O óleo de copaíba é um produto natural encontrado principalmente na região amazônica, onde é utilizado na medicina popular como tratamento para inflamações e como cicatrizante. A espécie Copaifera multijuga Hayne demonstrou um potencial efeito anti-inflamatório em relação a outras espécies de Copaífera L., tendo como principal responsável o composto majoritário β-cariofileno. Nosso grupo de pesquisa vem estudando a veiculação deste óleo em nanoemulsões e desenvolveu uma formulação que contém uma elevada proporção de óleo de copaíba no núcleo oleoso (20 % w/v), sem prejuízo da estabilidade do sistema. A partir desta formulação, seguiram-se os estudos de avaliação da permeação cutânea, de otimização da formulação e de avaliação de atividade anti-inflamatória, apresentados neste trabalho. Um método em cromatógrafo a gás acoplado à espectrômetro de massas no modo headspace (HS-CG/EM) foi validado a fim de analisar β-cariofileno em mostras de pele provenientes do teste de permeação cutânea com nanoemulsões de óleo de copaíba. O método mostrou-se específico, linear, preciso e exato. O teste de permeação cutânea demonstrou que apenas com a nanoemulsão é possível detectar β-cariofileno na camada da derme, enquanto que, com o óleo, somente no estrato córneo. A seguir, foram testados dois tensoativos catiônicos na formulação da nanoemulsão para verificar se a carga positiva na interface da gotícula poderia promover a permeação cutânea do β-cariofileno. O tensoativo brometo de cetiltrimetilamônio provou ser mais eficiente em concentrações consideradas seguras para o uso tópico, revertendo o potencial zeta para valores adequados, sem interferir no tamanho de gotícula e índice de polidispersão. O tensoativo oleilamina também reverteu o potencial zeta, porém somente em concentrações muito elevadas, podendo ser consideradas tóxicas. O teste de permeação cutânea demonstrou que a incorporação de tensoativos catiônicos aumenta a retenção de β-cariofileno na epiderme em três vezes, enquanto que, na derme, não há diferença estatística entre as formulações aniônica e catiônica. Após, as nanoemulsões escolhidas foram incorporadas em hidrogéis de Carbopol®, Natrosol® e quitosana com vistas ao espessamento e adequação da viscosidade ao uso tópico. O hidrogel com quitosana 8 apresentou-se instável, com aumento de tamanho de gotícula e índice de polidispersão, apesar de não ter afetado o potencial zeta. Os hidrogéis de Carbopol® e Natrosol® apresentaram bons resultados de caracterização físico-química, porém somente o hidrogel de Natrosol® foi escolhido para os estudos de permeação cutânea e atividade anti-inflamatória in vivo, devido ao seu caráter neutro. No estudo de permeação cutânea das nanoemulsões incorporadas em hidrogel, houve um aumento na retenção de β-cariofileno na derme em relação às nanoemulsões, e houve a facilitação de permeação até o fluido receptor. Por fim, o estudo da atividade in vivo das formulações selecionadas demonstrou que o óleo de copaíba apresenta atividade anti-inflamatória e que a sua incorporação em nanoemulsões aumenta este efeito. No entanto, ambas nanoemulsões, tanto negativamente quanto positivamente carregadas, apresentaram resultado semelhante para a inibição do edema. Quando compara-se a permeação cutânea das formulações verifica-se que na derme não há diferença estatística, o que pode justificar a semelhança do grau de inibição da inflamação no teste in vivo. Em relação à atividade das nanoemulsões incorporadas em hidrogéis, pode-se verificar que no teste de edema de pata apenas a formulação carregada positivamente teve um efeito mais pronunciado, enquanto no edema de orelha as formulações obtiveram um perfil equivalente ao controle cetoprofeno, porém não potencializaram o efeito do óleo. Quanto ao estudo com os parasitos causadores da Leishmaniose, os testes in vitro mostraram que os tratamentos (óleo de copaíba, β-cariofileno e suas nanoemulsões) foram mais eficazes contra as espécies L. major e L. donovani em comparação às espécies L. amazonensis e L. braziliensis. O teste in vivo mostrou que todos os tratamentos foram capazes de reduzir a área da ferida dos camundongos infectados com L. major. No entanto, eles não conseguiram recuperar totalmente os animais. / Copaiba oil is a natural product found especially in the Amazon region, where it is used as treatment for inflammations and as wound healer in the popular medicin. The species Copaifera multijuga Hayne showed a potential anti-inflammatory effect in relation to other Copaifera L. species, mainly due to its major compound, β-caryophyllene. Our research group studied the oil incorporation in nanoemulsions and developed a formulation containing a high copaiba oil proportion in the oil core (20% w/v) without loss of system stability. Based in this nanoemulsion, we present in this study the skin permeation, the formulation optimization and the anti-inflammatory activity. A method in gas chromatograph coupled with mass spectrometer in headspace mode (HS-GC/MS) was validated to analyze β-caryophyllene in skin samples from the skin permeation assay. The method proved to be specific, linear, precise and accurate. Skin permeation test showed that only with the nanoemulsion is possible to detect β-caryophyllene in the dermis layer, while