A melatonina produzida pela glândula pineal apresenta diversas ações reguladoras da homeostase dinâmica interna de mamíferos. Suas ações abrangem tanto a regulação de funções endógenas circadianas e sazonais em situações de higidez quanto durante processos fisiopatológicos. O presente trabalho avalia o efeito dos moduladores de processos inflamatórios corticosterona, TNF e IFNy; sobre o metabolismo da glândula pineal. Os resultados aqui apresentados mostram que: 1- Corticosterona potencia a síntese de noradrenalina in vivo e in vitro na vigência de estimulação β-adrenérgica, mas inibe a produção induzida por estimulação concomitante α e β-adrenérgica. 2- Este efeito é dependente de ativação de GR e não altera a captação extraneuronal de catecolaminas. 3- Corticosterona aumenta a expressão do transcrito aa-nat e a atividade das enzimas AA-NAT e HIOMT. 4 Corticosterona inibe o acúmulo nuclear de NF-κB. 5- A inibição farmacológica da via NF-κB mimetiza o efeito potenciador da corticosterona sobre a produção hormonal da pineal. 6 IFN-y inibe a via NF-κB. 7 - IFN-y potencia a produção de melatonina pela glândula pineal. 8- TNF ativa a via NF-κB. 9 TNF inibe a produção de melatonina pela pineal. 10- TNF inibe transitoriamente a expressão do transcrito aa-nat e NAS. 11 A transitoriedade deste efeito é dependente de neosíntese protéica. O presente trabalho mostra que a glândula pineal está aparelhada para responder a diferentes agentes moduladores de processos inflamatórios além de fortalecer e darem base para a hipótese da existência de um eixo imune-pineal central no controle de processos patológicos em mamíferos. / The melatonin, synthetized by the pineal gland, exihibits a number of regulatory activities on the internal dynamic homeostasis of mammals. These functions are related to the regulation of endogenous circadian and seasonal rhythms during healthy and physiopathological processes. This study evaluates the effects of the inflammatory modulators, corticosterone, TNF and IFN- y, over the pineal gland metabolism. The results presented here show that: 1 - Corticosterone enhances the synthesis of norepinephrine in vivo and in vitro in the presence of β-adrenergic stimulation, but inhibits the hormonal production when both, αand βadrenoceptors, are activated. 2 - This effect depends on the GR activation and does not interfere in the extraneuronal uptake of catecholamines. 3 - Corticosterone increases the expression of the aanat transcript and also the enzymatic activity of AA-NAT and HIOMT. 4 - Corticosterone inhibits the nuclear accumulation of NF-κB. 5 - The pharmacological inhibition of NF-κB pathway mimics the effect of corticosterone on the hormonal production in pineal. 6 - IFN-y inhibits the NF- κB pathway. 7 - IFN-y enhances the synthesis of melatonin in the pineal gland. 8- TNF activates the NF-κB pathway. 9 - TNF inhibits the production of melatonin in the pineal gland. 10 - TNF transiently inhibits the production of the aa-nat transcript and also of NAS. 11 - This transient effect depends on the synthesis of proteins. This study shows that the pineal gland can respond to different inflammatory modulators, supporting the hypothesis of a central immune-pineal axis controlling pathological processes in mammals. .

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-08-30T13:16:38Z No. of bitstreams: 1 PDF - Jôffyli Vandenberg Morais Rodrigues.pdf: 37894327 bytes, checksum: 96d00470a43bdcfe00e188bbc27b7d0a (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-08-31T18:16:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Jôffyli Vandenberg Morais Rodrigues.pdf: 37894327 bytes, checksum: 96d00470a43bdcfe00e188bbc27b7d0a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-31T18:16:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Jôffyli Vandenberg Morais Rodrigues.pdf: 37894327 bytes, checksum: 96d00470a43bdcfe00e188bbc27b7d0a (MD5) Previous issue date: 2015-08-28 / Herbal medicines are alternatives to the pharmaceutical industry ahead the treatment of several diseases and herbal extracts are starting point’s assets inputs for the development of these products. The Aspidosperma pyrifolium Mart. is a characteristic plant of semi-arid and it is able to provide pharmacological activities such as analgesia and anti-inflammation due to its phytochemical composition. The objective of this study was to develop an oral solution from the nebulized extract of A. pyrifolium Mart. having anti-inflammatory and analgesic activity. Three batches of the oral solution were produced: one with only the excipients used in the formulation, and two others at concentrations of 12.5 and 25.0 mg.mL . The pre- -1 formulation studies were performed with this phytomedication the aid of thermoanalytical methods and analysis in the near infrared region. The pharmacological activity was assayed by the writhing test and peritonitis in mice. The percentage inhibition of pain and inflammation were quite significant, being better than the positive control in some tests using the higher concentration solution. The quality control of the formulations was evaluated through physical, chemical and microbiological parameters, the lot of concentration 12.5 mg.mL was following all the parameters. The herbal solution developed submitted good -1 results to quality control during production, proved the conservation of the pharmacological properties of the nebulized extract of A. pyrifolium Mart. highlighting the successful results of the analgesic activity obtained in the percentage inhibition of writhing numbers of 70.6% and 89.4% for lower and higher concentration solution, respectively, instead of dipyrone, the positive control of the test, submitted the percent inhibition of 77.65% of contortions. / Medicamentos fitoterápicos são alternativas aos tratamentos convencionais, frente a diversas patologias. Os extratos de plantas medicinais são insumos ativos de partida para o desenvolvimento desses produtos. A Aspidosperma pyrifolium Mart. é uma planta característica do semiárido e possui atividade farmacológica, como analgesia e combate à inflamação, devido a sua composição fitoquímica. Assim, o objetivo desse trabalho foi desenvolver uma solução oral a partir do extrato nebulizado de A. pyrifolium Mart. com atividade anti-inflamatória e analgésica. Foram produzidos três lotes da solução oral: um placebo contendo apenas os excipientes, e outros dois nas concentrações de 12,5 e 25,0 mg.mL . Os estudos de pré-formulação deste fitomedicamento foram realizados com o -1 auxílio de métodos termoanalíticos e por análises na região do infravermelho próximo. A atividade farmacológica foi testada por teste de contorções abdominais e peritonite em camundongos. Os percentuais de inibição da dor e de inflamação foram bastante significativos, sendo melhores que o controle positivo em alguns testes utilizando a solução de maior concentração. O controle da qualidade das formulações foi avaliado através dos parâmetros físico-químicos e microbiológicos, apresentando resultados promissores acerca dos lotes com extrato vegetal. O fitoterápico desenvolvido, além de apresentar bons resultados quanto ao controle da qualidade durante sua produção, comprovou a conservação das propriedades farmacológicas do extrato nebulizado de A. pyrifolium Mart. destacando-se com êxito nos resultados referentes à atividade analgésica, na qual obteve percentuais de inibição do número de contorções de 70,6% e 89,4% para as soluções de menor e maior concentração, respectivamente, ao passo que a dipirona, controle positivo do teste, apresentou percentual de inibição de 77,65% das contorções.

