Cette thèse traite de l'étude d'un modèle mathématique de croissance tumorale métastatique et de ses éventuelles applications en clinique. Il y est développé en particulier une étude théorique et numérique des modèles présentés. La première partie du manuscrit traite de l'étude d'un modèle de croissance métastatique non traitée où il est introduit un nouvel outil in silico: l'Index Métastatique qui pourrait permettre de quantifier l'état métastatique métastatique d'un patient donné et qui pourrait ainsi venir renforcer les classifications tumorales déjà existantes. La deuxième partie traite de l'étude du modèle enrichi de manière à prendre en compte l'action d'un traitement par chimiothérapie. Il y est présenté une étude théorique et numérique du modèle modifié ainsi que des exemples de simulation visant à étudier l'évolution de l'index métastatique infléchi par l'action du traitement. La dernière partie de ce manuscrit est consacrée à l'étude des potentialités du modèle en termes d'applications cliniques. Il y est décrit en particulier une manière de rendre compte de la fiabilité du modèle en confrontant les simulations avec des résultats provenant d'une étude clinique. Enfin il est étudié quelques pistes pour raffiner la classification de l'état de la maladie d'un patient et de comment déterminer les traitements les plus efficaces afin de minimiser la survenue de récidives.

Le secteur de la santé en France, fait l'objet régulièrement de réformes qui toutes ont pour objectif d'optimiser la prise en charge des patients grâce à une amélioration de la sécurisation du système sanitaire, tout en devant tenir compte des contraintes économiques. Cependant, ce n'est que très récemment, bien des années après les Etats-Unis, qu'une véritable prise de conscience a eu lieu chez les différents acteurs, positionnant désormais la sécurité du patient comme une priorité nationale. Les efforts portent notamment sur la réduction des événements iatrogènes graves évitables, dont une des sources principales est représentée par la prise en charge médicamenteuse. Dans le domaine hospitalier, de nombreuses méthodes de gestion des risques validées existent et leur utilisation est recommandée par la Haute Autorité de Santé. Elles présentent certaines limites, ne prenant pas ou peu en compte certains facteurs comme notamment les facteurs organisationnels et humains alors qu'ils interviennent de manière importante dans la survenue des incidents. Parallèlement, plusieurs méthodologies intégrant les facteurs organisationnels et humains existent et commencent à être utilisées dans différents secteurs, mais elles n'ont pas encore été évaluées dans le domaine de la santé. L'objectif de cette thèse est d'apporter des éléments de réponse originaux et pertinents aux priorités actuelles des décideurs et des professionnels de santé notamment au niveau des établissements de santé. Nous nous proposons d'évaluer une nouvelle méthode d'analyse a priori du risque nommée Functional Resonance Analysis Method (FRAM) par rapport à une méthode de référence, l'Analyse des Modes de Défaillances, de leurs Effets et de la Criticité (AMDEC) et de proposer un positionnement potentiel au niveau institutionnel dans le cadre d'une politique globale de gestion des risques. Le champ de l'évaluation dans le cadre de cette thèse porte sur le circuit des chimiothérapies.

Mémoire numérisé par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Université de Montréal.

