Normalmente, após a cobertura ou a inseminação artificial de éguas, ocorre uma endometrite aguda transitória em resposta ao sêmen e bactérias no útero. O objetivo deste estudo foi verificar se o transporte espermático e a intensidade da reação inflamatória uterina, 2h, 4h ou 24h após a inseminação com sêmen resfriado, são influenciados pela concentração espermática na dose inseminante. Para tal, foram utilizadas 192 éguas em cio, com folículo dominante ≥35 mm, sem crescimento bacteriano e livres de PMNs aos exames uterinos complementares. As éguas foram distribuídas aleatoriamente em grupos e inseminadas com 20 ml contendo 100x106 (n=30), 500x106 (n=27) ou 1000x106 (n=31) espermatozóides diluídos em solução de 3 ml de plasma seminal e 17 ml de leite desnatado, refrigerado e armazenado por 18 a 22 horas, ou infundidas com 20 ml de plasma seminal (n=33), ou com 20 ml de leite desnatado (n=38). As éguas foram abatidas duas, quatro ou 24h após as inseminações ou infusões. O grupo controle (n=33) não recebeu nenhum tratamento. Os ovidutos foram separados do útero, sendo útero e ovidutos lavados separadamente com PBS. Uma amostra do lavado de cada oviduto foi examinada para contagem de espermatozóides e uma amostra de cada lavado uterino foi utilizada para contagem de leucócitos. Após as lavagens, foi retirada uma amostra de endométrio para exame histopatológico. As éguas inseminadas e infundidas apresentaram reação inflamatória significativamente maior que as éguas do grupo controle, no decorrer das 24 horas. A reação inflamatória foi significativamente maior nas éguas inseminadas que nas infundidas. A reação inflamatória apresentou correlação com a concentração espermática (r=0,389). O número de éguas apresentando espermatozóides nos ovidutos não foi diferente nos grupos inseminados. Concluiu-se que componentes da dose inseminante provocam uma resposta inflamatória, sendo esta tanto mais severa e de resolução mais rápida, quanto maior for a concentração espermática. Por outro lado, até as quatro horas pós-inseminação, o transporte espermático independe da concentração espermática utilizada.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:03:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O sistema imune inato é a primeira linha de defesa contra infecções. A erradicação de microorganismos invasores pelos neutrófilos, monócitos e macrófagos depende em grande parte da capacidade fagocítica e posterior geração de espécies reativas de oxigênio (EROs), assim como produção de óxido nítrico (NO). Neste trabalho avaliouse a produção de EROs e NO em monócitos e neutrófilos do sangue periférico, em um mesmo indivíduo durante o tratamento da sepse. Casuística e métodos: Foi coletado sangue em heparina sódica de 50 pacientes sépticos nos dias zero (D0), até 48h após o evento sepse. Foi realizada uma segunda coleta em 30 destes pacientes sete dias (D7) após a primeira. A produção de EROs e de NO foi mensurada por citometria de fluxo, utilizando-se como substrato DCFH-DA e DAF-FM-DA, respectivamente. Os dados foram adquiridos e analisados no programa CellQuest. Nos ensaios foi observada a produção espontânea e após os estímulos com S. aureus e P. aeruginosa. Resultados: A produção de EROs no dia 0 em monócitos e neutrófilos foi maior nos pacientes sépticos comparado aos controles sadios nas três situações avaliadas: sem estímulo, estimulado com P.aeruginosa e S. aureus. A produção EROs em monócitos e neutrófilos no DO não apresentou correlação com idade, gênero e os escores APACHE II e SOFA. Não houve diferença na produção de EROs e NO entre pacientes com sepse grave e choque séptico. Também não houve diferença na produção de EROs entre pacientes que sobreviveram e que evoluíram para óbito no D0. Os monócitos dos pacientes apresentaram diminuição da produção de EROs no dia 7 em relação ao dia 0 em todas as situações analisadas, enquanto essa diminuição nos neutrófilos ocorreu somente na situação estimulada com S. aureus. Nas coletas de seguimento em relação ao desfecho clínico dos pacientes na alta hospitalar (mortalidade ou sobrevida), os monócitos dos pacientes que sobreviveram apresentaram diminuição da produção de EROs no dia 7 em relação ao dia 0 em todas as situações avaliadas. Nos neutrófilos essa diminuição ocorreu nas situações estimuladas com P. aeruginosa e S. aureus. A produção de NO em monócitos no dia 0 foi maior nos pacientes sépticos comparado aos controles sadios nas três situações avaliadas: sem estímulo, estimulado com P. aeruginosa e S.aureus enquanto que nos neutrófilos isso ocorreu somente na situação sem estímulo. A produção de No em monócitos e neutrófilos no DO não