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:01:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Magno Perea Muniz.pdf: 3877083 bytes, checksum: a620a7990787a4877c1b18ca0f4428ae (MD5) Previous issue date: 2013-03-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The species Endopleura uchi, Humiriaceae family, native to the Amazon, is commonly known as uxi-amarelo or uxi-liso. The tea from its bark is popularly referred to uterine inflammation, urinary, and extremely effective in treating specific fibroids and polycystic ovary. Based on information collected about the popular use of this species in the region of Manaus, the study was conducted to obtain the phytochemical investigation of Endopleura uchi which led to the isolation of friedelin, a pentacyclic triterpene, and also bergenin, a gallic acid derivative, known to have various biological activities and is the main component in the species. In the present study were quantified bergenin in different extracts of different parts of the plant and also in commercial bark Endopleura uchi. The result showed a higher percentage of Bergenin in methanol extracts of bark (CEM-1 = 4.17% and CEM-2 = 4.75%) followed by extracts of leaves and in lower concentrations in aqueous extracts of twigs (GEA-1 = 1.95% and GEA-2 = 1.89%), bergenin as indicating the major component Endopleura uchi and that may be related to biological activities popularly given to the species. All samples analyzed showed the presence of bergenin with percentages ranging from 0.20% to 3.57%, confirming the authenticity of the plant material. Was also performed quantification of total phenolics by Folin-Ciocalteu, which revealed high levels of phenolic compounds from 16.69 to 43.02 mg GAE/g dry extract. This evaluation of the antioxidant activity by reducing iron ranged from 230.43 to 567.89 mmol Fe+2/g of dry extract and the scavenge of radical DPPH ranged from CS50 = 12.04 to 24.20 g/ml. The test for evaluation of antiulcer activity of the fractions ethyl acetate and chloroform leaves showed preventive effects of ulcerations as much as the positive control. The anti-inflammatory assay of aqueous extracts and fractions of Endopleura uchi by inhibition of nitric oxide (NO ) showed significant inhibition capacity, the best result being attributed to chloroform fraction of the leaves with IC50 = 3.2 g/mL. The results obtained from the leaves, twigs and bark species Endopleura uchi with great therapeutic value by the presence of antioxidant compounds and their ability anti-inflammatory and antiulcer, enabling the use of this popular safer plant species and the possible contribution to the development of herbal products or news drugs. / A espécie Endopleura uchi, da família Humiriaceae, nativa da Amazônia, é conhecida comumente como uxi-amarelo ou uxi-liso. O chá de suas cascas é popularmente indicado para inflamação uterina, urinária, e extremamente eficaz no tratamento específico de miomas e ovário policístico. Com base nas informações coletadas sobre o uso popular dessa espécie na região de Manaus, foi desenvolvida a investigação fitoquímica de Endopleura uchi que levou ao isolamento da friedelina, um triterpeno pentacíclico, e também da bergenina, um derivado do ácido gálico, conhecido por apresentar diversas atividades biológicas e por ser o principal componente na espécie. No presente estudo foi realizado a quantificação de bergenina em diferentes extratos de partes distintas da planta e também em amostras de cascas comerciais de Endopleura uchi. Os resultados dos extratos mostraram maior porcentagem de bergenina nos extratos metanólicos das cascas (CEM-1 = 4,17 % e CEM-2 = 4,75 %) seguido dos extratos das folhas e em menor quantidade nos extratos aquosos dos galhos (GEA-1 = 1,95 % e GEA-2 = 1,89%), indicando a bergenina como componente majoritário de Endopleura uchi e que pode estar relacionada às atividades biológicas indicadas popularmente para a espécie. Todas as amostras comerciais analisadas indicaram a presença de bergenina com porcentagens que variaram entre 0,20 % a 3,57 %, confirmando a autenticidade do material vegetal. Foi realizado a quantificação de fenólicos totais nos extratos pelo método de Folin Ciocalteu, que revelou altos teores de compostos fenólicos entre 16,69 43,02 mg EAG/g de extrato seco. A avalição da atividade antioxidante dos extratos pela redução de ferro variou de 230,43 a 567,89 mmol Fe+2/g de extrato seco e pelo sequestro de radicais de DPPH variou entre CS50 = 12,04 a 24,20 g/mL. O ensaio para avaliação da atividade antiúlcera das frações acetato de etila e clorofórmica das folhas evidenciaram efeitos preventivos das ulcerações tanto quanto o controle positivo. O ensaio anti-inflamatório dos extratos aquosos e frações de Endopleura uchi pela inibição de óxido nítrico (NO) apresentaram capacidade de inibição significantes, sendo o melhor resultado atribuído à fração clorofórmica das folhas com IC50 = 3,2 g/mL. Os resultados obtidos das folhas, galhos e cascas revelam a espécie Endopleura uchi com amplo valor terapêutico pela presença de compostos antioxidantes e por sua capacidade anti-inflamatória e antiúlcera, possibilitando o uso popular mais seguro dessa espécie vegetal e para a contribuição do desenvolvimento de possíveis produtos fitoterápicos ou até de novos fármacos.