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Le mélanome est un cancer dont l'incidence est toujours en augmentation et dont la mortalité ne faiblit pas, malgré les dispositifs de prévention et de détection précoce. Ce constat peut être principalement imputé au caractère invasif très marqué de cette pathologie, associé à un manque de traitements efficaces face à la maladie disséminée. Le travail présenté dans ce mémoire s'inscrit dans l'initiation d'une stratégie d'adressage tumoral actif de prodrogues, qui s'appuie sur un vecteur ciblant les mélanines (ICF01012) posédant un profil pharmaco-cinétique favorable (fixation tumorale forte, spécifique et durable). Une première génération de quatre prodrogues constituées par un principe actif anticancéreux modèle (l'IUdR) conjugué au vecteur via diverses fonctions espaceurs (ester, acétal, carbonate et carbamate) a été synthétisée et évaluée in vitro sur des critères métabolique et physico-chimique. Les études de biodistribution in vivo après radiomarquage des deux composés les plus pertinents ont démontré une absence de vectorisation, principalement imputable à une métabolisation très rapide des prodrogues conduisant à la perte de l'édifice vecteur. Ainsi, une seconde génération de trois prodrogues variant la nature des espaceurs (chaînes pegylées, pour l'amélioration de ce dernier point et fonction cétal) a été synthétisée. Les résultats biologiques indiquent que l'insertion d'une chaîne pegylée courte augmente la stabilité métabolique par encombrement de la fonction amine tertiaire, conduisant à une faible fixation tumorale. De plus, un espaceur sensible au pH acide constitué par une fonction cétal a été identifié et devrait permettre une libération sélective du principe actif au sein de la tumeur grâce au pH intramélanosomal acide. La libération sélective d'un principe actif par l'action d'une enzyme propre aux mélanosomes, la tyrosinase, a également été abordée par la synthèse de huit "prosondes" constituées par un substrat de l'enzyme (phénol ou catéchol), un espaceur auto-clivable et une sonde permettant d'étudier le mécanisme de libération. Une prosonde vectorisée incluant le vecteur a également été préparée. Des voies d'accès versatiles ont été conçues pour faciliter l'insertion ultérieure de principes actifs. L'aboutissement de cette étude devrait conduire à des prodrogues doublement spécifiques (i.e. distribution tumorale et libération spécifiques) conçues pour le traitement du mélanome métastasé. / Despite prevention campaigns and early detection, incidence and mortality of cutaneous melanoma are still increasing, due to its high invasiveness and the lack of efficient treatments against disseminated disease. This work is the starting point of a melanoma targeted prodrug therapy approach based on a melanin-targeting ligand (ICF01012) which displays an appropriate in vivo kinetic profile (strong, specific and long-lasting tumor uptake). A first generation of four prodrugs with varied spacers (ester, acetal, carbonate and carbamate) was synthesized and evaluated in vitro onphysicochemical and metabolic stability criteria. Two of them were selected and radiolabelled for in vivo evaluation which demonstrated non-specific distribution, mainly because of early metabolism leading to the loss of the targeting moeity. Taking into account these results, a second generation of three prodrugs varying the properties of spacers (pegylated chain for improving this last point and ketal function) was synthesized. Insertion of a short pegylated chain improved the metabolic stability by structural hindering of the tertiary amine fonction and led to a weak tumor uptake. Moreover, the ketal fonction was identified as a pH-sensitive linker able to selectively release the drug into the tumor due to the acidic intramelanosomal pH. The enzymatic drug release by tyrosinase, a specific melanosomal enzyme, was also explored. Eight "pro-probes" including an enzyme substrate moiety (phenol or catechol), a self-immolative spacer and a probe allowing the release mechanism were synthesized. A proprobe which includes the targeting moiety was also developed. During these studies, versatile synthetic pathways were designed for further easy incorporation of drugs. Achievement of this study should lead double specific prodrugs (i.e. specific tumor distribution and release) designed for metastatic melanoma treatment.