apresentou correlação com idade, gênero e os scores APACHE II e SOFA. Não houve diferença na produção de NO entre pacientes com sepse grave e choque séptico. Também não houve diferença na produção de NO entre pacientes que sobreviveram e que evoluíram para óbito no D0. A produção de NO nos monócitos mostrou-se aumentada no D0 comparado ao D7 na situação sem estímulo. Nos neutrófilos isso ocorreu nas condições sem estímulo e estimulado com S. aureus. Nas coletas de seguimento em relação ao desfecho clínico dos pacientes na alta hospitalar (mortalidade ou sobrevida), os monócitos e neutrófilos dos pacientes que sobreviveram apresentaram uma diminuição de NO no dia 7 em relação ao dia 0 nas situações sem estímulo e estimulado com S. aureus. Conclusão: O aumento da produção de EROs e NO no início da sepse contribui para uma resposta eficaz do hospedeiro para erradicação do patógeno do organismo, mas a persistência exacerbada desses mediadores pode ter impacto negativo na sobrevida do paciente com sepse. / The innate immune system is the first line of defense against infections. The eradication of invading microorganisms by neutrophils, monocytes and macrophages depends largely on the phagocytic ability and subsequent generation of reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO). This study evaluates the production of ROS and NO by monocytes and peripheral blood mononuclear cells, during the treatment of sepsis. Blood samples from 50 septic patients, in which the event of sepsis was diagnosed until 48 hours, was collected as day zero (D0) and a second sample from 30 of these patients was collected seven days (D7) after the defining event of sepsis. The production of ROS and NO was measured by flow cytometry, using DCFH-DA and DAF-FMDA as substrates, respectively. Data were acquired and analyzed using CellQuest software. Spontaneous production of ROS as well ROS generation after stimulation with S. aureus and P. aeruginosa was observed. The production of ROS by monocytes and neutrophils on D0 was higher in septic patients when compared to the healthy controls in three situations: without stimulation, stimulated with P. aeruginosa and stimulated with S. aureus. This production was not correlated with age, gender, APACHE II and SOFA scores. There were no differences in ROS and NO production among patients with severe sepsis and septic shock. Also, there were no differences in ROS production between survivors and patients who died. Comparative production of ROS on D7 in relation to D0 demonstrated a decrease in the ROS production by monocytes of septic patients, in the three conditions evaluated. When the same analysis was run to neutrophils, a decrease in ROS production was observed in D7 when cells were stimulated with S. aureus. Monocytes of patients who survived showed a decrease in ROS production on D7 compared to D0 in all situations evaluated. This decrease occurred in neutrophils stimulated with P. aeruginosa and S. aureus. NO production in monocytes on D0 was higher in septic patients compared to the healthy controls in three situations evaluated: without stimulation, stimulated with P. aeruginosa and S. aureus. A decrease in NO production in neutrophils occurred only when cells were not stimulated. NO production in monocytes and neutrophils in the DO did not correlate with age, gender, APACHE II and SOFA. There was no difference in NO production among patients with severe sepsis and septic shock. There was also no difference in NO production among patients who survived and who died on D0. The production of NO on D7 increased significantly when compared to D0 in monocytes without stimulation. In neutrophils this increase in the production occurred in the conditions without stimulation and when cells were stimulated with S. aureus. A decrease of NO production in D7 in relation to D0 by monocytes and neutrophils without stimulation and stimulated with S. aureus was observed in those patients who survived when compared to those who died. The increased production of ROS and NO in early sepsis may be contributing to an effective response of the host in an attempt to eradicate the pathogen, however the persistence of these mediators may contribute to exacerbate the negative impact on survival of patients with sepsis. / FAPESP: 2006/ 58744-1 / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2007 / Bibliografia: f. 63-84 / A lectina KM+, purificada de sementes de Artocarpus integrifolia, induz migração de neutrófilos de maneira depende do domínio de reconhecimento de carboidratos e por haptotaxia, sendo esta mediada por interação da lectina com seu glicoligante na superfíci / The lectin KM+, purified from seeds of Artocarpus integrifolia, induces haptotatic neutrophil migration dependent on the CRD, which is mediated by the interaction of the lectin with its glycoligand on the neutrophil surface and in the extracellular matrix

Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, São José dos Pinhais, 2012 / Inclui bibliografias / Objetivo: O presente estudo visou avaliar, em âmbito ambulatorial e laboratorial clínico, a comparação entre cavalos com e sem tosse. Hipótese: A hipótese levantada é que cavalos com tosse apresentam inflamação em vias aéreas. Material e Métodos: Para ist / Objective: The present study aimed to evaluat horses with and without cough, on an outpatient basis and clinical laboratory. Hypothesis: The hypothesis is that horses with cough have airway inflammation. Material and Methods: For this, there were 50 horse

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-08-23T17:29:49Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 983334 bytes, checksum: 7f0471578fe8924654865e3402110776 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-23T17:29:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 983334 bytes, checksum: 7f0471578fe8924654865e3402110776 (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Neutrófilos são as primeiras células do sistema imune a migrarem para o tecido inflamado e exercem a importante função de fagocitose e eliminação imediata de patógenos invasores. A ativação de neutrófilos é um processo de múltiplos passos e de alta complexidade. A busca por agentes biológicos capazes de modular o processo de ativação, migração, fagocitose e produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) é importante pois aumentam a gama de opções para utilização na pesquisa. Nesse trabalho utilizamos a lectina extraída de Brassica oleracea (BOL) a fim de avaliar a sua capacidade na modulação da resposta de neutrófilos. Para os ensaios nós purificamos neutrófilos de camundongo tanto do sangue periférico quanto da cavidade peritoneal buscando avaliar sua capacidade migratória, o índice de CD62L na superfície e o índice fagocítico de neutrófilos pré-incubados com BOL. A lectina apresentou diversos efeitos de acordo com a dose utilizada, sendo possível observar o efeito de indução de migração para cavidade peritoneal de camundongos quando utilizada em doses intermediárias (1 μg/mL e 2,5 μg/mL) tanto quanto o efeito de redução de migração quando observada em doses altas (5 μg/mL e 10 μg/mL). O índice de fagocitose também foi avaliado e houve alteração de acordo também com a dose utilizada. As doses mais altas apresentaram efeito de redução na taxa de fagocitose (5 μg/mL e 10 μg/mL) enquanto as outras doses não apresentavam diferença estatística. Com esse trabalho conseguimos observar os efeitos imunomodulatórios sobre neutrófilos de uma lectina ainda muito pouco estudada e que demonstrou ter efeitos sobre a fisiologia de neutrófilos de acordo com a dose escolhida, alterando sua capacidade de migração e fagocitose. / Neutrophils are the first cells of the immune system to migrate into inflamed tissue and they develop the important function of phagocytosis and immediate elimination of invading pathogens. Neutrophil activation is a multi-step and highly complex process. Research on biological agents able to modulate the activation, migration, phagocytosis and production of reactive oxygen species (ROS) are important because they increase the range of options for use in the research. In this work we used the lectin extracted from Brassica oleracea (BOL) aiming to evaluate its ability to modulate the neutrophil response. For the tests, we purified mouse neutrophils from the peripheral blood and the peritoneal cavity with the objective to evaluate their migratory capacity, the surface CD62L index and the phagocytic index of neutrophils pre-incubated with BOL. The lectin presented several effects according to the dose used, being possible to observe the effect of induction of migration to peritoneal cavity when it was used in intermediate doses (1 μg/mL and 2.5 μg/mL) as well as the effect of reduction of migration as observed at high doses (5 μg/ mL and 10 μg/mL). The phagocytosis index was also evaluated and there was also an alteration according to the dose used. Higher doses showed a smaller phagocytosis rate (5 μg/mL and 10 μg/mL), unlike the other doses. In this work we were able to observe the immunomodulatory effects on neutrophils of a lectin that has not yet been studied and has shown to have effects on neutrophil physiology according to the chosen dose, altering its migration capacity and phagocytosis.

