O basidiomiceto Moniliophthora perniciosa é conhecido por causar a doença vassoura-debruxa no cacau (Theobroma cacao), responsável por grandes perdas de produção nessa cultura. A população de M. perniciosa apresenta variabilidade devido à sua capacidade de colonização de outras espécies de plantas, o que permite a identificação de biótipos e conseqüente agrupamento de isolados com base no hospedeiro. A caracterização de biotipos do fungo contribui para melhor conhecimento da estrutura populacional e sua dispersão, o que é importante para utilização em programas de melhoramento. Com esse objetivo foi avaliada a variabilidade genética e fisiológica de isolados do fungo correspondentes a três biotipos considerando a análise de taxas de crescimento pelo desenvolvimento micelial em diferentes meios e ambientes de cultivo in vitro, como a incorporação de cisteína, metionina e lisina e das fontes de nitrogênio tartarato de amônio e nitrato de potássio, iluminação, suscetibilidade a fungicidas, compatibilidade somática (SCG Grupo de Compatibilidade Somática), análise de perfis protéicos por SDS-PAGE e seqüenciamento parcial do 28S rDNA. A história evolutiva do patógeno não está registrada em seqüências de genes ribossomais e proteínas totais. Além disso, crescimento e produção de pigmentos são características compartilhadas pelos biótipos, não sendo fatores primários para adaptação do patógeno, porém com provável papel na colonização do hospedeiro. / The Basidiomycete Moniliophthora perniciosa is known as the pathogen for witches\' broom disease in cocoa (Theobroma cacao), responsible for large yield losts. Population of M. perniciosa presents variability due to its ability to colonize other plant species, which allows biotype identification and strains grouping, based upon the host specie. Fungi biotype characterization contributes to the knowledge of population and its dispersion and epidemiological methods, important for breeding programs. To aim the genetic and physiological variability of three strains, characteristics as growing rates, measured by the mycelia spreading at different culture media and different culture conditions in vitro, cysteine, methionine, lysine, nitrogen sources ammonium tartrate and potassium nitrate incorporation, light, fungicide susceptibility, somatic compatibility (SCG), protein patterns by SDS-PAGE and partial sequencing of rRNA 28S region were done. The evolutional history of it is pathogen is not printed into ribosomal genes sequences and total proteins. Besides that, growing and dye production are characteristics shared by the biotypes and can not be a primary adaptation factor but it can play a role in the host colonization process.

Submitted by Jos? Henrique Henrique (jose.neves@ufvjm.edu.br) on 2018-07-09T19:37:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) clara_almeida_guerra.pdf: 1004414 bytes, checksum: 6688d13a6216ca1b6380300e85cdd209 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2018-07-18T13:16:18Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) clara_almeida_guerra.pdf: 1004414 bytes, checksum: 6688d13a6216ca1b6380300e85cdd209 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-18T13:16:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) clara_almeida_guerra.pdf: 1004414 bytes, checksum: 6688d13a6216ca1b6380300e85cdd209 (MD5) Previous issue date: 2017 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / O objetivo deste trabalho foi desenvolver uma metodologia de propaga??o in vitro de Lychnophora pohlii Sch. Bip., envolvendo as etapas de alongamento, enraizamento e pr?-aclimata??o de pl?ntulas cultivadas in vitro. Na etapa de alongamento, no primeiro experimento avaliou-se o efeito dos reguladores de crescimento ANA + BAP, ANA + TDZ e GA3 combinados com os meios MS e MS/2 na altura m?dia e percentual de calos. Ainda nessa etapa, no experimento dois e tr?s, utilizou-se o meio MS e concentra??es de GA3 (0; 0,5; 1; 2 e 4 mg L-1) e ANA (0,1; 0,3; 0,6; e 0,9 mg L-1), e avaliou-se a altura m?dia, percentual de enraizamento, n?mero m?dio de ra?zes e percentual de calos. Na etapa de enraizamento, nos experimento quatro e cinco foram testadas concentra??es de ANA e AIB (1,0 e 2 mg L-1) e quatro tempos de perman?ncia dos explantes no meio (7, 14, 21e 28 dias) e as avalia??es foram realizadas semanalmente quanto ao percentual de enraizamento, n?mero m?dio de raiz, altura m?dia e percentual de calos. Tamb?m nessa etapa, para os experimentos seis e sete, os tratamentos foram constitu?dos de dois tipos de meio (MS/2 e WPM/2) e concentra??es de ANA e AIB (0,1 e 0,5 mg L-1) e avaliados o percentual de enraizamento, n?mero m?dio de ra?zes, altura m?dia e percentual de calos. Na etapa de pr?-aclimata??o, as pl?ntulas foram transplantadas para copos pl?sticos (200 cm3) contendo vermiculita? autoclavada e os tratamentos foram constitu?dos por pl?ntulas cobertas com saco de polietileno intacto, pl?ntulas cobertas com saco de polietileno perfurado e aus?ncia de cobertura, onde se avaliou o percentual de sobreviv?ncia, altura m?dia, comprimento m?dio da raiz principal, mat?ria fresca da parte a?rea, mat?ria fresca da raiz, mat?ria seca da parte a?rea e mat?ria seca da raiz. Na fase de alongamento, a maior m?dia de altura foi verificada em explantes cultivados em meio MS, suplementado com ANA + BAP. A combina??o de ANA + TDZ aumentou o percentual de calo. As concentra??es de 0,9 e 0,1 mg L-1 proporcionaram a maior e menor n?mero m?dio de raiz por tratamento. O menor percentual de calo foi observado na concentra??o de 0,1 mg L-1 de ANA. Na fase de enraizamento a concentra??o de 1,0 mg L-1 de ANA proporcionou maior m?dia de altura e menor percentual de calo e na concentra??o de 2,0 mg L-1 se observou a menor m?dia de altura e o maior percentual de calo. O tempo de perman?ncia de 21 dias possibilitou a maior m?dia de altura dos explantes tratados com ANA e AIB. A concentra??o de 2,0 mg L-1 de AIB contribuiu com o maior n?mero m?dio de ra?zes. O meio WPM/2 suplementado com 0,5 mg L-1 de ANA obteve o maior n?mero m?dio de ra?zes. A maior m?dia para a altura foi encontrada nos explantes cultivados em meio WPM/2. A concentra??o de 0,1 mg L-1 de ANA proporcionou o menor percentual de calo. A concentra??o de 0,5 mg L-1 de AIB proporcionou os maiores valores para o percentual de enraizamento, n?mero m?dio de ra?zes e percentual de calo. Na fase de pr?-aclimata??o, o maior percentual de sobreviv?ncia foi observado no tratamento em que as pl?ntulas foram cobertas com sacos de polietileno intacto. As pl?ntulas cobertas com sacos de polietileno perfurado expressaram maior altura m?dia, comprimento m?dio da raiz, mat?ria fresca e seca da parte a?rea. Nessas condi??es os explantes mostraram-se responsivos quanto aos tratamentos testados, denotando boas perspectivas quanto ao cultivo in vitro dessa esp?cie. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncia Florestal, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2017. / The objective of this work was to develop an in vitro propagation methodology of Lychnophora pohlii Sch. Bip. including the stretching, rooting and pre-acclimatization of seedlings grown in vitro stages. In the stretching stage, the effect of the growth regulators ANA + BAP, ANA + TDZ and GA3 combined with the MS and MS/2 media were evaluated at the mean height and callus percentage. At this stage, the effect of concentrations of GA3 (0, 0.5, 1, 2 and 4 mg L-1) and ANA (0.1, 0.3, 0, 6, and 0.9 mg L-1) were evaluated at the mean height, rooting percentage, mean number of roots and percentage of callus. In the rooting stage, ANA and IBA concentrations (1.0 and 2 mg L-1) and four dwell times of the explants in the medium (7, 14, 21 and 28 days) were tested and rooting percentage, root mean number, mean height and callus percentage were evaluated weekly. Also in this step, the treatments were composed of two types of medium (MS/2 and WPM/2) and ANA and IBA concentrations (0.1 and 0.5 mg L-1). In the pre-acclimation stage, the seedlings were transplanted to plastic cups (200 cm3) containing autoclaved vermiculite?. The treatments were composed by seedlings covered with intact polyethylene bag, seedlings covered with perforated polyethylene bag and seedling uncovered It was evaluated the percentage of survival, mean height, mean length of the main root, fresh shoot matter, fresh root matter, shoot dry matter and root dry matter. In the elongation phase, the highest mean height was verified in explants grown in MS medium, supplemented with ANA + BAP. The combination of ANA + TDZ increased the callus percentage. Concentrations of 0.9 and 0.1 mg L-1 provided the highest and lowest root mean number per treatment, respectively. The lowest percentage of callus was observed for the concentration of 0.1 mg L-1 of ANA. In the rooting stage, the concentration of 1.0 mg L-1 of ANA provided a higher average height and a lower percentage of callus. At the concentration of 2.0 mg L-1, the lowest mean height and the highest percentage of callus were observed. The dwell time of 21 days allowed the highest average height of the explants treated with ANA and AIB. The concentration of 2.0 mg L-1 of AIB contributed with the highest average number of roots. The WPM/2 medium supplemented with 0.5 mg L-1 of ANA obtained the highest mean number of roots. The highest mean height was found in the explants grown on WPM/2 medium. The concentration of 0.1 mg L-1 of ANA provided the lowest percentage of callus. The concentration of 0.5 mg L-1 of IBA provided the highest values for rooting percentage, mean number of roots and percentage of callus. In the pre-acclimatization stage, the highest percentage of survival was observed in the treatment in which the seedlings were covered with bags of intact polyethylene. Seedlings covered with perforated polythene bags expressed higher mean height, root mean length, fresh and dry shoot matter. In these conditions, the explants were responsive to the treatments tested, indicating good perspectives regarding the in vitro cultivation of this species.

Submitted by Katiane Souza (katyane.souza@gmail.com) on 2016-06-05T16:39:15Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4186223 bytes, checksum: 3758454784531cdb854ab4f824e31065 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-05T16:39:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4186223 bytes, checksum: 3758454784531cdb854ab4f824e31065 (MD5) Previous issue date: 2015-12-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Brazil has 47 endemic species of strawberry guava (Psidium spp.), being an important center of genetic diversity of this genus. In the Caatinga biome, the occurrence of the species P. schenckianum Kiaersk, P. guineense Swartz. (most often) and Psidium grandifolium Mart. have been reported. These species have great potential for economic exploitation of the fruit, which is rich in vitamin C and can be consumed fresh or processed in the form of juices, sweets, jams, jellies and ice cream. It also presents outstanding antimicrobial activity, pharmacological and antioxidant as well as essential oils. In addition, strawberry guava are the main sources of resistance to nematode (Meloidogyne enterolobii), which is the main pathogen of guava (P. guajava). This resistance can be transferred to the Paluma guava (cv. GP). However, the strawberry guava is endangered in its natural environment and presents limitations in vegetative propagation by conventional methods, making impossible cloning the resistant plants. Micropropagation is a viable propagation technique of species susceptible to extinction and difficult vegetative propagation. Protocols allowing the cloning of this species for future studies should be improved. Thus, the aim of this research is to develop a protocol for micropropagation of Psidium spp., determining the culture medium, conditions of gas exchange, type of explant and concentration of growth regulators. Seedlings of three access of strawberry guava and cultivar guava paluma (cv.GP) were grown under the following conditions: JADS culture medium, MS and WPM to determine the culture medium; and medium JADS sealed with lids without membrane (SM), one membrane (1M) and two membranes (2M) with carbon dioxide exchange rates (TTCO2) 14; 21 and 25 μL L-1, respectively, to determine the best seedling growth in TTCO2 Psidium spp. After this, different explants of Brazilian guava trees were transferred to regeneration media with different concentrations of indolbutyric acid (IBA): 0, 2.46, 4.92 and 9.84 mM in rooting induction and benzyladenine (BA): 0.0, 2.2 and 4.44 mM; BA + naphthaleneacetic acid (NAA): 2.22 uM BA + 0.054 uM ANA; and 4.44 uM BA + 0.054 uM ANA in regeneration shoots of the following explants: nodal and apical segments in semi-solid culture, stem segments in liquid culture, organogenesis internodal segments, and leaf sections in semi-solid cultureof a P. guineense access and induction of organogenesis in liquid culture using root segments of a P. schenckianum access and three accessions of P. guineense. Seedlings of strawberry guava and cv. GP showed better growth in JADS culture medium. TTCO2 (25 μL L-1) resulted in the growth of seedlings with improved morphophysiological and anatomical characteristics and biosynthesis of compounds of reserve in leaves from both species (P. guineense and P. guajava). This condition is the most indicated for the development in in vitro propagation protocols of Psidium spp. It was not necessary the addition of IBA in the rooting of shoots. Shoots were obtained with and without addition of plant hormones in stem segments, apical segments, nodal and root segments in P. guineense accesses from direct organogenesis, maintaining the same ploidy of the seedlings of this species. In stem segments, the greater number of shoots was observed with 2.22 and 4.44 mM of BA. Shoots were elongated, rooted and acclimatized with 100% survival, showing that the in vitro regeneration protocol established is efficient. This is the first micropropagation protocol established to strawberry guava / O Brasil possui 47 espécies endêmicas de araçazeiros (Psidium spp.), constituindo-se num importante centro de diversidade genética do gênero. No bioma Caatinga, já foram reportadas a ocorrência das espécies Psidium schenckianum Kiaersk., P. guineense Swartz. e P. grandifolium Mart., com maior frequência das duas primeiras. Estas espécies apresentam grande potencial de uso de seus frutos, por serem ricos em vitamina C, podendo ser utilizado no consumo in natura ou industrializado, na forma de sucos, doces, compotas, geleias e sorvetes. Apresenta ainda, marcante atividade antimicrobiana, farmacológica e antioxidante além de possuir grande quantidade de óleos essenciais. Além disso, os araçazeiros