Submitted by Iatã do Carmo Mendonça null (iata.mendonca@hotmail.com) on 2018-11-13T19:26:17Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Iatã Final.pdf: 6444130 bytes, checksum: 11f109faa73fa111dd02175f3cf51eaf (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Carolina Gonçalves Bet null (abet@iq.unesp.br) on 2018-11-21T12:18:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 mendonca_ic_me_araiq_int.pdf: 6335142 bytes, checksum: 3275b085559a59aa0ff58a993812c371 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-21T12:18:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mendonca_ic_me_araiq_int.pdf: 6335142 bytes, checksum: 3275b085559a59aa0ff58a993812c371 (MD5) Previous issue date: 2018-10-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Considerando a variedade de compostos encontrados em produtos de origem natural, o estudo da biodiversidade de um país é de interesse tanto científico quanto econômico. Sendo possível destacar os ecossistemas marinhos que apresentam biodiversidade comparável às florestas tropicais. Devido ao ambiente diferenciado, muitas vezes inóspito, os habitantes do ambiente marinho exibem características bioquímicas diferenciadas, mostrando grande potencial para bioprospecção. A importância do estudo de organismos marinhos na busca por metabólitos secundários bioativos levou à proposta de aprofundar a prospecção química do fungo endofítico Humicola fuscoatra, isolado da alga vermelha Asparagopsis taxiformis. A partir de seu extrato foi possível purificar por técnicas cromatográficas, e identificar 7 substâncias com base nos dados de ressonância magnética nuclear uni e bidimensional (RMN de 1H, RMN de 13C, TOCSY-1D, COSY, HSQC, HMBC) e espectrometria de massas (EM). Dentre estes foram identificados um composto da classe das dicetopiperazinas (P01), duas isocumarinas (P02 e P05), além de 4 substâncias não relatadas na literatura, incluindo três valerolactamas (P03, P06 e P07) e uma cicloexadienona (P04). Além dos compostos purificados por CLAE, foi possível identificar duas substâncias por cromatografia a gás acoplada a espectrometria de massas (CG-EM) sendo elas uma dicetopiperazina e um ftalato. A variedade estrutural dos compostos isolados e a grande quimiodiversidade do extrato de Humicola fuscoatra reforçam a necessidade de se realizar estudos químicos de fungos endofíticos de origem marinha, visto que estes são uma fonte de metabólitos com grande potencial para contribuir na busca por protótipos para novos agentes terapêuticos, além de enfatizar a importância da preservação dos biomas aquáticos, sob constante ameaça por impactos ambientais e mudanças climáticas. / Seeing the variety of compounds obtained from natural products, study a country biodiversity have a scientific interest as well as economic. It is possible to highlight marine ecosystems that present biodiversity comparable to rainforests. Due to the unique environment, often inhospitable, the organisms of the marine environments display uncommon biochemical characteristics, showing great potential for bioprospecting. The importance of the study of marine organisms in the search for bioactive compounds led to the proposal to deepen the prospection of the endophytic fungus Humicola fuscoatra, isolated from the red alga Asparagopsis taxiformis. Its extract led to the purification by chromatographic methods, and identification of 7 compounds based on their NMR spectral data obtained by uni and bidimensional experiments (1H NMR, 13C NMR, TOCSY-1D, COSY, HSQC, HMBC) and mass spectrometry (MS). One diketopiperazine (P01), two isocoumarins (P02 and P05) in addition to four novel compounds, including three valerolactams (P03, P06 and P07) and one cyclehexadienone (P04) were isolated. Moreover another diketopiperazine and one phthalate derivative were identified by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). The structural variety of the identified compounds associated to the rich chemodiversity observed for the Humicola fuscoatra extract reinforces the need to develop additional chemical studies of endophytic fungal strains of marine origin, since they have been providing metabolites with great potential to the development of novel therapeutic agents, in addition to emphasize the importance of aquatic biomes preservation, as they have been continuously threatened by environmental and climate change impacts.