A coleta de hemocomponentes por equipamentos de aférese tem aumentado muito nos últimos anos, sendo considerado um avanço na medicina transfusional, pois possibilita a retirada de um ou mais componentes de um doador único resultando em um hemocomponente padronizado e de alta qualidade. No entanto, os intervalos entre as doações de plaquetaférese em geral são curtos, podendo haver perda de células a cada doação e potencial desregulação do sistema hematopoiético. Pode ocorrer ainda um possível efeito patogênico após passagem das células pelo equipamento de aférese e ativação neutrofílica. Diante disso, há a preocupação se isso acarretaria riscos à saúde do doador em longo prazo. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a perda da expressão de proteínas ancoradas ao glicosilfosfatidilinositol (GPI), presença de clone HPN (hemoglobinúria paroxística noturna) e ativação de neutrófilos em doadores de plaquetaférese de repetição. Métodos: Estudo de caso controle, sendo 44 amostras de doadores de plaquetaférese de repetição e 44 doadores de sangue total controle. Foram coletadas amostras de sangue periférico, marcadas com os anticorpos monoclonais CD157, CD45, CD64, CD10 e FLAER (do inglês, Fluorescent Aerolysin, aerolisina fluorescente) e analisadas por citometria de fluxo. Para análise de ativação de neutrófilos, foram analisadas 17 amostras de doadores de plaquetaférese de repetição e 17 amostras de doadores de sangue total marcadas com CD64. Conclusão: Não foram encontradas alterações significativas na expressão das proteínas ancoradas ao GPI e na expressão de CD64 entre os doadores de plaquetaférese de repetição e os controles. Sugere-se que a doação de plaquetaférese de repetição não altera a expressão de proteínas ancoradas ao GPI, não gera clone HPN tampouco altera a expressão de CD64. Palavras-chave: plaquetaférese, GPI, HPN, ativação de neutrófilos. / The collection of hemocomponents through apheresis equipment has increased much in recent years, which is considered an advance in transfusion medicine because it enables the withdrawal of one or more components from a single donor, resulting in a standardized and high-quality hemocomponent. Nonetheless, the intervals between the plateletpheresis donations are generally short, which can cause loss of cells in each donation and potential dysregulation of the hematopoietic system. What can also happen is a possible pathogenic effect after the transit of the cells through the apheresis equipment and neutrophilic activation. In light of this situation, there is the concern about whether that brings risks to the donor’s health, in the long term. Objective: the objective of this study was to evaluate the loss in the expression of some glycosylphosphatidylinositol-anchored (GPI-anchored) proteins, the presence of PNH clone and neutrophils activation in repeated plateletpheresis donors. Methods: Case-control study using 44 samples of donors of repeated plateletpheresis and 44 samples of donors of whole-blood donors as controls. Peripheral blood samples were collected into tubes containing EDTA, marked with CD157, CD45, CD64, CD10 and FLAER monoclonal antibodies, and analyzed by flow cytometry. For the analysis of neutrophil activation, 17 samples of repeated plateletpheresis donors and 17 samples of whole-blood donors, both marked with CD64 were analyzed. Conclusion: No alteration in the expression of glycosylphosphatidylinositol-anchored proteins and in the CD64 expression was found. It is suggested that repeated plateletpheresis donation does not alter the expression of GPI-anchored proteins, does not generate PNH clone and neither alters the expression of CD64.

