Neste trabalho verificamos o efeito da administração de células mononucleares de medula óssea murinas em ratos submetidos a modelos de lesão hepática aguda (por CCl4) e crônica (por ligadura de ducto biliar comum). No modelo de lesão hepática aguda as células foram injetadas através da veia porta 24 horas após a administração de 1,25 mL/kg de CCl4. Nos ratos submetidos à LDB a injeção foi realizada 14 dias após a lesão, através da veia mesentérica. Em ambos casos, foram injetadas 1 x 106 células mononucleraes de medula óssea diluídas em 0,2 mL de PBS. A sobrevida, níveis de ALT e avaliação histológica foram analisados no modelo agudo, 72 horas após lesão. A quantificação da fibrose hepática, ALT, AST, FA, peroxidação lipídica e avaliação histológica foram realizadas no modelo crônico 14 e 28 dias após a lesão. Pode-se observar um aumento na sobrevida de ratos tratados pós IHA, com aumento do número de mitoses no tecido hepático e diminuição nos níveis de ALT 72 horas após a lesão. No modelo de LDB houve uma redução na deposição de colágeno após o tratamento e uma diminuição nos níveis de fosfatase alcalina. Os outros parâmetros não apresentaram alterações. Em ambos estudos pode-se observar a presença das células transplantadas no fígado dos animais. Nossos dados sugerem um efeito benéfico do transplante celular para as duas situações, no entanto, os resultados encontrados indicam mecanismos de ação diferentes destas células em resposta aos danos induzidos. Os resultados deste trabalho juntamente com estudo destes mecanismos podem ajudar no desenvolvimento de futuros protocolos clínicos envolvendo esta abordagem terapêutica. / In this work we verified the effects of bone marrow mononuclear cell transplantation in animal models of acute and chronic liver disease induced by carbon tetrachloride and common bile duct ligation, respectively. In the acute liver damage model, cells were injected through the portal vein of rats 24 hours after damage, induced by 1.25 mL/kg of CCl4. Rats with common bile duct ligation were transplanted with bone marrow cells 14 days after surgery through the mesenteric vein. In both protocols 1 x 106 cells were injected in 0.2 mL of PBS. Survival, ALT levels and histological evaluation were the main endpoints of the CCl4 protocol, while liver fibrosis, ALT, AST, ALP, lipid peroxidation and histologic evaluation were studied in the chronic disease model. In the CCl4 model, we were able to verify an increase in the survival rate of treated animals with a two fold raise in liver mitotic activity and reduced ALT levels 72 hours after damage. In the common bile duct ligation model there was a significant reduction in fibrotic area in cell treated animals. Besides, a significant reduction in alkaline phophatase levels was also observed. Other parameters did not show any differences among the groups. In both protocols it was possible to detect the presence of donor-derived cells in livers from treated rats. Our data suggest a benefit from cell therapy in both situations. Moreover, our findings indicate that these cells may act through different mechanisms in response to different liver insults. The results obtained in this work, combined to further studies may help in developing adequate and safe clinical protocols using cell therapies in liver disease.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Educação Física, Programa de Pós-Graduação em Educação Física, 2017. / Submitted by Raiane Silva (raianesilva@bce.unb.br) on 2017-07-24T17:13:40Z No. of bitstreams: 1 2017_FredericoRibeiroNeto.pdf: 7211326 bytes, checksum: 7218c3e5a7355010affd8eda43acebc4 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-08-25T21:23:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_FredericoRibeiroNeto.pdf: 7211326 bytes, checksum: 7218c3e5a7355010affd8eda43acebc4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-25T21:23:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_FredericoRibeiroNeto.pdf: 7211326 bytes, checksum: 7218c3e5a7355010affd8eda43acebc4 (MD5) Previous issue date: 2017-08-25 / A independência funcional é um dos principais objetivos de um processo de reabilitação de indivíduos com lesão medular (LM) traumática e é influenciada, em proporções diferentes, por um grande número de variáveis. Algumas destas variáveis podem ser modificadas pela atuação de profissionais da saúde, enquanto outras, como idade e nível de lesão, por exemplo, apresentam alterações em virtude do tempo ou pela evolução do trauma. Dentre as variáveis passíveis de serem desenvolvidas e treinadas por exercícios físicos, a força muscular apresenta grande importância, pois interfere positivamente na independência funcional. No entanto, três aspectos ainda precisam ser melhor elucidados para o treinamento adequado dessa variável em um processo de reabilitação. Primeiramente, os estudos que verificaram a relevância da força muscular na independência funcional realizaram correlações e comparações diretas, não sendo possível estabelecer se a força muscular influencia a independência funcional dentro de um conjunto de variáveis preditoras. Outro aspecto a ser considerado nessas análises é a utilização de grupos musculares totalmente preservados nos testes de força de pessoas com paraplegia. Embora os resultados encontrados tenham evidenciado boas associações com a independência funcional, músculos parcialmente comprometidos apresentam grande relevância para a independência funcional. A musculatura de tronco apresenta comprometimento a depender do nível de LM e é fundamental para o equilíbrio postural e