Orientadora: Dulce Helena Siqueira Silva / Banca: Alberto José Cavalheiro / Banca: Taicia Pacheco Fill / Resumo: Considerando a variedade de compostos encontrados em produtos de origem natural, o estudo da biodiversidade de um país é de interesse tanto científico quanto econômico. Sendo possível destacar os ecossistemas marinhos que apresentam biodiversidade comparável às florestas tropicais. Devido ao ambiente diferenciado, muitas vezes inóspito, os habitantes do ambiente marinho exibem características bioquímicas diferenciadas, mostrando grande potencial para bioprospecção. A importância do estudo de organismos marinhos na busca por metabólitos secundários bioativos levou à proposta de aprofundar a prospecção química do fungo endofítico Humicola fuscoatra, isolado da alga vermelha Asparagopsis taxiformis. A partir de seu extrato foi possível purificar por técnicas cromatográficas, e identificar 7 substâncias com base nos dados de ressonância magnética nuclear uni e bidimensional (RMN de 1H, RMN de 13C, TOCSY-1D, COSY, HSQC, HMBC) e espectrometria de massas (EM). Dentre estes foram identificados um composto da classe das dicetopiperazinas (P01), duas isocumarinas (P02 e P05), além de 4 substâncias não relatadas na literatura, incluindo três valerolactamas (P03, P06 e P07) e uma cicloexadienona (P04). Além dos compostos purificados por CLAE, foi possível identificar duas substâncias por cromatografia a gás acoplada a espectrometria de massas (CG-EM) sendo elas uma dicetopiperazina e um ftalato. A variedade estrutural dos compostos isolados e a grande quimiodiversidade do extrato de Humi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Seeing the variety of compounds obtained from natural products, study a country biodiversity have a scientific interest as well as economic. It is possible to highlight marine ecosystems that present biodiversity comparable to rainforests. Due to the unique environment, often inhospitable, the organisms of the marine environments display uncommon biochemical characteristics, showing great potential for bioprospecting. The importance of the study of marine organisms in the search for bioactive compounds led to the proposal to deepen the prospection of the endophytic fungus Humicola fuscoatra, isolated from the red alga Asparagopsis taxiformis. Its extract led to the purification by chromatographic methods, and identification of 7 compounds based on their NMR spectral data obtained by uni and bidimensional experiments (1H NMR, 13C NMR, TOCSY-1D, COSY, HSQC, HMBC) and mass spectrometry (MS). One diketopiperazine (P01), two isocoumarins (P02 and P05) in addition to four novel compounds, including three valerolactams (P03, P06 and P07) and one cyclehexadienone (P04) were isolated. Moreover another diketopiperazine and one phthalate derivative were identified by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). The structural variety of the identified compounds associated to the rich chemodiversity observed for the Humicola fuscoatra extract reinforces the need to develop additional chemical studies of endophytic fungal strains of marine origin, since they have been providin... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Agrarias / Made available in DSpace on 2012-10-17T01:41:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-08T22:03:28Z : No. of bitstreams: 1 107899.pdf: 38972744 bytes, checksum: 68dcc20221f0526f8211176ecfb93cf0 (MD5) / Foram identificados os organismos incrustantes nas valvas de mexilhões Perna perna e realizadas medidas de crescimento dos animais mantidos em sistema de cultivo suspenso na Ilha de Ratones Grande-SC-Brasil, sob condições normais e após tratamento de "castigo". Este consistiu de 4 horas semanais de exposição ao ar dos mexilhões em cultivo, para diminuir o "biofouling". As análises foram acompanhadas durante 6 meses, em 4 lotes, correspondentes às estações do ano. Em cada lote, a cada mês de amostragem, foi analisada a presença dos organismos incrustantes, peso fresco e peso seco em uma corda inteira de mexilhões por tratamento e, em 100 mexilhões de cada corda, foram medidos: comprimento; altura; largura; peso; grau de cobertura das valvas e freqüência dos organismos associados com a identificação taxonômica das espécies presentes. Nos resultados da análise de regressão multivariada interagindo com o tempo ("dummy" variables) o crescimento foi melhor no verão e o tratamento de "castigo" reduziu significativa e qualitativamente (Mollusca, Crustacea, Tunicata, Bryozoa, Hydrozoa, Algas) e quantitativamente o "biofouling" e os organismos associados, causando diminuição significativa na razão de crescimento: 1,2369 mm/mês em comprimento; 0,42402 mm/mês em altura; 0,1362 mm/mês em largura; 0,71394 g/mês em peso. O controle dos organismos incrustantes pode contribuir para garantir o bom desenvolvimento dos mexilhões, reduzindo o trabalho para comercialização, melhorando a aparência do produto final e o lucro do cultivo.

