CUNHA FILHO, José Ferreira da. L-alanil-glutamina e seus efeitos sobre o estresse oxidativo : o controle glicêmico e a resposta inflamatória em crianças submetidas à palatoplastia. 2007. 123 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2007. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-02-28T12:23:08Z No. of bitstreams: 1 2007_dis_jfcunhafilho.pdf: 1249472 bytes, checksum: 94c3ffa2d902f69e15ce5dd40c977519 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-02-28T12:23:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_dis_jfcunhafilho.pdf: 1249472 bytes, checksum: 94c3ffa2d902f69e15ce5dd40c977519 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-28T12:23:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_dis_jfcunhafilho.pdf: 1249472 bytes, checksum: 94c3ffa2d902f69e15ce5dd40c977519 (MD5) Previous issue date: 2007 / The palatoplasty is the surgical procedure aimed at closing the communication of the nasal and oral cavities, not resulting from the processes palatins embryonic closing at the time of formation of the face. The objective of this study was to evaluate the effect of L-alanyl-glutamine on the oxidative stress, the glycemic control and inflammatory response in cleft palate and lip patients, submitted to palatoplasty. The study was prospective, single blind, randomized, placebo-controlled, and is comprised of 30 (thirty) male children in the age group between 02 and 10 years of age, divided into 02 groups: Group A-Control, n = 15 , which were administered to each child 100ml of saline solution to 0.9% and Group B- L-alanyl-glutamine, n = 15, which were administered to each child a solution of 100ml with L-alanyl-glutamine to 20 %, 0.5 g / kg / dose (Dipeptiven ®) and saline solution to 0.9%. The Research Project was submitted to the Committee of Ethics in Research of Hospital Infantil Albert Sabin being approved under the registry No 51/06 of May 29, 2006. It was picked peripheral venous blood, at 05 times different: T1- 03 hours prior to the surgical procedure; T2- after administration of the solution (before the surgical procedure), T3- after the surgical procedure, T4- 06 hours post-operative and T5- 12 hours post-operative. The concentrations were determined of: glutathione, Tiobarbituric Acid of Reactivates substances (TBARS), glucose, insulin, C-reactive protein (CRP), interleukin-6 (IL-6) and interleukin-10 (IL-10) . Comparisons between groups Control and L-alanyl-glutamine were made using the t test for not paired variables ( parametric data) or the U test of Mann-Whitney ( not parametric data), and is regarded as statistically significant P value < 0.05. For the parameters evaluated in weight and age, no statistically significant differences were found between groups. In all the times studied, there were no statistically significant differences in glucose, insulin, TBARS, glutathione, IL-6 and IL-10, there was an increase in T4 [(Grupo A - 20,472 [11,637-27,780] versus T1 0,0 [0,0-2,226] p<0,05; T2 0,0 [0,0-2,140] p<0.01 e T3 0,625 [0,0-2,153] p<0.01) (Grupo B – 19,317 [11,670-24,048] versus T1 1,888 [0,559-5,295] p<0,05; T2 0,0 [0,0-1,316] p<0,001 e T3 0,0 [0,0-2,757] p<0,05)] and T5[(Grupo A – 22,129 [9,721-33,225] versus T1 0,0 [0,0-2,226]p<0,01; T2 0,0 [0,0-2,140] p<0,001; T3 0,625 [0,0-2,153]p<0,001) (Grupo B – 22,177 [11,157-33,407] versus T1 1,888 [0,559-5,295]p<0,01; T2 0,0 [0,0-1,316]p<0,001; T3 0,0 [0,0-2,757]p<0,01), of the IL-6, regarding times T1, T2 and T3, for the two groups. In assessing the CRP, children of the L-alanyi-glutamine group, compared to patients in the group Control showed a significant reduction, in T5 (3,6 [3,160-5,05] versus 8,4 [4,1-11,9]) (p=0.0037). In conclusion, significant reduction in the dosage of CRP, 12 hours after the surgical procedure in children who received L-alanyl - glutamine, reflects lower inflammatory response. / A palatoplastia é o procedimento cirúrgico que visa o fechamento da comunicação das cavidades nasal e oral, resultante do não fechamento dos processos palatinos embrionários, na época de formação da face. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da L-alanil-glutamina sobre o estresse oxidativo, o controle glicêmico e a resposta inflamatória em pacientes portadores de fissuras lábio-palatais, submetidos à palatoplastia. O estudo foi prospectivo, simples cego, randomizado e controlado por placebo, sendo constituído por 30 (trinta) crianças do sexo masculino, na faixa etária entre 02 e 10 anos de idade, distribuídos em 02 grupos: Grupo A - Controle, n = 15, em que foi administrado a cada criança 100ml de soro fisiológico a 0,9% e Grupo B – L-alanil-glutamina, n = 15, em que foi administrada a cada criança uma solução de 100ml com L-alanil-glutamina à 20%, 0,5g/kg/dose (Dipeptiven®) e Soro Fisiológico a 0,9%. O Projeto de Pesquisa foi submetido ao Comitê de Ética em Pesquisa do Hospital Infantil Albert Sabin sendo aprovado sob o registro Nº 51/06 de 29 de maio de 2006. Foi colhido sangue venoso periférico, em 05 tempos diferentes: T1- 03 horas antes do procedimento cirúrgico; T2- após a administração da solução (antes do procedimento cirúrgico); T3- após o procedimento cirúrgico; T4- 06 horas de pós-operatório e T5- 12 horas de pós-operatório. Foram determinadas as concentrações de: glutationa, Substâncias Reativas do Ácido Tiobarbitúrico(TBARS), glicose, insulina, proteína C reativa (PCR), interleucina-6 (IL-6) e interleucina-10 (IL-10). Comparações entre os grupos Controle e L-alanil-glutamina foram feitas mediante o uso do teste t para variáveis não emparelhadas (dados paramétricos) ou do teste U de Mann-Whitney (dados não paramétricos), sendo considerado como estatisticamente significante um valor P < 0,05. Para os parâmetros avaliados de peso e idade, não foram constatadas diferenças estatisticamente significantes entre os grupos. Em todos os tempos estudados, entre os grupos, não foram verificadas diferenças estatisticamente significantes para glicose, insulina, TBARS, glutationa, IL-6 e IL-10. Houve um aumento, no T4 [(Grupo A - 20,472 [11,637-27,780] versus T1 0,0 [0,0-2,226] p<0,05; T2 0,0 [0,0-2,140] p<0.01 e T3 0,625 [0,0-2,153] p<0.01) (Grupo B – 19,317 [11,670-24,048] versus T1 1,888 [0,559-5,295] p<0,05; T2 0,0 [0,0-1,316] p<0,001 e T3 0,0 [0,0-2,757] p<0,05)] e no T5 [(Grupo A – 22,129 [9,721-33,225] versus T1 0,0 [0,0-2,226]p<0,01; T2 0,0 [0,0-2,140] p<0,001; T3 0,625 [0,0-2,153]p<0,001) (Grupo B – 22,177 [11,157-33,407] versus T1 1,888 [0,559-5,295]p<0,01; T2 0,0 [0,0-1,316]p<0,001; T3 0,0 [0,0-2,757]p<0,01)], da IL-6 em relação aos tempos T1, T2 e T3, em ambos os Grupos. A infusão de L-alanil-glutamina, no grupo B, induziu queda significante nas concentrações de PCR quando comparadas às do grupo Controle, no T5 (3,6 [3,160-5,05] versus 8,4 [4,1-11,9]) (p=0,0037). Como conclusão, redução significante na dosagem da PCR, 12 horas após o procedimento cirúrgico, em crianças recipientes de L-alanil-glutamina, reflete menor resposta inflamatória.