Les analogues de choline constituent une nouvelle classe d'antipaludiques qui inhibent la biosynthèse de la phosphatidylcholine (PC) de Plasmodium, parasite responsable du paludisme. Les études conduites ont mis en relief des particularités uniques de ces composés. Nous avons élucidé le mécanisme d'action biochimique de l'albitiazolium, actuel candidat clinique, caractérisant chacune des 5 étapes conduisant à la biosynthèse de PC. L'albitiazolium affecte en premier lieu l'entrée de choline dans le parasite intraerythrocytaire, choline et albitiazolium utilisant le même transporteur et affecte de façon différentielle les autres étapes de synthèse. L'activité antipaludique est fortement antagonisée par la choline indiquant que le mécanisme d'action primaire est bien l'inhibition de la synthèse de PC. L'accumulation des analogues de choline dans le parasite intracellulaire leur permet de restreindre leur toxicité aux seuls érythrocytes infectés. Des études comparatives réalisées chez Plasmodium et Babesia montrent une double compartimentation de l'albitiazolium uniquement chez Plasmodium, l'une d'elles correspondant à la vacuole digestive. L'accumulation chez Plasmodium est glucose-dépendante et exige aussi le maintien des gradients ioniques dans la cellule. Bien que les analogues de choline exercent leur effet antiparasitaire dès les premières heures de contact, l'effet dit « cheval de Troie » exige des conditions particulières pour les mesures d'activités pharmacologiques, nous amenant à comparer différents tests d'activité. Seuls les tests isotopiques basés sur l'incorporation d'hypoxanthine ou d'éthanolamine après un cycle parasitaire entier et le test fluorescent au SYBR green appliqué après 72h obtiennent des résultats fiables quel que soit le mécanisme d'action des antipaludiques. Enfin, des études de pharmacocinétique / pharmacodynamie montrent une exposition plasmatique supérieure chez les souris infectées par Plasmodium, due au recyclage de l'albitiazolium après son accumulation dans l'érythrocyte infecté. / Choline analogues form a new class of antimalarial drugs that inhibit the biosynthesis of phosphatidylcholine (PC) in Plasmodium, the malaria-causing parasite. The studies presented here highlighted the unique features of these compounds. We elucidated the biochemical mechanism of action of albitiazolium, the current clinical candidate, characterizing each of the 5 steps leading to the biosynthesis of PC. Albitiazolium primarily affects the entry of choline into the intraerythrocytic parasite and choline and albitiazolium use the same carrier. The other steps of synthesis are differentially affected. Antimalarial activity is strongly antagonized by choline indicating that the primary mechanism of action is the inhibition of PC synthesis Accumulation of choline analogs in the intracellular parasite allows them to restrict their toxicity to infected erythrocytes. Comparative studies in Plasmodium and Babesia show a double compartmentalization of albitiazolium only in Plasmodium, one of them corresponding to the food vacuole. Accumulation in Plasmodium is glucose-dependent and requires maintaining ionic gradients in the cell.Although choline analogues exert their antiparasitic effect in the first hours of contact, the “Trojan horse effect” requires specific conditions for the determination of pharmacological activity, leading us to evaluate various tests of activity. Only the isotopic tests based on hypoxanthine or ethanolamine incorporation after one parasite cycle and the fluorescent SYBR green assay applied after 72 hours give reliable results regardless of the mode of action of the tested antimalarials. Finally, pharmacokinetics/pharmacodynamics studies in Plasmodium-infected mice revealed that albitiazolium is recycled after its accumulation in the infected erythrocyte leading to increased plasma levels.