with the oil, only in the stratum corneum. After, two cationic surfactants were tested in the nanoemulsion to prove if the positive charge on the droplet interface could promote β-caryophyllene permeation. Cetyltrimethylammonium bromide proved to be more effective at concentrations considered safe for topical use, reversing the zeta potential to suitable values, without interfering with droplet size and polydispersity index. Oleylamine also reversed the zeta potential, but only at very high concentrations, that may be considered toxic. Skin permeation test showed that the incorporation of cationic surfactants increases β-caryophyllene retention in the epidermis by three fold, whereas in the dermis, there is no statistical difference between the cationic and anionic nanoemulsions. Afterward, the chosen nanoemulsions were incorporated in Carbopol®, Natrosol® and chitosan hydrogels in order to adjust the viscosity for topical use. Chitosan hydrogel presented instability, with an increase in droplet size and polydispersity index, although it has not affected the zeta potential. Carbopol® and Natrosol® hydrogels showed good results in physicochemical characterization, but only Natrosol® hydrogel was chosen for the following skin permeation 10 and anti-inflammatory activity in vivo studies due to its neutral character. In nanoemulsions thickened-hydrogel skin permeation study, there was an increase in the β-caryophyllene retention in the dermis compared to nanoemulsions, and promoted permeation to the receptor fluid. Finally, in vivo anti-inflammatory activity from selected formulations showed that the copaiba oil has anti-inflammatory activity and that its incorporation into nanoemulsions increases this effect. However, both negative and positively charged nanoemulsions, showed similar results for inhibition of edema. When the nanoemulsions’ skin permeation is compared, it is found that in the dermis there is no statistical difference, which may explain the similarity degree of inflammation inhibition in the in vivo test. Regarding to the activity of the nanoemulsions incorporated in hydrogels, it can be verified that in paw edema assay, only the positively charged formulation had a more pronounced effect, whereas in the ear edema the formulations obtained a profile equivalent to the control, ketoprofen, but did not potentiate the effect of the oil. As for the study with the parasites causing Leishmaniasis, in vitro tests showed that the treatments (copaiba oil, β-caryophyllene and their nanoemulsions) were more effective against L. major and L. donovani compared to L. amazonensis and L. braziliensis. In vivo assay showed that all treatments were able to reduce the wound area of mice infected with L. major. However, they were unable to fully recover the animals from the disease.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. / Made available in DSpace on 2012-10-17T21:38:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T17:10:05Z : No. of bitstreams: 1 173997.pdf: 3927403 bytes, checksum: 7b16f6d300c40b56dbeab5015d05b909 (MD5) / Ocorre em torno 10 mil casos de acidentes por ano no Brasil, causados por escorpião amarelo, sendo que o sintoma mais expressivo do envenenamento relatado por indivíduos picados é a dor intensa no local da picada. Devido a estes relatos propomos estudar neste trabalho os mediadores envolvidos na dor inflamatória induzida pelo veneno do escorpião Tityus serrulatus. Utilizamos para avaliar a intensidade de hiperalgesia em patas de ratos (Wistar,machos), o método de Randall-Selitto modificado por Ferreira e cols., 1978. O veneno administrado em patas de rato foi capaz de induzir hiperalgesia dependente da dose (0,312 a 10 ug/pata). Sugerimos a participação da bradicinina na hiperalgesia, uma vez que esta foi abolida pelo HOE140. O veneno possivelmente é capaz de liberar citocinas inflamatóriaa , visto que drogas como nimesulide, dexametasona e pentoxifilina foram capazes de abolir a hiperalgesia induzida pelo veneno. E o teste de ELISA para dosagem das concentrações interleucina-1 beta (IL-1) e TNF alfa, demonstraram que estas aumentam uma e duas horas após a administração do veneno. Substâncias que inibem a COX, como indometacina , meloxicam , paracetamol e dexametasona foram capazes de inibir a hiperalgesia, sugerindo a participação de prostaglandinas. Substâncias que bloqueiam a ação de aminas simpatomiméticas, como atenolol e guanetidina atenuaram a hiperalgesia, sugerindo a participação de aminas simpatomiméticas. A liberação de prostaglandinas e aminas simpatomiméticas provavelmente é concomitantee possui efeito somatório, visto que a associação de AINEs e simpatolíticos aboliram a hiperalgesia induzida pelo veneno. Demonstramos que substâncias como dipirona e diclofenaco, foram capazes de reverter o quadro de hiperalgesia. E que estas substâncias agem de forma analgésica via liberação de NO, visto que as ações do diclofenaco e da dipirona foram abolidas pelo prévio tratamento com LNMMA ou azul de metileno. Possivelmente o veneno não induz a liberação de histamina, e nem a síntese de leucotrienos, visto que substâncias que inibem a ações da histamina como a meclisina e composto 48/80 e o MK886, que impede a síntese de leucotrienos foram incapazes de inibir a hiperalgesia.