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. / Made available in DSpace on 2012-10-17T07:59:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-08T23:05:48Z : No. of bitstreams: 1 145055.pdf: 1760692 bytes, checksum: faacb278b963edf1252e8f840d9e0652 (MD5)

Made available in DSpace on 2016-08-12T19:15:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AndreiaMPN_DISSERT.pdf: 819538 bytes, checksum: 11aa4da74d4f370279cff73751713879 (MD5) Previous issue date: 2015-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Among the numerous problems in the culture of melon plants, is the dependence of fertilizer inputs. The Lithothamnium (Lit.) is presented as an alternative source of calcium and magnesium. This research studies the growth, yield and quality of melon to the different formulations, doses, method and application intervals (IA) Lit. Three experiments were conducted, two in greenhouse and in the field. In the first experiment cv. melon seeds were used. 'Gladial', planted in plastic containers with 0.5 kg capacity with organic substrate. The treatments were: T1-test .; T2, T3, T4 - Lit. concentrated suspension - SC at doses 10, 20, 30 L / ha, respectively; T5-Nit. amino acid + calcium 5L / ha; T6, T7, T8 - Lit. nanoparticles in the doses 1, 5, 10 kg / ha, respectively; T9-Lit. Powder-micronized, 50 kg / ha and T10-Quantile 10L / ha. The T6 treatment differed statistically by Tukey a 5% probability of other treatments for the variables plant height (PH), fresh weight of shoots (PFPA) and fresh root weight (PFR). In the second experiment the following treatments were used: T1-test .; T2, T3, T4 Lit. nanoparticles; T5, T6, T7 Lit. powder-micronized; T8, T9, T10 Lit. SC, AI 7-7, 10-10, 14-14 DAS, for each formulation, respectively. The results indicated significant differences for IA (14-14 DAS) only for the PSPA and PSR variable, with the best formulations Lit. in nanoparticles and SC for AP variables, PFPA and root length. The experiment III was produced in a commercial area of Dina company, in which the treatments were T1-test. T2, T3 Lit. powder-micronized; T4, T5-Lit SC; T6, T7-Lit nano (FT) and T8, T9-Lit. nano; T10, T11-Lit. SC (Pulv.). The results indicated that the fruits produced showed the oblong fruit shape. All treatments with Lit. were higher than the control for the variable shell thickness. The T6 to T11 treatments differed from the other for the variable firmness, by Scott-Knott test. These are the first data Lit. for melons in Brazilian literature, being necessary experiments with other types of melon. So Lit. provided increment in the evaluated variables and can be used for melons to improve both plant growth as post-harvest fruit quality / Dentre os inúmeros problemas existentes na cultura do meloeiro, está à dependência de insumos fertilizantes. O Lithothamnium (Lit.) se apresenta como uma fonte alternativa de Cálcio e Magnésio. O presente trabalho objetivou estudar o crescimento, produção e qualidade do melão à diferentes formulações, doses, modo e intervalos de aplicação (IA) de Lit. Foram realizados três experimentos, sendo dois em casa de vegetação e um em campo. No experimento I foram utilizadas sementes de melão da cv. Gladial , semeadas em recipientes plásticos com capacidade 0,5 Kg com substrato orgânico. Os tratamentos foram: T1-test.; T2, T3, T4 Lit. suspensão concentrada - SC nas doses 10, 20, 30 L/ha, respectivamente; T5-Nit. de cálcio + aminoácidos 5L/ha; T6, T7, T8 Lit. em nanopartículas nas doses 1, 5, 10 Kg/ha, respectivamente; T9 Lit. Pó-micronizado, 50 Kg/ha e T10-Quantis 10L/ha. O tratamento T6 diferiu estatisticamente mediante Tukey a 5% de probabilidade dos demais tratamentos para as variáveis: altura de planta (AP), peso fresco da parte aérea (PFPA) e peso fresco da raiz (PFR). No experimento II foram utilizados os seguintes tratamentos: T1-test.; T2,T3,T4 Lit. nanopartículas; T5, T6, T7 Lit. pó-micronizado; T8,T9,T10 Lit. SC, com IA 7-7, 10-10, 14-14 DAS, para cada formulação, respectivamente. Os resultados indicaram diferença significativa para IA (14-14 DAS) apenas para a variável PSPA e PSR, sendo as melhores formulações Lit. em nanopartículas e SC para as variáveis AP, PFPA e comprimento de raiz. O experimento III foi produzido em área comercial da empresa Dina, na qual os tratamentos foram T1-test. T2, T3- Lit. pó-micronizado; T4, T5-Lit SC; T6,T7-Lit nano (FT) e T8,T9-Lit. nano; T10,T11-Lit. SC (Pulv.). Os resultados indicaram que os frutos produzidos apresentaram formato do fruto oblongo. Todos os tratamentos com Lit. foram superiores à testemunha para a variável espessura de casca. Os tratamentos T6 a T11 diferiram dos demais para a variável firmeza de polpa, mediante teste Scott-Knott. Estes são os primeiros dados de Lit. em meloeiro na literatura brasileira, sendo necessários experimentos com outros tipos de melão. Então, o Lit. proporcionou incremento nas variáveis avaliadas, podendo ser utilizado em meloeiro para melhorar tanto o crescimento da planta como a qualidade pós-colheita dos frutos