Objectif: Malgré l'intensification du régime de chimiothérapies, la survie de 5 ans des patients atteints d'ostéosarcome métastatique ou récidivant (OsA) reste faible. Le facteur netrin 1 (NTN1) est surexprimé dans de nombreux cancers humains en tant que facteur de survie. Nous avons étudié ici le rôle de l'anticorprs anti NTN1 (Ac aNTN1) dans l'ostéosarcome.Design expérimental : L'expression NTN1 a été quantifiée par RT qPCR à partir d'une cohorte OsA humaine (n = 22). L'efficacité antitumoral et anti-métastatique de l’Ac aNTN1 seul ou combiné à la doxorubicine a été analysée selon un modèle d'OsA de rat orthotopique et métastatique récidivant. Les effets du traitement sur le microenvironnement tumoral ont été effectués par des analyses immuno-histologiques.Résultats: L'ARNm de la NTN1 est fortement exprimé dans les échantillons OsA humains et dans le modèle OsA de rat. Le traitement combiné (Dox + Ac aNTN1) a été capable de réduire la progression de la tumeur, prévient la dissémination tumorale et retarde la rechute d'OsA. La Dox + Ac aNTN1 diminue l'infiltration des LT effecteurs et inhibe la migration des macrophages M2 au centre de l'OsA de rat.Conclusion: Le blocage de la NTN1 potentialise l'efficacité de la chimiothérapie chez les modèles OsA de rat par des modifications dans le microenvironnement tumoral / Purpose: Despite the intensification of chemotherapies regimen, 5 years survival for patients with metastatic or relapsed osteosarcoma (OsA) remains poor. The secreted factor netrin 1 (NTN1) is overexpressed in many human cancers as a survival factor. We investigated here the role of anti NTN1 Ab in osteosarcoma. Experimental design: NTN1 expression was quantified by RT qPCR from human OsA cohort (n = 22). Anti-tumoral and anti-metastatic efficiency of anti NTN1 antibody alone or combined with doxorubicin was analyzed on a progressive and on a relapsed orthotopic and metastatic rat OsA model. Treatment effects on tumor microenvironment were performed by immuno-histological analyzes.Results: NTN1 mRNA is highly expressed in human OsA samples and in rat OsA model. Combined treatment (Dox + aNTN1 Ab) was found able to synergistically to down tumor progression, prevents tumor dissemination, and delays OsA relapse. Dox + aNTN1 Ab decreased T effetors infiltration and inhibited M2 macrophages migration in the center of rat OsA.Conclusion: NTN1 blockade potentiates chemotherapy efficacy in rat OsA models by modifications in tumor microenvironment

L’oncologie actuelle est encore confrontée à la résistance et à la progression rapide des cancers. Les mécanismes de résistance intrinsèque développés par les cellules tumorales peuvent compromettre l’efficacité des chimiothérapies et des immunothérapies. Il est maintenant admis que l’état de la réponse immunitaire de l’hôte détermine en partie l’issue thérapeutique des patients. L’objectif de notre équipe de recherche est donc de caractériser cette réponse et d’étudier l’impact des thérapies conventionnelles sur celle-ci dans le but d’identifier les mécanismes liés à un échappement futur de la tumeur. Dans ce contexte, nous avons montré qu’une chimiothérapie (5-FU, oxaliplatine, anti-VEGF (« Vascular Endothelium Growth Factor » : FOLFOX-bevacizumab) provoque chez certains patients une chute des gMDSC (cellules myéloïdes immunosuppressives granulocytaires) périphériques qui est associée à une meilleure réponse thérapeutique. Comme chez la souris, cet effet sur les gMDSC provoque néanmoins une élévation des Th17, une population pro-angiogénique, qui limite l’efficacité de la chimiothérapie. La suite de notre travail a eu pour objectif de tester l’effet « anti-Th17 » de l’activation de l’histone désacétylase SIRT1. SIRT1 est une enzyme capable de perturber l’acétylation de STAT3, un facteur essentiel à la différenciation des Th17. Nous avons montré que l’utilisation d’agonistes pharmacologiques de SIRT1 (resvératrol, SRT1720, metformine) inhibe la polarisation des Th17 par la désacétylation de STAT3 et que cet effet permet de limiter la croissance tumorale dans un modèle de cancer colique et de mélanome chez la souris (B16F10, CT26). Nous avons validé ce concept chez l’homme, ce qui suggère qu’il est possible de cibler les Th17 par cette stratégie en complément de la chimiothérapie. Le dernier volet de ce travail est consacré à la comparaison du profil immunologique périphérique de volontaires sains à celui d’une cohorte prospective de cancers bronchiques non à petites cellules. Cette étude nous a permis de mettre en lumière les altérations immunitaires