A distrofia muscular de Duchenne (DMD) é uma alteração neuromuscular hereditária e progressiva que afeta humanos do sexo masculino. O modelo canino Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD) é considerado modelo experimental para estudos de novas propostas terapêuticas e melhor entendimento da fisiopatogênica da DMD. O processo progressivo da distrofia está relacionado com alterações nas populações celulares que compõe o sistema imune dos pacientes, pois devido a ausência da proteína distrofina na membrana sarcoplasmática, o músculo fica mais susceptível à lesões, ocorrendo liberação de citocinas, que recrutam e estimulam células do sistema imune, principalmente macrófagos e linfócitos T. A longo prazo, essa resposta inflamatória contínua e persistente, leva a uma série de reações que culminam com danos cada vez maiores, a ponto de ocorrer um esgotamento de células satélites e fibrose do tecido muscular. Uma das propriedades mais estudadas das células tronco mesenquimais (MSCs) é sua capacidade imunomoduladora, fazendo com que essas células se tornem promissoras na utilização da terapia celular. Neste contexto, esta ferramenta imunomoduladora pode atuar como uma estratégia interessante na manipulação do sistema imune. O estudo proposto foi elaborado com a finalidade de trazer subsídios para viabilização de experimentos de terapia celular na distrofia muscular, por meio do conhecimento sobre a imunomodulação durante o tratamento in vitro, contribuindo para uma possível aplicação terapêutica em humanos. Para tanto, foram estudados dois grupos de cães, um grupo controle (GR; n=5) e um grupo de cães afetados (GRMD; n=9), compostos por machos e fêmeas. O estudo consistiu na avalição da proliferação de linfócitos na presença de MSC em diferentes concentrações, bem como da proliferaçao de linfócitos específicos como o Tauxiliar (CD4+FoxP3-) e Tregulatórios (CD4+FoxP3+) com as MSCs. Adicionalmente, realizamos a dosagem de nitrito com o intuito de quantificar a produção de óxido nítrico (NO) através do cocultivo de macrófagos com as MSCs. Neste estudo foi possível observar que as MSCs estimularam a proliferação significativa de linfócitos T regulatórios. Adicionalmente, essa porcentagem de divisão aumentou em cocultivos que utilizaram maiores concentrações de MSC. Maior concentração de nitrito também foi encontrada no cocultivos de MSC e macrófagos estimulado com LPS. Estas informações geram incrementos no entendimento de como as MSCs podem agir no organismo distrófico e como poderemos explorar essa fonte para promover um retardamento no processo inflamatório e consequentemente melhorar a qualidade de vida do paciente. / The Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a progressive hereditary neuromuscular disorder that affects human males. The canine model Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD) is considered experimental model for studies of new therapies and better understanding of the DMD. The process of progressive dystrophy is related to changes in cell populations that comprise the immune system of patients, because due to the absence of the protein dystrophin in the sarcoplasmic membrane, the muscle is more susceptible to injury, occurring release of cytokines that recruit and stimulate cell immune, mainly macrophages and T lymphocytes in the long term, this continuous and persistent inflammatory response, the system takes a series of reactions that culminate with increasing damage to the point of exhaustion of satellite cells of muscle tissue and fibrosis occur. One of the most studied properties of mesenchymal stem cells (MSCs) is their immunomodulatory capacity, making these cells become promising in the use of cell therapy. In this context, this immunomodulatory can act as an interesting strategy in manipulating the immune system. The proposed study was designed in order to provide support for the feasibility of cell therapy trials in muscular dystrophy, through the knowledge of immunomodulation during treatment in vitro, contributing to a possible therapeutic application in humans. In this purpose, two groups were studied, a group of affected dog (GRMD, n=9) and a control group (GR, n=5 GR). The study consisted of rating of lymphocyte proliferation in the presence of MSCs in different concentrations as well as the proliferation of specific lymphocytes as Thelper (CD4+FoxP3-) and Tregulatory (CD4+FoxP3+) to MSCs. In addition, the dosage of nitrite performed in order to quantify the production of nitric oxide (NO) by coculture with macrophages MSCs. In this study we observed that MSCs stimulated significant proliferation of regulatory T lymphocytes. Additionally, this percentage split increased cocultivos that used higher concentrations of MSC. Highest concentration of nitrite was also found in cocultivos of MSC and macrophages stimulated with LPS. This information generates increments in understanding how MSCs may act in the body dystrophic and how we exploit this source to promote a delay in the inflammatory process and consequently improve the quality of life of patients

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-04-04T17:21:32Z No. of bitstreams: 1 Lucian Del Fabbro.pdf: 1272289 bytes, checksum: 12f1723b46015bc56a5601039de65844 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-04T17:21:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lucian Del Fabbro.pdf: 1272289 bytes, checksum: 12f1723b46015bc56a5601039de65844 (MD5) Previous issue date: 2014-03-02 / As micotoxicoses ocorrem através do consumo de alimentos contaminados, sendo uma questão de saúde pública em todo o mundo. A contaminação dos alimentos depende de crescimento fúngico, além de condições climáticas ideais para o desenvolvimento das micotoxinas. A ingestão de micotoxinas por seres humanos ocorre principalmente pela ingestão de produtos vegetais contaminados, bem como pelo consumo de produtos derivados destes alimentos. A Zearalenona (ZEA) é uma lactona do ácido fenólico resorcílico e pode ser produzida por várias espécies de Fusarium, sendo que Fusarium graminearum, proliferatum e culmorum são os principais produtores. A ZEA é um composto estrogênico, cujo os efeitos tóxicos e seus metabólitos têm sido atribuídos principalmente à sua estrutura química