Submitted by Gilvan Almeida (gilvan.almeida@icict.fiocruz.br) on 2016-10-11T17:33:25Z No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 72053.pdf: 1362653 bytes, checksum: fba356e2b9087f52b86707b982c63e23 (MD5) / Approved for entry into archive by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2016-10-25T16:57:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 72053.pdf: 1362653 bytes, checksum: fba356e2b9087f52b86707b982c63e23 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-25T16:57:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 72053.pdf: 1362653 bytes, checksum: fba356e2b9087f52b86707b982c63e23 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Leptina é um hormônio/citocina produzido pelo tecido adiposo que inibe a ingestão alimentar e o metabolismo lipídico. É altamente expressa na obesidade, sem no entanto intensificar seu efeito de inibição do apetite. Dentre outras funções, regula a imunidade inata e adaptativa. Sabe-se que a leptina ativa macrófagos, induzindo a produção de mediadores inflamatórios, como TNF-\F061, IL-1, IL-6 e LTB4. A leptina parece ainda regular a participação de neutrófilos em respostas inflamatórias. No entanto, não estão esclarecidos os mecanismos pelos quais a leptina seria capaz de regular migração ou ativação de neutrófilos, uma vez que estes não apresentam o principal receptor funcional de leptina, ObRb. Estudos in vitro não são conclusivos quanto aos efeitos serem diretos ou indiretos, enquanto estudos in vivo não se detém a estudar efeitos quimiotáticos de leptina sobre neutrófilos. O objetivo deste trabalho é investigar a sinalização por leptina envolvida na migração de neutrófilos. Para isso, foi realizada estimulação de animais C57Bl/6, bem como knockout de TNFR1-/-, MIP-1\F061-/-, 5-LO -/-, PI3K\F067-/-, machos, com leptina i.p. por 1, 6 e 24 h para avaliação do influxo de neutrófilos para a cavidade peritoneal e quantificação de mediadores inflamatórios no sobrenadante de lavado peritoneal e plasma. Também foram realizados tratamentos com rapamicina, para inibição de mTOR, Zileuton e U-75302, para inibir a sinalização por LTB4, bem como anticorpos anti-KC Foi observado que macrófagos incubados com leptina 20 nM in vitro produzem KC e TNF-\F061, mediadores que recrutam neutrófilos. In vivo, foi observado que a migração de neutrófilos por leptina é dependente de TNF-\F061, KC e PI3K\F067, e independente de 5-LO/LTB4, MIP-1\F061\F020e mTOR. Para avaliar o efeito de hiperleptinemia crônica na imunidade inata, foi estabelecido um modelo murino de obesidade induzida por dieta. Animais do grupo obeso foram alimentados com dieta hiperlipídica com 60% de teor calórico proveniente de gordura, enquanto a dieta controle possui 10% de teor calórico proveniente de gordura. Animais obesos apresentaram hiperglicemia e hiperleptinemia. A dieta hiperlipídica predispôs a ativação de macrófagos peritoneais por leptina, incrementando a produção de corpúsculos lipídicos. Os níveis de TNF-\F061 no sobrenadante de lavado peritoneal foram maiores em animais obesos não estimulados com leptina i.p., sendo a estimulação com leptina i.p. capaz de induzir recrutamento de neutrófilos em animais obesos. Tais eventos sugerem que a dieta hiperlipídica induziu background inflamatório, que, no entanto, não interferiu na capacidade da leptina induzir recrutamento neutrofílico. Tais dados sugerem que leptina promove recrutamento de neutrófilos por meio da ativação de macrófagos e produção de mediadores. Além disso, a obesidade experimental promove ativação subclínica de macrófagos, sem alterar o recrutamento de neutrófilos. Com este trabalho, espera-se contribuir para o melhor entendimento da participação da leptina na regulação do sistema imune inato / Leptin is an adipose tissue-produced hormone/cytokine which inhibits food intake and lipid metabolism. It is highly expressed in obesity without appetite inhibition enhancement. Also regulates innate and adaptive immunity. It is known that leptin activates macrophages inducing the production of inflammatory mediators such as TNF-\F061, IL-1, IL-6 and LTB4. Leptin regulates neutrophil functions in inflammatory responses. However, mechanisms by which leptin could induce neutrophils migration and activation are not elucidated, since they do not show the main functional leptin receptor, ObRb. In vitro studies are inconclusive about direct or indirect effects, while in vivo