são as principais fontes de resistência ao nematoide (Meloidogyne enterolobii), principal patógeno que acomete a goiabeira (P. guajava), a qual pode ser transferida para a goiabeira Paluma (cv. GP). Contudo, os araçazeiros encontram-se em risco de extinção em seus ambientes naturais e apresentam dificuldades na propagação vegetativa pelos métodos convencionais, impossibilitando a clonagem das plantas resistentes. A micropropagação é uma técnica viável para propagação de espécies passíveis de extinção e de difícil propagação vegetativa, devendo-se desenvolver protocolos que possibilitem a clonagem desta espécie para estudos futuros de melhoramento. Dessa forma, objetivou-se com a presente pesquisa desenvolver um protocolo para micropropagação de Psidium spp., determinando o meio de cultura, condições de trocas gasosas, tipo de explante e concentração de fitorreguladores. Plântulas de três acessos de araçazeiros e da cultivar de goiaba Paluma (cv. GP), foram crescidas nas seguintes condições: meios de cultura JADS, MS e WPM para determinação do meio de cultura, e em meio de cultura JADS, vedados com tampas sem membrana (SM), uma membrana (1M) e duas membranas (2M) com taxas de trocas de dióxido de carbono (TTCO2) de 14; 21 e 25 μL L-1, respectivamente, para determinar a melhor TTCO2 no crescimento de plântulas de Psidium spp. Após determinada estas condições, diferentes explantes de araçazeiros foram induzidos a regeneração in vitro, utilizando diferentes concentrações de ácido indolbutírico (AIB) (0; 2,46; 4,92 e 9,84 μM) na indução de rizogênese; benziladenina (BA) (0,0; 2,2 e 4,44 μM) e BA + ácido naftalenoacético (ANA) (2,22 μM BA + 0,054 μM ANA e 4,44 μM BA + 0,054 μM ANA) na regeneração de brotos dos seguintes explantes: segmentos nodais e apicais em meio de cultura semi-sólido, segmentos caulinares em meio de cultura líquido, organogênese de segmentos internodais, e secções foliares em meio de cultura semi-sólido, de um acesso de P. guineense e indução de organogênese em meio de cultura líquido, utilizando segmentos radiculares de um acesso de P. schenckianum e três acessos de P. guineense. As plântulas de araçazeiro e da cv. GP apresentaram melhor crescimento em meio de cultura JADS. Maiores TTCO2 (25 μL L-1), resultaram no crescimento das plântulas com melhores características morfofisiológicas e anatômicas, e na biossíntese de compostos de reservas nas folhas de ambas as espécies (P. guineense e P. guajava), sendo esta condição a mais indicada para o desenvolvimento de protocolos de propagação in vitro de Psidium spp. Não foi necessária adição de AIB no enraizamento das brotações. Foram obtidas brotações com e sem adição de fitorreguladores, em segmentos caulinares, segmentos apicais, nodais e, em segmentos radiculares nos acessos de P. guineense, a partir de organogênese direta, mantendo a mesma ploidia das plantas oriundas de sementes desta espécie. Em segmentos caulinares, maior número de brotações foi observado com 2,22 e 4,44 μM de BA. As brotações foram alongadas, enraizadas e aclimatizadas com 100% de sobrevivência, permitindo inferir que o protocolo de regeneração in vitro estabelecido é eficiente. Este é o primeiro protocolo de micropropagação estabelecido para araçá.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:53:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 727392 bytes, checksum: 517cdc64095df68fed6389220058244a (MD5) Previous issue date: 2005-07-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The nutrition of ornamental plants plays an important role in the production of quality seedlings and flowers. In general, studies focusing on nutrition of such plants are rare, particularly for orchids, which represent a wide field for new research. On this background, our study investigated mainly: the performance of in vitro-grown orchid plants in different chemical media compositions; the effect of the addition of organic and/or chemical fertilizers; and lime addition to the growth medium. In vitro cultivation was evaluated regarding the plant response to different mineral doses and compositions in the medium. The Knudson C medium and that of Novais or NPK fertilizers were used as nutrient sources for this purpose. Two studies were realized in the experiments in pots: one tested different organic fertilizers (a commercial and another homemade one, the latter composed of castor bean meal, bonemeal and ashes) or mineral fertilizers (Peter s or Ca nitrate), applied individually or jointly. The second tested the application of lime doses to the growth medium of plants of the genus Epidendrum. Results obtained in vitro showed that the simple use of NPK fertilizers in culture medium for orchids is feasible; maximal seedling growth was achieved with doses of 5 g L -1 . The simultaneous application of homemade organic and Peter s fertilizers led to a significant increase in plant growth, while separate applications of the two fertilizers did not result in significant differences between them. The commercial organic fertilizer provoked B toxicity symptoms in the plants, as demonstrated in the tissue analysis. Lime application resulted in a higher total dry matter yield and number of leaves per plant. There was however no significant difference in plant height, resulting in plants with shorter internodes, which indicates a probable Zn deficiency. / A nutrição de plantas ornamentais é um importante fator para a obtenção de mudas e flores de qualidade. De modo geral, estudos de nutrição para essas plantas são escassos, em particular para as orquídeas, que apresentam um amplo campo para novas pesquisas. Sendo assim, os principais objetivos deste trabalho foram: estudar o comportamento de plantas de orquídeas cultivadas in vitro, submetidas a diferentes composições químicas de meios; estudar o efeito da adição de fertilizantes orgânicos e, ou, químicos e a de calcário no substrato de cultivo. Para os cultivos in vitro, foram realizados estudos com o objetivo de avaliar as respostas das plantas a diferentes doses e composições minerais no meio, sendo, para isso, utilizados os meios Knudson C e de Novais, ou fertilizantes NPK como fontes de nutrientes. Em experimentos em vasos, foram realizados dois estudos: um testando diferentes fertilizantes orgânicos (um comercial e outro doméstico, sendo o último composto por torta de mamona, farinha de ossos e cinzas), ou, minerais (Peters® ou nitrato de Ca), aplicados individualmente ou em conjunto, e um outro testando de doses de calcário no substrato de cultivo de plantas do gênero Epidendrum. Os resultados obtidos in vitro mostraram ser viável a simples utilização de fertilizantes NPK no meio de cultivo para orquídeas, sendo o crescimento máximo das mudas obtido com a dose de 5 g L-1. A aplicação simultânea dos fertilizantes orgânico doméstico e Peters® levou a um significativo aumento no crescimento das plantas, sendo que a aplicação isolada destes dois fertilizantes não resultou em diferenças significativas entre eles. O fertilizante orgânico comercial proporcionou sintomas de toxicidade por B nas plantas, comprovados pela análise de tecidos. A aplicação de calcário resultou em incremento na produção de matéria seca total e no número de folhas de plantas, entretanto, sem diferenças significativas em termos de altura de plantas, o que resultou em plantas com entre-nós mais curtos, indicando uma provável deficiência de Zn.