estabilização do corpo, necessários à produção de força em situações cotidianas. Em testes de força realizados nos músculos totalmente preservados, o tronco é estabilizado e a transferência dos resultados para as atividades diárias pode apresentar distorções. Por fim, é imprescindível quantificar a força muscular para se estabelecer metas concretas de reabilitação a serem alcançadas nos diversos níveis de LM. Esses três aspectos estão intrinsecamente relacionados aos principais objetivos dessa tese e, para atingi-los, foram conduzidos dois estudos prévios. O primeiro consistiu na elaboração de um protocolo de familiarização para o teste de força no dinamômetro isocinético em pessoas com LM. Neste, demonstrou-se que uma sessão composta por 2 séries com 10 repetições submáximas, em uma classificação de “2” de percepção de esforço, pode ser utilizada como protocolo padrão para a familiarização em um teste de força máxima em exercícios de cotovelo e ombro. O segundo estudo teve como intuito principal adaptar e validar um circuito de habilidades em cadeira de rodas para o Português-Brasileiro. Como não existe padrão ouro para avaliação de independência funcional, normalmente utilizam-se questionários, tais como o de medida de independência em LM (SCIM-III) e os circuitos de habilidade em cadeira de rodas. Assim, foram analisadas a validade de critério e de constructo para elaborar a versão brasileira do circuito adaptado de habilidades em cadeira de rodas (AMWC-Brasil). Com a instrumentação metodológica estabelecida, o objetivo dessa tese foi verificar a capacidade preditiva da força muscular relativa e absoluta na independência funcional e nas habilidades em cadeira de rodas em homens adultos com LM traumática. Foram avaliados 54 indivíduos com LM nos testes de força de ombro (em musculatura totalmente preservada) e de tronco (em musculatura com comprometimentos de força a depender do nível de LM). Para analisar a relação da força muscular com a independência funcional, além do pico de torque absoluto e relativo, foi utilizada a eficiência neuromuscular (ENM) que associa o recrutamento muscular (RMS, root mean square, em μV) com os valores de torque. Como essa variável não foi aplicada em pessoas com LM, recrutou-se um grupo controle de 27 indivíduos para comparação. As variáveis de força e outras preditoras de independência funcional foram inseridas na regressão multivariada stepwise para elaborar equações de regressão com três preditores, considerando os desfechos de independência funcional da SCIM-III e AMWC-Brasil. Dessa forma, foi possível detectar a influência de cada variável preditora nos desfechos de independência. Concluída essa análise, foram calculados pontos de corte com os valores de pico de torque que apresentaram maiores importância para independência funcional. Os testes de força conseguiram discriminar indivíduos com paraplegia alta, baixa e o grupo controle. Constatou-se que as forças relativas, dentre as variáveis de força, apresentaram melhor capacidade preditiva para independência funcional e habilidades em cadeira de rodas. Em seguida, foram estabelecidos pontos de corte de picos de torque relativos de forma que possam ser utilizados como referências na relação com a independência funcional e habilidade em cadeira de rodas. Os resultados ainda identificaram a importância da abdução de ombro nos desfechos estudados, sugerindo-se que o treinamento ocorra com uma compensação de musculaturas antagônicas, evitando desequilíbrios musculares e, assim, reduzindo a possibilidade de lesões nessa articulação. Por fim, a ENM apresentou baixa capacidade preditiva e não foi adequada para analisar as alterações de força e estímulo neural em diferentes níveis de LM. Sugere-se o uso da ENM em pesquisas longitudinais entre os mesmos níveis de LM ou comparando com grupos sem lesão. / Functional independence is one of the main objectives of a rehabilitation process of individuals with spinal cord injury (SCI) and it is influenced by a large number of variables in different proportions. Some of these variables can be modified by health professionals, while others, such as age and level of injury, for example, present changes due to the time or trauma evolution. Among the variables that can be developed and trained, muscle strength is very important, as it interferes positively with functional independence. However, three aspects still need to be better elucidated for the proper training of this variable in a rehabilitation process. First, studies that verified the relevance of muscle strength in functional independence performed direct correlations and comparisons, and it is not possible to establish if the muscle strength influences functional independence within a set of predictor variables. Another aspect to be considered in these analyzes is the use of fully preserved muscles in the strength tests of people with paraplegia. Although the results with preserved muscles showed good associations with functional independence, partially compromised muscles present great relevance for functional independence. Trunk musculature might present compromised functionality depending on the level of injury and it is fundamental for the postural balance and stabilization of the body, necessary for the production of force in daily situations. The trunk is stabilized during strength tests performed on fully preserved muscles and, transferring the results to daily life activities may presents misinterpretation. Finally, it is essential to quantify muscular strength in order to establish rehabilitation goals to be