution in children with 15% to 45% total body surface area reduced the need of crystalloid infused during the resuscitation period. Significantly lower cases of fluid creep were identified and lower length of stay was observed among patients who were treated earlier with albumin

Introdução: A reanimação fluídica da criança queimada é um desafio devido à intolerância à insuficiente ou excessiva oferta de líquidos. Há dúvidas em relação à utilização de solução coloide na ressuscitação volêmica e também quanto ao melhor momento a ser administrada. O momento ideal para a administração de albumina permanece em foco de debate, se deveria ser utilizada como estratégia de resgate, quando o volume de cristaloide infundido se torna excessivo, ou rotineiramente, como intervenção primária em pacientes com queimaduras extensas. Objetivos: Avaliar e comparar quanto a evolução clínica de crianças com lesões térmicas que receberam abordagem de infusão precoce (entre 8 e 12 horas do acidente) de solução coloide natural versus crianças que receberam abordagem de infusão tardia (após 24 horas do acidente) da mesma solução para reanimação na fase aguda. Metodologia: Ensaio Clínico Randomizado Controlado, realizado no Centro de Tratamento de Queimados do Hospital Universitário de Londrina. Foram estudadas 46 crianças (1 a 12 anos), apresentando entre 15% e 45% de Superfície Corporal Queimada, admitidas até a 12a hora após o acidente. Intervenção: Para a ressuscitação hídrica dos pacientes, foi utilizada solução cristaloide baseada na Fórmula de Parkland modificada, ajustada de acordo com o débito urinário. O Grupo Intervenção (23 pacientes) foi randomizado para receber solução de albumina entre 8 e 12 horas do acidente, e o Grupo Controle (23 pacientes) recebeu a mesma solução após 24 horas do acidente. Resultados: Houve possibilidade de redução de infusão de solução cristaloide durante o período de ressuscitação dos pacientes. O grupo Intervenção recebeu um volume de solução cristaloide com uma mediana de -31,99% (P=0,025) no 1º dia, -19,37% (P=0,002) no 2º dia e -45,3% (P=0,002) no 3º dia de ressuscitação. Não foram observadas diferenças significantes entre os grupos em relação à diurese. A incidência acumulada de fluid creep na população estudada foi de 30,43% (n=14). O RR para o desenvolvimento do fluid creep no Grupo Intervenção foi de 0,0769 (IC 95% 0,0109 a 0,5407). A mediana do tempo de internação dos pacientes do Grupo Controle foi de 18 (15-21) dias e a do Grupo Intervenção foi de 14 (10-17) dias, P=0,004. Conclusões: A infusão precoce de solução de albumina em crianças com queimaduras entre 15% e 45% de superfície corporal reduziu a necessidade de infusão de solução cristaloide no período de ressuscitação. Foram identificados significativamente menos casos de fluid creep e observado menor tempo de internação entre pacientes que receberam albumina precocemente / Introduction: The fluidic resuscitation of burned children is a challenge due to intolerance to insufficient or excessive supply of liquids. There are questions regarding the use of colloids in fluid resuscitation solution as well as the timing of the administration. The ideal time for the administration of albumin, in other words whether it should be used as a rescue strategy when the volume of crystalloid infused becomes excessive, or routinely, as primary intervention for patients with extensive burns, remains in the focus of discussion. Objectives: Evaluate the clinical outcomes of children with burn injuries who have received early infusion treatment (between 8 and 12 hours after the accident) with natural colloids solution compared to the children who have received late infusion treatment (24 hours after the accident) with the same solution, in order to resuscitate them in the acute phase. Methods: Randomized Controlled Trial carried out at the Burn Treatment Center, State University of Londrina. Forty-six children (1 to 12 year olds) who had between 15% and 45% total body surface area and were admitted up to 12 hours after the accident were studied. Intervention: For the fluid resuscitation of patients, a crystalloid solution based on modified Parkland Formula was adjusted according to urine output. The Intervention Group (n= 23) were randomized to receive albumin solution between 8 and 12 hours after the accident and the Control Group (n= 23) received the same solution later than 24 hours after the burn injury. Results: During the resuscitation of patients, it was possible to reduce the infusion of crystalloid solution. The Intervention Group required a volume of crystalloid solution with a median of -31.99% (P = 0.025) on day 1, - 19.37% (P = 0.002) on day 2 and -45.3% (P = 0.002) on day 3 of resuscitation. No significant differences were observed in the groups in relation to diuresis. The cumulative incidence of fluid creep in the population studied was 30.43% (n=14). The RR for the development of fluid creep in the Intervention Group was 0.0769 (IC 95% 0.0109 to 0.5407). The patients in the Control Group spent an average time of 18 (15-21) days in hospital, while the patients in the Intervention Group spent 14 (10-17) days, P=0,004. Conclusions: The early infusion of albumin solution in children with 15% to 45% total body surface area reduced the need of crystalloid infused during the resuscitation period. Significantly lower cases of fluid creep were identified and lower length of stay was observed among patients who were treated earlier with albumin