Se evaluaron los efectos cicatrizante, antiinflamatorio y antimicrobiano de la grasa de Iguana Verde (Iguana iguana) de hembras grávidas procedentes del distrito de Castilla, provincia de Piura, departamento de Piura (Perú). La grasa demostró que a dosis de 0,55 mL/kg (vía tópica) tiene actividad cicatrizante y claras evidencias de atenuar y/o borrar cicatrices sobre lesiones inducidas en ratas; también mostró tener propiedad antiiflamatoria mediante edema inducido por xyleno en oreja de ratón. Los resultados microbiológicos demostraron actividad antimicrobiana poco significativa. El estudio químico analítico reveló: proteínas totales (12%), albúmina (6,4%), úrea (0,05%),Fe (1ppm), Al (2ppm) y Cr (2ppm). Un análisis de composición de ácidos grasos realizado por Cromatografía gas-líquida en columna mostró los siguientes ácidos: mirístico (0,9 %), palmítico (28,9%), palmitoleico (6,2%), hexadecatrienoico ω4 (0,2%), esteárico (7,0%), oleico ω7 (4,0%), oleico ω9 (34,9%), linoleico ω6 (5,2%), linolénico ω3 (9,7%), araquídico (0,1%), gadoleico ω9 (0,5%), eicosadienoico ω6 (0,1%), eicosatrienoico ω3 (0,3%), araquidónico ω3 (0,1%), araquidónico ω6 (0,1%), docosapentaenoico ω3 (0,1%). Asimismo, se investigaron las vitaminas E por HPLC y vitamina A por la técnica de la USP XXVIII concluyéndose que la grasa de iguana no contiene estas vitaminas. Respecto a su DL50 es inócua, la prueba de sensibilidad cutánea y reactividad aguda en conejos indica que no es irritante a la piel por lo que estaríamos ante una fuente de materia prima natural con un gran potencial para su empleo en dermatología. Palabras clave: Grasa de Iguana Verde, Piura, Efecto cicatrizante, Efecto antiinflamatorio, Efecto antimicrobiano, Estudio químico analítico, Dermatología. / -- The cicatrizant effects were evaluated, anti-inflammatory and antimicrobial of the fat of Green Iguana (Iguana iguana) of pregnant female coming from the district of Castilla, county of Piura, department of Piura (Peru). The fat demonstrated that to dose of 0,55 mL / kg (via topical) has healing activity and whites evidences of to attenuate and/or to erase scars on lesions induced in rats; also showed to have property anti-inflammatory mediating edema induced by xyleno in mouse ear. The microbiological results demonstrated little significant microbial activity. The chemical analytic study revealed: total (12%) proteins, albumin (6,4%), úrea (0,05%), Fe (1ppm), Al (2ppm) and Cr (2ppm). An analysis of composition of fatty acid carried out by gas-liquid Chromatography in column showed the following acids: myristic (0,9%), palmitic (28,9%), palmitoleic (6,2%), hexadecatrienoic ω4 (0,2%), stearic (7,0%), oleic ω7 (4,0%), oleic ω9 (34,9%), linoleic ω6 (5,2%), linolenic ω3 (9,7%), arachidonic (0,1%), gadoleic ω9 (0,5%), eicosadienoic ω6 (0,1%), eicosatrienoic ω3 (0,3%), araquidonic ω3 (0,1%), araquidonic ω6 (0,1%), docosapentaenoic ω3 (0,1%). Also, the vitamins E were investigated by HPLC and vitamin A by the technique of USP XXVIII being concluded that the iguana fat doesn't contain these vitamins. Regarding their DL50 it is innocuous, the test of cutaneous sensibility and sharp reactivity in rabbits it indicates that it is not irritating to the skin for what we would be before a matter source prevails natural with a great potential for their employment in dermatology. Keywords: Fat of Green Iguana, Piura, healing Effect, anti-inflamatorio Effect, antimicrobial Effect, Study chemical analytic, Dermatology. / Tesis

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2012-10-24T20:41:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 261614.pdf: 631140 bytes, checksum: ff121f74c5bc6020d896f00ab345d6e4 (MD5) / A Lotus corniculatus (Fabaceae) é distribuída em muitas regiões do mundo e possui grande valor agronômico por seus constituintes: proantocianidinas, flavonoides e ácido oleanólico. Esta planta é utilizada como alimento para o gado proporcionando o aumento no ganho de peso e na produção de leite, além do controle de infecções intestinais parasitárias nos animais. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito anti-inflamatório e antibacteriano do extrato bruto (CE) da Lotus corniculatus v. São Gabriel, frações (hexano (HEX), acetato de etila (AcOEt), butanólica (BuOH) e resíduo aquoso (AF)), e compostos isolados (canferitrin, ácido oleanólico e ß-sitosterol). As partes aéreas da Lotus corniculatus foram secas a temperatura ambiente, e a partir desse material (620 g), foi extraído o extrato bruto (CE) por maceração com etanol 96% por um mês. O solvente foi evaporado resultando em 78 g de extrato bruto (CE). O extrato bruto foi fracionado por extração líquido-líquido utilizando solventes em ordem crescente de polaridade resultando nas frações hexano (HEX), acetato de etila (AcOEt), butanólica (BuOH) e resíduo aquoso (AF). A partir da fração HEX foram isolados o ácido oleanólico e o ß-sitosterol, e a partir da fração AcOEt o canferitrin. Para a avaliação da atividade anti-inflamatória foi