Made available in DSpace on 2016-08-12T19:18:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AndreiaMPN_DISSERT.pdf: 819538 bytes, checksum: 11aa4da74d4f370279cff73751713879 (MD5) Previous issue date: 2015-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Among the numerous problems in the culture of melon plants, is the dependence of fertilizer inputs. The Lithothamnium (Lit.) is presented as an alternative source of calcium and magnesium. This research studies the growth, yield and quality of melon to the different formulations, doses, method and application intervals (IA) Lit. Three experiments were conducted, two in greenhouse and in the field. In the first experiment cv. melon seeds were used. 'Gladial', planted in plastic containers with 0.5 kg capacity with organic substrate. The treatments were: T1-test .; T2, T3, T4 - Lit. concentrated suspension - SC at doses 10, 20, 30 L / ha, respectively; T5-Nit. amino acid + calcium 5L / ha; T6, T7, T8 - Lit. nanoparticles in the doses 1, 5, 10 kg / ha, respectively; T9-Lit. Powder-micronized, 50 kg / ha and T10-Quantile 10L / ha. The T6 treatment differed statistically by Tukey a 5% probability of other treatments for the variables plant height (PH), fresh weight of shoots (PFPA) and fresh root weight (PFR). In the second experiment the following treatments were used: T1-test .; T2, T3, T4 Lit. nanoparticles; T5, T6, T7 Lit. powder-micronized; T8, T9, T10 Lit. SC, AI 7-7, 10-10, 14-14 DAS, for each formulation, respectively. The results indicated significant differences for IA (14-14 DAS) only for the PSPA and PSR variable, with the best formulations Lit. in nanoparticles and SC for AP variables, PFPA and root length. The experiment III was produced in a commercial area of Dina company, in which the treatments were T1-test. T2, T3 Lit. powder-micronized; T4, T5-Lit SC; T6, T7-Lit nano (FT) and T8, T9-Lit. nano; T10, T11-Lit. SC (Pulv.). The results indicated that the fruits produced showed the oblong fruit shape. All treatments with Lit. were higher than the control for the variable shell thickness. The T6 to T11 treatments differed from the other for the variable firmness, by Scott-Knott test. These are the first data Lit. for melons in Brazilian literature, being necessary experiments with other types of melon. So Lit. provided increment in the evaluated variables and can be used for melons to improve both plant growth as post-harvest fruit quality / Dentre os inúmeros problemas existentes na cultura do meloeiro, está à dependência de insumos fertilizantes. O Lithothamnium (Lit.) se apresenta como uma fonte alternativa de Cálcio e Magnésio. O presente trabalho objetivou estudar o crescimento, produção e qualidade do melão à diferentes formulações, doses, modo e intervalos de aplicação (IA) de Lit. Foram realizados três experimentos, sendo dois em casa de vegetação e um em campo. No experimento I foram utilizadas sementes de melão da cv. Gladial , semeadas em recipientes plásticos com capacidade 0,5 Kg com substrato orgânico. Os tratamentos foram: T1-test.; T2, T3, T4 Lit. suspensão concentrada - SC nas doses 10, 20, 30 L/ha, respectivamente; T5-Nit. de cálcio + aminoácidos 5L/ha; T6, T7, T8 Lit. em nanopartículas nas doses 1, 5, 10 Kg/ha, respectivamente; T9 Lit. Pó-micronizado, 50 Kg/ha e T10-Quantis 10L/ha. O tratamento T6 diferiu estatisticamente mediante Tukey a 5% de probabilidade dos demais tratamentos para as variáveis: altura de planta (AP), peso fresco da parte aérea (PFPA) e peso fresco da raiz (PFR). No experimento II foram utilizados os seguintes tratamentos: T1-test.; T2,T3,T4 Lit. nanopartículas; T5, T6, T7 Lit. pó-micronizado; T8,T9,T10 Lit. SC, com IA 7-7, 10-10, 14-14 DAS, para cada formulação, respectivamente. Os resultados indicaram diferença significativa para IA (14-14 DAS) apenas para a variável PSPA e PSR, sendo as melhores formulações Lit. em nanopartículas e SC para as variáveis AP, PFPA e comprimento de raiz. O experimento III foi produzido em área comercial da empresa Dina, na qual os tratamentos foram T1-test. T2, T3- Lit. pó-micronizado; T4, T5-Lit SC; T6,T7-Lit nano (FT) e T8,T9-Lit. nano; T10,T11-Lit. SC (Pulv.). Os resultados indicaram que os frutos produzidos apresentaram formato do fruto oblongo. Todos os tratamentos com Lit. foram superiores à testemunha para a variável espessura de casca. Os tratamentos T6 a T11 diferiram dos demais para a variável firmeza de polpa, mediante teste Scott-Knott. Estes são os primeiros dados de Lit. em meloeiro na literatura brasileira, sendo necessários experimentos com outros tipos de melão. Então, o Lit. proporcionou incremento nas variáveis avaliadas, podendo ser utilizado em meloeiro para melhorar tanto o crescimento da planta como a qualidade pós-colheita dos frutos