achieved at the different SCI levels. These three aspects are intrinsically related to the main objectives of this thesis and to reach them, two previous studies were conducted. The first one consisted of a familiarization protocol elaboration for strength test in the isokinetic dynamometer in people with SCI. It was demonstrated that a session composed of 2 sets with 10 submaximal repetitions and a perception of effort classified in "2", can be used as standard protocol for familiarization in a maximum strength test in elbow and shoulder exercises. The second study aimed to adapt and validate a wheelchair skills circuit for Brazilian-Portuguese. As there is no gold standard for functional independence assessment, questionnaires such as the Spinal Cord Independence Measure (SCIM-III) and wheelchair skill circuits, are usually used. Thus, the criterion and construct validity were analyzed to elaborate the Brazilian version of the Adapted Manual Wheelchair Circuit (AMWC-Brasil). With the methodological instrumentation established, the aim of this thesis was to verify the predictive capacity of relative and absolute muscle strength in functional independence and wheelchair skills in adult men with SCI. Fifty-four individuals with SCI were evaluated in the shoulder (fully preserved musculature) and trunk (compromised muscles according to SCI level) strength maximum tests. In order to analyze the relationship between muscular strength and functional independence, in addition to the absolute and relative peak torque, neuromuscular efficiency (NME) was used to associate muscle recruitment (RMS) with torque values. As this variable was not applied in people with SCI, a control group of 27 subjects was recruited for comparison. Strength variables and other predictors of functional independence were inserted into the multivariate stepwise regression to elaborate regression equations with three predictors, considering the functional independence outcomes of SCIM-III and AMWC-Brazil. In this way, it was possible to detect the influence of each predictor variable on independence outcomes. After this analysis, cut-off points were calculated with the peak torque values that presented the greatest importance for functional independence. The strength tests were able to discriminate individuals with high and low paraplegia and the control group. The relative forces of shoulder and trunk exercises were the strength variables with the best predictive capacity for functional independence and wheelchair skills. Then, cut-off points of relative peak torque were established so that they could be used as references for functional independence and wheelchair skills. The results also identified the importance of shoulder abduction in the studied outcomes, suggesting that training occurs with an offset of antagonistic muscles, avoiding muscular imbalance, therefore, reducing the possibility of injuries in this joint. Finally, NME presented low predictive capacity and it was not adequate to analyze the changes in strength and neural stimulus at different levels of SCI. It is suggested the use of NME in longitudinal investigations between the same SCI levels or to compare to groups without injury.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ceilândia, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Reabilitação, 2017. / Texto parcialmente liberado pelo autor. Conteúdo liberado: Resumo e Abstract. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-03-20T19:19:42Z No. of bitstreams: 1 2017_PatríciaMartinsFerreira_PARCIAL.pdf: 1179514 bytes, checksum: 7ca30f520a31953e8554e35cfd3b01aa (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-03-20T19:28:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_PatríciaMartinsFerreira_PARCIAL.pdf: 1179514 bytes, checksum: 7ca30f520a31953e8554e35cfd3b01aa (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-20T19:28:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_PatríciaMartinsFerreira_PARCIAL.pdf: 1179514 bytes, checksum: 7ca30f520a31953e8554e35cfd3b01aa (MD5) Previous issue date: 2017-03-20 / INTRODUÇÃO: Os dispositivos de auxílio da função manual são soluções da tecnologia assistiva aliadas da readaptação das pessoas com lesão medular cervical. OBJETIVO: caracterizar a satisfação com o uso dos dispositivos de tecnologia assistiva, que compensam a função manual nas atividades de vida diária (AVD) de pessoas com tetraplegia. MÉTODO: A pesquisa foi realizada em três etapas: estudo de revisão sistemática, pesquisa em fontes de dados secundárias e o estudo observacional analítico, realizado em um centro de referência em reabilitação do estado de Goiás. Participaram 20 indivíduos com lesão medular cervical, média de idade de 36,80 anos (DP = 15,99), que receberam dispositivos para compensação da função manual nas AVD. Como instrumentos da pesquisa foram utilizados um roteiro de entrevista semiestruturado, a Avaliação da predisposição ao uso do dispositivo de Tecnologia Assistiva – Brasil: ATD PA Br; e a Avaliação da satisfação do usuário com a Tecnologia Assistiva de Quebec: B-Quest (2.0). ANÁLISE DOS DADOS: Foram realizadas estatísticas descritivas e distribuições de frequência, análises de comparação entre variáveis do perfil sociodemográfico, dos fatores psicossociais e da satisfação com o uso da tecnologia assistiva, utilizando teste t de Student e análise da variância ANOVA, e análises de correlação de Pearson entre as variáveis investigadas e a continuidade do uso. RESULTADOS: Os participantes do estudo receberam, durante o período investigado na pesquisa, um total 