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-10-13T04:07:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334859.pdf: 1237565 bytes, checksum: 2a4b58684807e6764131b33a58094409 (MD5) Previous issue date: 2015 / A doença de Parkison (DP) é uma doença progressiva crônico-degenerativa, considerada a segunda mais prevalente na população idosa. É caracterizada clinicamente por sintomas motores como tremor, rigidez, bradicinesia e instabilidade postural; e patologicamente pela perda de neurônios dopaminérgicos da substância nigra, redução da produção de dopamina, severo processo inflamatório e presença de corpos de Lewy. Embora a DP tenha sido considerada tradicionalmente por afetar indivíduos com idade superior a 50 anos, os sintomas também podem manifestar-se em pessoas com idade inferior aos 21 anos, sendo neste caso denominada de Parkinsonismo juvenil. Este tipo em especial ocorre esporadicamente ou como afecção hereditária autossômica associada com uma mutação no gene PARK2. Neste cenário o presente estudo teve como objetivo analisar a contribuição da neuroinflamação na fisiopatologia da doença de Parkinson juvenil em modelo genético por deleção do gene PARK2. Para este fim, camundongos C57BL/6 nocaute para PARK2 tiveram o estado neuroinflamatório induzido pela administração intraperitoneal de lipopolissacarídeo bacteriano (LPS; 0,33 mg/kg). Quatro horas após a administração os animais realizaram testes comportamentais em campo aberto e interação social. Logo após os animais foram eutanasiados e o estriado foi coletado para posteriores análises.Nossos resultados mostram que o genótipo promove alteração cognitiva somente no parâmetro de memória social. No entanto, a administração aguda de LPS compromete a atividade locomotora e reduz a quantidade e a intensidade das visitas no teste de interação social. Ainda, o genótipo e a administração do LPS modulou a expressão gênica de importantes genes relacionados à síntese de BH4, ao metabolismo mitocondrial e plasticidade cerebral. Além disso, promoveu alterações morfológicas como aumento do número, redução da área e relocalização subcelular na distância das mitocôndrias em relação à membrana nuclear. A análise conjunta dos dados nos permite concluir que a deleção do gene PARK2 promove maior susceptibilidade ao desenvolvimento dos danos causados pela resposta inflamatória, além de promover importantes alterações morfológicas, bioquímicas e moleculares, as quais poderiam contribuir para fisiopatologia do Parkinsonismo juvenil.<br> / Abstract : Parkinson Disease (PD) is a chronic degenerative disease considered the second most prevalent in the elderly population. It is clinically characterized by motor symptoms such as tremor, rigidity, bradykinesia and postural instability; and pathologically by loss of dopaminergic neurons of the substantia nigra, reduction of the dopamine production, severe inflammation and presence of Lewy bodies. Although, PD has been considered to affect individuals with age above 50 years, the symptoms may manifest in people under the age of 21 years, being in this case called 'juvenile Parkinsonism. Juvenile PD occurs sporadically or as autosomal hereditary condition associated with a mutation on the gene PARK2. In this scenario, this study had as objective to analyze the contribution of the neuroinflammation in the pathophysiology of the juvenile PD in the genetic model with deletion of the PARK2 gene. For this, C57BL/6 and knockout for PARK2 mice had the neuroinflammatory state induced by intraperitoneal administration of bacterial lipopolysaccharide (LPS; 0.33 mg/kg). Four hours after the administration the animals were submitted to the behavioral tests namely, open field and social interaction. Afterwards, the animals were perfused for striatal collection to perform morphological and molecular analyzes. Our results showed that the genotype promotes cognitive impairment only in the social interaction paradigm. However, the acute administration of LPS compromised locomotor activity and reduced the number and intensity of the visits in the social interaction test. Still, the genotype and the administration of LPS modulated gene expression of important genes related to the synthesis of BH4, mitochondrial metabolism and brain plasticity. Moreover, the treatment and genotype promoted morphological mitochondrial alterations including, reduction of the area and subcellular relocation of mitochondria. In addition, the distance of mitochondria respect to the nuclear membrane was also reduced. Altogether, this work allows us to conclude that the deletion of PARK2 in addition to the inflammatory state promotes greater susceptibility for neurogeneration, mainly due to mitochondrial adaptations and reduced BH4 pathway flow, which could contribute to the pathophysiology of juvenile PD.

Made available in DSpace on 2016-02-26T13:34:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 luciana_leo_ioc_mest_2015.pdf: 2510426 bytes, checksum: 7967d9273680443d5c735d2b5543fee6 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / O papel da lipoxina A4 (LXA4) no sistema imunológico é bem estudado, mas o papel dessa molécula na fisiologia do sistema nervoso central (SNC) só foi abordado recentemente. Como um modulador alostérico positivo, a LXA4 produz efeitos canabimiméticos e pode, dessa forma, estar envolvida em vários aspectos de funções fisiológicas reguladas pelo sistema endocanabinóide (eCB). Nós investigamos essa hipótese analisando o comportamento de camundongos knockout (5-LO-/-) para a enzima 5-lipoxigenase (5-LO), que participa da síntese de LXA4. Ansiedade, consumo de água e alimento, locomoção, nocicepção e memórias aversivas são comportamentos reconhecidos como sob controle do sistema eCB e foram avaliados neste estudo. Nenhuma alteração foi observada no comportamento de 5-LO-/- em relação ao consumo de água e alimento e locomoção no teste de campo aberto. No entanto, o tratamento com LXA4 produziu efeito ansiolítico no labirinto em cruz elevada. Além disso, inibição farmacológica da 5- LO demonstrou um efeito ansiogênico em animais idosos, mas não em adultos jovens, indicando que a LXA4 endógena exerce um efeito regulatório sobre ansiedade de forma idade-dependente. Os animais 5-LO-/- apresentaram um aumento na sensibilidade e redução na tolerância à dor no teste de sensibilidade ao choque. Ainda, uma disfunção em memória de curto prazo e extinção de memória no teste de esquiva inibitória foi observada nos animais 5-LO-/-, indicando que a LXA4 pode agir na facilitação do aprendizado. Esse dado é de grande importância para o possível uso da LXA4 como tratamento do dano cognitivo decorrente de neuroinflamação O estudo da sepse nos revela que um estímulo inflamatório pode gerar produção exacerbada de moléculas pró-inflamatórias no SNC, o que causa neuroinflamação e disfunção cognitiva. A LXA4 é uma boa candidata como alvo de terapia para o dano cognitivo decorrente de neuroinflamação, uma vez que tem potencial anti-inflamatório e neuroprotetor por ação em receptores ALX e CB1, respectivamente. Neste estudo foi possível observar queda na produção de citocinas pró-inflamatórias no plasma e no cérebro de camundongos com inflamação sistêmica induzida por lipopolissacarídeo (LPS) mediante tratamento com LXA4. Além disso, o dano cognitivo observado sobre consolidação de memória neste modelo de sepse foi prevenido após tratamento com LXA4. Os dados apresentados neste estudo apontam funções do SNC sujeitas a modulação pela disponibilidade de LXA4 endógena e um efeito benéfico do tratamento da LXA4 no resgate de dano cognitivo decorrente de neuroinflamação. Apresentamos evidências que contribuem para o esclarecimento do papel fisiológico da LXA4 no SNC e para o seu potencial no tratamento de patologias inflamatórias que atingem o encéfalo / The role of lipoxin A 4 (LXA 4 ) in the immune system is well studied, however the part this molecule play s in central nervous system (CNS) physiology has only recently been addressed. LXA 4 , as a CB1 allosteric enhancer, has a cannabimimetic effect and may therefore be involved in various aspects of endocannabinoid system (eCB) physiological functions. We investigated this reasoning by analyzing the behavior of 5 - lipoxygenase ( 5 - LO ) knockout mice (5 - LO - / - ) . A nxiety - like behavior, a ppetitive behavior, locomotion, nociception and learning and memory are all known to be under control of the eCB system and were assessed in this study. No alteration was observed in the behavior of 5 - LO knockout mi ce regarding appetitive behavior, measured by food and water intake, or locomotion in the open field test. However, treatment with LXA 4 produced an anxiolytic - like effect on the elevated plus maze. Further, pharmacological inhibition of 5 - LO showed a n anxi ogenic - like effect in aged, but not adult mice, indicating that endogenous LXA 4 has an age - dependent effect on the modulation of anxiety - like behavior. 