semelhante a dos estrógenos naturais. O sistema reprodutivo é um dos principais alvos de toxicidade da ZEA, sendo os órgãos reprodutores, como útero, ovários e testículos os principais órgãos afetados. Frente a esta problemática, o estudo de substâncias naturais capazes de prevenir tal micotoxicose se faz necessária. A crisina é um flavonoide da classe das flavonas. Possui hidroxila livre nos carbonos 5 e 7 do anel, está presente em níveis elevados no maracujá do mato, mel e no própolis. Possui conhecidos efeitos benéficos como atividades antioxidante e anti-inflamatória, além de aumentar níveis de testosterona. Este estudo teve por objetivo avaliar o efeito protetor da crisina frente aos efeitos tóxicos da micotoxina ZEA nos testículos de camundongos Swiss. Para isto, os camundongos foram tratados durante 10 dias consecutivos com crisina (5 e 20 mg/Kg, via gavagem), no 11° dia os animais receberam uma dose de ZEA (40 mg/Kg, via gavagem). Após 48 horas, os animais receberam uma dose de pentobarbital (180 mg/Kg, intraperitoneal, i.p.) e o sangue foi coletado por punção cardíaca e os testículos removidos, pesados e homogeneizados em tampão para as determinações dos níveis de testosterona, contagem e avaliação da motilidade dos espermatozoides, determinação de indicadores de estresse oxidativo por métodos colorimétricos: catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD), glutationa peroxidase (GPx), glutationa redutase (GR), glutationa-S-transferase (GST) e não enzimáticos glutationa reduzida, TRAP (capacidade de reatividade antioxidante total) e TAR (capacidade antioxidante total) e 4-Hydroxynonenal (4-HNE). Foram determinados interleucinas (IL-1β, IL6 e IL10), o fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) e a enzima mieloperocidase (MPO). Foram determinados parâmetros apoptóticos, as atividades das Caspases 3 e 6 além de dos níveis de 8-hydroxy-2'-deoxyguanosina (8-OHdG). O tratamento com crisina reverteu a redução dos níveis de testorenona, da contagem e da motilidade dos espermatozoides. O tratamento com crisina reverteu a inibição das enzimas antioxidantes GPx, GR, e GST, além de normalizar os níveis de GSH e 4-HNE. A alteração nos parâmetros inflamatórios causados pela administração de ZEA foi prevenida pela administração da crisina restaurando os níveis xi de IL-1β e IL-6 e TNF-α e reduzindo os níveis de IL-10 e a atividade da MPO. O tratamento com crisina atenuou os danos apoptóticos causados pela ZEA, inibindo a atividade das caspases 3 e 6 e reduzindo os níveis de 8-OHdG. Desta forma o tratamento com crisina preveniu os danos causados pela micotoxina ZEA em camundongos swiss através da modulação do estresse oxidativo, acarretando em uma redução do processo inflamatório e consequentemente apoptótico. Desta forma espera-se que a crisina possa vir a ser um possível tratamento auxiliar no combate a micotoxicoses seja em humanos ou animais. / Ace mycotoxicoses occur through the consumption of contaminated food being a public health issue worldwide. Contamination of food depends on fungal growth beyond the ideal climatic conditions for the development of mycotoxins. The ingestion of mycotoxins by humans occurs primarily by ingestion of contaminated plant products, as well as the consumption of food products derived therefrom. Zearalenone (ZEA) is a phenolic resorcylic acid lactones and can be produced by various Fusarium species, and Fusarium graminearum, culmorum and proliferatum are the main producers. ZEA is an estrogenic compound, whose the toxic effects and its metabolites have been mainly attributed to their similar chemical structure of natural estrogens. The reproductive system is one of the main targets of toxicity of ZEA and the reproductive organs such as the uterus, ovaries and testes those most affected organs. Faced with this problem, the study of natural substances capable of preventing such mycotoxicosis is required. Chrysin is a flavonoid of the flavones class. It has free hydroxyl at carbons 5 and 7 ring, is present at high levels in passion fruit bush honey and propolis. Chrysin has known beneficial effects as an antioxidant activities and anti-inflammatory and it has increased testosterone levels. This study aimed to evaluate the protective effect of chrysin forward to the toxic effects of the mycotoxin ZEA in the testes of Swiss mice. For this, the mice were treated for 10 consecutive days with chrysin (5 and 20 mg / kg by gavage) on day 11, the animals received ZEA, a dose (40 mg / kg by gavage). After 48 hours, the animals received an overdose of pentobarbital (180 mg / kg, intraperitoneal, i.p.) and blood was collected by heart puncture and removed, weighed and homogenized testis for determination of testosterone, count and assessment of sperm motility, determination of oxidative stress indicators by colorimetric methods: catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase (GR), glutathione-S-transferase (GST) and non-enzymatic reduced glutathione, TRAP (reactivity total antioxidant capacity) and TAR (total antioxidant capacity) and 4-hydroxynonenal (4-HNE). Were determined, interleukins (IL-1β, IL-6 and IL-10), tumor necrosis factor (TNF-α) and mieloperoxidase enzyme (MPO). Apoptotic parameters were determined, Caspases 3 and 6 beyond the levels of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OHdG). The treatment with chrysin reversed the reduction of testorenone levels, count and motility of sperm. Treatment with chrysin reversed the inhibition of antioxidant enzymes GPx, GR, and GST, as well as normalizing levels of GSH and 4-HNE. The alteration in inflammatory parameters caused by the administration of ZEA was xiii prevented by administration of chrysin, restoring IL-1β and IL-6 and reducing IL-10 levels, and reduce TNF-α levels and MPO activity. Treatment with chrysin attenuated apoptotic damage ZEA, inhibiting the activity of caspases3 and 6, reducing levels and 8-OHdG. Thus, the treatment with chrysin prevented the damage caused by mycotoxins ZEA in Swiss mice probably through modulation of the oxidative stress, resulting in a reduction of the inflammatory process and hence apoptosis. Thus it is expected that chrysin may be a possible treatment support combat in mycotoxicosis both in humans and animals.