A partir de extratos aquosos da esponja marinha Axinella corrugata, coletada na costa sul do Brasil (Santa Catarina), foram purificadas duas lectinas, ACL-I e ACL-II, por cromatografia em coluna de afinidade de matriz de estroma de coelhopoliacrilamida, seguida por gel filtração em Ultrogel AcA 44. Os trabalhos se concentraram, especialmente, no estudo da lectina com maior atividade hemaglutinante, ACL-I. Dentre os eritrócitos testados, ACL-I aglutinou, fortemente, eritrócitos de coelho, além de eritrócitos caprinos e caninos. A atividade hemaglutinante foi inibida por N-acetil-D-glicosamina, N-acetil-D-galactosamina e Nacetil- D-manosamina com igual intensidade, além de N, N’, N”-triacetilquitotriose, o melhor inibidor. Por outro lado, ACL-II aglutinou, preferencialmente, eritrócitos de coelho e caninos, tendo sua atividade hemaglutinante inibida por N-acetil-Dglicosamina, N-acetil-D-manosamina, quitina, N, N’, N”-triacetilquitotriose e fetuína, além de D-galactose, mas não por N-acetil-D-galactosamina. Ambas lectinas foram fracamente inibidas por N-acetil-D-lactosamina. A atividade hemaglutinante mostrouse independente de cátions divalentes e foi estável a uma ampla faixa de temperatura e de pH para ACL-I e para ACL-II. ACL-I foi estável frente à ação de enzimas proteolíticas, mas perdeu 50 % de sua atividade na presença de agentes redutores e desnaturantes. ACL-I é uma glicoproteína e sua massa molecular relativa foi estimada em 82.300 por SDS-PAGE em condições redutoras e não redutoras, e sem desnaturação pelo calor. Ainda, mostrou ser constituída por 6 subunidades monoméricas de 13.900, apresentando pontes de dissulfeto entre as mesmas. Por FPLC, a massa molecular estimada foi de 78.500. Da mesma forma como para ACL-I, ACL-II apresentou apenas uma banda em sistema SDS-PAGE, na ausência de agente redutor e sem desnaturação pelo calor, cuja massa molecular relativa foi estimada em 80.000, enquanto que por FPLC foi estimada em 78.000. O pI de ACL-I foi de 6,3, avaliado por focalização isoelétrica, e a sua composição centesimal de aminoácidos exibiu uma prevalência de glicina, seguida de ácido aspártico/asparagina, ácido glutâmico/glutamina e alanina. Dentre as atividades biológicas testadas, a ACL-I demonstrou atividade quimiotáxica, mitogênica e citotóxica, mas não antioxidante. Os ensaios imuno-histoquímicos mostraram que ACL-I se encontra intracelularmente em grânulos celulares, provavelmente no interior de células esferulosas da esponja marinha. A lectina também mostrou ser uma ferramenta útil na marcação de células transformadas de mama, cólon, pulmão, ovário e bexiga. / Two lectins, ACL-I and ACL-II, were purified from aqueous extracts of marine sponge Axinella corrugata, collected at Atlantic coastline of southern Brazil (Santa Catarina) by rabbit stroma-polyacrylamide gel affinity column, followed by size-exclusion chromatography on Ultrogel AcA 44. The analysis were performed, especially, on the study of lectin with greater hemagglutinating activity, ACL-I. Among the erythrocytes tested, ACL-I agglutinated, strongly, native rabbit, goat and dog erythrocytes, whose hemagglutinating activity was inhibited by N-acetyl-D-glucosamine, N-acetyl-Dmannosamine, N-acetyl-D-galactosamine and N, N’, N”- triacetylchitotriose. On the other hand, ACL-II agglutinated, preferentially, rabbit and dog erythrocytes, with its hemagglutinating activity inhibited by D-galactose, N-acetyl-D-glucosamine, N-acetyl- D-mannosamine, chitin, N, N’, N”- triacetylchitotriose and fetuin, but not by N-acetyl- D-galactosamine. Both lectins were weakly inhibited by N-acetyl-D-lactosamine. The hemagglutinating activity was independent of divalent cations and it was stable at large range of temperature and pH to ACL-I and ACL-II. ACL-I was resistent to enzymatic proteolysis, but lost 50 % of its activity in the presence of reducing or denaturant agents. This lectin presented a relative molecular mass of 82,300 estimated by SDS-PAGE in the presence or absence of 2-mercaptoethanol, without pre-heating, and it is constituted by six monomeric subunits of 13,900, showing disulphide bridges among them. By FPLC the relative molecular mass was 78,500. Similar to ACL-I, ACL-II showed one unique protein band by SDS-PAGE, in the absence of 2-mercaptoethanol and without pre-heating, whose relative molecular mass was estimated as 80,000 and by gel filtration as 78,000. The isoelectric focusing of ACL-I revealed the presence of one unique protein band with pI of 6.3 and the amino acid composition showed a prevalence of glycine, followed by aspartic acid/asparagine, glutamic acid/glutamine and alanine. Among the biological activities analysed, the ACL-I demonstrated chemotactic, mitogenic and cytotoxic activities, but not antioxidant. The immunohistochemical assays revealed that ACL-I is stored in vesicles, probably inside of spherulous cells of the marine sponge. The lectin showed to be a useful tool in the labelling of transformed cells of breast, colon, lung, ovary and bladder.