studies usually do not focus on leptin effects on neutrophil chemotaxis. This study aims to investigate leptin signaling involved in neutrophil migration. C57BL/6 and knockout TNFR1-/-, MIP-1\F061-/-, 5-LO-/-, PI3K\F067-/- male mice were stimulated with leptin ip for 1, 6 or 24 h for evaluation of neutrophil influx into peritoneal cavity and quantification of inflammatory mediators in the supernatant of peritoneal fluid and plasma. It was also performed treatments with rapamycin, for inhibition of mTOR, Zileuton and U-75302 for inhibition of LTB4 signaling, and anti-KC antibodies. Macrophages incubated with 20 nM leptin in vitro produce KC and TNF-\F061, neutrophil recruitment mediators. In vivo, neutrophil migration induced by leptin is dependent on TNF-\F061, KC and PI3K\F067, and independent on 5-LO/LTB4, MIP-1\F061 and mTOR To evaluate the effect of chronic hyperleptinemia in innate immunity, we established a murine model of diet induced obesity. The obese animals were fed with high fat diet with 60% calories from fat content, while the control diet had 10% of caloric content derived from fat. Obese animals showed hyperglycemia and hyperleptinemia. The fat diet predisposed the activation of peritoneal macrophages by leptin, increasing the lipid bodies formation. The levels of TNF-\F061 in the supernatant of peritoneal fluid were higher in obese animals, not stimulated with leptin ip; leptin ip stimulus induced neutrophil recruitment in obese animals. Such events suggest that the high fat diet induced inflammatory background, which, however, did not affect the ability of leptin to induce neutrophil recruitment. These data suggest that leptin promotes neutrophils recruitment through the activation of macrophages and production of mediators. Furthermore, experimental obesity promotes subclinical activation of macrophages, without changing the recruitment of neutrophils. This thesis is expected to contribute to a better understanding of leptin role in the regulation of innate immune system

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2015-02-20T18:16:04Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Jacilara Alexandrino Conceição.pdf: 856676 bytes, checksum: 479a49d19cc6988235dc9071b5950c30 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-20T18:16:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Jacilara Alexandrino Conceição.pdf: 856676 bytes, checksum: 479a49d19cc6988235dc9071b5950c30 (MD5) / Introdução: Pacientes com leishmaniose cutânea (LC) desenvolvem uma resposta inflamatória, caracterizada por alta produção de TNF-α e IFN-γ, que são essenciais na morte do parasito, mas contribuem com o desenvolvimento das lesões. Como a resposta imune adaptativa não está associada à proteção na leishmaniose tegumentar, é importante compreender o papel da resposta imune inata na patogênese da LC. Embora os macrófagos sejam as principais células hospedeiras da Leishmania, os neutrófilos (PMN) são as primeiras células a migrarem para o sítio de infecção e podem promover a morte do parasito. Diversos estudos têm demonstrado a participação dos PMN na resposta inicial à infecção em modelos experimentais de leishmaniose cutânea. No entanto, o papel dos PMN na leishmaniose cutânea humana causada por L. braziliensis ainda não é conhecido. Objetivo: Avaliar o papel dos neutrófilos na leishmaniose tegumentar humana causada por L. braziliensis. Materiais e Métodos: Neutrófilos de pacientes com LC (n=21) e de controles sadios (CS) (n=17) foram infectados com L. braziliensis na proporção de 5 parasitos por célula. A frequência de neutrófilos infectados e a carga parasitária foram quantificadas por microscopia óptica após coloração pelo método de Panótico, das lâminas preparadas por citocentrifugação. Marcadores de ativação e de migração (CD66b,CD11b e CD62L) bem como a produção de burst oxidativo mensurada pela fluorescência de DHR-123 foram avaliadas por citometria de fluxo. A produção de metaloproteinase de matriz-9 (MMP-9), CXCL9 e CXCL10 (quimiocinas envolvidas na ativação e recrutamento de células Th1) foi avaliada através do teste imunoenzimático (ELISA). Resultados: Após 180 minutos de infecção com L. braziliensis, os neutrófilos de pacientes com LC foram mais infectados do que os neutrófilos de controles sadios. Baseado na expressão de CD66b e de CD11b, os neutrófilos de pacientes foram menos ativados após infecção, quando comparados com os CS. A