utilizado o modelo de pleurisia induzida pela carragenina, em camundongos, e foram avaliados os seguintes parâmetros inflamatórios: concentrações de leucócitos, exsudação, atividade da mieloperoxidase (MPO) e da adenosina-deaminase (ADA), além das concentrações de nitrito/nitrato (NOx) e interleucina-1 beta (IL-1 ). Nesse protocolo experimental, foram utilizados camundongos albinos suíços, os quais foram distribuídos em diferentes grupos e tratados com CE (100 - 400 mg/kg), HEX (50 - 200 mg/kg), AcOEt (100 - 400 mg/kg), BuOH (50 - 200 mg/kg), AF (25 - 200 mg/kg), canferitrin (50 - 100 mg/kg), ácido oleanólico (10 - 100 mg/kg) ou ß-sitosterol (10 - 100 mg/kg) 0,5 h antes da administração da carragenina (1%, i.pl.). Os parâmetros inflamatórios foram avaliados 4 h após. Todos os animais, exceto nos experimentos que foram analisadas as atividades enzimáticas, foi administrado previamente (10 min.) Azul de Evans (25 mg/kg, i.v.) a fim de avaliar a exsudação. Dexametasona e indometacina foram utilizados como fármacos anti-inflamatórios de referência. Para a avaliação da atividade antibacteriana, foi utilizada a técnica de microdiluição em caldo para a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e da concentração bactericida mínima (CBM). Neste protocolo, o material vegetal, o extrato bruto (CE), frações e compostos isolados, foram dissolvidos em dimetilsulfóxido (DMSO) e transferidos para uma placa em diluição seriada e, a seguir, o inóculo bacteriano foi adicionado. Gentamicina foi utilizada como fármaco antibacteriano de referência. Diferenças estatísticas entre os grupos, para os parâmetros inflamatórios, foram determinadas pela análise dos testes t de Student ou de variância (ANOVA). Valores de P < 0,05 foram considerados significativos. O extrato bruto da Lotus corniculatus (200 - 400 mg/kg) e frações (50 - 200 mg/kg), assim como os compostos isolados (25 - 100 mg/kg) inibiram: leucócitos, neutrófilos, exsudação, a atividade da MPO e da ADA, além das concentrações de NO e IL-1 (P < 0,05). A indometacina e a dexametasona inibiram todos os parâmetros inflamatórios estudados (P < 0,05). Em relação à atividade antibacteriana, somente as frações HEX e AcOEt, e os compostos isolados ácido oleanólico e canferitrin, revelaram atividade bactericida e/ou bacteriostática. A fração HEX demonstrou moderada atividade antibacteriana (CIM = 100 µg mL-1) para a bactéria Bacillus cereus, e fraca atividade antibacteriana (CIM = 600 a 1000 µg mL-1) para as bactérias Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Staphylococcus epidermidis, Providencia alcalifaciens e Acinetobacter calcoaceticus. A fração AcOEt demonstrou fraca atividade antibacteriana (CIM = 800 µg mL-1) para as bactérias Enterococcus faecalis, Bacillus cereus e Acinetobacter calcoaceticus. O ácido oleanólico revelou boa atividade antibacteriana para Staphylococcus aureus meticilina resistente (CIM = 100 µg mL-1),Listeria monocytogenes e Bacillus cereus (CIM = 25 µg mL1), e o canferitrin demonstrou boa atividade antibacteriana para as bactérias: Staphylococcus epidermidis, Shigella flexinerii, Salmonella typhimurium e Acinetobacter calcoaceticus (CIM = 100 µg mL-1). Este composto demonstrou excelente atividade antibacteriana para as bactérias Enterococcus faecalis (CIM = 3.9 µg mL-1) e Bacillus cereus (CIM = 8.5 µg mL-1). O extrato bruto, frações e compostos isolados da Lotus corniculatus v. São Gabriel demonstraram importante atividade anti-inflamatória e antibacteriana. Os compostos isolados: canferitrin, ácido oleanólico e ß-sitosterol podem ser responsáveis por estes efeitos anti-inflamatório e/ou antibacteriano. The Lotus corniculatus (Fabaceae) is distributed in many regions of the world and has a high agronomic value for its constituted: proanthocyanidins, flavonoids and oleanolic acid. This plant is used as food for cattle providing the enhancement of the weight and of milk production beyond the control of intestinal parasitic infections in the animals. The aim of this study was to evaluate the anti-inflammatory and anti-bacterial effects of crude extract (CE), fractions (hexane (HEX), ethyl acetate (AcOEt), n-butanol (BuOH) and aquous fraction (AF)), and isolated compounds (kaempferitrin, oleanolic acid and ß-sitosterol) from Lotus corniculatus v. São Gabriel. The aerial parts of Lotus corniculatus were dried at room temperature and this material (620 g) the crude extract (CE) was extracted by maceration with ethanol 96% for one month. The solvent was evaporated resulting in 78 g of crude extract (CE). The crude extract was fractionated by liquid-liquid extraction using solvents in growing order of polarity resulting in hexane (HEX), ethyl acetate (AcOEt), n-butanol (BuOH) and aqueous fraction (AF). From the HEX fraction it was isolated the oleanolic acid and the ß-sitosterol and from AcOEt fraction the kaempferitrin. To evaluate the anti-inflamatory activity, it was used the mouse model of pleurisy induced by carrageenan and the following inflammatory parameters