QUINDERÉ, A. L. G. Propriedades na nocicepção e na inflamação de uma fração polissacarídica sulfatada da alga marinha Acanthophora muscoides. 2011. 81 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, 2011. / Submitted by JOANA BEZERRA (joanabib@yahoo.com.br) on 2013-01-07T21:25:36Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_algquindere.pdf: 2652696 bytes, checksum: 3ea18d2c3a2e31c663a80ef68b105b24 (MD5) / Approved for entry into archive by Érica Barros(ericabarros@ufc.br) on 2013-01-09T17:03:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_algquindere.pdf: 2652696 bytes, checksum: 3ea18d2c3a2e31c663a80ef68b105b24 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-01-09T17:03:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_algquindere.pdf: 2652696 bytes, checksum: 3ea18d2c3a2e31c663a80ef68b105b24 (MD5) / Herein, a sulfated polysaccharidic fraction obtained from the marine alga Acanthophora muscoides (AmII) was evaluated using models of nociception and inflammation. The systemic toxicity of the total sulfated polysaccharides was also assessed. The antinociceptive properties were assayed using the writhing test induced by acetic acid, the formalin and the hot plate test. Swiss mice were treated with AmII (1, 3 or 9 mg/kg; i.v.) 30 min prior to either receiving an injection of 0.8% acetic acid or 1% formalin or prior to a thermal stimulus. AmII reduced the number of acetic acid-induced writhes and licking time in the second phase of the formalin test, but it did not alter the response latency in the hot plate test. The anti-inflammatory properties were assayed using the carrageenan-induced neutrophil migration into the peritoneal cavity and carrageenan- or dextran-induced paw edema models. Wistar rats were treated with AmII (1, 3 or 9 mg/kg; s.c.) 60 min prior to inflammatory stimuli. AmII reduced significantly the neutrophil migration into the peritoneal cavity. In the carrageenan-induced paw edema, AmII did not reduce the edema formation or the neutrophil migration, as assessed by the determination of myeloperoxidase levels in the paw tissue. However, AmII reduced dextran-induced paw edema during the first interval analysed. Furthermore, when AmII (500 μg) was injected (s.c.) into the paw, to verify a possible edematogenic effect, no edema was observed. Additionally, when mice were treated with the total sulfated polysaccharides from A. muscoides (20 mg/kg; i.p.) for 14 days, no consistent signs of systemic damage were observed, as revealed by body weight, liver, kidney, heart, spleen, thymus and lymph node wet weight and by biochemical, hematological and histopathological analyses. In conclusion, AmII has antinociceptive and anti-inflammatory properties and represents a potencial therapeutic agent warranting future studies. / No presente trabalho, uma fração polissacarídica sulfatada obtida da alga marinha Acanthophora muscoides (AmII) foi avaliada através de modelos de nocicepção e inflamação. A toxicidade sistêmica dos polissacarídeos sulfatados totais também foi analisada. A atividade antinociceptiva foi avaliada através dos ensaios de contorções abdominais induzidas por ácido acético, teste da formalina e da placa quente. Camundongos Swiss machos foram tratados com AmII (1, 3 ou 9 mg/kg; i.v.) 30 min antes de receber injeção de ácido acético 0,8% ou formalina 1% ou antes da exposição a um estímulo térmico. AmII reduziu significativamente o número de contorções abdominais induzidas por ácido acético e o tempo lambedura da pata na segunda fase do teste da formalina. No teste da placa quente, AmII não prolongou o tempo de reação dos animais. A atividade antiinflamatória foi avaliada através do ensaio de migração de células através da cavidade peritoneal induzida por carragenana (700 μg/ cavidade) e dos ensaios de edema de pata induzidos por carragenana (500 μg/pata) ou por dextrano (400 μg/pata). Ratos Wistar foram tratados com AmII (1, 3 ou 9 mg/kg; s.c.) 60 min antes do estímulo inflamatório. AmII reduziu significativamente a migração de neutrófilos através da cavidade peritoneal. No ensaio do edema de pata induzido por carragenana, AmII não reduziu a formação do edema e a migração neutrofílica, analisada através da determinação dos níveis teciduais de mieloperoxidase. Entretanto, AmII inibiu o edema de pata induzido por dextrano no primeiro intervalo analisado. Adicionalmente, quando AmII (500 μg) foi injetada (s.c.) na pata, para verificar um possível efeito edematogênico, não foi observado edema. No ensaio de toxicidade subcrônica, camundongos foram tratados diariamente durante 14 dias com os polissacarídeos sulfatados totais de A. muscoides (20 mg/kg; i.p.). Sinais consistentes de dano sistêmico não foram observados, conforme revelado pela avaliação do peso corporal e dos órgãos fígado, rim, coração, baço, timo, e linfonodo e das análises bioquímicas, hematológicas e histopatológicas. Como conclusão, a fração AmII possui propriedades antinociceptiva e antiinflamatória e representa um potecial agente terapêutico, justificando estudos futuros.