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-04-04T17:31:47Z No. of bitstreams: 1 Marcelo Gomes de Gomes.pdf: 1949846 bytes, checksum: c4472edd9df88ec1d4f0e86bd59fafa9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-04T17:31:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcelo Gomes de Gomes.pdf: 1949846 bytes, checksum: c4472edd9df88ec1d4f0e86bd59fafa9 (MD5) Previous issue date: 2015-03-02 / O lipopolissacarídeo (LPS) associado com a D-galactosamina (D-GalN), tetracloreto de carbono (CCl4) e o paracetamol (PCM), são modelos animais de hepatite fulminante aguda amplamente utilizados. O gama orizanol (γ-ORY) é uma mistura de 10 ésteres de ácido trans ferúlico e é encontrado no óleo do farelo de arroz. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito hepatoprotetor do γ-ORY nos diferentes modelos animais de hepatite fulminante aguda em camundongos. O experimento foi realizado através do tratamento com γ-ORY (50 mg/kg, por via oral, p.o.) durante uma semana, após uma hora do último tratamento foi administrado por via intraperitoneal o LPS (50 mg/kg) e D-GalN (500 mg/kg), foi utilizado silimarina como controle positivo. O γ-ORY foi administrado oralmente (50 mg/kg) durante uma semana, após 1 hora da última administração o dano foi induzido por uma única dose de CCI4 (1 mg/kg i.p.), a silimarina foi utilizada como controle positivo. Os animais receberam γ-ORY durante dois dias em duas doses (10 mg e 50 mg/kg p.o.), no terceiro dia o PCM (2 g/kg, p.o.). Após 24 horas os animais foram submetidos à eutanásia. Foram feitas as seguintes determinações bioquímicas: marcadores de estresse oxidativo (TBARS, NPSH, 4-HNE), defesas antioxidantes enzimáticas (CAT, SOD, GPx), marcadores de dano hepático (AST, ALT, GGT), marcadores de funcionalidade hepática (bilirrubina), marcadores inflamatórios (TNF-α, IL-1β), marcadores de apoptoses (Caspase 3 e 9) e análise histológica. O γ-ORY foi capaz de proteger significantemente em todas as determinações analisadas, podendo ser comparado ao um fármaco utilizado para o tratamento da hepatite fulminante aguda que é a silimarina. Portanto, sugerimos que o γ-ORY pode ser uma alternativa para o tratamento da hepatite fulminante aguda, pois ficou comprovado seu efeito hepatoprotetor está associado com sua capacidade antioxidante, anti-inflamatória e anti-apoptótica. / The lipopolysaccharide (LPS) associated with D-galactosamine (D-GalN), carbon tetrachloride (CCl4) and paracetamol (PCM) are acute fulminant hepatitis widely used animal models. The gamma oryzanol (γ-ORY) is a mixture of 10 esters of trans-ferulic acid and is found in rice bran oil. The objective was to assess the potential hepatoprotective effect of γ-ORY on mechanisms involved in different animal models of acute fulminant hepatitis in mice. The animals were divided into different groups depending on the experiment. γ-ORY treatment (50 mg/kg, per oral, p.o.) for a week after an hour of the last treatment before the administration by intraperitoneal of LPS (50 mg/kg) and D-GalN (500 mg/kg). γ-ORY was administered orally (50 mg/kg) for one week, after 1 hour of the last administration damage was induced by a single dose of CCl4 (1 mg /kg i.p.). The animals received γ-ORY for two days in two doses (10mg and 50mg /kg p.o.), on the third day PCM (2 g/ kg, p.o.). After 24 hours the animals were euthanized. The following biochemical determinations were made: non-enzymatic antioxidant defenses, defenses enzymatic antioxidants, liver damage markers, liver function markers, inflammatory markers, apoptosis markers and histological analysis. The γ-ORY was able to significantly protect in all analyzed determinations, and can be compared to a drug used for acute fulminant hepatitis. Therefore, we suggest that the γ-ORY can be an alternative for the treatment of acute fulminant hepatitis, as was proved its hepatoprotective effect is associated with its antioxidant capacity, anti-inflammatory and anti-apoptotic effect.