were evaluated: leukocytes, exudation, myeloperoxidase (MPO) and adenosine-deaminase (ADA) activities, as well as, nitrite/nitrate (NOx) and interleukin-1 beta (IL-1ß) levels. In this experimental protocol, swiss mice were used in the in vivo experiments, which were distributed in different groups and they were treated with CE (100 - 400 mg/kg), HEX (50 - 200 mg/kg), AcOEt (100 - 400 mg/kg), BuOH (50 - 200 mg/kg), RA (25 - 200 mg/kg), kaempferitrin (50 - 100 mg/kg), oleanolic acid (10 - 100 mg/kg) or ß-sitosterol (10 - 100 mg/kg) 0,5 h before carrageenan (1%,i.pl.). The inflammatory parameters were evaluated 4 h after. All animals, except in the experiments that were analyzed enzymatic activities, the animals were previously pretreated (10 min.) with Evans blue dye (25 mg/kg, i.v.) in order to evaluate the exudation. Dexamethasone and indomethacin were used as anti-inflammatory reference drugs. To evaluate the anti-bacterial activity, it was used the microdilution in broth technical to determine the minimal inhibitory concentraton (MIC) and the minimal bactericidal concentration (MBC) methodology. In this protocol the crude extract (CE), fractions and isolated compounds were dissolved in dimethylsulfoxide (DMSO) and transferred to plate in serial dilution and, after, the bacterial inoculum were added. The gentamicin was used as the anti-bacterial reference drug. To the anti-inflammatory parameters, statistical differences between groups were determined by Student's t test and analysis of variance (ANOVA). Values of P < 0.05 were considered significant. The crude extract of Lotus corniculatus (200 - 400 mg/kg) and fractions (50 - 200 mg/kg), as well as its isolated compound (25 - 100 mg/kg) inhibited: lekocytes, neutrophils and exudation, the MPO and ADA activities, as well as NO and IL-1 levels (P < 0.05). Indomethacin and dexamethasone inhibited all the studied inflammatory parameters (P < 0.05). In regard to the anti-bacterial activity, only the HEX and AcOEt fractions and the isolated compounds, oleanolic acid and kaempferitrin, revealed anti-bacterial and/or bacteriostatic activities. The hexane fraction showed moderate anti-bacterial effect (MIC = 100 µg mL-1) on Bacillus cereus and weak anti-bacterial effect (MIC = 600 to 1000 µg mL-1) on Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Staphylococcus epidermidis, Providencia alcalifaciens and Acinetobacter calcoaceticus. The AcOEt fraction demonstrated a weak anti-bacterial activity (MIC = 800 µg mL-1) on Enterococcus faecalis, Bacillus cereus and Acinetobacter calcoaceticus.The Oleanolic acid, isolated from hexane fraction, exhibited a good anti-bacterial activity on methycillin-resistant Staphylococcus aureus (MIC = 100 µg mL-1), Listeria monocytogenes and Bacillus cereus (MIC = 25 µg mL-1) and the kaempferitrin, a compound isolated from this fraction, demonstrated a good anti-bacterial effect on: Staphylococcus epidermidis, Shigella flexinerii, Salmonella typhimurium and Acinetobacter calcoaceticus (MIC = 100 µg mL-1). This compound showed an excellent anti-bacterial activity on Enterococcus faecalis (MIC = 3.9 µg mL-1) and Bacillus cereus (MIC = 8.5 µg mL-1). The crude extract, fraction and isolated compound from Lotus corniculatus v. São Gabriel, demonstrated important anti-inflammatory and anti-bacterial activities. The isolated compounds: kampferitrin, oleanolic acid and ß-sitosterol can be responsible for these anti-inflammatory and/or anti-bacterial effects.

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-graduação em Odontologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T18:21:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 293405.pdf: 1282948 bytes, checksum: 00f3ebc2be62211bb1924e2b81333143 (MD5) / A necessidade de novas alternativas em materiais de uso clinico em odontologia, incentiva novas pesquisas à procura de produtos naturais biocompatíveis. A biodiversidade da região amazônica Brasileira possui um enorme potencial de fontes vegetais, para a obtenção de substâncias com ação terapêutica. O presente estudo demonstra modelos experimentais em ratos de teste subcutâneo de biocompatibilidade, e emprego em terapia de enxertia óssea de três extratos vegetais de árvores amazônicas e uma Mistura Adesiva, contendo os três extratos: Resina do Breu branco (Protium heptaphyllum march) (RBB); a resina do Jatobá (Hymenaea courbaril L) (RJ); o leite do Amapá-doce (Brosimum Parinarioides Ducke) (LA); e a Mistura Adesiva (MA). O teste de biocompatibilidade subcutâneo avaliou, em microscopia de luz, o tipo de infiltrado inflamatório induzido por cada substância, nos tempos de 3, 7 e 15 dias. Os melhores resultados foram observados no grupo (RBB), apresentando reação inflamatória discreta à sua implantação. Em seguida vieram (MA), (RJ) e (LA) respectivamente. O leite do Amapá se revelou a substância menos biocompatível, apresentando quadro inflamatório agudo intenso, em todos os tempos experimentais. Os testes de enxertia óssea avaliaram em 7 e 21 