Caulerpa racemosa Caulerpaceae belongs to the family, known as the Brazilian Northeast as grampo-do-mar or caviar-verde and is widely distributed in tropical and subtropical regions. In this study, we attempted to investigate the antinociceptive and anti-inflammatory actions of crude methanol extract (CME), phases chloroform, ethyl acetate, n-butanol and an alkaloid isolated from Caulerpa racemosa. The experiments were conducted on Swiss mice (n = 6) using models of nociception and inflammation. To characterize the mechanism responsible for these antinociceptive and antiinflammatory actions of caulerpin, COX inhibitor screening assay kit in vitro. The CME, the phases chloroform, ethyl acetate, n-butanol (100 mg/kg, p.o.) and alkaloid caulerpin (100 μmol/kg, p.o.) reduced the nociception produced by acetic acid in 76.9%, 70.5%, 76.1 %, 47.4% and 78%, respectively. The data show that in the writhing test caulerpin calculated ID50 was 0.24 μmol/kg, and dipyrone, drug standard, 0.12 μmol/kg. The caulerpin and dipyrone showed equivalent potency and efficacy, given that reached maximum efficiency and ID50 in the same order of magnitude (μmol/kg). In the neurogenic phase of the formalin test, treatment with CME, with the phase of chloroform, n-butanol phase and caulerpin reduced nociception generated by the application of formalin, with an inhibition percentage of 51.8%, 31.5% 36.1% and 31.8% respectively. Just a phase acetate didn´t promote inhibition of response at this phase. On the other hand, when we evaluate the inflammatory phase, the phase acetate proved to be the most active, with inhibition of 74.9%, followed by indomethacin and caulerpin with 49.7% and 45.4% inhibition, respectively. In the hot plate test the treatment with phases chloroform, ethyl acetate and caulerpin has significantly increased the latency of the animal on the plate in times of 150, 90-120 and 90-150, respectively. This results suggests that these phases and caulerpin exhibits a central antinociceptive activity, without changing the motor activity (seen in the rotarod test). In addition, caulerpin was able to significantly inhibit capsaicin-induced ear edema in 55.8%, an anti-inflammatory activity in the test of carrageenan-induced peritonitis, significantly inhibiting the number of recruit cells in 48.3%. In the leukocyte count to confirm the activity of caulerpin cell recruitment observed an inhibition effectively mobilizing cellular polymorphonuclear leukocytes (neutrophils) and an increase in monocytes compared to control treated only with carrageenan. In addition, caulerpin was able to inhibit COX-1 significantly, with an inhibition profile similar to that observed for indomethacin at a concentration of 0.2 μM. These results infer that the CME, the phases and caulerpin have antinociceptive activity, the caulerpin features antiinflammatory activity as demonstrated in the experimental peritonitis and ear edema and its mechanism of action is via inhibition of COX-1. / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Alagoas / Caulerpa racemosa pertence à família Caulerpaceae, conhecida no Nordeste brasileiro como grampo-do-mar ou caviar-verde e é amplamente distribuída nas regiões tropicais e subtropicais. Neste trabalho, buscou-se investigar a atividade antinociceptiva e antiinflamatória do extrato metanólico bruto (EMB), das fases clorofórmica, acetato de etila, n-butanólica e de um alcaloide isolado (caulerpina) da alga Caulerpa racemosa. Os experimentos foram realizados em camundongos Swiss (n=6) usando modelos de nocicepção e inflamação. Para caracterizar o mecanismo de ação da caulerpina responsável por sua ação antinociceptiva e antiinflamatória foi utilizado o ensaio de inibição de COX in vitro. O EMB, as fases clorofórmica, acetato de etila, n-butanólica (100 mg/kg, v.o) e o alcaloide caulerpina (100 μmol/kg, v.o) reduziram a nocicepção produzida por ácido acético em 76,9%, 70,5%, 76,1%, 47,4% e 78%, respectivamente. Os dados mostram que, no teste de contorção a DI50 calculada da caulerpina foi de 0,24 μmol/kg, e da dipirona, fármaco padrão, 0,12 μmol/kg. A caulerpina e a dipirona apresentaram potência e eficácia equivalentes, visto que atingiram eficácia máxima e DI50 na mesma ordem de grandeza (μmol/kg). Na fase neurogênica do teste de formalina, o tratamento com o EMB, com a fase clorofórmica, fase n-butanólica e caulerpina reduziram a nocicepção gerada pela aplicação de formalina com uma porcentagem de inibição de 51,8%, 31,5%, 36,1% e 31,8%, respectivamente. Apenas a fase de acetato não promoveu inibição da resposta nesta fase. Por outro lado, quando avaliamos a fase inflamatória, a fase acetato mostrou-se a mais ativa, com inibição de 74,9%, seguido da indometacina e caulerpina com 49,7% e 45,4% de inibição, respectivamente. No teste de placa quente o tratamento com as fases clorofórmica, acetato de etila e caulerpina aumentaram de forma estatisticamente significativa o tempo de latência do animal sobre a placa nos tempos de 150, 90-120 e 90-150, respectivamente. Estes resultados sugerem que essas fases e a caulerpina apresentam uma atividade antinociceptiva central, sem alterar a atividade motora, observado no teste de rota rod . Além disso, a caulerpina foi capaz de inibir significativamente o edema de orelha induzido por capsaicina em 55,8%, apresentando uma atividade antiinflamatória no teste de peritonite induzida por carragenina, inibindo significativamente o recrutamento celular em 48,3%. Na contagem diferencial de leucócitos para confirmar a atividade da caulerpina no recrutamento celular observou-se uma inibição de forma efetiva da mobilização celular de leucócitos polimorfonucleares (neutrófilos) e um aumento de monócitos quando comparados ao controle tratado apenas com carragenina. Além disso, a caulerpina foi capaz de inibir, significantemente COX-1, com um perfil de inibição parecido com o observado para indometacina na concentração de 0,2 μM. Estes resultados inferem que o EMB, as fases e a caulerpina apresentam atividade antinociceptiva, a caulerpina apresenta atividade antiinflamatória como demonstrado nos ensaios de peritonite e edema de orelha e seu mecanismo de ação é via inibição de COX-1.