O objetivo geral deste trabalho foi avaliar a influência do uso precoce de antimicrobianos na microbiota intestinal, resposta imune e ocorrência de diarreias em bezerras recém-nascidas. Foram selecionadas 26 bezerras Holandesas distribuídas de acordo com a aplicação (ATB+) ou não (ATB-) de tulatromicina (2,5 mg/Kg - SC) até 12h de vida. Capítulo 1 Este capítulo avaliou a influência do uso precoce de antimicrobiano na sanidade de bezerras holandesas recém-nascidas, por meio do exame clínico geral. As diarreias foram detectadas por sistema de escore e matéria seca (%) nas fezes, além do escore respiratório e palpação externa da região umbilical. O desempenho das bezerras foi determinado pela estimativa do ganho de peso. As bezerras ATB- apresentaram maior frequência de mucosas esbranquiçadas (P=0,066) e inflamações umbilicais no ATB- em D3-5 (P=0,063) e D13-15 (P= 0,066). A frequência de escore fecal 2 e 3 foi semelhante entre os grupos, observando-se pico no D13-15. Os valores médios para matéria seca (%) foram menores no ATB+ no D7-9 (P=0,063) e D27-30 (P=0,084). O agente etiológico das diarreias foi o Cryptosporidium e/ou rotavírus. O ganho de peso diário (GPD) foi igual entre grupos, observando-se intensa redução no GPD em D13-15. Capítulo 2 O objetivo deste capítulo foi avaliar a influência do uso precoce de antimicrobianos na colonização bacteriana intestinal, por meio da detecção de material genético dos principais grupos bacterianos por meio do PCR em tempo real. Não foram observadas diferenças entre os grupos para bactérias totais e C. perfringens. As bezerras ATB- apresentaram maior quantidade de Bifidobacterium, nas fezes no D3-5 (P=0,002) e D7-9 (P=0,018). A população de Lactobacillus também apresentou tendência (P=0,097) para maior número de cópias de DNA no grupo ATB-. Ao contrário, a Escherichia coli apresentou tendência para maiores valores no grupo ATB+ no D20-23 (P=0,052) e D27-30 (P=0,072). Capítulo 3 O objetivo deste capítulo foi avaliar a influência do uso precoce de antimicrobianos no perfil inflamatório de bezerras holandesas recém-nascidas por meio de provas hematológicas, imunológicas, bioquímicas e eletroforéticas. Observou-se tendência para menores valores de hemoglobina (P=0,071), CHCM (P=0,057) e ferro sérico (P=0,051) no D3-5 no ATB-. Neste momento, a frequência de anemias também foi maior no ATB- (P=0,016). O número de neutrófilos (P=0,051) e a produção espontânea de EROs foi maior no ATB-, enquanto o número de linfócitos foi maior no ATB+ (P=0,061) no D7-9. Estes dados são condizentes com as análises imunes, no qual a proporção de populações de mononucleares 1 e 2 expressando o CD62L+ apresentou tendência para maior valor no ATB+ em D3-5 (P=0,098) e D7-9 (P=0,083). Após as diarreias (D13-15), os granulócitos (P=0,043) e mononucleares (P=0,089) das bezerras ATB+ apresentaram maior intensidade de fluorescência para expressão CD62L no D20-23. O grupo ATB+ também apresentou maiores teores de beta-globulina (P=0,057), gama-globulina (P=0,069) e haptoglobina (P=0,032) no D13-15. O uso precoce de tulatromicina influenciou na microbiota intestinal, imunidade inata e ocorrência de doenças no período neonatal. / The general goal of this research was to evaluate the influence of early antimicrobial use in the gut microbiota, immune response and occurrence of diarrhea in neonate heifers. It was screened 26 neonate Holstein heifers distributed according to the application (ATB+) or not (ATB-) of tulathromycin (2.5mg/Kg - SC) from birth until 12 hours of life. Chapter 1 This chapter evaluated the influence of early use of antimicrobial in the health of neonate Holstein heifer by general clinical examination. Diarrheas were detected using score system and fecal dry matter (%), besides of respiratory score and external palpation of navel region. The performance of calves was evaluated by daily weight gain. Heifers ATB- had high frequency of paleness mucous (P=0.066) and umbilical inflammation in ATB- group on D3-5 (P=0.063) and D13-15 (P= 0.066). The frequency of fecal score 2 and 3 was similar between groups, observing peak of diarrhea on D13-15. The mean values of fecal dry matter were low in ATB+ group on D7-9 (P=0.063) and D27-30 (P=0.084). The main etiologic agent of diarrheas was Cryptosporidium and/or rotavírus. The daily weight gain (DWG) was similar between groups, observing intense decrease of DWG on D13-15. Chapter 2 The aim of this chapter was to evaluate the influence of early use of antimicrobial in the microbial gut colonization by detection of genetic bacterial material using real time PCR. It was not found difference between groups for total bacteria and C. perfringens. The calves from ATB- group had high quantity of Bifidobacterium in the fecal material on D3-5 (P=0.002) and D7-9 (P=0.018). The Lactobacillus population had a tendency (P=0.097) to have high number of DNA copies in the ATB- group. On the other hand, Escherichia coli had tendency to high values in ATB+ group on D20-23 (P=0.052) and D27-30 (P=0.072). Chapter 3 The aim of this chapter was to evaluate the influence of early use of antimicrobial in the inflammatory profile of neonate Holstein heifers by hematological, immunological and biochemical tests, besides electrophoresis. It was possible to observe lower values of hemoglobin (P=0.071), CHCM (P=0.057) and serum iron (P=0.051) in ATB- group on D3-5. In this moment, the frequency of anemia also was high in ATB- group (P=0.016). The number of neutrophils (P=0.051) and spontaneous ROSs was high in ATB- group, while the number of lymphocytes was high in ATB+ group (P=0.061) on D7-9. These data were according to immune analysis, where the proportion of mononuclear population 1 and 2 expressing CD62L+ had a tendency for high values in ATB+ group on D3-5 (P=0.098) and D7-9 (P=0.083). After diarrhea (D13-15), granulocytes (P=0.043) and mononuclear cells (P=0.089) showed high fluorescence intensity of CD62L in ATB+ heifers on D20-23. ATB+ group also had high rate of beta globulin (P=0.057), gamma globulin (P=0.069) and haptoglobin (P=0.032) on D13-15. The early use of tulathromycin had influence on gut microbiota, innate immunity and occurrence of disease in the neonatal period.