5 - LO - / - mice presented an increase in pain sensitivity and a decrease in pain tolerance in the foot shoc k sensitivity test. Interestingly, the animals also presented impairment in short - term memory and extinction learning in the step - down inhibitory avoidance task, pointing out that LXA 4 may act in the facilitation of fear learning. These data are of great i mportance to the possible use of LXA 4 as treatment to neuroinflammation induced cognitive impairment. The study of sepsis reveals that an inflammatory stimulus can induce the exacerbated production of pro - inflammatory cytokines in the CNS, which causes neu roinflammation and cognitive impairment. LXA 4 is a good candidate as target in the treatment of neuroinflammation induced cognitive impairment, since it has anti - inflammatory and neuroprotection potential due to its action on ALX and CB1 receptors, respect ively. In this study, we observed a decrease in the production of pro - inflammatory cytokines in plasma and brain of mice with induced systemic inflammation by lipopolysaccharide (LPS) injection due to treatment with LXA 4 . Moreover, the memory consolidation impairment observed in this sepsis animal model was prevented following LXA 4 treatment. The data presented in this study point out CNS functions subjected to modulation by endogenous LXA 4 availability and a beneficial effect of LXA 4 tr eatment on neuroinflammation induced cognitive impairment. We present evidence that contributes to the understanding of the physiological role of LXA4 in the CNS and its potential in the treatment of inflammatory pathologies that affect the brain

Made available in DSpace on 2016-02-26T13:34:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 sally_liechocki_ioc_mest_2013.pdf: 1475025 bytes, checksum: 2a646a61990f5049a1fdef8e661f2fae (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O tecido adiposo desempenha papel fundamental na regulação do balanço energético e na modulação do sistema imune. A obesidade, caracterizada pelo excesso de tecido adiposo, é uma doença de caráter inflamatório crônico e que prejudica esses dois sistemas. Considera-se que depósitos de tecido adiposo distintos respondem de maneira diferente a estímulos lipolíticos, adipocinas e a mediadores lipídicos. Neste trabalho, investigamos o perfil plasmático de mediadores inflamatórios de pacientes obesos (OB), ex-obesos (Ex-OB) e voluntários sadios e as características de três depósitos de tecido adiposo humano: subcutâneo (SC), pré-peritoneal (PP) e visceral (VC) em obesos e ex-obesos. Na análise dos níveis plasmáticos de insulina e leptina, observamos que o grupo de pacientes obesos (OB) apresentou níveis mais elevados de ambos os hormônios quando comparados a indivíduos com IMC normal e que após redução ponderal, tal medida foi normalizada. Além disso, em relação a mediadores inflamatórios, ao compararmos indivíduos obesos e controle, observamos diferenças significativas nos níveis de leptina, resistina, monocyte chemotatic protein 1 (MCP-1) e plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1). Não obstante os níveis de leptina do grupo obeso tenham sido similares aos descritos na literatura, as últimas três adipocinas apresentaram maiores níveis no grupo controle, sugerindo que a amostra de indivíduos obesos estudados apresenta um perfil inflamatório reduzido. As outras citocinas avaliadas (IL-1b, IL-6, IL-8, TNF-\03B1, adiponectina e TGF-\03B2) se encontraram no mesmo nível dos voluntários não obesos. Em seguida, amostras de tecido adiposo humano de indivíduos obesos foram obtidas durante cirurgia de gastroplastia Neste trabalho evidenciamos a diferença macroscópica entre os diferentes depósitos de tecido adiposo. Além disso, as amostras de tecido adiposo de 3 pacientes obesos não diabéticos (ND) e 1 paciente obeso diabético (D) foram submetidas à extração de RNA para análise de genes associados à inflamação e metabolismo lipídico por ensaio de PCR em tempo real. Nos pacientes ND a expressão do gene perilipina (PLIN1) foi maior no tecido VC quando comparado aos tecidos SC e PP. A expressão de PLIN2, ACAT1, FABP4, LEPR foi similar em todos os tecidos destes pacientes analisados. De maneira interessante, foi possível observar que todos os genes avaliados, apresentaram expressão mais alta nos três tecidos do paciente obeso diabético em comparação às amostras de tecido de indivíduos obesos não diabéticos. Avaliamos também os níveis das proteínas adiponectina, perilipina e PPAR-\03B3 nas três amostras de tecido adiposo, através de Western Blot. Nossos resultados mostraram que não há diferenças entre os três depósitos de tecido adiposo em paciente obeso e ex-obeso em relação às proteínas avaliadas. Observamos ainda que em amostras de tecido adiposo de pacientes obesos há variações entre os depósitos distintos de tecido adiposo quanto ao conteúdo de lipídios neutros e que tal variação pode ter caráter individual. Juntos, nossos resultados mostram que os distintos depósitos de tecido adiposo possuem variações metabólicas que, consequentemente, podem contribuir de maneira diferente às alterações moleculares presentes durante a obesidade / A dipose tissue plays a fundamental role in regulation of energy balance and im m une system modulation. Obesity is a chronic inflammatory disease characterized by excess of adipose tissue, with impairment in both systems . It is considered that distinct depots of adipose tissue respond differently to lipolytic stimulu s , adipokines and lipid mediators secretion. Here we investigated the plasma cytokines of obese patients, ex - obese patients and healthy individuals (CT) as well the characteristics of distinct depots of human adipose tissue: subcutaneous (SC), preperitoneal (PP) and visceral (VC) of obese and ex - obese patient s . In the analysis of plasmatic insulin and leptin levels, we observed that the obese group (OB) presented higher levels of both hormones when compared with normal IMC subjects; we also observed that after weight loss these hormone levels were normalized. Furthermore, in relation to inflammatory mediators, when OB and CT were compared , we saw meaning differences in leptin, resistin, monocyte chemotatic protein 1 (MCP - 1) e plasminogen activator inhibitor 1 (PAI - 1) levels. Although the leptin levels were similar to those reported in literature, the last three adipokines presented higher levels