induites par la tumeur et de lier ces altérations à la réponse au nivolumab (anti-PD-1). Un premier modèle prédictif de réponse a pu être généré grâce aux données d’un panel d’analyse des cellules myéloïdes. Ce modèle révèle une fois encore que les cellules gMDSC ont un rôle prédictif défavorable, alors que les populations présentatrices d’antigènes (cellules dendritiques et monocytes) exprimant PD-L1 ont un bon rôle prédictif. Les données présentées dans cette partie sont préliminaires et devront être confirmées avec la cohorte de validation qui est en cours d’inclusion. L’ensemble de ce travail a permis de montrer qu’il est essentiel de cibler spécifiquement les cellules myéloïdes immunosuppressives et les Th17 pour favoriser l’efficacité des chimiothérapies et de l’immunothérapie dans le cancer. / Actual oncology is still facing resistance and rapid progression of cancer. Intrinsic resistance mechanisms developed by tumor cells determine chemotherapy and immunotherapy efficacy. It is now recognized that the host immune response status is in part implicated in the therapeutic outcome of patients. The aim of our research team is to characterize this response and to study the impact of therapies in order to identify the mechanisms associated with future exhaust of the tumor. In this context, we have shown that chemotherapy (5-FU, oxaliplatin, anti-VEGF: FOLFOX-bevacizumab) in some patients causes a drop in devices gMDSC (granulocytic myeloid derived suppressive cells) that is associated with better therapeutic response. Nevertheless, as in mice, this effect on gMDSC causes an elevation of Th17, a pro-angiogenic population, which limits the effectiveness of chemotherapy. The result of our work was aimed to test the effect "anti-Th17" activating SIRT1 deacetylase histone. SIRT1 is an enzyme capable of disrupting the acetylation of STAT3, a key factor in the differentiation of Th17. We have shown that by using pharmacological agonists SIRT1 (resveratrol, SRT1720, metformin) inhibits Th17 polarization by deacetylation of STAT3 and that this effect can limit tumor growth in colorectal and melanoma murine models (B16F10, CT26). We validated this concept in humans, suggesting that it is possible to target Th17 cells by this strategy in addition to chemotherapy. The final component of this work is devoted to the comparison of peripheral immunological profile of healthy volunteers to a prospective cohort of non-small cell lung cancer. This study has allowed us to highlight the immune alterations induced by the tumor and to link these changes in response to nivolumab (anti-PD-1). A first response predictive model could be generated using data from a panel analysis of myeloid cells. This model proves once again that gMDSC have a negative predictive role, while antigen presenting (dendritic cells and monocytes) expressing PD-L1 has a good predictive role. Data presented in this section are preliminary and must be confirmed with the validation cohort that is currently included. All of this work has shown that it is essential to specifically target immunosuppressive myeloid cells and Th17 to promote the efficacy of chemotherapy and immunotherapy in cancer.

Les chimiokines (CKs) jouent un rôle important dans l’orchestration de la réponse immunitaireen contrôlant notamment la mobilisation des cellules immunitaires. Les cellules myéloïdes et, enparticulier, les monocytes sont impliquées dans le processus inflammatoire et notamment dansle développement des cancers. En effet, les cellules dérivées des monocytes ou macrophagesassociés aux tumeurs sont fortement représentés dans le micro environnement tumoral et sontsouvent associés à un mauvais pronostic. La caractérisation des mécanismes aboutissant aurecrutement des monocytes dans la tumeur représentent donc un enjeu majeur pourl’optimisation des protocoles thérapeutiques anti-cancéreux. Chez la souris, deux populationsmonocytaires sont caractérisées sur la base de l’expression différentielle des récepteurs auxchimiokines CCR2 et CX3CR1 et interviennent dans leur recrutement et leur différenciation enmacrophages dans les tissus, les monocytes inflammatoires (CCR2+, CX3CR1low) et les monocytesdits résidents (CCR2-, CX3CR1high). L’objectif principal de mon projet de recherche a été de mieuxcomprendre les mécanismes contrôlant la mobilisation des monocytes suite à un traitementchimiothérapeutique. J’ai entrepris d’étudier le rôle des récepteurs aux chimiokines, enparticulier CX3CR1, dans la reconstitution monocytaire après traitement chimiothérapeutiquepar le cyclophosphamide (CP), un agent alkylant reconnu pour son activité myélosuppressive. LeCP provoque un renouvellement des monocytes et une forte infiltration de la tumeur par les LTspécifiques de la tumeur (issus d’un transfert adoptif) associés à la réactivation de la réponseimmune anti-tumorale. Cependant, les LTs spécifiques de l’antigène de la tumeur se localisentpréférentiellement dans des zones riches en cellules dendritiques associées à la tumeur (TuDCs)et sont piégés par ces dernières. Ces interactions diminuent potentiellement le nombre decontacts entre les LT et les cellules tumorales suggérant un rôle pro tumoral des TuDCs. Letraitement au CP provoque une déplétion des cellules myéloïdes suivie d’une reconstitutionmassive des réservoirs de monocytes (moelle osseuse et rate). Au cours de la reconstitutionmonocytaire, l’expression de CX3CR1 diminue et est corrélée à une diminution de l’adhérence exvivo des cellules médullaires. Nous avons mis en évidence une mobilisation accrue desmonocytes inflammatoires au sein des souris CX3CR1- /- comparée aux souris WT et CCR2-/-.L’imagerie in vivo de la moelle osseuse au sein de souris CX3CR1-/- ou à l’aide d’un antagonistede CX3CR1 nous a permis de montrer un rôle spécifique de CX3CR1 dans le « crawling » sur lescellules endothéliales et le confinement des cellules monocytaires au niveau des sinus et duparenchyme médullaire. Nous suggérons qu’au cours de la mobilisation cellulaire induite par leCP le récepteur CX3CR1 contrôle la rétention médullaire des monocytes. Nous pensons que lamodulation du taux de mobilisation cellulaire au cours de la reconstitution induite par CP et/oule ciblage de CX3CR1 pourrait, par augmentation du pool de cellules myéloïdes leucocytairesd’un hôte, contribuer à l’amélioration des réponses cellulaires à la suite d’une lésion tissulaireou d’un dysfonctionnement des défenses immunitaires. De plus, le ciblage de CX3CR1 pourraittrouver des applications dans le domaine de la greffe de HSCs. / Chemokines orchestrate immune response especially by leucocytes mobilization. Myeloidcells, notably monocytes, are involved in inflammation and cancer development. Indeedmonocyte-derived cells and macrophages are strongly represented in tumourmicroenvironment and are associated with a bad prognosis. Characterization of mechanismsleading to monocytes recruitment within the tumor is thus a major issue in anti-cancertherapeutic protocols optimization. Based on the differential expression of chemokinereceptors CCR2 and CX3CR1, two populations of monocytes, inflammatory monocytes(CCR2+, CX3CR1low) and resident monocytes (CCR2-, CX3CR1high) have been characterized inmice which are involved in monocytes recruitment and differentiation into macrophages.The main objective of my work was to better understand the mechanisms of monocytesmobilization following chemotherapeutic treatment. I started to study the role of chemokinereceptors with a focus on CX3CR1 in monocytes reconstitution following cyclophosphamide(CP) treatment. CP is an alkylant agent known for its myelosuppressive properties. Thischemotherapeutic agent induces a transitory anti tumour immune response associated witha monocyte renewal and a strong infiltration of the tumour by adoptively transferred Tlymphocytes. However, antigen-specific T cells are trapped by tumour-associated dendriticcells (TuDCs). This potentially decreases interactions between T lymphocytes and tumourcells suggesting an immunosuppressive role of TuDCs. CP induces a strong depletion ofmyeloid cells followed by a massive reconstitution of bone marrow and spleen monocytesreservoirs. CX3CR1 expression on bone marrow monocytes is decreased duringreconstitution and correlated with a decreasing adhesion of these cells to CX3CL1 ex vivo.We highlighted an increased mobilization of inflammatory monocytes in CX3CR1-/- micecompared to WT and CCR2-/-. Intra vital imaging of bone marrow within CX3CR1-/- mice orwith the help of a CX3CR1 antagonist allowed us to show a specific role of CX3CR1 in thelumen crawling and confinement of monocyte-derived cells in both sinusoid andparenchyma of the bone marrow. We suggest that CX3CR1 controls the release of bonemarrow monocytes during CP-induced mobilization. We think that modulating the rate ofcellular mobilization, by increasing the host’s leukocyte pool during CP inducedreconstitution and/or targeting CX3CR1, could contribute to improve cellular responsefollowing tissue damage or immune cell dysfunction. Furthermore, targeting CX3CR1couldprovide applications in the stem cell transplantation domain.