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV15MA150.pdf: 821511 bytes, checksum: 342265f1c5a506595b83f7a903d958b0 (MD5) Previous issue date: 2015-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / New plantings of vineyards bump in low productivity and poor quality of the grapes produced, due to the action of complex factors that are not well understood. Among these, the viruses are a major barrier to the development and highly profitable production in viticulture. By in vitro techniques it is possible to produce plants and multiply matrices of high quality vine plant. Cryotherapy, based cryopreservation methods, it is a promising tool for obtaining high frequency regenerating plants free of viruses in a short time. The paper proposes the development of a protocol for efficient recovery viruses vine plants through cryotherapy methods. The experiments were conducted in Biotechnology EPAGRI Laboratory, Experimental Station of Lages. The selection of genotypes was through the presence of different viral species (GLRaV-1, GLRaV-3, GFKV; GFLV and GVA) by serological ELISA test. The study is divided into two complementary chapters with information that follows the chronological order. The first aims to assess the establishment and multiplication in vitro and ex vitro acclimatization of grape genotypes through nodal segments cultivated in five formulations of culture media without added growth regulators. In Chapter I, in addition to selecting the best saline formulation that will be used in Chapter II for the grape varieties, is apreserntada an updated review of the topics covered at work, with information available to the present. In the second chapter, cryotherapy different methods investigated for vitis were applied, with the objective of defining a standard protocol for the eradication of viruses in potential genotypes. In vitro propagation of the rootstock IAC 571-6 and cultivars Poloskei Muskotaly and Bordô through nodal segments provide high rates of regeneration and rooting, suggesting no need to use growth regulators that promote rooting or specific phase for rooting. Percentage of high survival were obtained in the acclimatization of IAC 571-6 rootstock and cvs. Poloskei Muskotaly and Bordô. Considering all variables, the formulation that provided the best growth and development of root and shoot better and in vitro multiplication of IAC 571-6 vine rootstock and cv. Poloskei Muskotaly was Roubelakis composition and for the cv. Bordô were to Roubelakis and Zlenko formulations. The results of cryotherapy experiments to cultivars in question reaffirm the specificity of genotypic responses to cryogenic procedures. Rates between 6% and 10% were achieved for regenerating rootstock IAC 571-6 through encapsulation methodologies, dehydration and vitrification, respectively. Propagules regenerating after freezing in liquid nitrogen are anomalous and after small seedling growth from corrosion of tissues and lack of evolution cresmimento. Oxidative damage observed in the investigated protocols may be unfeasible cryopreserved tissues, even if part of the exposed tissues are viable in apparent liquid nitrogen is low or no regeneration of tissues. Understanding the degree of sensitivity of materials to vitrificantes solutions is the first step towards optimization of vitrification protocols in this study dehydration for 15 minutes in ½ PVS2 solution followed by 30 minutes PVS2 showed the best results for the rootstock IAC 571-6 / Novos plantios de vinhedos esbarram na baixa produtividade e na má qualidade das uvas produzidas, devido à ação de fatores complexos que ainda não estão bem esclarecidos. Dentre esses, as viroses constituem um importante obstáculo para o desenvolvimento e a produção altamente rentável na viticultura. Por meio de técnicas in vitro é possível produzir e multiplicar plantas matrizes de videira de alta qualidade fitossanitária. A crioterapia, baseada em métodos de criopreservação, torna-se uma ferramenta promissora para obtenção de alta frequência de plantas regenerantes livres de viroses, em curto espaço de tempo. O trabalho propõe o desenvolvimento de um protocolo eficaz para recuperação de plantas de videira virosadas através de métodos de crioterapia. Os experimentos foram conduzidos no Laboratório de Biotecnologia da EPAGRI, Estação Experimental de Lages. A seleção de genótipos foi por meio da presença de diferentes espécies virais (GLRAV-1; GLRAV-3; GFKV; GFLV e GVA), através do teste sorológico ELISA. O estudo foi dividido em dois capítulos complementares, com informações que seguem a ordem cronológica. O capítulo I tem por objetivo avaliar o estabelecimento e multiplicação in vitro e a aclimatização ex vitro de genótipos de videira, por meio de segmentos nodais cultivados em cinco formulações de meios de cultura sem adição de reguladores de crescimento. Esse capítulo, além da seleção da melhor formulação salina que será utilizada no capítulo II para as cultivares de videira, é apresentada uma revisão atualizada dos temas abordados no trabalho, com informações disponíveis até o presente. No segundo capítulo, diferentes métodos de crioterapia investigados para Vitis foram aplicados, com o objetivo de definir um protocolo padrão para a erradicação de viroses em genótipos potenciais. A propagação in vitro do porta-enxerto IAC 571-6 e das cultivares Poloskei Muskotaly e Bordô por meio de segmentos nodais proporcionam elevadas taxas de regeneração e enraizamento, sugerindo que não há necessidade de utilização de reguladores de crescimento que promovam o enraizamento ou de fase específica para o enraizamento. Elevados percentuais de sobrevivências foram obtidas na aclimatização do porta-enxerto IAC 571-6 e das cvs. Poloskei Muskotaly e Bordô. Considerando todas as variáveis analisadas, a formulação que proporcionou o melhor crescimento e desenvolvimento da parte aérea e radicular e melhor multiplicação in vitro do porta-enxerto de videira IAC 571-6 e da cv. copa Poloskei Muskotaly foi a composição Roubelakis e, para a cv. Bordô foram às formulações Roubelakis e Zlenko. Os resultados dos experimentos de crioterapia para as cultivares em questão reafirmam a especificidade das respostas dos genótipos aos procedimentos criogênicos. Taxas entre 6 % a 10 % de regenerantes foram atingidas para o porta-enxerto IAC 571-6 por meio das metodologias de encapsulamento-desidratação e vitrificação, respectivamente. Propágulos regenerantes após o congelamento em nitrogênio líquido são anômalos e após pequeno crescimento da plântula apresentam oxidação dos tecidos e não possuem evolução de crescimento. Os danos oxidativos observados nos protocolos investigados podem ter inviabilizado os tecidos criopreservados, mesmo que parte dos tecidos expostos em nitrogênio líquido aparente viabilidade, ocorre baixa ou nula regeneração de tecidos. A compreensão do grau de sensibilidade de materiais para soluções vitrificantes é o primeiro passo para otimização dos protocolos de vitrificação, no presente estudo a desidratação por 15 minutos em solução ½ PVS2 seguido de 30 minutos em PVS2 apresentou os melhores resultados para o porta-enxerto IAC 571-6