in control group, suggesting that the obese sample s presented a reduced inflammatory profile. The other cytokines (IL - 1b, IL - 6, IL - 8T NF - α , a diponectin and TGF - β ) maintained the same level than the healthy donnors. Thereafter, samples of human depots adipose tissues of obese patient were obtained during bariatric surgery. Here we evidence the macroscopic differences between distinct depots of adipose tissue. Fu r thermore samples of 3 non - diabetic obese and 1 diabetic obese patient s were submitted to RNA extraction for analysis of inflammatory and lipid metabolism related gene expression by qPCR assay . In non - diabetic obese patients, pe rilipin ( PLIN1 ) expression was higher in VC when compared to SC and PP adipose tissue . PLIN2, ACAT1, FABP4, LEPR expression remained similar in all fat tissues analysed. Moreover it is interesting to note that gene expression of adipose tissue from diabeti c obese patient wa s higher than non - diabetic obese patient gene expression . We also evaluated adiponectin, perilipina and PPAR - γ proteins levels of these 3 adipose tissue samples, by western blot assay. Our results show no differences between ex - obese and obese distinct depots of adipose tissue. Furthermore in obese adipose tissue samples there are variations between distinct depots of adipose tissue in relation to neutral lipids content suggesting that such variatio n may have individual character. Taken together our results demonstrated that distinct depots of adipose t issue have metabolic variations that could contribute in a different manner to molecular alterations during obesity

Made available in DSpace on 2016-04-04T12:45:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 victor_solorzano_ioc_mest_2014.pdf: 3199066 bytes, checksum: 5a50f9918959a0ee0f9a1c603688f5d5 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A dengue se tornou a arbovirose mais difundida no mundo, atingindo mais de 100 países. O sorotipo DENV-4 foi reintroduzido no Brasil em 2010, se espalhou para as diferentes regiões brasileiras sendo responsável por uma das maiores epidemias de dengue relatadas no país em 2013. O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil clínico-laboratorial, citocinas/quimiocinas inflamatórias e mediadores da coagulação em pacientes infectados pelo DENV durante esta epidemia. Para isto, foram avaliados 265 casos confirmados de dengue atendidos nos centros de saúde dos estados do RJ e MS no ano de 2013. Os pacientes foram classificados de acordo com a nova classificação da OMS, 2009 nos grupos: 158 (70,2%) dengue sem sinais de alarme (DSSA), 65 (28,9%) dengue com sinais de alarme (DCSA) e 2 (0,9%) dengue grave. Os sinais de alarme mais frequentes foram dor abdominal persistente (61,5%) e sangramento de mucosas (32,3%). O DENV-4 foi o sorotipo de maior incidência e 85,2% dos pacientes apresentaram infecção secundária. Pacientes DCSA/DG apresentaram baixa contagem de leucócitos totais, de plaquetas e altos níveis séricos de AST/TGO e ALT/TGP quando comparados aos pacientes DSSA e aqueles ODF (outras doenças febris). A quantificação dos mediadores inflamatórios por ensaios imunoenzimáticos indicou: (i) níveis aumentados de citocinas (TNF-\03B1, IL- 6 e IL-10) e quimiocinas (IL-8/CXCL8, IP-10/CXCL10 e MCP-1/CCL2) nos pacientes DSSA e DCSA/DG quando comparados com o grupo controle; (ii) níveis aumentados de IL-10 e IL-6 nos pacientes DCSA/DG enquanto que IL-8/CXCL8 foi maior nos pacientes DSSA Em relação aos parâmetros de coagulação: (iii) Os pacientes DSSA e DCSA/DG apresentaram menores níveis do fator tecidual (TF) e maiores níveis do inibidor fisiológico da via do TF (TFPI) quando comparados com o grupo controle; (iv) Baixos níveis de fibrinogênio foram encontrados nos pacientes DCSA/DG e níveis elevados de trombomodulina foram encontrados nos pacientes entre 4-7 dias de doença. As análises de correlação demonstraram correlação inversa entre os níveis circulantes de IP-10/CXCL10 e IL-10 com a contagem de plaquetas e leucócitos totais e correlação positiva com níveis séricos de AST/TGO. Além disso, IL-10 foi associada diretamente com relação albumina/globulina. As análises de correlação demonstraram que os níveis de TF estavam diretamente correlacionados com os níveis do TFPI, que por sua vez foi associado inversamente com a contagem de plaquetas. Estes resultados sugerem mecanismos de regulação da cascata da coagulação durante a infecção pelo DENV. Apesar dos altos níveis circulantes de IL-10 encontrados nos pacientes DCSA/DG, a análise da curva sob a área ROC não encontrou bom valor preditivo na discriminação entre DSSA e DCSA/DG e, portanto a IL-10 não se mostrou adequada para o uso como um biomarcador nesta população / Dengue has become the most widespread arbovirus in the world, reaching more th an 100 countries. The DENV - 4 serotype was reintroduced in Brazil in 2010, and spread to the different Brazilian regions being responsible for one of the largest epidemics of dengue reported in the country in 2013 . The objective of this study was to evaluat e the clinical and laboratory profile, and inflammatory cytokines /chemokines and coagulation mediators in patients infected with DENV during this epidemic. For this, were evaluated 265 confirmed cases of dengue attended at health centers in the states of R J and MS in the year 2013. P atients were classified according to the new WHO classification, 2009 in groups: 158 (70.2%) de ngue without warning signs (DwoWS ), 65 (28.9%) dengu e with warning signs (DwWS ) and 2 (0.9%) severe dengue (SD) . The most frequent w a rning signals were persistent abdominal pain (61.5%) and mucosa l bleeding (32.3%). The DENV - 4 was the most prevalent serotype and 85,2% of dengue patients showed secondary infection . DwWS/SD patients showed low er white blood cell and platele t count s , and h igher AST and ALT serum levels compared to DwoWS and other febrile illnesses patients. Quantification of inflammatory mediators by immunoassays indicated : (i) i ncreased levels of cytokines ( TNF - α , IL - 6 and IL - 10 ) and chemokines ( IL - 8/CXCL8, IP - 10/CXCL10 an d MCP - 1/CCL2 ) in DwoWS and DwWS patients compared with healthy individuals ; ( ii) increased levels of IL - 10 and IL - 6 in DwWS/SD patients while IL - 8/CXCL8 was increased in DSSA patients; In respect to coagulation parameters: (iii ) DwoWS and DwWS/SD patients showed lower levels of sTF and higher of TFPI compared with the control group; ( i v) Low er levels of fibrinogen were found in DwWS/SD patients and high er levels of thrombomodulin in patie nts between 4 - 7 days of illness; Correlation analysis showed an invers e correlation between circulating levels of IP - 10/CXCL10 and IL - 10 with the total amount of platelets and leukocytes and positive correlat ion with serum levels of AST . Furthermore, IL - 10 was directly a ssociated with albumin/ globulin ratio. Corre lation anal ysis showed that TF levels were directly correlated with TFPI l evels, which in turn was inversely related with platelets counts . These results suggest mechanisms involving regulation of the coagulation cascade during DENV infection. Despite high er circulat ing levels of IL - 10 found in DwWS/SD patients, analysis of the area under the ROC curve, did not showed a good predictive value in discriminating those who were likely to develop DwWS/SD and therefore IL - 10 was not suitable for use as a biomarker in this p opulation.