Orientador: Marco Antônio Alvarenga / Resumo: Na espécie equina, o embrião se movimenta no útero entre os dias 9 e 16 após a ovulação, o concepto apresenta uma forma esférica e se move constantemente no lúmen uterino mediante contrações miometriais, produzidas por estimulação química da vesícula embrionária. O deslocamento embrionário durante este período é essencial para o reconhecimento materno da gestação. Este longo período de estímulo garante que o embrião produza sinais anti-luteolíticos no endométrio, evitando a luteólise. Após 17 dias, a vesícula embrionária cessa a mobilidade e ocorre a fixação em um dos cornos. Durante a mobilidade, o embrião produz prostaglandinas PGE-2, PGF-2α e PGI-2. Se houver uma falha durante a migração embrionária, o reconhecimento materno da gestação pode ser afetado e consequentemente há lise do corpo lúteo, resultando na perda precoce da prenhes. O uso do anti-inflamatório flunixin meglumine imediatamente após a transferência do embrião é amplamente utilizado para prevenir uma reação inflamatória local, a luteólise e a perda embrionária precoce. No entanto, de acordo com a literatura, o ácido mefenâmico causa menos efeitos sobre a mobilidade embrionária e aumenta as taxas de gestação. O objetivo deste estudo foi elucidar o efeito do ácido mefenâmico sobre a mobilidade embrionária em éguas. Foram selecionadas 10 éguas para o estudo. Após a confirmação da gestação com ultrassom transretal, a mobilidade embrionária foi avaliada por ultrassonografia em série (a cada 5 minutos) durante 1 h... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In the equine specie, the embryo moves in the uterus between days 9 and 16 after ovulation, the conceptus presents a spherical shape and moves constantly in the uterine lumen through myometrial contractions, produced by chemical stimulation of the embryonic vesicle. Embryonic displacement during this period is essential for maternal recognition of pregnancy. This long stimulus period ensures that the embryo produces anti-luteolytic signals to the endometrium, avoiding the luteolysis. After 17 days the embryonic vesicle stops the mobility and occurs the fixation in one of the horns. During mobility, the embryo produces prostaglandins PGE-2, PGF, and PGI-2. If there is a failure during embryo migration the maternal recognition of pregnancy may be affected and consequently lysis of corpus luteum, resulting in the early pregnancy loss. The use of the anti-inflammatory flunixin meglumine immediately after the embryo transfer is widely used in order to prevent a local inflammatory reaction, luteolysis, and early embryonic loss. However, according to the literature, mefenamic acid cause less effects on embryonic mobility and increases pregnancy rates. The objective of this study was to elucidate the effect of mefenamic acid on embryonic mobility in mares. There were selected 10 mares for the study. After confirmation of pregnancy with transrectal ultrasound, the embryo mobility was evaluated by serial ultrasonography (every 5 minutes) during 1 hour. This examination was considered t... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by BRUNA RAGASSI (bruna_ragassi@hotmail.com) on 2018-06-28T16:17:37Z No. of bitstreams: 1 Bruna Ragassi .pdf: 2101839 bytes, checksum: 9fec82e4090b7e088c646916c780712d (MD5) / Approved for entry into archive by Cristina Alexandra de Godoy null (cristina@adm.feis.unesp.br) on 2018-06-28T17:14:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ragassi_b_me_ilha.pdf: 2101839 bytes, checksum: 9fec82e4090b7e088c646916c780712d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-28T17:14:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ragassi_b_me_ilha.pdf: 2101839 bytes, checksum: 9fec82e4090b7e088c646916c780712d (MD5) Previous issue date: 2018-05-07 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A qualidade da água é um assunto de crescente preocupação, especialmente devido à presença de fármacos que contaminam o ambiente aquático. Muitos compostos têm sido detectados em efluentes de estações de tratamento de esgoto (ETEs) e águas superficiais em todo o mundo. A ocorrência de fármacos no ambiente pode apresentar efeitos adversos aos ecossistemas aquáticos. O objetivo desse estudo foi avaliar a presença e a concentração dos fármacos diclofenaco, ibuprofeno e naproxeno durante março de 2017 a fevereiro de 2018 em 7 pontos de amostragem, sendo 5 pontos no Córrego das Marrecas - SP e 2 pontos na ETE do município de Dracena - SP. Em cada ponto do córrego foi mensurada a concentração de oxigênio dissolvido (OD), pH, temperatura e sólidos totais dissolvidos (SDT) com auxílio de uma Sonda Multiparamétrica Aquaread AP 2000. Para a identificação dos fármacos, as amostras foram preparadas por microextração líquido – líquido dispersiva e analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência. Foi realizada uma análise descritiva para avaliação dos resultados de média, desvio padrão e coeficiente de variação dos parâmetros físico-químicos. Uma matriz de correlação foi aplicada para avaliar a interação entre os parâmetros físico-químicos da água e os fármacos dois a dois. Os três fármacos foram detectados em todos os pontos da ETE e do córrego. A maior concentração do diclofenaco (0,458 mg.L-1) foi registrada no ponto de lançamento do efluente da ETE no mês de março. Nesse ponto foi verificada a maior concentração de ibuprofeno (0,120 mg.L-1), porém no mês de maio. O naproxeno apresentou a maior concentração (0,040 mg.L-1) no mês de abril na nascente do Córrego das Marrecas e a jusante da ETE. Os parâmetros que apresentaram uma correlação significativa foram: ibuprofeno x temperatura, quanto maior a temperatura, menor a concentração de ibuprofeno. Oxigênio dissolvido x sólidos totais dissolvidos, quanto maior os STD, menor a concentração de OD. Oxigênio dissolvido x temperatura, quanto maior a temperatura menor o OD. Mudanças e melhorias devem ser realizadas para que a remoção desses compostos seja total, amenizando a transferência dessas substâncias para os ambientes aquáticos e diminuindo seus riscos para a saúde humana e para o meio ambiente. / Water quality is a subject of increasing concern, especially due to the presence of drugs that