ABREU, Ticiana Monteiro. Efeitos da Lectina da Alga Marinha Vermelha Solieria filiformis (Kützing) P.W. Gabrielson na Nocicepção e Inflamação em Animais. 2012. 112 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2012. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-07-13T14:06:13Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_tmabreu.pdf: 2823964 bytes, checksum: 547d578a7f85a4ed5fc8d14497be0364 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-07-14T22:50:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_tmabreu.pdf: 2823964 bytes, checksum: 547d578a7f85a4ed5fc8d14497be0364 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-14T22:50:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_tmabreu.pdf: 2823964 bytes, checksum: 547d578a7f85a4ed5fc8d14497be0364 (MD5) Previous issue date: 2012 / The seaweeds are a source of bioactive compounds, which gained importance in pharmacological applications. Among these, there are the lectins, which are (glyco)proteins that bind to specific mono or oligosaccharides. The aim of this study was to isolate the lectin from the red seaweed Solieria filifmoris (LSf), investigate its properties in acute nociception and inflammation, and their possible signs of toxicity in animals. Initially, the LSf was purified by extraction with Tris-HCl buffer 25 mM (pH 7,5), precipitation with ammonium sulfate (70%) and chromatographies in DEAE-cellulose and Sephadex G-100 columns. In the evaluation of the biological activities, animals groups (n=6) were submitted to pretreatment with LSf (1, 3 or 9 mg/kg; i.v.), 30 min before of the nociceptive or inflammatory stimulus. The antinociceptive activity was evaluated in male mice Swiss using the abdominal writhing test induced by acetic acid 0,8%, the formalin test to 2% and the hot plate test. Morphine and indomethacin (5 mg/kg; s.c.) were used as controls. The anti-inflamatory activity in male rats Wistar was assayed through of the peritonitis induced by carrageenan - Cg (700 µg/cav) and of the paw edemas Cg- (700 µg/paw), dextran- (500 µg/paw) or LSf-induced (9 mg/kg) models. Dexamethasone (1 mg/kg; s.c.) was used as control. The LSf edematogenic action (1, 3 or 9 mg/kg) was evaluated by the application of this lectin in the rat paws and by the pharmacological modulation of the edema formed. The toxicity study of LSf (9 mg/kg; i.v.) was carried out through of its application in mice (7 days) and of the analysis of the physical, biochemical and histological parameters. LSf significantly reduced the number of abdominal writhing and the paw licking time in the second phase of formalin test, but didn’t prolong the reaction time in hot plate test. The LSf also inhibited the cell migration in peritonitis induced by Cg and the paw edemas induced by Cg, dextran and LSf. Moreover, LSf showed edematogenic activity, which was inhibited by indomethacin and dexamethasone. Additionally, the LSf administration for 7 days presented no signs of systemic damages, except for the reduced level of alkaline phosphatase and splenomegaly. Concluding, the LSf has antinociceptive, anti-inflammatory (i.v.) and edematogenic (i.pl.) properties and could represent a potential therapeutic agent and a possible tool for the inflammation study. / As algas marinhas são fontes de compostos bioativos, os quais vêm despertando interesse em aplicações farmacológicas. Dentre esses, destacam-se as lectinas, que são (glico)proteínas que se ligam a mono ou oligossacarídeos específicos. O objetivo desse trabalho foi isolar a lectina da alga marinha vermelha Solieria filiformis (LSf), investigar as suas propriedades na nocicepção e na inflamação aguda e seus possíveis sinais de toxicidade em animais. Inicialmente, a LSf foi purificada por extração com tampão Tris-HCl 25mM, pH 7,5, precipitação com sulfato de amônio (70%) e cromatografias em colunas de DEAE-celulose e Sephadex G-100. Na avaliação das atividades biológicas, grupos de animais (n=6) foram submetidos ao pré-tratamento com a LSf (1, 3 ou 9 mg/kg; i.v.), 30 min antes do estímulo nociceptivo ou inflamatório. A atividade antinociceptiva foi avaliada em camundongos Swiss machos através dos ensaios de contorções abdominais induzidas por ácido acético 0,8%, teste da formalina a 2% e da placa quente. Morfina e indometacina (5 mg/kg; s.c.) foram utilizadas como controles. A atividade anti-inflamatória em ratos Wistar machos foi avaliada através dos ensaios de peritonite induzida por carragenana - Cg (700 µg/cav) e de edema de pata induzidos por Cg (700 µg/pata); dextrano (500 µg/pata); ou pela própria LSf (9 mg/kg). Dexametasona (1 mg/kg; s.c.) foi utilizada como controle. A ação edematogênica da LSf (1, 3 ou 9 mg/kg) foi avaliada através da sua aplicação na pata de ratos e da modulação farmacológica do edema formado. O estudo da toxicidade da LSf (9 mg/kg;i.v.) foi realizado através da sua aplicação em camundogos (7 dias) e da análise dos parâmetros físicos, bioquímicos e histológicos. A LSf reduziu significativamente o número de contorções abdominais e o tempo de lambedura da pata na segunda fase do teste da formalina, porém não prolongou o tempo de reação na placa quente. A LSf também inibiu a migração celular na peritonite induzida por Cg e os edemas de pata induzidos por Cg, dextrano e LSf. Ademais, LSf apresentou atividade edematogênica, que foi inibida por indometacina e dexametasona. Adicionalmente, a administração da LSf por 7 dias não apresentou sinais de danos sistêmicos, exceto pela redução no nível de fosfatase alcalina e esplenomegalia. Concluindo, a LSf possui propriedades antinociceptiva, anti-inflamatória (i.v.) e edematogênica (i.pl.), podendo representar um potencial agente terapêutico e uma possível ferramenta para o estudo da inflamação.