RIVANOR, R. L. C. Efeitos antinociceptivo e anti-inflamatório da lectina da alga marinha verde Caulerpa cupressoides no modelo de artrite induzida por zymosan na articulação temporomandibular de ratos. 2014. 103 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2015-01-09T17:42:09Z No. of bitstreams: 2 2014_dis_rlcrivanor.pdf: 3830723 bytes, checksum: 7382b3d5ec675e6b8b188b843e6479a8 (MD5) 2014_dis_rlcrivanor.pdf: 3830723 bytes, checksum: 7382b3d5ec675e6b8b188b843e6479a8 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-11-30T19:05:25Z (GMT) No. of bitstreams: 2 2014_dis_rlcrivanor.pdf: 3830723 bytes, checksum: 7382b3d5ec675e6b8b188b843e6479a8 (MD5) 2014_dis_rlcrivanor.pdf: 3830723 bytes, checksum: 7382b3d5ec675e6b8b188b843e6479a8 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-30T19:05:25Z (GMT). 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Control groups received saline (40 μL; i.art.), indomethacin (5 mg/kg, s.c.) or morphine (5 mg/kg, s.c.). Groups of animals received CcL (10 mg/kg; i.v.) associated with mucin (8 mg/kg; i.v.), a sugar inhibitor, and another group received only mucin before stimulus. To analyze the involvement of HO-1 pathway in arthritis, animals were pretreated (3 mg/kg, s.c.) with a specific inhibitor of heme (zinc protoporphyrin IX-ZnPP IX). Finally, to evaluate the analgesic effect of CcL in the activation of the opioid system, group of animals received an injection i.art. (10 μg/art.; 15 µL) of the opioid receptor antagonist (naloxone), 35 min before injection of Zy. After 5 min, the animals were pretreated with CcL (10 mg/kg). Mechanical hypernociception was recorded before the i.art. injections of Zy or saline and after 4h. After 6 hour, the synovial fluid was collected to perform cell counting and myeloperoxidase (MPO) assay. Also, TMJ tissues were excised to perform histopathological, immunohistochemistry (TNF-α, IL-1β e HO-1) and cytokine assays (IL-1β) in the periarticular tissue and trigeminal ganglion. Pretreatment with CcL (0.1, 1 or 10 mg/kg; i.v.) inhibited (p<0.05) the nociceptive response (81, 83, and 89.5%, respectively) and reduced the influx of leukocytes (77.3, 80.7 and 98.5%, respectively) compared to Zy group, as demonstrated by MPO activity. Sugar inhibitor (mucin) did not inhibit the anti-inflammatory and antinociceptive effect of CcL in arthritis induced by Zy. We observed that during the histological analysis of ATM, animals treated with CcL showed a significant reduction of cell influx in the synovial membrane. Furthermore, CcL significantly reduced the production of IL-1β in the periarticular tissue and expression of IL-1β, TNF-α and HO-1 in the synovial membrane during immunohistochemistry assay. Treatment with ZnPP IX was not able to inhibit the effect CcL, indicating that its antinociceptive and anti-inflammatory action did not occur HO-1 pathway. In addition, treatment with naloxone did not reverse the effect of CcL. Therefore, CcL showed antinociceptive and anti-inflammatory effect on model of Zy-induced arthritis, reducing the production of primary cytokines (TNF-α and IL-1β), however its antinociceptive action did not occur by peripheral opioid mechanism. / As algas marinhas são fontes de compostos bioativos para a indústria farmacêutica e dentre esses compostos destacamos as lectinas. O presente trabalho teve como objetivo investigar os efeitos antinociceptivo e anti-inflamatório da lectina da alga marinha verde Caulerpa cupressoides (LCc) no modelo de artrite induzida por zymosan (Zy) na articulação temporomandibular (ATM) de ratos. LCc foi extraída com tampão Tris-HCl 25 mM, pH 7,5 e isolada por cromatografia de troca iônica em coluna de DEAE-celulose. Nos ensaios de artrite induzida por Zy, ratos Wistar machos receberam LCc (0,1; 1 ou 10 mg/kg; i.v.) ou salina estéril, 30 min antes da injeção intra-articular (i.art.) de Zy (2 mg/art., 40 µL) na ATM esquerda. Grupos controles receberam salina estéril (40 µL; i.art.), indometacina (5 mg/kg; s.c) ou morfina (5 mg/kg, s.c.). Grupos de animais receberam LCc (10 mg/kg, i.v.) associada à mucina (100 mg/kg, i.v.), um açúcar inibidor, e outro grupo recebeu somente mucina antes dos estímulos. Para analisar o envolvimento da via da HO-1 na artrite, os animais foram pré-tratados (3 mg/kg, s.c.) com um inibidor específico do grupo heme (zinco protoporfirina IX – ZnPP IX). Finalmente, para avaliar se o efeito antinociceptivo de LCc estava envolvido na ativação do sistema opioide, grupo de animais receberam uma injeção i.art. (10 μg/art.;15 µL) de um antagonista de receptores opioides (naloxona), 35 min antes da injeção de Zy. Após 5 min, os animais foram pré-tratados com LCc (10 mg/kg). A hipernocicepção mecânica foi medida utilizando o método de Von Frey elétrico no tempo basal e 4 h após a injeção de Zy. Na 6a hora, os animais foram eutanasiados e suas ATM lavadas para coleta do lavado sinovial e realização da contagem total de células e dosagem de mieloperoxidase (MPO). Posteriormente, as ATM foram removidas para as análises histológicas e imunohistoquímica (TNF-α, IL-1β e HO-1), além da dosagem de IL-1β no tecido periarticular e gânglio trigeminal. O pré-tratamento com LCc (0,1, 1 ou 10 mg/kg; i.v.) reduziu significativamente a hipernocicepção induzida por Zy (81, 83 e 89,5%, respectivamente) e inibiu o influxo de leucócitos (77,3, 80,7 e 98,5%, respectivamente) comparado ao grupo Zy, sendo confirmada pela atividade de MPO. O açúcar inibidor (mucina) não foi capaz de inibir o efeito anti-inflamatório e antinociceptivo de LCc na artrite induzida por Zy. Observamos que durante a análise histológica da ATM, os animais tratados com LCc apresentaram uma redução significativa do influxo celular na membrana sinovial. Além disso, LCc reduziu significativamente a produção de IL-1β no tecido periarticular e a expressão de IL-1β, TNF-α e HO-1 na membrana sinovial durante o ensaio de imunohistoquímica. O tratamento com ZnPP IX não foi capaz de inibir os efeitos de LCc, mostrando que sua ação antinociceptiva e anti-inflamatória não ocorre pela via da HO-1. Além disso, o tratamento com naloxona não reverteu o efeito de LCc. Portanto, LCc apresentou efeito antinociceptivo e anti-inflamatório no modelo de artrite induzida por Zy, reduzindo a produção de citocinas primárias (TNF-α e IL-1β), porém sua ação antinociceptiva não ocorre pelo mecanismo opioide periférico.

FONTENELLE, T. P. C. Caracterização estrutural e atividade anti-inflamatória da lectina da alga marinha vermelha Bryothamnion triquetrum. 2012. 78 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2015-01-22T18:06:19Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_tpcfontenelle.pdf: 798007 bytes, checksum: b4ac36b1e082f93f1df77fffe44bd8f3 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2016-01-27T22:47:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_tpcfontenelle.pdf: 798007 bytes, checksum: b4ac36b1e082f93f1df77fffe44bd8f3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-27T22:47:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_tpcfontenelle.pdf: 798007 bytes, checksum: b4ac36b1e082f93f1df77fffe44bd8f3 (MD5) Previous issue date: 2012 / The great biodiversity of seaweeds and their occurrence in almost all environments on the planet demonstrate the importance of such beings to ecosystems. One example is the extraction of potentially active biomolecules such as lectins, which are proteins that have been subject of research worldwide. This is due to its impressive ability to bind specifically to carbohydrates or substances containing them, providing an immense field of biological application. This work purpose was to produce lectin from the red seaweed Bryothamnion triquetrum (Lec), evaluate its secondary structure using spectroscopic techniques, and investigate their anti-inflammatory properties in mice. Initially, the lectin was purified by precipitation with ammonium sulfate (0-60) and ion exchange chromatography, and obtained the first peak (PI). This peak was selected by hemagglutination activity thus obtaining pure lectin from Bryothamnion triquetrum, verified by SDS-PAGE. The secondary structure of lectin was analyzed by circular dichroism spectroscopic techniques, against to pH extremes (4.0 to 11.0), and compared to the spectrum of its native structure, and fluorescence against different temperatures, ranging from 25° to 75°, each 10° interval. In biological activities assessment, groups of animals were subjected to pretreatment with the lectin (1.5 and 10mg/kg, ip) and indomethacin (10mg/kg) 30 min before the inflammatory stimulus. The anti-inflammatory activity in mice was evaluated through the assays of peritonitis induced by carrageenan - Cg (500 μg / cav) and paw edema induced by Cg (500 μg / paw), and dextran (500 μg / paw). Extremes of pH (4.0 and 11.0) did not alter the protein secondary structure. Fluorescence data (280nm and 295nm) also showed stability, and aromatic amino acids presence in their structure. Lectin inhibited cell migration in the induced peritonitis by Cg and induced paw edema by Cg and dextran. Thus, it is concluded that the lectin obtained from the Bryothamnion triquetrum DEAE PI shows stable structure related to pH and temperature variation. Regarding biological properties tested, the lectin showed anti-inflammatory effects in models used, and it can be considered a molecule with potential for further studies of inflammation. / A grande diversidade biológica das algas marinhas e sua ocorrência em praticamente todos os ambientes do planeta demonstram a importância desses seres para os ecossistemas. Um deles é a extração de biomoléculas potencialmente ativa como as lectinas, que são proteínas que têm sido alvo de pesquisas no mundo inteiro. Isso se deve à sua impressionante capacidade de ligar-se especificamente a carboidratos ou a substâncias que os contêm, propiciando um imenso campo de aplicação biológica. O objetivo deste trabalho foi produzir a lectina da alga marinha vermelha Bryothamnion triquetrum (Lec), avaliar sua estrutura secundária a partir de técnicas espectroscópicas e investigar as suas propriedades anti-inflamatórias em camundongos. Primeiramente a lectina foi purificada por precipitação com sulfato de amônio (0-60) e cromatografia de troca – iônica, sendo recolhido o primeiro pico (PI). Este pico foi selecionado através da atividade de hemaglutinação obtendo assim a lectina pura a partir de Bryothamnion triquetrum, verificada por SDS-PAGE. A lectina foi analisada quanto a sua estrutura secundária por técnicas espectroscópicas de dicroísmo circular, frente a extremos de pH (4,0 – 11,0) e comparada ao espectro da sua estrutura nativa, e fluorescência frente a diferentes temperaturas que variaram de 25° a 75° em intervalo de 10°. Na avaliação das atividades biológicas, grupos de animais foram submetidos ao pré-tratamento com a Lectina (1,5 e10mg/kg; i.p.) e indometacina (10mg/kg), 30 min antes do estímulo inflamatório. A atividade anti-inflamatória em camundongos foi avaliada através dos ensaios de peritonite induzida por carragenina - Cg (500 μg/cav) e de edema de pata induzidos por Cg (500 μg/pata); dextrano (500 μg/pata). Extremos do pH (4,0 e 11,0) não alterou a estrutura secundária da proteína. Os dados de fluorescência (280nm e 295nm), mostraram também uma estabilidade, além da presença de aminoácidos aromáticos na sua estrutura. A Lectina inibiu a migração celular na peritonite induzida por Cg e os edemas de pata induzidos por Cg e dextrano. Deste modo, conclui-se que a Lectina obtida do PI da DEAE de Bryothamnion triquetrum apresentou estrutura estável em relação a variação de pH e temperatura. Em relação às propriedades biológicas testadas, a Lectina apresentou efeitos anti-inflamatórios nos modelos empregados, podendo ser considerada uma molécula com potencial para estudos mais aprofundados de inflamação.