40 dispositivos, utilizados em média por 56,30 semanas. Houve predomínio de dispositivos para auxílio na alimentação e escrita. Foram encontrados resultados significativos nas análises de comparação entre idade e presença de fatores psicossociais positivos (p=0,04), classes sociais e classificação da lesão, com a satisfação (p=0,007; p=0,004). Foi identificada correlação positiva entre o número de semanas de uso do dispositivo e as variáveis alcance de objetivos (r=0,46; p=0,04), autoconfiança (r=0,50; p=0,02), encaixe na rotina (r= 0,60; p=0,006) e conforto em utilizar perto dos amigos (r=0,46; p=0,04). DISCUSSÃO: Os dados encontrados sugerem que a continuidade do uso da tecnologia assistiva está associada ao alcance das expectativas do indivíduo e à satisfação com o dispositivo. CONCLUSÃO: O estudo possibilitou conhecer a satisfação com o uso da tecnologia assistiva das pessoas com tetraplegia e levantar preditores de eficácia e eficiência relacionados ao uso dos dispositivos. Espera-se que os resultados possam contribuir para implantação de protocolos de serviços de tecnologia assistiva centrados no cliente e consolidação de políticas públicas que auxiliem esta população que necessita da tecnologia assistiva para ampliação da sua independência funcional. / INTRODUCTION: The manual function devices are assistive technology solutions combined with the rehabilitation of people with cervical spinal cord injury. OBJECTIVE: To characterize satisfaction with the use of assistive technology devices, which compensate the hand function for activities of daily living (ADL) of people with tetraplegia. METHODS: The study was carried out in three stages: a systematic review, research on secondary data sources and an observational, analytical study performed at a reference center in the state of Goiás. Twenty individuals with cervical spinal cord injury, mean age of 36.80 years (SD = 15.99), who received devices for hand function compensation in ADL. As instruments of the research were used a script of semistructured interview, the Evaluation of predisposition to the use of Assistive Technology device - Brazil: ATD PA Br; and the User Satisfaction Assessment with Quebec Assistive Technology: B-Quest (2.0). DATA ANALYSIS: Descriptive statistics and frequency distributions, comparisons between sociodemographic profile variables, psychosocial factors and satisfaction with the use of assistive technology were performed using Student's t test and ANOVA variance analysis, and correlation analyzes between the variables investigated and the continuity of use. RESULTS: The study participants received, during the period investigated in the research, a total of 40 devices, used on average for 56.30 weeks. There was a predominance of devices to aid in feeding and writing. Significant results were found in the analyzes comparing age and the presence of positive psychosocial factors (p = 0.04), social classes and classification of the lesion, with satisfaction (p = 0.007; p = 0.004). Positive correlation between the number of weeks of use of the device and the goal attainment range (r = 0.46, p = 0.04), self-confidence (r = 0.50, p = 0.02), (r = 0.60, p = 0.006) and comfort in using close friends (r = 0.46, p = 0.04). DISCUSSION: The data suggest that the continuity of the use of assistive technology is associated with the fulfillment of expectations and satisfaction with the device. CONCLUSION: The study made it possible to know the satisfaction with the use of assistive technology of people with tetraplegia and to establish predictors of efficacy and efficiency related to the use of the devices. It is hoped that the results may contribute to the implementation of customer-centric assistive technology services protocols and consolidation of public policies that will assist this population that needs assistive technology to increase their functional independence.

O Exame de Medula Óssea (EMO) permite avaliação citológica da medula, sendo útil no diagnóstico e monitoramento de desordens hematológicas, quando exames mais simples não são suficientes para esclarecer o quadro clínico. Investigação clínica e laboratorial completa deve ser realizada para garantir que a indicação apropriada exista. São requeridas pelo menos duas colorações (Romanowsky e Azul da Prússia), onde devem ser avaliadas a qualidade da amostra, celularidade global da mesma, contagem diferencial de células nucleadas, relação Mielóide/Eritróide bem como cuidadosa avaliação quantitativa e qualitativa das três linhagens hematopoéticas (Granulocítica, Eritróide e Megacariocítica). O EMO fornece informações relevantes no diagnóstico e monitoramento de Leucemias/Linfomas, Mieloma Múltiplo (MM), Síndrome Mielodisplásica (SMD), Aplasia medular, doença metastática na Medula Óssea (MO), infecções em HIV positivos, febre de origem desconhecida e investigação de citopenias. Tendo em vista a classificação da OMS de 2008 para neoplasias mielóides e leucemias agudas cabe ressaltar a importância de unir achados citogenéticos, dentre os quais se destacam atualmente as mutações gênicas FLT3, KIT, NPM1 e CEBPA, aos achados morfológicos, imunofenotípicos, citoquímicos e clínicos, alcançando desta forma marcadores diagnósticos e prognósticos precisos que servem como guia para um tratamento eficaz. Este estudo tem por objetivo identificar as principais indicações para o EMO no HCPA bem como verificar a acurácia das mesmas. Foram analisados 400 pacientes submetidos ao EMO na Unidade de Hematologia do HCPA no período de Janeiro a Dezembro de 2009, tendo sido resgatados todos os