dias, também em microscopia de luz, a ação dos três extratos e a Mistura Adesiva, associados ao enxerto autógeno, em defeitos de 5 milímetros criados na calota craniana da calvária de ratos. A histomorfometria revelou que, em associação com osso autógeno, o extrato do Breu Branco associado com osso autógeno (A+BB) (851,7 µm) também foi capaz de produzir resultados ósseos satisfatórios , comparáveis ao grupo autógeno (A) (694,4 µm) ao final de 21 dias. A associação Mistura Adesiva + osso autógeno (A+MA) produziu resultados iniciais (7 dias) surpreendentes (313,8 µm), atingindo quase 2 vezes a espessura óssea média do grupo (A) (174,8 µm) , com resultados similares ao grupo (A+BB) em 21 dias. Também em 21 dias, a associação da resina do Jatobá com osso autógeno (A+J) (467,1 µm) obteve resultados inferiores ao grupo (A), mas superiores ao grupo controle (C) (226,8 µm), onde os defeitos foram preenchidos apenas por coágulo. O grupo (A+LA) (487,9 µm), a associação de leite do Amapá com osso autógeno, também apresentou resultados superiores ao grupo (C), ao final de 21 dias. Sugere-se que, apesar da necessidade de novas pesquisas, a Mistura Adesiva, assim como o Breu Branco (Protium heptaphyllum march), tem potencial terapêutico no reparo ósseo. / The need for new alternative materials in clinical dentistry, encourages further researches of natural products. It´s well known that Brazilian Amazon biodiversity has enormous potential plant sources for obtaining therapeutic substances. Experimental studies in rats are commonly used for the initial tests of new substances biocompatibility. The present study demonstrates experimental models in rats of biocompatibility subcutaneous test, and the possible use in bone graft therapies of three plant extracts from tropical rainforest trees, and the Adhesive Mixture made by the extracts: the Breu Branco (Protium heptaphyllum march) resin (RBB), the Jatobá (Hymenaea courbaril L) resin (RJ), the Amapá-doce (Brosimum Ducke Parinarioides) extract (LA); and the Adhesive Mixture (MA). The subcutaneous test evaluated the biocompatibility through analysis of inflammatory infiltrate characteristics, caused by each substance, in light microscopy, on 3, 7 and 15 days. The best results were presented by (RBB), showing discrete inflammatory reaction by it´s implantation, followed by (MA), (RJ) and (LA), respectively. The Amapá extract had less biocompatible scores compared to the other substances, showing intense acute inflammation in all experimental times. The bone graft test evaluated extracts and Adhesive Mixture bone healing action by light microscopy. The associations extracts- autograft were used filling 5 mm defects in rat calvaria, at 7 and 21 days. The histomorphometry revealed that, in combination with autograft, the Breu Branco extract (A+BB) (851,7 µm) was also able to produce satisfactory results in bone graft therapy, reaching comparable outcomes to autograft group (A) (694,4 µm) at the end of 21 days. The Adhesive Mixture autograft association (A+MA) (313,8 µm), has produced impressive initial results (7 days) to nearly 2 times the group (A) (174,8 µm) average bone thickness, getting similar outcome to group (A+BB) in 21 days. The Jatobá resin - autograft association (A+J) (467,1 µm) has showed lower bone thickness in comparison to group (A), but higher levels compared to control group (C) (226,8 µm), where the blood clot was used for bone defect filling. The group (A+LA) (487,9 µm), the Amapá extract - autograft association, also showed superior levels in comparison to group (C). It suggests that, despite the need for additional researches, the Adhesive Mixture, as the Breu Branco (Protium heptaphyllum march) resin, has potential use in dentistry.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T00:57:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 289130.pdf: 934362 bytes, checksum: 45e1f5c2bc758369144b6b49b7c34dae (MD5) / O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito anti-inflamatório da Lotus corniculatus no modelo de pleurisia induzida por bradicinina, em camundongos. Materiais e métodos: As partes aéreas da L. corniculatus var. São Gabriel foram secas ao ar e cortadas. Ao material obtido foi adicionado etanol 96% para obter o extrato bruto hidroálcoólico (CE). Este foi fracionado por partição líquido-líquido utilizando hexano, acetato de etila, n-butanol e água, em ordem crescente de polaridade, resultando nas frações hexano (HEX), acetato de etila (AcOEt), butanol (BuOH), e aquosa (Aq). Os compostos 1 e 2 foram isolados das frações HEX e AcOEt por meio de coluna cromatográfica de sílica gel, e identificados como ácido oleanólico e canferitrina. Camundongos albinos suíços foram utilizados nos experimentos e a pleurisia foi induzida por bradicinina (BK), de acordo com metodologia descrita por Saleh et al. (1997). Inicialmente, diferentes grupos de animais foram tratados com diferentes doses de CE (25-200 mg/kg), HEX (5-25 mg/kg), AcOEt (5-25 mg/kg), BuOH (5-25 mg/kg), Aq (5-25 mg/kg), ácido oleanólico (1-5 mg/kg), ou canferitrina (1-10 mg/kg), 0,5 h antes da indução por BK. Os parâmetros inflamatórios (leucócitos, exsudação, atividade das enzimas mieloperoxidase (MPO) e adenosina-deaminase (ADA), e concentrações de nitrato/nitrito (NOx) e interleucina-17A (IL-17A)) foram avaliados 4 h após a indução da pleurisia. Diferenças estatísticas entre os grupos foram determinadas pela analise de variância (ANOVA), complementadas quando necessário, com Dunnett ou teste t de Student. Valores de p < 0,05 foram considerados significantes. Resultados: o CE, suas frações e compostos isolados inibiram significativamente os leucócitos, a exsudação, a atividade das enzimas MPO e ADA, assim como as concentrações de NOx e IL-17A (p < 0,05). Conclusão: A L. corniculatus apresentou importante efeito anti-inflamatório, principalmente pela inibição do influxo de leucócitos e exsudação causada pela BK. Este efeito parece ser em parte mediado pela inibição das enzimas MPO e ADA, e dos mediadores NO e IL-17A. Além disso, os compostos ácido oleanólico e canferitrina parecem ser responsáveis, em parte, pelo efeito anti-inflamatório observado.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2012-10-22T17:44:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 225204.pdf: 793572 bytes, checksum: c926504bdd61b55900b4d9275567811b (MD5)

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2012-10-23T08:39:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 252060.pdf: 593370 bytes, checksum: 858361c2f238891d3f74efba8b533051 (MD5)

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:59:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 326557.pdf: 2039210 bytes, checksum: c0e63b81faa91dd1a265f2812a7dd060 (MD5) Previous issue date: 2014 / Introdução: Jungia é um gênero da família Asteraceae, que compreende arbustos, cipós e ervas e está presente na América do Norte, Central e América do Sul, incluindo o sul do Brasil, onde a espécie Jungia sellowii Less. é encontrada no estado de Santa Catarina. Este gênero é utilizado na medicina popular para tratar inflamação no trato urinário, tonsilite, úlceras estomacais, nefrite, hemorroidas e também é utilizado como um agente desinfetante para tratar infecções geniturinárias. Objetivos: Avaliar o efeito anti-inflamatório do extrato bruto (EB), frações e compostos isolados de Jungia sellowii Less. (Asteraceae), administrados por via intraperitoneal (i.p.), utilizando-se o modelo murino da pleurisia induzida pela carragenina. Metodologia: Folhas frescas foram extraídas com etanol e água para obtenção do EB, que foi fracionado com diferentes solventes de polaridade crescente obtendo-se as frações n-hexano (Hex), diclorometano (DCM), acetato de etila (AcOEt), n-butanol (BuOH) e a fração residual aquosa (Aq). O ácido succínico (AS) e o ácido lático (AL) foram isolados da fração Aq e suas estruturas foram determinadas por ressonância magnética nuclear (1H RMN). Camundongos albinos Swiss, fêmeas, foram utilizados nos experimentos in vivo. O modelo experimental da pleurisia foi induzido por uma injeção intrapleural de Cg (1%) e os parâmetros inflamatórios: migração de leucócitos, concentração de exsudação, atividade da mieloperoxidase (MPO) e adenosina desaminase (ADA), bem como as concentrações dos metabólitos do óxido nítrico (NOx), interleucina-1 (IL-1ß), fator de necrose tumoral-a (TNF-a) e interleucina-17A (IL-17A) foram analisados no lavado da cavidade pleural dos camundongos. A expressão do ácido ribonucleico mensageiro (RNAm) para IL-1ß, TNF-a, IL-17A e também para a óxido nítrico sintase induzida (iNOS) e a avaliação da fosforilação da proteína p65 (p-p65 Fator Nuclear-?B (NF-?B)) foram determinadas no tecido pulmonar após 4 h da indução da pleurisia. Diferenças estatísticas entre os grupos foram determinadas por análise de variância (ANOVA) de duas vias, complementado pelo teste de Newman-Keuls. Valores de p < 0.05 foram considerados significativos. Resultados: Animais tratados com EB (25-50 mg/kg), BuOH (25-50 mg/kg), Aq (5-25 mg/kg), AS (1-2.5 mg/kg) e AL (1-2.5 mg/kg) inibiram a migração de leucócitos e a concentração de exsudação. O EB (25 mg/kh), BuOH (25 mg/kg), Aq (5 mg/kg), SA (1 mg/kg) e LA (1 mg/kh) inibiram a atividade da MPO e da ADA, as concentrações de NOx, IL-1ß, TNF-a, IL-17A, bem como a expressão do RNAm para IL-1ß, TNF-a, IL-17A e iNOS. O AS e o AL inibiram a fosforilação da proteína p65 (p-p65 NF-kB) (p < 0.05). Conclusão: Os resultados demonstraram que Jungia sellowii Less. inibiu a inflamação induzida pela carragenina pela diminuição da migração de leucócitos e da exsudação. Estes efeitos foram relacionados à inibição de citocinas pró-inflamatórias e do óxido nítrico. Ainda, os compostos isolados, AS e AL, podem ter um papel importante neste efeito anti-inflamatório pela inibição de todos os parâmetros inflamatórios estudados e sua ação anti-inflamatória pode estar relacionada à regulação do NF-kB.