P53 est mutée dans plus de la moitié des cancers humains et son inactivation est souvent associée à une résistance à la thérapie anti-cancer. Notre équipe a montré que dans le cas de tumeurs où p53 est inactive, la surexpression de la phosphatase Wip1 permettait la restauration de l’efficacité de la chimiothérapie, et une protection des tissus sains face aux effets secondaires du traitement. Afin d’améliorer cette stratégie, deux objectifs principaux ont été étudiés : trouver une protéine qui peut interagir avec la voie de signalisation de Wip1 et potentialiser son action dans cette stratégie thérapeutique, et trouver des molécules chimiques pouvant activer Wip1. Nous avons réalisé un criblage d’interférence à ARN de l’intégralité du kinome humain afin d’identifier plusieurs kinases, dont l’inhibition potentialise l’action anti-tumorale de Wip1. Cela a ainsi mis en évidence l’action de Wee1 et Hipk2, dont des inhibiteurs existent, sur la voie de signalisation de Wip1. Inhiber Wee1 avec une faible dose de MK-1775, un inhibiteur spécifique de cette kinase, a permis de réduire la concentration efficace de cisplatine, en entraînant une apoptose caspase-3-dépendante. De plus, combiner MK-1775 avec la surexpression de Wip1 n’a pas d’impact sur l’effet protecteur de cette phosphatase envers les tissus sains. Nous avons ensuite montré que le Vorinostat, un inhibiteur des histone-déacétylases, permettait une augmentation de la transcription de Wip1 dans des cellules de cancer du sein mutées pour p53. Ce travail de thèse a permis de mettre en évidence un moyen de potentialiser la stratégie de traitement des tumeurs p53-négatives basée sur la phosphatase Wip1. / P53 is mutated in more than half of human cancers and when inactivated is often associated with a resistance to anti-cancer therapy. Our team has hown that in the case of p53-negative tumors, overexpression of Wip1 phosphatase sensitizes tumor cells to chemotherapy, while protecting normal tissues from the side effects of the treatment. To improve this strategy, two main objectives were studied. Firstly, to find a protein which can interact with Wip1 pathway and potentiate its action in this therapeutic strategy. Secondly, to find a molecule which can activate Wip1. We realized a siRNA screening of the whole human kinome to identify several kinases, whose inhibition could potentiate anti-tumoral action of Wip1. We have shown that Wee1 and Hipk2, which both have available inhibitors, have an action on Wip1 pathway. Inhibiting Wee1 with a low dose of MK-1775, a specific inhibitor of this kinase, allowed us to decrease effective cisplatin concentration, inducing a caspase-3-dependent apoptosis. Moreover, the combination of MK-1775 with Wip1 overexpression does not impair the protective effect that this phosphatase provides towards normal tissues. We then showed that the Vorinostat, an HDAC inhibitor, induces an increase in Wip1 transcription in breast cancer cells with inactive p53. This work uncovered a way to potentiate the Wip1-based therapeutic strategy of p53-negative tumors.