freqüência de neutrófilos de pacientes expressando CD62L não reduziu após a infecção, possivelmente indicando capacidade migratória reduzida. O parasito induziu maior produção de burst oxidativo nos neutrófilos de pacientes do que nos de controles sadios e aumentou a produção de MMP-9 em ambos os grupos. Após a infecção com o parasito, os neutrófilos de pacientes com LC produziram maior concentração de CXCL9 do que os de controles sadios, indicando que estas células de pacientes com LC podem participar do recrutamento de outras células envolvidas com a progressão da doença. Conclusão: Nossos dados demonstraram, pela primeira vez, que os neutrófilos de pacientes com leishmaniose cutânea apresentam um perfil de ativação diferente dos neutrófilos de controles sadios. Esses dados sugerem que os neutrófilos podem contribuir com a patogênese da doença através do recrutamento e ativação das células Th1.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2016-03-03T15:59:31Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Med_Cleriston Farias Queiroz.pdf: 3156396 bytes, checksum: c5202cbec1c680cf776743f5a6044235 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2016-04-20T11:42:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_Med_Cleriston Farias Queiroz.pdf: 3156396 bytes, checksum: c5202cbec1c680cf776743f5a6044235 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-20T11:42:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_Med_Cleriston Farias Queiroz.pdf: 3156396 bytes, checksum: c5202cbec1c680cf776743f5a6044235 (MD5) / FAPESB;Serviço de Imunologia (SIM) do Hospital Universitário Professor Edgard Santos da Universidade Federal da Bahia / Caracterização do Perfil Inflamatório em Pacientes com Doença Pulmonar Obstrutiva Crônica (DPOC) e sua Relação com a Gravidade e Reversibilidade do Volume Expiratório Forçado no Primeiro Segundo (VEF1 ) Objetivo: Determinar a relação entre a frequência de eosinófilos e os níveis de citocinas séricas com estágios da DPOC com base na reversibilidade do FEV1 e uma correlação entre esses biomarcadores e gravidade da DPOC. Métodos: Estudo de corte transversal realizado em 37 pacientes, portadores de DPOC (de acordo com a Global Initiative for Chronic Obstructive Lung Disease GOLD, 2010). Os pacientes responderam a um questionário clínico, realizaram exames físicos e foram submetidos à prova de função pulmonar (espirometria), com ênfase nos parâmetros funcionais do volume expiratório forçado no primeiro segundo (VEF1), capacidade vital forçada (CVF) e da relação (VEF1 / CVF) <70% de acordo com GOLD, 2010. A análise da celularidade do escarro induzido (EI) foi realizada após citocentrifugação do material e o PRICK -TEST para alérgenos foi realizado em todos os pacientes. Os níveis de citocinas foram determinados por método de ELISA. Resultados: Os pacientes foram classificados em dois grupos com base no VEF1 após broncodilatador. Em 24 pacientes (grupo 1) não havia resposta significativa após broncodilatador e 13 pacientes tiveram uma resposta com uma média ≥ 12% de reversibilidade e foram classificadas como grupo 2. Os parâmetros de gravidade avaliados pelos resultados dos testes de função pulmonar foram os seguintes: todos os pacientes na amostra estavam com a relação (VEF1 / CVF) ≤ 70% do previsto de acordo com as diretrizes do GOLD, 2010 (Tabela 1). O VEF1 pré / pós broncodilatador no grupo 1 teve 18 mediana de 48 (30-66) \ 51 (35-71), enquanto que no grupo 2 foi de 35 (28-44) \ 47 (36-52) (p < 0.03). Os estágios da gravidade da DPOC tiveram os seguintes resultados: O número de pacientes no grupo 1 na fase II, III e IV foram 6 (27,3%), 12 (50%) e 6 (27,3%), respectivamente, no grupo 2 zero, 12 (92,3%) e 1 (7,7%). Os níveis séricos do TNF e IL-6 foram maiores em pacientes com DPOC do que nos controles (p0.001). A IL-6 foi maior nos pacientes do grupo 1 do que os controles (p0.001). Houve uma correlação inversa entre os níveis de TNF e IMC em ambos os grupos. Conclusões: 1- Os neutrófilos foram o tipo de célula predominante em ambos os grupos de pacientes com DPOC independentes da reversibilidade do VEF1%. 2. História anterior de atopia, a positividade do teste alérgico e CCL5 não estão associados a pacientes com DPOC que tinham reversibilidade do VEF1. 3. Os pacientes que tiveram reversibilidade do VEF1 não têm DPOC mais grave. 4. Houve uma associação com os níveis séricos de TNF com níveis mais baixos de IMC.