Submitted by Cibele Nogueira (cibelenogueira@ufgd.edu.br) on 2016-05-18T19:15:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) GISELESOUSA.pdf: 887544 bytes, checksum: 13afd905cf042644a131924f5ef22690 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-18T19:15:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) GISELESOUSA.pdf: 887544 bytes, checksum: 13afd905cf042644a131924f5ef22690 (MD5) Previous issue date: 2013-11-22 / In vitro propagation of orchids has been used for the production of commercially important plants and for the conservation of endangered species, while the storage of orchid seeds preserves genetic variability. Objectives of this research were: 1 – to study the effect of the concentration of 6-benzylaminopurine (BAP) (0.0, 0.1, 1.0 or 2.0 mg L-1), fruit maturation (60, 90, 120, 150, 180 or 210 days after pollination - DAP) and the three culture time (15, 30 or 45 days) in the asymbiotic seed germination of Brassavola tuberculata, from three types of pollination (hand self-pollination, hand cross-pollination or natural pollination); 2 - evaluate the initial in vitro stages of development of B. tuberculata, in response to the use of 6- benzylaminopurine (BAP) (0.0 , 0.1, 1.0 or 2.0 mg L- 1), fruit maturation (60, 90, 120, 150, 180 or 210 days after pollination - DAP) and the three types of pollination (hand self-pollination, hand cross-pollination or natural pollination); 3 - evaluate the storage time and agar concentrations in vitro germination of B. tuberculata and 4 - to evaluate the effect of different concentrations of MS medium, the initial growth of B. tuberculata. The research was performed at the Laboratory for in vitro cultivation of the Faculty of Agricultural Sciences (FCA) of the Federal University of Grande Dourados (UFGD), during the period from august 2010 to 2013. Were used for the research of germination and development in vitro, seeds of B. tuberculata from different types of pollination and ages of maturation, and for the growth, plants 180 days after sowing. The cultures were kept in a growth room at 25±2ºC and photoperiod of 12h, in completely randomized design. Being evaluated germination percentage; number of protocorm, protocorm percentage at different stages of development and number of dead protocorms; survival percentage, number of tillers and roots, length of leaf and greater root mass fresh plant. Every variables and vegetal attributes were submitted to variance analysis and of the regression. The hand self-pollination produced seeds that did not germinate in vitro, whereas the seeds produced by hand crosspollination or natural pollination, produced seeds that germinated in vitro, when the fruits were harvested after 150 DAP. Germination percentages above 90% were recorded in fruits from the hand cross-pollination or natural pollination, harvested at 210 DAP and cultured for more than 30 days. The germination of B. tuberculata is more linked to the maturation of the fruit, since there was little influence of exogenous supply of cytokinin on seed germination in vitro. The number of protocorm of hand cross-pollination and natural pollination is higher in the fruits collected at 180 DAP. The percentage of protocorms in stage 1 (% P1) formed by hand cross-pollination and natural pollination is higher in fruit collected at 150 DAP. The percentage of protocorms in stage 4 (%P4) is higher in fruits collected at 150 DAP derived from natural pollination, and at 210 DAP, those derived from hand cross-pollination. The use of liquid and solid media favors the germination of B. tuberculata. Seeds of B. tuberculata stored for 90 days resulted in germination above 70%. The plants of B. tuberculata, have higher initial growth when cultured on MS medium with concentration between 70 and 75 %. Use of MS 50% medium is promising when the objective is the in vitro multiplications of B. tuberculata. / A propagação in vitro de orquídeas tem sido utilizada para produção de plantas comercialmente importantes e para a conservação de espécies ameaçadas de extinção, enquanto que o armazenamento de sementes de orquídeas preserva a variabilidade genética. Foram objetivos desta pesquisa 1 – estudar o efeito da concentração de 6-Benzilaminopurina (BAP) (0,0; 0,1; 1,0 ou 2,0 mg L-1), da maturação dos frutos (60, 90, 120, 150, 180 ou 210 dias após polinização - DAP) e de três tempos de cultivo (15, 30 ou 45 dias) na germinação assimbiótica de sementes de Brassavola. tuberculata Hook., oriundas de três tipos de polinização (autopolinização manual, polinização cruzada manual ou polinização natural); 2 - avaliar os estádios de desenvolvimento inicial in vitro de B. tuberculata, em resposta à utilização de 6-Benzilaminopurina (BAP) (0,0; 0,1; 1,0 ou 2,0 mg L-1), da maturação dos frutos (60, 90, 120, 150, 180 ou 210 dias após polinização - DAP) e de três tipo de polinização (autopolinização manual, polinização cruzada manual ou polinização natural); 3 - avaliar o tempo de armazenamento e as concentrações de ágar na germinação in vitro de B. tuberculata e 4 – avaliar o efeito de diferentes concentrações do meio MS, no crescimento inicial de plantas de B. tuberculata. Os trabalhos foram realizados no Laboratório de cultivo in vitro da Faculdade de Ciências Agrárias (FCA) da Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD), durante o período de agosto de 2010 a agosto de 2013. Foram utilizadas para os estudos de germinação e desenvolvimento in vitro, sementes de B. tuberculata provenientes de diferentes tipos de polinização e épocas de maturação, e para o crescimento, plantas com 180 dias após a semeadura. As culturas foram acondicionadas em sala de crescimento, com temperatura média 25±2ºC, fotoperíodo de 12h, em delineamento experimental inteiramente casualizado. Sendo avaliados porcentagem de germinação; número de protocormos, porcentagem de protocormos em diferentes estádios de desenvolvimento e número de protocormos mortos; porcentagem de sobrevivência, número de perfilhos e de raízes, comprimento da maior folha e da maior raiz, massa fresca da planta. Todas as variáveis e atributos vegetais foram submetidos às análises de variância e de regressão. A autopolinização manual produziu sementes que não germinaram in vitro, enquanto que as sementes produzidas por polinização cruzada manual ou polinização natural produziram