resultados do Aspirado de Medula Óssea bem como dados clínicos e laboratoriais relevantes obtidos do prontuário médico. Verificou-se que cerca de metade dos pacientes submetidos ao EMO em nosso centro são para controle de tratamento, o que está de acordo com as características do mesmo, o qual é referência regional para tratamento de doenças malignas. Nos pacientes que realizam o exame com propósito diagnóstico as indicações principais são suspeita de Leucemia e MM. Nos 260 pacientes com suspeita de doença hematológica primária observou-se confirmação da mesma em 61% dos casos, nos 39% restantes foram encontradas alterações qualitativas e/ou quantitativas (29%), MO normal (7%) e amostra insuficiente/diluída (3%). Dos pacientes que fizeram o exame com propósito diagnóstico 20.5% não fizeram biópsia. Com relação à acurácia da indicação, encontrou-se que 7 pacientes (2%) provavelmente não deveriam ter sido submetidos a este procedimento. Ressaltamos a importância de realizar em todos os casos Aspirado e Biópsia de MO simultaneamente uma vez que seus achados devem ser correlacionados e se a Biópsia for omitida o patologista pode não obter a informação máxima requerida. / The Bone Marrow Examination (BME) permits cytological assessment of Marrow, being useful in the diagnosis and monitoring of hematological disorders, when simpler tests are not sufficient to clarify the clinical picture. Are required at least two colors (Romanowsky and Prussian blue), it should be evaluated the quality of the sample, the same overall cellularity, differential count of nucleated cells, myeloid:erythroid (M:E) ratio and carefull evaluation quantitative / qualitative from the three lineages of hematopoietic (granulocytic, erythrocytic and megakaryocytic). The BME provides information relevant to diagnosis and follow-up of leukemia/lymphoma, multiple myeloma (MM), myelodysplastic syndrome (MDS), marrow aplasia, bone marrow (BM) metastatic disease , infections in HIV positive, pyrexia of unknown origin and investigation of cytopenias. The 2008 classification of the World Health Organization (WHO) to the myeloid neoplasms and acute leukemia highlight the importance of join cytogenetic findings - bring out currently FLT3, KIT, NPM1 and CEBPA gene mutations - to the morphologic, immunophenotypic, cytochemical and clinical findings reaching this way accurate diagnostic and prognostic markers that serve as a guide to effective treatment. This study aims to identify the main indications for the BME at HCPA and to verify their accuracy. It were analyzed 400 patients submitted to BME in the Hematology Unit of HCPA in the period January to December 2009, having been rescued the bone marrow aspirate results as well as all relevant clinical and laboratory data obtained from the medical records. It was found that about half of patients submit BME in our center are to control treatment, which agrees with the characteristics of it, it is a regional referral center for treatment of malignancies. In patients who perform the test with diagnostic purpose the main indications were suspected leukemia and MM. In 260 patients with suspected primary hematological disease 61.2% turned out to be the case, the remaining 38.8% had quantitative and/or qualitative BM alterations (29.6%), normal MO (6.5%) and insufficient sample or diluted (2.7%). Of the patients who took the exam with diagnostic purpose 20.5% had no biopsy. With respect to accuracy of indication, it was found that 7 patients (2%) probably should not have undergone this procedure. We emphasize the importance of performing in all cases aspirate and biopsy since their findings must be correlated and furthermore if the biopsy is omitted the pathologist can not get the maximum information required.

A epilepsia atinge cerca de 1% da população mundial, sendo que aproximadamente 30% desses pacientes não respondem ao tratamento medicamentoso. Por sua vez, as células-tronco representam uma esperança de tratamento da epilepsia, visto que têm grande capacidade de proliferação, diferenciação e regeneração de tecidos, podendo restaurar circuitos neurais e restabelecer a excitabilidade neuronal fisiológica. O objetivo deste estudo é verificar se as células mononucleares da medula óssea (CMMO) apresentam potencial terapêutico no controle das crises epilépticas e do dano neuronal progressivo induzido pela epilepsia experimental. Os animais foram injetados com lítio-pilocarpina (127 mg/kg e 60 Mg/kg i.p., respectivamente) para indução de status epilepticus (SE). As crises comportamentais foram classificadas de acordo com a escala de Racine e a duração do SE foi controlada com diazepam (10 mg/kg, i.p., 90 minutos). Os animais controle receberam solução salina. Após 22 dias, o total dos animais foi dividido em quatro grupos: Pilocarpina; Pilocarpina + CMMO, Salina e Salina + CMMO. Os grupos CMMO receberam transplante de células da camada mononuclear da medula óssea, obtidas de camundongos EGFP C57BL/6, via veia caudal (107 células, 200L), e os demais salina. Os animais tratados com pilocarpina foram monitorados por vídeo durante sete dias pré-transplante e outros catorze dias após o procedimento, para observação e computação de crises espontâneas recorrentes (CERs). Ainda, 45 dias depois da injeção das células os animais foram avaliados na tarefa do labirinto aquático de Morris (LAM) e a seguir na tarefa de reconhecimento de objetos, e logo após utilizou-se o teste do eletrochoque máximo para avaliação do limiar convulsivo. Decorridos sete meses do transplante os animais foram sacrificados e foram coletados