Submitted by Maurílio Figueiredo (maurilioafigueiredo@yahoo.com.br) on 2013-03-06T19:19:24Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_PolpaAçaíModula.PDF: 1709102 bytes, checksum: 4c2b43a647e6c66927e9ba80f372d500 (MD5) / Approved for entry into archive by Neide Nativa (neide@sisbin.ufop.br) on 2013-03-13T19:37:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_PolpaAçaíModula.PDF: 1709102 bytes, checksum: 4c2b43a647e6c66927e9ba80f372d500 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-13T19:37:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_PolpaAçaíModula.PDF: 1709102 bytes, checksum: 4c2b43a647e6c66927e9ba80f372d500 (MD5) Previous issue date: 2011 / Açaí (Euterpe oleracea Mart.) recentemente foi identificado como uma fonte promissora de antioxidantes naturais. O estresse oxidativo e a redução dos mecanismos de defesa antioxidante são fatores importantes no desenvolvimento das complicações do diabetes. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar o possível efeito protetor da polpa de açaí sobre a produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) por neutrófilos e sobre o sistema de defesa antioxidante hepático em ratos controle e diabéticos. Ratas Fischer foram divididas em 4 grupos de 8 animais de acordo com o tratamento recebido, Controle (C), Açaí (A), diabético (D), e diabético + açaí (DA). O diabetes foi induzido por uma única injeção intraperitoneal de estreptozotocina (35mg/kg de peso corporal) no primeiro dia do experimento. Os grupos C e D receberam dieta padrão (AIN-93), os grupos A e DA receberam dieta padrão acrescida com 2% da polpa de açaí. Ao final de 4 semanas os animais foram anestesiados e eutanasiados. A suplementação da dieta com 2% da polpa de açaí por 30 dias aumentou os níveis de mRNA para γ-glutamilcisteína sintetase (γ-GCS) e glutationa peroxidase (GPx) no tecido hepático, aumentou o conteúdo de glutationa total e reduziu a produção de EROs por neutrófilos em ratos controle. Os ratos diabéticos apresentaram redução na expressão de mRNA que codificam para a Zn-superóxido dismutase (Zn-SOD), GPx and γ-GCS e aumento nos níveis de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e proteínas carboniladas quando comparado aos ratos controle. A suplementação com a polpa de açaí não alterou a expressão de enzimas antioxidantes em ratos diabéticos, no entanto apresentou efeito protetor, através da redução da peroxidação lipídica e aumento de glutationa total no fígado desses animais. Esses resultados sugerem que a polpa de açaí pode modular a produção de ROS por neutrófilos a apresentar efeito favorável sobre o sistema de defesa antioxidante hepático. _________________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: Açai (Euterpe oleracea Mart.) has recently been identified as a promising source of natural antioxidants. Because increased oxidative stress and impaired antioxidant defense mechanisms are important factors in the development of diabetic complications, the present study was undertaken to evaluate the possible protective effects of açai on the production of reactive oxygen species (ROS) by neutrophils and on the liver antioxidant defense system in control and streptozotocin-induced diabetic rats. Female Fischer rats were divided into four groups, control (C), açai (A), diabetic (D), diabetic + açai (DA). Diabetes was induced by a single intraperitoneal injection of streptozotocin (35 mg/kg body weight). Animals in groups C and D were fed a standard diet (AIN-93); those in groups A and DA were given the standard diet with 2% (w/w) açai pulp added for 30 days. Supplementation of the diet with 2% açai for 30 days was found to increase levels of mRNA for gamma-glutamylcysteine synthetase (γ-GCS) and glutathione peroxidase (GPx) in liver tissue, to increase the glutathione (GSH) content of the liver and to decrease ROS production by neutrophils. Compared to control animals, diabetic rats exhibited lower levels of mRNA coding for Zn-superoxide dismutase (Zn-SOD), GPx and γ-GCS and higher levels of thiobarbituric acid-reactive substances (TBARS) and carbonyl proteins in hepatic tissues. Although açai supplementation did not change the level of expression of mRNAs coding for antioxidant enzymes in diabetic rats, it showed a protective effect, decreasing lipid peroxidation and increasing GSH content in the liver. These findings suggest that açai can modulate ROS production by neutrophils and that it has a significant favorable effect on the liver antioxidant defense system.