contaminate the aquatic environment. Many compounds have been detected in effluents from sewage treatment plants (ETEs) and surface water worldwide. The occurrence of drugs in the environment may have adverse effects on aquatic ecosystems. The objective of this study was to evaluate the presence and concentration of the drugs diclofenac, ibuprofen and naproxen during March 2017 to February 2018 in 7 sampling points, 5 points in the Stream of Marrecas - SP and 2 points in the TTE of the municipality of Dracena - SP The concentrations of dissolved oxygen (DO), pH, temperature and total dissolved solids (TDS) were measured at each point of the stream using an Aquaread AP 2000 Multiparameter Probe. For drug identification, the samples were prepared by dispersive liquid-liquid microextraction and analyzed by chromatography high efficiency liquid. A descriptive analysis was performed to evaluate the results of mean, standard deviation and coefficient of variation of physical-chemical parameters. A correlation matrix was applied to evaluate the interaction between the physicochemical parameters of water and drugs two to two. All three drugs were detected at all points of the TEE and the stream. The highest concentration of diclofenac (0.458 mg.L-1) was recorded at the point of launch of the ETE effluent in March. At that point, the highest concentration of ibuprofen (0.120 mg.L-1) was observed, but in May. The naproxen had the highest concentration (0.040 mg.L-1) in April at the source of the Stream of Marrecas and downstream of the TEE. In the TEE it was observed that a greater reduction of diclofenac occurred (97.7% in March), followed by ibuprofen (91.7%) and naproxen (43.5%) both in April. The parameters that presented a significant correlation were: ibuprofen x temperature, the higher the temperature, the lower the concentration of ibuprofen. Dissolved oxygen x total dissolved solids, the higher the STD, the lower the OD concentration. Dissolved oxygen x temperature, the higher the temperature the lower the OD. Changes and improvements should be made to the removal of these compounds, minimizing the transfer of these substances to aquatic environments and reducing their risks to human health and the environment.

Fabaceae family is one of the largest botanical families and of wide geographic distribution. Erythrina genus is among the several genus of this family. Erythrina mulungu, popularly known as mulungu, is a native tree of the southeast and northeast of Brazil. In the herbal medicine is considered an excellent sedative to treat anxiety, nervous coughs, agitation psicomotory and insomnia, besides asthma, bronchitis, hepatitis, gengivite, hepatic and esplenics inflammations and fevers. This work had as aim accomplishes the phytochemical investigation of the crude ethanolic extract of the root of E. mulungu, and the pharmacological evaluation of the ethanolic extracts of the root bark, root, stem bark and stem. As result, it has been isolated two substances of the root of E. mulungu, that were identified by infrared, 1H and 13C NMR analyses as Quercitrin and Luteollin, obtained from the chloroformic and Ethyl Acetate phases, respectively. These substances had never been isolated before from this species. All of the tested crude extracts, as well as the chloroformic and ethyl acetate phases of the root exhibited a significantly inhibition of the contortions induced by acetic acid. In the hot plate test, any extract and/or phase presented antinociceptive effect, indicating that the tested extracts and phases don t have central analgesic action. In the first phase of the formalin test, no sample presented significant statistic effect, and in the second phase, all of the extracts and phases induced reduction of the time of latency. In the peritonitis test all of the extracts and the chloroformic phase reduced the number of cells significantly in the peritoneal washed. Finally, we can conclude that the two identified substances are valuable for literature, once this is the first time they were isolated of this species; and the pharmacological tests were showed promising antiinflammatory potential for Erythrina mulungu. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A família Fabaceae é uma das maiores famílias botânicas e de ampla distribuição geográfica. O gênero Erythrina está dentre os vários gêneros desta família. Erythrina mulungu, popularmente conhecida como mulungu, é um arbusto nativo do sudeste e nordeste do Brasil. Na medicina herbária é considerada um excelente sedativo para tratar ansiedade, tosses nervosas, agitação psicomotora e insônia, além de asma, bronquite, hepatite, gengivite, inflamações hepáticas e esplênicas e febres. Este trabalho teve como objetivo realizar a investigação fitoquímica do extrato etanólico bruto da raiz de E. mulungu, com a avaliação farmacológica dos extratos etanólicos da casca da raiz, raiz, casca do caule e caule. Como resultado, foram isoladas duas substâncias da raiz de E. mulungu, que através de análises de infravermelho, RMN de 1H e 13C, e comparação com dados da literaura, foram identificadas como Quercitrina, proveniente da fase clorofórmica; e Luteolina, proveniente da fase Acetato de Etila, substâncias estas nunca relatadas antes na espécie. Todos os extratos brutos testados, assim como as fases clorofórmica e acetato de etila da raiz exibiram uma inibição significativa das contorções induzidas por ácido acético. Já no teste da placa quente, nenhum extrato e/ou fase apresentou efeito significante, indicando que as amostras testadas não têm ação analgésica central. Na primeira fase do ensaio de nocicepção induzida por formalina, nenhuma amostra apresentou resultado estatisticamente significante, e na segunda todos os extratos e fases induziram redução do tempo de latência. No ensaio de peritonite todos os extratos e a fase clorofórmica reduziram significativamente o número de células no lavado peritoneal. Sendo assim, pode-se concluir que as duas substâncias identificadas são de grande valia para literatura, uma vez que esta é a primeira vez em que foram isoladas desta espécie; e os testes farmacológicos se mostraram promissores no que diz respeito ao potencial anti-inflamatório para Erythrina mulungu.