os hipocampos direito e esquerdo, e amostras de cerebelo, bulbo olfatório, coração, pulmão e fígado para análise da presença de EGFP por PCR. Nossos resultados demonstram que os animais tratados com pilocarpina que receberam injeção de CMMO têm melhor desempenho no LAM quando comparados com o grupo pilocarpina. Esta melhora foi significativa durante o primeiro e último dias de treino, e também durante o teste em todos os parâmetros avaliados: latência, número de cruzamentos e permanência no quadrante alvo. Ainda, as CMMO reduziram o número de crises. Entretanto, na tarefa de reconhecimento de objetos e no teste do eletrochoque máximo não há diferença entre os animais epilépticos tratados ou não com CMMO. Finalmente, não foram detectadas bandas correspondentes à EGFP em nenhuma das amostras estudadas. Nos últimos anos, estudos que buscam tratamentos baseados em células-tronco para as mais diversas doenças neurodegenerativas foram vistos com muito interesse. Este tipo de tratamento pode ser útil também no tratamento da epilepsia crônica, dado o potencial que estas células têm de, independentemente do mecanismo, restaurar o micro ambiente neuronal e re-estabelecer a excitabilidade neuronal fisiológica. Palavras-chave: Epilepsia, células-tronco, testes comportamentais. / Epilepsy affects 1% of the world population and 30% of these patients are refractory to medication now available. Stem cells host hope in the treatment of epilepsy. Given their ability to proliferate, differentiate and regenerate tissues they could fix neural circuits and reestablish the physiological excitability of neurons. This study aimed to verify the therapeutic potential of bone marrow mononuclear cells (BMMC) on seizure control and on progressive neuronal loss induced by experimental epilepsy. Experimental status epilepticus (SE) was induced by lithium-pilocarpine injection (127 mg/kg; ip and 60 mg/kg; ip respectively). Seizures were scored by Racine’s scale. The duration of SE was controlled with diazepan (10mg/kg; ip; 90 minutes after SE onset). Control animals received saline other than pilocarpine. Twenty-two days after SE, rats were randomly assigned into four groups: Pilocarpina; Pilocarpine+BMMC; Control and Control+BMMC. BMMC groups received cell transplantation (obtained from EGFP C57BL/6 mice) via tail vein (107 cells, 200L). The other groups received saline in the same volume. Pilocarpine-treated animals were monitored for the presence of spontaneous seizures for 21 days (7 prior to cell transplant and 14 afterwards).Forty-five days after transplant rats underwent cognitive evaluation in the object recognition task and the Morris water maze (MWM), followed by the maximal electroshock test to evaluate seizure threshold. Rats were sacrificed seven months after transplantation. The hippocampi, cerebellum, olfactory bulb, and samples of the heart, lung and liver were collected in order to verify the presence of EGFP using PCR. Our results demonstrate that pilocarpine-treated rats injected with BMMC perform better in the MWM when compared to pilocarpine only. This difference was significant in the first and last training days and during the probe trial, when we evaluated the escape latency, time in target quadrant and number of crossings. In addition, seizure frequency was reduced by BMMC. Despite that, in the object recognition task and in the maximal electroshock test no difference was found between epileptic rats treated with BMMC or saline. Finally, we didn’t detect the presence of EGFP in any of the analyzed samples. During the last years much has been done to study the application of stem cells in several neurodegenerative diseases. This kind of approach can also be valid in the treatment of chronic epilepsy, given these cells have the potential of, whichever the mechanism might be, restore the neuronal micro environment and reestablish neuronal physiological excitability.

Com o advento dos transplantes surgiu um novo grupo de doenças. Em especial na Dermatologia, além do comportamento atípico de dermatoses já conhecidas, doenças próprias dos transplantes estão sendo estudadas. A população pediátrica vem sendo tratada como uma extensão da população adulta, mas é necessário esclarecer as peculiaridades desta faixa etária. Foi realizado um estudo de coorte prospectivo incluindo pacientes de ambos os sexos com idade até 17 anos que realizaram transplante renal, hepático, ou de medula óssea durante o ano de 2003 em Porto Alegre/Brasil. Foram realizados exames dermatológicos periódicos até o 6º mês após o procedimento e a sua análise foi descrita através da Densidade de Incidência (DI = nº de alterações dermatológicas / nº pacientes-mês X 100). Foram examinados 39 pacientes: 20 transplantes renais, 11 de medula óssea (10 autólogos e 1 alogênico) e 8 hepáticos. As principais alterações dermatológicas foram decorrentes do uso de fármacos (DI=87,18). Individualmente, o transplante renal também apresentou maior densidade de incidência nas alterações por fármacos (DI=104,06); já o transplante de medula óssea nas alterações dos anexos cutâneos (DI=85,37) e o transplante hepático nas alterações vasculares (DI=94,93). Concluiu-se que as alterações dermatológicas em pacientes transplantados pediátricos são freqüentes e com características próprias, tanto quanto ao aspecto clínico como em relação à época de surgimento. Estratégias próprias para esta faixa etária são necessárias para diminuir as co-morbidades e garantir a qualidade de vida das crianças transplantadas, principalmente considerando seu maior tempo de sobrevida.