sementes que germinaram in vitro quando os frutos foram colhidos após 150 DAP. Porcentagem de germinação superior a 90% foram registradas em frutos oriundos de polinização cruzada manual e polinização natural, colhidos aos 210 DAP e cultivados por período superior a 30 dias. A germinação de B. tuberculata está mais vinculada ao estádio de maturação dos frutos uma vez que houve pouca influência do fornecimento exógeno de citocinina sobre a sua germinação in vitro. O número de protocormos da polinização cruzada manual e da polinização natural é maior em frutos coletados aos 180 DAP. A porcentagem de protocormos em estádio 1(%P1) formada pela polinização cruzada manual e polinização natural é maior em frutos coletados aos 150 DAP. A porcentagem de protocormos em estádio 4 (%P4) é maior em frutos coletados aos 150 DAP oriundos de polinização natural e, aos 210 DAP, naqueles oriundos de polinização cruzada manual. O emprego dos meios líquido e sólido favorecem a germinação de B. tuberculata. Sementes de B. tuberculata armazenadas por 90 dias apresentam germinação acima de 70%. As plantas de B. tuberculata apresentam maior crescimento inicial quando cultivadas em meio MS com concentração entre 70 e 75%. A utilização do meio MS 50% é promissor quando o objetivo for a multiplicação in vitro de B. tuberculata.

Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2016-09-27T14:25:05Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Roseane Maidana Moreira.pdf: 1526932 bytes, checksum: 24ec9be5cb36029c41e9e55dad9e3488 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2016-09-28T17:10:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Roseane Maidana Moreira.pdf: 1526932 bytes, checksum: 24ec9be5cb36029c41e9e55dad9e3488 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-28T17:10:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Roseane Maidana Moreira.pdf: 1526932 bytes, checksum: 24ec9be5cb36029c41e9e55dad9e3488 (MD5) Previous issue date: 2014-03-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A oliveira (Olea europaea L.) pertence a família Oleaceae, a qual tem suas espécies distribuídas em regiões tropicais e temperadas do mundo. O cultivo é crescente e demanda tecnologias para a instalação de pomares. Dentre as técnicas de propagação utilizadas para a oliveira, a micropropagação se destaca, pois permite conservar o germoplasma e produzir mudas de alta qualidade e sanidade. No entanto verifica-se a carência de protocolos eficientes para o estabelecimento in vitro de várias cultivares de oliveira. Assim sendo, este trabalho teve como objetivo desenvolver protocolos eficientes para a redução da oxidação e estabelecimento in vitro de oliveira. O experimento foi realizado no laboratório de Propagação de Plantas Frutíferas, Departamento de Fitotecnia da Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel, da Universidade Federal de Pelotas, (UFPel/RS), no período de março de 2012 a outubro de 2013. O artigo 1 consistiu no estabelecimento in vitro de seis cultivares de oliveira (Ascolano, Leccino, Maria da Fé, Coratina, Arbequina e Frantoio) em diferentes meios de cultura (MO e WPM) e épocas de coleta dos explantes (outono, inverno, primavera e verão). No artigo 2, o objetivo foi avaliar o efeito da presença e ausência de luz fornecida à planta matriz, bem como concentrações de zeatina (0, 2, 4 e 8 mg.L-1) no estabelecimento in vitro. Em ambos os artigos foram avaliadas as variáveis referentes à porcentagem de oxidação; contaminação fúngica e bacteriana; sobrevivência e estabelecimento dos explantes in vitro. Os resultados obtidos demonstraram que no artigo (1) houve maior oxidação fenólica em explantes de oliveira coletados no inverno, a primavera é indicada para a coleta de explantes da cultivar Maria da Fé, enquanto as cultivares Ascolano e Arbequina apresentam maior taxa de estabelecimento in vitro no outono. O meio de cultura WPM promoveu maior porcentagem de estabelecimento de explantes de oliveira. No artigo (2), plantas matrizes em condições de ausência de luz são as mais indicadas no estabelecimento in vitro das cultivares de oliveira estudadas. A concentração de 2 mg.L-1 de Zeatina favorece a sobrevivência de explantes de oliveira 'Arbequina'. As concentrações (0, 4 e 8 mg.L-1 ) de Zeatina não apresentam diferença entre as cultivares Leccino e Arbequina para a variável contaminação fúngica. / The olive tree (Olea europaea L.) belongs to Oleaceae family, which has its species distributed in tropical and temperate regions of the world. The cultivation is increasing and demand technologies for facilities orchards. Among the techniques used for olive propagation, micropropagation stands out, because it preserves germplasm and produce high qualitu seedling and sanity. However there is a lack of efficient protocols for in vitro in several varieties of olive property.This study aimed to develop efficient protocols to reduce oxidation and in vitro establishment of olive. The experiment was conducted in the Fruit Tree Propagation Laboratory, Crop Science Department, Faculty of Agronomy Eliseu Maciel, Universidade Federal de Pelotas (UFPel/RS) from March 2012 to October 2013. The Article 1 consisted of establishing in vitro six olive cultivars (Ascolano, Leccino, Maria da Fé, Coratina, Arbequina e Frantoio) in different culture media (MO e WPM) and explants sampling times (fall, winter, spring and summer). In Article 2, the objective was to evaluate the presence and absence of light provided to the mother plant and Zeatin concentrations (0, 2, 4 and 8 mg.L-1) in vitro establishment. In both articles the variables were evaluated variables concerning the percentage of rust, fungal and bacterial contamination, survival and establishment of explants in vitro were evaluated. The results showed that in the Article 1 there was a higher phenolic oxidation in olive explants collected in winter, spring is indicated for collecting explants of cultivar Maria da Fé, while Ascolano and Arbequina cultivars have a higher rate of in vitro establishment in autumn. The WPM promoted a higher rate of establishment of olive explants. In Article (2), mother plants in conditions of absence of light are the most suitable in vitro establishment of olive cultivars studied. The concentration of 2 mg.L-1 Zeatin promotes survival explants of olive 'Arbequina'. Concentrations (0, 4 and 8 mg.L-1) showed no Zeatin difference between Leccino and Arbequina cultivars for variable fungal contamination.