SILVEIRA, Elizama Shirley. Desenvolvimento e avaliação farmacológica de nanocápsulas de cinamato de metila : potencial anti-inflamatório. 2015. 96 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-10-19T13:27:42Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_essilveira.pdf: 768343 bytes, checksum: f58c16e1d3c7bbb9cd9d414e754ce5f4 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-10-19T13:50:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_essilveira.pdf: 768343 bytes, checksum: f58c16e1d3c7bbb9cd9d414e754ce5f4 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-19T13:50:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_essilveira.pdf: 768343 bytes, checksum: f58c16e1d3c7bbb9cd9d414e754ce5f4 (MD5) Previous issue date: 2015 / ABSTRACT DEVELOPMENT AND PHARMACOLOGICAL EVALUATION OF METHY L CINNAMATE NANOCAPSULES: ANTI-INFLAMMATORY POTENTIAL . Elizama Shirley Silveira. Advisor: Profª. Drª. Luzia Kalyne Almeida Moreira Leal. Master degree. Program of Post-Graduate in Pharmaceutical Sciences . Department of Pharmacy. Federal University of Ceará, 2013. The methyl cinnamate (MC) is a monoterpene found in the essential oil of medicinal plants of various species, which have antimicrobial and analg esic and activities. In addition, studies have shown that the MC itself has anti-spamodic and anti-inflammatory action. However, the considerable volatility of the MC, poor stability ( stable freshly prepared solution) and lipophilic character is a challenge for further stu dies for the development of pharmaceutical formulations from that monoterpene. In this context , the encapsulation of MC in nanocarriers can be an alternative to overcome or reduce these c hallenges without compromising or even improving the pharmacological characteristics of th e product. Given the above, the objective of this work was the development and characterizati on of nanocapsules of MC (NCMC) through analytical method validation, and to evalua te the possible cytotoxicity and investigate the anti-inflammatory potential of the MC and the N CMC using in vitro assays. To that end, we developed and validated analytical method for id entification and quantification of the MC by UV spectrophotometry, as recommended in Resoluti on RE No. 899 (BRAZIL, 2003). Nanocapsules MC (NCMC) or nanocapsule-white NCW (wi thout MC) were prepared by Eudragit® RS100 polymer interfacial deposition of t he preformed polymer and characterized as the diameter (D), polydispersity index (PDI), ze ta potential (PZ), pH and content; and investigated the stability of the product for 60 da ys at ambient temperature. he in vitro toxicity was evaluated in the NCMC neutrophils or h uman keratinocytes by lactate dehydrogenase activity, and the MTT (Bromide 3 [4,5 -dimethylthiazol-2-yl] -2,5- diphenyltetrazolium bromide) test, while the anti-i nflammatory potential of MC and NCMC was assessed by neutrophil degranulation model indu ced by PMA (phorbol 12- myristate 13- acetate) , (0,1 μ M). For purposes of characterizati on and NCMC stability studies, the spectrophotometric method (270 nm) was validated, b eing specific, linear, precise, accurate and robust. In developing NCCM, among produced form ulations (NCMC1-3), the NCMC3 was selected for the large active content (88.50%) compared with other formulations (NCMC1: 42.48%; NCMC2: 81.60 %); and a diameter (D) average 136.1 ± 1.71 nm and low PDI (0.127 ± 0.01). The NCMC3 presented also an enc apsulation efficiency of 87.03 ± 0.21%. The results obtained with formulations white (NCW1-3) showed that MC does not influence the characteristics. The cytotoxicity of NCMC3 in human neutrophils (LDH) was proportional to the concentration (> 50 μ g/ml) and incubation time ( ≥ 30 min). In the MTT assay in human keratinocytes or neutrophils NCMC3 w as not cytotoxic, and quenched toxicity of free MC. Both the MC (1-100 mg / mL) an d the NCMC (1-100 μ g/mL) showed anti-inflammatory activity by significantly reducin g the degranulation of human neutrophils. In addition, the encapsulation of MC promoted an in crease in this activity in relation to the free MC, with similar magnitude to indomethacin. Th e MC encapsulation nanoscale allowed an increased in the time of stability of terpene an d reduced its cytotoxicity and increase their anti-inflammatory action in human. / O Cinamato de Metila (CM) é um monoterpeno encontrado no óleo essencial de várias espécies de plantas medicinais, que possuem atividades antimicrobiana, analgésica e anti-espasmódica. Além disso, estudos têm mostrado que o próprio CM tem ação antiespamódica e anti-inflamatória. No entanto, a considerável volatilidade do CM, pouca estabilidade (estável em solução recém-preparada) e caráter lipofílico constitui um desafio para prosseguir os estudos visando o desenvolvimento de formulações farmacêuticas a partir desse monoterpeno. Nesse contexto, a encapsulação do CM em nanocarreadores, pode constituir uma alternativa no sentido de superar ou reduzir esses desafios, sem comprometer ou até mesmo melhorar as características farmacológicas do produto. Diante do exposto, o objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento e caracterização de nanocápsulas de CM (NCCM) através de método analítico validade neste estudo, além de avaliar a possível citotoxicidade e investigar o potencial anti-inflamatório do CM e da NCCM em ensaios in vitro. Para tanto, foi desenvolvido e validado método analítico para identificação e quantificação do CM por espectrofotometria UV, conforme preconizado na resolução RE nº 899 (BRASIL, 2003). As nanocápsulas de CM (NCCM) ou nanocápsula branca-NCB (sem adição CM) foram preparadas com o polímero Eudragit® RS100 pelo método de deposição interfacial do polímero pré-formado e caracterizadas quanto ao diâmetro (D), índice de polidispersão (PDI), potencial zeta (PZ), pH e teor; e investigada a estabilidade do produto por 60 dias, a temperatura ambiente. A toxicidade in vitro da NCCM foi avaliada em neutrófilos ou queratinócitos humanos através da atividade da lactato desidrogenase e do teste do MTT, enquanto o potencial anti-inflamatório do CM e da NCCM foi avaliado através do modelo de desgranulação de neutrófilo induzido por PMA (0,1 µM). Para fins de caracterização e estudos de estabilidade da NCCM, o método espectrofotométrico (270 nm) foi validado, mostrando-se específico, linear, preciso, exato e robusto. No desenvolvimento de NCCM, dentre as formulações produzidas (NCCM1-3), a NCCM3 foi selecionada por apresentar um maior teor de ativo (88,50%) em relação as demais formulações (NCCM1: 42,48%; NCCM2: 81,60%); além de um diâmetro (D) médio de 136,1 ± 1,71 nm e baixo PDI (0,127 ± 0,01). A NCCM3 apresentou ainda, uma eficiência de encapsulação de 87,03 ± 0,21 %. Os resultados obtidos com as NCB mostraram que em algumas circunstâncias o CM parece influenciar nas características do nanosistema. A citoxicidade da NCCM3 em neutrófilo humano (LDH) foi observada de acordo com a concentração (> 50 µg/mL) e tempo de incubação (≥30min). No teste do MTT em neutrófilo ou queratinócitos humano a NCCM não foi citotóxica, e extinguiu a toxicidade do CM livre. Tanto o CM (1- 100 μg/mL) quanto a NCCM3 (1- 100 μg/mL) mostraram uma atividade antiinflamatória por reduzir significativamente a desgranulação de neutrófilos humano. Além disso, o encapsulamento do CM promoveu um aumento dessa atividade em relação ao CM livre, com magnitude semelhante à indometacina. A encapsulação do CM em escala nanométrica permitiu um aumento no tempo de estabilidade desse terpeno, além de reduzir a sua citoxicidade e aumentar a sua ação anti-inflamatória em neutrófilo humano.