Orientador: Pedro Felício Estrada Bernabé / Banca: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Osvaldo Magro Filho / Banca: Vinicius Canavarros Palma / Banca: Ariel Lenharo / Resumo: O objetivo deste estudo experimental foi comparar histologicamente o reparo ósseo ao redor de implantes preenchidos por coágulo local com ou sem a associação de centrifugado de medula óssea, por meio de análises histológica e histométrica. Doze coelhos receberam dois implantes osseointegráveis em cada tíbia direita, onde a primeira cortical foi preparada com 5 mm e a segunda, ou cortical inferior, com 3 mm. Os implantes foram estabilizados na cortical inferior com 40 N, sendo um defeito preenchido por coagulo sanguíneo e o outro com coágulo e centrifugado de medula óssea. O sacrifício dos animais foi realizado nos períodos de 7, 21 e 60 dias. As peças foram submetidas a processamento laboratorial de rotina e coradas com vermelho de alizarina e azul de Stevenel. Tanto o grupo coágulo quanto o grupo coágulo e centrifugado de medula, após 60 dias, tiveram seus defeitos preenchidos por tecido ósseo, não apresentando diferença estatística entre os grupos quanto à extensão linear de contato entre tecido ósseo e implante. / Abstract: The objective of this experimental study was to compare histologically the bone repair around implant filled out by local coagulum with or without association of bone marrow centrifuged through histological and histometric analysis. Twelve rabbits received two implants in the right tibia, where the first cortical it was prepared with 5 mm and the second or lower cortical, with 3 mm. The implants were stabilized in lower cortical with 40 N, being one defect filled out by blood coagulum and the other filled out by blood coagulum and bone marrow centrifuged. The sacrifice of the animals was accomplished in the periods of 7, 21 and 60 days. The pieces were submitted to routine laboratorial process and stained with alizarin red and Stevenel's blue. Both groups had their defects filled by bone after 60 days, not presenting statistical difference between the groups about the linear extension of contact between bone tissue and implant. / Doutor

Orientadora: Maria Rita Pacheco / Banca: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Banca: João Morelli Júnior / Banca: Tânia de Freitas Raso / Banca: Angela Cleusa de Fatima Banzatto de Carvalho / Resumo: Este trabalho objetivou analisar a morfologia e a morfometria das regiões cervical, torácica e lombar da medula espinhal de cães. Utilizou-se vinte cães sem raça definida, adultos, sendo dez cães hígidos, com sorologia negativa para toxoplasmose, utilizados como controle (grupo 1) e dez cães soropositivos para toxoplasmose (grupo 2). Para o estudo morfométrico, obtido por meio de um sistema analisador de imagens, os parâmetros analisados foram: área, perímetro, diâmetro máximo, diâmetro mínimo e fator de forma do citoplasma e núcleo dos neurônios. Também se avaliou a espessura da bainha de mielina axonal. Os resultados obtidos foram analisados estatisticamente, mediante o teste t de Student ao nível de 5% de probabilidade. Com relação a morfologia, não se observaram diferenças entre os dois grupos e as características morfológicas se apresentaram de acordo com a literatura. Baseado na morfometria, notou-se que os neurônios dos cães soropositivos eram maiores e mais arredondados em comparação aos do grupo controle, devido a um possível edema celular. Não houve diferença estatística na espessura da bainha de mielina entre os grupos estudados. Conclui-se que não houve alteração morfológica visível, pela microscopia de luz, em ambos os grupos, naquela ocasião. Os resultados morfométricos demonstram que há alteração no tamanho e estrutura dos neurônios, ocorrendo aumento e perda do formato estrelado, nos animais soropositivos, provavelmente devido a um processo de edema celular. Estes resultados sugerem que outras investigações deverão ser feitas para se comprovar a hipótese de que os neurônios destes cães, ainda assintomáticos, perderam a função condutora. / Abstract: The aim of this study was to analyze canine spinal cord morphology and morphometry of cervical, thoracic and lumbar regions. Twenty adult dogs were studied, ten toxoplasmosis seronegative, used as control (group 1) and ten seropositive above 1:256 (group 2). For the morphometry, the parameters were area, maximum and minimum diameter, perimeter and roundness, of neurons’ cytoplasm and nucleus. Axon myelin sheath thickness also was measured. The results were statistically analyzed by Student’s t-test, with a significance level of 5%. There were no morphologic differences between the two groups, and the morphologic characteristics were in agreement with literature. Based on morphometry, neurons of seropositive dogs were greater and had a more rounded shape when compared with control group, due to a possible cellular edema. Statistically significant differences were not found for axon myelin sheath thickness among groups. We can conclude that there was no visible morphologic alteration, at the time of the study but, the morphometric results showed that there were changes in neurons size and shape, occurring size increases and lose of the star shape in seropositive dogs, probable because of cellular edema. These results suggests others studies to prove the hypothesis that neurons of these dogs, still assyntomatics, lost there conductive function. / Doutor