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:22:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Georgea_Soares_Figueiredo.pdf: 728913 bytes, checksum: b001e52b25d78faa26942f0b6de87631 (MD5) Previous issue date: 2009-03-06 / The Japanese quince (Chaenomeles sinensis Koehne) can be used as rootstocks for quince, pear, loquat trees and as cultivar canopy. The use of quince by seeds, as rootstocks for other quince species and cultivars, has been shown viable. However, the inconvenient in the sexual reproduction is obtaining of not uniform seedlings, since it is not desired in the commercial plantations establishment due gene segregation. The seedlings production technology for Japanese quince by vegetative propagation is not defined, due low percentage of rooting. Thus, the tissue culture presents as a viable alternative in the clonal orchards development or seedlings commercial production. Experiments were performed to determine a protocol of in vitro establishment this specie, where was tested the disinfectant with chlorine appropriate for vegetal material, as well as cytokinin, flask cover, salt concentration of culture medium, culture medium, BAP cytokinin concentration and light quality. It could be conclude that calcium hypochlorite disinfectant is effective in the explants disinfestations, and the BAP provides better results in the establishment than 2iP and Zea cytokinins. Sealed flasks with cotton instead aluminum, reduce the explant oxidation and the original salt concentration of MS medium promotes better explant establishment. The WPM medium showed higher results than MS medium and BAP at 1mg.L-1 or 2mg.L-1 concentration promotes an increase in the number and length of sprouting, as well as the use of red light instead white and green light. / O marmeleiro japonês Chaenomeles sinensis Koehne pode ser utilizado como porta-enxerto para marmeleiros, pereiras, nespereiras e também como cultivar copa. O uso deste marmeleiro via seminífera, como porta-enxerto para outras espécies e cultivares de marmelo, tem se mostrado viável, o inconveniente na reprodução sexual é a obtenção de plântulas desuniformes, o que não é desejado no estabelecimento de plantios comerciais, devido à segregação gênica. A tecnologia de produção de mudas para o marmeleiro Japonês por propagação vegetativa não está ainda definida, devido a baixa porcentagem de enraizamento, sendo assim a cultura de tecidos apresenta-se como uma alternativa viável na formação de pomares clonais ou produção comercial de mudas. Foram realizados experimentos a fim de determinar um protocolo de estabelecimento in vitro desta espécie, onde foi testado o desinfestante a base de cloro adequado a desinfestação do material vegetal, bem como o a citocinina, tipo de vedação dos frascos, concentração salina do meio de cultura, meio de cultura, concentração da citocinina BAP e qualidade de luz. A partir dos resultados obtidos pode-se concluir que o desinfestante hipoclorito de cálcio é eficiente na desinfestação dos explantes, e a citocinina BAP promove melhores resultados no estabelecimento, comparada as citocininas 2iP e Zea. Frascos vedados com algodão, ao invés de alumínio, reduzem a oxidação dos explantes e o meio MS na sua concentração salina original promoveu melhor estabelecimento dos explantes. O meio WPM demonstrou resultados superiores ao meio MS e a citocinina BAP na concentração de 1mg.L-1 ou 2mg.L-1 promove aumento no número e comprimento das brotações, assim como a utilização de luz vermelha quando comparada a luz branca e a luz verde.

Neisseria meningitidis B libera vesículas de membrana externa, conhecidas pela sigla OMV. Essas possuem os mesmos componentes da membrana externa da bactéria e podem ser utilizadas como antígenos em vacinas contra a meningite B. As vesículas devem, também, expressar proteínas da membrana externa (OMP) e proteínas reguladoras do íon ferro (IRP). O objetivo deste trabalho é estudar a cinética de crescimento bacteriano, consumo das fontes de carbono e nitrogênio - especialmente os limitantes de crescimento ? e produção de OMV visando melhorar a produção desse antígeno. Realizaram-se cultivos descontínuos em biorreator, com duração de 20 h, empregando meio de Catlin com limitação de ferro e modificações nas concentrações de lactato, aminoácidos e glicerol. As condições do cultivo foram: 4,2 L de meio, temperatura de 36°C, pressão de 0,5 atm, vazão de ar 1 L/min, agitação entre 250-850 rpm, controle de oxigênio dissolvido em 10% de saturação. Constatou-se que o lactato é a principal fonte de carbono limitante, embora somente se tem a hipótese de que o glicerol age como protetor mecânico. O ácido L-glutâmico é a principal fonte de nitrogênio consumida durante o cultivo. As OMV começaram a ser liberadas quantitativamente no início da fase estacionária de crescimento. Sendo que a melhor condição para a produção de OMV, valor 162,3 mg/L, é aquela em que as concentrações iniciais de lactato e aminoácidos foram duplicadas, 15,00 g/L e 2,93 g/L respectivamente. Através da análise do padrão eletroforético, confirmou-se a presença das principais proteínas de superfície, inclusive das IRPs. A integridade da OMV foi constatada por microscopia eletrônica. Assim, o antígeno obtido mostra-se passível de utilização na composição de vacina anti-meningocócica. / Neisseria meningitidis B liberates outer membrane vesicles known by the abbreviation OMV. These vesicles have the same components of the outer membrane of the bacteria and may be used as antigens in vaccines against meningitis B. The vesicles must also express outer membrane proteins (OMP) and iron regulated proteins (IRP). The aim of this paper is to study bacterial growth kinetics, carbon and nitrogen sources consumption ? specially those which limit growth ? and OMV production, seeking to improve the production of this antigen. Discontinuous bioreactor cultivations were carried out for a period of 20 hours in Catlin medium with iron restriction and modifications in lactate, amino acid, and glycerol concentrations. Cultivation conditions were: 4,2 L of medium, temperature at 36ºC, 0,5 atm, air flow rate of 1 L/min, agitation between 250-850 rpm, and dissolved oxygen control at 10% of saturation. It was verified that lactate is the main limiting carbon source, although there is just a hypothesis that glycerol acts as a mechanic protector. The L-glutamic acid is the main source of nitrogen consumed during the cultivation. The OMV started to be liberated quantitatively at the beginning of the stationary phase of growth. The best condition for production of OMV, value 162,3 mg/L, is that where the initial concentrations of lactate and amino acids were duplicated, 15,00 g/L and 2,93 g/L, respectively. Through an analysis of the electroforetic pattern, the presence of the main surface proteins was confirmed, including the IRPs. The integrity of the OMV was testified by electronic microscopy. So, the antigen thus obtained may be used in the antimeningococcal vaccine composition.