MOURA, Carlos Tiago Martins. Participação dos canais iônicos na hiperreatividade induzida por ovalbumina em traquéias isoladas de ratos. 2004. 122 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2004. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-03-07T16:20:30Z No. of bitstreams: 1 2004_dis_ctmmoura.pdf: 735616 bytes, checksum: 735e9cdf07f498aba4693fd851ba5e0c (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-03-08T11:25:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2004_dis_ctmmoura.pdf: 735616 bytes, checksum: 735e9cdf07f498aba4693fd851ba5e0c (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-08T11:25:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2004_dis_ctmmoura.pdf: 735616 bytes, checksum: 735e9cdf07f498aba4693fd851ba5e0c (MD5) Previous issue date: 2004 / In order to verify the interference of the antigenic challenge on traqueal contractility in vitro, male rats (250 -350 g) were ovalbumine (OVA)-sensitized and, 13 to 14 days later, they were challenged through the sensitizing antigen inhalation (OVA, 1 mg/ml, followed by 5 mg/ml). Animals were sacrificed immediately (SD0) or 24 hours (SD24) after the antigenic challenge through chloral hydrate anaesthesia (0,4 g/Kg). Some animals were treated with metilsergide (1 mg/Kg) 40 minutes before the challenge. Control animals (CONT) received only the vehicle (NaCl 0,9 %) by inhalation. Tracheal rings were carefully removed and mounted in a 10 ml isolated bath chamber with modified Krebs-Henseleit solution (at 37±0,5 oC) bubbled with a mixture of 5% of CO2 in 95% of O2. Concentration-effect curves (CCE) were constructed for potassium chloride (KCl), acetycholine (ACh) or serotonin (5-HT). In another experiments, CCE for Ca2+ addition were constructed under Ca2+-free conditions (with 10-5 M EDTA, nifedipine and indomethacin, 10-6 M each) in the presence of KCl, ACh or 5-HT. Sensitization and subsequent antigenic challenge (SD) promoted a significant increase of the maximal response (RM) of the CCE to KCl (force in grams, mean ± S.E.M.: CONT = 0,52 ± 0,01; SD24 = 1,22 ± 0,03; n = 06; p < 0.01), ACh (CONT = 2.11 ± 0,10; SD24 = 3,53 ± 0,03; n = 06; p < 0.01) or to 5-HT (CONT = 0,60 ± 0,03; SD24 = 1,48 ± 0,09; n = 06; p < 0.01). Tracheal rings of sensitized and challenged animals showed a rise in RM for Ca2+ only when they were pre-contracted with KCl (CONT = 0,84 ± 0,08; SD24 = 1,98 ± 0,05; n = 6; p < 0.01) or ACh (CONT = 0,98 ± 0,09; SD24 = 1,54 ± 0,15; n = 6; p < 0,05). When 5-HT was used as agonist this hyperresponsiveness did not occur, being observed only in the nifedipine absence (CONT = 0.81 ± 0,06; SD24 without nifedipine = 1,23 ± 0,08; n = 05; p < 0.01). The sensitized but not challenged animals (SENS) were compared to SD animals in the presence of niflumic acid (AN). AN inhibited the antigenic shock-induced hyperresponsiveness for 5-HT (SENS = 1,28 ± 0,09; SD24 + AN = 1.01 ± 0,08; n = 05), while it was ineffective in inhibit that for the ACh (SENS = 1,44 ± 0,01; SD24 + AN = 1,67 ± 0,03; n = 05; p < 0.01). Therefore, the results show that there is a participation of Ca2+ channels, both voltage- and receptor-operated channels, in the hyperresponsiveness of the respiratory smooth muscle, induced by the representation of the antigen to previously sensitized animals and, in addition, the Cl- channels Ca2+-activated have an important role on 5-HT hyperresponsiveness development. / Com o objetivo de verificar a interferência da broncoprovocação antigênica sobre a contratilidade traqueal, ratos machos (250 -350 g) foram sensibilizados à ovalbumina (OVA) e, 13 a 14 dias depois, desafiados em intervalos de 15 minutos através da inalação do antígeno sensibilizante (OVA, 1 mg/ml, seguida de 5 mg/ml). O sacrifício dos animais foi feito imediatamente (SD0) ou 24 horas (SD24) após o desafio antigênico através de anestesia com hidrato de cloral (0,4 g/Kg). Alguns animais foram tratados com metilsergida (1 mg/Kg) 40 minutos antes do desafio. Os animais controle (CONT) inalaram apenas o veículo (NaCl 0,9 %). A traquéia foi removida e montada em cuba para orgão isolado contendo 10 ml de solução de Krebs-Henseleit modificada (mantida a 37±0,5 oC) e aerada com mistura carbogênica (O2/CO2–95:5). Foram confeccionadas curvas concentração-efeito (CCE) para cloreto de potássio (KCl), acetilcolina (ACh) ou serotonina (5-HT). Em outros experimentos foram realizadas CCE ao Ca2+ em preparações mantidas previamente em solução sem Ca2+ (contendo 10-5 M de EDTA, nifedipina e indometacina, 10-6 M para ambas) e estimuladas por KCl, ACh ou 5-HT. A sensibilização e o posterior desafio antigênico (SD) promoveram um significativo aumento da resposta máxima (RM) das CCE ao KCl (força em grama, média ± E.P.M.: CONT = 0,52 ± 0,01; SD24 = 1,22 ± 0,03; n = 06; p < 0,01), à ACh (CONT = 2,11 ± 0,10; SD24 = 3,53 ± 0,03; n = 06; p < 0,01) ou à 5-HT (CONT = 0,60 ± 0,03; SD24 = 1,48 ± 0,09; n = 06; p < 0,01). As traquéias de animais sensibilizados e desafiados apresentaram aumento da RM ao Ca2+ apenas quando pré-contraídas com KCl (CONT = 0,84 ± 0,08; SD24 = 1,98 ± 0,05; n = 6; p < 0,01) ou ACh (CONT = 0,98 ± 0,09; SD24 = 1,54 ± 0,15; n = 6; p < 0,05). Quando o agonista utilizado foi a 5-HT esta diferença não ocorreu, sendo observada uma maior RM somente na ausência de nifedipina (CONT = 0,81 ± 0,06; SD24 sem nifedipina = 1,23 ± 0,08; n = 05; p < 0,01). Foram comparados os animais apenas sensibilizados e não desafiados (SENS) com os SD na presença de ácido niflúmico (AN). O AN inibiu a hiperreatividade para a 5-HT induzida pelo desafio antigênico (SENS = 1,28 ± 0,09; SD24 + AN = 1,01 ± 0,08; n = 05), enquanto que foi ineficaz em inibir a hiperreatividade para a ACh (SENS = 1,44 ± 0,01; SD24 + NA = 1,67 ± 0,03; n = 05; p < 0,01). Portanto, os resultados mostram que há envolvimento de canais de Ca2+, tanto dependentes de voltagem (VOC) como operados por receptor (ROC), na hiperreatividade do músculo liso respiratório, induzida pela reapresentação do antígeno a animais previamente sensibilizados e que o desenvolvimento da hiperreatividade para a 5-HT está relacionado à abertura de canais de Cl- ativados por Ca2+