Orientador: João Guilherme Padilha Filho / Banca: Márcia Rita Fernandes Macahdo / Banca: Maria Angélica Miglino / Resumo: Objetivou-se neste trabalho avaliar a importância de intervenção cirúrgica precoce, em cães com discopatia tóraco-lombar (DTL), relacionando o tempo de recuperação (total ou parcial) da função locomotora, com o tempo de paralisia (TP) decorrido até o dia da cirurgia de fenestração tóraco-lombar (FTL), nos cães atendidos no HV-FCAV-UNESP de fevereiro de 2002 a novembro de 2006 . Foram incluídos 81 cães no estudo e classificados nos graus de lesão (GL) medular 1 a 5 e divididos em três grupos: GP (precoce), GI (intermediário) e GT (tardio) conforme o tempo decorrido do dia da paralisa até o dia da FTL. Destes, 74 obtiveram recuperação da função locomotora (RFL). Os cães foram avaliados quanto à correlação do TP com o tempo de recuperação dos movimentos voluntários (RMV) e RFL nos grupos GP, GI e GT, e também separadamente em cada GL. A análise estatística de todos os parâmetros foi realizada através do Teste de Fischer com nível de significância 5%. A raça mais prevalente foi a Teckel, com 78,3 % dos casos. O tempo de RMV em dias foi em média 8,84 l 11 para o GP, 9,18 l 8,6 para o GI e 27,71 l 21,6 para o GT. O tempo de RFL em dias foi em média 21,52 l 23,51 para o GP, 21,23 l 18,09 para o GI e 41,43 l 30,92 para o GT. À análise estatística verificou-se que existe relação entre RMV e TP com alto nível de significância (p = 0,002), mas não entre RFL e TP, pois o valor de p = 0,12. Concluiu-se que o tempo de RMV foi maior para os cães do GT, e o tempo de RFL foi maior, mas não estatisticamente significante, no GT comparado ao GP e GI. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the relevance of early surgical intervention in dogs with thoracolumbar disc disease (TLDD) by relating the recovery period (total or partial) of locomotive function with the duration of the paralysis (DP) till the day of the thoracolumbar fenestration surgery (TLF) for dogs admitted at the Veterinary Teaching Hospital of the FCAVUNESP (HV FCAV-UNESP) from February 2002 to November 2006. It has been included in the study 81 dogs, all classified according to the degree of spinal cord lesion (DL) from 1 to 5 and then divided into early (EG), intermediary (IG) and late (LG) groups, in regard to the time elapsed from the day of the lesion until the day of the TLF. Among these animals, 74 had their locomotive function reestablished (LFR). The dogs had been evaluated for the correlation of DP with the time of recovery of voluntary movements (RVM) and LFR in the EG, IG and LG groups, besides a separate evaluation for each DL. Statistical analysis for all parameters was done by use of the Fischer Test, with 5% significance. Most prevalent breed was the Teckel with 78.3% of cases. Time for RVM had an average of 8.84l11 days for EG, 9.18 l 8.6 for the IG and 27.71l21.6 for the LG. Time for LFR had an average of 21.52 l 23.51 for the PG, 21.23 l 18.09 for the IG and 41.43 l 30.92 for the LG. Statistically was verified a correlation between RVM and DP with high level of significance (p=0.002) but none between LFR and DP, hence p=0.12. It has been concluded that time of RVM was longer for dogs in the LG and that the time of LFR was longer, although not statistically significant, in the LG when compared to the EG and IG. / Mestre

Orientador: Áureo evangelista Santana / Banca: Alessandra Kataoka / Banca: Maria Rita Pacheco / Resumo: O presente estudo teve como objetivos promover a avaliação seqüencial e temporal do quadro leucocitário de cães portadores de linfoma, em remissão, submetidos à alta dose de ciclofosfamida seguida do transplante autólogo de medula óssea, bem como quantificar células CD45+ na medula óssea e sangue periférico dos referidos cães. O transplante consistiu de colheita de MO, preparo e congelamento da bolsa que continha células medulares em suspensão, condicionamento do paciente com 500mg/m2 de ciclofosfamida, infusão das células hematopoéticas e aplicação de fator estimulador de colônia. Para avaliar a recuperação hematopoética pós-transplante, realizaram-se leucograma e análise citométrica do sangue e medula óssea, por 28 dias após o transplante. O nadir médio dos neutrófilos segmentados foi 513 células/mL, e ocorreu 3 a 7 dias pós- TMO. A duração média da neutropenia foi de 3,2 dias. As mais elevadas contagens de leucócitos, para animais do grupo tratado que receberam G-CSF, foram observadas no último dia de sua aplicação, exceto para um animal. Nenhum animal apresentou febre ou sepse após a alta dose de ciclofosfamida. Desta maneira, podese comprovar o fato de que o uso do filgrastim leva a reduções significativas na incidência, severidade e duração da neutropenia. O aumento na quantidade de células CD45+ na medula óssea de cães tratados deveu-se aos efeitos combinados do autotransplante de células hematopoéticas e à ação do G-CSF. / Abstract: The present study has the goal to promote sequential and timing evaluation of leucocytes of dogs bearers of lymphoma, in remission, submitted to the high dose of cyclophosphamide followed by the autologous bone marrow transplant, as well as to quantify CD45+ cells in the bone marrow and blood of the abovementioned dogs. The transplant consisted of MO collect, preparation and freezing of the bag that contained medullar cells, conditioning of the patient with 500mg/m2 of cyclophosphamide, infusion of the hematopoietics cells and application of colonystimulating factor. In order to evaluate post-transplant hematopoietic recovery, leucogram and cytometric analysis of the blood and bone marrow were carried out for 28 days after the transplantation. The medium nadir of the segmented neutrophils was 513 cells/mL, and it occurred / took place 3 to 7 days after TMO. The medium duration of the neutropenia was of 3,2 days. The highest counts of leucocytes, to animals of the treated group that received G-CSF, could be observed on the last day of its application, except for one animal. None of the animals presented either fever or sepse after the high dose of cyclophosphamide. Thus, it can be verified that the use of filgrastim leads to significant reductions on the incidence, severeness and duration of the neutropenia. The increase of CD45+ cells in the bone marrow of the treated dogs was due to combined effects of the autotransplant of hematopoietics cells and to the G-CSF action. / Mestre