<br> / Abstract : Introduction: Jungia is a genus from the Asteraceae family, which comprises shrubs, lianas and herbs and it is present in the North America, Central America and South America, including southern Brazil, where the species Jungia sellowii Less. is found in the state of Santa Catarina. This genus is used in traditional medicine to treat urinary tract inflammation, tonsillitis, stomach ulcers, nephritis, hemorrhoids and it is also used as a disinfectant agent to treat genitourinary infections. Objectives: To evaluate the anti-inflammatory effect of the crude extract (CE), its derived fractions and isolated compounds from Jungia sellowii Less. (Asteraceae), administered intraperitoneally (i.p.), using a murine model of pleurisy induced by carrageenan. Methodology: Fresh leaves were extracted with ethanol and water to obtain the CE which was fractionated with different solvents of increasing polarity, yielding n-hexane (Hex), dichloromethane (DCM), ethyl acetate (EtOAc), n-butanol (BuOH) fractions and the residual aqueous fraction (Aq). The succinic acid (SA) and lactic acid (LA) were isolated from the Aq fraction and their structures were determined by nuclear magnetic resonance (1H NMR). Female Swiss mice were used in the in vivo experiments. The experimental model of pleurisy was induced by an intrapleural injection of Cg (1%) and the inflammatory parameters: leukocyte content, degree of exudation, myeloperoxidase (MPO) and adenosine deaminase (ADA) activities, as well as nitric oxide metabolites (NOx), interleukin-1ß (IL-1ß), tumor necrosis factor-a (TNF-a) and interleukin-17A (IL-17A) levels were analyzed in the mouse pleural fluid leakage. The messenger ribonucleic acid (mRNA) expression for IL-1ß, TNF-a, IL-17A and also for inducible nitric oxide synthase (iNOS) and the measurement of p65 protein phosphorylation (p-p65 Nuclear Factor-?B (NF-?B)) were determined in the lung tissue after 4 h of pleurisy induction. Statistical difference between groups were determined by two-way analysis of variance (ANOVA), followed by Newman-Keuls test. Values of p < 0.05 were considered significant. Results: Animals treated with CE (25-50 mg/kg), BuOH (25-50 mg/kg), Aq (5-25 mg/kg), SA (1-2.5 mg/kg) and LA (1-2.5 mg/kg) inhibited leukocyte content and the degree of exudation. The CE (25 mg/kh), BuOH (25 mg/kg), Aq (5 mg/kg), SA (1 mg/kg), and LA (1 mg/kh) inhibited MPO and ADA activities, NOx, IL-1ß, TNF-a, IL-17A levels, as well as the mRNA expression for IL-1ß, TNF-a, IL-17A and iNOS and the p65 protein phosphorylation (p-p65 NF-kB) (p < 0.05). Conclusions: The results demonstrated that Jungia sellowii Less. inhibited the inflammation induced by carrageenan by decreasing the leukocyte content and the degree of exudation. Those effects were related to the inhibition of pro-inflammatory cytokines and nitric oxide. Also, the isolated compounds, SA and LA, may play an important role in this anti-inflammatory effect by inhibiting all the studied pro-inflammatory parameters and its anti-inflammatory action may be related to the regulation of NF-kB.

Propone la estructura de flavonoides y determina la citotoxicidad, efecto antitumoral en líneas celulares, actividad antioxidante in vitro y efecto antiinflamatorio del extracto alcohólico de hojas de Hesperomeles cuneata Lindl. Se prepara un extracto alcohólico de hojas y se realiza el análisis anatómico vegetal e investigación fitoquímica mediante marcha de solubilidad, tamizaje fitoquímico, cromatografía y espectroscopia UV/Vis. Asimismo, se realiza los ensayos preclínicos de citotoxicidad en embriones de erizo de mar, efecto antitumoral en las líneas celulares BALB/c 3T3, M-14 y HT-29, actividad antioxidante in vitro por los métodos ABTS.+ y DPPH; y el efecto antiinflamatorio se realiza en ratas albinas hembras cepa Holtzman de 2,5 meses. El análisis anatómico de la hoja muestra un tipo mesomórfico. El extracto alcohólico es soluble en solventes polares y de mediana polaridad. Los metabolitos secundarios encontrados en el tamizaje fitoquímico son taninos, compuestos fenólicos, alcaloides, flavonoides; entre otros. Se propone nueve estructuras químicas de flavonoides mediante análisis espectroscópico UV/Vis. Los ensayos preclínicos, evidencian efecto citotóxico del extracto en erizo de mar a 200 μg/mL. La fracción 1 del extracto expresa los GI50 de 78,05 μg/mL para la línea celular tumoral M-14 y 69,52 μg/mL para la línea celular tumoral HT-29. En la actividad antioxidante in vitro empleando ABTS.+ y DPPH, el extracto manifesta los IC50 de 8,39 μg/mL y 13,58 μg/mL, respectivamente. El extracto muestra un mayor efecto antiinflamatorio in vivo en ratas a la dosis de 25 mg/kg. Se propone nueve estructuras de flavonoides presentes en el extracto alcohólico de hojas de Hesperomeles cuneata Lindl. Asimismo, los metabolitos secundarios del extracto alcohólico presentaron efecto citotóxico en embriones de erizo de mar, efecto antitumoral en líneas celulares, actividad antioxidante in vitro y efecto antiinflamatorio en ratas cepa Holtzman. / Tesis