CARDOSO, Mirlane Guimarães de Melo. Efeito potencializador do antineoplásico paclitaxel (TAXOL) na hiperalgesia inflamatória experimental induzida por zymosan. 2003. 127 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2003. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-05-07T13:49:25Z No. of bitstreams: 1 2003_dis_mgmcardoso.pdf: 948719 bytes, checksum: 74fac9ee50502a1b6865c0976f5275ed (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-05-08T16:52:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2003_dis_mgmcardoso.pdf: 948719 bytes, checksum: 74fac9ee50502a1b6865c0976f5275ed (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-08T16:52:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2003_dis_mgmcardoso.pdf: 948719 bytes, checksum: 74fac9ee50502a1b6865c0976f5275ed (MD5) Previous issue date: 2003 / Paclitaxel (Taxol®) was the first effective antineoplastic in the management of refractory neoplasias to the conventional chemotherapy. It induces clinically to myelosuppression and sensory peripheral neuropathy boundary and cumulative dose, well documented at literature already. Less often the patients exhibited myalgias and arthralgias. As to concern to the inflammatory pain, there is nothing described do date, aiming to correlate the involvement from pro-inflammatory cytokines with the hyperalgesia genesis associated to PCX since the drug induces the alpha-TNF expression gene. It has already been demonstrated, experimentally by several authors, the essential role of alpha-TNF triggering a set of cytokines which active two components of the inflammatory pain (eicosanoid and sympathetic). Findings of our group showed that zymosan (ZY) administrated intraperitoneal (ip) in mice, induces the release of these cytokines by resident macrophages at the wriggling abdominal model (CA) and that their injection intra-articular rat knees produces a feature periarthritis as a sign of hyperalgesia at articular incapacitation model (IA). Based on these findings, the aim of the present work was to evaluate PCX effect at the modulation of nociceptive response induced by zymosan in two animal models of the inflammatory pain. Then, was injected via ip PCX (8mg/kg/an) before two hours of ZY (1mg/cav;ip) in mice on the CA test. Rats were treated with ip PCX (4,8 mg/kg/an) after one hour ZY intra-articular (250mcg/animal;i-art) for IA test. Both tests, the animals were pre-treated subcutaneous via with COX-1 and COX-2 inhibitors, sympathetic blockade and citokines inhibitors. It was demonstrated that PCX (8mg/kg/an) dose potentiates the inflammatory hyperalgesia at CA model, increasing in 183%, being statistical significant at the level p< 0.001, versus experimental group. Such effect was inhibited at level of significance, p< 0.001 and dependent-dose by indomethacin (ED50 0.05mg/kg), celoxib (ED5013.68mg/kg), atenolol(ED50 0.13mg/kg), talidomide (ED50 23.36mg/kg), penthoxyphylin (ED50 8.40mg/kg) and dexamethasone (ED50 0,71mg/kg). This potential effect of at the IA test was justified at IA model in dose 4mg/kg (p< 0,001) by significant increase of time of suspension the paws through arthritis at third and fourth hours versus experimental group. By same way there was significant inhibition at the level p< 0.001 of this magnification of the pre-treated rats. Latter, PCX (Taxol®) magnified significantly the inflammatory hyperalgesia induced by ZY at CA and IA models, justifying one sided myalgias and artralgias of the patients by using PCX, suggesting the involvement of the hyperalgesic citokines - alpha-TNF, prostanoids and sympathetic mediators of the genesis of this hyper-nociceptive effect. / Paclitaxel(Taxol®), foi o 1º antineoplásico efetivo no tratamento de cânceres refratários a quimioterapia convencional. Clinicamente, induz mielossupressão e neuropatia periférica sensorial dose-limitante e cumulativa, já bem documentada na literatura. Menos freqüentemente os pacientes tratados apresentam mialgias e artralgias. No que diz respeito à dor inflamatória, nada foi descrito até o momento, visando correlacionar o envolvimento das citocinas pró-inflamatórias, com a gênese da hiperalgesia associada ao PCX, já que a droga induz a expressão do gene TNF-alpha. Experimentalmente já foi demonstrado por vários autores, o papel fundamental do TNF-alpha desencadeando uma cascata de citocinas que ativam os dois componentes da dor inflamatória (eicosanóide e simpático). Dados do nosso laboratório registram que o zymosan (ZY) administrado ip em camundongos, induz a liberação dessas citocinas por macrófagos residentes no modelo de contorção abdominal (CA), e que sua injeção intra-articular em joelhos de ratos produz uma periartrite característica tida como sinal de hiperalgesia no modelo de incapacitação articular (IA). Com base nestes achados, constituiu-se objetivo do presente trabalho, avaliar o efeito do PCX na modulação da resposta nociceptiva induzida pelo ZY em dois modelos animais de dor inflamatória. Para tanto, injetou-se via ip PCX (8mg/kg/an) 2h antes do ZY (1mg/cav;ip) em camundongos no teste CA. Ratos foram tratados ip com PCX 4 e 8mg/kg/an) 1 h após da administração intra-articular ZY (250mcg/an) no teste IA. Em ambos os testes os animais foram pré-tratados via Sc com inibidores de COX-1 e COX-2, bloqueador simpático e inibidores de citocinas. Ficou demonstrado que PCX na dose de 8mg/kg potencializa a hiperalgesia inflamatória no modelo de CA, aumentando de maneira significativa (p< 0.001) o n° de CA em 183%, em relação ao controle. Tal efeito foi inibido de maneira significativa (p<0.001) e dose-dependente pela indometacina (ED50 0,05mg/kg), celecoxib (ED50 13,68mg/kg), atenolol (ED50 0,13mg/kg), talidomida (ED50 23,36mg/kg), pentoxifilina (ED50 8,40mg/kg) e dexametasona (ED50 0,71mg/kg). No teste de IA, esse efeito potencializador foi ratificado pelo aumento significativo do tempo de suspensão da pata (p< 0.001) na 3ª e 4ªh de artrite em relação ao controle, na dose 4mg/kg de PCX. Da mesma forma houve inibição significativa (p< 0.001) dessa amplificação nos ratos pré-tratados. Por fim, o PCX (Taxol®) amplifica significativamente a hiperalgesia inflamatória induzida pelo ZY no modelo de CA e IA, o que justifica em parte as mialgias e artralgias dos pacientes em uso de PCX e indiretamente sugere a participação de citocinas hiperalgésicas (TNF-alpha), prostanóides e mediadores simpáticos na gênese deste efeito hipernociceptivo.