A albumina humana (AH) é um medicamento de ampla utilização e de custo elevado que integra o elenco de procedimentos especiais do Ministério da Saúde no Brasil. Em 2004, a ANVISA publicou uma resolução que estabelece diretrizes para o uso terapêutico deste medicamento. Apesar dos dados da literatura sugerirem conclusões não definitivas sobre os reais benefícios do uso de albumina no tratamento de pacientes com síndrome nefrótica (SN), a diretriz recomenda o uso nos casos de edemas refratários ao uso de diuréticos. O objetivo deste estudo foi avaliar através de análises econômicas a indicação clinica da diretriz para uso de Albumina Humana da ANVISA, em pacientes com Síndrome Nefrótica. A partir de uma coorte concorrente foram realizadas análises econômicas dos tipos custo-efetividade e custoutilidade. A população do estudo foi constituída por pacientes adultos e pediátricos internados com síndrome nefrótica em quatro grandes hospitais do SUS do Estado da Bahia. Os pacientes incluídos foram divididos em dois grupos comparativos conforme o seguimento ou não das orientações de uso de albumina humana da diretriz da ANVISA. A perspectiva da análise econômica foi sobre o provedor de atenção à saúde, o SUS. Os dados de qualidade de vida dos pacientes foram obtidos através de aplicação dos questionários genéricos SF36 e CHQ-PF50. O índice QALY (anos de vida ajustados à qualidade de vida) foi utilizado para a avaliação de custo-utilidade da comparação. Ao final do estudo foram selecionados 109 pacientes, com 60% de adultos, 56% do gênero feminino, mais de 90% de negros e pardos tendo 41,3% seguido as diretrizes da ANVISA. O custo médio global por internação (média de 22 dias) para o SUS foi de R$ 2.360/paciente. Os parâmetros de efetividade analisados, peso, diurese e balanço hídrico foram mais efetivos em termos de custo para os pacientes que seguiram a diretriz. A RCEI para dias de internação evitados evidenciou um custo adicional de R$55,33/dia evitado. A análise de qualidade de vida demonstrou que seguir a diretriz dominou o não seguimento propiciando um acréscimo de 8% de qualidade de vida e gerando uma economia de R$ 3.458,13 por QALY ganho. As análises de sensibilidade das RCEI e RCUI evidenciaram a robustez dos resultados, principalmente na variação do QALY, que mesmo após 60% de variabilidade garantiu economia para o sistema. Os resultados deste estudo forneceram informações sobre o uso de albumina humana em pacientes com síndrome nefrótica que podem juntamente com outros dados nortear as práticas de saúde no SUS do ponto de vista clinico e econômico. As análises econômicas indicaram que apresentam melhores relações de custo-efetividade e custo utilidade os tratamentos dos pacientes que seguiram as orientações da diretriz da ANVISA. / Human albumin (HA) is a drug widely used and of high cost that integrates the cast of special procedures of the Ministry of Health in Brazil. In 2004, ANVISA issued a resolution establishing guidelines for the therapeutic use of this drug. Although data from the literature suggest no definite conclusions about the real benefits of the use of albumin in the treatment of patients with nephrotic syndrome (NS), the guideline recommends the use in cases of edema refractory to diuretics. The aim of this study was to evaluate economic analyzes through the clinical indication of guideline for use of Human Albumin ANVISA, in patients with nephrotic syndrome. Economic analyzes of both cost-effectiveness and cost-utility types were performed from a concurrent cohort. The study population was composed of adult and pediatric patients hospitalized with nephrotic syndrome in four major public hospitals in the State of Bahia. The included patients were divided into two distinct groups according to whether ANVISA’s guidelines for use of human albumin were followed by them or not. The economic perspective of the analysis regarded the health care provider, the NHS. The quality of life data of the patients were obtained through application of generic questionnaires SF36 and CHQ - PF50. The QALY index (quality-adjusted life year) was used to assess cost-utility comparison. At the end of the study 109 patients were selected, consisting of 60% adults, 56 % females, over 80 % blacks and dark-skinned, where 41.3 % followed the guidelines of ANVISA. The overall average cost per hospitalization (22 days average) to the NHS was R$ 2.360/patient. The analyzed parameters, weight, urine volume, and fluid balance were more effective in terms of cost for patients who followed the guidelines. The ICER for days of hospitalization avoided showed an additional cost of R$55.33/avoided day. The quality of life analysis showed that the majority followed the guidelines providing an increase of 8 % for quality of life and generating savings of R$ 3,458.13 per QALY gained. Sensitivity analyzes of the ICER and ICUR showed the robustness of the results, especially the variation of the QALY, which even after 60% of variability guaranteed savings for the system. The results of this study provided information on the use of human albumin in patients with nephrotic syndrome that can, along with other data, guide health care practices in the NHS from both clinical and financial standpoints. The economic analyzes that show better the costeffectiveness and cost utility of treatment patients who followed the recommendations the guideline of ANVISA.