Com o intuito de gerar subsídios para melhoria do processo de produção de Metarhizium anisopliae, o presente estudo teve como principais objetivos, determinar os efeitos de inibidores de proteinases de soja no crescimento vegetativo, esporulação e virulência do fungo e comparar a produção, viabilidade e virulência dos conídios produzidos em diferentes tipos de arroz e aditivos. A adição de 5 g.L-1 de inibidores de proteinases semi-purificados de soja ou 0,5 g.L-1 de inibidor purificado do tipo Kunitz no meio de cultura ME resultou em grande aumento na esporulação (de duas a 75 vezes) sem afetar a viabilidade dos conídios de quatro isolados (ESALQ-1037, IBCB348, E9, F20) de M. anisopliae. A presença destes inibidores de proteinases também alterou a morfologia dos conídios produzidos em ME. Os mecanismos responsáveis por estas alterações fisiológicas não foram determinados, mas provavelmente estejam associados à ação anti-nutricional, diminuindo a absorção protéica e estimulando a esporulação. Os conídios produzidos no meio com adição de 0,5 g.L-1 de inibidor de proteinase do tipo Kunitz ou com 2,5 g.L-1 de albumina de soro bovino e no meio BDA apresentaram virulência superior aos conídios produzido no meio ME sem inibidores. Quando o inibidor de proteinase do tipo Kunitz foi adicionado à suspensão de conídios do fungo antes da pulverização de lagartas de Diatraea saccharalis, a eficiência de controle foi 35,1%, inferior ao apresentado pelos demais tratamentos sem a presença deste inibidor. Nos estudos para determinação dos melhores tipos de arroz para produção de M. anisopliae, tentou-se correlacionar à produção de conídios com características destes substratos como valor nutricional, teor de resíduos de agrotóxicos e densidade de microorganismos. O arroz parboilizado foi responsável pela maior produção de conídios (4,38 x 109 conídios.g-1). Este tipo de arroz apresentou teor de proteína bruta menor do que a maioria dos arrozes e o maior teor de umidade (41,3% após a autoclavagem). Além disto, os grãos após autoclavagem ficaram menos gelatinosos e mais soltos, o que facilita o processo de produção do fungo. Enquanto que os arrozes dos tipos brancos polidos, canjicão e integral ficaram pegajosos e formaram grumos, o que provavelmente deve acarretar em menor superfície de desenvolvimento para o fungo. O segundo melhor arroz, o canjicão, com produção de 3,42 x 109 conídios.g-1, teve a maior quantidade de fungos contaminantes nos grãos crus. Quantidades intermediárias de conídios foram produzidas pelos arrozes branco polido irrigado, de terras altas e orgânico. O integral foi o que resultou na menor quantidade de conídios (1,53 x 109 conídios.g-1), sendo o mais rico em minerais, proteína bruta e extrato etéreo. Nenhum dos aditivos (farelo de soja, grãos de soja partidos, extrato de soja, peptona de soja, inibidores de proteinases de soja semipurificados e purificado do tipo Kunitz, polpa cítrica e levedura) resultou em aumento na produção de conídios em comparação com o arroz parboilizado sem aditivos. Os conídios produzidos em todos os arrozes e aditivos apresentam viabilidade superior a 99%. As vantagens da utilização do arroz parboilizado levando-se em consideração custo, facilidade de manuseio e produtividade são discutidas. / In order to optimize the production process of Metarhizium anisopliae, the present study aimed to determine the effects of soybean proteinase inhibitors on growth, sporulation and virulence of the fungus and to compare yield, viability and virulence of M. anisopliae conidia produced in different types of rice and additives. The addition of 5 g.L-1 of semi-purified soybean proteinase inhibitor or 0.5 g.L-1 of Kunitz-type inhibitor purified on the culture medium ME resulted in large increases in sporulation (two to 75 times) without affecting the viability of conidia of four M. anisopliae isolates (ESALQ-1037, IBCB348, E9, F20). The presence of proteinase inhibitors altered morphology of conidia produced in ME. Mechanisms responsible for these physiological changes in the fungus have not been determined, but it is probably associated to an anti-nutritional action, reducing the absorption of protein and stimulating sporulation. Spores produced in the medium with the addition of 0.5 g.L-1 Kunitz-type inhibitor purified or 2.5 g.L-1 of bovine serum albumin (BSA) and PDA medium showed higher virulence of conidia produced in ME without inhibitors. When the Kunitz-type inhibitor was added to conidial suspension of the fungus before spraying larvae of Diatraea saccharalis, control efficiency was 35.1% lower than that presented in other inhibitor-free treatments. In the studies aiming to determine the best types of rice for production of M. anisopliae, we tried to correlate production of conidia with characteristics of these substrates such as nutritional content, pesticide residues and density of microorganisms. The parboiled rice was responsible for greater production of conidia (4.38 x 109 conidia.g-1). This type of rice showed crude protein content lower than most rice and the highest moisture content (41.3% after autoclaving). Besides that, grains became less gelatinous and loose after autoclaving, and these feature favored fungus production. While types of polished white, brown rice and course (broken) rice grain were sticky and formed clumps, providing a smaller area for fungus development. The second best rice, course rice grain, with production of 3.42 x 109 conidia.g-1, had the highest amount of fungal contaminants in raw grains. Intermediate amounts of conidia were produced by white irrigated polished rice, upland rice and organic rice. The brown rice was the kind that resulted in fewer conidia (1.53 x 109 conidia.g-1), being the richest in minerals, protein and lipids. None of the additives (soybean meal, soybean parties, soy extract, soy peptone, semi-purified soybean proteinase inhibitor, Kunitz-type inhibitor purified, citrus pulp and yeast) resulted in increased production of conidia compared to parboiled rice without additives. Conidia produced in all types of rice and additives presented viability greater than 99%. The advantages of the use of parboiled rice taking into consideration the cost, easy handling and productivity are discussed.